Биохимическая и молекулярно-генетическая характеристика болезни Гоше у российских пациентов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.15, кандидат биологических наук Букина, Татьяна Михайловна

• Букина, Татьяна Михайловна
• кандидат биологических наук
• 2005

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Букина, Татьяна Михайловна

Список сокращений.

1. ВВЕДЕНИЕ.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

2.1. Структура, функции, метаболизм гликосфинголипидов (ГСФ).

2.2. Лизосомные болезни накопления ГСФ.

2.3. Болезнь Гоше (БГ).

2.3.1. Характеристика клинических фенотипов БГ.

2.3.2. Молекулярные механизмы этиологии и патогенеза БГ.

2.3.2.1. Патологические метаболиты БГ.

2.3.2.2. Патогенные маркеры БГ.

2.3.2.3. Кислая p-D-глюкоцереброзидаза.

2.3.3. Молекулярно-генетический анализ БГ

2.3.3.1. Характеристика гена p-D-глюкоцереброзидазы.

2.3.3.2. Анализ мутаций в гене p-D-глюкоцереброзидазы.

2.3.3.3. Гено-фенотипические корреляции при БГ.

2.4. Методические подходы к диагностике БГ

2.4.1. Клинико-биохимическая диагностика БГ.

2.4.2. Молекулярно-генетическая диагностика БГ.

2.5. Лечение БГ

2.5.1. Ферментзаместительная терапия.

2.5.2. Субстратподавляющая терапия.

2.5.3. Генотерапия.

2.5.4. Другие методы лечения.

2.6. Профилактика БГ.

3. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

3.1. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

3.2. РЕЗУЛЬТАТЫ

3.2.1. Характеристика выборки обследованных больных.

3.2.2. Пре- и постнатальная энзимодиагностика

3.2.2.1. Активность p-D-глюкозидазы.

3.2.2.2. Активность хитотриозидазы.

3.2.3. Пренатальная энзимодиагостика.

3.2.4. Молекулярно-генетический анализ БГ.

3.2.5. Исследование популяционного полиморфизма по обнаруженным мутациям.

3.2.6. Гено-фенотипические корреляции.

3.3. ОБСУЖДЕНИЕ

3.3.1. Биохимическая диагностика.

3.3.2. Молекулярно-генетическая диагностика.

3.3.3. Гено-фенотипические корреляции.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Биохимическая и молекулярно-генетическая характеристика болезни Гоше у российских пациентов»

Гликосфинголипидозы - группа наследственных болезней обмена веществ, характеризующихся нарушением ферментативного внутрилизосомного расщепления гликосфинголипидов (ГСП), важнейших структурных элементов клеточных мембран. Нарушение процесса расщепления ГСЛ сопровождается их внутрилизосомным накоплением в клетках-мишенях, что приводит к гибели этих клеток.

К гликосфинголипидозам относится и болезнь Гоше (БГ). Это аутосомно-рецессивное наследственное заболевание, обусловленное мутациями в структурном гене P-D-глюкоцереброзидазы, фермента, участвующего в процессе расщепления ГСЛ и присутствующего в лизосомах всех типов тканей (Brady et al, 1965а). БГ является наиболее распространенным гликосфинголипидозом человека, однако три ее основных клинических фенотипа (I - III) распространены с различной частотой. Самым частым из них является тип I, не неврологический, (в различных популяциях от 1:40 ООО до 1:60 ООО новорожденных), типы II и III, неврологические, встречаются реже (1:100 ООО и 1:50 000 соответственно).

Характерными особенностями БГ являются клиническая гетерогенность и полиморфизм (Beutler and Grabowski, 1995), что существенно затрудняет диагностику БГ. Поэтому на клиническом уровне заболевание может быть только заподозрено, а для точной диагностики необходимо проведение биохимических исследований (локусная дифференциация БГ) и молекулярно-генетических исследований (аллельная дифференциация БГ). Использование таких диагностических процедур, очевидно, позволяет решать проблемы точной постнатальной диагностики, что необходимо для профилактики БГ в семьях высокого риска.

В исследовании, диагностике и разработке методов лечения БГ I типа последовательно реализовались все методические подходы, используемые для других наследственных болезней обмена веществ (ИБО), что делает это заболевание своеобразной моделью в современной медицинской генетике. Методические подходы включают анализ патологических метаболитов, дефектного фермента, мутантного гена, разработку методов терапии (ферментзаместительной (ФЗТ), субстратподавляющей (СПТ) и генотерапии).

Метод измерения активности кислой p-D-глюкозидазы в клетках крови и фибробластах человека был разработан в 1965r (Brady et al, 1965b). Метод является простым, удобным и быстрым, а также не требует тяжелых инвазивных вмешательств. Кроме того, в 1994г. было обнаружено, что у больных с БГ макрофаги при накоплении негидролизованного субстрата начинают интенсивно синтезировать фермент хитотриозидазу (XT), в результате чего активность этого фермента возрастает более чем в сто раз (Hollak et al, 1994). Это позволяет использовать значение активности XT в качестве дополнительного маркера в диагностике БГ.

Расшифровка последовательности гена p-D-глюкоцереброзидазы, картированного на хромосоме lq 21, позволяет проводить анализ спектра мутаций при БГ (Sorge et al, 1985). По данным мировой литературы молекулярно-генетический анализ БГ начался в 90-х годах, тогда как в отечественной медицинской генетике еще не проводился (Beutler et al, 1990; Zimran et al, 1991; Sibille et al, 1993).

Настоящая работа важна как с научной, так и с практической точки зрения. Ее научная значимость определяется вкладом в исследование полиморфизма генома человека. Особенности формирования геномной структуры популяции обуславливают целесообразность изучения геномного полиморфизма, сопровождающегося как патологическим, так и нейтральным действием во всех популяциях, без чего представления о генофонде человека не могут быть полными.

Практическая значимость определяется задачами медико-генетического консультирования (МГК), т.е. точной диагностикой и дифференциацией различных по тяжести форм заболевания. Для значительного количества семей поводом для обращения в МГК является прогноз жизни ребенка. Тяжесть заболевания влияет на решение родителей о сохранении или прерывании беременности.

Все, выше изложенное, определяет актуальность выполненной работы. Цель и задачи исследования.

Целью данной работы являлись локусная и аллельная дифференциация различных клинических форм БГ. В ходе исследования решались следующие задачи: формирование выборки больных с болезнью Гоше;

- сравнительный анализ активности дефектного фермента (P-D-глюкоцереброзидазы) у пациентов с различными клиническими формами БГ, носителей БГ и в контрольной группе;

- сравнительный анализ активности маркерного фермента (хитотриозидазы) у пациентов с различными клиническими формами БГ, носителей БГ и в контрольной группе;

- скрининг на частые мутации и поиск редких мутаций в гене БДГ;

- анализ гено-фенотипических корреляций на исследуемой выборке больных.

Научная новизна и практическая значимость работы.

Учитывая фенотипическое сходство БГ с другими заболеваниями (например, БГ тип I с болезнью Ниманна-Пика тип В или остеомиелитом, БГ тип II с Gml-ганглиозидозм), при клиническом обследовании БГ можно только заподозрить. В практике отечественной медицины до сих пор главным методом постановки диагноза БГ является исследование цитологических препаратов костного мозга. Процедура забора клеток костного мозга является болезненной для пациента, а результат цитологического исследования не всегда может быть однозначным. Отработанный метод биохимической диагностики, основанный на измерении активности P-D-глюкозидазы в лейкоцитах крови, дает возможность достоверно диагностировать БГ без применения сложного и болезненного для пациента исследования пункции костного мозга. А дополнительное исследование активности XT в плазме дает возможность контролировать не только правильность постановки диагноза в случаях пограничной активности p-D-глюкозидазы, но и процесс лечения БГ. Результаты, полученные при обследовании пациентов в нашей лаборатории, подтверждают значимость биохимических методов исследования в диагностике БГ. Так из 152 человек с направляющим диагнозом БГ, диагноз БГ был подтвержден только у 86 человек.

Разработанные подходы к анализу первичной структуры нормального и мутантных аллелей гена P-D-глюкозидазы позволяют выявить молекулярные дефекты, лежащие в основе болезни Гоше. Впервые был проведен анализ мутантного гена у 55 российских больных с I, II и III типами БГ. Это позволило создать базу для прямого исследования генетической гетерогенности БГ. Впервые определен спектр мутаций в гене P-D-глюкозидазы в выборке российских больных и предпринята попытка выявить влияние данных мутаций на клиническое проявление БГ. Разработанные методы исследования позволили идентифицировать 16 мутантных аллелей. В ходе исследования обнаружены три преобладающих мутациив 9 и 10 экзонах гена P-D-глюкозидазы. Эти результаты позволяют предположить наличие специфических генотипов для российских популяций.

Положения, выносимые на защиту.

1. Проанализированы значения активности p-D-глюкозидазы в выборке пациентов с различными клиническими формами БГ, носителей БГ и в контрольной группе.

2. Проанализированы значения активности хитотриозидазы в выборке пациентов с БГ клиническими формами БГ, носителей БГ и в контрольной группе.

3. Обнаружено 16 мутаций в гене P-D-глюкозидазы у больных с различными клиническими формами БГ, в том числе 7 новых.

4. Выявлены особенности гено-фенотипических корреляций при БГ.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение диссертации по теме «Генетика», Букина, Татьяна Михайловна

выводы

1. Подтверждена необходимость биохимической диагностики для верификации диагноза БГ вследствие существования значительного количества гено- и фенокопий БГ, т.к. диагноз был подтвержден только у 86 из 152 пациентов с направляющим диагнозом БГ.

2. Проведен сравнительный анализ значений активности кислой P-D-глюкозидазы в контрольной группе, в группах пациентов с различными формами тяжести БГ и в группе облигатных гетерозигот. Получены значения контрольных величин активности P-D-глюкозидазы (контроль - 10,6±6,3 нМ/мг/ч; носители - 6,8±2,7 нМ/мг/ч; пациенты с БГ - 1,9±0,9 нМ/мг/ч. Установлено статистически достоверное снижение активности p-D-глюкозидазы в лейкоцитах пациентов с БГ (р=0,000).

3. При сравнительном анализе значений активности XT в плазме установлено статистически достоверное возрастание активности фермента у пациентов с БГ (р=0,00) и отсутствие достоверного изменения активности XT в плазме облигатных гетерозигот по сравнению с нормой (р=0,35). Возрастание активности хитотриозидазы (11328,4±1850,5 нМ/мл/ч) является решающим фактом в пользу диагноза БГ при явлении пограничной активности p-D-глюкозидазы между патологией и гетерозитотным носительством.

4. Выявлена корреляция между уровнем прироста активности XT и тяжестью течения БГ: прирост активности XT менее 100 нМ/мл/ч/год характерен для БГ тип I с поздней манифестацией (на 3-6 десятилетии) и легким течением; от 200 до 1000 нМ/мл/ч/год - для больных БГ тип I с манифестацией от 2 лет и более тяжелой формой; прирост активности XT свыше 1500 нМ/мл/ч/год - для больных БГ тип III и II типов с тяжелой неврологической формой заболевания.

5. Впервые в России налажены методы ДНК-анализа гена БДГ. Проведен молекулярно-генетический анализ 55 пациентов. При скрининге на частые мутации было обнаружено три преобладающих аллеля в 9 и 10 экзонах гена БДГ: N370S, L444P и Rec Neil. В процессе исследования идентифицировано 16 мутаций, из которых 7 описаны впервые: Р236Т, Rec(g4355-4430), L288P, L288Q, P319S, W381X и A384D.

6. Выявлены четкие корреляции тяжести течения БГ с обнаруженными мутациями. Мутация N370S в гомозиготном состоянии обуславливает легкую или промежуточную форму БГ I типа. Клиническое проявление БГ у гетерозиготных носителей N370S обусловлено вторым мутантным аллелем. Наличие мутации L444P в гомозиготном состоянии обуславливает развитие тяжелой клинической формы БГ II или III типов, а в сочетании с мутацией A384D она определяет II тип БГ.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

БГ - наиболее распространенное среди сфинголипидозов заболевание. Оно характеризуется широким спектром клинических форм от мягких бессимптомных до тяжелых с поражением ЦНС. Определение активности p-D-глюкозидазы в лейкоцитах позволяет точно верифицировать диагноз БГ, не прибегая к гистологическим методам исследования. Результаты исследования экспрессии P-D-глюкозидазы показали статистически достоверное снижение активности мутантного фермента в лейкоцитах пациентов с БГ. Столь же важным для диагностики БГ является исследование активности XT плазмы, поскольку в некоторых случаях остаточная активность p-D-глюкозидазы настолько высока, что ее значения у пациентов перекрываются со значениями активности у гетерозигот. В этом случае уровень активности XT становится дополнительным маркером при верификации диагноза БГ. Ранее было показано, что активность XT зависит от количества накопленного субстрата, что позволяет также осуществлять контроль при лечении пациентов с БГ. Результаты проведенного исследования позволяют говорить о взаимосвязи активности XT и тяжести клинического фенотипа, а также о взаимосвязи активности XT и генотипа.

В результате молекулярно-генетического анализа 55 пациентов было верифицировано 90% мутантных аллелей. Как в большинстве европейских популяций частыми оказались три: N370S, L444P и RecNcil, которые составили 45,6%, 20% и 7,3% от общего числа аллелей, соответственно. В числе редких и единичных мутаций были обнаружены R120W (2,7%), W184R (3,6%), G202R (1,8%), W381X (1,8%), A384D (2,7%), а мутации R170C, Р236Т, rec(g4355-4430), L288P, L288Q, P319S, R463C и с!е155были встречены только однажды (0,9%). 9% мутантных аллелей пока остались не идентифицированными. Отличительной особенностью нашей выборки явилось присутствие четырех аллелей W184R и A384D у не родственных пациентов. У пациентов нашей выборки обнаружилась значительная молекулярная гетерогенность (16 различных мутантных аллелей и 17 генотипов). Сорок шесть пациентов выборки являются генетическими компаундами, а из них сорок два пациента (76,4%) являются гетерозиготными носителями мутации N370S. Наиболее частыми генотипами в обследованной популяции были N370S/L444P - 10/55 (18%), N370S/Rec Nci I - 8/55 (15%); N370S/N370S - 5/55 (9%), L444P/L444P - 4/55 (7%).

Учитывая частоты встречаемости мутаций, а также наличие псевдогена, на 97% гомологичного функциональному гену, и достаточно часто возникающие

87 рекомбинантные мутации, обусловленные кроссинговером между БДГ и пБДГ, можно предложить следующую схему проведения ДНК-анализа для пациентов с БГ:

- скрининг на частые мутации (N370S, L444P, W184R, recNci I, R120W, A384D);

- обязательное исследование родительской ДНК в случае гомозиготного носительства мутации у пробанда;

- если родительская ДНК отсутствует, необходимо проведение дополнительного ДНК-анализа на наличие рекомбинантных мутаций, или крупных делеций гена;

Для практической диагностики основным методом верификации диагноза БГ являются биохимические методы исследования активности P-D-глюкозидазы и XT в качестве дополнительного маркера. ДНК-диагностика необходима в случае промежуточного значения активности P-D-глюкозидазы и нулевого значения активности XT. ДНК-диагностика на носительство возможна только в семьях с точно установленным генотипом, либо при помощи косвенной ДНК-диагностики. Пренатальная диагностика БГ на ранних сроках беременности также возможна как методом определения активности кислой P-D-глюкозидазы, так и с помощью ДНК-анализа.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Букина, Татьяна Михайловна, 2005 год

1. Ленинджер А. Основы биохимии: В 3-х т. М, Мир, 1985.

2. Тюрин Ю.Н., Макаров А.А. Статистический анализ данных на компьютере. М., ИНФА-Мб 528с., 1998.

3. Маниатис Т., Фрич Э., Сэмбрук Дж. Молекулярное «<лонирование. М., Мир, 1984 г, 479с.

4. Пейджен К. Генетическая регуляция лизосомных ферментов. В кн.: Лизосомы и лизосомные болезни накопления. М., «Медицина», стр. 17-32, 1984.

5. Abrahamov A, Elstein D, Gross-Tsur V et al. (1995) Gaucher's disease variant characterised by progressive calcification of heart valves and unique genotype. Lancet 346:1000-1003.

6. Aerts JMFG, Donker-Koopman WE, Brul S et al (1990) Comparative study on glucocerebrosidase in spleen from patients with Gaucher1 disease. Biochem J 269: 93-100.

7. Aerts JM, Hollak C, Boot R, Groener A (2003) Biochemistry of glycosphyngolipid storage disordes: implications for therapeutic interventioa Philos Trans R Soc bond В 358: 905-914.

8. Aghion E (1934) La maladie de Gaucher dans l'enfance. In These, Faculte de Medecine, Paris, France.

9. Achord D, Brot F, Gonzalez-Noriega A, Sly W, Stahl P (1977) Human beta-glucuronidase. II. Fate of infused human placental beta-glucuronidase in the rat. Pediatr. Res. 11:816.

10. Ashkenazi A,Zaizov R, Matoth Y (1986) Effect of splenectomy on destructive bone chenges in children with chronic (typel) Gaucher disease. Eur J Pediatr 145:138.

11. Austin J (1959) Metachromatic sulfatides in cerebral white matter and kidney. Proc Soc Exp Biol Med 100: 361-364.

12. Austin J, Suzuki K, Arnstrong D, Brady R et al (1970) Studies in globoid (Krabbe) leukodystrophy (GLD). V. Controlled enzymic studies in ten human cases. Arch Neurol 23: 502-509.

13. Balazs E.A. (1987) Chemistry and molecular biology of the intercellulur matrix. Academic press New-York. 1: 111.

14. Balicki D & Beutler E (1995) Gaucher disease. Medicine 74: 305-323.

15. Baltimore D (1981) Gene conversion: Some implications for immunoglobulin genes. Cell 24: 592.

16. Barneveld RA, Keijzer W, Tegelaers FPW et al (1983) Assigment of the gene coding for human P-glucocerebrosidase to the region q21-q31 of chromosome 1 using monoclonal antibodies. Hum Gen 64: 227-231.

17. Barranger JA & Ginns EI (1989) Gaucher disease. In Scriver CR, Sly WS & Valle D (eds) The Metabolic Basis of Inherited Disease, pp 1677-1698. New York: Mc Graw Hill.

18. Barton NW, Brady RO, Dambrosia JM, Di Bisceglie AM, Doppelt SH, Hill SC et al. (1991) Replacement therapy for inherited enzyme deficiency Macrophage-targeted glucocerebrosidase for Gaucher's disease. N Engl J Med 324: 1464-1468.

19. Bassan R, Montanelli A & Barbui T (1985) Interaction between a serum factor and T lymphocytes in Gaucher disease. Am J Hematol 18: 381-384.

20. Belchetz PE, Crawley JCW, Braidman IP, GregoriadisG (1977) Treatment of Gaucher's disease liposome-entrapped glucocerebroside:beta-glucosidase. Lancet 2: 116.

21. Berent SL & Radin NS (1981) Mechanism of activation of glucocerebrosidase by co-P-glucosidase (glucosidase activator protein). Biochim Biophys Acta 664: 572582.

22. Berg-Fussman A, Grace ME, Ioammon Y and Grabowski GA (1993) Human acid P-glucosidase: N-glycosylation site occupancy and the effect of glycosylation on enzymatic activity. J Biol Chem 268:14861-14866.

23. Berrebi A, Malnick SDH, Vorst EJ & Stein D (1992) High incidence of factor XI deficiency in Gaucher's disease. Am J Haematol 40: 153-161.

24. Beutler E (1991) Gaucher disease N Engl J Med 325: 1354.

25. Beutler E (1992) Gaucher disease: New molecular approaches to diagnosis and treatmen. Science 256: 794.

26. Beutler E (1993) Gaucher disease as a paradigm of current issues regarding single gene mutations of humans. Proc Nat Acad Sci USA 90: 5384-5390.

27. Beutler E & Gelbart T (1993) Gaucher disease mutations in non-Jewish patients. Brit J Haem 85: 401 405.

28. Beutler E & Gelbart T (1996) Glucocerebrosidase (Gaucher disease). Hum Mut 8: 207-213.

29. Beutler E, Gelbart T, Kuhl W, Sorge J, West С (1991) Identification of the second common Jewish Gaucher disease mutation makes possible population based screening for the heterozygote state. Proc Natl Acad Sci USA 88:10544.

30. Beutler E, Gelbart T, Kuhl W, Zimran A, West С (1992) Mutations in Jewish patients with Gaucher disease. Blood 79:1662.

31. Beutler E, Gelbart T, West С (1990) The facil detection of the NT 1226 mutation of glucocerebrosidase by "mismatched" PCR. Clin Chin Acta 194:161.

32. Beutler E & Grabowski GA (1995) Gaucher disease. In Scriver CR, Beudet A, SlythfVS, Valle D (eds) Molecular and Metabolic Bases of Inherited Disease, 7 edn, pp. 2641-2692. New York: McGrow-Hill.

33. Beutler E, Kay A, Saven A, Garver P, Thurston D, Dawson A, Rosenbloom В (1991) Enzyme replacement therapy for Gaucher disease. Blood 78:1183-1185.

34. Beutler E & Kuhl W (1970) The diagnosis of the adult type of Gaucher's disease and its carrier state by demonstration of deficiency of beta-glucosidase activity in peripheral blood leukocytes. J Labor Clin Med 76: 747 755.

35. Beutler E, Kuhl W, Matsumoto F et al (1976) Acid hydrolases in leucocytes and platelets in normal subjects and in patients with Gaucher's disease. J Exp Med 143: 975-980.

36. Beutler E & Saven A (1990) Misuse of marrow examination in diagnosis of Gaucher disease. Blood 76: 646-648.

37. Beutler E, Sorge JA, Zimran A, West C, Kuhl W, Westwood B, Gelbart T(1988) The molecular biology of Gaucher disease. In Salvayre R, Douste-Blagy L.Gatt S (eds): Lipid Storege Disorders. Biological and Medical Aspects. New York, Plenum, p 19.

38. Beutler E. (2000) Commentary: Dosage-Response in the Treatment of Gaucher Disease by Enzyme Replacement Therapy. Blood Cells, Mol., and Diseases 26: 303306.

39. Billet HH, Rizvi S & Sawitsky A (1996) Coagulation abnormalities in patients with Gaucher's disease: effect of therapy. Am J Haematol 51: 234-236.

40. Boot RG, Renkema GH, Strijland A et al (1995) Cloning cDNA encoding chitotriosidase, a human chitinase produced by macrophages. J Biolog Chem 270: 26252-26256.

41. Boot RG, Renkema GH, Verhoek M et al (1998) The human chitotriosidase gene. J Biolog Chem 273: 25680-25685.

42. Bornstein P, McKinney CE, LaMarca ME et al (1995) Metaxin, a gene contiguous to both thrombospondin 3 and glucocerebrosidase, is required for embrionic development in the mouse: Implications for Gaucher disease. Proc Natl Acad Sci USA 92: 4547-4549.

43. Bradford MN (1976) A rapid and sensitive method for the quantitation of microgram quantities of protein utilizing the principle of protein-dye binding. Anal. Biochem, 72: 248-254.

44. Brady RO, Gal AE, Bradley RM et al (1967) Enzymatic defect in Fabry's disease. Ceramidetrihexosidase deficiency. N Engl J Med 276:1163.

45. Brady RO, Kanfer J, Mock MB, Fredrickson DS (1966) The metabolism of sphingomyelin. II. Evidence of an enzymatic deficiency in Niemann-Pick disease. Proc Natl Acad Sci USA 55: 366-371.

46. Brady RO, Kanfer J & Shapiro D (1965a) Metabolism of glucocerebrosides .II. Evidence of an enzymatic deficiency in Gaucher's disease. Bioch. Bioph. Res. Com. 18: 221-225.

47. Brady RO, Kanfer J & Shapiro D (1965b) The metabolism of glucocerebrosides. I. Purification and properties of a glucocerebroside-cleaving enzyme from spleen tissue. J Biol Chem 240: 39-42.

48. Brady RO, Pentchev PG, Gal AE, Hibbert SR, Dekaban AS (1974) Replacment therapy for inherited enzyme deficiency. Use of purified glucocerebrosidase in Gaucher's disease. N Engl О Med 291: 989/

49. Brady RO (1966) Sphingolipidoses. New Engl J Med 275: 312-318.

50. O'Brien JS (1969) Generalized gangliosidosis. JPediatr 75: 167.

51. Brill NE (1901) Primary splenomegaly with a report of three cases occurring in one family. Am J Med Sci 121: 377-392.

52. Brill NE (1904) A case of "splenomegalie primitif': with involvement of the haemopoetic organs. Proceedings of the New York Pathological Society 4: 143-149.

53. McCabe ERB, Fine В A, Globus MS et al (1996) Gaucher disease Current issues in diagnosis and treatment. JAmer Med Assoc 275: 548-553.

54. Choy FY, Wong K, Vallance HD, Balduin V (2000) Novel point mutation (W184R) in neonatal type 2 Gaucher disease. Pediatr Dev Pathol 3:180-183.

55. Choudary PV, Barranger JA, Tsuji S, Mayor J, LaMarca ME, Cepko CL et al (1986a) Retrovirus-mediated transfer of the human glucocerebrosidase gene to Gaucher fibroblasts. Mol. Biol. Med. 3: 293-295.

56. Choudary PV, Horowitz M, Barranger JA, Ginns EI (1986b) Gene transfer and expression of active human glucocerebrosidase i n mammalian cell cultures. DNA 5: 78-81.

57. Choy FY, Wong K, Vallance HD, Balduin V (2000) Novel point mutation (W184R) in neonatal type 2 Gaucher disease. Pediatr Dev Pathol 3:180-183.

58. Collier WA (1895) A case of enlarged spleen in a child aged six. Transaction of the Pathological Society of London 46:148-150.

59. Condie A, Borresen A-L,Eeles R et al (1993) Point-mutation detection: Comparison of SSCP, CDGE and HOT. Hum Mut 2: 58-66.

60. Conradi NG, Saurander P, Nilsson O, Svennerholm L, Erikson A (1984) Neuropatology of the Norrbottnian type of Gaucher disease: Morphological and biochemical studies. Acta Neuropathol (Berl) 65: 99.

61. Conzelmann E, Sandhoff К (1978) Deficiency of a factor necessary for stimulation of hexosaminidase A catalyzed degradation of ganglioside Gm2 and glycolipid Ga2. Proc Natl Acad Sci USA 75: 3979.

62. Conzelmann E and Sandhoff К (1991) Biochemical basis of lateonset neurolipidoses. Dev Neurosci 13:197-204.

63. Cormand B, Montfort M, Chabas A, Vilageliu L, Grinberg D (1997) Genetic fine localization of the p-glucocerebrosidase (GBA) and prosaposin (PSAP) genes: implications for Gaucher disease. Hum Genet, 100: 75-79.

64. Cormand B, Grinbeg D, Gort L, Chabus A et al (1998) Molecular analysis and clinical findings in the Spanish Gaucher disease population: putative haplotype of the N370S ancestral chromosome. Hum Mut, 11 (4): 295-305.

65. Countre P, Demina A, Beutler T, Beck M? Petrides PE (1997) Molecular analysis of Gaucher disease: distribution of eight mutations and the compleate gene deletion in 27 patiants from Germany. Hum Genet, 99 (6): 816-821/

66. CoxT, Lachmann R, Hollak C, Aerts J, van Weely S et al (2000) Novel oral treatment of Gaucher's disease with N-Butyldeoxynojirimycin (OGT 918) to decrease substrate biosynthesis. Lancet 355:1481-1485.

67. Cullis P.R., Hope M.J., Tilcock C.P.S. (1986). Lipid polymorphism and the Roles of Lipids in Membranes. Chem. Phys. Lipids, 40, 127 144. •

68. Curatolo W., Neuringer L.J., (1986). The Effects of Cerebrosides of Model Membrane Shape. J. Biol. Chem., 261:17177-17182.

69. Curatolo W.(1987). Glycolipid Function. Biochim. Biophys. Acta, 906: 137-160.

70. Dahl N, Lagerstrom M, Erikson A, Pettersson U (1990) Gaucher disease type III (Norrborttnian type) is caused by a single mutation in exon 10 of the glucocerebrosidase gene. Am J Hum Genet 47:275.

71. Dawson G & Oh JY (1977) Blood glucosylceramide levels in Gaucher's disease and its distribution amongst lipoprotein fractions. Clin Chim Acta 75: 149-153.

72. De Duve, Pressman ВС, Gianotto R, Wattiaux R, Appelmans F (1955) Tissue fractionation studies, intracellular distribution patterns of enzymes in rat liver tissue. Biochem. J. 60: 604.

73. Demina A, Boas E and Beutler E (1998) Structure and linkage relationships of the region containing the human L-type pyruvate kinase (PKLR) and glucocerebrosidase (GBA) genes. Hematopathol Mol Hematol 11: 63-71.

74. Van Echten G and Sandhofif К (1993) Ganglioside metabolism. Enzymology, topology and regulation. J Biol Chem 268: 5341-5344.

75. Eto Y, Kawame H, Hasegawa Y et al (1993) Molecular characteristics in Japanese patients with lipidosis: novel mutations in metachromatic leucodystrophy and Gaucher disease. Mol Cel Bioch 119: 179-184.

76. Farber S, Cohen J, Usmann LL (1957) Lipogranulomatosis. A new lipoglicoprotein storage disease. J Mt Sinai Hosp 24: 816-822.

77. Fink JK, Correll PH, Perry LK, Brady RO, Karlsson S (1990) Correlation of glucocerebrosidase deficiency after retroviral-mediated gene transfer into hematopoietic progenitor cells from patiets with Gaucher disease. Proc Natl Acad Sci USA 87: 234.

78. Fleshner PR, Aufses AH Jr, Grabowski GA, Elias R (1991) 27-year experience with splenectomy for Gaucher's disease. Am J Surg 161: 69.

79. French JH, Brotz M & Poser CM (1969) Lipid composition of the brain in infantile Gaucher's disease. Neurology 96: 81-86.

80. Furst W., Sandhoff K. (1992) Activator proteins and topology of lysosomal sphyngolipid catabolism. Biochim. Biophys. Acta, 1226:1.

81. Galjaard H Genetic metabolic diseases. Early diagnosis and prenatal diagnosis. Elsevier/North-IIolland biomedical press. Amsterdam-New York-Oxford, 1980, 870pp.

82. Gaucher PCE (1882) De l'epithelioma primitif de la rate,hypertrophic idiopathique de la rate sans leucemie Thesis. Paris.

83. Gery I, Zigler JSJ, Brady RO &Barranger J A (1981) Selective effects of glucocerebroside (Gaucher's storage material) on macrophage cultures. J Clin Invest 68:1182-1189.

84. Gilbert HS & Weinreb N (1976) Increased circulating levels of transcobalamin ii in Gaucher's disease. N Engl J Med 295:1096-1101.

85. Ginns EI, Choudary PV, Tsuji S et al (1984) Isolation of cDNA clones for human p-glucocerebrosidase using the Xgtl 1 expression sistem. Biochem Biophys Res Com 123: 574-580.

86. Ginsberg II, Grabowski GA, Gibson JC et al (1984) Reduced plasma concentrations of total, low density and high density lipoprotein cholesterol in patients with Gaucher type 1 disease. Clin Gen 26:109-116.

87. Glenn D, Gelbart T & Beutler E (1994) Tight linkage of pyruvate kinase (PKLR) and glucocerebrosidase (GBA) genes. Hum Gen 93: 635-638.

88. Goldblatt J, Sacks S, Dall D, Beigton P (1988) Total hip arthroplasty in Gaucher's disease. Long-term prognosis. Clin Orthop 228: 94-98.

89. Grabowski GA, Pastores G, Brady RO, Barton NW (1993) Safety and efficacy of macrophage targeted recombinant glucocerebrosidase therapy. Pediatr. Res. 33: 139A.

90. Grabowski GA, Ponce E, Leonova T & Qi X (1997) Clinical and basic studies of enzyme and gene therapy in Gaucher disease type 1. Jap J Incher Metab Dis 13: 283-292.

91. Grabowski G.A. (2004) Gaucher disease: lesions from a decade of terapy. J. Pediatr. 144:15-19.

92. Grace ME, Desnick RJ, Pastores GM (1997) Identification and expression of acid beta-glucosidase mutations causing severe type 1 and neurologic type 2 Gaucher disease in non-Jewish patients. О Clin Invest 99: 2530-2537.

93. Grace ME, Grabowski GA (1990) Human acid beta-glucosidase: Glycosylation is required for catalytic activity. Biochem Biophys Res Commun 168: 771.

94. Graves PN, Grabowski GA, Ludman MD, Palese P, Smith EI: Human acid beta-glucosidase (1986) Nothern blot and SI nuclease analysis of the mRNA from cells and normal and Gaucher disease fibroblasts. Am J Hum Genet 39: 763.

95. Graves PN, Grabowski GA, Eisner R et al (1988) Gaucher disease type 1: cloning and characterization of a cDNA ancoding acid p-glucosidase from an Ashkenazi Jewish patient. DNA and Cell Biology 7: 521-528.

96. Guo Y, He W, Boer AM, Wevers RA, de Bruun AM, Groener JEM, Hollak СЕМ, Aerts JMFG, Galjaard H, van Diggelen OP. (1995) Elevated plasma chitotriosidase activity in various lysosomal storage disorders. J Inher Me tab Dis 18: 717-722.

97. Hakomori S. (1981) Лшш. Rev. Biochem. 50: 733 764.

98. Hannun YA, R.M.Bell (1989). Science 243 500 507.

99. He G-S, Grabowski GA (1992) Gaucher disease: A G+1—>A+1 IVS2 splice donor site mutation causing exon 2 skipping in the acid P-glucosidase mRNA. Am J Hum Genet 51: 810.

100. Hillborg PO (1959) Morbus Gaucher: Norrbortten. Nor disk Medicin 61: 303-306.

101. Hers H.G. (1965) Inborn lisosomal diseases. Gastroenterology 48: 625-652.

102. Ho MW, O'Brien JS, Radin NS & Ericson JS (1973) Glucocerebrosidase: reconstitution of activity from macromolecular components. Biochem J 131: 173176.

103. Hollak СЕМ, Levi M, Berends F et al (1997a) Coagulation abnormalities in type I Gaucher disease are due to low grade activation and can be partly restored by enzyme supplementation therapy. Brit JHaemotol 96: 470-476.

104. Hollak СЕМ, Evers L, Aets JMFG & van Oers MHJ (1997b) Elevated level of M-CSF, sCD14 and IL8 in type 1 Gaucher disease. Blood Cells, Molecules and Diseases 23:201-212.

105. Hollak СЕМ, van Weely S, van Oers MHJ& AertsLMFG (1994) Marked elevation of plasma chitotriosidase activity. A novel hallmark of Gaucher desease. J Clin Invest 93, 1288-1292.

106. Holleran WM, Ginns EI, Menon GK, Grundmann JU, Fartasch M, McKinney CE, Elias PM & Sidransky E (1994) J Clin Invest 93, 1756-1764.

107. I Iorowitz M, Tzuri G, Eyal N, Berebi A et al (1993) Prevalence of nine mutations among Jewish and non-Jewish Gaucher disease patients. Am О Hum Genet 53 (4): 921-930.

108. Hong CM, Ohashi T, Yu XJ, Weiler S, Barranger JA (1990) Sequence of two alleles responsible for Gaucher disease. DNA Cell Biol 9:233.

109. Horowitz M, Wilder S, Horowitz Z, Reiner O, Gelbart T, Beutler E (1989) The human glucocerebrosidase gene and pseudogene: Structure and evolution. Genomics 4: 87.

110. Horowitz M, Zimran A (1994) Mutations causing Gaucher disease. Hum Mut 3: 111.

111. Iyer SS, Berent SL & Radin NS (1983) The cohydrolases in human spleen that stimulate glucosil ceramide P-glucosidase. Biochem Biophys Acta 748: 1-7.

112. Jeyakumar M, Norflus F, Tifft CJ et al (2001). Enchanced survival in Sandhoff disease mice receving a combination of substrate deprivation therapy therapy and bone marrow transplantation. Blood; 97: 327-329.

113. Jacson LG, Barr MA, Wapner RA, Grebner EE, Davis GO (1986) Chorion villus sampling (CVS): an assessmrnt of safety and accuracy in a consecutive series of nearly 2000 patients. Am О Hum Genet; 39: 256-261.

114. Jatzkewitz H, Stinshof К (1973) An activator of cerebroside sulphatase in human normal liver and in cases of congenital metachromatic leukodystrophy/ FEBS lett 32: 129.

115. Kennaway NG & WoolfLI (1968) Splenic lipids in Gaucher's disease. J Lip Res 9: 755-765.

116. Kolodny EN, Firon N, Eyal N, Horowitz M (1990) Mutation analysis of an Ashkenazi Jewish family with Gaucher disease in three successive generations. Am J Med Genet 36: 467.

117. De Kruiff B. (1987) Polymorphic Regulation of Membrane Lipid Composition. Nature, 329, 587-588.

118. Mc Kusik VA, Neufeld EF, Kelly ТЕ (1995) Gaucher desease. In: The metabolic bases of inherited diseases. N-Ye.a., McGrow Hill Book Сотр., pp. 2641 2670.

119. Latham T, Grabowski GA, Theophilus BDM, Smith FI (1990) Complex alleles of the acid P-glucosidase gene in Gaucher disease. Am J Hum Genet 47: 79.

120. Le NA, Gibson JC, Rubinstein A et al (1988) Abnormalities in lipoprotein metabolism in Gaucher type 1 disease. Metabolism 37: 240-245.

121. Leiberman J & Beutler E (1976) Elevation of serum angiontensin-converting anzyme in Gaucher's disease. N Engl J Med 294:1442-1444.

122. Leinekugel P, Michel S, Conzelmann E and Sandhoff К (1992) Quantitative correlation between the residual activity of p-hexosaminidase A and arylsulfatase A and the severity of the resulting lysosomal storage disease. Hum Genet 88: 513-523.

123. Li S-C, Li Y-T (1976) An activator stimulating the enzymic hydrolysis of sphingoglycolipids. J Biol Chem 251:1159.

124. Lindblom B, Holmlund G (1988) Rapid DNA purification for restriction fragment length polymorphism analysis. Gen Anal Tech 5: 97 -101.

125. Long GL, Winfield S, Adolph KW et al (1996) Structure and organization of the human metaxin gene (MTX) and the pseudogene. Genomics 33: 177-182.

126. Lowden JA, O'Brein JS (1979) Sialidosis: A review of human neuraminidase deficiency. Am О Hum enet 31:1.

127. Mehl E, Jatzkewitz H (1965) Evidence for the genetic block in metachromatic leukodistrophy (ML). Biochem Biophys Res Commun 19: 407.

128. Michelakakis H, Spanou C, Kondyli A et al (1996) Plasma tumor necrosis factor (TNF-a) levels in Gaucher's disease. Biochem Biophys Acta 1317: 219-222.

129. Mistry PK (1995) Genotype/phenotype correlations in Gaucher's disease. Lancet 346: 982.

130. Neufeld EF (1991) Lysosomal storage diseases. Annu Rev Biochem 60: 257-280.

131. O'Neill RR, Tokoro T, Kozak CA & Brady RO (1989) Comparison of thechromosomal localization of murine and human glucocerebrosidase genes and of the deluced amino acid sequences. Proc Nat Ac Scienes USA 86: 5049 5053.

132. Nilsson О & Svennerholm L (1982a) Accumulation of glucosylsphingosine (psychosine) in cerebellum in infantile and juvenile Gaucher disease. J Neurochem 39: 709-718.

133. Nilsson О & Svennerholm L (1982b) Characterization and quantitative determination of gangliosides and neutral glycosphingolipids in human liver. J Lip Res 23: 327-334.

134. Van Oers MHJ, van Zaanen HC & Lokhorst HM (1993) Interleukin-6, a new target for therapy in multiple myeloma? An Hematol 66: 219-223.

135. MO.Orita M, Iwahana H, Kanazawa H et al (1989) Detection of polymorphisms of human DNA by gel electrophoresis as singl-strand conformation polymorphisms. Proc Natl Acad Sci USA 86: 2766-2770.

136. Paigen К (1979) Acid hydrolases as models of genetic control. A. Rev. Genet 13: 417-466.

137. Pentchev PG, Brady RO, Gal AE & Hibbert SR (1975) Isolation and characterization of glucocerebrosidase from human placental tissue. J Mol. Med. 1: 73-78.

138. Piatt FM, Butters TD (1998) New therapeutic prospects for the glycosphingolipid lysosomal storage diseases. Biochem Pharmacol 56: 421-430.

139. Platt FM, Neises GR, Reinkensmeier G e al (1997) Prevention of lysosomal storage in Tay-Schs mice treated with N-butyldeoxynojirimycin. Science 276: 428-431.

140. Platt FM, Jeyakumar M, Andersson U et al (2003). Substrate reduction therapy in mouse models of the glycosphingolipidoses. Philos Trans R Soc Lond В 358:947954.

141. Ponce E, Moskovitz J, Grabowski G (1997) Enzyme therapy in Gaucher disease type I: Effect of neutralizing antibodies to acid p-glucosidase. Blood 90: 43-48.

142. Preziosi P, Prual A, Galan P, Daouda H et al (1997) Effect of iron supplementation on the iron status of pregnant women: Consequeces for newborns. Am J Clin Nutr 66:1178-1184.

143. Qi X, Qin W, Sun Y, Kondoh К & Grabowski GA (1996) Functional organization of saposin C: difinition of the neurotrophic and acid p-glucosidase activation regions. J Biol Chem 271: 6974-6880.

144. Raghavan SS, Topol J & Kolodny EH (1980) Leucocyte beta-glucosidase in homozygotes and heterozygores for Gaucher disease. Am J Hum Gen 32: 158-173.

145. Reiner O, Horowitz M (1988) Differential expression of the human glucocerebrosidase-coding gene. Gene 73:469.

146. Reiner O, Wigderson M & Horowitz M (1988a) Structural analysis of the human glucocerebrosidase gene. DNA 7:107.

147. Reiner O, Wilder S, Givol D, Horowitz M (1987) Efficient in vitro and in vivo expression of human glucocerebrosidase cDNA. DNA 6:101.

148. Renkema GH, Boot RG, Strijland A et al (1997) Synthesis, sorting and processing into distinct isoforms of human macrophage chitotriosidase. Europ J Biochem 244: 279-285.

149. Ringden O, GrothCG, Erikson A et al (1995) Ten years experience of bone marrow transplantation for Gaucher disease. Transplantation 59: 864-870.

150. Rose JS, Grabowski GA, Barnett SH, Desnick RJ (1982) Accelerated skeletal deterioration after splenectomy in Gaucher type 1 disease. Am J Roentgenol 139:1202.

151. Sandhoff K., van Echten G., Schroder M., Schnabel D., Suzuki K. (1992) Metabolism of glycolipids: The role of glycolipidbinding proteins in the function and pathobiochemistry of lysosomes. Biochem. Soc. Trans 20: 695.

152. Sandhoff К and van Echten G (1993) Ganglioside metabolism Topology and regulation. Adv Lipid Res 26: 119-142.

153. Sandhoff К and Kolter T (1996) Topology of glycosphingolipid degradation. Trends Cell Biol 6:98-103.

154. Schiffmann R, Brady RO (2002). New prospects for the treatment of lysosomal storage diseases. Drugs; 62(5): 733-742.

155. Schindelmeiser J, Radzum HJ & Munstermann D et al (1991) Tartrate resistant purple acid phosphatase in Gaucher cells of the spleen. Immuno- and cytochemical analysis. Pathology, Research and Practice 187: 209-213.

156. Schneider EL, Ellis WG, Brady RO, Mc Culloch JR, Epstein CJ (1972) Infantile (type II) Gaucher's disease: In utero diagnosis and fetal pathology. J Pediatr 81: 1134-1137.

157. Sibille A, Eng CM, Kim S-J, Pastores G, Grabowski GA (1993) Phenotype/genotype correlations in Gaucher disease typel: Clinical and therapeutic implications. Am J Hum Genet 52: 1094.

158. Silverstein E & Friedland J (1977) Elevated serum and spleen angiotensin converting enzyme and serum lysozyme in Gaucher's disease. Clin Chim Acta 74: 21-25.

159. Sidransky E, Lau EK, Winfield S et al (1997) Identification two novel polymorphisms in the glucocerebrosidase gene region. Am J Hum Gen

160. Sidransky E, Tsuji S, Martin BM, Stublefield B, Ginns EI (1992) DNA mutation analysis of Gaucher patients. Am J Med Genet 42: 331.

161. Sorge J, Eest C, Westwood В et al (1985) Molecular cloning and nucleotide sequence of human glucocerebrosidase cDNA. Proc Nat Acad Sci USA 82: 72897293.

162. Sorge J, Gross E, West C, Beutler E (1990) High level transcription of the glucocerebrosidase pseudogene in normal subjects and patients with Gaucher disease. J Clin Invest 86:1137-1142.

163. Sorge J, Kuhl W, West C, Beutler E (1987) Complete correcetion of the enzymatic defect of type 1 Gaucher disease fibroblasts by retroviral- mediated gene transfer. Proc Natl Acad Sci USA 84: 906.

164. Sorge JA, West C, Kuhl W, Treger L, Beutler E (1987) The human glucocerebrosidase gene has two functional ATG initiator codons. Am J Hum Genet 41:1016.

165. Sorge J, West C, Westwood B, Beutlerr E (1985) Molecular cloning and nucleotide sequence of the human glucocerebrosidase gene. Proc Natl Acad Sci USA 82: 7289.

166. Srivastava S, Beutler E (1973) Hexosaminidase A and hexosaminidase B: Studies in Tay-Sachs disease and Sandhoff disease. Nature 24: 463.

167. Stone DL, Tayebi N, Orvisky E, Stubblefield B, Madike V, Sidransky E (2000) Glucocerebrosidase gene mutations in patients with type 2 Gaucher disease. Hum Mut 15:181 188.

168. Suzuki К (1982) Glucosylceramide and related compounds in normal tissues and in Gaucher disease. In DesnicK RJ, Gatt S & Grabowski GA (eds) Gaucher Disease: a Century of Delineation and Research, pp. 219-230. New York: Alan R Liss.

169. Suzuki K, Suzuki Y (1970) Globoid cell lcucodystrophy (Krabbe's disease): Deficiency of galactocerebroside P-galactosidase. Proc Natl ACAD Sci USA 66: 302-308.

170. Sweeley CC, Klionsky В (1963) Fabry's disease: Classification as a sphingolipidosis and partial characterization of a novel glicolipid. J Biol Chem 238: 3148.

171. Symington F.W., Murray W.A., Bearman S.I., Hakomori S. (1987). Intracellular Localization of Lactosilceramide, the Major Human Neutrophil Glycosphyngolipid. J. Biol. Chem., 262, 11356-11363.

172. Takasaki A, Murray GJ, Furbish FS et al, (1981) Structure of the N-asparagine-linked oligosaccharide units of human placental P-glucocerebrosidase. J Biol Chem 259:10112-10117.

173. Theophilus BD, Latham T, Grabowski GA, Smith FI (1989) Gaucher disease: Molecular heterogeneity and phenotype-genotype correlations. Am J Hum Genet 45: 212.

174. Tsuji S, Choudary PV, Martin BM, Winfield S, Barranger JA, Ginns EI (1986) Nucleotide sequence of cDNA containing the complete coding sequence for human lysosomal glucocerebrosidase. J Biol Chem 261: 50.

175. Tsuji S, Choudary PV, Martin BM et al (1987). A mutation in the human glucocerebrosidase gene in neuronopathic Gaucher's disease. N Engl J Med 316: 570-574.

176. Tsuji S, Martin BM, Barranger JA et al (1988) Genetic heterogeneity in type 1 Gaucher disease: Multiple genotypes in Ashkenazic individuals. Proc Natl Acad Sci USA 85: 2349-2353.

177. Turner BM & Hischhorn К (1978) Properties of beta-glucosidase in cultured fibroblasts from controls and patients with Gaucher disease. Am J Hum Gen 30: 346358.

178. Vistry PK, Smith SJ, АН M, Hatton CSR, Mclntyre N, Cox TM (1992) Genetic diagnosis of Gaucher disease. Lancet 339: 889.

179. Walley AJ, Barth ML, Ellis I et al (1993) Gaucher's disease in the United Kingdom: screening non-Jewish patients for the two common mutations. J Med Gen 30: 280283.

180. Weiler S, Kishimoto Y, O'Brien JS et al (1995) Identification of the binding and activating sites of the sphingolipid activator protein, saposin C, with glucocerebrosidase. Prot Sci 4: 756-764.

181. H.Wiegandt, In: H.Wiegandt (Ed.), Glycolipids, Elsevier, New York, 1985, pp. 199259.

182. Winfield SL, Tayebi N, Martin BM et al (1997) Identification of three additional genes contiguous to the glucocerebrosidase locus on chromosome lq21: Implications for Gaucher disease. Genome Res 7: 1020-1023.

183. Zimran A, Gelbart T, Westwood B, Grabowski GA, Beutler E (1991) High frequency of the 1226 mutation for type 1 Gaucher disease among the Ashkenazi Jewish population. Am J Hum Genet 49: 855.

184. Zimran A, Horowitz M (1994) Rec TL: A complex allel of the glucocerebrosidase gene associated with a mild clinical course of Gaucher disease. Am J Med Genet 50: 74.

185. Zimran A, Kay A, Gelbart T et al (1992) Clinical, laboratory radiologic and genetic features of 53 patients. Medicine 71: 337-353.

186. Zimran A, Sorge J, Gross E, Kubitz M, West C, Beutler E (1989) Prediction of severity of Gaucher's disease by identification of mutations at DNA level. Lancet 2: 349.

187. Zimran A, Sorge J, Gross E, Kubitz M, West C, Beutler E (1990) A glucocerebrosidase fusion gene in Gaucher disease. Implications for the molecular anatomy, pathogenesis and diagnosis of this disorder. J Clin Invest 85: 219.