Диагностика, штаммовое разнообразие, вредоносность и профилактика вируса огуречной мозаики на Дальнем Востоке тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 06.01.11, кандидат биологических наук Козловская, Зинаида Николаевна

• Козловская, Зинаида Николаевна
• кандидат биологических наук
• 2002

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Козловская, Зинаида Николаевна

ВВЕДЕНИЕ.

ЕЛАВАI. ВИРУС ОЕУРЕЧНОЙ МОЗАИКИ (ВОМ) И ЕГО ШТАММЫ (обзор литературы).

1. Общая характеристика вируса.

2. Штаммы ВОМ.

3. Методы защиты растений от ВОМ.

ГЛАВА II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

1. Изоляты ВОМ.

2. Симптоматика растений-индикаторов, зараженных различными изолятами ВОМ.

3. Физико-химические методы.

3.1. Определение точки термической инактивации, предельного разведения сока, периода сохранения инфекционности.

3.2. Тестирование изолятов на термочувствительность.

3.3. УФ-спектрофотометрия.

3.4. Электрофорез в полиакриламидном геле.

3.5. Определение молекулярных масс капсидных белков.

3.6. Оценка степени деградации капсидных белков.

4. Методы выделения вирусных препаратов.

5. Иммунохимические методы.

5.1. Схемы получения поликлональных антител.

5.2. Выделение иммуноглобулинов.

5.3. Получение иммунопероксидазных конъюгатов.

5.4. Реакция двойной диффузии в агаре.

5.5. Ракетный иммуноэлектрофорез.

5.6. Иммуноферментный анализ.

ГЛАВА III. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

1. Распространение и вредоносность ВОМ в Приморском крае.

2. Симптоматика растений-индикаторов, зараженных различными изолятами ВОМ.

3. Физико-химические характеристики изолятов.

4. Очищенные препараты изолятов ВОМ.

4Л. Выход вируса.

4.2. Характеристика капсидных белков изолятов.

5. Иммунохимическая характеристика изолятов.

5.1. Характеристика кроличьих поликлональных антител.

5.2. Реакция двойной диффузии в агаре.

5.3. Ракетный иммуноэлектрофорез.

5.4. Непрямой вариант иммуноферментного анализа.

5.5. «Сэндвич»-вариант иммуноферментного анализа.

6. Профилактика заболеваний сельскохозяйственных растений ВОМ.

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Диагностика, штаммовое разнообразие, вредоносность и профилактика вируса огуречной мозаики на Дальнем Востоке»

Вирус огуречной мозаики (ВОМ) - один из важнейших в экономическом отношении фитопатогенов, приносящих значительный ущерб сельскому хозяйству. Он относится к наиболее распространенным природноочаговым вирусам. Встречается по всему земному шару, в том числе повсеместно в дальневосточном регионе.

Обстоятельные исследования ВОМ проведены во многих странах Азиатско-Тихоокеанского региона. Так, японские исследователи, начиная с середины 60-х годов, интенсивно изучают этот вирус и сделали большой вклад в разработку методик его идентификации в растениях и выделения, способов дифференциации штаммов и изолятов, в определение их взаимоотношений, в исследование РНК ВОМ, в том числе сателлитной РНК (Shohara, Osaki, 1974; Hidaka et al., 1985). Работы по диагностике ВОМ, идентификации его изолятов и изучению их свойств ведутся в КНР и Корее (Xu Leyong et al., 1989; Ryu, Park, 1995). Встречаются работы по исследованию этого вируса в Таиланде, Индонезии, Вьетнаме (Tsuchizaki, Iwaki, 1986; Ye, Tian, 1994). Значительное внимание уделяется изучению свойств штаммов и изолятов ВОМ в Индии (Mohan, Lakshmanan 1988; Raj et al., 1995).

Широкое распространение BOM отмечено в Приморском крае. Здесь он впервые идентифицирован на сое в 1967 году под названием вирус задержки роста сои (Поливанова, 1971). Позднее вирус обнаружен на ягодниках (Gordejchuk et al. 1977), декоративных (Чуян и др., 1978), овощных (Теплоухова и др., 1987) культурах, кормовых бобах (Поливанова и др., 1981), а в последнее время - на картофеле (Романова, Гнутова, 1998).

Вирус характеризуется большим штаммовым разнообразием, и количество выявляемых в различных странах и регионах штаммов, постоянно увеличивается.

В связи с этим исследование биологических, физико-химических, иммунохимических и молекулярно-биологических свойств В ОМ является актуальной задачей, так как открывает возможность изучения изолятов этого вируса и классификации его штаммов с учетом индивидуальных особенностей и родственных взаимоотношений. С другой стороны, знание свойств вируса и его структурных компонентов позволит выявлять наиболее антигенноактивные штаммы и на их основе получать высокочувствительные иммунодиагностикумы, необходимые как для исследовательской работы, так и для практического использования, а именно, для выявления заболеваний и защиты сельскохозяйственных культур, что будет способствовать повышению их урожайности.

Поэтому цель нашей работы заключалась в изучении распространения и вредоносности ВОМ в агро- и биоценозах Приморского края, в сравнительном изучении антигенных и физико-химических свойств капсидных белков 6 изолятов, идентифицированных в Корее, Китае и на юге Дальнего Востока России, в установлении их штаммовой принадлежности, выявлении наиболее антигенноактивных штаммов и в разработке на их основе высокочувствительных методов массовой экспресс-диагностики вируса. Для достижения этой цели были поставлены следующие задачи:

1. Подобрать и отработать методики получения препаратов ВОМ.

2. Подобрать оптимальные схемы иммунизации для получения антисывороток к изолятам ВОМ.

3. Изучить биологические, физико-химические и антигенные свойства 6 изолятов ВОМ для получения доказательств их штаммовой принадлежности.

4. Исследовать электрофоретическую подвижность капсидных белков изолятов.

5. Выявить наиболее антигенноактивный штамм вируса и на его основе приготовить иммунодиагностикум. 6

6. Провести полевые исследования очагов ВОМ в природных и искусственных ценозах с целью выявления путей и способов распространения вируса и определения его вредоносности.

7. Дать предложения по применению полученных результатов в практике защиты сельскохозяйственных культур от ВОМ.

Работа выполнена в лаборатории иммунохимии и биологии вирусов растений Биолого-почвенного института ДВО РАН.

Автор благодарит за помощь в постановке экспериментов с.н.с., к.б.н. Н.Н. Какарека, и.с. С.А. Романову, вед. инженеров Т.И. Плешакову и В.А. Ледневу. За помощь в оформлении полученных результатов автор приносит благодарность г.н.с., д.б.н. А.В. Реунову и с.н.с., к.б.н. Ю.Г.Волкову.

Заключение диссертации по теме «Защита растений», Козловская, Зинаида Николаевна

ВЫВОДЫ

1. Определен круг растений-хозяев шести дальневосточных изолятов ВОМ (ВОМан, ВОМк/кит, ВОМк/кор, ВОМс/кор, ВОМкаб, ВОМо/кор) и показаны их различия по симптоматологии.

2. Установлены отличия изолятов ВОМс/кор, ВОМк/кор и ВОМк/кит по их физическим характеристикам - точке термической инактивации, периоду сохранения инфекционности, предельному разведению сока.

3. В результате изучения биологических, физико-химических и антигенных свойств исследованных изолятов идентифицированы пять новых дальневосточных штаммов ВОМ на картофеле - ВОМан, ВОМк/кит и ВОМк/кор, сое - ВОМс/кор и овощных культурах - ВОМкаб которые отнесены к подгруппе штаммов ВОМ 1.

4. На основании изучения электрофоретической подвижности капсидных белков изолятов показано, что изолят ВОМо/кор является популяцией двух штаммов (ВОМо/кор 1 и ВОМо/кор2) отнесенных соответственно к подгруппам ВОМ 2 и ВОМ 1.

5. Сравнительное изучение биологических, физико-химических и антигенных свойств изолятов дает основание отнести штаммы ВОМан, ВОМкаб и ВОМк/кор к дальневосточному серотипу ВОМ, а ВОМс/кор и ВОМо/кор2 - к группе «бобовых» штаммов.

6. Выявленное сходство приморских штаммов ВОМкаб, ВОМан и штамма ВОМк/кор из КНДР может свидетельствовать об их общем происхождении.

7. Определен наиболее антигенноактивный штамм ВОМ (ВОМан), к которому разработан универсальный иммунодиагностикум, позволяющий проводить детекцию других штаммов вируса.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Козловская, Зинаида Николаевна, 2002 год

1. Аксельсен Н., Крелль И., Вееке В. Руководство по количественному иммуноэлектрофорезу. М.: Наука, 1977. С. 200-205.

2. Власов Ю.И. Закономерности развития вирусных эпифитотий. М.: Колос, 1974. 158 с.

3. Гиббс А., Харрисон Б. Основы вирусологии растений. М.: Мир, 1978. 429 с.

4. Гнутова Р.В., Волков Ю.Г., Люй Вэньцин. Фитовирусы Дальнего Востока России и Китая // Проблемы фитовирусологии на Дальнем Востоке. Владивосток: Дальнаука, 1996. С. 5-20.

5. Гнутова Р.В., Козловская З.Н., Чуян А.Х., Сибирякова И.И. Иммунологическая характеристика дальневосточных изолятов вируса огуречной мозаики // Взаимоотношения вирусов с клетками растения-хозяина. Владивосток: ДВНЦ АН СССР, 1985. С.64-71.

6. Дьяков Ю.Т., Озерецковская О.Л., Джавахия В.Г., Багирова С.Ф. Общая и молекулярная фитопатология. М: Изд-во Общество фитопатологов, 2001. 302 с.

7. Келдыш М.А., Помазков Ю.И. Вирусные и микоплазменные болезни древесных растений. М.: Наука, 1985. 132 с.

8. Коваленко Т.К. Эффективность биопрепаратов в борьбе с картофельной коровкой // Матер, научно-практ. конф. «Генофонд растений Дальнего Востока России». Владивосток: ДНМЦРАСХН, 1999. С. 156-158.

9. Костин В.Д. Вирусные болезни дикорастущих растений Дальнего Востока // Проблемы фитовирусологии на Дальнем Востоке. Владивосток: Дальнаука, 1996. С. 74-87.

10. Ю.Крылов А.В. Вирусы растений Дальнего Востока. М.: Наука, 1992. С. 73-83.

11. Молдован М.Я. Вирусные болезни табака и меры борьбы с ними. Кишинев: Штиинца, 1979. 226 с.

12. Новиков В.К., Тюлькина Л.Г., Смирнягина К.В. Вирусные болезни лопуха и подорожника // Тез. докл. Всесоюзн. конф. «Микробиологические и биотехнологические основы интенсификации растениеводства и кормопроизводства. Алма-Ата. 1990. С.80.

13. И.Поливанова Т.А. Вирусные болезни сои // Болезни и вредители сои на юге Дальнего Востока и меры борьбы с ними. Владивосток: ДВО АН СССР, 1971. С.104-144.

14. Поливанова Т.А., Слепухина Л.П., Лазарева Л.В., Степаненко В.И. Штамм вируса огуречной мозаики, выделенный из кормовых бобов в Приморье // Вирусные болезни растений. Владивосток: ДВО АН СССР, 1981. Вып.11. С.77-82.

15. Романова С.А. Природные резервуары вируса огуречной мозаики в семеноводческих хозяйствах Приморского края // Тез III межд. конф "Биоресурсы и вирусы". Киев: Фитосоциоцентр, 2001. С. 96.

16. Романова С.А., Гнутова Р.В. Биологические свойства штамма вируса огуречной мозаики, выявленного из картофеля на Дальнем Востоке России // Тез II межд. конф "Биоресурсы и вирусы". Киев: Фитосоциоцентр, 1998. С.111.

17. Романова С.А., Леднева В.А., Гнутова Р.В. Биологические свойства штамма вируса огуречной мозаики, выделенного из картофеля на Дальнем Востоке России // Докл. РАСХН. 2000. №5. С. 16-18.

18. Теплоухова Т.П., Малевич В.М., Рублева Н.В. Вирусные болезни овощных культур в Приморском крае // Пути повышения продуктивности растениеводства, кормопроизводства и садоводства на Дальнем Востоке. Владивосток: ДВО АН СССР, 1987. С. 182-187.

19. Френкель-Конрат X. Химия и биология вирусов. М.: Мир, 1972 333 с.

20. Чуян А.Х., Крылов А.В., Стрекозова В.Ф., Малевич В.М. Вирус огуречной мозаики в Приморском крае // Тез. докл. Всесоюзн. совещ. «Вирусные болезни сельскохозяйственных растений и меры борьбы с ними». М.: ВАСХНИЛ, 1978. С. 147-148.

21. Ширгель Б. Количественный двумерный иммуноэлектрофорез (перекрестный электрофорез по Лоррелу) // Иммунологические методы. М.: Мир, 1979. С. 17-30.

22. Шоймоши Ф. Вирусология. Методы фитопатологии. М.: Колос, 1974. С. 6-80.

23. Abdalla О.A., Desjardins P.R., Dodds J.A. Identification, disease incidence, and distribution of viruses infecting peppers in California // Plant Dis. 1991. Vol. 75, N 10. P. 1018-1023.

24. Ahmad I.B., Scott H.A. An improved immunodiffusion test for the detection of intact cucumber mosaic virus in crude tobacco sap // Phytopathology. 1984. Vol. 74, N9. P. 1097-1100.

25. Ahmad I.B., Scott H.A. Identification and serotyping of cucumber mosaic and peanut stunt viruses from Arkansas // Plant Dis. 1985. Vol. 69. P. 891-893.

26. Anderson J.M., Palukaitis P., Zaitlin M. A defective replicase gene induces resistance to cucumber mosaic virus in transgenic tobacco plants // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1992. Vol. 89, N18. P. 8759-8763.

27. Brian J. Isolates of cucumber mosaic virus from spontaneously infected plant of Chelidonium majus and Impatiens parviflora // Biol. Plantarum. 1979. Vol. 21, N3. P. 220-223.

28. Bruckart W.L., Lorbeer J.W. Some weed host of cucumber mosaic in New-York // Phytopathology. 1974. Vol. 64, N 5. P. 579.

29. Buchen-Osmond C. Cucumber mosaic virus. Descr. 10.0.4.0.001 // ICTV. Database. 1999. 9 p.

30. Canto Т., Palukaitis P. Replicase-mediated resistance to cucumber mosaic virus does not inhibit localization and/or trafficking of the viral movement protein // Mol. Plant-Microbe Interact. 1999. Vol. 12, N8. P. 743-747.

31. Caranta C., Palloix A., Lefebvre V., Daubeze A.M. QTLs for a component of partial resistance to cucumber mosaic virus in pepper: restriction of virus installation in host-cells // Theor. Appl. Genet. 1997. Vol. 94, N 3-4. P. 431-438.

32. Carrere I., Tepfer M., Jacquemond M. Recombinants of cucumber mosaic virus (CMV): determinants of host range and symptomatology // Arch. Virol. 1999. Vol. 144, N2. P. 365-379.

33. Celebi F., Russo P., Watanabe K., Valkonen J.P.T., Slack S.A. Resistance of potato to cucumber mosaic virus appears related to localization in inoculated leaves //Am. J. Potato Res. 1998. Vol. 75, N4. P. 195-199.

34. Clark M.F., Adams A.N. Characteristics of the microplate method of enzyme-linked immunosorbent assay for the detection of plant viruses // J. Gen. Virol. 1977. Vol. 34. P. 475-483.

35. Clark M.F., Lister R.M., Bar-Joseph M. ELISA techniques // Meth. Enzymol. 1986. Vol. 118. P. 742-766.

36. Cleveland D.W., Fischer S.G., Kirschner M.W., Laemmli U.K. Peptide mapping by limited proteolysis in sodium dodecyl sulfate and analysis by gel electrophoresis // J. Biol. Chem. 1977. Vol. 252. P. 1102-1106.

37. Cohen J., Loebenstein G. Role of a whitefly-transmitted agent in infection of sweet-potato by cucumber mosaic-virus // Plant Dis. 1991. Vol. 75, N3. P. 291292.

38. Daniels J., Campbell R.N. Characterization of cucumber mosaic virus isolates from California // Plant Dis. 1992. Vol. 76, N12. P. 1245-1250.

39. Devergne J.C., Cardin L. Contribution a l'etude du virus de la mosaique du concombre (CMV). IY. Essai de classification de plusieurs isolats sur la base de leur structure antigenique // Ann. Phytopathol. 1973. Vol. 5. P. 409-430.

40. Devergne J.C., Cardin L. Relations serologiques entre cucumovirus (CMV, TAV, PSV) // Ann. Phytopathol. 1975. Vol. 7. P. 255-276.

41. Devergne J.C., Cardin L., Burckard J., van Regenmortel M.H.V. Comparison of direct and indirect ELISA for detecting antigenically related cucumovirus // J. Virol. Meth. 1981 . Vol. 3. P. 193-200.

42. Devic M., Jeagle M., Baulcombe D. Symptom production on tobacco and tomato is determined by two distinct domains of the satellite RNA of cucumber mosaic virus (strain Y) // J. Gen. Virol. 1989. Vol. 70. P. 2765-2774.

43. Diaz-Ruiz J.R., Kaper J.M. Cucumber mosaic virus-associated RNA 5. III. Little nucleotide sequence homology between CARNA 5 and helper RNA // Virology. 1977. Vol. 80. P. 203-213.

44. Diaz-Ruiz J.R., Kaper J.M. Isolation of viral double-stranded RNAs using a LiCl fractionation procedure // Preparative Biochemistry. 1978. Vol. 8. P. 1-17.

45. Ding S.W., Anderson B.J., Haase H.R., Symons R.H. New overlapping gene encoded by the cucumber mosaic virus genome // Virology. 1994. Vol. 198. P. 593-601.

46. Ding В., Li Q., Nguyen L., Palukaitis P., Lucas W.J. Cucumber mosaic virus 3a protein potenciates cell-to-cell trafficking of CMV RNA in tobacco plants // Virology. 1995a. Vol. 207. P. 345-353.

47. Ding S.W., Li W.X., Symons R.H. A novel naturally occurring hybrid gene encoded by a plant RNA virus facilitates long distance virus movement // EMBO J. 1995b. Vol. 14. P. 5762-5772.

48. Douine L., Quiot J.B., Marchoux G., Archange P. Recensement des especes vegetales sensibles au virus de la mosaique du concombre (CMV) // Etude bibliographique. Arm. Phytopathol. 1979. Vol. 11. P. 439-475.

49. Eagles R.M., Gardner R.C., Forster R.L.S. Incidence and distribution of 6 viruses infecting tamarillo (Cyphomandra-Betacea) in New-Zeland // N. Z. J. Crop Hortic. 1994. Vol. 22, N4. P. 453-458.

50. Edwards M.C., Cooper J.I. Plant virus detection using a new form of indirect ELISA//J. Virol. Meth. 1985. Vol. 11. P. 309-319.

51. Edwards M.C., Gonsalves D. Grouping of seven biologically defined isolates of cucumber mosaic virus by peptide mapping // Phytopathology. 1983. Vol. 73. P. 1117-1120.

52. Finch J.T., Klug A., van Regenmortel M.H.V. The structure of cucumber mosaic virus // J. Mol. Biol. 1967. Vol. 24. P. 303-305.

53. Francki R.I.B., Habili N. Stabilization of capsid structure and enhancement of immunogenicity of cucumber mosaic virus (Q strain) by formaldehyde // Virology. 1972. Vol. 48. P. 309-315.

54. Francki R.I.B., Mossop D.W., Hatta T. Cucumber mosaic virus // CMI/AAB Descr. Plant Virus. 1979. No 213.

55. Gibbs A.J., Harrison B.D. Cucumber mosaic virus // CMI/AAB Descr. Plant Virus. 1970. No 1.

56. Gonda T.J., Symons R.H. The use of hybridization analysis with complementary DNA to determine the RNA sequence homology between strains of plant viruses: Its application to several strains of cucumoviruses // Virology. 1978. Vol. 88. P. 361-370.

57. Gonsalves D., Provvidenti R., Edwards M.C. Tomato white leaf: the relation of an apparent satellite RNA and cucumber mosaic virus // Phytopathology. 1982. Vol. 72, N12. P. 1533-1538.

58. Gould A.R., Symons R.H. Cucumber mosaic virus RNA 3: Determination of the nucleotide sequence provides the amino acid sequences of protein ЗА and viral coat protein // Eur. J. Biochem. 1982. Vol. 126. P. 217-226.

59. Grogan R.G., Taylor R.H., Kimble K.A. The effect of placement of reactant on immunodiffusion precipitin patterns // Phytopathology. 1964. Vol. 54. P. 164-166.

60. Grogan R.G., Uyemoto J.K., Kimble K.A. Evidence that tomato aspermy and cucumber mosaic viruses are serologically unrelated // Virology. 1963. Vol. 21. P. 36-42.

61. Haack I., Richter J. Differenzierung von Isolaten des Gurkenmosaik-Virus (cucumber mosaic virus) nut Hilfe von Testpflanzen // Arch. Phytopathol. Pflanzenschutz. 1987. Bd23. S. 435-441.

62. Haase A., Richter J., Rabenstein F. Monoclonal antibodies for detection and serotyping of cucumber mosaic virus // J. Phytopathol. 1989. Vol. 127. P. 129136.

63. Habili N, Francki R.I.B. Comparative studies of tomato aspermy and cucumber mosaic viruses. III. Further studies on relationships and construction of a virus made from parts of the two viral genomes // Virology. 1974. Vol. 61. P. 443449.

64. Hanada К., Tochihara H. Genetic analysis of cucumber mosaic, peanut stunt and chrysanthemum mild mottle viruses // Ann. Phytopathol. Soc. Japan. 1980. Vol. 46. P. 159-168.

65. Havranek P. Use of quantitative immunoelectrophoresis in cucumber mosaic virus assay. I. Identification of antigenic patterns // J. Phytopathol. 1978. Vol. 92, N4. P. 351-358.

66. Havranek P. Use of quantitative immunoelectrophoresis in cucumber mosaic virus assay. III. Evaluation of dilution curves // Ibid. 1978. Vol. 93, N2. P. 97-104.

67. Hayes R.J., Buck K.W. Complete replication of a eukaryotic virus RNA in vitro by a purified RNA-dependent RNA polymerase // Cell. 1990. Vol. 63. P. 363368.

68. Hellwald K.-H., Palukaitis P. Viral RNA as a potential target for two independent mechanisms of replicase-mediated resistance against cucumber mosaic virus // Cell. 1995. Vol.83. P. 937-946.

69. Hidaka S., Tsunasawa S., Yoon J.-O. Messenger RNA structure participating in the initiation of synthesis of cucumber mosaic virus coat protein // J. Biochem. 1985. Vol. 97, N1. P. 161-171.

70. Hill J.H., Shephard R.J. Molecular weights of plant virus coat proteins by polyacrylamide gel electrophoresis //Virology. 1972. Vol. 47. P. 817-822.

71. Horvath J. Viruses of lettuce. II. Host ranges of lettuce mosaic virus and cucumber mosaic virus // Acta Agronom. Acad. Sci. Hung. 1980. Vol. 29. P. 333352.

72. Horvath J. Reaction of solanum-stoloniferum to cucumber mosaic cucumovirus // Acta Phytopathol. Entomol. Hung. 1994. Vol. 29, N 1-2. P. 105108.

73. Hughes J.D.A., Thomas В J. The use of protein A-sandwich ELISA as means for quantifying serological relationships between members of the tobamovirus group // Ann. Appl. Biol. 1988. Vol. 112. P. 117-126.

74. Hull R. Examination of alfalfa mosaic virus protein on polyacrylamide gels // Virology. 1971. Vol. 45. P. 767-772.

75. Hull R. The behavior of salt-labile plant viruses in gradient of cerium sulphate // Virology. 1976. Vol. 75. P 18-25.

76. Jon Jong On, Gnutova R.V., Kakareka N.N. Preparation of monoantibody CMV-1 // Bull. Acad. Sci. DPRK. 1994. N2. P. 47-50.

77. Jones R.A.C., Latham LJ. Natural resistance to cucumber mosaic virus in lupin species // Ann. Appl. Biol. 1997. Vol. 130, N1. P. 187-206.

78. Jones R.A.C., McKirdy S.J. Seed-borne cucumber mosaic vims infection of subterranean clover in Western Australia // Ann. Appl. Biol. 1990. Vol. 116. P. 73-86.

79. Kaniewski W.K., Thomas P.E. Field testing for virus resistance and agronomic performance in transgenic plants // MoL Biotechnol. 1999. Vol. 12, N1. P. 101-115.

80. Kaper J.M., Tousignant M.E. Cucumber mosaic virus-associated RNA 5. V. Extensive nucleotide sequence homology among CARNA 5 preparations of different CMV strains // Virology. 1978. Vol. 5. P. 323-327.

81. Kaper J.M., Tousignant M.E. Viral satellites: Parasitic nucleic acids capable of modulating disease expression // Endeavour. 1984. Vol. 8. P. 194-200.

82. Kaper J.M., Tousignant M.E., Lot H. A low molecular weight replicating RNA associated with a divided genome plant virus: defective or satellite RNA? // Biochem. Biophys. Res. Comm. 1976. Vol. 72. P. 1237-1243.

83. Kaper J.M., Waterworth H.E. Cucumber mosaic virus associated RNA 5: Causal agent for tomato necrosis // Science. 1977. Vol. 196. P. 429-431.

84. Kaper J.M., Waterworth H.E. Cucumoviruses // In: Handbook of plant virus infections: comparative diagnosis (ed. by E. Kurstak). Amsterdam: Elsevier/North Holland, 1981. P. 257-332.

85. Kaper J.M., West C.K. Polyacrylamide gel separation and molecular weight determination of the components of cucumber mosaic virus RNA // Prep. Biochem. 1972. Vol. 2. P 251-263.

86. Kaplan I.B., Shintaku M.H, Li Q., Zhang L., Marsh L.E., Palukaitis P. Complementation of virus movement in transgenic tobacco expressing the cucumber mosaic virus 3a gene // Virology. 1995. Vol. 209. P. 188-199.

87. Kearney C.M., Zitter T.A., Gonsalves D. A field survey for serogroups and the satellite RNA of cucumber mosaic virus // Phytopathology. 1990. Vol. 80. P. 1238-1243.

88. Kurath G., Palukaitis P. Satellite RNAs of cucumber mosaic virus: recombinants constructed in vitro reveal independent functional domains for chlorosis and necrosis in tomato // Mol. Plant-Microbe Interact. 1989. Vol. 2, N1. P. 91-96.

89. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4 //Nature. 1970. Vol. 227. P. 680-685.

90. Lot H., Kaper J.M. Physical and chemical differentiation of three strains of cucumber mosaic virus and peanut stunt virus // Virology. 1976. Vol. 74. P. 209222.

91. Lot H., Marrou J., Quiot J.B., Esvan C. Contribution a l'etude de virus de la mosaique du concombre (CMV). I. Methode de purification rapide du virus // Ann. Phytopathol. 1972. Vol. 4. P. 25-38.

92. Lovisolo O., Conti M. Biological characterization of some isolates of cucumber mosaic virus // Ann. Phytopathol. 1969. Vol. 1. P. 367-371.

93. Maeda Т., Inouye N. Differentiation of two serotypes of cucumber mosaic virus in Japan by F(ab') 42 0 ELISA with cross-absorbed antibodies // Ber. Ohara Inst. Landwirtsch. Biolog. Okayama Univ. 1987. Vol. 19. P. 149-157.

94. Marchoux G. Proprietes diologiques et genetiques des ARN du vims de la mosaique du concombre. Ph. D. Thesis, Univ. Marseille. 1975. 138 p.

95. Masuta C., Suruki M. Symptoms of yellow mosaic induced by sat-RNA of CMV are regulated by single not completely dominant gene in wild species Nicotiana // Phytopathology. 1993. Vol. 83, N4. P. 411-413.

96. Matthews R.E.F. Classification and nomenclature of viruses // Intervirology. 1982. Vol. 17. P. 1-199.

97. Mink G.I., Iizuka N., Kiriyama K. Some cucumber mosaic virus antisera contain antibodies specific for both peanut stunt virus and chrysanthemum mild mottle virus // Phytopathology. 1975. Vol. 65. P. 65-68.

98. Mohan S., Lakshmanan P. Outbreak of CMV on Musa sp. In Tamil Nadu, India//Phytoparasitica. 1988. Vol. 16. P. 281-282.

99. Morris T.J., Dodds J.A. Isolation and analysis of double-stranded RNA from virus infected plant and fungal tissue // Phytopathology. 1979. Vol. 69. P. 854-858.

100. Mossop D.W., Francki R.I.B. Comparative studies on two satellite RNAs of cucumber mosaic virus // Virology. 1979. Vol. 95. P. 395-404.

101. Murphy F.A., Fauquet C.M., Bishop D.H.L., Ghabrial S.A., Jarvis A.W., Martelli G.P., Mayo M.A., Summers M.D. Classification and nomenclature of viruses // 6th Rep. Inter. Comm. Taxonom. Virus. 1995. 586 p.

102. Nakane P.K., Kawoi A. Peroxidase labelled antibody. A new method of conjugation // J. Histochem. Cytochem. 1974. Vol. 22, N10. P. 1084-1091.

103. Nassuth A., Bol J.F. Altered balance of the synthesis of plus- and minus-strand RNAs induced by RNAs 1 and 2 of alfalfa mosaic virus in the absence of RNA 3 // Virology. 1983. Vol. 124. P. 75-85.

104. Ogawa Т., Hori Т., Ishida I. Virus-induced cell death in plants expressing the mammalian 2',5' oligoadenylate system // Nat. Biotechnol. 1996. Vol. 14, N11. P. 1566-1569.

105. Ouchterlony O. Diffusion in gel methods for immunological analyses // Progress in allergy. Basel, New York. 1962. P. 32-154.

106. Owen J., Palukaitis P. Characterization of cucumber mosaic virus. I. Molecular heterogeneity mapping of RNA3 in eight CMV strains // Virology. 1988. Vol. 166. P. 495-502.

107. Palukaitis P. Pathogenicity regulation by satellite RNAs of cucumber mosaic virus: Minor nucleotide sequence changes alter host responses // Mol. Plant-Microbe Inter. 1988. Vol. 1. P. 175-181.

108. Palukaitis P., Roossinck M.J., Dietzgen R.G., Francki R.I.B. Cucumber mosaic virus // Adv. Virus Res. 1992. Vol. 41. P. 281-348.

109. Palukaitis P., Symons R.H. Nucleotide sequence homology of thirteen tobamovirus RNAs as determined by hybridization analysis with complementary DNA//Virology. 1980. Vol. 107. P. 354-361.

110. Paul H.Z. SDS-polyacrylamide gel electrophoresis of virion proteins as a tool for detection the presence of virus in plant. I. Testing of methods // Phytopathol. Z. 1974. Bd 80. S. 330-339.

111. Paulus A.O., Kendrick J.В., Weathers L.G. Cucumber mosaic virus on peper in California // Phytopathology. 1962. Vol. 52. P. 25-32.

112. Peden K. W. C., Symons R.H. Cucumber mosaic virus contains a functionally divided genome // Virology. 1973. Vol. 53. P. 487-492.

113. Piazzolla P., Diaz-Ruiz J.R., Kaper J.M. Nucleic acid homologies of eighteen cucumber mosaic vims isolates determined by competition hybridization // J. Gen. Virol. 1979. Vol. 45. P. 361-369.

114. Porta C., Devergne J.C., Cardin L., Briand J.P., Van Regenmortel M.H.V. Serotype specificity of monoclonal antibodies to cucumber mosaic vims // Arch. Virol. 1989. Vol. 104. P. 271-285.

115. Price W.C. Isolation and study of some yellow strains of cucumber mosaic // Phytopathology. 1934. Vol. 24. P. 743-766.

116. Proll E., Richter J. Serologische Untersuchungen mit dem Gurkenmosaik-Virus. I. Virusreinigung und Antiserumberstellung // Arch. Pflanzenschutz. 1972. Bd 8, H. 5. S. 347-359.

117. Raj S.K., Haq Q.M.R., Srivastava K.M., Singh B.P. Sequence homology of 2 indian isolates of cucumber mosaic virus. N-terminal amino-acid sequences of the coat protein gene with CMV strains // Plant Biochem. Biotechnol. 1995. Vol. 4, N2. P. 77-80.

118. Rezaian M.A., Williams R.H.V., Symons R.H. Nucleotide sequence of cucumber mosaic vims RNA 1. Presence of a sequence complementary to part of the viral satellite RNA and homologies with other viral RNAs // Eur. J. Biochem. 1985. Vol. 150. P. 331-339.

119. Rizzo T.M., Palukaitis P. Nucleotide sequence and evolutionary relationships of cucumber mosaic virus (CMV) strains. CMV RNA 2 // J. Gen. Virol. 1988. Vol. 69. P. 1777-1787.

120. Rizzo T.M., Palukaitis P. Nucleotide sequence and evolutionary relationships of cucumber mosaic virus (CMV) strains. CMV RNA 1 // J. Gen. Virol. 1989. Vol. 70. P. 1-11.

121. Rodriguezalvarado G., Kurath G., Dodds J.A. Heterogeneity in pepper isolates of cucumber mosaic virus // Plant Dis. 1995. Vol. 79, N5. P. 450-455.

122. Ryu K.H., Park W.M. Complementary DNA hybridization analysis of double-stranded RNAs associated with cucumber mosaic virus-As strain // J. Phytopathol. 1995. Vol. 143, N 11-12. P. 683-687.

123. Schwinghamer M.W., Symons R.H. Fractionation of cucumber mosaic vims RNA and its translation in a wheat embryo cell-free system // Virology. 1975. Vol. 63. P. 252-262.

124. Scott H. Purification of cucumber mosaic virus // Virology. 1963. Vol. 20, N1. P. 103-106.

125. Sikora E.J., Gudauskas R.T., Murphy J.F., Porch D.W., Andrianifahanana M., Zehnder G.W., Bauske E.M., Kemble J.M., Lester D.F. A multivirus epidemic of tomatoes in Alabama // Plant Dis. 1998. Vol. 82, N1. P. 117-120.

126. Shohara K., Osaki Т. Очистка вируса мозаики огурца преципитацией полиэтилеигликолем (ПЭГ) и центрифугированием в градиентах ПЭГ. Нихон сёкубуцу бёригаку кайхо (Ann. Phytopathol. Soc. Jap). 1974. Vol. 40, N3. P. 265-267.

127. Somerville P.A., Campbell R.N., Hall D.H., Rowhani A. Natural infection of potatoes (Solanum tuberosum) by a legume strain of cucumber mosaic virus // Plant Dis. 1987. Vol. 71. P. 18-20.

128. Stussi-Garaud C., Garaud J.-C., Berna A., Godefroy-Colburn T. In situ location of an alfalfa mosaic virus non-structural protein in plant cell walls: Correlation with virus transport // J. Gen. Virol. 1987. Vol. 68. P. 1779-1784.

129. Takanami Y. A striking change in symptoms on cucumber mosaic virus-infected tobacco plants induced by a satellite RNA // Virology. 1981. Vol. 109. P. 120-126.

130. Takanami Y., Tomaru K. Effect of EDTA on cucumber mosaic virus and its application in purification // Virology. 1969. Vol. 37. P. 293-295.

131. Thresh J.M. Pest pathogens and vegetation. London: Pitman, 1981. P. 53-70.

132. Tolin A. The atlas of insect and plant viruses. New Jork San Francisko - London: Acad. Press, 1977. Vol. 8 P. 303-309.

133. Tomaru K., Hidaka Z. Strains of cucumber mosaic virus isolated from tobacco plants. III. A yellow strain // Bull. Hatano Tobacco Exp. St. 1960. Vol. 46. P. 143-149.

134. Tomassoli L., Ilardi V., Barba M., Kaniewski W. Resistance of transgenic tomato to cucumber mosaic cucumovirus under field conditions // Mol. Breed. 1999. Vol. 5, N2. P. 121-130.

135. Tsuchizaki Т., Iwaki M. Вирус мозаики огурцов, выделенный из крылатых бобов в Таиланде и из спаржевых бобов в Индонезии // Techn. Bull. Trop. Agr. Res. Cenf. 1986. N21. P. 223-227.

136. Valkonen J.P.T., Slack S.A., Watanabe K.N. Resistance to cucumber mosaic-virus in potato//Ann. Appl. Biol. 1995. Vol. 126, N1. P. 143-151.

137. Valkonen J.P.T., Watanabe K.N. Autonomous cell death, temperature sensitivity and the genetic control associated with resistance to cucumber mosaic vims (CMV) in diploid potatoes (Solanum spp.) // Theor. Appl. Genet. 1999. Vol. 99, N6. P. 996-1005.

138. Valverde R.A., Nameth S.T., Jordan R.L. Analysis of double-stranded RNA for Plant virus diagnosis // Plant Dis. 1990. Vol. 74. P. 255-258.

139. Van Regenmortel M.H.V., Hendry D.A., Baltz T. A reexamination of the molecular size of cucumber mosaic virus and its coat protein // Virology. 1972. Vol. 49. P. 647-653.

140. Van Regenmortel M.H.V. Serology and Immunochemistry of Plant Viruses. New York: Acad. Press, 1982. 302 p.

141. Ucko O., Cohen S., Ben-Joseph R. Prevention of virus epidemics by a crop-free period in the Arava region of Israel // Phytoparasitica. 1998. Vol. 26, N4. P. 313-321.

142. Wahyuni W.S., Dietzgen R.G., Hanada K., Francki R.I.B. Serological and biological variation between and within subgroup I and II strains of cucumber mosaic virus // Plant Pathol. 1992. Vol.41. P. 282-297.

143. Waterworth H.E. Purification of arabis mosaic virus isolated from a jasmine plant introduction // Phytopathology. 1975. Vol. 65, N8. P. 927-928.

144. Waterworth H.E., Tousignant M.E. Kaper J.M. A lethal disease of tomato experimentally induced by RNA-5 associated with cucumber mosaic virus isolated from commelina from Salvador // Phytopathology. 1978. Vol. 68. P. 561566.

145. Waterworth H.E., Kaper J.M., Tousignant M.E. CARNA 5, the small cucumber mosaic virus-dependent replicating RNA, regulates disease expression // Science. 1979. Vol. 204. P. 845-847.

146. Weber K., Osborn M. The reability of molecular weight determinations by dodecyl sulfate polyacrilamide gel electrophoresis // J. Biol. Chem. 1969. Vol. 224. P. 4406-4410.

147. Wood K.R., Coutts R.H.A. Preliminary studies on the RNA components of three strains of cucumber mosaic virus // Physiol. Plant Pathol. 1975. Vol. 7. P. 139-145.

148. Xu Leyong, Zhang Z., Chen J. Идентификация штамма вируса огуречной мозаики (ВОМ), вызывающего задержку роста арахиса // Acta phytopathol. Sin. 1989. Vol. 19, N3. P. 141-144.

149. Ye Y., Tian Во. Конструирование димерной к-ДНК сателлитной РНК ВОМ//Peog. Not. Sci. 1994. Vol. 4,N1.P. 53-59.102

150. Zaitlin M., Anderson J.M., Perry K.L., Zhang L., Palukaitis P Specificity of replicase-mediated resistance to cucumber mosaic-virus // Virology 1994. Vol. 201, N2. P. 200-205.