Глутаминаза пекарских дрожжей (выделение и свойства) тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 00.00.00, Полоцкая, Ирина Владимировна

• Полоцкая, Ирина Владимировна
• 1984

Оглавление диссертации Полоцкая, Ирина Владимировна

1. ВБВДЕНИЕ.

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

2.1. Роль глутамина в азотном обмене и его ферментативное дезамидирование

2.2. Распространенность глутаминазы и ее локализация в тканях и клетках.

2.3. Субстратная специфичность .II

2.4. Кинетика действия глутаминаз.

2.5. Механизм катализа ферментативного гидролиза глутамина.

2.6. Механизмы регуляции глутаминазы.

2.6.1. Влияние реактивов на сульфгидрильные группы.

2.6.2. Влияние структурных аналогов глутамина.

2.6.3. Влияние различных ионов

2.6.4. Влияние нуклеозидмоно-, -ди-, -трифосфатов и органических кислот.

2.7. Активность глутаминазы на различных стадиях роста микроорганизмов и изоэнзимы глутаминазы.

2.8. Очистка глутаминаз.

2.9. Физиологическая роль глутаминазы микроорганизмов.

3. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

3.1. Объект исследования и характеристика использованных реактивов

3.2. Методы исследования

3.2.1. Получение дрожжевого экстракта.

3.2.2. фракционированное осаждение белков сульфатом аммония.

3.2.3. Разделение белков гель-фильтрацией через

Сефадекс

-3- стр.

3.2.4. Разделение белков на КМ-целлшозе

3.2.5. Диск-электрофорез в полиакриламидном геле

3.2.6. Разработанная модификация метода определения активности глутаминазы

3.2.7. Определение белка по методу Лоури

3.2.8. Определение молекулярной массы глутаминазы с помощью гель-хроматографии.

3.3. Полученные результаты и их обсуждение.

3.3.1. Исследование активности глутаминазы при разных режимах хранения дрожжевого экстракта.

3.3.2. Выделение и очистка глутаминазы из пекарских дрожжей.

3.3.3. Кинетические свойства глутаминазы в реакции дезамидирования глутамина

3.3.3.1. Изучение реакции дезамидирования глутамина во времени.

3.3.3.2. Зависимость активности глутаминазы от темпе -ратуры.

3.3.3.3. Влияние рН на активность глутаминазы

3.3.3.4. Зависимость активности фермента от концентрации глутамина

3.3.3.5. Влияние концентрации ферментного препарата на активность глутаминазы

3.3.3.6. Термостабильность фермента

3.3.4. Исследование регуляции глутаминазы дрожжей.

3.3.4.1. Влияние фосфата и пирувата на активность фермента

3.3.4.2. Влияние парахлормеркурибензоата на активность фермента.

3.3.4.3. Влияние ЭДТА и ионов металлов на активность глутаминазы

3.3.4.4. Влияние некоторых органических кислот на активность фермента

3.3.4.5. Влияние аминокислот на активность фермента

-43.3.4.6. Влияние рибофлавина на активность фермента

3.3.4.7. Действие НАД и НАДФ на активность глутаминазы

3.3.4.8. Действие нуклеозидмоно-, -ди-, -трифосфатов на активность глутаминазы

3.3.5. Определение молекулярной массы глутаминазы пекарских дрожжей.

Заключение диссертации по теме «Другие cпециальности», Полоцкая, Ирина Владимировна

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

1.Разработана модификация метода определения активности глутаминазы в дрожках,

2. Разработана схема выделения и очистки глутаминазы, позволяющая очистить фермент в 20 раз*

3. Изучены кинетические свойства глутаминазы в дрожжевом экстракте и частично очищенной глутаминазы. Получены следующие результаты: а) зависимость активности фермента от времени его действия в течение 90 минут сохраняется линейной; б) максимальную активность глутаминаза проявляет при рН 8,5-8,6 и температуре 48°; в) зависимость активности глутаминазы от концентрации СубСТрао та имеет гиперболический характер; К^, = 2,3*10 М. г) зависимость активности глутаминазы от концентрации ферментного препарата прямолинейная; д) фермент весьма чувствителен к предварительному прогреву, однако в присутствии субстрата фермент проявляет высокую термостабильность; е) при очистке глутаминазы существенных изменений в ее кинетических параметрах по сравнению с неочищенным препаратом мы не обнаружили,за исключением того, что фермент стал более термолабильным«

4. Определена молекулярная масса глутаминазы из з.сегеу±в1ае, равная 68 ООО.

5. Исследовано действие ряда эффекторов на активность глутаминазы из дрожжевого экстракта и глутаминазы в частично очищенном препарате из БассЬаготусев eerevisiae „ Результаты проведенной серии экспериментов указывают на следующее: а) фермент является фосфат- и пируватнезависимым; б) п-ХМБ оказывает ингибирущее действие; в) ЭДТА понижает активность фермента; активаторами являются Р©2+ , Ме2+ ( плюс мп2+ для частично очищенной глутаминазы),

4 о 1 р+ ингибиторами - Овг\, Ми ( для частично очищенного ферментного препарата, только Са2^» г) ингибирущее действие органических кислот усиливается в ряду лимонная, ¿-кетоглутаровая, уксусная, яблочная: оно выражено в большей степени для частично очищенного фермента; д) аланин, глицин, триптофан и глутаминовая кислота в разной степени понижают глутаминазную активность очищенного и неочищенного ферментного препарата; гистидин ингибирует глутами-назу в дрожжевом экстракте и активирует очищенный ферментный препарат; е) рибофлавин оказывает ингибирущее действие на неочищенный ферментный препарат в меньшей степени, чем на очищенный; ж) рассмотренные нуклеозидмонофосфаты в небольших концентрациях повышают активность фермента; циклический АМФ, нуклеозидди-и -трифосфаты вызывают ингибирущее действие, за исключением АДФ, который дает сильный активирующий эффект и ГТФ, повышающего активность неочищенного ферментного препарата.

I' U '

Список литературы диссертационного исследования Полоцкая, Ирина Владимировна, 1984 год

1. Материалы ХШ съезда КПСС. Изд. политической литературы, М.,1982.

2. Продовольственная программа СССР на период до 1990 года.

3. Материалы Пленума ЦК КПСС , "Правда", 1982, май.

4. Абдумаликов А.Х., Еременко В.В. Глутаминаза и язоглутаминаза Saccharomyces cereviseae Meyen КМУ 381.- <

5. Биохимия,1967,32, В 3, с.363.

6. Абдумаликов А.Х., Николаев А.Я. Разделение и очистка глутаминазы, аспарагиназы и дезамидазы изоглутамина дрожжей.- Биохимия, 1967, 32, )& 3, с.859.

7. Аптекарь Л.С. Содержание свободного глутамина и активностьглутаминазы в слизистой оболочке желудка у больных с предрпухолевыми заболеваниями и раком желудка.-Бюл. эксперим.биол. и мед., 1976 , 82, $ 9, с.ПОб.

8. Аптекарь Л.С., Зиневич А.К. Глутамин и активность ферментовего обмена в крови больных раком желудка.- Пробл,зло-качеств. роста, М., 1977, с.12.

9. Ауэршн Т.Л., Уралец Т.И. Исследование характера действияэффекторов после выдерживания глютаминсинтетазы кормовых дрожжей при комнатной температуре.- Прикл. биохим. и микробиол., 1978, 14, )£ 3, с.373.

10. Ахалкаци Р*Т., Алексидзе Н.Г, , Гамбапшдзе М.Г. Долидзе Н.И.

11. Кинетические свойства,глутаминазы клеток тлии коры головного мозга кролика.-Изв. АН Груз.ССР. сер.биол., 1978, 4, № I, с.76.

12. Ашмарин И .П., Мшьберг A.A., Садиков Н.В. .Сытинский И. А*

13. Химия белка.1968, часть I, Изд. Л1У.-97- ■ . . .

14. Бадалян ЛЛ. ,Бунятян Г.Х., Оганесян B.C. Действие глутаминовой кислоты на взаимоотношения эффекторов различных активаторов глутаминазы мозга.- Учеги биакими-аи арцер. Вопр.биохимии .Ереван, АН Арм.ССР, 1975, 10, С.40.

15. Берегов Т.Т. .Хисамов Г.З., Евсеев Л.П. ,3анин В.А. Особенности синтеза аспарагиназы и глутаминазы у Рз.ъоге-opoiis 526 Бюл. эксперим.биол. и мед., 1973,76, №10, с.54.

16. Броновидкая З.С., Горетов В.П. Высаливание белков сернокислым ашонием при низких температурах. Таблица и монограмма.- Прякл. биохим. д микробиол., 1967, 3, с. 707.

17. Гинодман Л.Х. Хроматография белков на ионообменниках ифракционирование смесей, содержащих белки на колонках с сефадексом. Современные методы в биохимии. Под ред. В.Н.Ореховича, Изд. "Медицина", M., 1964, I , с.37.

18. Детерман Г. Хель-хроматография. Изд. "Мир", M., .J970. 15« Евсеев ЛЛ., Николаев АЛ., Еременко Б.В.,Мардашев O.P.

19. Индуцированный синтез аспарагиназы и глутаминазы у Pseudomonas sp. БИОХИМИЯ, 1967, 32, гё 3, с. 873. . . .

20. Куков A.B., Еременко В.В. Применение непрерывного культивирования для повышения аспарагиназной и глутами-назной активности У Paeudomönaa fluoreacens АГ-69. Ерикл. биохим. и микробиол., 1974, 10, № 5, с.708.

21. Зиневич А.К., Аптекарь Л.С. Содержание глутамина и активность глутаминаз при предопухолевых заболеваниях желудка,- Онкология, Респуб. межвед. сб. ,1977, №9, с.59.

22. Коваленко Н.А., Козлов Е.А., Герасимова А.В. Изменение активности глутаминазы ci.weichii sr-12 тод влиянием некоторых аналогов глутамина и реактивов на суль-фгидрильные группы.- Биохим. ,1970 ,35, -В 4,с.670.

23. Коваленко Н.А., Козлов Е.А., Герасимова А.В., Мардашев С.Р.

24. Кинетические свойства глутаминазы ci.weichii sr-12 и влияние некоторых ионов на ее активность.-Биохимия , 1971, 36, № 6, с.1198.

25. Козлов Е.А., Коваленко Н.А., Глутаминазы.- В кн.: Успехибиологич.химии, М.: Наука, 1972, 13, с.49.

26. Козлов Е.А., Коваленко Н.А., Мардашев е«Р* очистка ж некоторые свойства глутаминазы Clostridium welchii. -Биохимия, 1972, 37, В I, с.56.

27. Кочетов HP.А. Практическое руководство по энзимологни.- Изд. "Высшая школа", М., 1980, с.271.

28. Кретович B.I., Обмен азота в растениях. Изд."Наука", М.,1972.

29. Кретович B.JT. Биохимия растений. Изд. "Высшая школа", М.,1.60.

30. Кретович В.Л., Серебренников В.М.,Ауэрман Т.Л. РегуляцияаКТИВНОСТИ ГЛутаМИНСИНТетаЗЫ КОРМОВЫХ ДрОЖЖеЙ Candida tropicalis конечными продуктами обмена глута-мина.- Биохимия, 1976, 41, № I, с.167.

31. Кретович В.Л., Сидельникова Л.И., Казакова О.В.,Вейнова М.К.,

32. Карякина Т.И. Глутаминазная и аспарагиназная активноеть бактероидов пы^выхт lupinl • -Прикл, бшдаш. и микробиол., 1981, 17, В 6, с.:821.

33. Лебедева З.И. , Березов Т.Т., Орехович В.Н. Глутамин(аспарагян)аза ИЗ Pseudomonas aurantica .-БИОХИМИЯ, 1981, 46, Ä I, С.85.

34. Лебедева З.И., Кабанова Е.А. .Зеленева Р.Н., Березов Т.Т.

35. Выделение и очистка глутаминазы-аспарагиназы из Pseudomonas aurantica ВКМ-548.-ЭНЗИМ0Л. опухолей, М., 1979, о,68.

36. Львов Н.П. «Любимов В.И. Микродиффузионный метод определенияаммиака.- Методы совр. биохимии, М», 1975, с.58.

37. Любимов В.И., Львов Н.П. Улучшенная, камера для разрешениямикроорганизмов.-Прикл. биохим. и микробиол., 1968, 4, 5, с.592.

38. Майстер А. Биохимия аминокислот, Изд. Mag, М., 1961.

39. Мардашев С.Р., Коваленко H.A. Влияние некоторых аналоговглютамина на активность глютаминазы почек крыс» Clostridium welchii SR-12 И Mycobaoterum sp.n.-Вопр. мед.химии, 1968, 14, с.319.

40. Мардашев С.Р., Соковкина А.М. ' Синтез гидроксамовых кислотиз дикарбоновых аминокислот и их амидов у saccharo-myces oereviseae .Микробиология, 1965 , 34, С.47.

41. Николаев А.Я., Евсеев Л.П., Ткшьпанова Э.С., Абдумаликов А.Х.

42. Изоферментн аспарагиназы У Pseudomonas зр. Биохимия,1969, 34, с.352.

43. Николаев А.Я.,Коваленко H.A., Геворкян Ж.С., Оганесян A.C.

44. Влияние сывороточного фактора на активность глута-миназы-аспарагиназы ИЗ Pseudomonas fluorescens AF.

45. Айастани генсапанакан антес.- Еиол.ж.1рмения,1977, 30, № 8, с.94.-10036. Николаев А.Я., Соколов H.H. ,Марцашев С.Р. О природе аспарагшавной: и глутамина зной активности фракций АГ у

46. Pseudomonas fluorescens AT.- БИОХИМИЯ, I971, 36,1. Я 4, С.834.

47. Оганесян B.C., Бунятян Г.Х., Микиртумова К.С.,Айрапетян Р.Л.

48. Влияние тиоловнх реагентов на активность глутаминазы мозга.- В сб. Учеги биакимиаи. арцер, Вопр. биохимии, мозга. Ереван, АН Арм.ССР, 1974, 9, с.5.

49. Оганесян B.C., Бадалян Л.А., Саакян Ж.Дж.,Бунятян Г.Х.

50. Некоторые отличительные свойства глутаминазы митоховд-риальной фракции мозга и почек.- Учеги биакимиаи арцер. Вопросы биохимии мозга, Ереван, 1980, 14, с.81.

51. Оганесян B.C., Микиртумова К.С., Бунятян Г.Х. Влияние тироидных гормонов, их аналогов и иодсодержащих соединений на активность глутаминазы мозга.- Учеги биакимиаи арцер, Вопр. биохимии мозга, Ереван, 1977, 12, с.5.

52. ДетруньН.М., Мигаль Л.А.Колориметрический метод определения активности трех типов глутаминаз в тканях я биологических жидкостях,-Лаб. дело, 1975, 69 с.352,

53. Прянишников Д.Н. Азот в жизни растений и в земледелии СССР,м., 194-5. .

54. Ткач В.М. Действие ^ -облучения в относительно малойдозе на активность глутаминазы в субклеточных фракциях клеток мозга и печени,- Актуальн, проб.онколог. д мед.радиол, т.З, Минск, 1973, с.385,

55. Чигалейчик А.Г.,Виноградов Б. Д.,Орлова B.C. , Рылкин С.С.

56. Биосинтез ь -глутаманазы-аспарагиназы культурой Pseodomonas boreopolis В ЗаВИСИМОСТИ ОТ УСЛОВИЙ-Id

57. Baverel Gabriel ,Lund Patricia. The role of bicarbonate inthe mechanism of regulation of glutamine in mammals.-Biochem.J.,1979, 184, H 3, p. 599.

58. Beallg B., Weil-Malherbe H. Riboflavin sS -phosphate:apotant activator of brain glutaminase.- J.Neurochem., 1970, N 71 p.1101.

59. Benjamin A.M. Control of glutaminase activity in rat braincortex in vitro: influence of glutamate,phosphate, ammonium, calcium and hydrogen ions.- Brain . Res., 1981, 208, N 2, p. 363.

60. Benzinger T.H., Kitzinger C., Hems R., Barton R. Pree-energy changes of the glutaminase reaction and the hydrolysis of the terminal pyrophosphate bond of adenosine triphosphate.- Biochem.J. ,1959, 71, p. 400.

61. Blazek R., Benbough J. Improvement in the persistence ofmicrobial asparaginase and glutaminase in the circulationof the rat by chemical modifications.- Biochim. et Biophys.acta, 1981, 677, N 2, p. 220.

62. Bradford H.F., Ward H.K. Glutamine .-> as the substrate forthe isolated nerve endings ammonium ions inhibition.-Biochem.Soc.Trans., 1975, 3$ N 6, p. 1223.

63. Campbell H.A., Mushburn L.T.- L-asparaginase EC-2 from

64. Escherichia coli. Some substrate specificity characteristics.- Biochem.,1969, 8, p. 5768.

65. Carter Ch.E.,Greenstein J.P. Acceleration of enzymatic desamidation of glutamine by several inorganic anions.-J.Nat.Cancer Inst., 194-7, 7» P« 4-35.

66. Chiu J.P., Bocker B.A. Glutaminase of cow brain: partialpurification and mechanism of action.- Arch.Biochem. and Biophys.,1979» 196, U 2, p. 493.

67. Cook W.R., Hoffman J.H., Bernlohr R.W. Occurence of inducible glutaminase in Bacillus licheniformis.- J.Bacteriol., 1981, 148, N 1, p. 365.

68. Curthoys N.P., Kuhlenschmidt T., Godfrey S.S, On the regulation of arnmoniagenesis in kidneys. Purification and characteristics of phosphate-bound glutaminase from rat kidney.- Arch.Biochem. and Biophys., 1976, 174, N 1, p. 82.

69. Dass P.D., Welbourne T.C. Adaptation of J/- glutamyltransferase to acidosis.- Life Sci., 1980, 26, N 23, p.1985.-10360. Davis B.J. Disc electrophoresis. II.Method and application to human serum proteins.- Ann.N.-Y., Acad.Sci., 1964, 121, p. 404.

70. Desser H., Hocker P. The activity of L-glutaminase inlymphocytes of the patients with chronic lympholeu-kemia.- Clin.chim.acta, 1974, 53, If 2, p. 191.

71. Domnas A., Gatino E.C. The behavior of amidohydrolasesand 1-glutamate in synchronited populations of Blast* tocladiella emersonii.- Phytochem., 1965, 4,p. 273.

72. Ehrenfeld E., Marble S.J., Meister A. Enzymatic synthesisof jf- glutamylhydroxamic acid from glutamic acid andhydroxylamine.- J.Biol.Chem., 1963, 238, p. 3711.

73. El-Asmar P.A., Greenberg D.M. Studies on the mechanism ofinhibition of tumor growth by the enzyme glutaminase.-Cancer Res., 1966, 26, p. 116.

74. Ererra M., Greenstein J.P. Desamidation of glutamine and asparagine in normal and neoplastic hepatic tissues.-J.Hat.Cancer Inst., 1947, 7, p. I 285.

75. Errera M., Greenstein J.P. Effects of acidity and of heating on the capacity of ratliver extracts to desamida-te glutamine and asparagine.- J.Nat.Cancer Inst., 1947, 7, p. 437.

76. Pyankl&Q C.,Goldstein L. Glutaminase in kidneys of newborn and adult rats.- Enzyme, 1975, 19, N 4, p. 212.

77. Halpern Y.S., Grossowicz U. Hydrolysis of amides by extracts from Mycobacteria.- Biochem. J., 1957, 65, p.716.

78. Hartman S.C. Glutaminase of Escherichia coli.- I.Purificatioh and general catalytic properties.- J.Biol. Chem., 19Ö8, 243, N 5, p. 853.

79. Hartman S.O. Glutaminase of Escherchia coli .III.Studieson the reaction mechanism.- J.Biol.Chem., 1968, 243, IT 5, p. 870.

80. Hartman S.O., Glutaminase A of Escherichia coli. Reactions with the substrate analogue, 6- diazo-5-oxonorlencine.- J.Biol.Chem., 1977, 248, N 24, p. 8506.

81. Hartman S.O., McGrath T.P. Glutaminase A from E.coli

82. Reactions with substrate analogue-6-di$zo-5-oxonor-lencine.- J.Biol.Chem., 1973, 248, N 24, p. 8506.

83. Hartman S.O., Stochaj E.M. Glutaminase A from E.coli.

84. Subcell structure and cooperative behaviour.-J.Biol. Chem., 1973, 248, N 24, p. 8511.

85. Holcenberg J.S.»Borella L.D.,Camitta B.M. ,Ring B.J. Pharmacological and toxine action of succinylated preparation of glutaminase-asparaginase from on a man.-Biochem., ^979, 39, N 8, p. 3145.

86. Holcenberg J.S.,Lowell E., Joseph. R. Amino acid sequence ofthe diazooxonorleucine binding site of Acinetobacter and Pseudomonas 7A glutaminase-asparaginase enzymes.-Biochem. 1978, 17, N 3, p.411.

87. Holcenberg J.S.,Roberts J. ,Dolowy W.O. Glutaminases as antitumor agents.- Enzymes of glutamine Metabol. Newark, London, 1973, p. 277.

88. Holcenberg J.S,,teller D.C.,Roberts J. Sedimentations ofactive enzymes in enzymatic antitumor preparations of asparaginase and glutaminaseArch.Biochem. and Biophys. 1974, 161, N 1, p.306.

89. Holcenberg J.S.,Teller D.C.,Roberts J, Physical propertiesof antitumor glutaminase-asparaginase from Pseudomonas 7 A.-J.Biol.Chem., 1976, 251, N 17, p. 5375.

90. Holder J., Richterich E. Untersuchung verschiedener anderrenalen Säureausscheidung beteiligter Fermente,-Helv.med.acta, 1961, 28, p. 579.

91. Huang-Kun-Yen. Metabolie activity of the trench fever Rickettsia, Rickettsia quintana.- J.Bacteriol.,1967, 93,p.853*

92. Huang-Teh-Zen,Knox W. Comparative study of isoenzymes ofglutaminase win rat tissues.-Enzyme,1976,21 ,N5,p.408.-10686. Hughes D.E. The effect of surface-active agents on bacterialglutamic decarboxylase and glutaminase.- Biochem.J.,1950,46, p. > 231.

93. Hughes D.E., Williamson D.H. Some properties of the glutaminase of Clostridium welchii.- Biochem.J., 1952, 51, p.45.

94. Joseph S.K. ,McGivan J.D. The effect of chloride and ammonium bicarbonate on the glutaminase activity in mitochondria of liver.- Biochem.J., ;„ 1978, 176, N 3, p. 837

95. Joseph .\S.K., Meijer A.J. The inhibitory effects of sulphydrylreagents on the transport and hydrolysis of glutamine in rat-liver mitochondria.- Eur.J.Biochem., 1981, 119, N 3, p. 523.

96. Kalra J., Brosnan J.T. Localization of glutaminase in ratliver.- PEBS Lett., 1973, 37, IT 2, p. 325.

97. Kalra J., Brosnan J.T. Subcell localization of glutaminaseisoenzymes in the cortex layer of rat kidney.- J.Biol.Chem., 1974, 249, N 10, p. 3255.

98. Katsumata H., Katsumata R. , Abe Tsutomu. Purification andphysical-chemical properties of L-glutaminase from Pseudomonas.- Biochim. et Biophys.acta, 1972, ' 289, IT 2, p. 405.

99. Katunuma IT., Katsunuma T., Tomino V., Matsuda Y. Regulationof glutaminase activity and differentiation of the enzyme isozyme during development.- Adv.Enzyme Regulation ,1968, 6, p. 227.

100. Kim J.H., Boyse E.A.,01d L.J.,Campebll H.A. Inhibition of

101. HeLa cell cultures of preparations of Escherichia coli L-asparaginase.- Biochim,et biophys.acta, 1968,158,p.476.

102. Kisfaludy S. Ammonia intoxication and liver insufficiencyof rats. The activity of glutamatedegidrogenase and gluttaminase of the brain.- Acta med.Acad.Sci. Hung., 1977, 32, U 3-4, p. 279.

103. Kishino Y., Wegmann R. Enzymatic histochemical metabolismof ammonia and aminoacids in experimentally injured rat liver.- Ann.histochim., 1974, 19, N 3, p. 207.

104. Klingman J.D., Handler P.J. Partial purification and properties of renal glutaminase.- Biol.Chem., 1958, 232, p. 369.

105. Kovacevic ~Z. Distribution of glutaminase isoenzymes in kidney cells.- Biochim. et biophys. acta, 1974, 334, IT 1, p. 199.

106. Kovacevic Z. Properties and innercell localization of glutaminase in the cells of ascites Ehrlich tumor.-Cancer Res.,1974, 34, BT 12, p. 3403.

107. Kovacevic Z., Bajin K., Pavlovic M. Volume changes of ratkidney mitochondria, transport of glutamine and its inhibition by mersalyl»- Int.J.Biochem., 1980, 12, H 1-2, p. 139.

108. Kovacevic Z., Breberina M., Pavlovic M., Bajin K. Molecularform and kinetic properties of phosphate-dependent glutaminase in mitochondrias taken from kidneys of normal and acidosis rats.- Int.J.Biochem., 1979, 567 1,p.2l6.

109. Arch.Biochem. and Biophys., 1975, 167, N 2, p. 519.

110. Kvamme E., Olsen E. Evidence of two kinds of phosphate-activated glutaminase of mammons with different regulating properties.- PEBS Lett., 1979, Ю7, M" 1, p. 33.

111. Kvamme E., Olsen B.E., Regulation by substrate (activity)of phosphate -activated glutaminase from nerve tissue. Brain Res., 1980, 181, И 1, p. 228.

112. Kvamme E., Torgner I.A. The effect of acetyl on the phosphate-activated glutaminase of pig kidney and brain.-•»coferment A.-Biochem. J., 1974, 137, N3, p. 325.

113. Kvamme E., Tviet В., Svenneby G. Glutaminase from pig kidney, an allosteric protein.- Biochem.and Biophys. Res. Communs, 1965, 20, p. 566.

114. Lang S.,Beitr. Chem. Physiol, and Pathol. ,1904, 5, p. 321.цит. по Козлов E. А. »Коваленко H.A. Глутаминазы.- В кн.: Успехи биол.химии.М.:Наука,1972,13, с.49.

115. Lerner Е.М., Mueller J.H. The г I * role of glutamine in theglucose metabolism of Clostridium tetani.- .J.Biol. Chem., 1949, 181, p. 43.

116. Lois D., Brear D.R., Wingard P., Hawkins J., Kitto G.B.

117. Purification and properties of L-glutaminase -L-aspara-ginase from Pseudomonas acidovorans.- J.Bacteriol., 1977, 129, N 3, p. 1379.

118. Lowry O.H., IRosenbroufeh N.T., Parr A.L., Ranadall R.J.

119. Mcllwain H. The metabolism and glutaraine functioning ofvitamin-like compounds .Ammonia formation from gluta-mine by haemolytic streptococci, its reciprocal connection with glucolysis.- Biochem.J., 1946, 40, p. 67.

120. Mcllwan H. The metabolism and functioning of vitamin-likecompounds.- 3. Products of the decomposition of gluta-mine during streptococcal glycolysis.- Biochem.J., 1946, 40, p. 460.

121. Meister A. Amino group transfer. Volume G. The enzymes.

122. Edited by Boyer P.D. ,bardy H., Merback K. Acad.Press, New York, 1962.

123. Meister A., Levintow L., Greenfield R.E., Abehdschein P.A.

124. Hydrolysis and transfer -reactions catalyzed by u) -amidase preparations. J.Biol.Chem., 1955, 215, p.441.

125. Miller H.K., ' Balis M.E. Glutaminase activity of L-asparagine amido-hydrolase.- Biochem.Pharmacol., 1969, 18, p. 2225.

126. Mizunuma T. Agric.and Biol.Chem.(Tokyo), 1965, 29, p.491.цит. по Козлов E.A. »Коваленко H.A. Глутаминазы.-.V В кн: Успехи бйол.зхимии, М.: Наука, 1972, 13, с.49.

127. Morehouse R.F., Curthoys 3J.P. Properties of rat renal phosphate-dependent glutaminase coupled to Sepharose.Evidence that dimerization is essential for activation.-Biochem.J., 1981, 193, 3ST 3, p. 709.-пек

128. Nakamura M.t Goldstein L. Occurence of glutaminase in Endamoeba- histolytica Nature, 1957, 179» p.11

129. Nimmo G.A., Tipton K.F. Distribution of soluble and membrane-bound glutaminase forms from pig brain-.- J.Neurochem. 1979, 33, N 5, p. Ю83.

130. Nimmo G.A., Tipton E.P. Purification of soluble glutaminaseifrom pig brain.- Biochem.Pharmacol., 1980, ;:29, N 3, p.359*i

131. Nimmo G.A., Tipton K.F. Kinetic comparisons between soluble and membrane-bound glutaminase preparations from pig brain. Eur.J.Biochem., 1981, 117, N1, p. 57.

132. Ohshima M,, Yamamoto Т., Soda K. Further characteristic ofglutaminase isoenzymes from Ps aeruginosa.- Agr. and

133. Biol.Chem., 1976, 40, N11, p. 2251.

134. Oki Т., Shirai M., Ohshima M., Yamamoto Т., Soda K. Antitumor activity of bacterial leucyne-dehydrogenases andglutaminase A.- FEBS Lett., 1973, 33, N 3, p. 286.

135. Ornstein L. Disc electrophoresis. I. Background and theory.

136. Ann .N.Y.Acad. Sci., 1964, 121, p. 321.

137. Pinkus L.M., Windmueller H.G. Phosphate-dependent glutaminase of thin bowels. Localization and the role in gluta-mine metabolism in bowels.- Arch.Biochem. and Biophys., 1977, 182, N 2, p. 506.

138. Prusiner S. On the regulation of glutaminase in E.coli,metabolite control,- Biochem, and Biophys.Res., Communs. 1971, 45, N 6, p. 1474.

139. Prusiner S, Regulation of activity of glutaminase E.coli.

140. J.Bacteriol. 1975, 125, N 3, p. 992.

141. Prusiner S., Stadtman E.R. On the regulation of glutaminase

142. Ramadan M.E. ,E1-Asmar P., Greenberg D.M. Purification andproperties of glutaminase and asparaginase from Pseudomonas. I. Purification and physico-chemical propertie s.-Arch.Biochem. and Biophys., 1964, 108, p. 143.

143. Ramadan M.E., El-Asmar P., Greenberg D.M. Purification andproperties of glutaminase and asparaginase from Pseudomonas. II kinetics, activation and inhibition.-Arch.Biochem. and Biophys. , 1964, 108, p. 150.

144. Schmid P.A., Roberts J. Antitumor and toxine effects of glutaminase- asparaginase from Pseudomonas.- Cancer Chemother.Repts, 1974, Part 1, 58, IT 6, p. 829.

145. Singh A., Ahuja S.P.,Bhatia I.S. Characterization of enzymesof ammonia metabolism in protozoa from rumen of Buffalo bulls.- Zbl.Veterinarmed., 1980, A 27, N 5, p. 364.

146. Smithies 0. Zone electrophoresis in starch gels: group variations in the serum proteins of normal human adults.-Biochem.J., 1955, 61, N 4, p. 629.

147. Smithies 0. Zone electrophoresis in starch gels and itsapplication to studies of serum proteins.- Advanc. Protein .Chem. , 1959, 14, p. 65.

148. Soda K., Ohshima M., Yamamoto T. Purification and propertiesof glutaminase isoenzymes from Pseudomonas aeruginosa.-Biochem.and Biophys.Res.Communs., 1972, 46, N 3,p. 1278.

149. Soda K. , Uchiyama K., Ogata K. Metabolism of L-theanine,

150. D-theanine and the related compounds in bacteria. Purification and properties of the Enzyme hydrolyzing L-theanine, D-theanine and the related compounds.-Agric. and Bio.Chem.,(Tokyo),1966, 30,p.547.-113147. Stadtman E.R. Enzymes of Glutamine metabolism

151. Stadtman E.R. eds.), Academic Press N.T., 1975» pp.1-6.

152. Strzelecki T., Schoolwerth A.C. dC-ketoglutarate modulation of glutamine metabolism by rat renal mitochondria.-Biochem.and Biophys.ReS.Commun., 1981, 102, U 2, 7. . p. 588.

153. Svenneby G. Activation of pig brain glutaminase.-J.Neurochem.1970, 18, N 11, p. 2201.

154. Svenneby G. Glutaminase from pig renal cortex. -J.Biol.Chem.1971, 245, N 8, p. 1878. 151.Swierczynski J.,Makarewicz W. Glutaminase activity inmitochondrias of skeleton muscle of rats.- Experientia, 1978, 34, N 2, p. 165.

155. Y/ade H.E. Synthesis and functions of microbial asparaginasesand glutaminases. Section 4.4 Microorganisms and nitrogen sources. Edited by Payne J.W. John Wiley & sons Ltd. 1980.

156. Warrell R.P. ,Chou T.C., Gordon C., Tan C., Roberts J.,

157. Sternberg S.S., Philips P.S.,Young C.W.Phase I evaluation of succinylated Acinetobacter glutaminase- asparaginase in adults.- Cancer Res., 1980, N 12, p.4546.

158. Warrell R.P., Arlin Z.A., Gee T.S., Chou Ting-Chao ,Roberts J. Young C.W. Clinical evaluation of succinylated Acinetobacter glutaminase-asparaginase in adult leukemia.-Cancer

159. Treat Repts. , 1982, 66, IT 7, p.1479.

160. We&l-Malherbe H. Modulators of glutaminase activity.- J.

161. Neurocheen, 1972, 19, N 10, p. 2257.• -114156. Welbourne T.C., I^ancocur D. The effect of aldosteron on ammonia formation in kidneys.- Amer. J.Physiol., 1977, 233, N 1, p. E-56.

162. Welbourne T.C. Subcell localization and ammonia formationin case of acidosis.- Proc.Soc.Exp.Biol.and Med.,1978, 159, N 2, p. 294.

163. Wlodawar A., Hodgson K.O.,Bensch K. Research of two crystalline forms of L-glutaminase-aeparaginase from Acine-tobacter glutaminasificans. -J.Mol.Biol.,1975, 99, N 2, p. 295.

164. Yamamoto S., Hirooka H. Partial purification and glutaminase properties from Aspergillus sojae.- XaKKO KO^aKy Ä3accH, J.Ferment.Technol., 1974, 52, 18, p.570.