Глутаминсинтетаза мозга человека в норме и при шизофрении тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, кандидат биологических наук Терешкина, Елена Борисовна

• Терешкина, Елена Борисовна
• кандидат биологических наук
• 2000

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Терешкина, Елена Борисовна

Список использованных сокращений.

I. ВВЕДЕНИЕ.

И. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

Метаболическая связь нейронов и астроцитов.

Автономный метаболизм глутамата в мозге. Астроциты синтезируют углеродный скелет глутамата, используемый нейронами.

Поглощение глиальными клетками глутамата, высвобожденного нейронами.

Глутамат/глутаминовый цикл с участием нейронов и глиальных клеток.

Пути превращений глутамата в мозге.

Синтез глутамата в нейронах цитозолъно-митохондриальный «шаттл»).

Другие пути биосинтеза глутамата.

Утилизация глутамата в астроцитах.

Глутаминсинтетаза (ГС).

Биохимические свойства и сведения о структуре ГС.

Функции ГС в нервной системе.

Выводы о функциональной роли ГС на основе результатов по ингибированию ГС в экспериментах на животных.

Защитная функция ГС.

Множественность генов ГС человека, локализация известных генов и псевдогенов ГС.

Регуляция экспрессии ГС млекопитающих в ходе дифференцировки и развития нервной ткани.

Регуляция экспрессии гена ГС гормонами на уровне транскрипции.

Регуляция экспрессии гена ГС вторичными мессенджерами.

Регуляция уровня ГС возбуждающими аминокислотами.

Цитоспецифическая экспрессия гена ГС и ее контроль в ходе развития.

Регуляция экспрессии ГС в зрелом организме и тканях (модели).

Изменения уровня ГС как реакция на стресс.

Регуляция активности ГС на посттранскрипционном уровне. Пострансляционные модификации ГС.

ГС при патологических процессах в ЦНС.

Экспериментальные модели.

ГС и изменения метаболизма глутамата при патологиях нервной системы человека.

ГС и цикл Глу/Глн при болезни Альцгеймера.

Инактивация и снижение иммунореактивности ГС при окислительных модификациях.

Изменение клеточной локализации ГС при болезни

Алъцгеймера - иммуноцитохимические данные.

Глутаматергическая система при шизофрении.

Патологические изменения астроцигов при шизофрении.

Гипоглутаматергическая гипотеза шизофрении.

III. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

Материалы.

Методы.

Получение экстрактов белков мозга.

Определение ферментативной активности ГС.

Определение концентрации белка.

Определение частичной аминокислотной последовательности ГС и ГСПБ.

Хранение очищенных ферментов.

Ионнообменная хроматография.

Гель-фильтрация.

Аффинная хроматография.

Электрофорез в ДС-Na-ÜAAT.

Двумерный электрофорез.

Иммуноферментный метод анализа.

Вестерн-иммуноблоттинг с хемилюминесцентным усилением сигнала.

Статистическая оценка данных.

Получение антисывороток и их тестирование.

IV. РЕЗУЛЬТАТЫ.

Выделение глутаминсинтетазы и белка, подобного глутаминсинтетазе, из мозга человека.

Влияние различных факторов на ферментативную активность ГС и ГСПБ.

Определение молекулярной массы ГС и ГСПБ, молекулярной массы и ИЭТ их субъединиц.

Определение частичной аминокислотной последовательности

ГС и ГСПБ.

Получение поликлональных антител к ГС и ГСПБ.

Сравнительное изучение ферментативной активности и иммунореактивности ГС и ГСПБ в различных областях мозга в норме и при шизофрении.

V. ОБСУЖДЕНИЕ.

VI. ВЫВОДЫ.