Индукция гибели опухолевых клеток человека новой невирусной системой на основе дикатионных липидов, гена тимидинкиназы HVS-tk и ганцикловира тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.16, кандидат медицинских наук Московцев, Алексей Александрович

• Московцев, Алексей Александрович
• кандидат медицинских наук
• 2007

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Московцев, Алексей Александрович

ВВЕДЕНИЕ

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

ГЛАВА 1- ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ И

1,Молекулярная биотехнология н генетическая инженерия в практической медицине. Клинические протоколы генной терапии

2. Методы доставки генетического материала в клетки in vitro и ш 17ю, невнрусиые векторные системы.

3. Индукция гибели клеток. Механизмы апоптоэа, ответ на повреждение ДНК.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ, ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ

ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1» Обмкты исслслонапня

2,2Л, Культура клеток MCF

2.2.2, Культура клеток

2.2.3. Культура клеток Jurkat VST

2.2» Материалы исследования

2,2.1 .Плазмндные ДНК; репортерные пДНК pCMVSPORT-b

GAL, pEGFP-N l; терапевтическая пДНК pUT

2.2.2. Катионные дкмеры ДЭГАЗ, ДЭГА7, ДЭГА11«ДЭГА

2.2.3. Лнпофектнм (DOTMA-DOPE)

2.2.4. Антибиотики для селекции, ганцнкловир.

2.2.5, Флуоресцентные зонды.

23. Методы исследования

2.3.1 Культивировал не клеток.

2.3.2. Выделение н наращивание в препаративных колнчеегвах плазмидкых ДНК: репортерные pCMV-SPORT-b-GAL, pEGFP

N1 и терапевтическая pUT649, электрофорез ДНК

2-3-3. Химический синтез катионных бнеамфифнлов ДЭГАЗ,

ДЭГА7, ДЭГА 11, ДЭГА

2,3.4. Анализ конформацнн молекул катионных димеров.

2,3,5. Исследование физико-химических характеристик ДЭГА: критический параметр упаковки, критическая концешрацня мнцеллообразовання, температура фазового перехода,

2.3.6. Получение лнпосом на основе катионных димеров

ДЭГАЗ, ДЭГА7. ДЭГА 1 ]. ДЭГА22, Образование липоплексов.

Тропностъ ДЭГА-вези кул,

2.3.7. Определение распределения частиц дисперсных систем

ДЭГ А и липоплексов по размерам с помощью корреляционной спектроскопии светорассеяния

2.3.8 Атомная силовая микроскопия лнпосом и липоплексов,

2.3.9. Определение цитотоксичноети ли носами ых препаратов катанных дилеров в культурах клеток \iCF-7,293, .(игка! с помощью М7Т-теста

2.3-Ю. Оценка эффективности транефекцин липоплексами

ДЗГА с применением цветной реакции хОа! и световой микроскопии, флуоресцентной микроскопии, проточной цнтомстрин

2.3.11, Индукция клеточной гибели ганцикловнром. Селекция трансфеинрованных клеток с помощью антибиотика яеоап,

23.12 Подтверждение экспрессии клетками тнмидинкнназы вируса простого герпеса с помощью К Г-РСК

2-3-13. Детекция деполяризации митохондриапьной мембраны с помощью красителя КМ и конфокальной сканирующей микроскопии.

2.3.14. Определение активации фактора транскрипции МР-кВ.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ.

3.1 Химическая структура катионных бисамфифилов ДЭГА

3,2 Кон формации молекул катнонных димеров

3.3 Физико-химические характеристики ДЭГА; мембранообразующие свойства, критические концентрации мннеллообраювання. температуры фанового перехода.

3,4 Размеры везикул дисперсных систем ДЭГА, Атомная силовая микроскопия везикул ДЭГА. ООТМА-ООРЕ и плазм нлной ДНК

3,5 Размеры и морфология липоплексов.

3.6 Цнтотоксичность катионных димеров ДЭГА

3.7 Троиность везикул ДЭГА к мембранам клеток МСР7.

3.8 Эффективность транефекцин липоплексами на основе

ДЭГА культур клеток.

3,9 Цктотокснческое действие эффекторного комплекса

ДЭГАЗ-рЦТ649/С.СУ

3.10 Селекция грансфсинрованных рЦТ649 клеток

3.11 Деполяризация мнтохондрнальной мембраны при действии системы Н5У-1к/ОСУ.

3.12 Активация транскрипционного фактора №-кВ (р65) в отпет на действие системы

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Индукция гибели опухолевых клеток человека новой невирусной системой на основе дикатионных липидов, гена тимидинкиназы HVS-tk и ганцикловира»

Актуальность исследования

Способность к саморегуляции числа клеток - основополагающее свойство многоклеточного организма. Эффективным механизмом, обеспечивающим поддержание гомеостаза зрелых тканей и физиологический контроль роста при развитии систем в онтогенезе» является программируемая клеточная гибель» или алоптоз (Fischer. Schulze-OsthofF, 2005). Дизрегулнция аполтоза существенный элемент развития ряда патологических синдромов. Так, с одной стороны. острые коронарная недостаточность, цереброваекулярные заболевания, заболевания печени, почек ассоциированы с некротическими и нскробнотическнми процессами, массивно протекающими в функционально активных паренхиматозных структурах, в то время как нейродегенеративные синдромы являются следствием медленно прогрессирующей нейрональиой гибели, С другой стороны, уменьшение способности клеток к апоптшу и последующее их накопление может спровоцировать развитие онкологических и аутоиммунных заболеваний.

Для современной патофизиологии апоптоз, характеризуемый как запрограммированная последовательность молекулярных событий, ведущих клетку к гибели, представляет собой еще и концептуальное понятие, определяющее один из вариантов ответа клеткн на повреждающее воздействие. Апоптоз-залрограммнрованный акт активного самоуничтожения клеткн (Луценко В.К., 2004) - является элементом типовых патологических процессов, отличается детерминированным характером. «Повреждение играет роль причины и триггерного механизма развития патологического процесса, который осуществляется собственными, вторично возникающими, присущими самим измененным структурам, эндогенными механизмами» (Крыжаиовский Г.Н., 1996). Исследование этих эндогенных механизмов является для молекулярной патофизиологии актуальной задачей, а возможность модулировать индукцию алоптоза в тканях и управлять механизмом гибели клетки предстаапяется весьма привлекательной целью. Это особенно важно для терапнн онкологических заболеваний, которые по уровню социальной значимости стоит на одном m первых мест а мире- Можно скачать, что большинство методик химиотерапии опухолей основано на использовании механизма запрограммированной клеточной гибели (Waxman, Scbwaitz, 2003} путем активации различных триггеров, запускающих соответствующие природе триггеров и особенностям клетки-мишени каскады трансакции и амплификации сигнала Воздействие хнмнотерапевтнческого агента на клетки являете и комплексным, и оно может оказаться недостаточно эффективным по отношению к малигнизнрованным клеткам по ряду причин. Среди главных можно перечислить две: недостаточность сигнала для индукции на уровне клеток-мншеней и днзрегуляция рсцепторных и эффиаорных каскадов апоптоза, Клональная селекция при опухолевом росте может усилить эти два фактора. Недостаточность индукции может быть обусловлена как внешними причинами, например, отсутствием необходимой специфичности действия агента {невысокая избирательность противоопухолевого действия), что приводит к значительной общей токсичности химиотерапии, так и внутренними, на уровне клетки, например, лекарственной устойчивостью. Развивающиеся в последние годы методы генной терапии (Andersen. 1992), несмотря на очевидную сложность и проблемы роста этого направления, формируют новые подходы к терапии онкологических заболеваний (Баранов, 1999; Патрушев, 2000), Так, генно-инженерные системы активации нетоксичных соединений, к которым принадлежит исследуемая в работе гнмидннкиназа вируса простого герпеса ■ ганцикловир (HSV-tk/GCV), позволяют воспроизводить триггер индукции клеточной гибели непосредственно в клетке-мншени и поддерживать его активность на высоком уровне с возможностью внешнего им управления. Встраивание искусственного индуктора апоптоза происходит на уровне ДНК, реализация - посредством транскригщнонного и трансляционного аппаратов клетки. Это позволяет увеличить локальную концентрацию токсического индуктора в клетке и усилить сигнал. Для успешного применения такого подхода необходимы эффективные системы транспорта генетического материала в клетки-мишени, обеспечивающие нати вноси» доставленных нуклеиновых кислот как необходимое условие корректного включения нх в клеточный контекст. Существующие методы переноса генно-инженерных конструкций в клетки зукарнот, такие, как порацня мембран {злектропорацня, соногюрация, баллистические методы, магннтофекцня), или вирусные вектора не всегда эффективны в условиях in vitro и ограничены а свосн применимости in vivo либо из-за дополнительных барьеров организма, либо из-за побочных действий, связанных, например, с иммуногенностью вирусных векторов. Перспективным альтернативным подходом стати невнрусные вектора, лишенные ряда недостатков вышеперечисленных методов (Feigner et al-, 1989; Duzgunes, 2003). Для транспорта генетического материала в этом случае используются различные соедн нения: полимеры, лип иды. Лнпофекция -перенос генетического материала с помощью липидов - рассматривается как один из многообещающих способов. Однако, механизм лнпофекции недостаточно изучен, а ее системы не всегда эффективны, Разработка новых эффективных in vitro и in vivo систем транспорта нуклеиновых кислот на основе ненммуног енных нетоксичных лнпидных векторных систем, в частности, кат ионных бисамфифилов, исследование нх свойств и биологического действия представляется насущной задачей.

Дальнейшее изучение путей индукции. амплификации и экзекуции, приводящих клетку к гибели в результате действия противоопухолевых препаратов, является актуальной проблемой, Принято выделять две категории алоптоз-нндуцнрующих. путей - внешние, связанные с активацией ряда так называемых рецепторов смерти, и внутренние, ассоциированные с рецепцией разнообразных повреждений клеточных структур (Achanta et al,, 2001). В основе действия системы HSV-ik/GCV лежит экспрессия трансфеин рока иными клетками фермента тимидникиназы вируса простого герпеса первого типа, способного фосфорилнровать ганцнкловнр до соответствующего монофосфата. Последний, фосфор или рованлый эндогенными кип азами до GCV-трифосфата., начинает конкурировать с эндогенным гулом дезо кс нр н богу а н ило во й кислоты в процессах синтеза ДНК. Встраивание аномального нуклеотида вызывает остановку синтеза ДНК, одноточечные разрывы и запускает каскад клеточных реакций, одним нэ исходов которых может быть гибель клетки (Bellinger ct al., 1999), Подробные механизмы индукции апоптоза системой I ISV-tk/GCV, как н гомологичные нм механизмы активности противоопухолевых препаратов - аналогов нуклеотидов, остаются не до конца изученными.

Цель исследований.

Разработка, опенка эффективности и исследование механизмов действия невирусной генно-ннженерной системы активации нетоксичных соединений «ген тимндинкнназы вируса простого герпеса - ганцнкловнр» на основе новых катион ных бисамфнфилов. Задачи исследования.

1. Изучить ключевые для целен транспорта нуклеиновых кислот в клетку физико-химические свойства дисперсных систем новых катнонных бисамфнфилов ДЭГА: стабильность, размеры, агрегатную морфологию лншшных частиц. Оценить цктотокснчность и мембранотропность в культурах опухолевых клеток,

2. Охарактеризовать морфологию и размеры лшюплексон супрамолекулярных ансамблей катионных бисамфнфилов ДЭГА и плазмидных ДНК.

3. Исследовать эффективность трансфекцни лнпоплексами на основе ДЭГА культур клеток MCF7, 293 и Jurkat разными репортериыми системами.

4. Оценить эффективность индукции гибели клеток MCF7 и 293 системой ДЭГА-HSVtk-GCV,

5. Изучить детали механизма цитотокенчеекого действия системы ДЭГА-HSVtk-GCV, связанные с возможным вовлечением митохондрий и фактора транскрипции NF-kB,

Научный новизна исследовании.

Предложены новые катнонные бнеамфнфнлы ДЭГА в качестве невирусных медиаторов транефекцнн в составе генно-инженерном системы активации нетоксичных соединений ДЭГА-HSV-tk/GCV. Использованные в работе катнонные бисамфифилы, принадлежащие к новому классу поверхностно активных соединении gemini surfactants. представляют собой оригинальный ряд веществ для научения соотношения структура-активность. Впервые обнаружена пониженная интотокснчиость соединений ДЭГА в группе gemini surfaclants по сравнению с альтернативной липидной системой DOTMA-DOPE. Впервые для данной группы веществ покачана зависимость морфологии лнпоплексоь и тражфецнрующей активности от длины спейссра в структуре молекулы ДЭГА. Показана вовлеченность деполяризации митохондриальной мембраны н активации фактора трэнскрипцин NF-kB в комплексный ответ клетки на действие системы HS V-tk/GC V. Теоретический и практическая шчнмаегь работы.

Полученные в работе данные представляют теоретический интерес для понимания закономерностей н механизмов нсвирусного генного переноса и индукции ariomoua генно-инженерными системами активации нетоксичных соединений. Результаты работы имеют практическое значение для обеспечения дальнейшего прогресса в терапии онкологических заболеваний, а также ошнмнзацни применения клинических протоколов генной терапии. Основные положении, выносимые на защиту t. Новые катнонные бисамфифилы ДЭГА характеризуются низким значением критической концентрации мниеллообразования, преимущественно ламеллярной морфологией агрегатов в воде для ДЭГАЗ, смешанной для ДЭГА7 н мнцеллярной для ДЭГА11, ДЭГА22, Температура фазового перехода ДЭГА близка к физиологической, Катионные бнсамфнфилы ДЭГА образуют устойчивые дисперсные системы в воде,

2. Структура и активность супрамолекулярных ансамблей катионы ьгх бнеамфнфилов с плазмндной ДНК зависят от длины алифатического спсйсера.

3. Среди катнонных бнеамфлфилон ДЭГА при более низкой цнтотоксичностн максимальной трансфецирующей способностью, сравнимой с коммерческим препаратом 1лроГес1ш, обладает ДЭГАЗ. Эффективность трансфекцнн зависит от типа клеточной культуры, фкзнхо-хнмнческнх особен ностей липоплексоа, определяемых химической структурой катионного липида.

4. Система ДЭГА-НЗУ-1к/ОСУ индуцирует клеточную гибель в культурах эффективно трансфеиирусмых клеток,

5. Обнаружена деполяризация мктохондриальной мембраны и активация транскрипционного фактора NF-k.Il в экспрессирующих ткмидинкнназу вируса простого герпеса клетках в ответ на ганникловир

Заключение диссертации по теме «Патологическая физиология», Московцев, Алексей Александрович

выводы

1. В работе предложена новая невнрусна* система на основе катонных бисамфнфнлов ДЭГА, гена тимидинкиназы вируса простого герпеса в составе плазм нл ной ДНК рЦТ649 н ган ни клавира, которая эффективно вызывает гибель опухолевых клеток по механизму апоптоза, индуцированного продуктом «летального синтезам - активированным ганцнкловнром.

2. Дисперсные системы катион них бнеамфифнлов по данным физико-химических методов характеризуются агрегата вной устойчивостью, субмнкронными размерами и способностью к слиянию с мембранами клеток МСР-7.

3. Изученные в работе бисамфифилы ДЭГА сравнительно нетоксичны в экспериментах Iп \'Чго на монослойных культурах клеток 293, МСТ-7 и суснезнонной культуре .Гигка! и могут быть использованы в качестве медиаторов для переноса генетических конструкций в опухолевые клетки человека.

4. Исследованы физико-химические свойства супрамолекулярных ансамблей катионных бисамфифилов и плазмидных ДНК (липоплексов). Покатано, что эффективность трансфскцин линий клеток 293, \1CF-7 и ^игкчИ зависит от длины алифатического спенсера катионных бнсамфнфнлов. определяющей морфологию липоплексов.

5. Методом лазерной сканирующей конфокальной микроскопии показано, что в механизм гибели опухолевых клеток под действием системы ДЭГА-Н$У-(к/ганинкловир вовлечены ранняя деполяризация мнтохоидрнальной мембраны, а также активация фактора транскрипции КГ-кВ (модификация метода иммуно-ферментного анализа «по зЫЯ»). В гибель клеток 293 и МСР-7 вносит вклад эффект «(летального соседства» (ЬуОДгёег еГГсс!)

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Обнаруженные клеточные ответы в виде деполяризации митохондриальной мембраны н активации NF-kB позволяют предположить комплексное действие системы HSV-tk/GCV, индуцирующее каскад реакций, ведущий к клеточной гибели. Таким образом, индукция апонтоза представляет собой сложное событие, вовлекающее множество рсцелторных зон и амплнфнкацнонных петель. Помимо классического р53-олосредованного пути в ответ на повреждение ДНК, имеющего место при действии HSV-tk, можно предположить подключение дополнительных стимулов, например, связанных с возможной пертурбацией репарации ядерной ДНК, синтеза мнтохондриальной ДНК (ядерно-митохондриальное взаимодействие). Каждый из этих сигналов может быть подпороговым и недостаточным для принятия клеткой решения о самоубийстве, но интегральной суммы сигналов может хватить для исполнения апоптоэя, Возможно, что клетка нуждается в своеобразном дополнительном «опросе» о степени повреждения своих систем для принятия решения об экзекуции эффекторной стадии апоптоза. С этой точки зрения повреждение ядерной ДНК может являться основной, но отнюдь не единственной причиной апонтоза. Интересным фактом в данном случае является изменение роли NF-kB, более известного как антнапоптотический фактор, в проалоптотнческнй. Это явление скорее говорит о неспецифическом модулировании этим транскрипционным фактором аноптотнчсской машннерин, так как значительное количество промотеров содержит сайты связывания для NF-kB. Специфичность интеграции сигнала может быть обусловлена не только типом повреждения, но и особенностями самой клеткн-мишеин, и это не противоречит наблюдаемой двойственной природе NF-kB.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Московцев, Алексей Александрович, 2007 год

1. Адаме Р. Методы культивирования клеток для биохимиков, М,; Мир, 3983, -263 С,

2. Бажора Ю И. и Носкин Л.А. Лазерная корреляционная спектроскопия а медицине. Одесса.: Друк, 2002. 400 с.

3. Бергельсон ЛД., Дятловицкая Э.В. Молотковский Ю.Г., Батраков СТ., Барсуков Л,П., Проказова Н,В, Препаративная биохимия липилов. М.: Наука, 1981.-256 С,

4. Биология развития млекопитающих. Методы. Под ред. М. Майк. Пер, с англ, М., Мир: 1990. - 406 С.

5. Блохнн Д. 10., Соколовская А.А., Московцев А,А. Раз-дефицитная линия клеток .1игка1/А4, резистентная к индукторам и л и пандам программированной клеточной гибели// Российский Бнотсрапевтнческнй Журнал,-2003 ,-№1- С, 14,

6. Богланенко Е,В,, Свиридов Ю.В„ Московцев А,А, Жданов Р.И. Невирусный перенос генов ¡п в генной терапии //Вопросы Медицинской Химии-2000.1. 46.- С.229-242

7. Геннис Р. Биомембраны-Молекулярная структура и функции. М.: Мир, 1997.624 С.

8. Евстигнеева Р,П,, Казакова Е.В., Себякин Ю.Д. Исследования а области синтеза модельных тиогликолинидов, содержащих нейтральные и положительно заряженные полярные группировки. Н Докл. Акад. Наук. 1992. -Т. 323- - № 3. - С. 495 - 497.

9. Гурьев С.О, Лавренова Т.П., Серебренникова Г. А., Константинове И.Д., Масло в М, А- Новые кат ионные лилосомы для трансфекцин эукарнотнческнх клеток // Докл. Акад. Наук. ¡998. - 362. - № 4.- С. 557-560.

10. Зарилзе ДГ. Канцерогенез. М.:Медицина, 2004. 576 С.

11. Крыжановский Г.Н. Современная патофизиология состояние и перспективы,- Лекции первого российского конгресса по патофизиологии. М., 1996-25 С,

12. Кузнецов А.В., Кузнецова И.В. Связывание экзогенной ДНК рККЗ 11ас2 сперматозоидами кролика, ее перенос в ооциты и экспрессия в доимплантационных эмбрионах, // Онтогенез, 1995, - № 4, - С, 300 - 309.

13. Луценко В.К. Молекулярная патофизиология,-М.: МАИК «Наука/Иктерпериоднка», 2004.-270 с.

14. Максимов Г.В., Василенко В.Н., Максимов В.Г., Максимов А.Г. Теоретические н практические аспекты использования биотехнологии и генной инженерии М.: Вузовская книга, 2004,-208 с.

15. Маннатис Т. Фрицш Е.Ф., Сэмбрук Дж. Молекулярное клонирование. М-; Мир, 1984.-479 С.

16. Плохи не кий Н.А. Биометрия. М.: Издательство Московского Университета, 1970. - 367 С,

17. Себякнн ЮЛ., Полякова А.А., Панченкова И А,, Скрнпннкова М.А. Мемранообразующне свойства днмерных катнонных амфифнлов иа основе L-глутаминовой кислоты// Биологические Мембраны -2003 -Т.20.-№2.-С. 178-183

18. Хеймс Б., Хнгпшс С. Транскрипция и трансляция. Методы. М.: Мир, 1987.400 с.

19. Ченнов Ю.С. Практикум но цитологии. М,: Издательство Московского Университета, 1988. - 294 С,

20. Agami R., Blandino G., Oren M., and Shaul Y. Interaction of с-АЫ and p73a and their collaboration lo induce apoplosis.// Nature (Lond.).- 1999.-V.399.-P. 809-813,;

21. Alami E,, Beinert G„ Marie P. and Zana R. AlkanediyI-.alpha.,.omega.-bis^dimethylalkylammonium bromide) surfactants, Behavior at the air-water interface //Langmuir-im- V.9.-P. 1465-1467

22. Alami E., Levy H., Zana R. and Skoulios A, Alkanediyl-.alpha.,.omega.-bis(dimeihylalkylammomum bromide) surfadants-Structurc of the lyotropic mesophases in the presence of water jVLangmuir.- 1993.-V.9.-P.940-944

23. Anderson W.F. Human gene therapy. // Science. 1992. - V. 256. - P. 808-813.

24. Arscotl P. G., Li A.-Z-, Bloom field. V. A. Condensation of DNA by trivalent cations. Effects of DNA length and topology on the size and shape of condensed particles. //Biopolymers.-1990.-V.30.-P, 619-630.

25. Bao Sh., Thrall В., Gies R., Miller D. In Vivo transection of melanoma cells by lithotripter shock waves. //Cancer Research.- 1998.-V.58.- P. 219-221

26. Bellinger C., Fulda S., Kammertoens T, Uckert W., and Debatin Klaus-Michael Mitochondrial Amplification of Death Signals Determines Thymidine Kinase/Ganciclovir-triggered Activation of Apoplosis// CANCER RESEARCH.-2000.-V.60-P.3212-3217.

27. Bennett MJ., Nantz M.H,, Balasubramanian R.P., Grueocrt D.C., Malone R.W. Cholesterol enhances cation ic liposome-mediated DNA transfection of human respiratory' epithelial cells, // Biosci. Rep. 1995. - VJ 5. - P. 47 - 53,

28. Bloomficld V,A. DNA condensation.// Curr, Opinion Struc, Biol.-1996,-V, 6.-P.334

29. Boland MP» Fitzgerald KA and O'Neill LA. Topoisomcrase II is required for mitoxantrone to signal nuclear factor kappa B activation in HL60 cells.// J.Biol. Chem, 2000.-V, 275 .-P.25231-25238

30. Brown, J.M., and Wouters, B.G. Apoptosis, p53, and tumor cell sensitivity to anticancer agents. Cancer Res.- I999.V.59.-P. 1391-1399

31. Canonico A.E, Plitman J.D. Conary TJ,. Meyrick B E., Brigham K L, No lung toxicity after repeated aerosol or intravenous delivery' of plasmid-cationic complexes. // J. Appl. Physiol. 1994. - Vol. 77. - P. 415 - 419.

32. Capecchi M.R High efficiency transformation by direct microinjection DNA into cultured mammalian cells. //Cell. ¡980. - N. 22, - P. 479-488.

33. Cemazar M., Wilson I., Dachs G.U., Tozer G.M., Sersa G, Direct visualization of clcctroporation-assi&tcd in vivo gene delivery to tumors using intravital microscopy -spatial and time dependent distribution. // BMC Cancer. 2004. - V.4. -Jfe 1,-P. 81.

34. Cheng P.-W. Receptor ligand-facilitated gene transfer: enhancement of liposome-mediated gene transfer and expression by transferrin. H Hum. Gene Ther. 1996. -V , 7 . - Jfe 3 . - P 275-282.

35. Cheung C.Y., Murthy N. Stayton P.S., Hoffman A.S. A pH-scnsitive polymer that enhances cationic lipid-mcdiated gene transfer. // Bioconjug Chem. 2001. -V.I2.-J&6. -P. 906-910.

36. Cheung C.Y., Stayton P.S., HofFnian A.S. Poly >& propylacrylic acid)-mediated scrum stabilization of cationic lipoplexes. // J. Biomatcr. Sci. Polym, Ed - 2005,-V.I6 .-№2. -P. 163-179.

37. Chin D.J., Green G.A., Zon G., Szoka F.C., Straubinger R.M. Rapid nuclear accumulation of injected oligodcoxyribonucleotides. // New Boil. 1990. - N. 2. - P. 1091-1100.

38. Chiou H.C. Tangco M.V., Levine S.M., Robertson D„ Kormis K. Wu C.H., Wu G.Y. Enhanced resistance to nuclease degradation of nucleic acids complexed to asialoglycoprotein poly lysine carriers. // Nucleic Acids Res. - 1994. - V. 24. - P. 5439 - 5446,

39. Connolly M, L, The Molecular Surface Package, Hi Mol Graphics,- 1992.-V,l I(2).-P.I39-I4L

40. Conwetl C-C. Kinetic and thermodynamic factors govern DNA condensate and morphology. //Dissertation In Partial Fulfillment Of the Requirements for the Degree Doctor of Philosophy in Chemistry, Georgia Institute of Technology.- 2004

41. Cui 2,, Mumper R.J, Plasmid DMA-entrapped nanoparticlcs engineered from microemulsion precursors: in vitro and in vivo evaluation. // Bioconjug. Chcm. -2002. V. 13. - № 6. - P.1319-1327.

42. Curicl D.T.,Agarwal S„ Wagner H. Gotten M. Adenovirus enhansement of transferrin-mediatetl gene delivery. // Proc. Nat. Acad. Sri. USA. 1991. - N 88. - P. 8850-8854.

43. Deas O., Angevin E,, Cherbonnier C.t Senik A„ Charpentier B„ Levillain J.P., Oostenvijk E„ Hirsch F., Durrbach A,, In vivo-targcted gene delivery using antibody-based nonviral vector. // Hum, Gene Thcr 2002,- V, 13. - № 9. - P.I 101-1114

44. Debs RJ. Freedman L P , Edmunds S., Gaensler K.L., Du/.gunes N., Yamamoto K-R. Regulation of gene expression in vivo by liposorne-mediated delivery of a purified transcription factor. - J. Biol. Chem. - 1990. - Vol. 265, - №18. - P. 10189 -10192,

45. Devinsky F., Lacko I. and Imam T. Steady-state Fluresecnce Quenching in Mice) Jar Solutions of Biodegradable Gemini Surfactants // Acta Fac. Pharm.- 1990.* V.44.-P. 103

46. Dufes C., Keith W.N., Bilsland A., Proutski L, Uchegbu I F., Sehalzlcin A G, Synthetic anticancer gene medicine exploits intrinsic antitumor activity of cationic vector to cure established tumors, // Cancer Res 2005,- V,65. - № 18. - P 80798084.

47. Dzau J.V,, Mann MJ, Morishita R,, Kancda Y. Fusigenic viral liposome for gene therapy in cardiovascular diseases. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 1996. - N. 93. -P. 11421-11425.

48. Eastman S. J., Siegel C, Tousignant J., Smith A. E., Cheng S. H., and Scheule R. K. Biophysical characterization ofcationic lipid: DN A complexes J! Biochim. Biophys. Acta.-1997.-V. 1325.-P.41 62,

49. Eliyahu H., Makoviizki A., Azzam T,, Zlotkin A., Joseph A„ Gazil D,, Barenholz Y., Domb A,J, Novel dextran-spcrminc conjugates as trans fcciing agents: comparing water-soluble and micellar polymers. // Gene Ther. -2005. V. 12. - 6. - P. 494503.

50. Ewcrt K., Ahmad A., Evans H.M-, Schmidt H.W., Saflnya C.R, Efficient synthesis and ceJI-transfeciion properties of a new multivalent cationic lipid for nonviral gene delivery, //J, Med. Chem. 2002. - V.45 - Jfe 23. - P 5023-5029.

51. Fei P. El-Deiry W.S. p53 and radiation responses.// Oncogene-2003-V. 22.-P 5774-5783.

52. Feigner P L. Gadck T. R-. Holm M, Roman R . Chan H. W., Wenz M, Northrop J. P. Ringold J. M., Danielsen M. Lipofeclin: a highly efficient lipid-mediated DNA transfection procedure. // Proc. Nail. Acad. Sci. USA. 1987. V.84. -P. 7413-7417.

53. Feigner P.L., Gadck T.R., Holm M., Roman R., Chan H.W., Wenz M. Northrop J.P. Ringold G.M., and Danielsen M. Lipofeclion: a highly efficient, lipid-mediated DNA transfection procedureJi Proc.NatlAcad.Sci.-1987,- V.84.-P.74I3-7417,

54. Ferber D, Gene therapy: safer and virus-free? // Science, 2001. - V.294. -P. 1638-1642

55. Findley H.W.t Gu L-, Ycager A.M., and Zhou M. Expression and regulation of Bcl-2, Bcl-xl, and Bax correlate with p53 status and sensitivity to apoptosis in childhood acute lymphoblastic leukemia^/Blood.- I997.-V.89.-P. 2986-2993,

56. Fischer U, and Schulze-OsthoffK. New Approaches and Therapeutics Targeting Apoptosis in Disease,// Pharmacol Rev,- 2005 -V.57.-P. 187-215

57. Forrest M.L., Gabriclson N. Pack D.W. Cyclodcxtrin-polyethylenimine conjugates for targeted in vitro gene delivery. // Biotechnol. Bioeng. 2005. - V. 89. - № 4. - P. 416-423.

58. Freeman SM, Abboud CN, Whartenby KA, Packman CH, Koeplin DS, Moolten FL, Abraham GN, The bystander effect: tumor regression when a fraction of the tumor mass is genetically modified, Cancer Res.- t993.-V,53.-P.5274-5283.

59. Friesen C. Herr |„ Krammer PH., and Debaiin, K. M. Involvement of the CD95 (APO'1/FAS) receptor/1 igand system in drug-induced apoptosis in leukemia cells// Nat Med.- 1996.-V2.-P. 574-577.

60. Fukushima T„ Takata M., Morrison C., Araki R., Fujimori A„ Abe M., Tatsumi Jasin M,, Dhar P. K., Sonoda E., Chiba T,, and Takcda S, Genetic analysis of the

61. DNA-dcpendent protein kinase reveals an inhibitory role of Ku in Sate S-G2 phase DNA double-strand break repair.//J, Biol. Chem.-2001.-V. 276: 44413^4418.

62. Fulda $. Susin S.A., Kroemer G., and Dcbatin K M. Molecular ordering of apoptosis induced by anticancer drugs in neuroblastoma cells.// Cancer Res.-1998.-V. 58.-P.4453^4460 *

63. Gao S., Chen J , Xu X., Ding Z., Yang Y.I L, Hua Z., Zhang J. Galactosylated low molecular weight chitosan as DNA carrier for hepatocyte-targeting. // Int. J. Pharm.2003. V.255. - № N2. - P. 57-68.

64. Gartel A.L., and Tyner A.L. The role of the eye I in-dependent kinase inhibitor p21 in apoptosis.// Mol. Cancer Thcr,- 2002 V 1: 639-649.

65. Gershon H., Ghirlando R. Guttman S. B„ and Minsky A. Mode of fonnation and structural features of DNA-calionic liposome compJexes used for transfection,// Biochemistry ,' 1993 -V.32.-P.7143-7151.

66. Gewirtz DA A critical evaluation of the mechanisms ©faction proposed for the antitumor effects of the anlhracyclinc antibiotics adriamycin and daunorubicin.// Bioehem. Pharmacol.- 1999.-V. 57.-P.727-741

67. Gong J.G„ Costanzo A., Yang H.Q., Mclino G,, Kaelin W.G., Jr. Levrcro M, and Wang J, Y. The tyrosine kinase c-Abl regulates p73 in apoptotic response to cisplatin-induced DNA damage.// Nature (Lond,).- 1999,-V.399.-P. 806-809.

68. J. Hashida M., Nishtkawa M., Yamashitn F.T TaJcakura Y. Cell-specific delivery of genes with glycosylated carriers, // Adv. Drug Deliv. Rev. 2001. - V.52. - № 3. - P. 187-196.

69. Hodgson C P, Solaiman F. Virosomes: cationic liposomes enhance retroviral transduction // Nat Biotechnol, 1996. - V. 14, - N. 3, - P 339-342,

70. Hofland H,E„ Masson C. Iginla S„ Osetinsky I. Reddy J.A., Leamon C.P., Scherman D„ Bessodes M-, WHs P. Folate-targcted gene transfer in vivo, // Mot Ther. 2002. - V3. - № 6. - P.739-744,

71. Huang TT, Wuer/berger-Davis SM, Seufzer BJ, Shumway SD, Kurama T, Boothman DA and Miyamoto S NF-kappaB activation by camptothecin. A linkage between nuclear DNA damage and cytoplasmic signaling events J/ J. Biol, Chem.-2000.-V.275 -P. 9501-9509.

72. Huebner S-, Battersby B.J., Grimm R. Cevc G. Lipid-DNA complex formation: reorganization and rupture of lipid vesicles in the presence of DNA as observed by cryoelectron microscopy. // Biophys. J. 1999. -Vol, 76, - P. 3158 - 3166.

73. Inoue H-, Nojima H., Okayama H. High efficiency transformation of Escherichia coli with pi asm ids.// Gene 1990.- V.96.-P.23-28,

74. Ishii T., Okahata Y., Sato T. Mechanism of cell transaction with plasmid/chitosan complexes, // Biochim, Biophys. Acta. 2001, - V. 1514, - № 1. -P. 51-64,

75. Israelachvili J, N„ Mitchell D. J. Minham B. W. Theory of Self-Assembly of Hydrocarbon Amphiphiles into Micelles and Bilayers,// Chem, Soc., Faraday Trans. -I976.-V. 72.-P. 1525-1568,

76. Janssens S and Tschopp J. Signals from within: the DNA-damage-induced NF-kB response.// Cell Death and Differentiation.-2006,-V, 13 -P 773-784,

77. Johnstone R.W., Rucfli AA., and Lowe SW. Apoptosis: A Link between Cancer Genetics and Chemotherapy.//Cell.-2002.-V. 108.-P. 153-164

78. Jolli D. Viral vector systems for gene therapy. // Cancer Gene Ther, 1994, -Vol l.-P, 51-64.

79. Kanedn Y. Development of a novel fusogenic viral liposome system (HVJ-liposomes) and its applications to the treatment of acquired diseases. // Mol. Membr. Biol. 1999. - Vol. 16. - P. 119- 122.

80. Kasibhatla S., Brunner T., Geneslier L.t Echeverri F.( Mahboubi A,, and Green D. R. DNA damaging agents induce expression of Fas ligand and subsequent apoptosis in T lymphocytes via the activation ofNF-kB and AP-1 Jf Mol. Cell.1998.-V.l.-P. 543-551 '

81. Kasibhatla S,, Brunner T., Genestier L.t Echeverri F„ Mahboubi A., and Green D. R. DNA damaging agents induce expression of Fas ligand and subsequent apoptosis in T lymphocytes via the activation of NF-kB and AP-1// Mol. Cell.-l 998,-V. 1-P.543-551.

82. Kaul ü. Amiji M. Cellular interactions and in vitro DNA transfection studies with poly(ethylene glveol)-modilied gelatin nanoparticles. //1. Pharm, Sei, 2005, -V. 94.I -P. 184-198.

83. Kawano T., Okuda T., Aoyagi H., Niidome T. Long circulation of intravenously administered plasmid DNA delivered with dendritic poly(L-lysine) in the blood How. //J. Control, Release. 2004. - V. 99. - № 2. - P.329-337.

84. Kichlcr A. Lcborgne C,, Marz J„ Danos O., Bcchingcr B, Histidine-rich amphipathic peptide antibiotics promote efficient delivery of DNA into mammalian cells. // Proc Nail Acad. Sei. USA 2003. - V . 100 . - № 4 . - P 1564-1568.

85. Klink D.T., Glick MC. Scanlin T.F. Gene therapy of cystic fibrosis (CF) airways: a review emphasizing targeting with lactose, // Glycoconj J. 2001. - V. 18. - № 9. - P. 731-40

86. Koliovcr I-, Salditt T., RaedJer J, O., Saftnya C, R~ An inverted hexagonal phase ofcationic liposome-DNA complexes related to DNA release and delivery. // Science. 1998. - V. 281 - P. 78-81.

87. Kwok K. Y , Pari. Y. Vang Y. McKenzie D.L., Liu Y, Rice K G. In vivo gene transfer using sulfiiydryl cross-1 inked PEG-peptide/glycopeptide DNA co-condensates. I I J. Pharm. Sei. 2003. - V.92. - № 6. - P. 1174-1185.

88. Lappalainen K., Jääskeläinen L. Syrjänen K. Urtti A., Syrjänen S, Comparison of Cell Proliferation and Toxicity Assays Using Two Cationic Liposomes.// Pharm. Res.- i994.-V.11.-PJ 127-113 L

89. Lasic D.D. Liposomes in Gene Delivery. New York: CRC Press, Boca Raton. 1997. - 295 PP.

90. Ledley F. D. Pharmaceutical approach to somatic gene therapy. // Pharm. Res. 1996.-V.13.-P.I595- 1614

91. Lee T.W., Matthews D.A., Blair G.E, Novel molccular approaches to cystic fibrosis gene therapy. U Biochem, J. 2005. - V, 387(Pt t >, - P. 1-15.

92. Leong K.W. Mao H Q., Truong-Le V.L., Roy K , Walsh S.M., August J.T. DNA-polycation nanosphercs as non-viral gene delivery vehicles. U J. Control. Release 1998 V,53. - № 1-3. - P. 183-193.

93. Lin W.C., Lin F.T. and Nevins, J.R. Selective induction of E2F1 in response to DNA damage, mediated by ATM-dependent phosphorylation J! Genes Dev.- 2001 .-V.I5-P. 1833-1844,

94. Liu X. Tian P., Yu Y., Yao M. Cao X., Gu J. Enhanced antitumor effect of EGF R-targeted p2l WAF-1 and GM-CSF gene transfer in the established murine hepatoma by perifumorai injection. // Cancer Gene Thcr. 2002. - V.9. - № 1. -P, 100-108.

95. Liu X.t Tian P.K., Ju D.W., Zhang M.H., Yao M. Cao X T, Gu J.R. Systemic genetic transfer of p21WAF-1 arid GM-CSF utilizing of a novel oltgopeptidc-based EGF receptor targeting polyplex. // Cancer Gene Ther, 2003. - V, 10, - № 7. - P. 529-539.

96. Liu Y. Liggitt D„ Zhang W„ Tu G., Gaensler K. Debs R. Cationic liposome-mediated intravenous gene delivery. // J. Biol. Chem. 1995. - V. 270. - P. 24864 -24870.

97. Lowe, S.W., Lin, A.W. Apoptosis in cancer J/ Carcinogenesis 2000.-V.21,-P.485-495

98. Lu R, Zhang Y., Roberts D.D., Osborne C.K., Templeton N.S. Enhanced gene expression in breast cancer cells in vitro and tumors in vivo. // Mol Ther. 2002. -V.6.6. - P 783-792.

99. Lu Y-, Wecrs B., and Stellwagen N. C. DNA persistence length revisited^/ Biopolymers.- 2002-V.61 -P. 261 -275

100. Marshall £. Biomedicine: gene therapy on trial. H Science. 2000. - V.28S. -P.95I-957.

101. Marx K, A., Ruben. G, C.- Evidence for hydrated spermidine-calf thymus DNA toruses organized by circumferential DNA wrapping.// Nucleic Acids Res.-1983.-V.U.-P. 1839-1854.

102. Mastrobattista E., Kapel R.H., Eggenhuisen M.H., Roholl PJ., Crommelin D.J., Hennink W.E., Storm G. Lipid-coated polyplexes for targeted gene delivery to ovarian carcinoma cells. // Cancer Gene Ther. 2001. - V.8. - № 6. - P, 405-413.

103. Maurer N. Mori A. Palmer L., Monck M,A„ Mok K.W,, Mul B. Akhong Q.F„ CulJis P.R, Lipid-based systems for the intracellular delivery of gcnctic drugs. // MoJ, Membr. Biol 1999. - Vol. 16. - No I - P. 129 - 140.

104. McKay T., Reynolds P., Jezzard S. Curiel D. Coutelle C. Seeretin-mediated gene delivety, a specific targeting mechanism with potential for treatment of biliary and pancreatic disease in cystic fibrosis. // Mol. Ther, 2002. - V.5. - № 4. - P. 447454.

105. Meek D. W. Mechanisms of swjiching on p53: a role for covalent modification?//Oncogene.- I999.-V.18.-P. 7666-7675.

106. Melcher A, Todryk S., Hardwick N., Ford M.T Jacobson M Vile R. G. Tumor immunogenicity is determined by the mechanism of cell death via induction of heat shock protein expression.//Nat. Mcd.-l998,-VA-P.458l-4587.

107. Mengcr F, M„ Keiper J. S. Gemini surfactants.// Angew, Chem, Int. Ed 2000,-V.39.-P 1907

108. Menger F. M.; Keiper J. S.; Mbadugha B. N. A.; Caran K. L. and Romsted L. S, Interfacial Composition of Gemini Surfactant Micelles Determined by Chemical Trapping''/ Langmuir.- 2000.-V, 23,-P. 9095-9098.

109. Mcsnil M. Piccoli C. Tiraby G, Willecke K, Yamasaki H Bystander killing of cancer cells by herpes simplex virus thymidine kinase gene is mediated by connexins.// ProcNatl Acad Sci USA.- 1996.-V.93.-P.'l831-1835

110. Miller A. D, Human gene therapy comes on age. // Nature. 1992, - Vol. 357. -P, 455-460.

111. Mok K. W„ and Cullis P, R, Structural and fusogenic properties of cationic liposomes in the presence of piasmid DNA, Biophvs, J.- 1997.-V.73.-P.2534-2545.

112. Moskovtsev A.A., Filinova E.t Sebyakin Yu.L., Blokhin D.Yu. Detection of Potentially Effective Lipid Transfection Reagents.//2nd International Workshop "Scanning Probe Microscopy in Life Sciences"4, Berlin, 2003,- P.14

113. Mukusick, V.A. Mendelian Inheritance in Man, 8th cd, Baltimore: Johns Hoppkins University Press, 1988.-18260

114. Mummcnbrauer T., Janus F., Muller B,, Wiesmuller L., Dcppcrt W„ and Grosse F. p53 Protein exhibits 31-lo-5* exonuclease activity.//Cell.- I996.-V,85,-P.t089-1099.

115. Niidome T,. Huang L. Gene therapy progress and prospects: nonviral vectors. // Gene Ther. 2002. - V.9, - As 24. - P.I 647-1652,

116. Oberle V., Bakowsky U. and Hoekstra D. Lipoplex assembly visualized by atomic force microscopy J! Methods in Enzymol. Liposomes, Part C: Gene Transfer and Therapy.-2003.-Vol. 373.- P.281-297,

117. Oberle Volker, Bakowsky Udo, Zuhom Inge S., and Hoekstra Dick- Lipoplex Formation under Equilibrium Conditions Reveals a Three-Step Mechanism// Biophysical Journal 2000.-V, 79,- 1447-1454

118. Ono T„ Fujimo J.T., Tschiya T., Tsuda M, Plasmid DNAs directly injected into mice brain with lipofectin can be incorporated and expressed by brain cells. // Neurosci- Lett. 1990, - Vol. 117. - P. 259 - 263.

119. Ortiz-Urda Thyagarajan B„ Keene D R., Lin Q., Fang M„ Calos M.P., Khavari P.A. Stable nonviral genetic correction of inherited human skin disease. // Nat, Med, 2002, - V,8. - № 10- - P.1166-1170.

120. Osaka S,T Tsui H-, Kiwada H. Uptake of l iposomes surface-modified with glycyrrizhl by primary cultured rat hepatocites. // Biol. Pharm. Bull. 1994. - V.I7. -N.7. ■ P.940-943.

121. Ozbas-Turan S , Aral C . Kabasakal U Keyer-Uysal M„ Akbuga J. Co-encapsulation of two pl&imids in chiiosan microspheres as a non-viral gene delivery vehicle. // J. Pharm. Pharm. Sei. 2003. - V.6. - № I. - P. 27-32.

122. Papaconstantinou H.T., Xie C., Zhang W., Ansari N.H., Hell mich M. R., Townsend C.M. Jr. and Ko T. C. The role of caspases in methotrexate-induced gastrointestinal toxicity.// Surgery.- 200I.-V.130.-P. 859-865.

123. Patil S.D., Rhodes D.G. and Burgess DJ. DNA-based ITicrapeutics and DNA Delivery Systems: A Comprehensive Review Jt The AAPS Journal.- 2005.-V, 07(01),-P. 61-77

124. Perez L., Pinazo A., Rosen M. J. and Infante M. R, Surface Activity Properties at Equilibrium of Novel Gemini Cattonic Amphiphilic Compounds from Arginine, Bi s< Args)Langmuir 1998.-V. 14.-P.2307-2315

125. Piret B and Piette J Topoisomerase poisons activate the transcription factor NF-kappaB in ACH-2 and CEM cells. Nucleic Acids Res.-1996.-V,24,-P. 4242-4248

126. Plank €., Oberhauser B-, Mechtler K., Koch C., Wagner E. The influence of cndosomc-di5ruptive peptides on gene transfer using synthetic virus-like genetrans rer systems. It J. Biol. Chem, 1994. -V, 269. - № 17. - P.I 2918 - 12924.

127. Pollard H„ Remy J.-S,. Loussouam G., Dcmolombe S„ Bchr J.-P., Escande D, Polyethylemine but not cationic lipids promotes transgene delivery to the nucleus in mammalian cells. // J. Biol. Chem. 1998. - V. 273. - P. 7507-7511.

128. Pol yak K., Xia Y.r Zweier J. L., Kinzler K. W., Vogelstein B. A model for p53-indueed apoptosisJ'/Nature.- 1997,-V,389,-P. 300-305.

129. Pun S.H., öellocq N.C., Liu A., Jensen G,t Machemer T„ Quijano E., Schluep T„ Wen S,t Engler H-, Heidel J. Davis M.E. Cyclodextrin-modified Polyethylenimine polymers for gene delivery. // Bioconjug. Chem. 2004. - V. 15. - № 4. - P. 831 -840.

130. Pun S.H., Davis M.E. Development of a nonviral gene delivery vehicle for systemic application. It Bioconjug, Chem. 2002. - V, 13, - № 3. - P.630-639,

131. Racdlcr JO,, Koltover 1-, Salditt T., Safinya CR, Structure of DNA-cationic liposome complexes: DNA intercalation in multilamellar membranes in distinct interhelical packing regimes, it Science. -1997. V.275. - P.810-814.

132. Ramanj K., Bora R.S., Kumar M., Tyagi S.K., Sarkar D.P. Novel gene delivery to liver cells using engineered virosomes. // FEBS Lett. 1997. - V. 404 - N. 2-3. - P. 164-168.

133. Ramani K-, Hassan Q., Venkaiah B„ Hasnain S.E., Sarkar D.P, Site-specific gene delivery' in vivo through engineered Scndai viral envelopes. U Proc. Nail. Acad. Sei. US A. 1998. - V. 95 - N. 20. ■ P. 11886-11890.

134. Rcjman J., Oberle V., Zuhorn I.S., and Hoekstra D. Size-dependent internalization of particles via the pathways of clathrin- and caveolae-mediated endocytosis. //BiochemJ-2004 -V.377.-P. 159-169.

135. Rich T., Allen R.L. and Wyllie A.H. Defying death after DNA damage.// Nature (Lond.).- 2000.-V.407.-P. 777-783.

136. Richardson S.C., Kolbe H.V,, Duncan R. Potential of low molecular mass chitosan as a DNA dclivciy system: biocompatibility, body distribution and ability to complex and protect DNA. U Int J. Pharm, 1999. - V. 178. - № 2. - P.231 -43.

137. Rochlifz C.F. Gene therapy of cancer, ft Drags Today (Banc). 2000. - V. 36. -St 9. - P.619-629.

138. Rosengarten O., Horowitz A.T., Tüemach D. Huang L. Gabizon A. In vitro cytotoxicity and pharmacokinetics ofcationic liposomes in mice. I! Abstracts. -Cancer Gene Ther. 1994- Voll:- P. 301-336,

139. Safinya CR. Structures of lipid-DNA complexes; supramolecular assembly and gene delivery, // CurT. Opin. Struct. Biol. 2001. V, 11, - № 4. - P. 440- 448.

140. Sclierer F., Anton M, Schillinger U-, I lenke J., Bergemann C.t Kruger A., Gansbacher B., Plank C. Magnctofection: enhancing and targeting gene delivery by magnetic force in vitro and in vivo. U Gene Ther. 2002. - V.9. - № 2. - P. 102-109.

141. Schcrer F. Schillinger U„ Pute U., Stemberger A,., Plank C, Nonviral vector loaded collagcn sponges for sustained gene delivery in vitro and in vivo. // Gene Med 2002. - V4. - № 6. - P.634-643.

142. Schlingensiepen R.( Brysch K-Schlingensiepen H. Antisense From Technology to Therapy. - Berlin; Vienna: Blackwell Science, 1997.

143. Schoficld J,P„ Caskcy C.T. Non-viral approaches to gene therapy, // Br. Med, Bull. 1995. -N-51 - P.56-71.

144. Schwartz P. S., Waxman D.J. Cyclophosphamide induces caspase 9-dependent apoptosis in 9L tumor cells.// Mol. Pharmacol,- 2001.-V.60.-P.1268-1279.

145. Scgura T„ Shea L.D. Surface-tethered DNA complexes for enhanced gene delivery. .// Bioconjug Chem. 2002, - V.I3. - № 3. - P, 621-629,

146. Seki K., Yoshikawa H., Shtiki K„ Hamada Y„ Akamatsu N. and Tasaka K. Cisplatin (CDDP) specifically induces apoptosis via sequential activation of caspase-8, -3 and -6 in osteosarcoma,// Cancer Chemother. Pharmacol.- 2000.-V. 45.-P, 199206

147. Sen J., Chaudhuri A. Design, syntheses, and transfection biology of novel non-cholcstcrol-ba&ed guanidinylated cat ionic lipids, //J. Med. Chem, 2005. - V.48, -№3.-P. 812-820.

148. Shi H.Y., Liang R-, Templeton N.S., Zhang M. Inhibition of breast tumor progression by systemic delivery of the maspin gene in a syngeneic tumor model, it MoL Ther 2002. V.5. - № 6. - P,755-761,

149. Shinkai M., I to A„ Functional magnetic panicles for medical application, // Adv. Biochem. Eng. Biotcchnol. 2004. - V.9I. - P. 191-220.

150. Singhal A., Huang L, In Gene Therapeutics: Methods and Applications of Direct Gene Transfer, J, A. Wolf, editor. Birkhauser, Boston, Massachusetts, 1994.

151. Smaglik P. Gene therapy death may delay new trials. // The Scientist. 1999.6. V. 13. - N, 22. - P. 9.

152. Smiley ST, Reers M, Mottola-Hartshom C, Lin M, Chen A, Smith T, Steele GD, Chen L Intracellular heterogeneity in mitochondrial membrane potentials revealed by J-aggregate-forming lipophilic cation JC-1Л Proc Natl Acad Sci USA-1991.-V.88.-P.3671-3675,

153. Sokolovskaya AA., Mikhailov AD., Moskovtsev AA., Eriksson John E. and Blokhin D.Yu Induction of CD95-resistance leads ю multiresistant phenotypc.// Proceedings of the Miami Nature Biotechnology Winter Symposium.- 2003,- Vol. 14.-P.4LI 12

154. Solodin L, Brown C.S., Bruno M.S., ChowC.Y., Jang E.H., Debs RJ., Heath T.D. A novel series of amphiphilie imidazolinum compounds for in vitro and in vivo gene delivery, // Biocbemistiy. 1995. - V. 34. - P. 13537 - 13544.

155. Tillman D, M, Petak 1,. and Houghton J. A. A Fas-dependent component in 5-fluorouracil/leucovorin'induccd cytotoxicity in colon carcinoma cells.// Clin. Cancer Res I999.-V.5 -P 425-430.

156. Tillman P.M., Petak I., and Houghton J.A. A Fas-dependent component in 5-fluorouraciL/leucovorin-induced cytotoxicity in colon carcinoma cells.// Clin. Cancer Res.- 1999.-V. 5.-P. 425^30

157. Uehida E„ Mizuguchi H„ Ishii-Watabe A., and Hayakawa T. Comparison of die Efficiency and Safety of Non-viral Vector-Mediated Gene Transfer into a Wide Range of Human Cells, //Biol. Pharm. Bull,- 2002.-V,25(7).-P, 891-897,

158. Van Den Bosch M., Bree R.T., and Lowndes N.F. The MRN complex; coordinating and mediating the response to broken chromosomes-// EM BO Rep.-2003.-V. 4.-P. 844-849.

159. Van dcr Woude l„ Wagcnaar A., Meckel A. A„ ler Becst M. B„ Ruitcrs M. H., Engbcrts J. B. F. N., and Hoekstra D. Novel pyridinium surfactants for efficient, nontoxic in vitro gene delivery . Proc. Natl. Acad. Sci. USA.-1997.-V.94.-P.1160 -1165.

160. Wadia J. S. Chalmers-Redman R M, E., Ju W. J, H„ Carlile G. W,T Phillips J. L., Fraser A. D,. Tatton W. G. Mitochondrial Membrane Potential and Nuclear Changes in Apoptosis Caused by Serum and Nerve Growth Factor Withdrawal :Time

161. Course and Modification by (2)-Deprenyl//The Journal ofNeurosciencc,- 1998.-V,l8(3),-P,932-947

162. Wagner E,, Zenke M, Gotten M., Beng H,, Birnsteil M. Transfcrrm-polycation conjugates as carriers for DN A uptake into cells. // Proc, Nat, Acad, Sci. US A1990. V. 87. - N. 9, - P. 3410-3414.

163. Wagner J., Madry 11., Reszka R. In vivo gene transfer, focus in the kidney. if Nephrol. Dial. Transpl. 1995. - M.IO. - P. 1801-1807.

164. Waxman D.J. and Schwartz P. S, Harnessing Apoptosts for Improved Anticancer Gene TherapyJt Cancer Research.- 2003.-V.63.-P. 8563-8572

165. Weng L., Liu D., Li Y,, Cao S., Feng Y. An archaeal histone-like protein as an efficient DNA earner in gene transfer, // Biochim. Biophys, Acta. 2004. -V, 1702. -№ 2. - P. 209-216,

166. Widom J.; Baldwin R. L. Cation-induced toroidal condensation of DNA : Studies with Co3+<NH3)6 //J Mol Biol.- I980.-V. 144.-P.431-453

167. Wolfert MA., Seymour L, W. Chloroquine and amphipalic peptide helices show synergetic transfection in vitro. II Gene Therapy. 1998. - N. 5. - P. 409 -4t4.

168. Wrobcl L, and Collins D. Fusion of cationic liposomes with mammalian cells occurs after endocytosis.// Biochirn.Biophys.Acta.-1995.-V. 1235.-296-304

169. Wu G. S„ Burns T. F„ McDonald E, RM Meng R. D,, Kao G., Muschel R,, Yen T. and el-Deiiy W S, Induction of the TRAIL receptor KILLER/DR5 in p53-dependent apoplosis but not growth arrest tf Oncogene,- 1999.-V.18.-P, 6411-6418,

170. Yang F„ Cui X,, Yang X, Interaction of low-molecular-wcight chitosan with mimic membrane studied by electrochemical methods and surface plasmon resonance. H Biophys. Chem. 2002. - V 99. - Jfc 1. - P.99-106

171. Yuan L , Yu W M„ Yuan Z„ Haudcnschild C, C.r and Qu C, K, Role of SHP-2 tyrosine phosphatase in the DNA damage-induced cell death response Jt J. Biol. Chem.- 2003.-V.278.-P. 15208-15216.

172. Zabner J^ Fasbender A J., Moninger T., Poellinger K. A., Welsh M. Cellular and molecular baniers to gene transfer by a cationic lipids, it J. Biol, Chem. 1995. - V. 270,-N. 18.-P, 18997-19007,

173. Zabner J., Fasbcnder AJ., MoningcrT., Pocllinger K.A„ and Welsh M.J, Cellular and molecular barriers to gene transfer by a cationic lipid. //J.Biol,Chcm-1995 V,270.-P. 18997-19007.

174. ZaharofFD. A.t Barr R. C., LI C. Y., and Yuan F. Electro mobility of pi asm id DNA in tumor tissues during electric field-mediated gene delivery.// Gene Ther.-20O2.-V9-P.I286- 1290.

175. Zana R. and Talmon Y., Dependence of aggregate morphology on structure of dimcric surfactants.// Nature -1993 -V.362-P.228-230

176. Zana R. and Xia J. Gemini Surfactants: Synthesis. Interfacial and Solution-Phase Behavior, and Applications.- New York: Marcel Dekker, 2003,- 385 P,

177. Zana R., Benrraou M„ and RueffR. Alkanediyl-.alpha.„omega,-bis(dimcthylalkylammonium bromide) surfactants. Effect of the spacer chain length on the critical micelle concentration and micelle ionization degree/ZLangmuir.- 1991 .-V,7 -P,| 072- 1075

178. Zauner W., Blaas D„ Kuechler E., Wagner E., Riiinovims-mediated endosomal release of transfection complexes. //J. Virol, 1995, - N. 69, - P 1085-1092.

179. Zelphati Olivier, and Szoka Francis C., Jr, Mechanism of oligonucleotide release from cationic liposomes// PNAS,- 1996.-V.93.-P.11493-11498

180. Zhang X.Q. Wang XL., Huang S. W., Zhuo R.X., Liu Z.L., Mao H.Q.t Leong K.W. In vitro gene delivery using polyamidoamine dendrimcrs with a trimesyl core. U Biomacronrolecules. 2005. - V,6, - >fc P. 341-350.

181. Zhu J„ Liggitt D. Liu Y„ Debs R. Systemic gene expression after intravenous DNA delivery in adult mice. // Science. -1993. V. 261. - P. 209 - 21L

182. Zhu J., Zhang L„ Hanich U.K., Feigner P.L., Reszka R. A continuous gene delivery svstem for in vivo liposome mediated gene therapy, // Gene Therapy. -1996. N.3. - P. 472-476.

183. Zou Y„ Zong G,, Ling Y.H., Hao M M , Lozano G, Hong W.K., Perez-Soler R. Effective treatment of early endobronchial cancer with regional administration of liposome-p53 complexes. // J. Natl. Cancer Inst. - 1998. - V. 90. - P. 1130 - 1137.

184. Я очень прнзнатен Анатолию Алексеевичу Чурилоау за его поддержку, а также Николаю Николаевичу Золотову.

185. С уважением, А.А. Московцев