Исследование цитокининов, продуцируемых ризосферными микроорганизмами тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.12, кандидат биологических наук Архипова, Татьяна Николаевна

• Архипова, Татьяна Николаевна
• кандидат биологических наук
• 1999

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Архипова, Татьяна Николаевна

ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Цитокинины

1.2. Некоторые аспекты практического применения цитокининов

1.3. Микроорганизмы, синтезирующие цитокинины

1.4. Микроорганизмы как агенты биологического метода борьбы с заболеваниями растений

1.5. Методы определения цитокининов

1.6. Методы анализа цитокининов, продуцируемых микроорганизмами

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. Используемые в работе материалы и реактивы

2.2. Объекты и методы исследования

2.2.1. Объекты исследований

2.2.2. Приготовление конъюгатов цитокининов с белком

2.2.3. Получение антисыворотки к цитокининам

2.2.4. Твердофазный иммуноферментный анализ

2.2.4.1. Определение цитокининов

2.2.4.2. Определение ИУК и АБК

2.2.4.3. Определение неспецифического ингибитора иммунологи ческой реакции антиген-антитело в культуральной жидкости

2.2.5. Экстракционная очистка цитокининов

2.2.6. Ионообменная хроматография

2.2.7. Тонкослойная хроматография

2.2.8. Ультрафильтрация

2.2.9. Приготовление аффинного носителя

2.2.10. Иммуноаффинная хроматография

2.2.11. Высокоэффективная жидкостная хроматография в сочетании с масс-спектрометрией

2.2.12. Разделение свободных и связанных форм цитокининов

2.2.13. Определение молекулярного веса комплекса неспецифического ингибитора с цитокининами

2.2.14.УФ-спектрометрия

2.2.15. Биотест на цитокинины

2.2.16. Определение глюкозы

2.3.Статистическая обработка

3. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

5. ВЫВОДЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Исследование цитокининов, продуцируемых ризосферными микроорганизмами»

Актуальность. В процессе своей жизнедеятельности растения входят в сложные взаимоотношения с микроорганизмами, населяющими почву (Звягинцев и др., 1993). Микроорганизмы, окружающие растение в естественных условиях обитания, могут оказывать влияние на их рост и развитие. Предполагается, что одним из факторов воздействия является способность некоторых бактерий и грибов продуцировать гормоны растений (Мишке, 1988). Однако до сих пор остается неясным, в какой мере гормоны, продуцируемые микроорганизмами, влияют на физиологические процессы растений. Более ясное понимание характера влияния на растения гормонов, синтезируемых микроорганизмами, могло бы способствовать разработке эффективных рост-регулирующих препаратов как на основе самих гормон-продуцирующих микроорганизмов, так и синтезируемых ими гормонов. В настоящее время исследования по микробной продукции гормонов сфокусировались преимущественно на микроорганизмах, которые являются патогенами высших растений или входят с ними в симбиоз (Green, 1980), причем последним уделялось гораздо меньше внимания. В лаборатории прикладной микробиологии Института биологии УНЦ РАН было показано, что предпосевная обработка семян препаратом из микроорганизмов, отобранных по их способности подавлять рост патогенных для растений грибов, не только повышает устойчивость растений к грибным болезням, но и вызывает ряд эффектов, которые указывают на возможную продукцию данными микроорганизмами гормонов. Биотестирование, проведенное в лаборатории прикладной микробиологии, давало основание предполагать, что этими гормонами могли быть цитоки-нины, что не было до конца установлено. Проблема исследования продукции фитогормонов микроорганизмами, их влияния на рост и развитие растений в первую очередь связана со сложностью достоверного определения регуляторов роста растений. Применение антител к гормонам с целью увеличения селективности детекции и высокая чувствительность иммуноанализа может позволить на новом уровне решить проблему количественного определения гормонов, синтезируемых микроорганизмами.

Все сказанное наметило цель работы, которая состояла в разработке методов идентификации и количественного определения цитокининов, что необходимо для изучения данных гормонов, продуцируемых ризосферными микроорганизмами.

Для достижения указанной цели были поставлены следующие задачи:

1) Сконструировать иммуноферментную тест-систему с расширенной специфичностью для первичного скрининга бактерий, способных к продукции цитокининов.

2) Используя полученную тест-систему, отобрать штаммы-продуценты цитокининов из коллекции культур Института биологии Уфимского научного центра РАН.

3) Разработать методы очистки, разделения и количественного опреде ления отдельных форм цитокининов, синтезируемых микроорганизмами.

Научная новизна. Обнаружено изменение содержания гормонов у растений пшеницы, семена которых были обработаны препаратами на основе ризосферных микроорганизмов-антагонистов фитопатогенов. Создана имму-ноферментная тест-система с расширенной специфичностью, позволяющая выявлять присутствие основных форм гормонов растений из класса цитокининов. С помощью представленной тест-системы среди ризосферных микроорганизмов-антагонистов фитопатогенов был произведен скрининг штаммов, способных синтезировать цитокинины. В результате был выявлен штамм-суперпродуцент цитокининов Bacillus subtilis ИБ-22. Разработана схема количественного определения отдельных форм цитокининов, продуцируемых ризосферными микроорганизмами, включающая иммуноаффинную хроматографию, термообработку, тонкослойную хроматографию и иммуннофермент-ный анализ. Впервые в культуральной жидкости штамма Bacillus subtilis ИБ-22 обнаружена и охарактеризована новая связанная форма цитокининов, представляющая собой комплекс фитогормона с полисахаридом. Установлено, что связь гормона с полисахаридом носит нековалентный характер и ци-токинины макромолекулярного комплекса обладают биологической активностью. Показано, что в состав комплекса преимущественно входят рибозид зеатина и его нуклеотид; минорные компоненты представлены изопентенила-денозином и изопентениладенином.

Практическая ценность. Разработанные методы могут быть использованы для отбора штаммов-продуцентов цитокининов, при мониторинге биотехнологического синтеза цитокининов, а также при изучении взаимодействия микроорганизмов с растениями.

Апробация работы. Основные положения работы были представлены на П-ой Всесоюзной конференции «Регуляторы роста и развития растений» (Москва, 1992), 4-м Объединенном симпозиуме Фламандского общества физиологов растений и Комиссии по физиологии растений Королевского Голландского ботанического общества (Дипенбик, 1993), 5-ом международном симпозиуме по исследованию корней (Южная Каролина, 1996), 1У-ом съезде биохимического общества Российской академии наук (Москва, 1997).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 7 работ.

Автор выражает искреннюю признательность и благодарность своему научному руководителю Веселову Станиславу Юрьевичу за постоянную помощь на всех этапах выполнения работы. Ценные советы, замечания и доброжелательное отношение д.б.н. Кудояровой Г.Р. помогли мне в решении многих вопросов, возникавших в ходе работы. Автор благодарен к.т.н. Ме-лентьеву А.И. за помощь в работе и ценные замечания. Особую признательность автор выражает Симонян М.В. и Хисматуллиной А.Т. за помощь в проведении экспериментов, а также благодарит всех сотрудников лабораторий физиологии растений и прикладной микробиологии за всестороннюю помощь и поддержку.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Цитокинины

Цитокинины - класс растительных гормонов, известный как фактор, «ответственный» за деление клеток (Miller et al., 1955). Первым цитокинином (ЦК), выделенным из растений, был зеатин (Letham, 1963; Letham, 1973). Природные цитокинины являются производными пурина, а именно аденина. Известны также синтетические производные аденина, которые обладают ци-токининовой активностью. Это 6-бензиламинопурин (БАП) и 6-фурфириламинопурин (кинетин). С точки зрения химической природы большинство цитокининов можно разделить на три группы, каждая из которой базируется на трех основных представителях каждой группы, а именно - зеатине (3), дигидрозеатине (ДЗ) и изопентениладенине (ИПА). Все эти соединения могут существовать как в свободном виде, так и в качестве рибозидов (рибоза находится в положении N9 пуринового кольца), риботидов (т.е. фосфатных производных рибозидов) или глюкозидов (глюкоза может находиться в N7 или N9 положении; или присоединяться через кислород в боковой цепи) (Jackson, 1993). Атом углерода в положении 2 может нести в качестве заместителя водорода метальную или метилтиогруппу. По крайней мере около 30 различных цитокининов были идентифицированы с помощью GC/MS, хотя только несколько растительных видов было проанализировано всесторонне (McGaw, 1987).

Существует связь между химической структурой и физиологической активностью. Присоединение дополнительных радикалов к пуриновому кольцу, как правило, снижает цитокининовую активность соединения (Кулаева, 1973; Skoog et al., 1967; Дерфлинг,1985). Стереохимия двойной связи в боковой цепи играет определенную роль в проявлении активности. Присутствующие в природных источниках цис- и транс-формы зеатина активны, однако активность цис-формы в биотесте с каллусом табака значительно ниже (Hall,

Shrivastava, 1968). Хотя в последнее время показана способность взаимопревращения цис- и транс-$(урм (Bassi et al., 1993).

Цитокинины найдены не только в свободном виде, но и в качестве минорных компонентов т-РНК (Nishimura, 1972). Основной цитокинин, встречающийся в т-РНК многих организмов, - рибозид изопентениладенина (ИПАР); он же является единственным цитокинином, который присутствует в т-РНК животных (Robins et al., 1967). В высших растениях и микроорганизмах помимо ИПАР в состав т-РНК входят метилтиоизопентениладенозин, зеатинрибозид (ЗР) и метилтиозеатинрибозид (Armstrong et al., 1976; Petersen, 1973). Все т-РНК, содержащие цитокинины, узнают кодоны, в которых первым основанием является урацил. Цитокининовые нуклеозиды, встречающиеся в т-РНК, всегда находятся в одном положении, примыкая З'-концу антико-дона (Armstrong et al., 1969). Физиологическое значение цитокининовых производных т-РНК в качестве растительных гормонов не было установлено вследствие того, что скорость превращения т-РНК, которая была бы необходима для накопления цитокинина, не была исследована (Letham, Palni, 1983; McGaw, 1987). Имеется ряд доказательств того, что цитокинины в растении скорее всего синтезируется без участия деградации т-РНК (Letham, 1978; Полевой, 1982). Однако, по мнению Р.Хоргана (Horgan, 1992), этот путь образования цитокининов в растении не должен быть полностью исключен.

Прогресс в изучении биосинтеза цитокининов был достигнут благодаря экспериментам на опухолевых тканях. Исследования в области молекулярной биологии Ti плазмиды из бактерии Agrobacterium tumefaciens позволил осуществить клонирование и экспрессию in vitro двух генов, кодирующих ферменты биосинтеза цитокининов (Klee et al., 1984). Дальнейшие исследования позволили установить ключевую реакцию этого процесса. Она представляет собой присоединение диметилаллилпирофосфата в N6 позиции к адено-зинмонофосфату (AMP) при помощи изопентенилтрансферазы с образованием цитокининриботида, М6У2-изопентенилАМР. В настоящее время из экстракта бактерий выделен, очищен и детально охарактеризован фермент, катализирующий эту реакцию (изопентилтрансфераза) (Morris, 1986).

Несмотря на то, что был сделан быстрый прогресс в понимании биосинтеза цитокининов в системе опухолевых тканей, его изучение в нормальных растительных тканях и целом растении все еще остается проблемой. Установлено, что растения обладают ферментами, способными катализировать вышеописанную реакцию (Chen, 1982). То есть, в растительном экстракте была обнаружена активность данного фермента, но до сих пор выделить и очистить его не удавалось (Horgan, 1992). И, несмотря на доказательства включения меченого аденина в цитокинины в отдельных случаях (Wang et al., 1981), явная демонстрация биосинтеза цитокининов в целых растениях и растительных тканях затруднена.

Физиологически важный вопрос о том, как происходит и где локализуется биосинтез цитокининов в растении в настоящее время ясно не освещен (Horgan, 1992). Однако, большинство косвенных данных, а именно: обнаружение цитокининов в пасоке растений (Кулаева, 1973; Palmer,Wong, 1985), резкое снижение содержания этих гормонов в побегах, лишенных корней (Дерфлинг, 1985; Овсянникова, 1985), возрастание уровня цитокининов после укоренения побегов (Тоггеу, 1976), свидетельствуют в пользу того, что цитокинины синтезируются в корнях.

Метаболизм цитокининов включает превращение N6V2-изопентенилАМР в другие ^-замещенные производные аденина (В inns, 1994). Основными превращениями являются дефосфорилирование и дерибо-зилирование, в результате чего образуются рибозиды и свободные основания, соответственно; а также гидроксилирование боковой цепи с образованием производных транс-зеатина и восстановление боковой цепи, в результате которой образуются производные дигидрозеатина. Эти соединения могут также затем метаболизироваться с образованием О-глюкозида зеатина или дигидрозеатина или N-глюкозида в 7 и 9 позициях аденинового основания. Как было показано Торнер, сахара, отличные от глюкозы и рибозы (например, ксилоза) также могут быть присоединены к молекуле цитокининов (Turner et al., 1987). Цитокинины могут деградировать с помощью фермента цитокининоксидазы, которая удаляет изопентильную боковую цепь с образованием аденина или аденозина (Letham, Palni, 1983; Chatfield, Armstrong, 1986; Burch, 1989).

До сих пор остается актуальным вопрос о том, какие цитокинины являются физиологически активными и одинаковы ли они для каждого вида растений и ткани. Цитокининовые рибозиды и их свободные основания - наиболее вероятные кандидаты в «активные» формы (Van Staden, Drewes, 1991). С другой стороны, есть данные о том, что гидролиз рибозидов до соответствующих оснований является непременным условием для проявления биологической активности (Laloue, Pethe-Terrine, 1982). Показано, что N-глюкозиды и аланиновые конъюгаты являются более стабильными и проявляют низкую биологическую активность in vitro (Horgan, 1992; Eklof et al., 1997). Напротив, О-глюкозиды могут деглюкозилироваться и участвовать в регуляции содержания активных цитокининов (Letham, Palni, 1983; Van Staden, Drewes, 1991).

Р.Хорган предлагает определиться между тем, что могут делать экзо-генно примененные цитокинины и как гормоны функционируют эндогенно (Horgan, 1992). В случае цитокининов спектр физиологических эффектов, полученных после внешнего применения гормонов, очень большой; возможно, более широкий, чем у всех остальных гормонов. Разнообразие действия цитокининов приводит к мнению, что они (цитокинины) вовлечены почти во все фазы развития растений (Horgan, 1992).

Наиболее специфическим действием цитокининов является стимуляция клеточного деления. Такая способность цитокининов была обнаружена при работе с культурами клеток (Skoog et al., 1967), большинство из которых не могут делиться, если в среду не добавлен этот гормон. Показана способность цитокининов влиять не только на деление клеток, но и на их растяжение, что наиболее ярко проявляется на примере регуляции цитокининами роста клеток мезофилла листа (Miller, 1963; Кулаева, Цибуля, 1974).

Цитокинины устраняют явление апикального доминирования, стимулируя рост боковых побегов (Aung, 1986; Li, Bangerth, 1990). Они способны активировать прорастание семян, выход клубней и почек древесных видов растений из состояния покоя; ускорять рост побегов и формирование новых почек; задерживать процессы старения (Kende, 1964; Тао et al., 1983) и продлевать жизнь отделенных от растения листьев, предотвращая распад хлорофилла (Кулаева, 1982; Шакирова и др., 1982); уменьшать степень деградации листовых структур (Кулаева, 1982).

Установлено, что цитокинины ингибируют рост корней в длину (Van Staden, Harty, 1988) и особенно формирование боковых корней (Дерфлинг, 1985). Однако, использование низких концентраций гормонов иногда давало стимулирующий эффект (Блохин, 1986; Nandi et al., 1989).

Экзогенные цитокинины ускоряют (Pharis, 1972) и реже ингибируют (Krekule, Seidlova, 1977) инициацию цветения у различных видов растений в зависимости от количества гормонов и времени обработки (Чайлахян, 1988). Они играют важную роль в определении пола цветков. Показано, что ЦК способствует формированию женских цветков у конопли, огурца, кукурузы (Полевой, 1982).

Цитокинины способствуют образованию проводящей системы растений (Гамалей, 1972). Кинетин ускорял дифференцировку вторичной ксилемы древесных растений на ранних стадиях этого процесса (Little, Pharis, 1995).

Цитокинины оказывают влияние на фотосинтетический аппарат, световые реакции фотосинтеза и метаболизм углерода (Чернядьев, 1993), а также на распределение ассимилятов (Борзенкова, Зорина, 1990). Вероятно, названные процессы, как и все перечисленные эффекты, связаны с действием цито-кининов на молекулярном уровне.

Цитокинины влияют на биосинтез нуклеиновых кислот и белков (Ку-лаева, 1982), в том числе и некоторых ферментов: нитратредуктазы (Кузнецов и др., 1986), рибулозобифосфаткарбоксилазы (Павар и др., 1983). Образуя специфический комплекс с белковым рецептором (Chen et al., 1985), цитокинины, по-видимому, усиливают активность РНК-полимераз и матричную активность хроматина (транскрипционный уровень), стимулируют формирование полисом (посттранскрипционный уровень) (Шакирова и др., 1982) и таким образом влияют на клеточный метаболизм (Кулаева, 1973; Кулаева, 1982; Teramoto et al., 1994; Schmulling et al., 1997; Gaudino, Pikaard, 1997). Цитокинины могут также реализовывать регуляторную функцию на уровне мембран (Кулаева, 1982; Полевой, 1982). Они могут влиять на химический состав и функционирование мембран растительной клетки: на фосфорили-рование мембранных белков (Ralph et al., 1976); изменение состава жирных кислот в липидах мембран (Bousquet, Thimann, 1984); активировать локализованные в плазмалемме АТФазы (Kuiper et al., 1991), усиливать работу протонной помпы (Али-Заде и др., 1986), усиливать выход ионов водорода и поглощение ионов калия в замыкающих клетках устьиц и других тканях, изменять pH (Grabski, Schindler, 1996) и величину мембранного потенциала (Полевой, 1982).

Следует отметить, что обработка растений цитокининами в некоторых случаях обеспечивала повышение урожайности растений (Michael, Berringer, 1980). Цитокинины могут оказывать не только прямое влияние на урожайность растений, но и опосредованное. Известно, что они способны повышать устойчивость растений к неблагоприятным условиям (Salisbury, Marinos, 1985). Таким образом, повышение урожайности растений у обработанных цитокининами растений, которые росли в неблагоприятных условиях, можно объяснить тем, что они повышали их устойчивость.

2. Некоторые аспекты практического использования цитокининов.

Одной из целей всех исследований фитогормонов: изучение способа и механизма их действия на организм, путей биосинтеза и катаболизма, раскрытие общих закономерностей, - является их практическое применение.

Несмотря на тот факт, что цитокинины являются наиболее активными среди открытых рост регулирующих веществ, они еще не нашли широкого применения ни в сельском хозяйстве, ни в садоводстве (Thomas, Blakesley, 1987; Кефели, 1988).

Однако исследования в этой области ведутся. В 70-е годы появилось несколько публикаций, в которых цитокинины рассматривались в качестве специфических факторов клубнеобразования у картофеля. Установлено, что изолированные стороны картофеля накапливали меченый кинетин в местах будущего образования клубней (Ved, Yoshi, 1973). Также было показано, что цитокинины в концентрациях, угнетающих рост верхушечной почки, стимулировали образование клубней у отрезков проростков картофеля, выращенных на стерильной питательной среде (Артамонов, 1975).

Опыты, проведенные с разными сортами люпина, фасоли, гороха, кормовыми бобами подтвердили предположение о благоприятном действии ки-нетина на формирование клубеньков на корнях бобовых растений (Арутюнян и др., 1975).

Перспективность применения цитокининов в практике растениеводства связана также с их способностью к индукции органогенеза. Опыты, проведенные на растениях фасоли, у которых перед обработкой кинетином была удалена верхняя часть, показали, что кинетин способствует развитию хороших побегов (Артамонов, 1975). Учет отросшей зеленой массы клевера через 25 суток после скашивания свидетельствовал о том, что воздействие кинетина в концентрации 30 мг/л приводило к ее повышению на 20% (Артамонов, 1975).

Цитокинины участвуют в вегетативном микроразмножении растений, индуцируя образование стеблевых почек у каллусов (Бутенко, 1964). В работе японских авторов (Hisajima, Shigern, 1982) приведены сведения о широком наборе объектов, используемых при микроразмножении из семян и зародышей, - гороха, огурца, тыквы, редьки, кукурузы, риса, арахиса, миндаля, каштана. Показано, что добавление в среду БАП индуцировало образование многочисленных побегов.

Известно, что цитокинины имеют значение для появления зародышевого корешка (Brits et al., 1995). Имеются публикации о том, что обработкой цитокининами может быть прерван покой семян персика (Zigas, Coombe, 1977), хлопчатника (Coal, Wheeler, 1974), огурца, дикой горчицы (Hsia, 1980).

Применением цитокининов в ряде случаев также можно избежать обработки семян холодом. Это объясняется тем, что во время стратификации в семенах накапливаются эндогенные цитокинины, что способствует их прорастанию, а введенные извне фитогормоны могут имитировать обработку холодом (Якушина, 1964).

Д.Шлее сообщает о хороших результатах, достигаемых при хранении свежих фруктов, овощей и, особенно, цветов в случае обработки их кинети-ном (Shlee, 1975).

Имеются сообщения о положительном влиянии кинетина на урожай пшеницы, который увеличивался в результате опрыскивания листьев в фазу цветения и повторно через неделю на 13% за счет увеличения числа (но не размеров) зерен (Тупицын, 1986). Вообще же в литературе имеются как положительные, так и отрицательные данные относительно влияния кинетина на урожай пшеницы (Лихолат и др., 1984; Dua, Bhardwaj, 1979). Это объясняется, очевидно, специфичностью сортов, условиями обработки и рядом факторов внешней среды. Н.Ниловская отмечает, что обработка кинетином пшеницы сорта Мироновская способствовала увеличению урожая только при неблагоприятных условиях выращивания (Ниловская и др., 1984; 1985).

Имеются многочисленные данные, свидетельствующие о том, что ци-токинины способны смягчать последствия деструкционных процессов, вызванных различными стрессовыми факторами: дефицитом питания (Марда-нов, 1985; Кшрег, 81аа1, 1987), промышленными загрязнениями (Бессонова и др., 1984; 1985; Титов и др., 1986; Кузина и др., 1988), засухой (Ниловская и др., 1988; Банджюлене и др., 1990), засолением (КаЬаг, 1987; Кшрег еХ а1., 1990; Тапе]а е1 а1., 1992 ) и т.д. Детально рассмотрена роль экзогенных цито-кининов в физико-биохимических реакциях растений в условиях адаптации растения к неблагоприятным температурам и водному дефициту (Блохин, 1996). Сообщается, что цитокинины, осуществляя индукцию или стимуляцию белкового синтеза, существенно снижали отрицательное воздействие водного стресса (Чернядьев, 1997).

Поиск антистрессовых препаратов среди синтетических аналогов природных цитокининов привел к синтезу картолина, который снижает повреждение растений отрицательными температурами (Бочарова и др., 1986; Трунова и др., 1988) и засухой (Воробейников, Дричко, 1989;), положительно влияя на урожай. По характеру физиологической активности картолин довольно сильно отличается от природных цитокининов (Баскаков, 1988) и демонстрирует лишь узкий ее спектр (Бурханова и др., 1984; Клячко и др., 1987). С помощью биотестов было показано, что картолин проявляет активность только в некоторых из них и в более слабой степени, чем природные цитокинины (Баскаков, 1988).

Отсутствие всего комплекса свойств природных цитокининов характерно для большинства синтетических цитокининподобных соединений. Следует отметить, что в настоящее время арсенал используемых фитогормонов ограничен. Природные фитогормоны, отличающиеся морфогенетическим эффектом, труднодоступны, дороги, а эффективность их синтетических аналогов невысока, и применение последних не окупает затрат на их производство (Мишке, 1988).

Поэтому сейчас внимание исследователей направлено на поиск более простого по способу получения, более дешевого и эффективного источника цитокининов. Наиболее выгодным в этом отношении являются микроорганизмы, способные их синтезировать. Использование фитогормонов микробного происхождения в растениеводстве перспективно также ввиду того, что они являются природными соединениями, не чуждыми растительным организмам (Калниньш, Креслинь, 1974), быстро связываются и катаболизируют-ся в клетке, где уже зачастую имеются рецепторы и специфические ферментные системы (Романов, Таран, 1986; 1991). В отличии от химических веществ они являются препаратами мягкого действия, способны в различных сочетаниях регулировать отдельные процессы онтогенеза, как стимулируя, так и подавляя их (Мишке, 1988).

Заключение диссертации по теме «Физиология и биохимия растений», Архипова, Татьяна Николаевна

5. ВЫВОДЫ:

1. Обнаружено значительное повышение содержания ИУК и цитоки-нинов у растений пшеницы, семена которых перед посевом обрабатывали препаратами на основе ризосферных микроорганизмов-антагонистов фитопа-тогенных грибов.

2. Разработана иммуноферментная тест-система с расширенной специфичностью, позволяющая выявлять присутствие основных форм гормонов растений класса цитокининов.

3. С помощью данной тест-системы из коллекции штаммов ризосферных микроорганизмов-антагонистов фитопатогенных грибов отобраны бактерии, продуцирующие цитокинины, которые могут быть одним из факторов, обеспечивающих обнаруженную'способность указанных штаммов повышать устойчивость и продуктивность растений.

4. Показано, что некоторые штаммы ризосферных микроорганизмов синтезируют неспецифический ингибитор иммунологической реакции, влияющий на результаты иммуноанализа фитогормонов.

5. Предложена новая схема очистки, идентификации и количественного определения цитокининов, продуцируемых ризосферными микроорганизмами. Методика включает иммуноаффинную хроматографию, термообработку, тонкослойную хроматографию и иммуноферментный анализ.

6. Среди аэробных спорообразующих бактерий рода Bacillus выявлен штамм Bacillus subtilis ИБ-22 - суперпродуцент цитокининов. В культураль-ной жидкости указанного штамма впервые выявлена новая форма биологически активных связанных цитокининов, представляющая собой комплекс гормонов с полисахаридом.

7. Цитокинины в макромолекулярном комплексе главным образом представлены рибозидом зеатина и нуклеотидом зеатина. Среди минорных компонентов обнаружены изопентениладенин и изопентениладенозин.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Архипова, Татьяна Николаевна, 1999 год

1. Али-Заде В.М., Ахундова Т.С., Алиева Ф.К. Гормональная регуляция движущих сил транспорта ионов калия и водорода в клетках эпидермиса корня // Изв. АН АзССР. Сер. биол.- 1986.- № 6.- С. 16-21.

2. Андросова В.А., Вятых А.К., Вяткина Г.Г. Подавление корневой и прикорневой гнили озимой пшеницы бактофитом и ризопланом // Тез. докл. семинара-совещания по экологиз. с.-х. пр-ва Сев.-Кавказ. Региона.- Анапа, 1995. С. 74-76.

3. Артамонов В.И. Некоторые аспекты практического использования кинетина// Физиология растений.- 1975.- Т. 22, вып. 6.- С. 1283-1290.

4. Арутюнян Р.Ш., Карапетян H.A., Коладжян H.JI. и др. Влияние регуляторов роста на образование клубеньков у бобовых растений // Проблемы онкологии и тератологии растений.- 1975.- С. 223-225.

5. Афанасьева Л.Б. Использование бактерий в борьбе с белой гнилью подсолнечника // Тез. докл. Всесоюз. Конференции по проблемам создания и применения микробиологических средств защиты растений. Велегож, 1989.-Ч.2.- С. 285.

6. Банджюлене P.C., Блузманас П.И., Кулаева О.Н. Действие картолина-2 совместно с пестицидами, ретардантами и витаминами на продуктивность ярового ячменя в условиях почвенной засухи // Агрохимия.- 1990.- № 2.- С. 104-110.

7. Баскаков Ю.А. Новый антистрессовый препарат цитокининового типа действия // Агрохимия.- 1988.- № 4.- С. 103-105.

8. Беккер Г., Бергер В., Домшке Г. Органикум. М.: Мир, 1979. - С.228-232, 247-250.

9. Бессонова В.П., Лыженко И.И., Михайлов О.Ф., Кулаева О.Н. Влияние цитокинина на рост растений и содержание хлорофилла в листьях в условияхзагрязнения среды // Физиология растений.- 1984.- Т. 31, вып. 6.- С. 11491153.

10. Бессонова В.П., Лыженко И.И., Михайлов О.Ф., Кулаева О.Н. Влияние кинетина на рост проростков гороха и содержание пигмента при избытке цинка в питательном растворе // Физиология растений.- 1985.- Т. 32, № 1.- С. 153-159.

11. Блохин В.Г. Концентрационная зависимость влияния 6-бензил-аминопурина на рост корней растений разных видов // Физиология растений.-1986.- Т. 33, вып. 6.- С. 1084-1089.

12. Блохин В.Г. Устойчивость растений к неблагоприятным температурам, засухе и роль цитокининов в процессе адаптации // Симфер. Гос. Университет. Симферополь, 1996.- 221с.

13. Борзенкова P.A., Зорина М.В. Влияние кинетина и абсцизовой кислоты на фотосинтез, отток и распределение 14С-ассимилятов у растений картофеля // Физиология растений.- 1990.- Т. 37, вып. 3.- С. 546-552.

14. Бочарова М.А., Трунова Т.И., Белоусов A.M., Файзуллин А.Д. Влияние препарата картолин-2 на морозостойкость и урожай озимой пшеницы // Агрохимия.- 1986.- № 3.- С. 109-112.

15. Бурханова Э.А., Федина А.Б., Баскаков Ю.А., Кулаева О.Н. Сравнительное изучение 6-бензиламинопурина, тидиазурона и картолина на рост интактных проростков тыквы // Физиология растений.- 1984.- Т. 31, № 1.- С. 13-19.

16. Бутенко Р.Г. Культура изолированных тканей и физиология морфогенеза растений. -М.: Мир, 1964.- 272 с.

17. Васюк В.А., Андрианова Т.В., Мусатенко Л.И. Цитокинины фитопатогенных грибов Septoria tritici Rob. EX DESM. и Stagonospora nodorum //Укр. ботан. журнал. 1996.- Т. 53, вып. 6.- С. 717-721.

18. Веселов С.Ю., Кудоярова Г.Р. Принципы иммуноанализа применительно к определению гормонов // Иммуноферментный анализрегуляторов роста растений. Применение в физиологии растений и экологии. Уфа, Изд-во НЦ УрО РАН АН СССР, 1990.- С. 8-21.

19. Веселов С.Ю. Использование антител для количественного определения, очистки и локализации регуляторов роста растений и их метаболитов.-Уфа: Изд-е Башкирск. ун-та, 1998.-138 с.

20. Волкогон В.В., Дульнев П.Г., Ковтун Е.П., Носовец Е.И., Онищенко Л.И. Влияние фитогормонов и их синтетических аналогов на активность ассоциативной азотфиксации // Микробиология.- 1996.- Т. 65, № 6.- С. 850854.

21. Воробейников Г.А., Дричко В.Ф. Влияние картолина на устойчивость растений ячменя и пшеницы к засухе и затоплению почвы в критический период // Агрохимия.- 1989.- № 4.- С. 97-101.

22. Гамалей Ю.В. Цитологические основы дифференциации ксилемы. -М.: Наука, 1972.- 145 с.

23. Голышин Н.М. Новые средства защиты растений от болезней // Защита растений.- 1992.- № 8.- С. 50-54.

24. Громовых Т.И., Гукасян В.М., Малиновский А.Л. Использование микробного антагонизма в борьбе с инфекционным полеганием сеянцев хвойных // Сиб. экол. журнал.- 1997,- Т. 4, № 5.- С. 501-504.

25. Дерфлинг К. Гормоны растений. Системный подход. М.: Мир, 1985.206 с.

26. Егоров A.M., Осипов А.П. и др. Теория и практика иммуноферментного анализа.- М.: Высш. шк., 1991.- 596 с.

27. Блинов Н.П. Химия микробных полисахаридов.- М.: Высш. шк., 1987.- 256 с.

28. Ермаков Е.И., Степанова O.A. Изучение микроорганизмов ризосферы растений в ризотоне // Микробиология.- 1992.- Т. 61, вып. 5.- С. 916-923.

29. Звягинцев Д.Г. Почва и микроорганизмы. М.: Изд-во Моск. Ун-та., 1987. - 256 с.

30. Звягинцев Д.Г. Микробы-активаторы и ингибиторы роста растений // Тез. докл. Всесоюз. конф. Микроорганизмы стимуляторы и ингибиторы роста растений и животных.- Ташкент, 1989.- С. 78-80.

31. Звягинцев Д.Г., Добровольская Т.Г., Лысак Л.В. Растения как центры формирования бактериальных сообществ // Журнал общей биол.- 1993.- Т. 54, №2.-С. 183-201.

32. Зикманис П.Б. Спектрофотометрическое определение N6V2-изопентениладенина // Изв. АН Латв.ССР.- 1973.- №11.- С. 94-96.

33. Зикманис П.Б. Определение цитокининов в культуральной жидкости клубеньковых бактерий Rhizobium meliloti D-208 // Изв. АН Латв.ССР,- 1975.-№ 13.-С. 74-78.

34. Казарян Ф.Г., Агаджанян Д.А. Наличие гиббереллиновых веществ в метаболитах микроорганизмов и влияние их на высшее растение // Биол. журнал Армении.- 1971.- Т. 24, № 9.- С. 85-89.

35. Калниньш А.Д., Креслинь Д.П. Микроорганизмы стимуляторы роста растений. - Рига.: Зинатне, 1974.- 122 с.

36. Катаева Н.В., Александрова И.Г., Карягина Т.Б., Машкова А.Х. Возможности метода иммуноферментного анализа для определения фитогормонов в культивируемых in vitro побегах // Физиология растений. -1990.- Т. 37, вып. 4.- С. 813-821.

37. Кефели В.И. Проблема регуляторов роста и устойчивости ее возможности и перспективы // Мат-лы II Всесоюзн. конф. по регуляторам роста и разв.раст., Киев, 25-27 мая, 1988.- Киев, 1988.- С. 3-11.

38. Кефели В.И., Филимонова М.В., Мерван Хусейки Микобиотехнология как основа для получения фитогормонов // Микроорганизмы в с.х.: Тез. докл. 4 Всес. науч. конф., Пущино, 20-24 янв., 1992.- Пущино, 1992.- С. 84-85.

39. Клячко Н.Л., Шрамм И.М., Кулаева О.Н. Влияние тидиазурона и картолина на формирование полисом и рост изолированных семядолей тыквы // Физиология растений.- 1987. Т. 34, № 2.- С. 319-323.

40. Козачко И.А., Вьюницкая В.А., Бережницкая Т.Г., Резник С.Р., Смирнов В.В. Эндофитные бактерии рода Bacillus перспективные культуры для создания биологических средств защиты растений от болезней // Микробиол. журнал.- 1995.- Т. 57, № 5.- С. 69-77.

41. Коломиец Э.И., Здор H.A., Романовская Т.В., Лобанок А.Г. Некоторые аспекты фитозащитного действия Streptomyces ßavesens антагониста фитопатогенных грибов // Прикл. биохимия и микробиология.- 1997.- Т. 33, №5.-С. 508-511.

42. Кудоярова Г.Р., Веселов С.Ю., Каравайко H.H., Гюли-Заде В.З., Чередова Е.П., Мустафина А.Р., Мошков И.Е., Кулаева О.Н. Иммуноферментная система для определения цитокининов // Физиология растений.- 1990.- Т. 37, вып. 1.- С. 193-199.

43. Кузина Г.В., Карникова Л.Д., Калинина Г.А., Трунова Т.И., Штильман М.И. Влияние полистимулина К и 6-бензиламинопурина на покой и морозоустойчивость древесных растений // Физиология растений.- 1988.- Т. 35, № 3.- С. 574-584.

44. Кузнецов В.В., Шиманн И., Заальбах И., Кулаева О.Н. Нитратредуктазы зародышей кукуля, индуцированные цитокинином и нитратом // Физиология растений.- 1986.- Т. 33, вып. 2.- С. 234-243.

45. Кулаева О.Н. Цитокинины, их структура и функции.- М.: Наука, 1973.-263 с.

46. Кулаева О.Н., Цибуля JI.B. Действие цитокинина на рост высечек из этиолированных листьев фасоли // Физиология растений.- 1974.- Т. 21, вып. 4.-С. 709-713.

47. Кулаева О.Н. Гормональная регуляция физиологических процессов у растений на уровне синтеза РНК и белка: 410е Тимирязевское чтение.- М.: Наука, 1982.- 82 с.

48. Лихолат Т.В., Ниловская Н.Т., Помелов A.B., Морозова Э.В. Влияние обработки кинетином на продуктивность и некоторые физиологические показатели пшеницы при различных условиях облученности // Физиология растений.- 1984.- Т. 31, вып. 1.- С. 20-27.

49. Максимова Р.П., Лысак И.И., Игнатович O.K., Фомичев Ю.К. Штамм бактерий Ps. putida биостимулятор роста растений / Пат. 2051586 Россия МКИ А01 N 63/00 С12 N 1/20. Опубл. 10. 01. 96. Бюл. №1.

50. Марданов A.A. Действие цитокининов на рост побегов и корней N-дефицитных растений // Физиология растений.- 1985.- Т. 32, № 6.- С. 11201126.

51. Мелентьев А.И., Еркеев A.M. Изучение антагонизма между почвенными бациллами и микромицетами рода Fusarium Lk : Fr // Микробиол. журнал.- 1990.- Т. 52, № 1.- С. 53-56.

52. Мелентьев А.И., Яхин И.А., Камалетдинова Р.Н. и др. Эффективность бациспецина БМ против болезней злаковых культур // Новые средства и методы защиты растений : Сб. науч. тр. БНЦ УрО РАН.- Уфа, 1992.- С. 93.

53. Мишке И.В. Микробные фитогормоны в растениеводстве.- Рига.: Зинатне, 1988.- 151 с.

54. Мишке И.В., Тевелева М.К., Озолиня.Р.К., Гривиня П. Сфера применения микробных цитокининов // Микроорганизмы в с.х.: Тез. Докл. 4 Всес. Науч. Конф., Пущино, 20-24 янв., 1992.- Пущино, 1992.- С.139.

55. Муромцев Г.С. Регуляторы роста растений и урожай // Вестник с.-х. науки.- 1984.- Т. 33, № 7.- С. 75-83.

56. Никонорова А.К. Особенности взаимодействия Bacillus subtilis с Helmintosporiuim sativim Рат., king et bakke // Микология и фитопатология.-1996.- Т. 30, вып. 5-6.- С. 69-73.

57. Ниловская Н.Т., Помелов A.B., Морозова Э.В., Лихолат Т.В. Влияние кинетина на продуктивность пшеницы, выращиваемой при неблагоприятном температурном режиме // Докл. АН СССР.- 1984.- Т. 274, № 1.- С. 254-256.

58. Ниловская Н.Т., Лихолат Т.В., Помелов A.B., Морозова Э.В. Условия эффективного применения кинетина для повышения урожая пшеницы // С.- х. биология.- 1985.- № 5.- С. 119-121.

59. Ниловская Н.Т., Морозова Э.В., Моисеева Т.В., Моисеев А.Д. Действие кинетина и уровня азотного питания на продуктивность и фотосинтетическую деятельность яровой пшеницы в условиях почвенной засухи // Докл. ВАСХНИЛ. 1988.- Т. 4.- С. 7-10.

60. Новикова И.И., Иващенко В.Г., Калько Г.В., Бойкова И.В., Назаровская Л.А., Литвиненко А.И. Испытание новых биопрепаратов в борьбе с фузариозом колоса // Микология и фитопатология.- 1994.- Т. 28, № 1.- С. 7075.

61. Новикова И.И., Литвиненко А.И., Калько Г.В. Влияние новых биопрепаратов, созданных на основе штаммов микробов-антагонистов, на комплекс возбудителей корневых гнилей огурца // Микология и фитопатология.- 1995.- Т. 29, вып. 5.- С. 46-53.

62. Овсянникова Е.Н. Влияние корневой системы на активность фитогормонов в листьях огурцов // В сб.: Гормонональная регуляция ростовых процессов. М.: Наука, 1985.- С. 59-65.

63. Остерман J1.A. Методы исследования белков и нуклеиновых кислот.-М.: Наука, 1981.- 286 с.

64. Павар С.С., Клячко Н.Л., Романко Е.Г. Активация цитокинином синтеза рибулозобисфосфаткарбоксилазы // Физиология растений.- 1983.- Т. 30, №3.-С. 459-466.

65. Полевой В.В. Фитогормоны. Л.: Изд-во Ленингр. ун-та, 1982.- 249 с.

66. Попкова К.В., Фролякина А.И. Влияние некоторых биологических факторов на развитие возбудителей фузариозного увядания гвоздики ремонтантной // Тез. докл. Всесоюз. конференции «Лимитирование и ингибирование роста микроорганизмов».- Пущино, 1989.- С. 140.

67. Романов Г.А., Таран В.Я. Специфическое связывание зеатина белковой фракции лисьев ячменя и очистка цитокининсвязывающих белков // Физиология растений.- 1986.- Т. 33, вып. 1.- С. 93-102.

68. Романов Г.А., Таран В.Я. Зеатинсвязывающие белки злаков: возрастные, органные, тканевые и субклеточные аспекты // Физилогия растений.- 1991.-Т. 38, вып. 6.-С. 1117-1123.

69. Сердюк О., Смолыгина Л., Лауринавичене Т., Иванова Е. Цитокинины фототрофной пурпурной бактерии Rhodospir ilium rub rum II Автотрофные микроорганизмы: Конф. памяти акад. РАН Е.Н.Кондратьевой. Москва, МГУ, биофак. 23-25 апреля, 1996. М., 1996.- С. 52.

70. Сергеева М.Е., Новикова И.И., Быкова Г.А. Антагонистическая активность бактерии Bacillus sp. в отношении возбудителей бактериозов овощных культур // Тез. докл. конференции «Интродукция микроорганизмов в окружающую среду».- Москва, 1994.- С. 91.

71. Смирнов В.В., Резник С.Р., Василевская И.А. Спорообразующие аэробные бактерии продуценты биологически активных веществ. - Киев: Наука думка, 1982.- 280 с.

72. Сидоренко О.Д., Стороженко В.А., Кухаренкова О.В. Использование ассоциативных микроорганизмов для повышения урожайности картофеля // Тез. докл. 4 Межд. науч. конф. СОИСАФ «Биол. азот и растениеводство».-Москва, 1996.-С. 130-132.

73. Титов А.Ф., Дроздов С.Н., Критенко С.П., Таланова В.В., Шерудило Е.Г. Влияние цитокининов на холодо- и теплоустойчивость активно вегетирующих растений // Физиология и биохимия культ, растений.- 1986.- Т. 18, № 1.- С. 64-69.

74. Трунова Т.И., Кузина Г.В., Бочарова М.А., Астахова Н.В. Рост и морозостойкость растений // Рост и устойчивость растений / Отв.ред Салаев Р.К., Кефели В.И.- Новосибирск: Наука, 1988.- С. 133-144.

75. Тупицын И.В. Влияние экзогенных фитогормонов на развитие озимой пшеницы // Физиология и биохимия культ, растений.- 1986.- Т. 19, № 4.- С. 402-403.

76. Филимонова М.В., Талиева М.П. Содержание физиологически активных веществ (фитогормонов) в культуре фитопатогенных грибов рода Botrytis // Изв. АН СССР. Сер. биол.- 1989.- № 4,- С. 540-546.

77. Фрайфелдер Д. Физическая биохимия. М.: Мир, 1980.- 410 с.

78. Феоктистова Н.В. Микробная биотехнология и растения .- Казань: Изд-во Казан, гос. ун-та, 1997.- 15 с.

79. Чайлахян М.Х. Регуляция цветения высших растений.- М.-.Наука, 1988.- 560 с.

80. Чернядьев И.И. Фотосинтез и цитокинины // Прикл. биохимия и микробиология.- 1993.- Т. 29, вып. 5.- С. 644-673.

81. Чернядьев И.И. Фотосинтез растений в условиях водного стресса и протекторное влияние цитокининов // Прикл. биохимия и микробиология.-1997.-Т. 53, № 1.-С. 5-17.

82. Чертова Т.С. Биометод: взгляд оптимиста // Защита и карантин растений.- 1996.- № 8.- С. 4-6.

83. Шакирова Ф.М., Конрад К., Клячко Н.Л., Кулаева О.Н. Связь между действием цитокинина на рост изолированных семядолей тыквы и синтезом в них РНК и белка // Физиология растений.- 1982.- Т. 29, № 1.- С. 52-61.

84. Якушина И.И. Регуляторы роста растений. Воронеж, 1964. -169 с.

85. Akiyoshi D.E., Regier A.D., Gordon М.Р. Cytokinin production by Agrobacterium and Pseudomonas spp.H J. of Bacteriology.-1987.- V.169, № 9.-P.135-140.

86. Arshad M., Frankenberger W. Microbial production of plant hormones // Plant and Soil. -1991.- V.133.- P.l-8.

87. Armstrong D., Burrows W., Skoog F. Cytokinin in transfer RNA species of Escherichia colill Proc. Nat. Acad. Sci. USA.- 1969.- V.63. P. 834-841.

88. Armstrong D.J., Scarbough E., Skoog F., D.L., Leonard N.J. Cytokinins in Corynebacterium fascians cultures. Isolation and identification of 6-(4-hydroxy-3methyl-cis-2-butenyl-amino)-2 -methylthio-purine // Plant Physiol.- 1976.- V.58.-P. 749-752.

89. Arora N., Skoog F., Allen O.N. Kinetin-induced pseudonodules on tobacco roots // Am. J. Bot.- 1959.- V. 46,- P. 610-613.

90. Aung L.H. Action of cytokinins and anticytokinins on cotyledonary bud growth of Lycopersicum esculentum Mill.// Biol. Plant.- 1986.- V. 28, № 6.- P. 407-411.

91. Azcon R., Barea J. Synthesis of auxins, gibberellins and cytokinins by Azotobacter vinelandii and Azotobacter bijerinkii related to effects produced on tomato plants // Planta Soil.- 1975.- V. 43.- P. 609.

92. Baker R. Mechanisms of biological control of soil-borne pathogens // Ann. Rev. Phytopathol.- 1968.- V. 6.- P. 263-294.

93. Barea J.M., Brown M.E. Effects of plant growth produced by Azotobacter paspali related to synthesis of plant growth regulating substances // J. Appl. Bacterid.- 1974.- V. 40.- P. 583-599.

94. Bassi N.V., Mok D.W.S., Mok M.C. Partial purification of cis-trans-isomerase of zeatin from immature seed of Phaseolus vulgaris L. // Plant Physiol.-1993.-V. 102.-P. 867-872.

95. Beinsberger S., Valcke R., Deblaere R.Y. et al. Effects of the introduction of Agrobacterium tumefaciens T-DNA ipt gene in Nicotiana tabaccum L. cv. Petit Havana SR-1 plant cells // Plant Cell Physiol. 1991. - V. 32, № 4. - P. 489.

96. Bergey's Manual of Determinative Bacteriology. 8th ed. Baltimore : Wiliams and Wilking Co, 1974. - 576 p.

97. Biddington N.L., Thomas T.H. A modified Amaranthus betacyanin bioassay for the rapid idetermination of cytokinins in plant extracts // Planta.- 1973.- V. 111, № l.-P. 183-186.

98. Binns A.N. Cytokinins accumulation and action: biochemical, Genetic and Molecular approaches // Annu. Rev. Plant Physiol.- 1994.- V. 45.- P. 173-196.

99. Blondeau R. Nature d'une cytokinine presente dans les cultures de certains Arthrobacter II C.R.Acad.Sci. 1974.- V.D.297.- P. 1571- 1574.

100. Blondeau R. Contribution a l'etude au niveau de la rhisosphere // These doct. sci. nat. Lill.- Univ.Soet.Techn. 1985.- P. 212-215.

101. Bochow H. Phytosanitary effects of Bacillus subtilis as biocontrol agent // Univ. Gent.- 1992.- V. 57, № 2,- P. 393-395.

102. Bochow H., Hentschel K.D. Phytosantare Wirkungen einer Bakteriisierung von Gemusesamen und -samlingen mit Bacillus subtilis II Mitt. Biol. Bundesanst. Land- und Forstwirt.- 1994.- № 301.- P. 134.

103. Brown M.E. Seed and Root Bacterization // Ann. Rev. Phytopathol.- 1974.-V. 12.-P. 181-183.

104. Brenner M.L. Modern methods for plant growth substance analysis // Ann. Rev. Plant Physiol.- 1981.- V. 32,- P. 511-538.

105. Brits G.J., Cutting J.G.M., Brown M.A., Van Staden J. Environmental and hormonal regulation of seed dormancy and germination in Cape fyntos Leucospermum R. Br. Species : A work model // Plant Growth Regul.- 1995,- V. 17, №3.-P. 181-183.

106. Burch L.R., Horgan R. The purification of cytokinins oxidase from Zea mays kernels // Phytochemistry.- 1989.- V. 28.- P. 1313 -1319.

107. Buysens S., Scheffer R.J. Screening systems for biocontrol and growth promotion // JOBS / PRS Bulletin.- 1992.- V. 15, №. 1.- p. 145-146.

108. Campbell R. The use of microbial inoculants in the biological control of plant diseases // Microbial Inoculat. Crop Plants: Meet. Ecol. Group Soc. Microbial., Warwick, 14 Apr., 1988.- Oxford etc, 1989.- P. 67-77.

109. Chanway C.P, Holl F.B. Growth of outplanted lodgepole pine seedings one year after inoculation with plant growth promoting rhizobacteria // Forest ScL-1994. v. 40, № 2.- P. 238-246.

110. Chatfield J.M., Armstrong D J. Regulation of cytokinin oxidase activity in callus tissues of Phaseolus vulgaris L. cv Great Northern // Plant Physiol.- 1986.-V. 80.- P. 493-499.

111. Chen C.M. Cytokinin biosyntes free systems // In: Plant Growth Substanses (Ed. P.F.Wareing). London: Academic Press, 1982.- P. 155-163.

112. Chen C.-M., Ertl J.R., Leisner S., Chang C.-C. Localization of cytokinin biosynthesis sites in pea plants and carrot roots // Plant Physiol.- 1985.- V. 78.- P. 510-513.

113. Chen B., Jir P., Mei R. Observation of hormones produced by yield increasing bacteria (YIB) // 6th Int. Symp. Microb. Ecol. (ISME-6), Barselona, 611 Sept., 1992.: Abstr.-P. 258.

114. Coal D.T., Whewler J.E. Effect of pregermination treatments on germination and growth of cotton seed at suboptimal temperatures // Crop Sci.-1974.- V. 14.-P. 451.

115. Constantinov H.A., Kozlowski T.T., Upper C.D. Binding capacity and possible analytic aplication of the cytokinin-binding antibody, anti-N6-benzyladenin // Plant Physiol.- 1978.- V. 62, № 3.- P. 969-974.

116. Cooper R. Bacterial fertilizers in the Soviet Union // Soil Fertilizers.-1959.-V. 22.-P. 327-333.

117. Coppolla S., Giannattasio H. Activita citockinica in un actimicete rizosherico //Boll. Sci. Ital. Biol. Sper. 1968.- V. 44.- P. 1913-1915.

118. Crozier A., Sandberg G., Monteiro A.M., Sundberg A. The use of immunological teckniques in plant hormone analysis // Plant Growth substanses. (Proc. 12th Int. Conf., Heidelberg, August 26-91, 1985).- Berlin etc.: SpringerVerlag, 1986.- P. 13-21.

119. Davison J. Plant beneficial Bacteria // Biotechnology.- 1988.- V. 6, № 3.- P. 282-285.

120. Dobereiner J., Marrier I.E., Nery M. Ecological distribution of Spirillum lipoferum // Can. J. Microbiol.- 1976,- V. 22.- P. 1464-1473.

121. Dua J.S., Bhardwaj S. Influence of growth regulating substances on grain growth in aestivum wheats // Ind. J. Plant Physiol.- 1979.- V. 22.- P. 1.

122. Eberle J., Wang T.L., Cook S., Wellse B., Weiler E.W. Immunoassey and ultrastructural localization of isopentenyladenine and related cytokinins using monoclonal antibobies // Planta.- 1987.- V. 172, № 2.- P. 289-297.

123. Eklof S., Astot C., Blackwell J., Moritz T., Olsson O., Sandberg G. Auxin-cytokinin interaction in wild-type and transgenetic tobacco // Plant and Cell Physiology.- 1997.- V. 38, № 3.- P. 225-235.

124. Erlanger B.F., Beiser S. M. Antibodies specific for ribonucleosides and ribonucleotides and their relation with DNA // Proc. Natl. Acad. Sci. USA.- 1964.-V. 52, №1.-P. 68.

125. Ernst D., Schafer W. and Oesterhelt D. Isolation and quantitation of isopentenyladenosine in an anise cell culture by sigle-ion monitoring, radioimmuunoassay and bioassay // Planta.- 1983.- V. 159.- P. 216-221.

126. Evans M.L. Function of hormones at the cellular level of organization // Encycl. Plant. Physiol. 10. Berlin etc.:Springer-Verlag, 1984.- P. 23-79.

127. Ferrua B., Mollano G., Ly B. An enzyme immunoassay design using labelled antibodies for the determination of haptens // J. Immunol. Meth.- 1983.-V. 60, № l.-P. 257-261.

128. Gaudino R.J., Pikaard C.S. Cytokinin induction of RNA-polymerase-I transcription in Arabidopsis thaliana II J. of Biological Chemistry.- 1997.- V. 272.-P. 6799-6804.

129. Giannattasio M., Coppola S. Isolamento di citochinine dal Rhizobium leguminosarum Frank // Giorn. Bot. Ital.- 1969.- V. 103.- P. 11-17.

130. Grabski S, Schindler M. Auxins and cytokinins as antipodal modulators of elasticity within the actin network of plant cells // Plant Physiol.- 1996.- V. 110.- P. 965-970.

131. Grappelli A, Pietrosant W. Effecti dell'adenina produzione di cytokinine in culture di Arthrobacter sp. Asotofissatore // Ann. Microbiol. Enzimol.- 1977.- V. 27.-P. 151-155.

132. Green E. Cytokinine production by microorganisms // Bot. Rev.- 1980.- V. 46, № 1.-P. 25-74.

133. Grote D. Pathogenbendefall im Wurzelbereich bei hydroponisch augebauten Gemuse // Mitt. Biol. Bundesanst. Land- und Forstwirt. BerlinDahlem.- 1992,- № 283.- P. 188.

134. Hall R, Shrivastava B. Cytokinin activity of compounds obtained fr>m soluble RNA//Life Sci.- 1968.-V. 7, № 11.-P. 7-13.

135. Harman G.E, Nelson E.B. Mechanisms of protection of seed and seedling by biological disease control // Proc. Symp. Brit. Crop Prot. Counc, Canterbury, 57 Jan, 1994.-Farnham, 1994.- P. 283-292.

136. Hedden P. Modern methods for the quantification of plant hormones // Ann. Rev. Plant Physiol, and Plant Mol. Biol. 1993,- V. 44.- P. 107-129.

137. Heindle J.C, Carlson D.R, Brun W.A., Brenner M.L. Ontogenetic variation of four cytokinins in soybean root pressue exudate // Plant Physiol.- 1982.- V. 70.-P. 1619-1625.

138. Hisajima G, Shigern N. Microplast propagation through multiple shoot formation from seed and embryos // Proc. 5th Intern, congr. plant tissue and eel1 cultures.- Tokyo, 1982.-P. 141-142.

139. Hoffman P.J., Featonby Smith B.C., Van Staden J. The development of ELISA and RIA for cytokinin estimation and their application to a study of lunar periodicity in Echlonia maxima (osbeck) Papenf. // J. Plant Physiol.- 1986.- V. 122, №5.-P. 455.

140. Hoflich G, Leske B, Herrendorf K. et al. Verfahren zur Kulturflanzen mittels phytohormonbildender, phosphormobilisieren- der antagonistisch wirkender Pseudomonas Bakterien : Пат. 295152 ГДР , МКИ С 05 А 11/08. - Опубл. 24.10.91.

141. Hoflich G. Wechseldeziehungen swischen phytoeffektiven Pseudomonas -Bakterien und dem Wachstrum von Kulturflanzen // Zbl. Mikrobiol.- 1992.- V. 147, №3-4.- P. 182-191.

142. Hoflich G, Wiehe W, Kuhn G. Plant growth stimulation by inoculation with symbiotic and associative rhizosphere microorganisms // Experientia.- 1994.-V. 50, № 10.-P. 897-905.

143. Hoflich G., Liste H.-H, Kohn S. Interaktionen ausgewählter Mikroorganismen in der Rhizosphare von Leguminosen und Mais // Bodenkultur.-1996.-V. 47, № l.-P. 15-22.

144. Holl F.B, Chanway C.P. Rhizosphere colonisation and seedling growth promotion of logepole pine by Bacillus polymyxa II Can. J. Microbiol.- 1992.- V. 38, № 4.- P. 303-308.

145. Horgan R. Present and future prospects for cytokinin research // Physiology and Biochemistry of cytokinis in plants / Eds. Kaminek M, Mok D.W.S, Zazimalova E.- The Hague: Academic Publ.,1992.- P. 3-13.

146. Jackson M.B. Are plant hormones involved in root to shoot communication? //Adv. in Bot. Research.- 1993,- V. 19,- P. 107-187.

147. Jackson A.O., Taylor B. Plant-microbe interactions: Life and death at the interface //Plant cell.- 1996.- V. 8, № 10.- P. 1651-1668.

148. John M. Transmembrane orientation and receptor-like structure of the Rhizobium meliloti common nodulation protein nod C. EMBO.- 1988.- P. 583-588.

149. Jones H.G. Correction for Non-specific Interference in Competitive Immunoassays // Physiol. Plant.- 1987.- V. 70, № 2.- P. 146-154.

150. Kabar K. Alleviation of salinity stress by plant growth regulators on seed germination//J. Plant Physiol. 1987,- V. 128, № 1-2.- P. 179-183.

151. Kaiss-Chapman R.W., Morris R.O. Trans-zeatine in culture filtrates of Agrobacterium tumefaciens // Biochemical and biophysical Research communications.- 1977.- V. 76, № 2.- P. 453-459.

152. Kaminek M. Bioassays for cytokinins: problems and improvment // Plant Growth Regulators.- Sofia, 1983.-P. 179-185.

153. Kampert M., Strzelczik E. The syntesis of cytokinine-like substances by coryneform of pine seedlings // Acta Microbiol. Pol.- 1980. V. 29, № 2.- P. 117124.

154. Kende H. Preservation of in leaf sections by substanses obtained from root exudate//Science.- 1964.-V. 145.-P. 1066-1067.

155. Kiraly Z., Pozsar I., Hammady M. Increased cytokinin activity on rust infected bean and broad bean leaves // Phytopathology.- 1966.- V. 57.- P. 93-94.

156. Klambt D. Nachweis eines Cytokinins aus Agrobacterium tumefaciens und sein Vergleich mit dem Cytokinin aus Corynebacterium fascians II Wiss. Ztschr. Univ. Rostock. Math.- Naturwiss. Reihe.- 1967,- Bd 16.- S. 623-625.

157. Klee H., Montoya A., Horodyshi F., Lichtenstein C., Garfinkle D. et al. Nucleotide sequenxe of the tms genes of thr pTi A6NC octopine Ti plasmid: twogene products involved in plant tummorigensis I I Proc. Nat. Acad. Sci USA.-1984.-V. 81.-P. 1728-1732.

158. Kloepper J.W, Lifshitz R, Zablotowicz R.M. Free-living bacterial inocula for crop productivity // Trenda Biotechnol.- 1989.- V. 7, № 1.- P. 39-44.

159. Krekule J, Seidlova F. Effect of exogenous cytokinins on flowering of the short-day plant Chenopodium rubrum L. // Biol. Plant.- 1977.- V. 19, № 2.- P. 142149.

160. Kuiper D, Staal M The effect of exogenously applied plant growth substances on the physiological plasticity in Plantago mayor ssp. plesiosperma: responses on growth, shoot to root ratio and respiration // Physiol. Plant.- 1987.- V. 4.- P. 651-658.

161. Kuiper D, Scuit J, Kuiper P.J.C. Actual cytokinin concentrations in plant tissue as an indicator of salt resistance in cereals // Plant and Soil.- 1990.- V. 123, № 1. p. 243-250.

162. Kuiper D., Sommarin M, Kylin A. The effects of mineral nutrition and benzyladenine on the plasmalema ATPase activity from roots of wheat and Plantago major ssp. Pleiosperma // Physiol. Plant.- 1991.- V. 81.- P. 169-174.

163. Kunst A, Draeger B, Ziegenhorn J. Colorimetric Methods with Glucose Oxidase and Peroxidase // Methods of Enzymatic Analisis.- 1984.- V. 1- P. 178185.

164. D.M., Alexander M. Factors affecting co-inoculation with antibiotic-producing to enhance rhizobial colonization and nodulation // Plant and Soil.-1990.- V. 129, № 2.- P. 195-201.

165. McDonald E., Akiyoshi D.E., Morris R.O. Combined HPLC Radioimmunoassay for Cytokinins // J. of Chromatography.-1981.- V. 214.- P. 101-109.

166. McDonald E., Morris R.O. Isolation of Cytokinins by Immunoaffmity Chromatography and Analysis by HPLC Radioimmunoassays // Methods Enzimol.-1981.- V. 110,- P. 346-358.

167. McDonald E.M.S., Powell G.K., Regier D.A. Selection of zeatin, ribosylzeatin and ribosyl-l-methylzeatin by Pseudomohas savastanoi II Plant Physiol.- 1986.- V. 82.- P. 742-747.

168. McGaw B.A. Cytokinin metabolism // Plant Hormones in Search of a role. Monograph 14 ( R.Horgan and B.Jeffcoat, eds.). Bristol: British Plant Growth Regulation Group, 1987.- P. 9-17.

169. Michael J, Beringer H. The role of hormones in yield formation // In: Physiol. Aspects. Crop. Prod.- Berlin: Wobflanfen, 1980.- P. 85-116.

170. Miller C, Skoog F, van Saltza M, Strong F. Kinetin: a cell division factor from deoxyribonucleic acid // J. Amer. Chem. Soc.- 1955.- V. 77.- P. 1329.

171. Miller C. Kinetin and kinetin-like compound // Modern Methoden der Pflanzenanalyse.- 1963.- V. 6.- P. 194-202.

172. Miller C. Zeatin and Zeatin riboside from a Mycorrhyzal fungus // Science.-1967.-V. 157.-P. 1055-1057.

173. Miller C. Cytokinin production by mycorrhizal fungi Mycorrhizal. -Washington D.C, 1971. № 1189.- P.

174. Milosevic N, Govedarica M, Jarak M. Effect inoculation wilt different strains of Azotobacter chroococcum and Azospirillum lipofesum on some vegetables // Proc. of 10th Inter. Congr. on Nitrogen Fixation. St.Petersburg, Russia.- 1995.- P. 771.

175. Miura G, Miller C. 6-dimethylallylaminopurine as a precursor of zeatine // Plant Physiol.- 1969.- V. 44,- P. 372-376.

176. Morris R.O. Genes specifying auxin and cytokinin biosynthesis in pathogens // Annu. Rev. Plant Physiol.- 1986.- V. 59.- P. 509-538.

177. Morris R.O, Jameson P.E. Rapid Identification of Cytokinins by an Immunological Method // Plant Physiol.- 1991.- V. 95.- P. 1156-1161.

178. Muller P, Muller R, Motte G. Einsatz mikrobieller Antagonisten gegan samen- und bodenburtige pilzliche Schaderreger. Eine Alternative zum chemischen Pflanzenschutz // Feldwirt schaft.- 1991.- V. 32, № 3.- P. 112-115.

179. Muller R. Einsatz mikrobieller Antagonisten gegan boden- und samenburtige Fusariumbefall an Winterweizen: Pflanzenschutz-Tag. // Mitt. Biol. Bundesanst. Land- und Forstwirt. Berlin; Dahlem, 1992.- P. 283-381.

180. Murai N. Cytokinin biosynthesis and its relationship to the presence of plasmids instrains of Corynebacterium fascians II Metabolism and molecular activity of Cytokinins. Proc. Intern, colloq., Gif-sur-Yvette, 1980. Berlin etc., 1981. -213 p.

181. Murphy A.M., Pryce-Jones E., Johnstone K., Ashby A.M. Comparison of cytokinin production in vitro by Pyrenopeziza Brassicae with other plant pathogenes // Physiol, and Mol. Plant Pathol.- 1997.- 50, № 1.- P. 53-65.

182. Nandi S.K., Letham D.S., Palni L.M.S., Wong O.C., Summons R.E. 6-Benzylaminopurine and its glycosides as naturally occuring cytokinins // Plant. Sci.- 1989.-V. 61.-P. 189-196.

183. Napier R.M., Venis M.A. Receptors for plant growth regulators: recent advances // J. Plant Growth Regul.- 1990.- V. 9.- P. 113-126.

184. Nicander B., Stahl U., Bjorkman P., Tillberg E. Immunoaffinity co-purification of cytokinins and analysis by high-performance liquid chromatograghy with ultraviolot-detection // Planta.- 1993.- V. 189.- P. 312-320.

185. Nieto K.F., Frankenberger W.T. Determination of CK by ion suppression-chromatography // J. Liq. Chrom.- 1988.- V. 11,- P. 2907-2925.

186. Nieto K.F., Frankenberger W.T. Biosynthesis of cytokinins produced by Azotobacter chroococcum II Soil Biol. Biochem.- 1989.- V. 21,- P. 967-972.

187. Nieto K.F., Frankenberger W.T. Microbial production of cytokinins // Soil Biochemistry.- 1990.- V. 6,- P. 191-248.

188. Nishimura S. Minor components in transfer RNA: their characterization, location and function // Progress Nucl. Resaerch Molecular Biol.- 1972.- V. 12.- P. 49-85.

189. Normanly J. Auxin metabolism // Physiol. Plant.- 1997.- V. 100.- P. 431442.

190. Omar S.A., Abd-Alla M.H. Enhancement of faba nodulation, nitrogen fixation and growth by different microorganisms // Biol, plant. 1994.- V. 36, № 2.- P. 295-300.

191. Osman A.R., Fahim M.M., Abd-Elkader M.M. Biological control of lupin wilt II Egipt. J. Phytopathol.- 1986.- V. 18, № 1.- P. 11-25.

192. Palmer M.V., Wong O.C. Identification of cytokinins from xylem exudate ofPhaseolus vulgaris L. //Plant Physiol.- 1985.- V. 79, № i. p. 296-298.

193. Palni I.M.S., Horgan R., Darral N.M., Stuchbury N., Warieng P.F. Cytokinin biosynthesis in crown-gall tissue of Vicea rosea. The significance of nucleotides // Planta.- 1983.- V. 159.- P. 50-59.

194. Patau K., Das N.K., Skoog F. Inducation of DNA synthesis by kinetin and indoleacetic acid in excised tobacco pith tissue // Physiol. Plant 1957.- V.10.- P. 949-966.

195. Patil G.S., Strikant Kulkarni, Hegde R.K. Antagonistic action of species of Trichoderma, Bacillus and Streptomyces on Drechlera sorokiniana ( Sace ) Subram and Jain // Pesticidez.- 1987,- V. 21, № 12.- P. 22.

196. Pengelly W., Meins F. A specific radioimmunoassay for nanogram quantities of the auxin, indole-3-acatic acid // Planta.- 1977.- V. 136, № 1,- P. 173178.

197. Pengelly W. Validation of immunoassays // Plant Growth substanses. ( Proc. 12th Int. Conf., Heidelberg, August 26-29., 1985).- Berlin etc.: Springer -Verlag.- 1986.-P. 35-43.

198. Petersen M. Identification of a cytokinin, 6-(3-methyl-2-butenylamino)purine in sea water and the effect of cytokinins of broun algae // Physiol. Plantarum.- 1973.- V. 28.- P. 101-105.

199. Pharis R.P. Flowering of Chrisanthemum under non-inductive long days by gibberellins and N6-benziladenine // Planta.- 1972.- V. 105, № 3,- P. 205-212.

200. Phillips D., Torrey J. Studies of cytokinin production by Rhizobium II Plant Physiol.- 1972.- V.49,№ l.-P. 11-15.

201. Ploper L.D. New alternatives in biological control of plant disease // Commun. Biol.- 1993.- V. 11, № 3.- P. 248.

202. Prinsen E, Redig P,Strnad M. Quantifying Phytohormones in transformed plants // Methods in Molecular Biology, vol. 44, Agrobacterium Protocols / Eds. K.M.A.Gartland, M.R.Davey. Totowa Humana Press Inc. 1995.- P. 245-261.

203. Puppo F., Rigaud J. Cytokinins and morphological aspects of French-bean roots in the presence of Rhizobium // Physiol. Plant.- 1978.- V. 42.- P. 202-206.

204. Rademacher J.E, Graebe J.E. Isolation and analysis by gas-liquid chromatograghy of auxins, gibberellins , cytokinins and abscisic acid from single sample of plant material // Ber. Deutsch bot. gas.- 1984.- V. 97, № 1.- P. 75-81.

205. Raheem R, Shaishoury A. Effect of St.corchorusii, St.mutabilis on the control of bacterial and Fusarium wilt of tomato // Can. J. Bot.- 1996.- V. 74, № 7.-P. 1016-1022.

206. Rathbone M.P, Ross H. Concerning the Presence of the Cytokinin, N6-isopentenyladenine, in culture of Corynebacterium fascians II Planta.- 1972.- V. 108.- P. 93-102.

207. Reeve D.R, Crozier A. Quantitative analysis of plant hormones // Hormonal Regulation of Development, Berlin etc.: Springer-Verlag.- 1980.- 203 p.

208. Robins M.J, Hall R.H, Thedford R. N6-isopentenyladenosine. A component of the transfer ribonucleic acid of yeast and of mammalian tissue: method isolation and characterization // Biochemistry.- 1967.- V. 6.- P. 1837-1848.

209. Rubenchik L.I. Azotobacter and its use in Agriculture // Jerusalem: Israel Program for Scientific Translation.- 1963.- 278 p.

210. Sadlers H.M, Keuken O, Sikora R. A, Lenz F. In vitro Versuche und Freilanduntersuchunger zur Wirkung von Bacillus subtilis auf Tomate 11 Mitt. Biol. Bundesanst. Land- und Forstwirt. Berlin-Dahlem.- 1994.- № 301.- P. 372-379.

211. Salisbury F.B, Marinos N.G. The ecological role of plant growth substances. Hormonal regulation of development. III. Berlin etc,: SpringerVerlag.- 1985.- P. 707-764.

212. Sandberg G., Lung K., Aim P. Precision and accuracy of radioimmunoassay in the analysis of endogemous 3-indoleacetic acid from needles of scot pine // Phytochemistry.- 1985.- V. 24.- P. 1435.

213. Sattar M.A., Gaur A.C. Production of auxins and gibberellines by phosphate dissolving microorganisms // Zentralbl. Microbiol.- 1987,- V. 142.- P. 393-395.

214. Scarbrough E., Armstrong D., Skoog F. Isolation of cis-zeatin from Corynebacterium fascians cultures // Proc. Nat. Acad. Sci. USA.- 1973.- V. 70, № 12.-P. 3825-3829.

215. Scheng-Ming T.I. Biological control of basal stem root of chrysenthemum by antagonists // J.Phytopathol.- 1989.- V. 126, № 4.- P. 313-323.

216. Schlee D. Cytokinine in Mikroorganosmen // Pharmacie.- 1975.- BD 30, № 6.- P. 245-249.

217. Schmiedeknecht G. Effect of antagonistic Bacillus strains on Rhizoctonia solani Kuhn infection of potatoes // JOBC / WPRS Bulletin.- 1992.- V. 15, № 1.- P. 139-141.

218. Schmulling T., Schafer S., Romanov G. Cytokinin as regulators of geneexpression // Physiol. Plant.- 1997.- V. 100.- P. 505-519.

219. Sembdner G., Adsorn R., Schneider G. Plant hormone conjugation // Plant Mol. Biol.- 1994.- V. 26.- P. 1459-1481.

220. Shishido M., Massicotte H. B., Chanway C.P. Effect of Plant Growth Promoting Bacillus Strains on Pine and Spruce Seedling Growth and Mycorrhizal Infection // Ann. of Botany.- 1996.- V. 77.- P. 433-441.

221. Skoog F., Hamzi H.Q., Szweykowska A.M., Leonard N.Y., Carraway K.L. et al. Cytokinins: structure activity relationships // Phytochemistry.- 1967.- V. 6, № 5.-P. 1169-1192.

222. Stevens G.A., Berry F.M. Cytokinin secretion by Frankia sp. HFPArl3 in defined medium // Plant Physiol.- 1988,- V. 87.- P. 15-16.

223. Sturtevant D.B.,Taller B.J. Cytokinin Production by Bradirhizobium japonicum II Plant Physiol.- 1989.-V. 89.-P. 1247-1252.

224. Surico G, Sparapano L, Gerario P. Cytokinin activity in extract from culture filtrates of Pseudomonas savastanoi II Experimentia.- 1975.- V. 31, № 1.-P. 929-930.

225. Taller B.J, Tit-Yee Wong. Cytokinins in Azotobacter vinelandii culture medium 11 Appl. and environmental Microbiology.- 1989.- V. 55, № 1.- P. 266267.

226. Tanaka I, Abe M, Uchiyama M. Isopentenyladenine from Dictyostellium discoideum II Phytochemistry.- 1978.- V. 17, № 3,- P. 543-544.

227. Taneja R, Varma S.K, Dayal J, Datta K.S. Effect of kinetin on water relation, photosynthesis, respiration and chlorophyll and nucleic acid contents of wheat (Triticum aestivum L.) grown under salinity // Biol. Plant.- 1992.- V. 34, № 1-2.- P. 85-91.

228. Tao G.Q, Letham D.S, Palni M.S., Summons R.E. Cytokinins biochemistry in relation to leaf senescence. I. The metabolism of 6-benzylaminopurine and zeatin in oat leaf segments // J. Growth Regul.- 1983.- V. 2.- P. 89-102.

229. Teramoto H, Momotani E, Takeba G, Tsuji H. Isolation of cDNA Clone for a cytokinin- repressd gene in excised Cucumber cotyledons // Planta.- 1994.- V. 193.- P. 573-579.

230. Thimann K, Sacha T. The role cytokinins in the farciaticus disease caused by Corynobacterium fascians II Amer. J. Bot.- 1966.- V. 53.- P. 731-739.

231. Thomas H, Blakesley D. Practical and potential uses of cytokinin in Agriculture and Horticulture // Plant Hormones in Search of a role. Monograph 14 ( R.Horgan and B.Jeffecoat, eds.).- Bristol: British Plant Growth Regulator Group, 1987.-P. 69-81.

232. Torrey J.G. Root hormones and plant growth // Annu. Rev. Plant Physiol.-1976.-V. 27.-P. 435-459.

233. Turner J.E, Mok D.W.S, Mok M.C, Shaw G. Isolation and partial purification of the enzyme catalysing the formation of novel zeatin metabolites in Phaseolus vulgares embryo // Proc. Natl. Acad. Sci.- 1987.- Y. 84.- P. 3714-3717.

234. Utkhede R.S., Li T.S.C. Evaluation of Bacillus subtilis for potential control of apple replant diseases // J. Phytopathol.- 1989,- V. 129, № 4.- P. 305-312.

235. Van der Krieken W.M., Croes A.F., Smulders M.J.M., Wullens G.J. Cytokinins and flower bud formation in vitro in tobacco. Role of metabolites // Plant Physiol.- 1990.- V. 92,- P. 565-569.

236. Van Staden J., Davey J.E. Cytokinin translocation in xylem sap of herbaceous plants // Z. Pfleanzenphysiol- 1976.- V. 77, № 5.- P. 377-382.

237. Van Staden J., Harty R. Cytokinins and adventitious root formation // In: Adventitious root formation in cuttings. (Eds. T.D.Davies, B.E.Haissig, N.Sankhila). Dioscorides Press, 1988.- V. 2.- P. 185-201.

238. Van Staden J., Drewes F.E. The biological activity of cytokinin derivatives in the soybean callus bioassay // Plant Growth Regulation.- 1991.- V. 10.- P. 109115.

239. Ved P., Joshi G.C. Influence of foliar feeding of kinetin and potassium nitrate in the grain setting of wheat // Agrochimica.- 1963.- V. 17, № 3-4.- P. 238242.

240. Venkatasubbaish P. Efficacy of Bacillus subtilis as a biocontrol for collar root of coffee pathogen//Geobios.- 1985.-V. 12, №3-4.- P. 101-104.

241. Veselov S.U., Kudoyarova G.R., Egutkin N.L., Gyuli-Zade V.Z., Mustafina A.R., Kof E.M. Modifoed solvent partitioning scheme providing increased specifity and rapidity of immunoassey for IAA // Physiol. Plantarum.- 1992.- V. 86, № 1.- P. 93-96.

242. Wang T.L., Beutelmann P., Cove D.J. Cytokinin biosynthesis in mutants of the moss Physcomitrella patens // Plant Physiol.- 1981,- V. 140.-P. 151-153.

243. Wang T.L., Griggs P., Cook S. Immunoassey for plant growth regulators a help or a hindrance? // Plant Growth Substances (M.Bopp ed.). - Berlin, Geidelberg: Springer-Verlad, 1986.- P. 26-34.

244. Weiler E.W. Immunoassay of plant hormones // Ann. Rev. Plant. Physiol.-1983.- V. 35.-P. 85.

245. Weiler E.W, Eberle J, Mertens K. Antisera and monoclonal antibody-based immunoassay of plant hormones // Soc. Exp. Biol. Sem. Ser. 29. Immunology in plant science. Cambridge Univ. Press.- 1986.- P. 27.

246. Wilson E. Pathological Histogenesis in oleander tumors induced by Pseudomonas savastanoi // Phytopathology.- 1965.-V. 55.- P. 1244-1249.

247. Wong T.-Y. Effect of mannose on the growth of N2-fixing Az. vinelandii 11 Appl. Environ. Microbiol.- 1989.- V. 54.- P. 473-475.

248. Yokota T, Murofushi N. Exstraction, Purification and Identification // Hormonal Regulation of Development 1.-Springer-Verlad Heidelberg New York.-1980.-P. 113-190.

249. Zaspel I. Studies on the influence of antagonistic rhizoshere bacteria on winter wheat attacked by Gaeumannomyces graminis var. tritici II JOBC / WPRS Bulletin.- 1992.- V. 15, № 1.- P. 142-144.

250. Zhang J, Howell C.R. Biocontrol of Fusarium wilt of cotton by Bacillus subtilis, Gliocladium virens and nonpathogenic Fusarium spp. Strains // Phytopathology.- 1995.-V. 85, № 10,-P. 1137.

251. Zhang J, Howell C.R, Starr J.L. Suppression of Fusarium colonisation of cotton roots and fusarium wilt by seed treatments with Gliocladium virens and Bacillus subtilis II Biocontr. Sci. and Technol.- 1996.- V. 6, № 2.- P. 175-187.

252. Zheng X.Y, Sinclair J.B. Relationship between traits of Bacillus megaterium, soybean root and seed colonization, and suppression of rhizoctonia root rot II Phytopatalogy.- 1995,- V. 85, № 10.- P. 1137.

253. Zigas R.P, Coombe B.G. Seedlings development in peach Prunus persica (L.) batch. Effect of plant growth regulations and their possible role // Austral. J. Plant Physiol.- 1977.- V. 4.- P. 359-371.