Каталитические свойства НАД- и НАДФ-малатдегидрогеназ при токсическом поражении печени крыс тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, кандидат биологических наук Михайлова, Елена Владимировна

  • Михайлова, Елена Владимировна
  • кандидат биологических науккандидат биологических наук
  • 2009, Воронеж
  • Специальность ВАК РФ03.00.04
  • Количество страниц 182
Михайлова, Елена Владимировна. Каталитические свойства НАД- и НАДФ-малатдегидрогеназ при токсическом поражении печени крыс: дис. кандидат биологических наук: 03.00.04 - Биохимия. Воронеж. 2009. 182 с.

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Михайлова, Елена Владимировна

ВВЕДЕНИЕ

• ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Токсическое поражение печени

1.1.1. Общая характеристика гепатитов

1.1.2. Создание модели токсического гепатита при помощи CCU 14 • 1.2. Оксидативный стресс и антиоксидантная система организма

1.2.1. Свободнорадикальное окисление биомолекул

1.2.2. Пероксидное окисление липидов и его роль

1.2.3. Образование активных форм кислорода и их биологическое 18 значение в клеточном метаболизме

• 1.2.4.' Роль процессов свободнорадикального окисления в патогенезе токсического гепатита

1.2.5. Антиоксидантная система организма 25 1.3. Характеристика НАД- и НАДФ-зависимых малатдегидрогеназ из различных источников

1.3.1. Общая характеристика малатдегидрогеназной активности

L3.2. Характеристика НАД-зависимой малатдегидрогеназы 30 1.3.2.1.Функции и распространение НАД-малатдегидрогеназы в живых 30 организмах

• 1.3.2.2. Изоформы НАД-зависимой малатдегидрогеназы

1.3.2.3. Очистка НАД-малатдегидрогеназы из различных объектов

1.3.2.4.Исследование структуры и активного центра фермента

1.3.2.5.Кинетическое поведение и регуляция активности НАД-зависимой 42 малатдегидрогеназы

1.3.2.5.1.Кинетика и сродство к субстратам и кофакторам

1.3.2.5.2.Влияние температуры и рН

1.3.2.5.3 .Регуляция активности НАД-зависимой малатдегидрогеназы

1.3.3. Характеристика НАДФ-зависимой малатдегидрогеназы

1.3.3.1. Внутриклеточное распределение НАДФ-зависимой 53 малатдегидрогеназы и ее роль в физиолого-биохимических процессах

13.3.2. Очистка НАДФ-малатдегидрогеназы из различных объектов

1.3.3.3.Исследование активного центра и структурной организации 56 НАДФ-малатдегидрогеназы

1.3.3.4. Кинетические и регуляторные свойства НАДФ-зависимой * 58 малатдегидрогеназы

1.3.3.4.1.Сродство к субстрату и кофакторам. Аллостерические свойства

1.3.3.4.2.Влияние рН и температуры на функционирование фермента 59 ' 1.3.3.4.3 .Регуляция активности НАДФ-малатдегидрогеназы

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

ГЛАВА 2. ОБЪЕКТ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Объект исследования

2.2. Создание модели экспериментального токсического гепатита

2.3. Определение активности ферментов

2.4. Определение содержания белка

2.5. Выделение и очистка ферментов

• ' 2.5.1. Экстракция

2.5.2. Получение субклеточных фракций гепатоцитов

2.5.3. Фракционирование сульфатом аммония

2.5.4. Гель-фильтрация на сефадексе G

2.5.5. Ионообменная хроматография на ДЭАЭ-целлюлозе

2.5.6. Гель-хроматография на Toyopearl HW

2.6. Исследование кинетических характеристик и регуляции 68 активности ферментов

2.7. Аналитический электрофорез

• ' 2.8. Определение молекулярной массы ферментов

2.9. Статистическая обработка результатов

ГЛАВА 3. АКТИВНОСТЬ, СУБКЛЕТОЧНАЯ ЛОКАЛИЗАЦИЯ 71 И ОЧИСТКА НАД- И НАДФ-ЗАВИСИМЫХ МАЛАТДЕГИДРОГЕНАЗ ИЗ ПЕЧЕНИ КРЫС В НОРМЕ И ПРИ ТОКСИЧЕСКОМ ГЕПАТИТЕ

3.1. Субклеточная локализация и активность НАД- И НАДФ- 71 малатдегидрогеназ из гепатоцитов крыс в норме и при токсическом гепатите

3.2. Очистка НАД-и НАДФ-зависимых малатдегидрогеназ из печени- 72 крыс в норме и при токсическим гепатите

ГЛАВА 4. ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ, КИНЕТИЧЕСКИЕ И

РЕГУЛЯТОРНЫЕ СВОЙСТВА НАД-МАЛАТДЕГИДРОГЕНАЗЫ ИЗ ПЕЧЕНИ КРЫС В НОРМЕ И ПРИ ИНТОКСИКАЦИИ СС

4.1. Молекулярная масса митохондриальной и цитоплазматической 78 НАД-зависимой малатдегидрогеназы

4.2. Исследование кинетических параметров каталитического действия 81 НАД-малатдегидрогеназы в норме и при экспериментальном токсическом гепатите

4.3. Влияние рН среды на активность митохондриальной и 86 цитоплазматической НАД-малатдегидрогеназы из гепатоцитов крыс в норме и при введении гепатотоксина

4.4. Влияние температуры на активность НАД-малатдегидрогеназы

4.5. Регуляторные свойства митохондриальной и цитоплазматической 94 НАД-зависимой малатдегидрогеназы из печени крыс в норме и при патологии

4.5.1. Влияние ионов некоторых металлов и пероксида водорода на 94 активность НАД-зависимой малатдегидрогеназы

4.5.2. Исследование регуляции активности НАД-зависимой 101 малатдегидрогеназы из печени крысы в норме и при гепатите под действием аденозинфосфатов

4.5.3. Влияние глутатиона на функционирование НАД

• малатдегидрогеназы из печени контрольной группы крыс и животных с токсическим гепатитом

4.5.4. Регуляция активности НАД-зависимой малатдегидрогеназы 107 интермедиатами цикла трикарбоновых кислот

ГЛАВА 5. ИССЛЕДОВАНИЕ КАТАЛИТИЧЕСКИХ СВОЙСТВ 110 НАДФ-ЗАВИСИМОЙ МАЛАТДЕГИДРОГЕНАЗЫ ИЗ ПЕЧЕНИ КРЫС В НОРМЕ И ПРИ ТОКСИЧЕСКОМ ГЕПАТИТЕ 5.1. Молекулярная масса НАДФ-малатдегидрогеназы из печени

• контрольных и подвергнутых воздействию гепатотоксина крыс

5.2. Кинетические характеристики НАДФ-малатдегидрогеназы 112 из гепатоцитов крыс в норме и при патологии

5.3. Влияние рН среды на активность НАДФ-зависимой 114 малатдегидрогеназы из гепатоцитов крыс в норме и при токсическом гепатите

5.4: Исследование влияния температуры на активность НАДФ- 115 малатдегидрогеназы из печени крыс в норме и при патологии 5.5. Исследование регуляторных свойств НАДФ-зависимой

- малатдегидрогеназы из печени крыс в норме и при токсическом гепатите

5.5.1. Влияние ионов некоторых металлов и пероксида водорода на 120 активность НАДФ-зависимой малатдегидрогеназы

•5.5.2. Регуляция активности НАДФ-зависимого фермента с помощью 124 глутатиона

5.5.3. Влияние аденозинфосфатов на активность НАДФ- 125 малатдегидрогеназы 5.5.4. Исследование влияния интермедиатов цикла Кребса на НАДФ

• малатдегидрогеназу из гепатоцитов контрольных крыс и животных, подвергнутых воздействию СС

Рекомендованный список диссертаций по специальности «Биохимия», 03.00.04 шифр ВАК

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Каталитические свойства НАД- и НАДФ-малатдегидрогеназ при токсическом поражении печени крыс»

Актуальность проблемы. Одной из актуальных проблем биохимии в настоящее время является исследование функционирования ферментов центрального метаболизма при патологиях, сопряженных с окислительным стрессом, в частности, поражениях печени разной этиологии [6, 84, 102]. Токсический гепатит — один из наиболее распространенных видов патологии, вызываемый действием различных химических веществ, включая лекарства и алкоголь. К ксенобиотикам с высокой степенью избирательной гепатотоксичности относят хлорированные углеводороды, типичным представителем которых является тетрахлорметан. Отравление экспериментальных животных этим ксенобиотиком по морфологической характеристике и биохимическим изменениям близко к острым поражениям печени различной этиологии у человека. Имеются данные, что в результате введения четыреххлористого углерода наблюдается усиление свободнорадикальных процессов в печени [6,94, 269].

Предполагается, что одним из механизмов подавления процессов свободнорадикального окисления (СРО) в митохондриях может служить ингибирование ключевых ферментов цикла трикарбоновых кислот (ЦТК) [236]. Известно, что функционирование митохондрий в условиях высокого соотношения концентрации НАДН/НАД и АТФ/АДФ, а также при высоком мембранном потенциале может приводить к генерации активных форм кислорода (АФК) [96]. Одним из классических примеров такой регуляции является1 торможение функционирования ЦТК при ишемии, приводящее к окислению ферментов дыхательной цепи - восстановителей 02 до Ог" [236, 237]. Установлено, что при экспериментальной ишемии миокарда (ЭИМ) крыс снижается активность НАД-малатдегидрогеназы [93] и аконитатгидратазы [45].

В этой связи вызывает интерес функционирование НАД-зависимой малатдегидрогеназы (КФ 1.1.1.37; НАД-МДГ) в условиях ' 9 экспериментального токсического гепатита (ЭТГ), катализирующей в ЦТК обратимое превращение малата в оксалоацетат. Цитоплазматическая форма .НАД-МДГ (цНАД-МДГ) участвует в обеспечении транспорта метаболитов между клеточными компартментами [66]. Имеются данные о значительной роли субстрата МДГ — малата, в биохимической адаптации организма к гипоксии и его способности диффундировать в митохондрии, передавая восстановительные эквиваленты в электронтранспортную цепь [26]. Известно также, что малат участвует в транспорте низкомолекулярного . антйоксиданта — цитрата, через биологические мембраны [222]. Кроме того, нельзя исключить, что' НАДФН, образующийся в реакции, катализируемой НАДФ-зависимой МДГ (КФ 1.1.1.82; НАДФ-МДГ), может быть дополнительным источником восстановительных эквивалентов для глутатйонредуктазной/глутатионпероксидазной (ГР/ГП) антиоксидантной системы (АОС). Ранее было показано, что' в качестве дополнительного поставщика НАДФН в клетке, помимо ключевого фермента пентозофосфатного пути — глюкозо-6-фосфатдегидрогеназы, могут выступать другие ферменты, . например, НАДФ-специфичная • изоцитратдегидрогеназа [45] и НАДФ-малатдегидрогеназа [93].

Таким образом, исследование особенностей каталитического действия НАД- и НАДФ-зависимых малатдегидрогеназ из гепатоцитов крыс при ЭТГ может иметь значение для понимания процессов, происходящих в клетках печени, в условиях интенсификации СРО, вызванного введением гепатотоксина, а также способствовать поиску возможных путей коррекции данного патологического состояния.

Цель и задачи исследования. Целью данной работы явилось исследование каталитических свойств и регуляции активности НАД- и НАДФ-МДГ из печени крыс при ЭТГ. В связи с целью работы были поставлены следующие задачи: 1) определение активностей и субклеточной локализации НАД- и НАДФ-МДГ в клетках печени в норме и при токсическом гепатите; 2) получение высокоочищенных ферментных препаратов НАД- и НАДФ-зависимых МДГ из печени крыс в норме и при патологии; 3) исследование кинетических параметров каталитического действия НАД- и НАДФ-МДГ из печени контрольных животных, и крыс, подвергшихся воздействию СС14; 4) сравнительная характеристика регуляторных свойств НАД- и НАДФ-МДГ из гепатоцитов крыс в норме и при патологии; 5) создание схемы, отражающей особенности функционирования НАД- и НАДФ-МДГ в условиях токсического гепатита.

• Научная новизна. Впервые проведено комплексное исследование функционирования НАД- и НАДФ-МДГ в печени крыс в условиях увеличения интенсивности процессов СРО при ЭТГ. Разработаны процедуры выделения и получены гомогенные .препараты различно локализованных форм НАД-МДГ и НАДФ-МДГ из печени крыс в норме и при патологии. Впервые дана сравнительная характеристика каталитических свойств ' и регуляции активности данных ферментов в печени в норме и при токсическом гепатите. Выявлено изменение активности, а также кинетических и регуляторных свойств митохондриальной НАД-МДГ (мНАД-МДГ). Установлено, что активности цНАД-МДГ и НАДФ-МДГ при патологии не имеют достоверных отличий от контрольных значений. Но, несмотря на стабильность активности данных ферментов, в условиях развития токсического гепатита для них характерны особенности каталитического действия.

Практическая значимость. Полученные данные позволяют расширить и углубить фундаментальные представления о функционировании НАД- -и НАДФ-МДГ в условиях нормы и патологии. Особенности функционирования данных ферментов в условиях токсического гепатита способствуют пониманию развития патологического процесса и поиску путей его коррекции в медицинской практике.

Разработанные способы получения высокоочищенных препаратов НАД- и'НАДФ-МДГ из гепатоцитов крыс могут быть использованы для получения ферментных препаратов в производственных и лабораторных условиях. Материалы работы используются в учебном процессе на биолого-почвенном факультете Воронежского государственного, университета при чтении курсов «Биохимия человека», «Медицинская биохимия», а также спецкурсов по аналитической биохимии и энзимологии. Кроме, того, . материалы работы используются при проведении практикумов, выполнении курсовых и дипломных работ студентами.

Апробация работы. Основные результаты, полученные при .выполнении диссертационной работы, представлены на 12ой Пущинской школе-конференции молодых ученых «Биология — наука 21го века» (Пущино, 2008), международной научной конференции «Биология: теория, практика, эксперимент» (Саранск, 2008), международном симпозиуме «Адаптационная физиология и качество жизни: проблемы традиционной и инновационной медицины» (Москва, 2008), VIII съезде Белорусского общественного . объединения фотобиологов и биофизиков (Минск, 2008), II съезде Российского общества медицинской элементологии (РОСМЭМ) (Тверь, 2008), международной студенческой биологической конференции при Ереванском государственном университете (Ереван, 2009), II Всероссийском с международным участием конгрессе студентов и аспирантов-биологов «Симбиоз-Россия 2009» .(Пермь, 2009), 13ом международном симпозиуме студентов-биологов «Симбиоз-Россия 2009» (Казань, . 2009), ежегодной научной отчетной конференции преподавателей и сотрудников Воронежского госуниверситета (Воронеж, 2009). Публикации. Основные результаты диссертационной работы изложены в 15 публикациях — 7 статьях и 8 тезисах.

На защиту выносятся следующие положения:

1. При токсическом гепатите происходит снижение активности митохо'ндриальной НАД-МДГ в печени крыс на 13%, что может быть сопряжено с торможением ЦТК, способствующем подавлению свободнорадикальных процессов. Цитоплазматическая форма НАД-МДГ не изменяет своей активности и, по-видимому, не участвует в лимитировании

СРО биосубстратов. При этом как для мНАД-МДГ, так и для цНАД-МДГ характерны значительные изменения кинетических и регуляторных свойств: сродства к субстрату, степени субстратного ингибирования, чувствительности к воздействию ионов Fe2+, Cu2+, ряда интермедиатов цикла Кребса, глутатиона, АТФ, АДФ. Ингибирующие эффекты АТФ, АДФ и фумарата на мНАД-МДГ, возникающие при патологии, очевидно, могут способствовать снижению активности фермента.

2. Активность НАДФ-МДГ при токсическом поражении печени крыс остается стабильной, что, по-видимому, связано с высокой активностью в гепатоцитах ферментов пентозофосфатного пути, обеспечивающего генерирование НАДФН для глутатионовой АОС. Однако при патологии имеют место изменения сродства к субстрату и коферменту, а также ряд особенностей регуляции активности под действием некоторых метаболитов ЦТК, аденозинфосфатов, ионов Fe2+, Cu2+, Са2+.

3. Субклеточная локализация, молекулярная масса, субъединичная структура, электрофоретическая подвижность НАД- и НАДФ-МДГ из печени крыс не изменяются в условиях развития СС14-индуцированного гепатита.

4. Предложена схема, отражающая особенности функционирования митохондриальной и цитоплазматической НАД-МДГ и цитоплазматической НАДФтМДГ под влиянием различных факторов при токсическом поражении печени крыс/

• Структура и объем работы. Диссертация представлена на 182 страницах текста, состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части и обсуждения полученных результатов (5 глав), заключения, выводов, списка литературы (270 источников) и приложения. Иллюстративный материал включает 53 рисунка и 13 таблиц. В приложении содержатся 19 рисунков.

Похожие диссертационные работы по специальности «Биохимия», 03.00.04 шифр ВАК

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Михайлова, Елена Владимировна

ВЫВОДЫ

1. Установлено, что при ЭТГ происходит снижение активности мНАД-МДГ в печени крыс на 13%. При этом в цитоплазме активности НАД-МДГ и НАДФ-МДГ не изменяются. .

2. С использованием электрофоретически гомогенных ферментных препаратов установлено, что ряд физико-химических свойств НАД- и НАДФ-МДГ не изменяется при патологии. Молекулярная масса цНАД-МДГ и мНАД-МДГ составляет 130 кДа, НАДФ-МДГ - 132 кДа. Для ферментов характерна гомотетрамерная субъединичная структура. Электрофоретическая подвижность НАДФ-МДГ равна 0,10, мНАД-МДГ - 0,36, цНАД-МДГ - 0,33.

3. Обнаружено, что в пораженной гепатотоксином печени крыс происходит изменение сродства всех исследуемых ферментов к субстрату (OA), а также НАДФ-МДГ к- НАДФН, сужение рН-оптимума цитоплазматической формы НАД-МДГ, наблюдается более высокая активность митохондриальной НАД-МДГ при низких значениях рН и НАДФ-МДГ при рН 7,02 и 7,58-7,72.

4. Для НАДФ-МДГ из печени крыс с токсическим гепатитом показано более интенсивное снижение активности при воздействии повышенных температур, а также увеличение энергии активации и констант инактивации при 55°С и 60°С по сравнению с контрольными значениями.

5. Выявлены особенности регуляции активности всех исследуемых п. форм фермента при токсическом гепатите под действием ионов Fe . Значения констант ингибирования различно локализованных форм НАД-МДГ ионами железа ниже при патологии. В условиях ЭТГ митохондриальная НАД-МДГ имеет меньшую чувствительность к ингибирующему влиянию ионов Си2+, характеризующемуся смешанным типом. Установлено, что при токсическом гепатите активность НАДФ-МДГ в большей степени тормозится ионами Fe2+ и Си2+, для действия которых характерен неконкурентный тип ингибирования как в норме, так и при патологии. Для цНАД-МДГ и НАДФ

МДГ в условиях ЭТГ отмечены особенности функционирования в присутствии ионов Са2+.

6. Показано участие АТФ, АДФ, АМФ в регуляции скорости протекания МДГ — реакции как в норме, так и на фоне развития патологии. Установлено, что в условиях ЭТГ происходит снижение активности митохондриальной НАД-МДГ под воздействием АТФ и АДФ, тогда как в норме данный эффект не был выявлен. Обнаружено повышение чувствительности НАДФ-МДГ к ингибирующему действию АТФ и АДФ при ЭТГ, тогда как АМФ в большей степени тормозит активность НАДФ-МДГ в норме. Ингибирование НАДФ-МДГ АТФ и АДФ является конкурентным.

7. Выявлены различия в регуляции активности НАД-МДГ окисленной и восстановленной формами глутатиона в норме и при ЭТГ. На НАДФ-МДГ обе формы глутатиона оказывают активирующее действие как в условиях контроля, так и при патологии.

8. Выявлено изменение функционирования НАДФ-МДГ из гепатоцитов крыс с ЭТГ под влиянием таких интермедиатов ЦТК, как цитрат, изоцитрат, 2-ОГ, сукцинат и фумарат, а также обнаружены особенности регуляции активности НАД-МДГ из митохондрий гепатоцитов крыс при патологии под воздействием цитрата, сукцината и фумарата.

9. На основании результатов исследования функционирования НАД- и НАДФ-МДГ предложена схема, отражающая особенности регуляции активности фермента при токсическом гепатите.

141

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Проведённые исследования показали, что развитие процессов СРО биосубстратов при токсическом гепатите приводит к снижению активности мНАД-МДГ из печени крыс на 13%, что может быть сопряжено с торможением ЦТК, способствующем подавлению свободнорадикальных процессов. По данным других исследователей, при патологиях, сопряженных с окислительным стрессом, происходит более значительное снижение активности ферментов ЦТК. В частности, в работах Андреещевой Е.М. и Медведевой JI.B. показано снижение активности аконитатгидратазы при ЭТГ и ЭИМ в 1,3 и 2,6 раза соответственно [6, 45]. Также при ЭИМ Сафоновой О.А. установлено снижение активности м- и цНАД-МДГ в 2,6 раза [93]. Торможение реакций ЦТК, по-видимому, может способствовать снижению образования активных форм кислорода в ходе неполного восстановления кислорода "в дыхательной цепи. Понижение активности цНАД-МДГ, участвующей в переносе восстановительных эквивалентов между клеточными компартментами, также может приводить к снижению поставки НАДН в электронтранспортную цепь митохондрий и таким образом лимитировать процессы СРО биосубстратов. Однако, согласно результатам, полученным в нашей работе, активность цНАД-МДГ при токсическом гепатите не имеет достоверных отличий от контрольных значений и, вероятно, данная форма НАД-МДГ не участвует в регуляции свободнорадикальных процессов при ЭТГ.

Нами выявлено, что активность НАДФ-МДГ не изменяется при ЭТГ. Согласно результатам, полученным другими исследователями, при оксидативном стрессе происходит повышение активности некоторых НАДФН-генерирующих ферментов, а именно НАДФ-МДГ и НАДФ-изоцитратдегидрогеназы при ЭИМ и НАДФ-изоцитратдегидрогеназы при ЭТГ [6, 45, 93]. Так," для НАДФ-МДГ из сердца крыс при ЭИМ длительностью 40 минут характерно повышение активности в 1,6 раза.

Возможно, стабильность активности НАДФ-МДГ из гепатоцитов крыс с ЭТТ связана с достаточно высокой активностью пентозофосфатного пути в клетках печени, тогда как в кардиомиоцитах активность функционирования ферментов пентозофосфатного пути ниже, чем в других органах [33], и в качестве дополнительного источника НАДФН в миокарде могут выступать другие ферменты, в частности, НАДФ-МДГ.

Тем не менее, как для НАД-МДГ из митохондриальной и цитоплазматической фракции гепатоцитов, так и для НАДФ-зависимого фермента характерны значительные особенности каталитического действия в условиях развития токсического гепатита. По-видимому, это связано с нарушением функционирования метаболических систем клетки и изменением концентрации многих интермедиатов клеточного обмена в условиях развития патологии, сопряженной с оксидативным стрессом [91]. Нельзя исключить, что, несмотря на выявленную стабильность активности цНАД-МДГ и НАДФ-МДГ, изменение микроокружения может отражаться на некоторых свойствах данных ферментов, что и выявлено в ходе наших исследований.

Вместе с тем, такие свойства как молекулярная масса, субъединичная структура, электрофоретическая подвижность всех исследованных форм МДГ из печени контрольных крыс и животных, подвергнутых токсическому гепатиту, не изменялись. Оставалось постоянным и соотношение активностей НАД- и НАДФ-МДГ в субклеточных фракциях гепатоцитов в норме и при патологии. Полученные данные позволяют предположить, что изменение некоторых свойств ферментов, наблюдаемое при развитии ЭТГ, не связано с изменением четвертичной структуры, и, следовательно, действием ассоциативно-диссоциативного механизма регуляции активности в результате изменения концентрации субстратов, а также с перераспределением активности между субклеточными фракциями.

На основании полученных данных на рисунке 53 представлена схема, отражающая особенности регуляции активности мНАД-МДГ, цНАД-МДГ и

НАДФ-МДГ из гепатоцитов крыс в условиях развития ЭТГ под влиянием различных факторов. Согласно представленной схеме, в пораженной гепатотоксином печени крыс происходит изменение сродства исследуемых ферментов к субстрату (OA), причем для митохондриальной формы фермента характерно повышение сродства к OA, для НАД-МДГ из цитоплазматической фракции гепатоцитов — снижение данного параметра по сравнению с нормальными значениями, а также повышение сродства НАДФ-МДГ к НАДФН, что может иметь значение при увеличенном расходовании НАДФН в условиях интенсификации СРО. Сходные данные получены при исследовании сродства НАД-МДГ из кардиомиоцитов крыс при ишемии. В частности, в условиях патологии для митохондриального фермента характерно снижение значения Км по OA, а для цитоплазматического - увеличение данного параметра [93]. Кроме того, следует отметить изменение степени субстратного ингибирования исследуемых ферментов при поражении печени четыреххлористым углеродом, а именно снижение константы ингибирования оксалоацетатом цитоплазматической НАД-МДГ, то есть повышение чувствительности к ингибирующему влиянию данного соединения в определенных концентрациях. Что касается митохондриальной НАД-МДГ, то ингибирование OA в концентрациях выше 0,3 мМ отмечается только для фермента при патологии. В условиях ЭТГ для НАДФ-МДГ показано увеличение Км и Ksi оксалоацетатом, что свидетельствует о снижении сродства к субстрату, но в тоже время и о снижении чувствительности фермента к его ингибирующему влиянию. Согласно литературным данным, МДГ из ряда других источников также подвергается ингибированию субстратом и коферментом, степень которого различна в норме и на фоне развития органопатий [91, 93]. Возможно, данные изменения кинетических свойств ферментов в условиях ЭТГ могут быть объяснены конформационными перестройками, происходящими в структуре белка в качестве реакции на изменение состава его окружения в условиях патологии, приводящей к изменению функционирования многих метаболических систем клетки.

Результаты исследований показали, что как для мНАД-МДГ и цНЛД-МДГ, так и для НАДФ-МДГ характерны особенности влияния концентрации ионов водорода при патологии. Можно предполагать, что более высокая активность митохондриальной НАД-МДГ при низких значениях рН может отражаться на его функционировании в условиях ацидоза, развивающегося при окислительном стрессе и рассматриваться, как адаптивное изменение свойств фермента при нарушении метаболического постоянства внутренней среды организма и клетки. В то же время при патологии происходит сужение диапазона оптимальных значений рН цитоплазматической НАД-МДГ и повышение активности НАДФ-МДГ при определенных концентрациях ионов водорода. Для НАДФ-зависимого фермента также характерна более интенсивная потеря активности при воздействии повышенных температур, что отражается в увеличении значений констант инактивации фермента при 55°С и 60°С.

Выявлено, что рК ионогенных групп НАД-МДГ из митохондриальной фракции гепатоцитов крыс соответствуют рК сульфгидрильной группы, а-аминогруппы цистина и 8-аминогруппе лизина; установленные значения рК цНАД-МДГ соответствуют а-аминогруппе цистина и г-аминогруппе лизина. Для НАДФ-МДГ величины рК ионогенных групп, определенные по методу Курганова, соответствуют рК имидазольной группы гистидина и а-аминогрупп. Согласно литературным данным, существуют три остатка аргинина (Arg-102, Arg-109, Arg-171), которые высоко консервативны во всех МДГ и имеют большое значение для связывания субстрата и катализа. Консервативными остатками являются и Asp-168, His-195 и Ala-246, а также Asp-52, участвующий в образовании связей с НАД [38]. Окисление остатков лизина, аргинина, гистидина, пролина, треонина, глутамата и аспартата в полипетидной цепи приводит к образованию карбонильных групп (карбонилирование) [94]. В результате образуются: из аргинина и пролина — полуальдегид глутаминовой кислоты, а из лизина — полуальдегид аминоадипиновой кислоты [164]. Также при усилении СРО интенсифицируется такой процесс, как глутатионилирование. При этом окисленная форма глутатиона может связываться с цистеиновыми остатками в молекуле ферментов, что ведет к образованию смешенных дисульфидов [184]. Таким образом, модификация аминокислотных остатков, входящих в состав ферментов, путем карбонилирования и глутатионилирования могут быть одними из причин изменения их активности и свойств при окислительном стрессе.

Наряду с изменением некоторых кинетических характеристик НАД- и НАДФ-зависимых МДГ, выделенных из печени крыс, подвергнутых воздействию CCU, выявлены и особенности регуляции исследуемых ферментов под влиянием ионов Fe , Си и Са , играющих важную роль в развитии оксидативного стресса, глутатиона - компонента антиоксидантной системы организма, таких энергетически важных соединений, как АТФ, АДФ, АМФ, а также интермедиатов ЦТК.

Установлено, что ионы Fe оказывают ингибирующее влияние на все исследуемые МДГ как в норме, так и при ЭТГ, причем при патологии отмечено усиление торможения активности митохондриальной и цитоплазматической НАД-МДГ ионами данного металла. Как мощные ингибиторы ионы Fe действуют на активности многих ферментов. Механизм действия железа связан с модификацией SH-групп цистеина [38]. Ионы Fe ингибируют МДГ и согласно данным других исследований [59, 91, 93],, в частности, Сафоновой О.А. также показано повышение степени ингибирования мНАД-МДГ и цНАД-МДГ ионами данного металла в условиях усиления СРО на фоне ЭИМ. Кроме того, усиление торможения активности мНАД-МДГ при токсическом гепатите отмечено и при воздействии АДФ, что также может иметь значение в регуляции скорости образования свободных радикалов при ЭТГ.

Среди других особенностей функционирования митохондриальной НАД-МДГ в условиях ЭТГ следует отметить снижение чувствительности к ингибирующему влиянию ионов Си2+ и цитрата и увеличение степени ингибирования АТФ, GSH, сукцинатом и фумаратом. Для цНАД-МДГ при патологии характерна активация ионами кальция, отсутствующая в норме, и резистентность к выявленному в норме тормозящему эффекту GSH.

В качестве адаптивной реакции НАДФ-МДГ в условиях СРО при гепатите нельзя исключить изменение скорости реакции под влиянием АДФ, а именно уменьшение интенсивности ингибирующего воздействия данного соединения. Известно, что концентрация АДФ увеличивается при патологиях, сопряженных с окислительным стрессом, что связано с нарушением целостности митохондриальной мембраны и угнетением синтеза АТФ [39]. Также для НАДФ-МДГ отмечено увеличение чувствительности к ингибирующему воздействию ионов Fe2+, Cu2+, АМФ. При исследовании влияния интермедиатов ЦТК на НАДФ-МДГ установлено, что все исследуемые соединения являются ингибиторами фермента, причем степень ингибирования цитратом, изоцитратом, 2-ОГ, сукцинатом выше для НАДФ-МДГ в норме, тогда как фумарат более интенсивно снижает активность фермента при ЭТГ.

Изменение регуляции активности исследуемых форм МДГ, наблюдаемое в условиях токсического гепатита, по отношению к ионам некоторых металлов, аденозинфосфатам, глутатиону, интермедиатам цикла Кребса свидетельствует о модификации ряда механизмов метаболитной регуляции при патологии печени. Можно предположить, что изменение ряда регуляторных свойств малатдегидрогеназ (рис. 53) происходит за счет конформационных перестроек в молекуле фермента при изменении его микроокружения в патологических условиях. Но, несмотря на это, суммарные эффекты изменений ряда ингибирующих и активирующих влияний на исследуемые ферменты приводят к относительной стабильности функционирования МДГ в печени крыс при токсическом гепатите. повышение/понижение сродства к оксалоадетшу------------------------повышен ни/пониженне сродства к ноферменту повышен и(.7iюнияжние степени субстратного ингибирования оксалоацетатом •

I ювышенис/понижение степени субстратного ингибирования коферментом---особенности влияния рН СРДДЛ i + I* уовышсни о/понижение термосгабнлыюсти повышение/понижение степени активирующего воздействия: j-сукцинат

J повышение/понижение степени ингнбирующего воздействия: -j--►

-дтф АДФ

АМФ

-GSH

-GSSG. цитрат

-иэоцитряг

-2-омсоглугараг > -сукциног j I j ^wtaptrr

НАДФ-малаггдегидрогеназа

Рис. 53. Особенности регуляции активности митохондриальной и цитоплазматической НАД-малатдегидрогеназы и НАДФ-малатдегидрогеназы из гепатоцитов крыс в условиях развития токсического гепатита под влиянием различных факторов. Красной сплошной стрелкой показано усиление воздействия, синей пунктирной стрелкой - снижение воздействия.

139

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Михайлова, Елена Владимировна, 2009 год

1. Абдулаев Н.Х. Печень при интоксикации гепатотропными ядами / Н.Х. Абдулаев, Х.Я. Каримов. - Ташкент: Медицина УзСССР, 1989. - 25 с.

2. Абдуллаев Ф.И. Некоторые биохимические аспекты действия селена на организм животных / Ф.И. Абдуллаев // Успехи современной биологии. 1989. - Т. 108, №2. - С. 270-287.

3. Абрамова Ж.И. Человек и противоокислительные вещества / Ж.И. Абрамова, Г.И. Оксенгендлер. СПб.: Наука, 1985. - 230с.

4. Азизова О.А. О роли эндогенного свободного железа в ишемическом повреждении печени / О.А. Азизова, А.В. Козлов // Свободные радикалы и биостабилизаторы: 1й болг— сов. симп., София, 23-26 ноября 1987 г.: тез. докл. — София, 1987. — С.З.

5. Ананьева Г.В. Экспериментальная и клиническая энзимология / Г.В. Ананьева, В.В. Поступаев, Е.Г. Рябцева. Хабаровск, 1983. - С. 8-11.

6. Анисимов В.Н. Мелатонин и эпиталамин угнетают процесс свободнорадикального окисления у крыс / В.Н. Анисимов, В.М. Прокопенко, В.Х. Хавинсон // Доклады РАН. 1995. - Т. 343. - С. 557559.

7. Антиоксидантная система, онтогенез и старение / О.Н. Воскресенский и др. // Вопросы медицинской химии. 1982. - №1. - С. 14-27.

8. Антоненков В.Д. Дегидрогеназы пентозного цикла в пероксисомах печени крысы / В.Д. Антоненков, Л.Ф. Пасченко // Биохимия. 1984. -Т. 49.-С. 1159-1165.

9. Артюхов В.Г. Биологические мембраны: структурная организация,функции, модификация физико-химическими агентами: Учеб. пособие / В.Г. Артюхов, М.А. Наквасина. — Воронеж: Изд-во Воронеж.ун-та, • 2000.-296с.

10. Березов Т.Т. Биологическая химия / Т.Т. Березов, Б.Ф. Коровкин. М.: Медицина, 1998. - 704 с.14. • Болдырев А.А. Окислительный стресс и мозг / А.А. Болдырев //

11. Соросовский образовательный журнал. 2001. - Т. 7, № 4. - С. 21-28.

12. Бурлакова Е.Б. Молекулярные механизмы действия антиоксидантов при лечении сердечно-сосудистых заболеваний / Е.Б. Бурлакова // Кардиология. 1980. - №8. - С. 48-52.

13. Бустаманте Д. Метаболизм а-липоевой кислоты в печени при различных формах патологии / Д. Бустаманте, Д. Лодж, Л. Маркоччи // Международный медицинский журнал. 2001. - № 2. - С. 133-142.

14. Буценко 3. А. Хроматографическое разделение лактатдегидрогеназы и малатдегидрогеназы из сердечной мышцы свиньи / 3. А. Буценко, Т. А. Боднева, Р. К. Вайткавичюс // Производство и применение биореакторов. Вильнюс, 1987 (1988). - С. 81-86.

15. Венгеровский А.И. Влияние гепатотоксинов на активность органеллоспецифических ферментов и метаболизм липидов печени // Вопр. Мед. Химии. — 1989, №3. С. 87-91.

16. Владимиров Ю.А. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах/ Ю.А. Владимиров, А.И. Арчаков. М.:Наука, 1980. - 320с.

17. Владимиров Ю.А. Свободнорадикальное окисление липидов и физические свойства липидного бислоя биологических мембран / Ю.А.

18. Владимиров // Биофизика. 1987. - Т.32, вып.5. - С.830-844.

19. Владимиров Ю.А: Структурная организация мембраны / Ю.А. Владимиров, А.Ф. Поглазов //Биол. мембраны. М., 1973. - С. 7-47.

20. Влияние железа, цинка, меди на процессы перекисного окисления липидов печени / Е.Н. Кухтина и др. // Биохимия. 1996. Т. 61, вып.6. — С.993-997.

21. Выделение, очистка и свойства малатдегидрогеназы из серобактерий Beggiatoa leptomitiformis / Епринцев А.Т и др. // Изв. АН. Сер. биол. -2003. №3 .-С. 301-305.

22. Гаверова Ю.Г. Исследование влияния аминокислот на глюкозо-6-фосфатдегидрогеназу и малатдегидрогеназу тутового шелкопряда / Ю.Г. Гаверова, А.С.Коничев // 2 Съезд Биохим. о-ва РАН, Москва, 1923 мая 1997 г. 1997. - Москва, 1997. - С. 180.

23. Гайнуллин М.Р. Митохондриальная малатдегидрогеназа мозга: особенности локализации и каталитических свойств / М.Р Гайнуллин // Тез докл. 2 Съезда биохимического обществава РАН, Москва, 19-23 мая 1997 г.-М., 1997.-С. 16-17.

24. Глотов Н.А. Влияние гипоксии и глютаминовой кислоты на содержание кетокислот в миокарде и почках крыс / Н.А. Глотов, JI.T. Шмелева// Укр. биохим. журн. 1973. - № 5. - С. 605-608.

25. Гордеева А.В. Взаимосвязь между активными формами кислорода и кальцием в живых клетках /А.В. Гордеева, Р.А. Звягильская, Ю.А. Лабас // Биохимия. 2003. - Т. 68, вып. 10. - С. 1318-1322.

26. Гродзинский A.M. Краткий справочник по физиологии растений / A.M. Гродзинский, Д.М. Гродзинский. Киев: Наукова думка, 1973. - 273 с.

27. Губский Ю.И. Коррекция химических поражений печени / Ю.И. Губский. Киев: Здоровье, 1989. - 156 с.

28. Гусев В.А. Супероксидный радикал и супероксиддисмутаза в свободнорадикальной теории старения / В.А. Гусев, Л. Ф. Панченко // Вопр. мед. химии. 1982. - №4. - С. 8-25.

29. Диксон М. Ферменты: в 3-х т. / М. Диксон, Э. Уэбб. М.: Мир, 1982'. -Т. 1. - 389 с.

30. Диксон М. Ферменты: в 3-х т. / М. Диксон, Э. Уэбб. М.: Мир, 1982. -Т. 2. - 515 с.

31. Диксон М. Ферменты: в 3-х т. / М. Диксон, Э. Уэбб. М.: Мир, 1982. -Т. 3. - 605 с.

32. Дубинина Е.Е. Антиоксидантная система плазмы' крови / Е.Е. . Дубинина // Укр. биохим. журн. 1992. - Т. 64, №2. - С. 3-15.

33. Дэвис Г. Электрофорез. / Г. Дэвис. М.: Мир. — 1970. - 56 с.

34. Евстигнеева Р.П. Витамин Е как универсальный антиоксидант и стабилизатор биологических мембран / Р.П. Евстигнеева, И.М. Волкова, В.В. Чудинова // Биол. мембраны. 1998. - Т. 15, №2. - С. 119-137.

35. Емнова Е.Е. Препарат малатдегидрогеназы из термофильной водородной бактерии Pseudomonas thermophila. / Е.Е. Емнова, А.К. Романова, В.В. Котелев // Прикладн. биохим. и микрйбиол. 1982.• 18,№2.-С. 221-224.

36. Епринцев А.Т. Экспрессия и регуляция ферментов глиоксилатного цикла / А.Т. Епринцев, В.Н. Попов, М.Ю. Шевченко. Воронеж : Центрально-черноземное книжное издательство, 2005. — 224 с.

37. Жеребцов Н.А. Биохимия / Н.А. Жеребцов, Т.Н. Попова, В.Г. Артюхов. Воронеж: Изд-во Воронеж. Ун-та, 2002. — 693с.

38. Иванищев В.В. Кинетические свойства малатдегидрогеназы изхлоропластов хлопчатника / В.В. Иванищев // Докл. АН Тадж. ССР. — 1990. Т. 33, № 12. - С. 839-842.

39. Иванищев В.В. Ферменты метаболизма малата: характеристика, регуляция активности и биологическая роль / В.В. Иванищев, Курганов Б .И. // Биохимия. 1992 . - Т. 57, № 5. - С. 653-662.

40. Индукция пероксисомальной изоформы малатдегидрогеназы в печени крыс при пищевой депривации / В.Н. Попов и др. // Биохимия. 2001. -Т. 66, №5.-С. 617-623.

41. Интенсивность свободнорадикальных процессов и регуляция активности цитоплазматической NADP-изоцитратдегидрогеназы в кардиомиоцитах крысы в норме и при ишемии / JI.B. Медведева и др. // Биохимия. 2002. - Т. 67, № 6. - С. 838-849.

42. Кабачный В.И. Производные гетерозидов эффективные добавки к криозащитным средам / В.И. Кабачный, Н.И. Горбунова // Пробл. криобиол. - 2004. - № 2 .— С. 28-35.

43. Казимирко В.И. Свободнорадикальное окисление и антиоксидантная терапия / В.И. Казимирко, В.И. Бутылин, Н.И. Горобец.- К.: Морион, 2004. 160 с.

44. Кения М.В. Роль низкомолекулярных антиоксидантов при окислительном стрессе / М.В. Кения, А.И. Лукаш, Е.П. Гуськов // Успехи сов. биол. 1993. - Т.113, вып.4. - С. 456-469.

45. Кожевников Ю.Н. О перекисном окислении липидов в норме и патологии / Ю.Н. Кожевников // Вопр. мед. хим. 1985. - № 5. - С. 2-7.

46. Козлов А.В. Роль эндогенного свободного железа в активации перекисного окисления липидов' при ишемии / А.В. Козлов, Л.И.

47. Шинкаренко, Ю.А. Владимиров // Бюллютень экспериментальной биологии. 1985. - Т. 1. - С. 38-40.

48. Козлов Ю.П. Свободнорадикальное окисление" липидов в• биомембранах в норме и. патологии / Ю.П. Козлов // Биоантиокислители. М., 1975. - С. 5-14.

49. Колесниченко JI.C. Изменение активности ферментов метаболизма• глутатиона при иммобилизованном стрессе и их возможное значение / JI.C. Колесниченко, Н.С. Манторова, JI.A. Шапирова // Патол. физиология и эксперим. терапия. — 1990. №4. - С. 9-13.

50. Кондрашова М.Н. Отрицательные аэроионы и активные формы кислорода / М.Н. Кондрашова // Биохимия. 1999. - Т. 64, №3. - С. 430432.

51. Кочетов Г.А. Практическое руководство по энзимологии / Г.А.

52. Кочетов. М.: Высш. шк., 1980. - 272 с.

53. Крутикова Г.О. Глутатионпероксидазная и глутатионредуктазная активность печени крыс после введения селенита натрия / Г.О. Крутикова, И.М. Штутман // Укр. биохим. журн. 1976. - Т. 48, №2. -С. 223-227.

54. Кулинский В.И. Активные формы кислорода и оксидативная модификация макромолекул: польза, вред и защита / В.И. Кулинский // Соросовский Образовательный Журнал. 1999. -Т.38, №1. - С. 2-7.

55. Кулинский В.И. Структура, свойства, биологическая роль и регуляция глутатионпероксидазы / В.И. Кулинский, JI.C. Колиснеченко // Успехи современной биологии. 1993. - Т. 113, № 1. — С. 107-122.

56. Курганов Б.И. Аллостерические ферменты / Б.И. Курганов. М.: Наука, 1978.-С. 27-41.

57. Курганов Б.И. Анализ колоколообразных рН-зависимостей скоростей ферментативных реакций / Б.И. Курганов, Е.В. Петушкова // Биохимия.1992.-Т. 57.-С. 348-361.

58. Ленинджер А. Основы биохимии : в 3-х томах / А. Ленинджер. М. : Мир, 1985. - Т. 2. - С. 369-734.

59. Ллойд Э. Справочник по прикладной статистике / Э. Ллойд, У. Ледерман. М.: Финансы и статистика, 1990. - С. 493-513.

60. Лобзин Ю.В. Руководство по инфекционным болезням / Ю.В. Лобзин; Под ред. проф. Ю.В. Лобзина, проф. А.П. Казанцева. Ростов-на Дону: Феникс, 1997. — 736 с. Лужников Е.А. Клиническая токсикология / Е.А. Лужников. - М.: Медицина, 1982. - 368 с.

61. Локализация цикла С4 дикарбоновых кислот в клеточных структурах ассимиляционных тканей листа кукурузы / В.М. Персанов и др. // Физиология растений. - 1975. - Т. 22. - С. 479-483.

62. Лукьянова Л.Д. Кислородзависимые процессы в клетке и её функциональное значение / Л.Д. Лукьянова. — М.: Наука, 1982. 301 с.

63. Лущак В.И. Окислительный стресс и механизмы защиты от него убактерий / В.И. Лущак // Биохимия . 2001. - Т. 66, №5. - С. 592-609.

64. Ляхович В.В. Активированные кислородные метаболиты в монооксидазных реакциях /В.В. Ляхович, В.А. Вавилин, Н.К. Зенков // Бюллетень СО РАМН. 2005. -№4(118). - С. 7-12.

65. Маликов В.Ф. Ферментные системы обмена глутаминовой и яблочной кислот сухих семян пшеницы / В.Ф. Маликов, В.Р. Шатилов // Междунар. Конференция «Физиол. раст. наука 3-го тысячелетия», Москва, 4-9 октября 1999 г. : тез. докл. -М., 1999. - С. 627.

66. Мауэр Г. Диск-электрофорез. / Г. Мауэр // М.: Мир, 1971. 22 с.

67. Меерсон Ф.З. Стресс-лимитирующие системы организма и новые принципы профилактической кардиологии / Ф.З. Меересон // Обзорная информация. Медицина и здравоохранение. Серия: Проблемы кардиологии. М. - 1989. - №3. - С. 72.

68. Меньшикова Е.Б. Антиоксиданты и ингибиторы радикальных окисленных процессов / Е.Б. Меньшикова, Н.К. Зенков // Успехи современной биологии. 1993. - Т. 113, вып. 4. — С. 442-455.

69. Меньшикова Е.Б. Окислительный стресс при воспалении / Е.Б. Меньшикова, Н.К. Зенков // Успехи современной биологии. 1997. - Т. 117, вып. 2.-С. 155-165.

70. Новиков Ю.К. Свободнорадикальное воспаление и антирадикальнаязащита у больных бронхиальной астмой. (http://v^ovw.kuban.su/mcdicme/shtm/baza/rmj/nH-x/8.htm).

71. О нарушениях некоторых звеньев энергетического обмена при экспериментальной интоксикации гербицидом 2,4-ДА / Э.Ф.

72. Аглетдинов и др. // Горизонты физ.-хим. Биол. 2000. - С. 134-135. • 81. Осипов А.Н. Активные формы кислорода и их роль в организме / А.Н. Осипов, О.А. Азизова, Ю.А. Владимиров // Успехи биологической химии. - 1990. - Т. 31, № 2. - С. 180-208.

73. Пат. 4591555 США, МЕСИ C12Q 1/32. Malate dehydrogenase method / Larry H. Bernstain. № 488693; заявл. 27.04.1983, опубл. 27.05.1986. -(http://www.patents.com/Malate-dbhydrogenase-method/US4591555/en-US/)

74. Пентюк А. А. Поражение печени ксенобиотиками / А. А. Пентюк, JI. В. Мороз, О. В. Паламарчук // Соврем, проблемы токсикологии. 2001. -№2.- С. 8-16.

75. Пероксидное окисление липидов и стресс / В.А. Барабой и др.. -СПб.: Наука, 1992. 148с.

76. Петрович Ю.А. Глутатионпероксидазы в системе антиоксидантной защиты мембран / Ю.А. Петрович, Д.В. Гуткин // Пат. физиол. 1981. -№5. - С. 76-78.

77. Петровский В. Д. Большая медицинская энциклопедия / В. Д. Покровский. 3-е изд., дораб. - М.: Советская энциклопедия, 1977. - Т. 5.-568 с.

78. Пинейру де Карвалью М.А.А. Малатдегидрогеназы высших растений /

79. М.А.А. Пинейру де Карвалью, А.А. Землянухин, А.Т. Епринцев. -Воронеж : Изд-во Воронеж, ун-та, 1991. — 214с.

80. Регуляция ферментативной активности при оксидативном стрессе / Т.Н. Попова и др.. Воронеж: Изд-во Воронеж, ун-та, 2009. - 344 с.

81. Рыжова Д.П. Особенности ингибирования избытком субстрата различных олигомерных форм лактатдегидрогеназы и малатдегидрогеназы / Д.П. Рыжова, М.В. Иванов // 2 Съезд Биохим. общества РАН, Москва, 19-23 мая 1997 г. : тез. докл. М., 1997. - С.63.

82. Сафонова О.А. Свойства и регуляция активности НАД- и НАДФ-малатдегидрогеназ в условиях оксидативного стресса в миокарде крыс при ишемии : дис. . канд-та биол. наук : 030004 : защищена 29.12.04 / О.А. Сафонова. Воронеж, 2004. - 264 с.

83. Свободнорадикальные процессы в биосистемах / Попова Т.Н. и др.. -Воронеж : Издательство ИПК «Кириллица». 2008. — 192 с.

84. Сенкевич С.Б. Очистка и некоторые свойства НАДФ-специфической МДГ из митохондрий коры надпочечников быка / С.Б. Сенкевич // Биохимия. 1988.-Т. 53, № 11.-С. 1783-1790.

85. Скулачев В.П. Кислород в живой клетке: добро и зло / В.П. Скулачев // Соросовский Образовательный Журнал. 1996. - № 3. - С.4-16.

86. Стальная И.Д. Метод определения малонового диальдегида с помощью 2-тиобарбитуровой кислоты / И.Д. Стальная // Современные методы в биохимии; под ред. В.Д. Ореховича. М.: 1977. С. 66-68.

87. Ткемаладзе Г.Ш. Кинетические свойства мататдегидрогеназы растений / Г. Ш. Ткемаладзе // Биохимия. 1981. - Т. 46, № 6. - С. 1133—1141.

88. Ткемаладзе Г.Ш. Стабильность малатдегидрогеназы и NADP-глутаматдегидрогеназы чайного растения и виноградной лозы./ Г.Ш. Ткемаладзе // Сообщ. АН ГССР. 1984: - 116, № 3. - С. 605-608.

89. Уклистая Е.А. Антиоксиданты и антигипоксанты в комплексном лечении больных хроническим бронхитом / Е.А. Уклистая, Г.А. Трубников, А.А. Панов // Южно-российский журнал. — 1998. -№4. — С. 94-98.

90. Федорова Н.Ю. Состояние системы глутатионпероксидазы — глутатионредуктазы в стимулированном к регенерации органе и ее роль в клеточной пролиферации : дис . канд. биол. наук / Н.Ю. Федорова. Воронеж, 1999. - 186 с.

91. Фридович И. Радикалы кислорода, пероксид водорода и токсичность кислорода // Свободные радикалы в биологии / И. Фридович ; под ред. У. Прайора. -М. : Мир, 1979.-Т. 1.-С. 272-314.

92. Хабриев Р.У. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Р.У. Хабриев. М. : Медицина, 2005. - 832 с.

93. Хачкалян Т.К. Множественные молекулярные формы НАД-зависимой малатдегидрогеназы в онтогенезе / Т. К. Хачкалян, А.А Симоняй ; Ред. "Биол. Армении". Ереван, 1986 - 13 с. - Деп. в ВИНИТИ 1.12.86, № 8150.

94. Хворостинка В. Н. Клиническая эффективность а-липоевой кислоты (бертилиона 300) при хронических токсических заболеваниях печени / В.Н. Хворостинка, JI.P. Бобронникова // Мистецтво лжувания. 2004.

95. С. 60-62. - (http://m-I.com.ua/7aicH196).

96. Хемилюминесцентная оценка антиоксидантного статуса больных атеросклерозом / О.А. Азизова и др. // Бюллютень экспериментальной биологии и медицины. 2001. - Т. 131, № 5. - С. 524-526.

97. Цитология ферментов / под ред. Покровского. — М. : Мир, 1971. 89с.

98. Чеснокова Н.П. Молекулярно-клеточные механизмы инактивации свободных радикалов в биологических системах / Н.П. Чеснокова, Е.В. Понукалина, М.Н. Бизенкова // Успехи современного естествознания. — 2006. -№7.-С. 29-36.

99. Шанин Ю.Н. Антиоксидантная терапия в клинической практике / Ю.Н. Шанин, Е.В. Зиновьев ; под ред. Ю.Н. Шанина. СПб.: ЭЛБИ, 2003. -128с.

100. Шапиро А.З. Свойства малатдегидрогеназы мышц мидий Mytilus galloprovincialis / А.З. Шапиро // Ж. эволюц. биохимии и физиол. -1984. Т. 20, № 2. - С. 135—139.

101. Шерин П.С. Фотохимические реакции триптофана и его природного метаболита кинуренина: автореф. . дис. канд. биол. наук / П.С. Шерин Новосибирск, 2009. - 18с.

102. Экспериментальное исследование эффективности препарата Биомелан при остром отравлении тетрахлорметаном / A.M. Шаяхметова и др. // Лгкування штоксикацш.http://www.medved.kiev.ua/arhivmg/st 2002/02 1 16.htm).

103. Эмеретли И.В. Влияние гипоксии различной продолжительности на активность малат- и лактадегидрогеназы в тканях мидии / И.В. Эмеретли // Гидробиол. ж. 2001. - Т. 37, № 2. - С. 81-85.

104. Эффекты ионов кальция на вне- и внутриклеточные процессы генерации активных форм кислорода в фагоцетирующих клетках крови / А.В. Бизюкин и др. // Бюллетень экспериментальной биологии и медицины. 1998. - Т. 126, № 9. - С. 334-336.

105. Anderson L.E. Extraction of a membrane bound factor and a reconstitution of light activation of NADP-malate dehydrogenase / L.E. Anderson // 5th Int. Congr. Photosynth. 1980. - V. 52, № 7. - P. 332-335.

106. Antonenkov V. D. Effect of chronic ethanol, catalase inhibitor on the activity of enzymes related to peroxide metabolism in rat liver and heart / V. D. Antonenkov, L.F. Panchenko // International Journal of Biochemistry. -1988. -V. 20, №8. P. 823-828.

107. Aspray E. Th. Malate Dehydrogenase, Inhibition of Pig Heart Supernatant Enzyme by Iodoacetamide / Th. E. Aspray, George M. Riihimaki, Raymond G. Wolfe // J. Biol. Chem. 1979. - V.254, №5. - P. 1776-1779.

108. Bansal P. Impact of lead and cadmium on enzyme of citric acid cycle in germinating pea seeds / P. Bansal, P. Sharma, V. Goyal // Biol, plant. — 2002.- V. 45, № 1. P. 125-127.

109. Baro J. Influence of pH on the kinetic mechanism of chicken liver cytoplasmic malate dehydrogenase (B form) / J. Baro, A. Cortes, Fes. J. Bozal // Int. J. Biochem. 1981. -V. 13, № 4. - P. 463—469.

110. Bast A.G. Oxidants and antioxidants / A.G. Bast, G.R. Halnen , C.S.A. Doelman // state of the art. American J.Med. 1991. -V. 91. - P. 7-13.

111. Belomo G. Cell damage by oxygen free radicals / G. Belomo // Cytotechnology. 1991. -V.5, №1. - P. 571-573.

112. Berkson В. M. A conservative triple antioxidant approach to the treatment of hepatitis C. Combination of alpha lipoic acid (thioctic acid), silymarin, and selenium: three case histories / В. M. Berkson // Med. Klin.- 1999. V. 94. -P. 84-89.

113. Birktoft Jens J. Refined crystal structure of cytoplasmic malate dehydrogenase at 2.5 A resolution / Jens J. Birktoft, Gale Rhodes, Leonard Banaszak // J. Biochemistry. 1989. - V. 28, № 14. - P. 6065-6081.

114. Bracht A. Mitochondrial L-malate dehydrogenase: substrate inhibition in the .coenzyme / A. Bracht, A.P. Campello // Arg. biol. et tecnol. 1980. -V. 23, № 3. - p. 337—341.

115. Brigellius-flohe R. Vitamin E: function and metabolism / R. Brigelius-flohe, G. Traben // The FASEB Journal. 1999. - № 13. - P. 1145-1155.

116. Burt A.D. diagnostic and interpretation of steatosis and steatohepatitis / A.D. Burt, A. Mutton, C.P. Day // Semin. Diagn. Pathol. 1998. - № 15. - P. 246-258.

117. Bush Roy S. Malate dehydrogenase from bovine tissues / Roy S. Bush // Can. J. Anim. Sci. 1985. - V.65, № 2. - P. 383-390.

118. Cadmium toxicity effects on growth, mineral and chlorophyll contents, and activities of stress related enzymes in young maize plants (Zea mays L.) / A. Lagriffoul et al. // Plant, and Soil. 1998. - V. 200, № 2. - P. 241-250.

119. Carr P.D. Chloroplast NADP-malate dehydrogenase: structural basis of light-dependent regulation of activity by thiol oxidation and reduction / P.D. Carr, D. Verger, A.R. Ashton // Structure Fold Des. 1999. - V. 7, № 4. - P. 461-475.

120. Chan К. T. Studies on the Presence and Role of Tryptophan in Pig Heart Mitochondrial Malate Dehydrogenase / К. T. Chan, A. Karl Schellenberg // J. Biol. Chem. 1968. - V. 243, № 23, P. 6284-8290.

121. Chaperone-like activity of tubulin. Binding and reactivation of unfoldedsubstrate enzymes / Manna Tapas et al. // J. Biol. Chem. — 2001. — V. 276, №43.-P. 39742-39747.

122. Characterization and crystallisation of the malate dehydrogenase from Streptomyces aureofaciens / N. Mernik et al. // Gen. physiol. and Biophys. 1998.'-V. 17, №1.-P. 49-51.

123. Chrungoo V.J. Differential biochemical response of fleshly isolated rat hepatocytes to paracetamol, carbon tetrachloride and D-galactosamine toxicity / V.J. Chrungoo, K. Singh, J. Singh // Indian J. Exp. Biol. 1997. — V. 35,N.6.- P. 603-610.

124. Cooper T.G. Mitochondria and glyoxysomes from castor been endosperm / T.G. Cooper, H. Beevers // J. Biol. Chem. 1969. - V. 244, № 13.'- P. 3507-3513.

125. Crow К. E. Human liver cytosolic malate dehydrogenase: purification, kinetic properties, and role in ethanol metabolism / К. E. Crow, T. J. Braggins, M. J. Hardman // Arch. Biochem. and Biophys. 1983. - V. 225,• №2.-P. 621-629.

126. Crystalline NAD/NADP-dependent malate dehydrogenase; the enzyme from the thermoacidophilic archaebacterium Sulfolobus acidocaldarius / T. Hartl et al. // Biol. Chem. Hoppe-Seyler. 1987. - V. 368, № 3. - P. 259-267.

127. DeLeve L. Glutathione metabolism and its role in hepatotoxity / L. DeLeve, N. Kaplowitz // Pharmacol. Ther. 1991. - №52. - P. 287-305.

128. Detection and study of protein factors involved in dithiothreitol activation of NADP-malate dehydrogenase from a C4 plant / J. Vidal et al. // Plant Sci. Lett. 1978.-V. 11, № 3-4.-P. 305-310.

129. Hormonal regulation of malate-aspartate shuttle enzymes during postnatal development of mice / S. Dey, R. Sharma // Indian J. Biochem. and Biophys.- 1998. V. 35, № 4. - P. 224-228.

130. Temperature adaptation of cytosolic malate dehydrogenases of limpets (genus Lottia): differences in stability and function due to minor changes in sequence correlate with biogeographic and vertical distributions / Y.'Dong,

131. GN. Somero // J. Exp. Biol. 2009 - V. 212(Pt 2). - P. 169-177.

132. Effect of oral dosing vehicles on the subchronic hepatotoxity of carbon tetrachloride in the rat / K.P. Koporec et al. // J. Toxicol. Environ. Health.- 1995.-V. 44, N.l. — P. 13-27.

133. Effect of route and pattern of exposure on the plasmacokinetics and acute hepatotoxity of carbon tetrachloride / U.Y. Sanzgiri et al. // Toxicol. Appl. Pharmacol.-1995.-V. 134,N.l.-P. 148-154.

134. Elduque A. Intramitochondrial location of the molecular forms of chiken liver mitochondrial malate dehydrogenase / A. Elduque, F. Casado, A.

135. Cortes// Int. J. Biochem. 1982. -V. 14, № 3. - P. 221-229.

136. Enhancement of the turnover number of thermostable malate dehydrogenase by deteting hydrogen bonds around the catalytic site / N. Makoto et al. // Biochem, and Biophis. Res. Commun. 1996. - V. 225, №3.-P. 844-848.

137. Enzyme activities NADPH-forming metabolic pathways in normal and leukemic leukocymes / F. Belfiore et al. // Clin. Chem. 1975. — V. 21. — P. 880-883.

138. Essential histidine at the active site of sorghum leaf NADP-dep'endent malate degydrogenase / M. Lemaire et al. // J. Biol. Chem. 1994. - V.269, № 44. P. 27291- 27296.

139. Evidence for chloroplastic localization of spinach leaf NADP malate degydrogenase. Activating factors / J.-P. Jacguot et al. // Planta. 1977. -V. 137.-P. 89-90.

140. Evidence of hepatocyte apoptosis in rat liver after the administration of carbon tetrachloride / J. Shi et al. // Am. J. Pathol. 1998. - V. 153. - P. 515-525.

141. Fickenscher K. Amino acid sequence similarity between malate dehydrogenases (NAD) and pea chloroplast malate dehydrogenase (NADP) /

142. K. Fickenscher, R. Scheibe, F. Marcus // Eur. J. Biochem. 1987. - V. 168, № 3. - P. 653-658.

143. Fickenscher K. Limited proteolysis of inactive tetrameric chloroplast NADP-malate dehydrogenase produces active dimer / K. Fickenscher, R. Scheibe // Arch. Biochem. and Biophys. 1988. - V. 260, № 2. - P. 771779.

144. Fickensher K. Purification and properties of NADP-dependent malate dehydrogenase from pea leaves / K. Fickensher, R. Scheibe // Biochem. et Biophys. Acta. 1983. -V. 749, № 3. - P. 249-254.

145. Fromenty B. Micro vesicular steatosis and steatohepatitis: role of mitochondrial dysfunction and lipid peroxidation / B. Fromenty, A.Berson, D. Pessayre // J. Hepatol. 1997. - V. 26 (Suppl. 1). - P. 13-22.

146. Genetic control of isozymes in the primary gene pool Phaseolus lunatus L. / Bi Irie Zoro et al. // Biotechnol., agr., soc. et environ. 1999. -V. 3, № 1. - P. 10-27.

147. Glutamic and aminoadipic semialdehydes are the main carbonyl products of metal-catalyzed oxidation of proteins / Requena J.R. et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2001. - V. 98. - P. 69-74.

148. Goward C. R. Malate dehydrogenase: A model for structure, evolution, and catalysis / C. R. Goward, D. J. Nic'holls // Protein Science. 1994. - № 3. -P. 1883-1888.

149. Gregory M. Chemical modification of bovine heart mitochondrial malate dehydrogenase. Selective modification of cystein and histidine eugene / M. Gregory // J. Biol. Chem. 1975. - V. 250, № 14, P. 5470-5474.

150. Hand S. C. Purification and properties of cytoplasmic malate dehydrogenase isolated from a larval crustacean, Artemia salina / S. C. Hand., M. M. Becker, F. P. Conte // J. Exp. Zool. 1981. - V. 217, № 2. - P. 119-212.

151. Hartl T. Die malat-dehydrogenase des archebacteriums Sulfolobus acidocaldarius. Reinigung, kristallisation und charakterisierung : diss . dokt. naturwis. Fak. Chem. Univ. / T. Hartl. Stattgart, 1987. - 169 p.

152. Hayes M. K. Mitochondrial malate dehydrogenase from corn. Purification of multiple forms / M. K. Hayes, Michael H. Luethy, Thomas E. Elthon // Plant Physiol. 1991 . -V. 97, № 4. - P. 1381-1387.

153. Hordur K. Purification and properties of malate dehydrogenase from the extreme thermophile Bacillus caldolyticus / K. Hordur, Ponnamperuma Cyril // Limits Life. 1980. - T. 67, № 6. - C.47 — 54.

154. Interaction among vitamin C, vitamin E, and beta-carotene / E.'Niki et al. ' .// Am. J. Clin. Nutr. 1995. - V.'62. - P. 1322-1326.

155. Jacquot J.-P. Enzyme regulation in C4 photosyntesis:. purification and properties of thioredoxin-linked NADP-malate dehydrogenase from corn leaves / J.-P. Jacquot, B.B. Buchanan // Plant Phys. 1981. - V. 68. - P. 300-304.

156. Janiczek O. Purification and properties of malate dehydrogenase from Paracoccus denitrificans / O. Janiczek, J. Kovar, Z. Glatz // Prep. Biochem. 1993.-V. 23, №3.-P. 285-301.

157. Jawalia N. NADP-malate dehydrogenase from leaves Zea mays. Chemical and kinetical properties / N. Jawalia // Plant Physiol. 1988. - V. 263, № 7. -P. 677-692.

158. Jeffery D. Citratesyntase and malate dehydrogenase from tomato fruit / D. Jeffery, P. W. Goodenougt, P.D. Weltzman // Phytochemistry. 1988. - V. 27, № 1, P. 41-44.

159. Johansson K. Structural basis for light activation of a chloroplast enzyme: the structure of sorghum NADP-malate dehydrogenase in its oxidized form / K. Johansson, S. Ramaswamy, M. Saarinen // Biochemistry. 1999. - V. 38, № 14.-P. 4319-4326.

160. Johnson U. S. Properties and regulation of leaf NADP-malate dehydrogenase and malic enzyme in plant with the C4-dicarboxylic acid pathway of photosynthesis / U. S. Johnson, M. D. Hatch // Biochem. J. -1970.-V. 119, №2.- P. 273-277.

161. Johnston D.E. Mechanism of early carbon tetrachloride toxicity in cultured rat hepatocytes / D.E. Johnston, C. Kroening // Pharmacol. Toxicol. — 1998. -V. 83; №6. P. 231-239.

162. Increase of lipid hydroperoxides in liver mitochondria and inhibition of cytochrome oxidase by carbon tetrachloride intoxication in rats / Ikeda K. et al.// Free.Radic. Res.-1998.-V.28,N.4. P. 403-410.

163. Kagawa T. NADP-malate dehydrogenase from leaves of Zea mays: purification and physiological, chemical and kinetical properties / T. Kagawa // Arch. Biochem. and Biophys. 1988. - V. 260, № 2. - P. 674

164. Kagawa Т. Regulation of C4 photosynthesis: characterization of protein factor mediating the activation and inactivation of NADP-malate dehydrogenase / T. Kagawa, M.D." Hatch // Arch. Biochem. and Biophys. -1977. -V. 184, № 1. P. 290-297.

165. Kamal-Eldin A.L. The chemistry and antioxidant properties of tocopherols and tocotrienols / A.L. Kamal-Eldin, A. Appelqvist // Lipids. 1996. - V. 31.-P. 671-701.

166. Kil I.S. Regulation of Mitochondrial NADP-dependent Isocitrate Dehydrogenase Activity by Glutathionylation /I.S. Kil, J.-W. Park // J. Biol. Chem.-2005.-V. 280, № 11.-P. 10846-10854.

167. Kook Park In. Effects of NAD or NADP on the stability of liver and pectoral muscle enzymes in 3-acetylpyridine treated quail by heat and trypsin / Park In Kook, Kim Jae Young // Int. J. Biochem. and Cell Biol. 1998. - V. 30, № 11.-P. 1223-1234.

168. Korshunov S. High potential actuates a mechanism of production of reactive oxygen species in mitochondria / S. Korshunov, V.P. Skulachev,

169. A.A. Starkov//FEBS Lett.- 1997:-V. 416.-P.15-18.

170. Krinsky N. I. Carotenoids as antioxidants / N. I. Krinsky // Nutrition . -2001.-V. 17.-P. 815-817.

171. Kubik-Dobosz Genowefa. The intracellular localization of malate dehydrogenase isoenzimes in Pisum arvense roots / Genowefa Kubik

172. Dobosz // Acta soc. Bot. Pol. 1986. - V. 55, № 4. - P. 621 - 627.

173. Ku Maurice S.B. Activation of NADP-malate dehydrogenase, pyruvate, Pi dikinase, and fructose-1,6-bisphosphatase in relation to photosynthetic rate in maize / S.B. Maurice Ku // Plant Physiol. 1984. - V. 76, №1.-P. 238243.

174. Labrou N. E. Dye-affinity labelling of bovine heart mitochondrial malate dehydrogenase and study of the NADH-binding site / N. E. Labrou, E. Eliopoulos, Y. D. Clonis//J. Biochem. 1996.-V. 315.-P. 687-693.

175. Laemmli U.K. Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4 / U.K. Laemmli // Nature. 1970. - V.227. -P.680-685.

176. Lander H. M. An essential role for free radicals and derived species in signal transduction / H. M. Lander // FASEB J. 1997. - Vol. 11, № 1. - P. 118124.

177. Lee W. M. Drug-induced hepatotoxity / W. M. Lee // N. Eng. J. Med. -1995.-V. 333, №.17.- P. 1118-1127.

178. Light activation of NADP-malate dehydrogenase in guard cell protoplasts from Viciafaba L. / K. Gotow et al. // Plant Physiol. 1985. - V. 79, № 3. -P. 829-832.

179. Light modulated NADP-malate dehydrogenases from mossfern and green algae: insights into evolution of the enzyme's regulation / O. Ocheretina et al.//Gene.-2000.-V. 258, №1-2.-P. 103-110, 147-154.

180. Liver-specific induction of NADPH-generating enzymes by polychlorinated biphenyls in rats / Y. Hitomi et al. // Biosci., Biotechnol. and Biochem. — 1993.-V. 57, №7.-P. 1134-1136.

181. Localization of the C4 and C3 pathways of photosynthesis in the leaves of penriisetum purpureum and other C4 species / M. Gutierrez et al. // Planta. 1974. - V. 119. - P. 267-278.

182. Mansini E. Effects of temperature on the mitochondrial malate dehydrogenase of adult muscle of Toxocara canis / E. Mansini, E. G.

183. Oestreicher, L. P. Ribeiro // Aroh. Lat. phisiol. et biochim. 1989. - Y. 97, №6.-P. 447-453.

184. Mansini E. Purification and properties of mitochondrial malate dehydrogenase of Toxocara canis muscle./ E. Mansini, E.G. Oestreicher, Luiz P. Ribeiro // Сотр. Biochem and phisiol. 1986. - V. 85, № 1. - P. 223-228.

185. Mass spectrometric sequencing of proteins silver-stained poly aery lamide / A. Shevchenko et al. // Anal. Chem. 1996. - V. 68. - P. 850-858.

186. Mc Guire J. P. Studies of enzyme Inhibition. The interaction of some platinum(II) complexes with fumarase and malate dehydrogenase / Joanne P. Mc Guire, Michael E. Friedman, Charles A. McAulifie // Inorg. chim. Acta.- 1984.-V. 91, №3.-P. 161-165.

187. Molecular properties and thioredoxin-mediated activation of spinach . chloroplastic NADP-malate dehydrogenase / N. Ferte et al. // FEBS Lett.1982.-V. 146, №1.-P. 133-138.

188. NADH-NADP-MDH phaseolus vulgaris / J. Vidal et al. // Phisiol. Plant. -1977.-V. 39.-P. 190-195.

189. NADP-malate dehydrogenase from unicellular green alga Chlamidomonas reincardtii. A first step toward redox regulation / S. D. Lemaire et al. // PlantPhys.-2005.-V. 137.-P. 514-521.

190. Noda Y. Hydroxyl and superoxide anion radical scavenging activites of natural source antioxidants using the computerized JES-FR30 ESPspectrometer system / Y. Noda, K. Anzai, A. Mori // Biochem. Mol. Biol. Int. 1997.-V. 42, №1.-P. 35-44.

191. Okabayashi K. Purification and properties of mitochondrial malate dehydrogenase from unfertilized eggs of the seaurchin Anthocidariscrassispina / Ken Okabayashi, Eizo Nakano // J. Biochem. 1984. - V. 95, №6.-P. 1620-1632.

192. Pacuet K.J. The carbon-tetrachlo'ride-hepatotoxicity as a model of liver damage / K.J. Pacuet, U. Kamphausen // Acta Hepato-Gastroenterol. 1975. - V. 22. - P. 84-88.

193. Pai E.F. The catalytic mechanism of glutathione reductase as derived from ray diffraction analyses of reaction intermediates / E.F. Pai, G.E. Schulz // J. Biol. Chem. 1983. - V. 3, №.258. - P. 1752-1757.

194. Plants under climatic stress. VI. Chilling and light effects on photosynthetic enzymes of sorgnum and maize / Л.О. Taylor et al. // Plant. Physiol. -1974. V. 54, № 5. - P. 696-701.

195. Potential mechanisms of benzamide riboside mediated cell death / Polgar D. et al. // Curr. Medicinal Chem. 2002. - № 7 . - P. 765-771.

196. Properties and primary structure of a thermostable L-malate dehydrogenase from Archaeoglobus fulgidus / Anne Siri Langelandsvik et al. // Arch. Microbiol. 1997. - V. 168, № 1. - P. 59-67.

197. Protein measurement with the Folin Phenol reagent / O. Lowry et all. // J. Biol. Chem. 1951. - V. 194, № 1. - P. 265-271.

198. Purification and immunological properties of NAD-Iinked malate dehydrogenase isozymes from Euglena gracilis / Miyatake Kazutaka et all.//Agr. and Biol. Chem.-1986.-V. 50, № 10.-P. 2651-2653.

199. Purification and molecular properties of NADP-dependent malate dehydrogenase from sorghum leaves / C. Li-Bin et al. // Acta phythophysiol. sin. 1987.-V. 13, №2.-P. 113-121.

200. Purification and N-terminal amino-acid sequences of bacterial malate dehydrogenases from six actinomycetales strains and from Phenylobacterium immobile strain E / Theobald O. Rommel et al. // Biol Chem. 1989. - V. 370, № 7. - P. 763-768.

201. Qiu-Xiang Pang. Связанные с полом различия в изоферментных фенотипах у ланцетника Branchi'ostoma belcheri / Pang Qiu-Xiang, Zhang

202. Shi-Cui, Wang Chang-Fa // Dongwu xuebao. 2004. - V. 50, № 1. - P. 6267.

203. Rainer Jaenicke. Structure-function relationship of mitochondrial malate dehydrogenase at high dilution and in multicomponent systems / Jaenicke Rainer / Biol. Chem. Hoppe-Seyler. 1987. - V. 368, № 7. - P. 871-878.

204. Robinson B.H., Olei J. Citrate transport in guinea pig heart mitochondria / B.H. Robinson, J. Olei // Biochem. 1975. - V. 53, № 5. - P. 643-64.

205. Ethylmaleimide modification of active center sulfhydryl residues / E. M. Gregory et al. // J. Biol. Chem. 1971. - V. 246, № 17. - P. 5491-5497.

206. Scheibe R. Light modulation of NADP-dependent malate dehydrogenase is regulated by NADP / R. Scheibe // Hoppe-Seyler's Z. Physiol. Chem. -1983. -V. 364, № 9.- P: 1207-1208.

207. Scheibe R. NADP-malate dehydrogenase in Сз-plants: regulation and a role of a light-activated enzyme / R. Scheibe // Physiol. Plant. 1987. - V. 71, №3.-P. 393-400.

208. Scheibe R. Quantitation of the groupes involved in the reductive activation of NADP-malate dehydrogenase / R.' Scheibe // Biochem. et Biophys. Acta: Protein Struct, and Mol. Enzymol. 1984. - V. 788, № 2. - P. 241-247.

209. Scheibe R. The dark NADP-dependent malate dehydrogenase from pea chloroplast is catalytically active in the presence of guanidine-HCl / R. Scheibe, K. Fickenscher // FEBS Lett. 1985. - V. 180, № 2. - P. 317-320.

210. Schepens I. The dimer contact area of sorghum NADP-malate dehydrogenase: role of aspartate 101 in dimer stability and catalytic activity / I. Schepens, P. Decottignies, E. Ruelland et al. // FEBS Lett. 2000. -V. 471,№2-3.-P. 240-244.

211. Schurman P. Improvedin vitro light activation and assay systems for two spinach chloroplast enzymes / P. Schurman, J. P. Jacguot // Biochem. et Biophys. Acta. 1979. -V. 569, № 2. - P. 309-312.

212. Shinji Iijima. Reversible denaturation of thermophilic malate dehydrogenase by guanidine hydrochloride and acid / Iijima Shinji, Saiki Takashi, Beppu Teruhiko //J. Biochem. 1984. -V. 95, № 5. - P. 1273-1281.

213. Sites of interaction of thioredoxin with sorghum NADP-malate dehydrogenase / A. Goyer et al. // FEBS Lett. 2001. - V. 505, № 3. - P.405.408.

214. Skulachev V.P. Membrane-linked systems preventing superoxide formation / V.P. Skulachev // Bioscience Reports. 1997. - V.17. - P.347-366.

215. Skulachev V.P. Mitochondrial physiology and pathology; concept of programmed death of organelles, cells and organisms / V.P. Skulachev //

216. Mol. Aspects of Medicine.- 1999.-№>20.-P. 139-184.238.' Sloan R. A kinetic assay for the isoenzymes of malate dehydrogenase / R. Sloan, E.J. Roberi//Biochem. Soc. Trans. 1991. - V. 19, № 1. - P. 545.

217. Smith K. A facile method for the isolation of porcine heart mitochondrial malate dehydrogenase by affinity elution chromatography on Procion Red HE3B / K. Smith, Trichur K. Sundaram // Biosci. Repts. 1983. - V. 3, № ll.-P. 1035-1043.

218. Stadtman E.R. Protein oxidation / E.R. Stadtman, R.L. Levine // Ann. NY Acad. Sci.-2000.-V. 899.-P. 191-208.

219. Steffan J. S. Structural and functional effects of mutations alfering the subunit interfact of mitochondrial malate dehydrogenase/ J. S. Steffan, Mc Alister-Hann Lee // Arch. Biochem. and Biophys. 1991. - V. 287, № 2. -P. 276-282.

220. Stoyanovsky D.A. Thiol oxidation and cytochrome P450-dependent metabolism of CC14 treggers Ca2+ release from liver microsomes •/ D.A. Stoyanovsky, A. Cederbaum // Biochemistry. 1996. - V. 35, №. 49. - P. 15839-15845.

221. Structural basis for cold adaptation. Sequence, biochemical properties, and crystal structure of malate dehydrogenase from a psychrophile Aquaspirillium arcticum / K. Sun-Yong et al. // J. Biol. Chem. 1999. - V. 274, № 17.-P. 11761-11767.

222. Peter, O.V. Subasy // Gen. and Compar. Endocrinol. 1990. - V. 79, № 2. -P. 246-252.

223. Suzuki Y.J. Free Radical / Y.J. Suzuki, HJ. Forman, A. Sevanian // Free

224. Radical Biol. Med. 1996. - V. 22, № 1/2. - P. 269-285.

225. The auto inhibition of sorghum NADP malate dehydrogenase is mediated by a C-terminal negative charge / E. Ruelland et al. // J. Biol. Chem. 1998. - V. 273, № 50. - P. 33482-33488.

226. The malate dehydrogenase isoforms from Trypanosoma brucei: subcellular localization and differential expression in bloodstream and procyclic forms / A. Aranda et al. // Int J Parasitol. 2006. - V. 36, № 3. - P. 295-307.

227. The N-Ethylmaleimide-sensitive Cysteine Residue in the pH-dependent Subunit Interactions of Malate Dehydrogenase / David C. Wood et al. // J.

228. Biol. Chem. 1981. -V. 256, № 19. - p. 9895-9900.

229. The palmitoleate: a natural selective denaturant of enzymes / M. T. Vincenzini et al. // Int. J. Biochem. 1953. - V. 15, № 10. - P. 1083-1086.

230. Thermal stability of the molecular forms of guinea-pig skeletal muscle cytoplasmic malate dehydrogenase and kinetic mechanism of the thermostable form / A. Sorribas et all. // Int. J. Biochem. 1981. - V. 13, №3.-P. 355-364.

231. The role of active site arginines of sorghum NADP-malate dehydrogenase in thioredoxin-dependent activation and activity /1. Schepens et al. // J. Biol.

232. Chem. 2000. - V. 275, № 46. - P. 35792-35798.

233. Toshihisa Obshima. Purification and characterization of Malate dehydrogenase from the phototrophic bacterium. Rhodopseudomonascapsulata / Obshima Toshihisa, Sacuraba Haruhico // Biochem. et biophis. Acta. 1986. - V. 869, № 2. - P. 171 - 177.

234. Uptake, distribution • and elimination of carbon tetrachloride in rat tissues following inhalation and ingestion exposures / C.E. Dallas et al. // Toxicol. Appl. Pharmacol. 1997. -V. 143, № 1. - P. 120-129.

235. Vidal J. Identification of a cDNA clon for sorghum leaf malate . dehydrogenase (NADP) light dependent mRNA accumulation / J. Vidal, C.

236. Clareal // Eur. J. Biochem. 1988. - V. 174, № 3. - P. 497-501.

237. Varriale B. Effetto della castrazione e del diidrotestosterone (DHT) sulla malato-deidrogenasi ipotalamica nel topo maschio / B. Varriale, M. Milone, C.H. Giovanni // Boll. Soc. natur. Napoli. 1981(1982). - V. 90, № 3. - P. 65-71.

238. Waters J.K. Cytoplasmic malate dehydrogenase from Phycomyces blakesleanus: kinetics and mechanism / J.K. Waters, B. Dale // Can. J. Biochem. and Cell. Biol. 1985. -V. 63, № 10. - P. 1097-1105.

239. Waters J.K. Malate dehydrogenase from Rhizobium japonicum 31 lb-143 , Bacteroides and Glycine max root-nodule mitichondria / James K. Waters,

240. B. Dale, David. W. Emerich / Biochemistry. 1985. - V. 24, № 23. - P. 6479 - 6486.

241. Weiss S.J. The interolay of oxidants and proteinases in neutrophil-mediated tissue damage / S.J.Weiss // J. Cell Biochem. 1991. - Suppl. 5 c. - P. 210.

242. Wiseman H. Damage to DNA by reactive oxygen and nitrogen species: role ininflammatory disease ans progression to cancer / H. Wiseman, B. Hallivel // Biochem.J.- 1996.-V. 313, № 1.-P. 17-19.

243. Wright K.S. Alteration of the Specificity of Malate Dehydrogenase by Chemical Modulation of an Active Site Arginine / Ki.S. Wright, R.E. Viola //J. Biol. Chem. -2001. Vol. 276, № 33, P. 31151-31155.

244. Yin Yifeng. Identification of functional paralog shift mutations: Conversion of Escherichia coli malate dehydrogenase to a lactate dehydrogenase /Yifeng Yin and JackF. Kirsch/ PNAS. -2007.- V. 104, №44.-P. 17353-17357.

245. Yuch Y.A. Purification and molekular properties of malate dehydrogenase from the marine diatom Nitzaching alba / A.Y. Yuch, Che-Sheng Chung, Lai Yiu-Kay // Biochem. J. 1989. - V. 258, № 1. - P. 221-228.

246. Zhu.W. The roles played by crucial free radicals like lipid free radicals, nitric oxide, and enzymes NOS and NADPH in CC14-induced acute liver injury of mice / W. Zhu, P.C. Fung // Free Radic. Biol. Med. 2000. - V. 29, №9. - P. 870-880. '

247. Zhang P. Beta-carotene and protein oxidation: effects of ascorbic acid and alpha-tocopherol / P. Zhang, S. Omaye // Toxicology. 2000. - V. 146. - P. 37-47.

Обратите внимание, представленные выше научные тексты размещены для ознакомления и получены посредством распознавания оригинальных текстов диссертаций (OCR). В связи с чем, в них могут содержаться ошибки, связанные с несовершенством алгоритмов распознавания. В PDF файлах диссертаций и авторефератов, которые мы доставляем, подобных ошибок нет.