Клинико-иммунологическая характеристика хронического гепатита С с учетом факторов противовирусного иммунитета тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.09, кандидат наук Селькова, Мария Сергеевна

• Селькова, Мария Сергеевна
• кандидат наук
• 2013

Оглавление диссертации кандидат наук Селькова, Мария Сергеевна

ОГЛАВЛЕНИЕ

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. КЛИНИКО-ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКАЯ, ВИРУСОЛОГИЧЕСКАЯ И

ИММУНОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ХРОНИЧЕСКОГО ГЕПАТИТА С

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРНЫХ ДАННЫХ

1.1 Социально-экономические аспекты ХГС

1.2 Эпидемиологические особенности ХГС

1.3 Строение ВГС и связанные с ним механизмы персистенции возбудителя. Вирусологическая диагностика ХГС

1.4 Иммунопатогенез ХГС

1.4.1 роль иммунной системы в патогенезе ХГС

1.4.2 Особенности содержания и функционального состояния цитотоксических лимфоцитов у пациентов с ХГС

1.4.3.Роль иммунорегуляторных клеток в патогенезе ХГС

1.4.4. Особенности синтеза эндогенных интерферонов у пациентов с ХГС

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 Общая характеристика пациентов, включенных в исследование

2.2. Общеклинические методы исследования

2.3 Лабораторно-инструментальные методы исследования

2.3.1. Молекулярно-биологические и серологические методы исследования

2.3.2 Биохимические методы исследования

2.3.3.Неинвазивный метод «Фибротест» оценки фибротических изменений в ткани печени

2.3.4 Исследование субпопуляционного состава лимфоцитов периферической крови

2.3.4.1 Исследование общих маркеров Т- и В-клеток (СБЗ СЭ4 СБ8 СБ19)

2.3.4.2 Исследование численного состава и функциональной активности МК-клеток и ИКТ-клеток

2.3.4.3 Исследование уровня регуляторных Т-клеток

2.3.5. Исследование интерферонового статуса

2.3.6. Методы статистической обработки данных

Глава 3. КЛИНИКО-ЛАБОРАТОРНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ОБСЛЕДОВАННЫХ ПАЦИЕНТОВ

3.1 Клиническая характеристика пациентов с ХГС

3.2 Биохимическая характеристика течения ХГС

3.3 Молекулярно-биологические характеристики возбудителей ХГС

3.4 Особенности содержания маркеров развития соединительной ткани печени у пациентов с различными формами ХГС

Глава 4. ОЦЕНКА ИММУНОЛОГИЧЕСКИХ ПАРАМЕТРОВ ОБСЛЕДОВАННЫХ ПАЦИЕНТОВ

4.1 Характеристика цитотоксическских лимфоцитов и взаимосвязь их уровня с биохимическими показателями, молекулярно-биологическими характеристиками и степенью прогрессии заболевания

4.2 Характеристика регуляторных Т-лимфоцитов и взаимосвязь их уровня с биохимическими показателями, молекулярно-биологическими характеристиками и степенью прогрессии заболевания

4.3 Интерфероновый статус пациентов и взаимосвязь их уровня с биохимическими показателями, молекулярно-биологическими характеристиками и степенью прогрессии

заболевания

Глава 5. ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИИ

ХГС- хронический гепатит С ВГС - вирус гепатита С ПЦР - полимеразная цепная реакция РНК - рибонуклеиновая кислота AJ1T - аланинаминотрансфераза ACT - аспартатаминотрансфераза ГГТП - у-глутамилтранспептидаза ЩФ - щелочная фосфатаза

NK-клетки - клетки с фенотипом CD3" CD16+ CD56+ NKT-клетки - клетки с фенотипом CD3+ CD16+ CD56+

Активированные NK-клетки - клетки с фенотипом CD3~CD16+CD56+CD107a+ Т-регуляторные клетки (Т-регуляторные лимфоциты) - клетки с фенотипом CD4+CD25+CD127low

NCAM (neural cell adhesion molecule) - адгезионная молекула нервной ткани NKG2D, NKG2A - фенотипы лектиновых рецепторов NK-клеток TRAIL (tumor necrosis factor-related apoptosis-inducing ligand) - зависимый механизм апоптоза

Fas-леганд (CD 95) - леганд для Fas-рецептора клетках

CCL3 - хемокин CCL3

CCL4- хемокин CCL4

CCL5 - хемокин CCL5

XCL1 - хемокин XCL1

МНС 1 класса (major histocompatibility complex) - главный комплекс гистосовметимости 1 класса

МНС II класса (major histocompatibility complex) - главный комплекс гистосовметимости 2 класса

FcrRIII - рецептор для семейства иммуноглобулинов на NK-клетках

TGF (3 (Transforming growth factor beta) - трансформирующий ростовой фактор (3

KIR (killer inhibitory receptor) - ингибирующий рецептор на NK-клетках ITIM-мотив (immunoreceptor tyrosine-based inhibition motif) - ингибиторный участок на NK-клетках IL-2 (Interleukin-2) - интерлейкин - 2 IL-4(Interleukin-4) - интерлейкин - 4 IL-7(Interleukin-7) - интерлейкин - 7 IL-13 (Interleukin-13) - интерлейкин - 13 IL-15(Interleukin-15) - интерлейкин - 15 IL-17(Interleukin-17) - интерлейкин - 17 TCR (T cell receptor) - Т-клеточный рецептор Th (T-helper cell) - Т-хелперные клетки Thl - Т-хелперные клетки 1 Th2 - Т-хелперные клетки 2 Th3 - Т-хелперные клетки 3 Thl7 - Т-хелперные клетки

LAMP (Lysosomal-associated membrane protein) - гликозилированный протеин CTLA- 4 (Cytotoxic T-Lymphocyte Antigen 4) - цитотоксический Т-лимфоцит-ассоциированный антиген

GITR (glucocorticoid-induced TNFR-related protein) - индуцированный

глюкокортикостероидами TNF-подобный рецептор

LAG-3 (Lymphocyte activation gene 3) - ген активации лимфоцитов

FOXP 3 (forkhead box РЗ) - транскрипционный фактор Т-регуляторных клеток

IFN (interferon) - интерферон

TRIF (transcription factors IRF3) - транскрипционный фактор синтеза интерферонов

MAVS (mitochondrial antiviral signaling protein) - транскрипционный фактор синтеза интерферонов

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Клинико-иммунологическая характеристика хронического гепатита С с учетом факторов противовирусного иммунитета»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы

Проблема вирусных гепатитов с парентеральным путем заражения остается

одной из самых актуальных в инфекционной патологии. Особого внимания заслуживает вирусный гепатит С, которым страдает приблизительно 150 млн. человек во всем мире.

По данным Всемирной организации здравоохранения ежегодно более 350000 человек умирают от ассоциированных с ВГС болезней печени (Информационный бюллетень № 164 ВОЗ, июль 2012 г.). Чрезвычайно высока вероятность развития первичной гепатокарциномы (20% случаев хронических гепатитов) [29, 43, 49].

С тех пор как в 1989 году вирус гепатита С (ВГС) был идентифицирован, продолжается его интенсивное изучение. Успехи этиологической верификации вирусных гепатитов, в том числе определение ВГС, ограничили в последние годы их распространение при гемотрансфузиях, операциях и прочих медицинских манипуляциях, однако значительной группой риска остаются парентеральные потребители наркотиков [165]. При анализе путей возможного инфицирования следует учитывать также парамедицинские процедуры (татуаж, пирсинг).

Отсутствие специфических мер профилактики наряду с высокой стоимостью противовирусной терапии и, ее недостаточной эффективностью делает хронического гепатита С (ХГС) актуальной медицинской и социальной проблемой [48, 71,150].

С момента выявления различных генотипов вируса предпринимались и предпринимаются до настоящего времени попытки определить зависимость клинической картины и эффективность терапии от определенного генотипа вируса и вирусной нагрузки [108].

Практически отсутствуют данные о взаимосвязи изменений различных популяций иммунокомпетентных клеток пациентов в зависимости от генотипа вируса, вирусной нагрузки и характера изменений в ткани печени.

Гуморальные факторы специфического иммунитета при ХГС практически не играют протективную роль, а их определение имеет преимущественно диагностическое значение [186, 191]. Поэтому особое внимание привлекает изучение клеточных факторов иммунитета [140]. При этом основную роль в механизмах элиминации вируса и развитии патологических процессов в печени отводят клеточным факторам иммунитета, в том числе врожденного, в частности цитотоксическим клеткам, а также системе интерферонов [115].

Практически не изучена при ХГС роль Т-регуляторных лимфоцитов, определяющих интенсивность иммунного ответа и ограничивающих иммунопатологические реакции в органах-мишенях.

Полученные данные, характеризующие содержание и функциональные особенности иммунекомпетентных клеток у пациентов с ХГС, могут иметь значение, как для оценки прогноза заболевания, так и для разработки новых подходов к иммуноориентированной терапии.

Цель и задачи исследования Цель:

изучить роль цитотоксических клеток, системы интерферонов и Т-регуляторных лимфоцитов в патогенезе хронического гепатита С (ХГС). В соответствии с указанной целью были поставлены и решены следующие

задачи:

1. Охарактеризовать клинико-биохимические особенности ХГС у пациентов с различными вариантами течения заболевания.

2. Определить этиологическую гетерогенность и уровень вирусной нагрузки у больных ХГС.

3. Оценить состояние интерферонового статуса у пациентов с различными вариантами течения ХГС.

4. Выяснить характер изменений содержания МКТ- и 1ЧК- клеток, в том числе их активированных форм у больных ХГС.

5. Уточнить роль Т-регуляторных лимфоцитов в прогрессировании ХГС.

Положения выносимые на защиту:

1. У пациентов с различными вариантами течения ХГС снижено содержание

активированных форм КК-клеток на всех стадиях заболевания. Содержание 1ЧКТ-клеток уменьшается по мере прогрессирования заболевания. ХГС сопровождается существенными изменениями интерферонового статуса, характеризующимися повышением сывороточного интерферона и снижением способности к продукции а/(3- и у-интерферонов лейкоцитами независимо от стадии заболевания.

2. При ХГС развитие фибротических изменений в ткани печени определяется иммуносупрессивными механизмами, связанными с Т-регуляторными лимфоцитами.

3. Для оценки тяжести и прогноза заболевания важное значение имеет сопоставление иммунологических параметров, в частности содержания и функциональной активности цитотоксических клеток, Т-регуляторных клеток, интерферонового статуса и биохимических параметров.

Научная новизна

Впервые на основании комплексной оценки содержания цитотоксических клеток установлено, что у пациентов с ХГС наблюдается снижение количества активированных форм МК-клеток. Получены новые данные, показывающие взаимосвязь повышения содержания Т-регуляторных клеток с прогрессированием фибротических изменений в ткани печени. Выявлено снижение способности к продукции эндогенных интерферонов, что может являться дополнительным патогенетическим обоснованием назначения интерферонотерапии при ХГС.

Теоретическая значимость работы

Показана возможная роль снижения цитотоксического потенциала 1ЧК-клеток в патогенезе ХГС. Установлено снижение функционально активированных Ж -клеток (СОЗ СБ16+С056+СЭ107а+) у пациентов с ХГС. Получены данные о взаимосвязи вирусной нагрузки с содержанием цитотоксических лимфоцитов и их функциональной активностью. Определено, что выраженность холестатического синдрома у пациентов ХГС связана с повышением содержания МКТ-клеток (С03+С016+СБ56+). Выявлено снижение способности к продукции эндогенных интерферонов, свидетельствующее о существенных изменениях неспецифической противовирусной резистентности у пациентов с различными вариантами течения ХГС. Установлено, что по мере прогрессирования заболевания увеличивается содержание Т-регуляторных клеток в периферической

крови пациентов, что может свидетельствовать о важной роли иммуносупрессивных механизмов в патогенезе ХГС и прогрессировании фибротических изменений в ткани печени.

Практическая значимость работы

Оценка содержания и функционального потенциала МК-клеток может

служить важным иммунологическим критерием прогрессирования ХГС. Так, снижение содержания активированных МК-клеток (СХ)30}16+С056+СВ107а+) является одним из показателей неблагоприятного течения ХГС. Выявленные у пациентов ХГС существенные изменения интерферонового статуса,

характеризующиеся снижением способности к продукции а/р~ и у-интерферонов лейкоцитами, могут служить дополнительным обоснованием для назначения интерферонотерапии. Определение содержания Т-регуляторных лимфоцитов позволяет оценить выраженность иммуносупрессивных механизмов у пациентов с ХГС, способствующих прогрессированию заболевания.

Апробация и внедрение результатов работы в практику

Результаты работы доложены на VII Всероссийской научно-практической

конференции "Вирусный гепатит - проблемы эпидемиологии, диагностики, лечения и профилактики" (М, 2007), Международной конференции «Развитие научных исследований и надзор за инфекционными заболеваниями» (СПб, 2010), XIV Всероссийском научном форуме с международным участием им. акад. В.И.Иоффе «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге» (СПб, 2011), Научной конференции молодых ученых с международным участием «Актуальные вопросы инфекционной патологии - 2011» (СПб, 2011), V Междисциплинарной научно-практической конференции с международным участием «Урогенитальные инфекции и репродуктивное здоровье: клинико-лабораторная диагностика и терапия» (СПб, 2012), Объединенном иммунологическом форуме (Нижний Новгород, 2013).

Результаты работы внедрены в лечебно-диагностическую практику отделения экспериментальной терапии вирусных гепатитов ФГБУ «НИИ гриппа» МЗ РФ, ГКУЗ Ленинградской области «Центр по профилактике и борьбе со СПИД и инфекционными заболеваниями», используются в учебном курсе для студентов V и VI курсов и слушателей на циклах постдипломного образования на кафедре инфекционных болезней и эпидемиологии с курсом ВИЧ-медицины ГБОУ ВПО «СПбГМУ им.акад. И.П.Павлова» МЗ РФ.

Публикации

По теме диссертации опубликовано 10 работ, в том числе 3 статьи - в ведущих рецензируемых научных журналах и изданиях, рекомендуемых ВАК РФ.

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 143 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, результатов собственных исследований и их обсуждения, выводов, практических рекомендаций, списка литературы. Диссертация иллюстрирована 18 таблицами и 11 рисунками. В библиографический указатель включено 206 источника, из них 29 работ отечественных и 177 зарубежных авторов.

Глава 1. КЛИНИКО-ЭПИДЕМИОЛОГИЧЕСКАЯ, ВИРУСОЛОГИЧЕСКАЯ И ИММУНОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ХРОНИЧЕСКОГО ГЕПАТИТА С

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРНЫХ ДАННЫХ 1.1 Социально-экономические аспекты ХГС

Проблема вирусных гепатитов с парентеральным путем заражения остается одной из самых актуальных в инфекционной патологии. Особого внимания заслуживает ВГС в связи с тем, что возбудителем этой инфекции (ВГС) инфицировано более 150 млн. человек во всем мире (Информационный бюллетень № 164 ВОЗ, июль 2012 г.).

В Российской Федерации тенденция к увеличению частоты хронизации вирусного гепатита С прослеживается на протяжении нескольких лет, в то время как число острых форм вирусного гепатита С неуклонно сокращается. Так например, если в 2000 году было зарегистрировано 21,1 %00 хронических форм гепатита С и 22,2 %оо острых форм, то уже в 2008 году соотношение резко изменилось и составило 2,8 %оо острых (манифестных) форм гепатита С и 39,1 %оо хронических форм гепатита С [20].

Наиболее неблагоприятными регионами Российской федерации считаются Дальневосточный, Уральский, Сибирский и Северо-Западный федеральные округа, где регистрируется устойчиво высокое количество всех форм данной инфекции.

В Санкт-Петербурге определяется рост заболеваемости различными формами вирусного гепатита С. Это отражает, не только инфицированность популяции, но и повышение качества диагностики в городе. Наличие современных методов диагностики, применяемых в рутинной практике, увеличивает количество регистрируемых заболеваний, в том числе и гепатита С.

Как было указано, выше частое развитие хронических форм заболевания, отсутствие специфической профилактики, экономический аспект (поражается в основном молодое дееспособное население, находящееся в репродуктивном

возрасте), дорогостоящее лечение делает проблему вирусного гепатита С значимой не только с медицинской точки зрения, но и с социально-экономической [39, 94].

1.2 Эпидемиологические особенности ХГС

Вирусный гепатит С - антропонозная инфекция, источником которой является больной человек. Особенно опасны лица с асимптомным течением инфекции, которая чаще всего и наблюдается.

Основной механизм передачи ВГС - парентеральный. Именно с этим вирусом ассоциировали развитие посттрансфузионного гепатита в прошлом (минимум 85% случаев). В настоящее время гемотрансфузии являются причиной менее чем 4% острых случаев гепатита С [12].

В последнее десятилетие главным фактором риска заражения ВГС стало внутривенное ведение наркотиков. Инфицирование происходит довольно быстро после начала их применения: 50 - 80% наркозависимых становятся серопозитивными в течение 12 месяцев после первой инъекции [3, 12]. Также высок риск инфицирования при выполнении таких манипуляций как татуировки, пирсинг, маникюр и других подобных манипуляций [12].

Особую группу риска инфицирования ВГС представляют собой работники здравоохранения [149]. Нозокомиальное распространение инфекции происходит при несоблюдении мер безопасности, неправильной дезинфекции и обработке медицинского оборудования [12, 27, 29].

Риск инфицирования половым путем намного ниже в сравнении с риском заражения вирусом гепатита В, вирусом иммунодефицита человека и другими возбудителями инфекционных заболеваний, передающихся половым путем, составляя от 5 до 15%. К группе высокого риска относят лица, часто меняющих половых партнеров [12].

Перинатальное инфицирование не имеет большого значения в распространении ВГС. Частота встречаемости антител к ВГС среди беременных составляет в среднем 1% и варьирует от 0,5 до 2,4% в разных географических

зонах. Риск инфицирования ребенка от матери составляет 1,7%, если у матери определяются только антитела к ВГС и повышается в среднем до 5,6%, если у матери в сыворотке крови циркулирует РБК ВГС [7, 12, 13, 17].

Спорадические случаи гепатита С, когда пути инфицирования выявить не удается, составляют 30 - 40% [12].

1.3 Строение ВГС и связанные с ним механизмы персистенции возбудителя. Вирусологическая диагностика ХГС

Вирус гепатита С (ВГС) как этиологический агент гепатита ни-А, ни-В впервые был выделен Q.Choo и соавторами в 1989 году [63]. При его изучении было установлено, что ВГС - РНК-содержащий вирус, относящийся к семейству Flaviviridae, роду Hepacivirus. Геном ВГС представлен однонитевой линейной РНК размером 9,5 kb, включающей в себя две нетранслируемые области (5' UTR и 3' UTR), между которыми расположена транслируемая область [126, 200]. Сигнальные последовательности 5'- и З'-нетранслируемых областей рассматриваются как необходимые для осуществления репликации вирусной РНК [88, 125, 120]. Транслируемая область содержит одну открытую рамку считывания, кодирующую полипротеин-предшественник размером 3010-3033 аминокислотных остатков, из которого в результате процессинга образуются структурные и неструктурные белки. Структурные белки формируют вирусную частицу и представлены ядерным протеином (core), образующим нуклеокапсид, и двумя поверхностными белками El и Е2 [32, 147, 168, 172, 205]. Неструктурные белки (NS) участвуют в репликации генома HCV и процессинге полипротеина-предшественника. Они представлены семью протеинами (р7 (NSI), NS2, NS3, NS4A, NS4B, NS5A, NS5B), выполняющими в основном функции ферментов [129, 136, 188, 171].

ВГС-индуцированные изменения зависят от состояния самого организма, а также от внешних факторов, и предполагает взаимодействие между ВГС и этими факторами [62, 157, 137].

Основные функции соге-протеина - это формирование вирусного капсида, супрессия отдельных генов клетки-хозяина, в том числе генов, отвечающих за

апоптоз поврежденных вирусом клеток. За счет связывания core- протеина с рецепторами TNF, FAS или лимфотоксина ß возможен вариант замещения собой сигнальных молекул TNF-рецептор-ассоциированный фактор-2 (TRAF-2) или ТМР_рецептор-ассоциированный домен смерти (TRADD) [145, 206]. Это может иметь существенное значение, в том числе и для цитотоксических эффектов NK-клеток. Соге-протеин может активировать или ингибировать транскрипционный фактор NFkB, а также изменять чувствительность гепатоцита к действию цитокинов [145]. Некоторые авторы отметили усиление такой чувствительности, в то время как другие - ее снижение или отсутствие существенных изменений. [56,36]. Кроме того, последние исследования показали, что соге-протеин ингибирует in vitro РНК-зависимую протеинкиназу (PKR), которая так же вовлечена в процесс апоптоза [162]. Таким образом, белки ВГС могут модулировать апоптоз гепатоцитов при помощи прямых и непрямых механизмов

[5].

Гликопротеины содержат гипервариабельные участки. Основную часть мутаций связывают с HVR участком Е2-протеина Данный участок подразделяется на 2 отдела HVR1 (hypervariable region) и HVR2, расположенные в N-концевой части Е2. Именно в этих отделах происходит частая замена аминокислотных остатков, что приводит к огромному вирусному разнообразию [61]. Изучение последовательности этих аминокислотных остатков у пациентов, ответивших или не ответивших на противовирусную терапию, позволило выявить участок, возможно связанный с резистентностью к терапии (ISDR - interferon- sensitivity determining region) [80]. Гликопротеины также отвечают за прикрепление вируса к клетке и его проникновение внутрь клетки. Некоторые исследователи высказывают предположение, что эти участки могут быть мишенью для нейтрализующих и протективных антител, и именно эти участки в последующем предлагаются к их использованию для изготовления вакцины против гепатита С [195].

Таким образом, для механизмов персистенции вируса основную роль играют неструктурные белки и гипервариабельность гликопротеинов с очень

высокой скоростью мутаций с образованием квазивидов. Такие мутационные изменения вируса способствуют ускользанию от иммунного ответа, поскольку вновь образующиеся антигены с новой последовательностью аминокислот не успевают быть опознанными Т и В-лимфоцитами.

Изучение последовательностей РНК вируса выявило существование основных групп вируса, получивших название - генотипы вируса [174]. Гомология их нуклеотидных последовательностей не менее 75%, при этом она пропорционально распределяется между консервативными (54UTR , core) и вариабельными (Е1/Е2) областями генома. Если уровень генетических различий составляет 20-25%, то такие близкородственные изоляты в пределах одного генотипа называют субтипы. При уменьшении генетической гетерогенности до 10%, такие варианты вируса называют квазивиды [65]. Филогенетический анализ генома вируса позволил идентифицировать отличные друг от друга регионы РНК, на основании чего ученые установили наличие 6 генотипов вируса и более 100 субтипов [4, 19, 155].

Наиболее часто используемым скрининговым методом диагностики вирусного гепатита С является определение антител к структурным и неструктурным белкам вируса [158]. В настоящее время используются диагностические системы на основе рекомбинантных или синтетических фрагментов структурных и неструктурных белков ВГС (core, NS3, NS4, NS5). Дифференцированное определение антител к различным антигенам имеет важное диагностическое значение [78].

Так, антитела к core-, Е-, и МЭЗ-антигенам появляются на самых ранних этапах заболевания, а антитела к NS4, NS5 появляются значительно позднее. В случае острой формы гепатита С антитела сохраняются в течение нескольких лет после элиминации вируса [127].

При ХГС антитела выявляются постоянно. При этом определение анти-соге и aHTH-NS5 ассоциировано с репликацией вируса. Кроме того, определение анти-соге используется в качестве подтверждающего теста при «неопределённых» результатах тестирования образцов сывороток [78].

Высокий уровень антител к N83, N84, может свидетельствовать о склонности к развитию хронического процесса и характеризует выраженность поражения печени [99].

Технология ИФА для выявления ВГС-антител носит стандартный характер. На твёрдой фазе сорбируются рекомбинантные белки или синтетические олигопептиды. В дальнейшем в лунку иммунологического планшета последовательно добавляются исследуемая сыворотка и коньюгат (антитела к иммуноглобулинам М или в, меченые ферментом) и субстратная смесь с хромогеном. Цветная реакция происходящая в случае наличия специфических антител регистрируется в дальнейшем на микрофотоэлектроколориметре с вертикальным лучом (мультискан) при определённой длине волны, зависящей от вида хромогена.

Несколько большей чувствительностью обладает метод электрохемилюминесценции. При проведении этого метода образец инкубируется с биотинилированными антигенами ВГС или антигенами ВГС, мечеными лантаноидами (рутений, европий) и взаимодействует с образованием «сэндвича» [54,65].

Для оценки интенсивности инфекционного процесса («вирусной нагрузки») используется так называемая количественная полимеразная цепная реакция (ПЦР) [73].

Для определения вирусной нагрузки (количественный метод) в клиническом материале используется реакция обратной транскрипции РНК (образование кДНК), совмещённая с полимеразной цепной реакцией и дальнейшей гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме реального времени. Ответ выражается в МЕ на 1 мл или в количестве копий вируса в 1 мл.

Границей между высокой и низкой вирусной нагрузкой принято считать 800 ОООМЕ/мл. Содержание вируса выраженное в МЕ/мл и количество вирусных частиц РНК/мл соотносится как 1:4.

Динамика вирусной нагрузки важна как с точки зрения прогноза прогрессирования заболевания, так и для оценки эффективности противовирусной терапии.

Другой метод вирусологической диагностики - генотипирование ВГС [54]. Необходимость типирования вируса связана с различной их чувствительностью к генноинженерным интерферонам. Так, вирусы, принадлежащие к 3 генотипу существенно более чувствительны к терапии, чем, например, вирусы, относящиеся к 1 генотипу.

Для выявления и дифференциации генотипов ВГС используется реакция обратной транскрипции РНК, с пе81ес1-амплификацией кДНК и детекцией продуктов ПЦР-амплификации методом электрофореза в агарозном геле. Возможен вариант совмещения реакций обратной транскрипции, ПЦР-амплификации и гибридизационно-флуоресцентной детекции в режиме реального времени.

В наших условиях чаще всего используется тест-системы, позволяющие определять 1а, 1Ь, 2, За генотипы наиболее распространённые на территории Российской Федерации.

1.4 Иммунопатогенез ХГС

1.4.1 роль иммунной системы в патогенезе ХГС

В последнее время бурно обсуждается значение состояния иммунной системы при ХГС. Это определяет варианты развития инфекционного процесса, его исход. От иммунных параметров зависит успешность проводимой противовирусной терапии.

При проникновении вируса в организм уже через 3-4 дня в крови определяется РНК вируса [25, 127]. В это время клинических данных инфекционного процесса нет [25, 101]. Биохимические показатели остаются в норме. Антитела к вирусу при использовании скрининговых тестов в этот период не выявляются [25]. Такой период называется периодом «серологического окна» [170].

Специфический гуморальный иммунитет характеризуется как образованием антител к структурным компонентам вируса (соге-протеин, белки оболочки El и Е2) и к неструктурным компонентам (NS 3,4,5). Доказано, что антителогенез при ХГС не имеет протективного значения [96]. Возможно повторное инфицирование другими генотипами вируса [166]. Повторное инфицирование тем же генотипом требует обсуждения, так как, несмотря на длительный вирусологический ответ на противовирусную терапию, о полной элиминиции вируса из организма с уверенностью говорить невозможно. А значит, возможность повторного заражения тем же генотипом стоит отличать от реинфекции. Тем не менее, в экспериментальных условиях установлено, что существует образование специфических антител способных нейтрализовывать специфические изоляты in vitro и in vivo, а также образование антител, способных ингибировать связывание белка Е2 оболочки вируса с гепатоцитами in vitro [102]. Изменение функциональной активности Е2 происходит за счет связывания с CD81 В-лимфоцитов, SR-рецепторами типа В1 (скавенджер-рецепторы) [116].

Основной мишенью нейтрализующих антител являются белки El и Е2 оболочки, в особенности их участки HVR1. Высокая гетерогенность этого участка между изолятами и квазивидами внутри одного хозяина обуславливает неэффективность гуморального звена иммунитета, так как нейтрализующее действие антител ограничено во времени, в связи с гипервариабельностью этих участков [82].

Таким образом, как и при большинстве вирусных инфекций основную роль в элиминации возбудителя при ВГС имеют факторы клеточного иммунитета, в первую очередь цитотоксические лимфоциты, а именно NK-клетки [144].

При ХГС выявляется дисбаланс Т-хелперных звеньев иммунитета, а именно - преобладание Т-хелперов 1 (Thl) ассоциируют с выздоровлением пациентов, а преобладание иммунного ответа по механизму Т-хелперов 2 (Th 2) связано с хронизацией инфекционного процесса в ткани печени [15].

Изменения при гепатите С касаются всех компонентов иммунной системы. Так, например, кроме дисбаланса хелперных клеток выявляются изменения в

цитотоксических лимфоцитах, как количественные, так и функциональные, Т-регуляторных клетках и их количестве, цитокинах [75, 95, 97, 98, 131, 193].

Изменение иммунологических показателей при вирусных гепатитах не носят специфический характер (за исключением, конечно, выявления специфических антител), однако их определение может иметь важное значение для оценки прогноза заболевания и эффективности терапии.

Среди иммунологических показателей следует отметить уменьшение способности лейкоцитов к продукции а/(3- и у-интерферонов, а также изменение цитотоксической активности NK-клеток. Следует отметить также выявление антител к митохондриям и к гладким мышцам. И хотя эти параметры определяются преимущественно при такой самостоятельной нозологической форме как аутоиммунный гепатит, но в ряде случаев они регистрируются и при прогрессирующих формах хронических вирусных гепатитов с индукцией аутоиммунных процессов.

1.4.2 Особенности содержания и функционального состояния

цитотоксических лимфоцитов у пациентов с ХГС

Натуральные киллеры (NK-клетки или большие гранулярные лимфоциты) составляют от 5 до 15% от общей популяции лимфоцитов [68]. Относятся NK-клетки к врожденному иммунитету и для своей деятельности не требуют предварительной сенсибилизации [151].

По характеру экспрессии поверхностных маркеров NK-клетки можно подразделить на 48 популяций, однако практически используется деление на 2 группы. Одна группа экспрессирует на своей поверхности в основном CD 16 молекулу и в меньшей степени CD56, другая в большей степени экспрессирует CD56 и в меньшей степени CD 16. Обозначаются они соответственно

CD16brightCD56dim и CD16dimCD56bright [lg9] Принят() счихать5 чх0 КЛеТКИ

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Селькова, Мария Сергеевна, 2013 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Акинфеева, О.В. Роль субпопуляции естественных регуляторных CD4+CD25+ Т-клеток в норме и при патологии / Акинфеева О.В., Бубнова JI.H. // Медицинский академический журнал. — 2010. —Т. 10, №1, —С. 5-16.

2. Абакушина, Е.В. Основные свойства и функции NK-клеток человека / Абакушина Е.В., Кузьмина Е.Г., Коваленко Е.И. // Иммунология. - 2012.

— Т. 33, № 4. — С. 210-216.

3. Беляева, Т.В. Медико-социальные последствия инфекционных осложнений наркомании / Беляева Т.В., Лиознов Д.А., Антонова Т.В. // Вирусные гепатиты и ВИЧ-инфекция у подростков: тез. докл. научно-практической конф. — СПб., 2003. — С.6

4. Блюм, Х.Е. Гепатит С: современное состояние проблемы / Блюм Х.Е. // РЖГГК. — 2005. — № 1. — С.20 - 25.

5. Буеверов, А.О. Некоторые аспекты изучения апоптоза при хронических вирусных гепатитах / Буеверов А.О. // Клинические перспективы гастроэнтерологии, гепатологии. — 2009. — №2. — С.9-17

6. Вирусные гепатиты: клиника, диагностика, лечение / Лобзин Ю.В., Жданов К.В., Волжанин В.М., Гусев Д.А. — М.: Фолиант, 2006. — 192 с.

7. Возрастные особенности диагностики и прогноза вирусного гепатита С: пособие для врачей / Горячева Л.Г., Аксенова O.A., Железникова Г.Ф., Пономарева М.А., Рогозина Н.В., Мукомолова А.Л., Шилова И.В, Крыга Л.Н. — СПб., 2003, — 15 с.

8. Гусев, Д.А. Хронический гепатит С: течение, прогноз и лечение больных в военно-медицинских учреждениях: дис. ... д-ра мед. наук / Гусев Д.А.

— СПб., 2006. — 334 с.

9. Жданов, К.В. Латентные формы вирусных гепатитов В и С у лиц молодого возраста: дис. ... д-ра мед. наук / Жданов К.В. — СПб., 2000. — 330 с.

10. Жулай, Г.А. Регуляторные Т-клетки и канцерогенез / Жулай Г.А., Олейник Е.К. // Иммунология. — 2013. — №1. — С. 61-64.

П.Змушко, Е.И. Вирусный гепатит / Змушко Е.И., Белозеров Е.С., Иоанниди Е.А. Элиста: Джангар, 2002. 160 с.

12. Ивашкин, В. Т. Болезни печени и желчевыводящих путей: руководство для врачей / Ивашкин В. Т. — М.: ООО "Издат. дом "М-Вести", 2005. — 536 с.

13. Игнатова, Т.М. Хронические заболевания печени вирусной и невирусной этиологии у беременных: тактика ведения, лечения / Игнатова Т.М. // Вирусные гепатиты. Достижения и перспективы. Инф. бюллетень. — 2002. — № 1 (14). — С.З- 11.

14. Иммунология / Мейл Д., Бростофф Дж., Рот Д.Б, Ройтт А. — М.: Логосфера, 2007. — 248с.

15. Иммунопатогенез вирусного гепатита С. Иммунологические маркеры прогрессирования заболевания / Лобзин Ю.В. Никитин И.А. Сухина И.А. Цыган В.Н. Мишин Ю.А. // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. — 2007. — №6. — С.75-84

16.Львов, Д.К. Закономерности распространения вируса гепатита С и его генотипов в России и странах СНГ / Львов Д.К., Самохвалов Е.И., Миширо С. // Вопросы вирусологии. — 1997. — № 4. — С. 157 - 161.

17.Маевская, М.В. Лечение пациентов хроническим гепатитом С с исходно нормальным значением аланиновой аминотрансферазы / Маевская М.В. // РЖГГК. — 2005. — №2. — С. 22 - 26.

18.Майер, К.П. Гепатит и последствия гепатита / Майер К.П. — М.: ГЭОТАР Медицина, 2004. — 720 с.

19.Михайлов, М.И. Лабораторная диагностика гепатита С. (Серологические маркеры и методы их выявления) / Михайлов М.И. // Вирусные гепатиты.

Достижения и перспективы. Инф. бюллетень. — 2001. — № 2 (12). — С.8 - 18.

20.0нищенко, Г.Г. Вирусные гепатиты в Российской Федерации: справочник / Онищенко Г.Г., Жебрун А.Б. — СПб., 2009. — 220с.

21.Подымова, С.Д. Болезни печени: руководство для врачей / Подымова С.Д. — М.: Медицина, 2005. — 768 с.

22.Пролиферативный ответ лимфоцитов крови у больных хроническим гепатитом С с различными генотипами возбудителя / Ющук Н. Д., Шмелева Е. В., Капитонова О. С., Федосеева Н. В., Балмасова И. П., Еремина О. Ф // Иммунология. — 2012. — №5. — С.264-267.

23.Рахманова, А.Г. Хронические вирусные гепатиты и цирроз печени / Рахманова А.Г. — СПб.: Специальная литература, 2006. — 413 с.

24.Роль клеток-регуляторов CD4+CD25+ в развитии хронических инфекционных заболеваний / Воробьев A.A., Быковская С.Н., Пашков Е.А., Быков A.C. // Вестник РАМН. — 2006. — № 9-1. — С24-29.

25.Руководство по инфекционным болезням / ред. Лобзин Ю.В. — СПб.: Фолиант, 2003. — 1040 с.

26.Хайдуков, C.B. Вопросы современной проточной цитометрии. Клиническое применение / Хайдуков C.B., Зурочка A.B. — Челябинск, 2008. — 195с.

27.Хронический вирусный гепатит / ред. Серов В.В., Апросина З.Г. — М.: Медицина, 2004. — 384 с.

28.Частичная реверсия злокачественного фенотипа опухолевых клеток инактивацией трансформирующего фактора роста бета 2 / Макарова М.В, Морозова О.В., Лазаревич Н.Л., Флейшман Д.И., Доннер Н.Е. // Российский биотерапевтический журнал. — 2009. — № 3. — С. 9-14.

29.Шахгельдян, И.В. Парентеральные вирусные гепатиты (эпидемиология, диагностика, профилактика) / Шахгельдян И.В., Михайлов М.И., Онищенко Г.Г. — М., 2003. — 384 с.

30.Ярилин, А.А. Основы иммунологии / Ярилин А.А. — М.: Медицина, 1999.

31. A crucial role for Kupffer cell-derived galectin-9 inregulation of T cell immunity in hepatitis С infection / Mengshol J.A., Golden-Mason L., Arikawa T. [et al.] // PLoS One. — 2010. — Vol.5, N 3:e9504.

32. A genetic interaction between the core and NS3 proteins of hepatitis С virus is essential for production of infectious virus / Jones D.M., Atoom A.M., Zhang X. [et al.] // J. Virol. — 2011. — Vol. 85, N 23. — P. 12351-12361.

33.A role for clonal inactivation in T cell tolerance to Mis-la / Blackman M.A., Gerhard-Burgert H., Woodland D.L. [et al.] // Nature. — 1990. — Vol. 345. — P.540-542.

34.A smac mimetic reduces TNF related apoptosis inducing ligand (TRAIL)-induced invasion and metastasis of cholangiocarcinoma cells /Fingas C.D., Blechacz B.R., Smoot R.L. [et al.] // Hepatology. — 2010. — Vol. 52, N 2. — P. 550-561.

35.Activated T cells complicate the identification of regulatory T cells in rheumatoid arthritis / Aerts N.E., Dombrecht E.J., Ebo D.G. [et al.] // Cell Immunol. — 2008. — Vol. 251. — P. 109-115.

36.Activation of intracellular signaling by hepatitis В and С viruses: С viral core is the most potent signal inducer / Kato N., Yoshida H., Ono Nita S.K. [et al.] // Hepatology. — 2000. — Vol. 32. — P. 405^112.

37.Activation of invariant NKT cells by toll-like receptor 9-stimulated dendritic cells requires type I interferon and charged glycosphingolipids / Paget C., Mallevaey Т., Speak A.O. [et al.] // Immunity. — 2007. — Vol. 27, N 4. — P. 597-609.

38.Adaptation of TCR repertoires to self-peptides in regulatory and nonregulatory CD4 + T cells / Wong J., Obst R., Correia-Neves M. [et al.] // J. Immunol. — 2007. — Vol.178. — P. 7032-7041.

39.Airoldi, J. Hepatitis С and pregnancy / Airoldi J., Berghella V. // Obstet. Gynecol. Surv. — 2006. — Vol. 10. — P. 666-672.

40.Allan, S.E. Activation-induced FOXP3 in human T effector cells does not suppress proliferation or cytokine production / Allan S.E., Crome S.Q., Crellin N.K. // Int. Immunol. — 2007. — Vol. 19. — P. 345-54.

41. Alpha and beta chemokines induce NK cell migration and enhance NK-mediated cytolysis / Taub D.D., Sayers T.J., Carter C.R.D., Ortaldo J.R. // J. Immunol. — 1995. — Vol.155. — P. 3877-3888.

42.Alter, G. CD107a as a functional marker for the identification of natural killer cell activity / Alter G., Malenfant J.M., Altfeld M. // J. Immunol. Methods. — 2004. — Vol. 294, N1-2. — P. 15-22.

43.Alter, H. J. HCV natural history: the retrospective and prospective in perspective / Alter H. J. // J. Hepatol. — 2005. — Vol. 43, № 4. — P. 550 -552.

44.An essential role for Scurfin in CD4 + CD25 + T regulatory cells / Khattri R., Cox T., Yasayko S.A., Ramsdell F. // Nat. Immun. — 2003. — Vol. 4. — P. 337-342.

45.An immunomodulatory role for CD4+CD25+ regulatory T lymphocytes in hepatitis C virus infection / Cabrera R., Tu Z., Xu Y. [et al.] // Hepatology.

— 2004. — Vol. 40. - P. 1062-1071.

46.Anintersection between the self-reactive regulatory and nonregulatory T cell receptor repertoires / Hsieh C.S., Zheng Y., Liang Y. [et al.] // Nat Immun. — 2006. — Vol. 7. — P. 401^410.

47.Asselah, T. Interferon free therapy with direct acting antivirals for HCV / Asselah T., Marcellin P. // Liver Int. — 2013. — Vol. 33. — P. 93-104.

48.Asselah, T. New direct-acting antivirals' combination for the treatment of chronic hepatitis C / Asselah T., Marcellin P. // Liver Int. — 2011. — Vol. 31.

— P. 68-77.

49. Association between chronic viral hepatitis infection and breast cancer risk: a nationwide population-based case-control study / Su F.H., Chang S.N., Chen P.C. [et al.] // BMC Cancer. — 2011. — Vol. 24. — P. 495.

50.AST/ALT ratio predicts cirrhosis in patients with chronic hepatitis C virus infection / Sheth S.G., Flamm S.L., Gordon F.D., Chopra S. // Am. J. Gastroenterol. — 1998. — Vol. 93, N 1. — P. 44-48.

51. Autoreactive CD4 + T cells protect from autoimmune diabetes via bystander suppression using the IL-4/Stat6 pathway / Homann D., Holz A., Bot A. [et al.] // Immunity. — 1999. — Vol. 11. — P. 463-472.

52.B7 / CD28-dependent CD4 + CD25 + regulatory T cells are essential components of the memory-protective immunity to Candida albicans / Montagnoli C., Bacci A., Bozza S. [et al.] // J. Immunol. — 2002. — Vol. 169. —P. 6298-6308.

53.Bacteria-triggered CD4(+) T regulatory cells suppress Helicobacter hepaticus-inducedcolitis / Kullberg M.C., Jankovic D., Gorelick P.L. [et al.] // J. Exp. Med. — 2002. — Vol. 196. — P. 505-515.

54.Cabezas-Fernandez, M. Introduction of an automated system for the diagnosis and quantification of hepatitis B and hepatitis C viruses / Cabezas-Fernandez M„ Cabeza-Barrera M. // Open Virol. J. — 2012. — Vol.6. P. — 122-134.

55.Cardif is an adaptor protein in the RIG-I antiviral pathway and is targeted by hepatitis C virus / Meylan E., Curran J., Hofmann K. [et al.] // Nature. — 2005. — Vol.437(7062). — P. 1167-1172.

56.Caspase activation correlates with the degree of inflammatory liver injury in chronic hepatitis C virus infection / Bantel H., Lugering A., Poremba C. [et al.] // Hepatology. — 2001. — Vol. 34. — P. 758-767.

57.CD127 expression inversely correlates with FoxP3 and suppressive function of human CD4 + T reg cells / Liu W„ Putnam A.L., Xu-Yu Z. [et al.] // J. Exp. Med. — 2006. — Vol. 203. — P. 1701-1711.

58.CD25 + CD4 + T cells, expanded with dendritic cells presenting a single autoantigenic peptide, suppress autoimmune diabetes / Tarbell K.V., Yamazaki S„ Olson K. [et al.]// J. Exp. Med. — 2004. — Vol. 199. — P. 1467-1477.

59.CD4(+)CD25(+) immunoregulatory T cells: gene expression analysis reveals a functional role for the glucocorticoid-induced TNF receptor / McHugh R.S.,

Whitters M.J., Piccirillo C.A. [et al.] // Immunity. — 2002. — Vol. 16. — P. 311-323.

60.Characterization of chronic HCV infection-induced apoptosis / Zekri A.R., Bahnassy A.A., Hafez M.M. [et al.] // Comp. Hepatol. — 2011. —Vol.10, N1. — P.4

61. Characterization of hepatitis C Virus genotype 3 a hypervariable region 1 in patients achieved rapid virological response to alpha interferon and ribavirin combination therapy /Akram M., Idrees M., Hussain A. [et al.] // Virol. J. — 2011, —Vol.8. —P.253.

62.Choi, J. Mechanisms of liver injury: III. Oxidative stress in the pathogenesis of hepatitis C virus / Choi J., Ou J. H. // Am. J. Physiol. Gastrointest. Liver Physiol. — 2006. — Vol. 290. — P. 847- 851.

63.Choo, Q. Isolation of a CDNA clone derived from a blood-borne non-A, non-B viral hepatitis genome / Choo Q., Kuo G., Weiner A. // Science. — 1989. — Vol. 244. — P. 359 - 362.

64.Chronic hepatitis C viral infection reduces NK cell frequency and suppresses cytokine secretion: Reversion by anti-viral treatment / Dessouki O., Kamiya Y., Nagahama H. [et al.] // Biochem. Biophys. Res. Communications. — 2010. — Vol. 393. — P. 331-337.

65.Classification of hepatitis C virus into six major genotypes and a series of subtypes by phylogenetic analysis of the NS-5 region / Simmonds P., Holmes E.C., Cha T.A. [et al.] // J. Gen. Virol. — 1993. — Vol.74. — P. 2391-2399.

66.Cohn, M. A rationalized set of default postulates that permit a coherent description of the immune system amenable to computer modeling / Cohn M. // Scand. J. Immunol. — 2008. — Vol. 68. — P. 371-380.

67.Comparison of a newly developed automated and quantitative hepatitis C virus (HCV) core antigen test with the HCV RNA assay for clinical usefulness in confirming anti-HCV results / Kesli R., Polat H., Terzi Y. [et al.] // J. Clin. Microbiol. — 2011. — Vol. 49, N 12. — P. 4089-4093.

68.Cooper, M.A. The biology of human natural killer-cell subsets / Cooper M.A., Fehniger T.A.,Caligiuri M.A. // Trends in Immunology. — 2001. — Vol 22, N11. —P. 633-640.

69.Correlation of viral load with bone marrow and hematological changes in pale patients with chronic hepatitis C virus / Abou E.I., Azm A.R., El-Bate H. [et al.] // Arch Virol. — 2012. — Vol. 157, N 8. — P. 1579-1586.

70.Corthay, A. How do regulatory T cells work? / Corthay A. // Scand. J. Immunol. — 2009. — Vol. 70, N 4. — P.326-336.

71.Cost minimisation analysis of 12 or 24 weeks of peginterferon alfa-2b + ribavirin for hepatitis C virus / De Compadri P., Koleva D., Mangia A. [et al.] // J. Med. Econ. — 2008. — Vol.11, N 1. — P. 151-163.

72.Cutting edge: CD4 + CD25 + alloantigen-specific immunoregulatory cells that can prevent CD8 + T cell-mediated graft rejection: implications for anti-CD 154 immunotherapy / van Maurik A., Herber M., Wood K.J., Jones N.D. // J. Immunol. — 2002. — Vol.169. — P. 5401-5404.

73.Deltenre P. Virological tools for optimal management of chronic hepatitis C // Acta Gastroenterol. Belg. — 2009. — Vol. 72, N 4. — P. 421-424.

74.Differential expression of T cell antigens in normal peripheral blood lymphocytes: a quantitative analysis by flow cytometry / Ginaldi L., Farahat N., Matutes E. [et al.] // J. Clin. Pathol. — 1996. — Vol. 49, N 7. — P. 539544.

75.Differential regulation of SOCS-1 signalling in B and T lymphocytes by hepatitis C virus core protein / Yao Z. Q., Prayther D., Trabue C. [et al.]// Immunology. — 2008. — Vol. 125, № 2. — P. 197-207.

76.Direct expansion of functional CD25 + CD4 + regulatory T cells by antigen-processing dendritic cells / Yamazaki S., Iyoda T., Tarbell K. [et al.] // J. Exp. Med. — 2003. — Vol.198. — P. 235-247.

77.Distinct subsets of human invariant NKT cells differentially regulate T helper responses via dendritic cells / Liu T. Y. [et al.] // Eur. J. Immunol. — 2008. — Vol. 38, № 4. — P. 1012-1023.

78.Distinguishing acute from chronic hepatitis C virus (HCV) infection based on antibody reactivities to specific HCV structural and nonstructural proteins / Araujo A.C., Astrakhantseva I.V., Fields H.A., Kamili S. // J. Clin. Microbiol.

— 2011. — Vol. 49, N 1. — P. 54-57.

79.Effect of Killer Immunoglobulin-Like Receptors in the Response to Combined Treatment in Patients with Chronic Hepatitis C Virus Infection / Vidal-Castiñeira J. R., López-Vázquez A., Díaz-Peña R. [et al.] // J. Virol. — 2010.

— Vol. 84. —P. 475-481.

80.El Hefnawi, M.M. Prediction of prognostic biomarkers for interferon-based therapy to hepatitis C virus patients: a meta-analysis of the NS5A protein in subtypes la, lb, and 3a / ElHefnawi M.M., Zada S., El-Azab I.A.// Virol. J. — 2010. — Vol. 15, N7. — P. 130.

81. Entero virus 71 Protease 2A(pro) Targets MAVS to Inhibit Anti-Viral Type I Interferon Responses / Wang B., Xi X., Lei X. [et al.]// PLoS Pathog. — 2013.

— Vol.9, N3:el003231.

82.Evidence for immune selection of hepatitis C virus (HCV) putative envelope glycoprotein variants: potential role in chronic HCV infections / Weiner A.J., Geysen H.M., Christopherson C. [et al.] // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. — 1992. — Vol.89, N 8. — P. 3468-3472.

83.Expression of interleukin (IL)-2 and IL-7 receptors discriminates between human regulatory and activated T cells / Seddiki N., Santner-Nanan B., Martinson J. [et al.] // J. Exp. Med. — 2006. — Vol. 203. — P. 1693-1700.

84.Fas / FasL system, IL-lbeta expression and apoptosis in chronic HBV and HCV liver disease / Bortolami M., Kotsafti A., Cardin R., Farinati F. // J. Viral. Hepat. — 2008. — Vol. 15, N 7. — P.515-522.

85.Fehervari, Z. CD4(+) Tregs and immune control / Fehervari Z., Sakaguchi S. // J. Clin. Invest. — 2004. — Vol. 114, N 9. — P. 1209-1217.

86.Fine characterization of intrahepatic NK cells expressing natural killer receptors in chronic hepatitis B and C / Bonorino P. Ramzan M., Camous X., Dufeu-Duchesne T. // J. Hepatol. — 2009. — Vol. 51, № 3. — P. 458^167

87.Fontenot, J.D. Foxp3 programs the development and function of CD4 + CD25 + regulatory T cells / Fontenot J.D., Gavin M.A., Rudensky A.Y. // Nat. Immun. — 2003. — Vol.4. — P. 330-336.

88.Frequent compartmentalization of hepatitis C virus variants in circulating B cells and monocytes / Ducoulombier D., Roque-Afonso A. M., Di Liberto G. [et al.] // Hepatology. — 2004. — Vol. 39. — P. 817 - 825.

89.Gane, E. Future perspectives: towards interferon-free regimens for HCV / Gane E. // Antivir Ther. — 2012. — Vol.17, N6, pt. B. — P. 1201-1210.

90.Gao, B. Liver natural killer and natural killer T cells: immunobiology and emerging roles in liver diseases / Gao B., Radaeva S., Park O. // J. Leukocyte Biology. — 2009. — Vol. 86. — P.513-528.

91.Godfrey, D.I. Going both ways: immune regulation via CDld-dependent NKT cells / Godfrey D.I., Kronenberg M. // J. Clin. Investigation. — 2004. — Vol. 114, N10. — P. 1379-1388.

92.Gupta, S. Analysis of the virus dynamics model reveals that early treatment of HCV infection may lead to the sustained virological response / Gupta S., Singh R. // PLoS One. — 2012. — Vol. 7, N 7:e41209.

93.Heim, M.H. Interferons and hepatitis C virus / Heim M.H. // Swiss Med. Wkly. — 2012. — Vol. 142:wl3586.

94.Hepatitis C and pregnancy: an analysis of factors associated with vertical transmission / Gardenal R.V., Figueiro-Filho E.A., Luft J.L. [et al.] // Rev. Soc. Bras. Med. Trop. — 2011. — Vol. 44, N 1. — P. 43-47.

95.Hepatitis C virus (HCV)-induced immunoglobulin hypermutation reduces the affinity and neutralizing activities of antibodies against HCV envelope protein / Machida K., Kondo Y„ Huang J. Y. [et al.] // J. Virology. — 2008. — Vol. 82, № 13. —P. 6711-6720.

96.Hepatitis C virus continuously escapes from neutralizing antibody and T-cell responses during chronic infection in vivo / von Hahn T., Yoon J.C., Alter H. [et al.] // Gastroenterology. — 2007. — Vol.132, N 2. — P. 667-678.

97.Hepatitis C virus infection of T cells inhibits proliferation and enhances Fasmediated apoptosis by down-regulating the expression of CD44 splicing variant 6 / Kondo Y., Machida K., Liu H. M. [et al.] // J. Infectious Diseases. — 2009. — Vol.199, № 5. — P.726-736.

98.Hepatitis C virus infects T cells and affects interferon-y signaling in T cell lines / Kondo Y., Sung V.M. H., Machida K. [et al.] // Virology. — 2007. — Vol. 361, № i._ p.161-173.

99.Hepatitis C virus replication and antibody responses toward specific hepatitis C virus proteins / Yuki N., Hayashi N., Kasahara A. [et al.] // Hepatology. — 1994. — Vol. 19, N 6. — P. 1360-1365.

100. Hepatitis C, interferon and depression: main physiopathologic hypothesis / Vignau J., Karila L., Costisella O., Canva V. // Encephale. — 2005. —Vol.31, N 3. — P. 349-57.

101. High antibody level: an accurate serologic marker of viremia in asymptomatic people with hepatitis C infection / Contreras A.M., Ochoa-Jimenez R.J., Celis A. [et al.] // Transfusion. — 2010. — Vol. 50, N 6. — P. 1335-1343.

102. High titers of antibodies inhibiting the binding of envelope to human cells correlate with natural resolution of chronic hepatitis C / Ishii K., Rosa D., Watanabe Y. [et al.] // Hepatology. — 1998. — Vol. 28. — P. 1117—1120.

103. Hokland, M. Natural killer cells: from "disturbing" background to central players of immune responses / Hokland M., Kuppen P.J. // Mol. Immunol. — 2005. — Vol. 42. — P. 381-383.

104. Hori, S. Control of regulatory T cell development by the transcription factor Foxp3 / Hori S., Nomura T., Sakaguchi S. // Science. — 2003. —Vol. 299. — P.1057-1061.

105. Human natural killer cells undergoing in vivo differentiation after allogeneic bone marrow transplantation: analysis of the surface expression and function of activating NK receptors / Vitale C., Chiossone L., Morreale G. [et al.] // Mol. Immunol. — 2005. — Vol.42. — P. 405- 411.

106. Huntington, N. D. Developmental pathways that generate natural-killer-cell diversity in mice and humans / Huntington N. D., Vosshenrich C. A. J., Di Santo J. P. // Nature Reviews Immunology. — 2007. — Vol. 9. — P.703-714.

107. IFN-lambdas mediate antiviral protection through a distinct class II cytokine receptor complex / Kotenko S.V., Gallagher G., Baurin V.V. [et al.] // Nat. Immunol. — 2003. — Vol. 4, N 1. — P. 69-77.

108. Ijaz, B. Association of laboratory parameters with viral factors in patients with hepatitis C / Ijaz B., Ahmad W., Javed F.T. // Virol. J. —2011.

— Vol. 21, N 8. — P.361.

109. IL-15 is expressed by dendritic cells in response to type I IFN, double-stranded RNA, or lipopolysaccharide and promotes dendritic cell activation / Mattei F., Schiavoni G., Belardelli F„ Tough D.F.// J. Immunol. — 2001. — Vol. 167, — P. 1179-1187.

110. IL-28, IL-29 and their class II cytokine receptor IL-28R / Sheppard P., Kindsvogel W„ Xu W. [et al.] // Nat. Immunol. — 2003. — Vol. 4, N 1. — P. 63-68.

111. Immune evasion by hepatitis C virus NS3/4A protease-mediated cleavage of the Toll-like receptor 3 adaptor protein TRIF / Li K., Foy E., Ferreon J.C. [et al.] // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. — 2005. — Vol. 102, N8.

— P. 2992-2997.

112. Immunologic self-tolerance maintained by activated T cells expressing IL-2 receptor alpha-chains (CD25). Breakdown of a single mechanism of self-tolerance causes various autoimmune diseases / Sakaguchi S., Sakaguchi N., Asano M. [et al.] // J. Immunol. — 1995. — Vol. 155. — P. 1151-1154.

113. Immunologic self-tolerance maintained by CD25 + CD4 + naturally anergic and suppressive T cells: induction of autoimmune disease by breaking their anergic/suppressive state / Takahashi T., Kuniyasu Y., Toda M. [et al.] // Int. Immunol. — 1998. — Vol.10. — P. 1969-1980.

114. Immunologic self-tolerancemaintained by CD25(+)CD4(+) regulatory T cells constitutively expressing cytotoxic T lymphocyte-associated antigen 4 / Takahashi T., Tagami T., Yamazaki S. [et al.]// J. Exp. Med. — 2000. — Vol.192. —P. 303-310.

115. Impact of viral selected mutations on T cell mediated immunity in chronically evolving and self limiting acute HCV infection / Guglietta S., Garbuglia A.R., Salichos L. [et al.] // Virology. — 2009. — Vol. 386, N 2.

— P. 398-406.

116. Incomplete humoral immunity against hepatitis C virus is linked with distinct recognition of putative multiple receptors by E2 envelope glycoprotein / Tae-Hwe H., Jae-Hoon C., Jae-Woo L. [et al.] // J. Immunol. — 2004. — Vol. 173, N 1. —P. 446-455.

117. Inngjerdingen, M. Expression and regulation of chemokine receptors in human natural killer cells / Inngjerdingen M., Damaj B., Maghazachi A. // Blood. — 2001. — Vol. 97. — P. 367-375.

118. Integrin-dependent organization and bidirectional vesicular traffic at cytotoxic immune synapses / Liu D., Bryceson Y.T., Meckel T. [et al.] // Immunity. — 2009. — Vol. 17. — P. 99-109.

119. Interferon-a is the primary plasma type-I IFN in HIV-1 infection and correlates with immune activation and disease markers / Hardy G.A., Sieg S., Rodriguez B. [et al.] // PLoS One. — 2013. — Vol. 8, N 2:e56527.

120. Internal ribosome entry site within hepatitis C virus RNA / Tsukiyama-Kohara K., Iizuka N. Kohara M„ Nomoto A. // J. Virol. — 1992. — Vol. 66.

— P. 1476- 1483.

121. International Hepatitis C Genetics Consortium (IHCGC) IL28B, HLA-C, and KIR variants additively predict response to therapy in chronic hepatitis C virus infection in a European Cohort: a cross-sectional study / Suppiah V., Gaudieri S., Armstrong N.J. [et al.] // PLoS Med. — 2011. — Vol.8, N 9:el001092.

122. Jesudian, A.B. Emerging therapeutic targets for hepatitis C virus infection / Jesudian A.B., de Jong Y.P., Jacobson I.M. // Clin. Gastroenterol. Hepatol. —2013. —Vol. 11. —P. 1542-1565.

123. Kanto, T. Virus associated innate immunity in liver / Kanto T. // Front. Biosci. — 2008. — Vol. 13. — P. 6183-6192.

124. Kappler, J.W. T cell tolerance by clonal elimination in the thymus / Kappler J.W., Roehm N., Marrack P. // Cell. — 1987. — Vol. 49. — P. 273280.

125. Kato, N. Replication of hepatitis C virus genome / Kato N. // Uirusu. — 2008. — Vol. 58, N 2. — P. 191-198.

126. Kim, C.W. Hepatitis C virus: virology and life cycle / Kim C.W., Chang K.M. // Clin. Mol. Hepatol. — 2013. — Vol. 19, N 1. — P. 17-25.

127. Laboratory diagnostics for hepatitis C virus infection / Kamili S., Drobeniuc J., Araujo A.C., Hayden T.M. // Clin. Infect. Dis. — 2012. —Vol. 55. —P. 43-48.

128. Level, phenotype and activation status of CD4+FoxP3+ regulatory T cells in patients chronically infected with human immunodeficiency virus and/or hepatitis C virus / Rallon N.I., Lopez M., Soriano V. [et al.] // Clin. Exp. Immunol. — 2009. — Vol. 155, N1. — P. 35-43.

129. Lin, C. Processing in the hepatitis C virus E2-NS2 region: identification of p7 and two distinct E2-specific products with different C termini / Lin C., Lindenbach B. D„ Pragai B. M. // J. Virol. — 1994. — Vol. 68, № 8. — P. 5063 - 5073.

130. Lymph node occupancy is required for the peripheral development of alloantigen-specific Foxp3 + regulatory T cells / Ochando J.C., Yopp A.C., Yang Y. [et al.] // J. Immunol. — 2005. — Vol.174. — P. 6993-7005.

131. Lymphotropic HCV strain can infect human primary naive CD4+ cells and affect their proliferation and IFN-y secretion activity / Kondo Y., Ueno Y., Kakazu E. [et al.] // J. Gastroenterology. — 2011. — Vol. 46, № 2. — P.232-241.

132. McGuirk, P. Pathogen-specific T regulatory 1 cells induced in the respiratory tract by a bacterial molecule that stimulates interleukin 10 production by dendritic cells: a novel strategy for evasion of protective T helper type 1 responses by Bordetella pertussis / McGuirk P., McCann C., Mills K.H. // J. Exp. Med. — 2002. — Vol. 195. — P. 221-231.

133. McNeill, A. Partial depletion of CD691ow-expressing natural regulatory T cells with the anti-CD25 monoclonal antibody PC61 / McNeill A., Spittle E., Backstrom B.T. // Scand. J. Immunol. — 2007. — Vol. 65. — P. 63-69.

134. McQueen, K.L. Variable receptors controlling activation and ingibition of NK cells / McQueen K.L., Parham P. // Current Opinition in Immunology.

— 2002. — Vol.14. — P.615-621.

135. Mercer, J.C. Natural killer T cells: rapid responders controlling immunity and disease / Mercer J.C., Ragin M.J., August A. // Int. J. Biochem. Cell Biol. — 2005. — Vol. 37. — P. 1337-1343.

136. Mizushima, H. Two hepatitis С virus glycoprotein E2 products with different С termini / Mizushima H., Hijikata M., Asabe S. // J. Virol. — 1994.

— Vol. 68, N10. — P. 6215 - 6222.

137. Molecular pathogenesis of human hepatocellular carcinoma / Wang X.W., Hussain S.P., Huo T.I. [et al.] // Toxicology. — 2002. — Vol. 181-182.

— P. 43 - 47.

138. Multi-step regulation of interferon induction by hepatitis С virus / Oshiumi H., Funami K., Aly H.H. [et al.] // Arch. Immunol. Ther. Exp. — 2013. — Vol.61,N 2. — P. 127-138.

139. Natural killer cell dynamic profile is associated with treatment outcome in patients with chronic HCV infection / Oliviero В., Mele D., Degasperi E. [et al.] // J. Hepatol. — 2013. URL: http://www.ncbi.nlm.nih.gov/pubmed (дата обращения 14.05.2013)

140. Natural killer cell functional dichotomy: a feature of chronic viral hepatitis? / Mondelli M.U., Oliviero B., Mele D. [et al.] // Front Immunol. — 2012, —Vol.3. —P.351.

141. Natural killer cells are polarized towards cytotoxicity in chronic hepatitis C in an interferon-a-dependent manner / Ahlenstiel G., Titerence R.H., Koh C. [et al.] // Gastroenterology. — 2010. — Vol. 138, N1. — P. 325-335.

142. Natural killer cells in antiviral defense: function and regulation by innate cytokines / Biron C.A., Nguyen K.B., Pien G.C. [et al.] // Annu. Rev. Immunol. — 1999. — Vol. 17. — P. 189-220.

143. Natural killer cells inhibit hepatitis C virus expression / Li Y., Zhang T., Ho C., Orange J. S. [et al.] // J. Leukocyte Biology. — 2004. — Vol.76. — P. 1171-1179.

144. Natural killer cells suppress full cycle HCV infection of human hepatocytes / Wang S. H. [et al.]// J. Viral. Hepat. — 2008. — Vol. 15, № 12. — P. 855-864.

145. Nguyen, H. Hepatitis C virus core protein induces expression of genes regulating immune evasion and anti-apoptosis in hepatocytes / Nguyen H., Sankaran S„ Dandekar S. // Virology. —2006 . — Vol.354, N 1. —P.58-68.

146. NKT cells from normal and tumor-bearing human livers are phenotypically and functionally distinct from murine NKT cells / Kenna T. [et al.] // J. Immunol. — 2003. — Vol. 171, № 4. — P. 1775-1779.

147. Nolandt, O. Analysis of hepatitis C virus core protein interaction domains / Nolandt O., Kern V. Muller H. // J. Gen.Virol. — 1997. — Vol. 78, №6. —P. 1331 - 1340.

148. Nonself-antigens are the cognate specificities of Foxp3 + regulatory T cells / Pacholczyk R., Kern J., Singh N. [et al.] // Immunity. — 2007. — Vol. 27. —P. 493-504.

149. Nurses at risk for occupationally acquired blood-borne virus infection at a South African academic hospital / Mosendane T., Kew M.C., Osih R., Mahomed A. // S. Afr. Med. J. — 2012. — Vol. 102, N 3, pt. 1. — P. 153-156.

150. On hepatitis c virus evolution: the interaction between virus and host towards treatment outcome / Bittar C., Jardim A.C., Yamasaki L.H. [et al.] // PLoS One. — 2013. — Vol.8, N 4:e62393.

151. Orange, J.S. Natural killer cells in human health and disease / Orange J.S., Balias Z.K. // Clinical Immunology. — 2006. — Vol.118. — P. 1-10.

152. Ozdemir, C. T regulatory cells and their counterparts: masters of immune regulation / Ozdemir C., Akdis M., Akdis C.A. // Clin. Exp. Allergy.

— 2009. — Vol. 39, N5. — P. 626-639.

153. Ozdemir, O. Combinational IL-2/IL-15 induction does not further enhance IL-15-induced lymphokine-activated killer cell cytotoxicity against human leukemia/lymphoma cells / Ozdemir O., Sava§an S. // Clin. Immunol.

— 2005. — Vol.115, N3. — P. 240-249.

154. Pavio, N. The hepatitis C virus persistence: how to evade the immune system? / Pavio N., Lai M.M.C. // J. Biosci. — 2003. — Vol. 28, № 3. — P. 287-304.

155. Pawlotsky, J. M. Pathophysiology of hepatitis C virus infection and related liver disease / Pawlotsky J. M. // Trends Microbiol. — 2004. — Vol. 12, №2. —P. 96- 102.

156. Perforin pores in the endosomal membrane trigger the release of endocytosed granzyme B into the cytosol of target cells / Thiery J., Keefe D., Boulant S. [et al.] // J. Nat. Immunol. — 2011. — Vol. 19. — P. 770-777.

157. Poli, G. Pathogenesis of liver fibrosis: role of oxidative stress / Poli G. // Mol. Aspects Med. — 2000. — Vol. 21, № 3. _ p. 49 _ 98.

158. Rapid diagnostic HCV antibody assays / Smith B.D., Jewett A., Drobeniuc J., Kamili S. // Antivir. Ther. — 2012. — Vol.17, N7, pt. B. — P. 1409-1413.

159. Read, S. Cytotoxic T lymphocyte-associated antigen 4 plays an essential role in the function of CD25(+)CD4(+) regulatory cells that control intestinal inflammation / Read S., Malmstrom V., Powrie F. // J. Exp. Med. — 2000. — Vol.192.— P. 295-302.

160. Recognition of the peripheral self by naturally arising CD25 + CD4 + T cell receptors / Hsieh C.S., Liang Y., Tyznik A.J. [et al.] // Immunity. —2004.

— Vol. 21. —P. 267-277.

161. Redistribution of regulatory T-cells across the evolving stages of chronic hepatitis C / Ferri S., Lalanne C., Lanzoni G. [et al.] // Dig Liver Dis. — 2011.

— Vol. 43, N 10. — P. 807-813.

162. Regulation of PKR by HCV IRES RNA: importance of domain II and NS5A / Toroney R., Nallagatla S.R., Boyer J.A.[et al.]// J Mol Biol. —2010.

— Vol.400,N 3 — P. 393-412.

163. Regulatory T Cells Suppress In Vitro Proliferation of Virus-Specific CD8+ T Cells during Persistent Hepatitis C Virus Infection / Rushbrook S. M., Scott M. W„ Vowler S. L. [et al.]// J. Virol. — 2005. — Vol. 79, № 12. — P. 7852-7859.

164. Regulatory T cells: the physiology of autoreactivity in dominant tolerance and quality controlof immune responses / Coutinho A., Hori S., Carvalho T. [et al.] // Immunol. Rev. — 2001. — Vol. 182. — P. 89-98.

165. Review and meta-analysis of the association between self-reported sharing of needles/syringes and hepatitis C virus prevalence and incidence among people who inject drugs in Europe / Palmateer N.E., Hutchinson S.J., Innes H. [et al.] // Int. J. Drug Policy. — 2013. — Vol.24, N2. — P.85-100.

166. Risk of Hepatitis C virus re-infection following spontaneous viral clearance in injecting drug users: a systematic review / Corson S., Greenhalgh D., Palmateer N. [et al.] // Int. J. Drug Policy. — 2011. — Vol. 22, N 2. — P. 102-108.

167. Robertson, M. J. Biology and clinical relevance of human natural killer cells / Robertson M. J., Ritz J. // Blood. — 1990. — Vol. 76. — P. 2421-2438.

168. Roccasecca, R.M. Binding of the hepatitis C virus E2 glycoprotein to CD81 is strain specific and is modulated by a complex interplay between hypervariable regions 1 and 2 / Roccasecca R.M., Asuini H., Vitelli A. // J. Virol. — 2003. — Vol. 77, № 3. — P. 1856-1867.

169. Role of LAG-3 in regulatory T cells / Huang C.T., Workman C.J., Flies D. [et al.] // Immunity. — 2004. — Vol. 21. — P. 503-513.

170. Safe blood in the absence of viral infections due to HBV, HCV and HIV in serological window period in donors Domínguez / Contreras A.M., Reta C.B., Torres O., Celis A. // J. Salud Publica Méx. — 2011. — Vol. 53. — P. 13-18.

171. Santolini, E. The NS2 protein of hepatitis C virus is a transmembrane polypeptide / Santolini E., Pacini L., Fipaldini C. // J. Virol. — 1995. — Vol. 69, № 12, —P. 7461 -7471.

172. Santolini, E. Biosynthesis and biochemical properties of the hepatitis C virus core protein / Santolini E., Migliaccio G., La Monica N. // J. Virol. — 1994. — Vol. 68, № 6. — P. 3631 - 3641.

173. Screening for cytotoxic defects with flow cytometric detection of CD107a on natural killer cells and cytotoxic lymphocyte cells / Wang J., Liu Z., Jiang L.P. [et al.] // Zhonghua Er Ke Za Zhi. — 2012. — Vol. 50, N 5. — P. 386-391.

174. Simmonds P. Variability of hepatitis C virus / Simmonds P. // Hepatology. — 1995. — Vol. 21. — P. 570-583.

175. Spaan, M. Immunology of hepatitis C virus infections / Spaan M., Janssen H.L., Boonstra A.// Best Pract Res Clin Gastroenterol. — 2012. — Vol. 26, N4.— P. 391-400.

176. Specific T regulatory cells display broad suppressive functions against experimental allergic encephalomyelitis upon activation with cognate antigen / Yu P., Gregg R.K., Bell J.J. [et al.] // J. Immunol. — 2005. — Vol. 174. — P. 6772-6780.

177. Spengler, U. Immunopathogenesis in hepatitis C virus cirrhosis / Spengler U., Nattermann J. // Clin. Sci. Lond. — 2007. — Vol. 112, № 3. _ p. 141-155

178. Structure and function of major histocompatibility complex (MHC) class I specific receptors expressed on human natural killer (NK) cells / Borrego F.,

Kabat J., Kim D.K. [et al.] // Mol. Immunol. — 2002. — Vol. 38, N 9. — P. 637-660.

179. Suppression of airway eosinophilia by killed Mycobacterium vaccae-induced allergenspecific regulatory T-cells / Zuany-Amorim C., Sawicka E., Manlius C. [et al.] // Nat. Med. — 2002. — Vol. 8. — P. 625-629.

180. Suppression of HCV-specific T cells without differential hierarchy demonstrated ex vivo in persistent HCV infection / Sugimoto K., Ikeda F., Stadanlick J. [et al.]// Hepatology. — 2003. — Vol.38. — P. 1437-1448.

181. Surface expression and cytolytic function of natural killercell receptors is altered in chronic hepatitis C / Nattermann J., Feldmann G., Ahlenstiel G. [et al.] // Gut. — 2006. — Vol. 55. — P. 869-877.

182. Szymczak-Workman, A.L. Cutting edge: regulatory T cells do not require stimulation through their TCR to suppress / Szymczak-Workman A.L., Workman C.J., Vignali D.A. // J. Immunol. — 2009. — Vol. 182. — P. 51885192.

183. T cells with a CD4+CD25+ regulatory phenotype suppress in vitro proliferation of virus-specific CD8+ T cells during chronic hepatitis C virus infection / Boettler T., Spangenberg H. C., Neumann-Haefelin C[et al.] // J. Virol. — 2005. — Vol. 79, № 12 — P. 7860-7867.

184. T(h)2 bias of CD4(+) NKT cells derived from multiple sclerosis in remission / Araki M., Kondo T., Gumperz J.E. [et al.] // Int. Immunol. —2003. — Vol. 15, —P. 279-288.

185. Takehara, T. Natural Killer Cells in Hepatitis C Virus Infection: From Innate Immunity to Adaptive Immunity / Takehara T., Hayashi N. // Clinical Gastroenterol. Hepatol. — 2005. — Vol. 3. — P. 78-81.

186. Tarr, A.W. The role of humoral innate immunity in hepatitis C virus infection / Tarr A.W., Urbanowicz R.A., Ball J.K.// Viruses. — 2012. — Vol. 4,N 1. —P. 1-27.

187. The HLA-A2 restricted T cell epitope HCV core 35-44 stabilizes HLA-E expression and inhibits cytolysis mediated by natural killer cells / Nattermann

J., Nischalke H.D., Hofmeister V. [et al.] // Am. J. Pathol. —2005. — Vol.166. _P.443.453.

188. The nonstructural proteins of the hepatitis C virus: structure and functions / Neddermann P., Tomei L., Steinkuhler C. [et al.] // Biol. Chem. — 1997. — Vol. 378, № 6. — P. 469 - 476.

189. The phenotypic heterogeneity of human natural killer cells: presence of at least 48 different subsets in the peripheral blood / Jonges L.E., Albertsson P., van Vlierberghe R.L. [et al.] // Scand. J. Immunol. — 2001. — Vol. 53. — P. 103-110.

190. The potency of allospecific Tregs cells appears to correlate with T cell receptor functional avidity / Tsang J.Y., Ratnasothy K., Li D. [et al.] // Am. J. Transplant. —2011. —Vol. 11, N8.— P. 1610-1620.

191. Thimme, R. Failure of innate and adaptive immune responses in controlling hepatitis C virus infection / Thimme R., Binder M., Bartenschlager R.// FEMS Microbiol. Rev. — 2012. — Vol. 36, N 3. — P. 663-683.

192. Thornton, A.M. CD4 + CD25 + immunoregulatory T cells suppress polyclonal T cell activation in vitro by inhibiting interleukin 2 production / Thornton A.M., Shevach E.M. // J. Exp. Med. — 1998. — Vol.188. — P. 287296.

193. Tissue-specific differences in PD-1 and PD-L1 expression during chronic viral infection: implications for CD8 T-cell exhaustion / Blackburn S. D., Crawford A., Shin H. [et al.] // J. Virology. — 2010. — Vol. 84, № 4. _ P.2078-2089.

194. TLR2-dependent induction of IL-10 and Foxp3+ CD25+ CD4+ regulatory T cells prevents effective anti-tumor immunity induced by Pam2 lipopeptides in vivo / Yamazaki S., Okada K., Maruyama A. [et al.] // PLoS One. — 2011. — Vol.6, N 4:el8833

195. Tong, J. New developments in small molecular compounds for antihepatitis C virus (HCV) therapy / Tong J., Wang Y.W., Lu Y.A. // J. Zhejiang. Univ. Sci. B. — 2012. — Vol. 13, N 1. — P. 56-82.

196. Tran, D.Q. Induction of FOXP3 expression in naive human CD4 + F0XP3 T cells by T-cell receptor stimulation is transforming growth factor-beta dependent but does not confer a regulatory phenotype / Tran D.Q., Ramsey H., Shevach E.M. // Blood. — 2007. — Vol. 110. — P. 2983-2990.

197. Transforming growth factor-(3 regulation of immune responses / Li M.O. Wan Y.Y., Sanjabi S. [et al.] // Annu. Rev. Immunol. — 2006. — Vol. 24. — P. 99-146.

198. Transient expression of FOXP3 in human activated nonregulatory CD4 + T cells / Wang J., Ioan-Facsinay A., van der Voort E.I. [et al.] // Eur. J. Immunol. — 2007. — Vol. 37. — P. 129-138.

199. Transient regulatory T-cells: a state attained by all activated human T-cells / Pillai V., Ortega S.B., Wang C.K., Karandikar N.J. // Clin. Immunol. — 2007. — Vol. 123. — P. 18-29.

200. Triyatni, M. Interaction of hepatitis C virus- like particles and cells: a model system for studying viral binding and entry / Triyatni M., Saunier B., Maruvada P. // J. Virol. — 2002. — Vol. 76, № 18. — P. 9335 - 9344.

201. Tumor necrosis factor (TNF)-related apoptosis-inducing ligand (TRAIL) induces chemotactic migration of monocytes via a death receptor 4-mediated RhoGTPase pathway/Wei W., Wang D., Shi J. [et al.] // Mol. Immunol. — 2010. — Vol. 47, N 15. — P. 2475-2484.

202. Type I IFN enhances follicular B cell contribution to the T cell-independent antibody response / Swanson C.L., Wilson T.J., Strauch P. [et al.] // Torres RMJ Exp. Med. — 2010. — Vol. 207, N 7. — P. 1485-1500.

203. Warren, H.S. Target-induced natural killer cell loss as a measure of NK cell responses / Warren H.S. // J. Immunol. Methods. — 2011. — Vol.370, № 1-2. —P. 86-92.

204. Wing, K. Regulatory T cells exert checks and balances on selftolerance and autoimmunity / Wing K., Sakaguchi S.// Nat. Immunol. — 2010. —Vol. 11, N 1. —P.7-13.

© h

205. Xu, Z. Synthesis of a novel hepatitis C virus protein by ribosomal frameshift / Xu Z., Choi J., Yen T. // EMBO. — 2001. — Vol. 20, № 14. — P. 3840 - 3848.

206. Zhu, N. Hepatitis C virus core protein enhances FADD-mediated apoptosis and suppresses TRADD signaling of tumor necrosis factor receptor / Zhu N., Ware C.F., Lai M.M. // Virology. — 2001. — Vol.283, N 2. — P. 178-187.