Механизм автокаталитического нитрозилирования и нитрования аминокислот в составе белков с гидрофобными участками тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.02, кандидат химических наук Рафиков, Руслан Робертович

• Рафиков, Руслан Робертович
• кандидат химических наук
• 2005

Оглавление диссертации кандидат химических наук Рафиков, Руслан Робертович

1. Введение

1.1. Актуальность исследования

1.2. Цель и задачи настоящего исследования

1.3. Научная новизна

1.4. Научно-практическое значение

2. Обзор литераруры

2.1. Введение

2.2. Основные этапы изучения оксида азота

2.3. Синтез N0 в оганизме

2.3.1 N0 - синтазный путь

2.3.2 Несинтазный путь синтеза N

2.4. Общие физико-химические характеристики N

2.5 Активные метаболиты NO

2.6 Окисление NO кислородом

2.7 Окисление NO переходными металлами

2.8 Нитрозилирование белков

2.9 Образование пероксинитрита

2.10 Нитрование белков

2.11 Денитрование нитротирозина

2.12 Выводы литературного обзора

3 Методики экспериментов

3.1 Приготовление раствора NO в воде

3.2 Приготовление раствора пероксинитрита

3.3 Синтез защищенных по триптофану wBSA, cwBSA

3.4 Сперктоскопическое определение продуктов нитрозилирования BSA

3.5 Тонкослойная хроматография производных ANSA

3.6 Определение нитрозотиолов

3.7 Определение нитрозотирозина методом Вестерн-блот анализа

3.8 Определение нитротирозина методом HPLC

3.9 Распределение нитротирозина в белках лизата

3.10 Приготовление первичной культуры гиппокампальных нейронов крыс.

3.11 Определение коэффицента распределения NO (Qno)

4 Результаты и обсуждение

4.1 Эффект окружения в белке на реакцию нитрозилирования триптофана и цистеина под действием N

4.2. Зависимость скорости нитрозилирования от концентрации NO

4.3 Использование ANSA в качестве зондов для определения N203 внутри гидрофобной фазы белка

4.4 Определение коэффициента распределения для NO в системе альбумин/вода

4.5 Катализ образования нитрозотиолов под действием BSA насыщенного NO

4.6 Участие различных путей в переносе N0+ из гидрофобной фазы.

4.7 Участие N0 в нитровании тирозиновых остатков в белках.

4.8 Различие в реакции нитрования тирозина между N0 и пероксинитритом

4.9 Участие тиолов в реакции нитрования тирозина.

4.10 Зависимоть уровня нитротирозина в клетках Е coli от присутствия тиолов в питательных средах

4.11 Восстановления нитротирозина в культуре нейронов с помощью тиолов при различных нитрозилирующих стрессах

4.12 Корреляция между различными способами нитрования белков в клетках и выживаемостью клеток

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Механизм автокаталитического нитрозилирования и нитрования аминокислот в составе белков с гидрофобными участками»

Актуальность исследования. Л) Оксид азота обладает широким спектром действия на различные защитные и регуляторные системы организма. Открытая вначале регуляция N0 сосудистого тонуса, оказалась лишь верхушкой айсберга. Сейчас довольно хорошо изучено участие NO в воспалении, в передаче сигнала в нейронах, в регуляции активности множества ферментов и рецепторов. Молекула N0 является радикалом, однако не обладает высокой реакционноспособностью, характерной для радикала. В организме N0 может реагировать с высокой скоростью лишь с радикалами и переходными металлами. Долгое время реакцию NO с кислородом исключали из рассмотрения, поскольку эта тримолекулярная реакция имеет низкую эффективность и не может конкурировать с реакциями, в которых участвуют радикалы и ионы переходных металлов. В последнее время появились работы, в которых показано ускорение тримолекулярной реакции N0 с кислородом в гидрофобных фазах, присутствующих в организме, таких как липидные частицы, мембраны f; клеток (Lancaster Jr JR. 1997, Недоспасов А., 1998). Благодаря своей гидрофобной природе кислород и NO накапливаются в гидрофобных веществах, и реакция окисления NO ускоряется за счет эффекта концентрирования, это явление получило название «мицеллярный катализ». Весьма актуальной и неисследованной областью представляется участие белковых гидрофобных участков в «мицеллярном KaTajm3e» ..у окисления N0. Многие ферменты, в регуляции которых участвует NO, не имеют металлических центров или показано, что NO не взаимодействует с металлическим центром. Поэтому в данных системах возникает вопрос о механизме действия NO на такие белки.Наиболее распространенным регуляции V Показано, белков с помощью нитрозопроизводного цистеинового и исследованным N0 остатка является механизмом образование в белке, нитрозоцистеина. например, что нитрозилирование цистеина ответственном за функционирование кальциевых каналов, влияет на выход кальция из скелетной мышцы (Sun J. 2003). Однако, на главный вопрос каков механизм образования нитрозоцистеина, если N0 и цистеин не реагируют между собой непосредственно ответа до сих пор нет. Поэтому, интересной и совершенно неисследованной проблемой является связь между модифицированием с помощью NO аминокислот в составе белков и окислением N0 в гидрофобных участках белков. При окислении NO кислородом, конечным продуктом реакции является N2O3 вещество, известное как сильнейший нитрозилирующий агент. Таким образом, белки, связанные с мембраной или имеющие, гидрофобные участки могут нитрозилировать свои собственные аминокислоты благодаря реакции окисления NO в этих гидрофобных областях. Установлено, что низкомолекулярные нитрозотиолы, такие как нитрозоцистеин и нитрозоглутатион, могут играть в организме роль, схожую с NO. Они расслабляют сосуды, уменьшают свертываемость крови; то есть действие этих соединений однонаправлено с действием N0. Однако, время жизни нитрозотиолов в физиологических средах на порядки длиннее, чем у NO и, кроме того, у них отсутствует многие отрицательные свойства N0, такие как образование пероксинитрита и ингибирование ферментов с металлическими центрами. Механизм образования дискутируется. Кроме очень хорошо исследованной модификации с помощью NO цистеиновых остатков, существует еще одна аминокислота триптофан, которая является сильным нуклеофилом и может модифицироваться в таких низкомолекулярных тиолов до сих пор белках под действием NO. Хотя, на сегодняшний день существует лишь небольшое количество работ, посвященных модификации триптофана оксидом азота, эта область становится, в последнее время, очень привлекательна для исследователей. Известно, что нитрозотриптофан расслабляет гладкие мышцы и уменьшает агрегацию тромбоцитов, что говорит о его действии, похожем на действие N0. Механизм образования и распада нитрозотриптофана в физиологических условиях также совершенно не изучен. Огромной проблемой в области исследования N0 является понимание процессов многих и образования и путей деградации такого Его метаболита NO, как нитротирозин. Известно, что нитротирозин является jy маркером реперфузии патологических процессов в организме. накопление в клетках наблюдают в месте воспаления, при ишемиинейродегенеративных в первую очередь, заболеваниях. связывают с Образование образованием нитротирозина, пероксинитрита, который получается в реакции NO с супероксид анионом. Нитротирозин является стабильным метаболитом и его накопление приводит к запуску программной гибели клетки апоптозу. Однако, поскольку и в здоровой ткани наблюдается небольшой уровень нитротирозина, исследователей этот факт приводит вопрос о тому, что многих возникает механизме деградации нитротирозина. Сейчас большое количество публикаций посвящено поиску путей неинзиматеческого восстановления нитротирозина (Murad F. 1998) или поиску фермента «денитразы» (Ischiropoulos Н. 2001). Таким образом, актуальность и перспективность исследования механизмов модификации аминокислотных остатков под действием NO в белках представляет интерес для широкого круга исследователей связанных с физиологией, биохимией и медициной.

Заключение диссертации по теме «Биофизика», Рафиков, Руслан Робертович

1. Впервые было показано, что при инкубации альбумина с раствором NO (10-1000мкМ) эффективно нитрозилируются цистеин и триптофан внутри белка и эффективность этого процесса возрастает с уменьшением концентрации NO.Следовательно, при физиологических концентрациях N0 процесс нитрозилирования идет только в белках имеющих гидрофобные области.2. Впервые был разработан новый тип антибиотиков на основе гидрофобных синтетических нафталинсульфаниламидов (ANSA), которые приводят к инактивации белков за счет образования кросслингующего реагента с частицей NO+.3. Установлено, что коэффициент распределения NO между фазами • альбумин/вода равен Q120. Таким образом, реакция окисления N0 внутри гидрофобного участка альбумина должна ускорится как минимум в 10 раз. Различные модифицированные альбумины (BSA, '^ BSA, "'BSA, '^ "'BSA) способны переносить NO+ на внешний тиол с разной эффективностью, следовательно, передача NO+ идет по тем путям: 1- прямо из гидрофобной области, 2- через Cys^\ 3- через Тгр^"^

4. При мгновенном добавлении тиолов (в течение первых минут после экспозирования белка с N0) образование нитротирозина полностью ингибируется, тогда как добавление тиолов спустя 30 минут не влияет на реакцию нитрования тирозина.5. Было найдено, что в случае гидрофильной частицы -

пероксиьштрита - белок атакуется со стороны водной фазы и образованные нитротирозины легкодоступны для внешнего восстанавливающего агента. N0 приводит к нитрованию тирозинов внутри белка и тиолы не оказывают восстанавливающего действия на нитротирозин. Это приводит к тому, что при уменьшении внутриклеточного уровня тиолов клетки становятся чувствительными к действию N0 на модификацию белков путем их нитрования.6. Результаты работы позволили установить, что добавление тиолов к клеткам приводит к восстановлению жизнедеятельности клеток, подвергшихся нитрозилирующему стрессу. В случае действия пероксинитрита, как нитрозилирующего реагента, восстановление происходит более полно, чем в случае N0.

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Рафиков, Руслан Робертович, 2005 год

1. Ванин А.Ф. Динитрозильные комплексы железа и S-нитрозотиолы л две возможные формы стабилизации и транспорта оксида азота в биологических системах Биохимия. 1998. V.63. N7. Р.782793

2. Ванин А.Ф. Окись азота в биологии: история, состояние и перспективы исследования Биохимия. 1998. Т.63. N7. 867869 З.Ванин А.Ф., Барич В.И. Образование нитрозильных комплексов негемового железа (комплексы 2.03) в такнях животных in vivo Биофизика. 1979. V.24. N4. Р.666-670

3. Ванин А.Ф., Стукан Р.А., Манухина Е.Б. Димерные и мономерные формы динитрозильных комплексов железа с тиол содержащими лигандами: физико-химические свойства и вазодилататорная активность Биофизика. 1997. V.42. N1. Р. 10-21 З.Волин М.С., Дэвидсон К.А., Камински П.М., Фейнгерш Р.П., Мохаззаб-Х К.М. Механизмы передачи сигнала оксидант оксид азота в сосудистой ткани Биохимия. 1998. Т.63. N7. 958965 б.Голубев A.M., Васильев А.Э. 151

5. Горрен А.К.Ф., Майер Б. Универсальная и комплексная энзимология синтазы оксида азота Биохимия. —998. —63. —С. 870—880 А.К.Ф., Майер Б. Универсальная и комплексная энзимология синтазы оксида азота Биохимия. —998. —63. —С. Медико-биологические аспекты применения эмульсий перфторуглеродов Пущино. 1983. 136- 63

6. Клигупенко Е.Н., Бижно И.П., Слинченков В.В., Лещев Д.П. О некоторых механизмах действия перфторана в остром периоде термической травмы Перфторорганические соединения в биологии и медицине. 1

8. Кузнецова способность И.Н., Борисова эмульсии И.В. Взаимодействие сыворотки побочные реакции частиц крови и при перфторуглеродной с белками основа функционирования перфторуглеродной "искусственной крови" Биофизика. 1996. Т.41. N1. 178- эмульсий вызывать внутривенном введении Физиологически активные вещества на основе перфторуглеродов в военной медицине. 1997. 65-66

9. Ладилов Ю.В.,Исламов Б.И., Воробьев СИ., Иваницкий Г.Р. Влияние различных доз эмульсии перфторуглеродов на гемодинамику и сократимость ишемического сердца. Бюлл. эксперимент. Биол. и медицины. 1992. Т.6. 593-595

10. Манухина Е.Б., Малышев И.Ю., Маленюк Е.Б., Зенина Т.А., Покидешев Е.А. Гипотензивное действие и тканевое распределение донора оксида азота динитрозильных комплексов железа (ДКЖ) Бюл. эксперм. биол. и мед. 1998. V. 125. N1. Р.30-33

11. Манухина Е.Б., Малышев И.Ю., Маленюк Е.Б., Зенина Т.Д., Покидешев Е.А. Гипотензивное действие и тканевое распределение донора оксида азота динитрозильных комплексов железа (ДКЖ) Бюл. эксперм. биол. и мед. 1998. V. 125. N1. Р.30-33 64

12. Недоспасов А.А. Биогенный NO в конкурентных отношениях Биохимия. 1998. V.63. N7. Р.881-904

13. Недоспасов А.А. Биогенный N0 в конкурентных отношениях Биохимия. 1998. V.63. N7. Р.881-904

14. Панченко СМ. Состояние системы гемокоагуляции после инфузии эмульсии перфторированных органических соединений Автореф. дис. канд. мед. наук. НИИ гематологии и переливания крови. Ленинфад. 1990

15. Плужнынов Н.Н, Софронов Г.А. Фармокологическая коррекция состояния антиоксидантной системы организма Патофизиология экстремальных состояний. 1993. 108-113

16. Реутов В.П., Сорокина Е.Г., Косицын Н. С Охотин В.Е. Проблема оксида азота в биологии и медицине и принцип цикоичности Москва. 2003

17. Реутов В.П., Сорокина Е.Г., Охотин 1

18. Реутов В.П., Сорокина Москва. 1998

19. Северина СИ. Растворимая гуанилатциклаза в молекулярном механизме физиологических эффектов оксида азота Биохимия. 1998. Т.63. N7. С 939-947 65 В.Е., Косицын Н. Циклические превращения оксида азота в организме млекопитающих Е.Г., Охотин В.Е,, Косицын Н. Циклические превращения оксида азота в организме млекопитающих

20. Стокле Ж.К., Мюлле Б., Андрианцитохайна Р., Клещев А. кровеносных Гиперпродукция оксида азота в патофизиологии сосудов Биохимия. 1998. Т.63. N7. 976-983

21. Ханевич М.Д., Софронов Г.А., Тиканадзе А.Д. и др. Применение перфторана в неотложной и плановой абдоминальной хирургии Физиологически активные вещества на основе перфторуглеродов в военной медицине. 1997. 112-113

22. Шехтман Д.Г, Сафронова В.Г, Склифас А.Н, Аловская А.А. Модифицирующее соединений нейтрофилов действие эмульсии перфторорганических сред на активность и других коркускулярных Перфторорганические соединения в биологии и медицине. 1

24. Alvarez В., Radi R. Peroxynitrite reactivity with amino acids and proteins Amino Acids. 2003. N3-4. P.295-311 "T-;

25. Ambrosio G., Weisman H.F., Mannisi J.A., Becker L.C. Progressive impairment of regional myocardial perfusion after initial restoration of postischemic blood flow Circulation. 1989. V.80. N6. P. 184661

26. Ambrosio G., Zweier J.L., Flaherty J.T. The relationship between oxygen radical generation and impairment of myocardial energy metabolism following post-ischemic reperfusion J. Mol. Cell Cardiol. 1991. V.23. N12. P. 1359-74

27. Amrani M., Chester A.H,, Jayakumar J., Schyns C.J., Yacoub M.H. Larginine reverses low coronary reflow and enhances postischaemic 66

28. Arnelle D.R., Stamler J.S. N0+, NO, and NO- donation by Snitrosothiols: implications for regulation of physiological functions by Snitrosylation and acceleration of disulfide formation Arch Biochem Biophys. 1995. V.318. N2. P.279-85

29. Arstall M.A., Sawyer D.B., Fukazawa R., Kelly R.A. Cytokine-mediated apoptosis in cardiac myocytes: the role of inducible nitric oxide synthase induction and peroxynitrite generation Circ. Res. 1999. V.85. N9. P.829-40

30. Asahi M., Fujii J., Takao Т., Kuzuya Т., Hon M., Shimonishi Y., Taniguchi N. The oxidation of selenocysteine is involved in the inactivation of glutathione peroxidase by nitric oxide donor J. Biol. Chem. 1997. V.272. N31. P. 19152-7

31. Ascenzi P., Colasanti M., Persichini Т., Muolo M., Polticelli F., Venturini G., Bordo D., Bolognesi M. Re-evaluation of amino acid sequence and structural consensus rules for cysteine-nitric oxide reactivity Biol. Chem. 2000. V.381. N7. P.623-7

32. Askew S.C, Bamett D.J., McAninly J., Williams D.L.H. Catalysis by -r; -н Cu of nitric oxide release from S-nitrosothiols (RSNO) J. Chem. Soc. Perkin Trans. 1995. V2. P.741 -5

33. Aversano Т., Zhou W., Nedelman M., Nakada M., Weisman H. A chimeric IgG4 monoclonal antibody directed against CD 18 reduces infarct size in a primate model of myocardial ischemia and reperfusion J. Am. Coll. Cardiol. 1995. V.25. N3. P.781-8

34. Becker L.B. New concepts V.61.-N3.-P.461-70 in reactive oxygen species and cardiovascular reperfusion physiology Cardiovasc. Res. 2004. 67

35. Beckman J.S., Beckman T.W., Chen J., Marshall P.A., Freeman B.A. Apparent hydroxyl radical production by peroxynitrite: implications for endothelial injury from nitric oxide and superoxide Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 1990. V.87. N4. P.1620-4

36. Beda N.V., Suntsova T.P. Micellar catalysis for oxidation of nitric oxide (NO) in the multi-phase systems in vivo FEBS Lett. 1999. V.453. -N1-2.-P.229-35

37. Bertuglia S., Giusti A. Microvascular oxygenation, oxidative stress, NO W. suppression and superoxide dismutase during postischemic reperfusion Am. J. Physiol. Heart. Circ. Physiol. 2003. V.285. N3. P.H106471

38. Bloch W., Mehlhom U., Krahwinkel A., Reiner M., Dittrich M., Schmidt A., Addicks K. Ischemia increases detectable endothelial nitric oxide synthase in rat and human myocardium Nitric Oxide. 2001. V.5.-N4.-P.317-33

39. Boyle M.P., Weisman H.F. Limitation of infarct expansion and Ту ventricular remodeling by late reperfusion. Study of time course and mechanism in a rat model Circulation. 1993. V.88. N6. P.287283

40. Brown G.C. Regulation of mitochondrial respiration by nitric oxide inhibition of cytochrome с oxidase Biochim. Biophys. Acta. 2001. V.1504.-N1.-P.46-57

41. Burkart V., Koike Т., Brenner H.H., Imai Y., Kolb H. Dihydrolipoic acid protects pancreatic islet cells from inflammatory attack Agents Actions. 1993. V.38. N1-2. P.60-5 68

42. Campbell D.L., Stamler J.S., Strauss H.C. Redox modulation of L-type calcium channels in ferret ventricular myocytes. Dual mechanism V: regulation by nitric oxide and S-nitrosothiols J Gen Physiol. 1996. V.108.-N4.-P.277-93

43. Cannon R.O. 3., Schechter A.N., Panza J.A., Ognibene P.P., Pease-Fye M.E., Waclawiw M.A., Shelhamer J.H., Gladwin M.T. Effects of inhaled nitric oxide on regional blood flow are consistent with intravascular nitric oxide delivery J. Clin. Invest. 2001. V. 108. N2. P.279-87 "-rj -ч44. Castro L.A., Robalinho R.L,, Cayota A., Meneghini R., Radi R. Nitric oxide and peroxynitrite-dependent aconitase inactivation and ironregulatory protein-1 activation in mammalian fibroblasts Arch. Biochem. Biophys. 1998. V.359. N2. P.215-24

45. Catani M.V., Bemassola F., Rossi A., Melino G. Inhibition of clotting factor XIII activity by nitric oxide Biochem Biophys Res Commun. 1998. V.249. N. 1. P.275-8

46. Choi Y.B., Tenneti L., Le D.A., Ortiz J., Bai G., Chen H.S., Lipton S.A. Molecular basis of NMDA receptor-coupled ion channel modulation by S-nitrosylation Nat. Neurosci. 2000. N1. P.15-21

47. Cooper C.E. Nitric oxide and iron proteins Biochim. Biophy.s Acta. 1999. V. 1411. N2-3. P.290-309 69

48. Crow J.P., Ischiropoulos H. Detection and quantitation of nitrotyrosine residues in proteins: in vivo marker of peroxynitrite Methods Enzymol. 1996. V.269. P. 185-94.

49. Crow JP, Ischiropoulos H. Detection and quantitation of nitrotyrosine residues in proteins: in vivo marker of peroxynitrite. Methods Enzymol. 1996 V269 PI85-94

50. Csonka C Szilvassy Z., Fulop F., Pali Т., Blasig I.E., Tosaki A., Schulz R., Ferdinandy P. Classic preconditioning decreases the harmful T accumulation of nitric oxide during ischemia and reperfusion in rat hearts Circulation. 1999. V.IOO. N22. P.2260-6

51. Daiber A., Herold S., Schoneich C Namgaladze D., Peterson J.A., Ullrich V. Nitration and inactivation of cytochrome P450BM-3 by peroxynitrite. Stopped-flow measurements prove ferryl intermediates Eur. J. Biochem. 2000. V.267. N23. P.6729-39 63,Depre C Fierain L., Hue L. Activation of nitric oxide synthase by ischaemia in the perfused heart Cardiovasc. Res. -.1997. V.33. N1. -P.82-7

52. Dohi K., Ohtaki H., Inn R., Ikeda Y., Shioda H.S., Aruga T. Peroxynitrite and caspase-3 expression after ischemia/reperfusion in mouse cardiac arrest model Acta Neurochir. Suppl. 2003. V.86. P.87-91

53. Duilio C Ambrosio G., Kuppusamy P., DiPaula A., Becker L.C., Zweier J.L. Neutrophils are primary source of O2 radicals during -4 reperfusion after prolonged myocardial ischemia Am. J. Physiol. Heart Circ. Physiol. 2001. V.280. N6. P.H2649-57

54. Eduardo da Silva-Santos J., Assreuy J. Long-lasting changes of rat blood pressure to vasoconstrictors and vasodilators induced by nitric oxide 70

55. Estevez A.G., Spear N., Manuel S.M., Radi R., Henderson C.E., Barbeito L., Beckman J.S. Nitric oxide and superoxide contribute to motor neuron apoptosis induced by trophic factor deprivation J. Neurosci. 1998. V.18. N3. P.923-31

56. Feelisch M., Rassaf Т., Mnaimneh S., Singh N., Bryan N.S., JourdHeuil D., Kelm M. Concomitant S-, N-, and heme-nitros(yl)ation in biological tissues and fluids: implications for the fate of NO in vivo FASEB J. 2002.-V.16.-N13.-P.1775-85

57. Flaherty J.T., Pitt В., Gruber J.W., Heuser R.R., Rothbaum D.A., Burwell L.R., George B.S,, Kereiakes D.J., Deitchman D., Gustafson N., et al. Recombinant human superoxide dismutase (h-SOD) fails to improve recovery of ventricular function in patients undergoing coronary angioplasty for acute myocardial infarction Circulation. 1994. V.89. N5. P. 1982-91

58. Frangogiannis N.G., Lindsey M.L., Michael L.H., Youker K.A., Bressler R.B., Mendoza L.H., Spengler R.N., Smith C.W., Entman M.L. Resident cardiac mast cells degranulate and release preformed TNF-alpha, initiating the cytokine cascade in experimental canine myocardial ischemia/reperfusion Circulation. 1998. V.98. N7. P.699-71

59. Frustaci A., Kajstura J., Chimenti C Jakoniuk I., Leri A., Maseri A., Nadal-Ginard В., An versa P. Myocardial cell death in human diabetes Circ. Res. 2000. V.87. N12. P.l 123-32

60. Furukawa Т., Kohno H., Tokunaga R., Taketani S. Nitric oxidemediated inactivation of mammalian ferrochelatase in vivo and in vitro: possible involvement of the iron-sulphur cluster of the enzyme Biochem. J. 1995. V.310. Pt.2. P.533-8 71 X;

61. Garcia-Ruiz C, Femandez-Checa J.C., Kaplowitz N. Bidirectional mechanism of plasma membrane transport of reduced glutathione in intact rat hepatocytes and membrane vesicles J. Biol. Chem. 1992. V.267. N31. P.22256-64

62. Gaston В., Sears S., Woods J., Hunt J., Ponaman M., McMahon Т., Stamler J.S. Bronchodilator S-nitrosothiol deficiency in asthmatic respiratory failure Lancet. 1998. V.351. N9112. P.1317-9 Ч-"

63. Giraldez R.R., Panda A., Xia Y., Sanders S.P., Zweier J.L. Decreased nitric-oxide synthase activity causes impaired endothelium-dependent relaxation in the postischemic heart J. Biol. Chem. 1997. V.272. N34.-P.21420-6

64. Gladwin M.T., Lancaster J.R., Jr., Freeman B.A., Schechter A.N. Nitric oxides reactions with hemoglobin: a view through the SNO-storm Nat. Med. 2003. N5. P.496-500

65. Gunther MR, Sturgeon BE, Mason RP. Nitric oxide trapping of the tyrosyl radical-chemistry and biochemistry. Toxicology. 2002 V.177-Nl-P.:l-9. SS.Heyndrickx G.R. Myocardial stunning: an experimental act with a large clinical audience Arch. Mai. Coeur. Vaiss. 2003. V.96. N6. P.665-70

66. Hobbs A.J. Soluble guanylate cyclase: the forgotten sibling Trends i:, Pharmacol. Sci. 1997. N12. P.484-91

67. Hobbs A.J., Gladwin M.T., Patel R.P., Williams D.L., Butler A.R. Haemoglobin: NO transporter, NO inactivator or NOne of the above? Trends Pharmacol. Sci. 2002. N9. P.406-11

68. Hogg N. The biochemistry and physiology of S-nitrosothiols Annu Rev Pharmacol Toxicol. 2002. V.42. P.585-600

69. Hogg N. The kinetics of S-transnitrosationa reversible second-order reaction Anal Biochem. 1999. V.272. N2. P.257-62

70. Huang K.T., Han Т.Н., Hyduke D.R., Vaughn M.W., Van Herie H., Hein T.W., Zhang C, Kuo L., Liao J.C. Modulation of nitric oxide bioavailability by erythrocytes Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 2001. -V.98.-N20.-P.11771-6

71. Huhmer A.F., Nishida C.R., Ortiz de Montellano P.R., Schoneich C. Inactivation of the inducible nitric oxide synthase by peroxynitrite Chem. Re.s Toxicol. 1997. N5. P.618-26

72. Huie R.E., Padmaja S. The reaction of no with superoxide Free Radic. Res. Commun. 1993. V.18. N4. P.195-9

73. Hunt J.F., Fang K., Malik R., Snyder A., Malhotra N., Platts-Mills T.A., Gaston B. Endogenous airway acidification. Implications for asthma 73

74. Jeremy J.Y., Shukla N., Muzaffar S., Handley A., Angelini G.D. Reactive oxygen species, vascular disease and cardiovascular surgery Curr. Vase. Pharmacol. 2004. V.2. N3. P.229-36 98.Jia L., Bonaventura C, Bonaventura J., Stamler J.S. Snitrosohaemoglobin: a d)mamic activity of blood involved in vascular control Nature. 1996. V.380. N6571. P.221-6

75. Kashiba-Iwatsuki M., Yamaguchi M., Inoue M. Role of ascorbic acid in the metabolism of S-nitroso-glutathione FEBS Lett. 1996. V. 389. N 2 P 149-52 74

76. Klatt P., Lamas S. Regulation of protein function by S-glutathiolation in response to oxidative and nitrosative stress Eur. J. Biochem. 2000. V.267.-N16.-P.4928-44 llO.Konorev E.A., Hogg N., Kalyanaraman B. Rapid and irreversible inhibition of creatine kinase by peroxynitrite FEBS Lett. 1998. V.427.-N2.-P.171-4 lll.Konorev E.A., Kalyanaraman В., Hogg N. Modification of creatine kinase by S-nitrosothiols: S-nitrosation vs. S-thiolation Free Radic Biol Med. 2000. V.28. N11. P.1671-8 75

77. Kubes P., Suzuki M., Granger D.N. Nitric oxide: an endogenous modulator of leukocyte adhesion. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 1991. -V.88.-N11.-P.4651-5 1 M.Lancaster J.R., Jr. A tutorial on the diffusibility and reactivity of free nitric oxide Nitric Oxide. 1997. N1. P. 18-30

78. Lancaster J.R., Jr. Simulation of the diffusion and reaction of endogenously produced nitric oxide Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 1994. V.91. N17. P.8137-41

79. Lane P., Hao G., Gross S.S. S-nitrosylation is emerging as a specific and fundamental N86. P.REl

80. Lash L.H., Jones D.P. Renal glutathione transport. Characteristics of the sodium-dependent system in the basal-lateral membrane J. Biol. Chem. 1984. V.259. N23. P. 14508-14 llS.Lee C.I., Liu X., Zweier J.L. Regulation of xanthine oxidase by nitric oxide and peroxynitrite J. Biol. Chem. 2000. V.275. N13. P.9369-76

81. Lincoff A.M., Topol E.J. Illusion of reperfusion. Does anyone achieve optimal reperfusion during acute myocardial infarction? Circulation. 1993. V.88. N 3 P.1361-74

82. Lipton A.J., Johnson M.A., Macdonald Т., Lieberman M.W., Gozal D., Gaston B. S-nitrosothiols signal the ventilatory response to hypoxia Nature. 2001. V.413. N6852. P. 171-4

83. Lipton S.A., Choi Y.B., Pan Z.H., Lei S.Z., Chen H.S., Sucher N.J., Loscalzo J., Singel D.J., Stamler J.S. A redox-based mechanism for the neuroprotective and neurodestructive effects of nitric oxide and related nitroso-compounds Nature. 1993. V.364. N6438. P.626-32

84. Mannick J.B., Schonhoff CM. Nitrosylation: the next phosphorylation? Arch. Biochem. Biophys. 2002. V.408. N1. P. 1-6

85. Mannisi J.A., Weisman H.F., Bush D.E., Dudeck P., Healy B. Steroid administration after myocardial infarction promotes early infarct expansion. A study in the rat J. Clin. Invest. 1987. V.79. N5. P.1431-9

86. Manukhina E.B., Smirin B.V., Malyshev I.I., Stoclet .JC, Muller В., Solodkov A.P., Shebeko V.I,, Vanin A.F. Nitric oxide storage in the cardiovascular system Izv. Akad. Nau.k Se.r Biol. 2002. V.9-10. N5. P.585-96

87. Marban E., Koretsune Y., Corretti M., Chacko V..P, Kusuoka H. Calcium and its role in myocardial cell injury during ischemia and reperfusion Circulation. 1989. V.80. N

89. Mori E., Haramaki N., Ikeda H., Imaizumi T. Intra-coronary л administration of L-arginine aggravates myocardial stunning through production of peroxynitrite in dogs Cardiovasc. Res. 1998. V.40. N l P l 13-23

90. Morita K., Sherman M.P., Buckberg G.D., Ihnken K., Matheis G., Young H.H., Ignarro L.J. Studies of hypoxemic/reoxygenation injury: without aortic clamping. V. Role of the L-arginine-nitric oxide pathway: the nitric oxide paradox J. Thorac. Cardiovasc. Surg. 1995. V.l 10. -N4.-Pt.2.-P.1200-ll

91. Muller В., Kleschyov A.L,, Alencar J.L., Vanin A., Stoclet J.C. Nitric oxide transport and storage in the cardiovascular system Ann N Y Acad Sci. 2002. V.962. N5. P. 131-9

92. Nakashima S., Tohmatsu Т., Hattori H., Okano Y., Nozawa Y. Inhibitory action of cyclic GMP on secretion, polyphosphoinositide hydrolysis and calcium mobilization in thrombin-stimulated human platelets Biochem. Biophys. Res. Commun. 1986. V.l35. N3. P.1099-104

93. Park J.L., Lucchesi B.R. Mechanisms of myocardial reperfusion injury Ann. Thorac. Surg. 1999. V.68. N5. P.1905-12

94. Pawloski J.R., Hess D.T., Stamler J.S. Export by red blood cells of nitric oxide bioactivity Nature. 2001. V.409. N.6820. P.622-6

95. Pawloski J.R., Swaminathan R.V., Stamler J.S. Cell-free Circulation. 1998. V.97. N3. P.263-7 ISO.Radi R., Beckman J.S., Bush K.M., Freeman B.A. Peroxynitrite-induced membrane lipid peroxidation: the cytotoxic potential of superoxide and nitric oxide Arch/ Biochem/ Biophys. 1991. V.288. N2. P.4817 ISl.Radi R., Rodriguez M., Castro L., Telleri R. Inhibition of mitochondrial electron transport by peroxynitrite Arch. Biochem. Biophys. 1994. V.308.-N1.-P.89-95

96. Reffelmann and erythrocytic S-nitrosohemoglobin inhibits human platelet aggregation Т., Hale S.L., Dow J.S., Kloner R.A. No-reflow phenomenon persists long-term after ischemia/reperfusion in the rat and predicts infarct expansion Circulation. 2003. V.108. N23. P.2911-7

97. Rogers P.A., Eide L., Klungland A., Ding H. Reversible inactivation of E. coli endonuclease III via modification of its [4Fe-4S] cluster by nitric oxide DNA Repair (Amst). 2003. V.2. N7. P.809-17

98. Rubbo H., Radi R., Trujillo M., Telleri R., Kalyanaraman В., Barnes S., Kirk M., Freeman B.A. Nitric oxide regulation of superoxide and peroxynitrite-dependent lipid peroxidation. Formation of novel nitrogencontaining oxidized lipid derivatives J. Biol. Chem. 1994. V.269. N42. P.26066-75 80

99. Sanchez de Miguel L., Arriero M.M., Farre J., Jimenez P., GarciaMendez A., de Frutos Т., Jimenez A., Garcia R., Cabestrero F., Gomez J., de Andres R., Monton M., Martin E., De la Calle-Lombana L.M., Rico L., Romero J., Lopez-Farre A. Nitric oxide production by neutrophils obtained from patients during acute coronary syndromes: expression of the nitric oxide synthase isoforms J. Am. Coll. Cardiol. 2002. V.39. N5. P.818-25

100. Sato H., Zhao Z.Q., McGee D.S., Williams M.W., Hammon J.W. Jr., Vinten-Johansen J. Supplemental L-arginine during cardioplegic arrest and reperfusion avoids regional postischemic injury J. Thorac. Cardiovasc. Surg. 1995. V.l 10. N2. P.302-14

101. Scalera F., Borlak J., Beckmann В., Martens-Lobenhoffer J., Thum Т., Tager M., Bode-Boger S.M. Endogenous Nitric Oxide Synthesis Inhibitor Asymmetric Dimethyl L-Arginine Accelerates Endothelial Cell Senescence Arterioscler. Thromb. Vase. Biol. 2004

102. Scharfstein J.S., Keaney J.F., Jr., Slivka A., Welch G.N., Vita J.A., Stamler J.S., Loscalzo J. In vivo transfer of nitric oxide between a plasma protein-bound reservoir and low molecular weight thiols J. Clin. Invest. 1994. V.94. N4. P. 1432-9

103. Scorza G., Pietraforte D., Minetti M. Role of ascorbate and protein thiols in the release of nitric oxide from S-nitroso-albumin and S-nitrosoglutathione in human plasma Free Radic Biol Med. 1997. V.22. N4. -P.633-42 161.Sen C.K., Tirosh O., Roy S., Kobayashi M.S., Packer L. A positively charged alpha-lipoic acid analogue with increased cellular uptake and more potent immunomodulatory activity Biochem Biophys Res Commun. 1998. V.247. N2. P.223-8 81 -к 4>

104. Sievers R.E., Schmiedl U., Wolfe C.L., Moseley M.E., Parmley W.W., Brasch R.C., Lipton M.J. A model of acute regional myocardial ischemia and reperfusion in the rat Magn. Reson. Med. 1989. V.10.-N2.-P.172-81

105. Singh R.J., Hogg N., Joseph J., Kalyanaraman B. Mechanism of nitric oxide release from S-nitrosothiols J. Biol. Chem. 1996. V. 271. N31.-P. 18596-603

106. Souza J.M., Choi I., Chen Q., Weisse M., Daikhin E., Yudkoff M., Obin M., Ara J., Horwitz J., Ischiropoulos H. Proteolytic degradation of tyrosine nitrated proteins Arch. Biochem. Biophys. 2000. V.380. N2. P.360-6

107. Stamler J.S. Redox signaling: nitrosylation and related target interactions of nitric oxide Cell. 1994. V.78. N6. P.931-6

108. Stamler J.S., Hausladen A. Oxidative modifications in nitrosative stress Nat. Struct Biol. 1998. N4. P.247-9 vT-/

109. Stamler J.S., Jia L., Eu J.P., McMahon T.J., Demchenko I.T., Bonaventura J., Gemert K., Piantadosi C.A. Blood flow regulation by Snitrosohemoglobin in the physiological oxygen gradient Science. 1997. V.276. N5321. P.2034-7

110. Stem M.D., Weisman H.F., Renlund D.G., Gerstenblith G., Hano O., Blank P.S., Lakatta E.G. Laser backscatter studies of intracellular Ca2+ oscillations in isolated hearts Am. J. Physiol. 1989. V.257. N2. Pt.2. P.H665-73 170.Sun J, Xu L, Eu JP, Stamler JS, Meissner G. Nitric oxide, NOC-12, and S-nitrosoglutathione modulate the skeletal muscle calcium release channel/ryanodine receptor by different mechanisms. An allosteric 82 4.

111. Takahashi S.S., Omori Y., Miyazaki H., Yoshino P., Shoji H., Lee M.C., Todoki K., Kamibayashi M., Murakami E. Real-time monitoring of nitric oxide in ischemic myocardium using an NO-selective electrode calibrated by electron spin resonance Life Sci. 2003. V.74. N1. P.75-85

112. Thomas D.D., Miranda K.M., Colton C.A., Citrin D., Espey M.G., Wink D.A. Heme proteins and nitric oxide (NO): the neglected, eloquent chemistry in NO redox signaling and regulation Antioxid. Redox. Signal. 2003. N3. P.307-17

113. Thurich Т., Bereiter J., Schneider M., Zimmer G. Cardioprotective effects of dihydrolipoic acid and tocopherol in right heart hypertrophy during oxidative stress. Arzneimittelforschung. 1998. V.48. N1. V -P.13-6

114. Tsao P.S., Aoki N., Lefer D.J., Johnson G. 3rd., Lefer A.M. Time course of endothelial dysfunction and myocardial injury during myocardial ischemia and reperfusion in the cat Circulation. 1990. V.82. N4. -P.1402-12

115. Tyurin V.A., Liu S.X., Tyurina Y.Y., Sussman N.B., Hubel C.A., Roberts J.M., Taylor R.N., Kagan V.E. Elevated levels of Sjj nitrosoalbumin in preeclampsia plasma Circ. Res. 2001. V.88. N11.-P.1210-5 tf> 83

116. Vanin A.F., Stukan R.A., Manukhina E.B. Dimeric and monomeric forms of dinitrosyl iron complexes with thiol-containing ligands: physico-chemical properties and vasodilator activity Biofizika. 1997. -V.42.-N1.-P.10-21

117. Vanin A.F., Varich V.I. Formation of nitrosyl complexes of nonheme iron (2.03 complexes) in animal tissues in vivo Biofizika. 1979. V.24. N4. P.666-70

118. Vaughn M.W., Kuo L., Liao J.C. Effective diffusion distance of nitric oxide in the microcirculation Am. .J Physiol. 1998. V.274. N5. Pt.2.-P.1705-14

119. Virag L., Scott G.S., Cuzzocrea S., Manner D., Salzman A.L., Szabo C. Peroxynitrite-induced thymocyte apoptosis: the role of caspases and poly (ADP-ribose) synthetase (PARS) activation Immunology. 1998. V.94. N3. P.345-55

120. Vriesman M.F., Haenen G.R. Westerveld G.J., Paquay J.B., Voss H.P., Bast A. A method for measuring nitric oxide radikal scavenging activity. Scavenging properties of sulfur-containing compounds Pharm. World Sci. 1997. V.19. N6. P.283-6

121. Wang P., Zweier J.L. Measurement of nitric oxide and peroxynitrite generation in the postischemic heart. Evidence for peroxynitritemediated reperfusion injury J. Biol. Chem. 1996. V.271. N46. P.29223-30

122. Weisman H.F. Myocardial Reperfusion Injury: The Case Against -b Shadow Boxing J. Thromb. Thrombolysis. 1997. V.4. N1. P.133-5

123. Weisman H.F., Bartow Т., Leppo M.K., Marsh H.C. Jr., Carson G.R., Concino M.F., Boyle M.P., Roux K.H., Weisfeldt M.L., Fearon D.T. 84

124. Wennmalm A, Benthin G, Edlund A, Jungersten L, Kieler-Jensen N, Lundin S, Westfelt UN, Petersson AS, Waagstein F. Metabolism and excretion of nitric oxide in humans. An experimental and clinical study Circ Res. 1993. V.73. N6. P.l 121-7

125. Weyrich A.S., Ma X.L., Lefer A.M. The role of L-arginine in ameliorating reperfusion injury after myocardial ischemia in the cat Circulation. 1992. V.86. N1. P.279-88

126. Whiteman M., Tritschler H., Halliwell B. Protection against peroxynitrite-dependent tyrosine nitration and alpha 1-antiproteinase inactivation by oxidized and reduced lipoic acid FEBS Lett. 1996. V.379.-N1.-P.74-6

127. Wink D.A., Darbyshire J.F., Nims R.W., Saavedra J.E., Ford P.C. Reactions of the bioregulatory agent nitric oxide in oxygenated aqueous media: determination of the kinetics for oxidation and nitrosation by intermediates generated in the N0/02 reaction Chem Res Toxicol. 1993.-V.6.-N1.P.23-7

128. Wink D.A., Kim S., Coffin D., Cook J.C., Vodovotz Y., Chistodoulou D., Jourdheuil D., Grisham M.B. Detection of S-nitrosothiols by fluorometric and colorimetric methods Methods Enzymol. 1999. V.301.-P.201-11

129. Wink D.A., Nims R.W., Darbyshire J.F., Christodoulou D., Hanbauer L, Cox G.W., Laval F., Laval J., Cook J.A., Krishna M.C. Reaction kinetics for nitrosation of cysteine and glutathione in aerobic nitric oxide solutions at neutral pH. Insights into the fate and physiological effects of intermediates generated in the N0/02 reaction Chem Res Toxicol. 1994.-V.7.-N4. P.519-25 85

130. Yasmin W., Strynadka K.D., Schulz R. Generation of peroxynitrite contributes to ischemia-reperfusion injury in isolated rat hearts Cardiovasc. Res. 1997. V.33. N2. P.422-32

131. Zhang Y., Bissing J.W., Xu L., Ryan A.J., Martin S.M., Miller F.J., Jr., Kregel K.C., Buettner G.R., Kerber R.E. Nitric oxide synthase inhibitors decrease coronary sinus-free radical concentration and ameliorate myocardial stunning in an ischemia-reperfusion model J. Am. Coll. Cardiol. 2001. V.38. N2. P.546-54 196.Zou M., Martin C Ullrich V. Tyrosine nitration as a mechanism of selective inactivation of prostacyclin synthase by peroxynitrite Biol. Chem. 1997. V.378. N7. P.707-13

132. Zweier J.L., Flaherty J.T., Weisfeldt M.L. Direct measurement of free radical generation following reperfusion of ischemic myocardium Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 1987. V.84. N5. P. 1404-7

133. Zweier J.L., Samouilov A., Kuppusamy P. Non-enzymatic nitric oxide synthesis in biological systems Biochim Biophys Acta. 1999. V.1411.-N2-3.-P.250-62

134. Zweier J.L., Wang P., Kuppusamy P. Direct measurement of nitric oxide generation in the ischemic heart using electron paramagnetic resonance spectroscopy J. Biol. Chem. 1995. V.270. N1. P.304-7

135. Zweier J.L., Wang P., Samouilov A., Kuppusamy P. Enzymeindependent formation of nitric oxide in biological tissues Nat. Med. .1995.-V.1.-N8.-P.804-9 86