Межклеточные взаимодействия мезенхимальных мультипотентных стромальных клеток и дифференцированных клеток сердца и почки тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.03.04, кандидат биологических наук Хряпенкова, Татьяна Геннадьевна

• Хряпенкова, Татьяна Геннадьевна
• кандидат биологических наук
• 2010

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Хряпенкова, Татьяна Геннадьевна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

Научная новизна работы.

Практическое значение работы.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

Потеря клеточных элементов как звено патогенеза почечной и сердечной недостаточности.

Консервативные методы лечения заболеваний сердца и почек медикаментозный и заместительный.

Трансплантация клеток как альтернативный подход.

Типы применяемых для терапии клеток.

Эмбриональные стволовые клетки.

Мезенхимальные стволовые клетки.

Стволовые клетки взрослой почки.

Стволовые клетки сердца.

Особенности подготовки клеток к трансплантации.

Способы трансплантации клеток.

Способы влияния: встраивание и дифференцировка; слияние; паракринные и эндокринные эффекты; иммуномодуляция; донирование органел, микровизикул, растворимых веществ.

Межклеточные взаимодействия.

Контакты.

Щелевые контакты.

Туннельные нанотрубочки.

Паракринные, эндокринные эффекты.

Слияние.

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

Среды и реагенты.

Получение первичной культуры кардиомиоцитов, эпителиальных клеток почки крысы.

Получение мезенхимальных мультипотентных стромальных клеток.

Модель сокультивирования клеток эмбриональной сердечной ткани крысы или эпителиоцитов крысы и мезенхимальных мультипотентных стромальных клеток человека.

Оценка состояния митохондрий в клетках.

Оценка организации цитоскелета клеток в культуре кардиомиоцитов.

Оценка распределения внутриклеточного кальция.

Оценка транспорта цитоплазмы.

Оценка транспорта мембранных компонентов.

Проточная цитофлуориметрия.

Электронная сканирующая и электронная трансмиссионная микроскопия

Моделирование ишемии/реперфузии почки.

Магнитно-резонансная томография.

Получение срезов корковой зоны почки.

Микроскопическое исследование клеток и срезов почек крыс.

Определение концентрации белка.

Вестерн-блот. иммуногистохимическое окрашивание срезов почки и культуры.

Статистика.

РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ.

Характеристика культуры клеток сердца эмбрионов крысы. Гетерогенность культуры.

Гетерогенность клеток культуры по энергетическому аппарату.

Гетерогенность клеток культуры по сократительному аппарату.

Гетерогенность по распределению внутриклеточного кальция.

Формирование межклеточных контактов в смешанной культуре клеток различного происхождения.

Исследование возможности различных клеток образовывать контакты по типу туннельных нанотрубочек в условиях moho- и совместной культуры.

Обмен цитоплазмой в смешанной культуре мезенхимальных мультипотентных стромальных и соматических клеток.

Транспорт митохондрий из мезенхимальных мультипотентных стромальных клеток в клетки сердца или почки.

Обмен мембранными компонентами в совместной культуре клеток почки и мезенхимальными мультипотентными стромальными клетками дифференцировка мезенхимальных мультипотентных стромальных клеток по ткане-специфичному пути.

Влияние мезенхимальных мультипотентных стромальных клеток при введении в почку in vivo.