Миелопептиды, индуцирующие терминальную дифференцировку лейкозных клеточных линий тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.36, кандидат медицинских наук Суворов, Николай Иванович

• Суворов, Николай Иванович
• кандидат медицинских наук
• 2007

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Суворов, Николай Иванович

Список используемых сокращений.

ВВЕДЕНИЕ.

Актуальность проблемы.

Цели и задачи.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1. Миелопептиды - иммунорегуляторные пептиды костного мозга.

1.1. Структура и функции миелопептидов.

1.2. Прикладной аспект проблемы миелопептидов.

2. Лейкозы и их лечение.

2.1. Лейкозы - системные опухолевые заболевания кроветворной ткан.

2.2. Лечение лейкозов.

3. Молекулярные аспекты нарушения процессов пролиферации и дифференцировки.

3.1.Основные сигнальные пути в клетке.

3.2. Роль ионов Са в регуляции пролиферации и дифференциров

МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.

Пептиды.

Клеточные линии.

Цитофлуориметрический анализ.

Оценка пролиферативного ответа клеток линии HL-60 и К-562.

Морфологический анализ.

Определение количества синтезированного клетками гемоглобина (бензидиновый тест).

Оценка количества клеток линии HL-60, находящихся в апоптозе под действием МП-4.

Определение внутриклеточной концентрации ионов Са2+ [Ca2+]j.

Определение активности МАР-киназ в клетках линии HL-60.

Определение параметров связывания МП-4 с клетками HL-60, проникновение МП-4 в клетку.

1. Цитофлуориметрический анализ.

2. Конфокальная микроскопия.

Статистическая обработка данных.

РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ.

1. Влияние МП-4 и МП -6 на дифференцировку клеток линии HL-60.

1.1. Влияние МП-4 и МП-6 на синтез ДНК в клеточной линии HL-60.

1.2. Изменение морфологии клеток линии HL-60 при инкубации с МП-4 и МП-6.

1.3. Экспрессия дифференцировочных антигенов на поверхности клеток линии HL-60 под влиянием МП-4 и МП-6.

1.4. Влияние МП-4 на апоптоз клеток линии HL-60.

2. Влияние МП-4 и МП -6 на дифференцировку клеток линии К-562.

2.1. Влияние МП-4 и МП-6 на пролиферацию клеточной линии К-562.

2.2. Экспрессия дифференцировочных антигенов на поверхности клеток линии К-562 под влиянием МП-4 и МП-6.

2.3. Увеличение количества гемоглобина синтезированного клетками К-562 под влиянием МП-4 и МП-6 (бензидиновый тест).

3. Изучение некоторых механизмов дифференцировочного действия МП-4 на клетках линии HL-60.

3.1. Определение параметров связывания МП-4 с клетками HL-60.

3.2. Проникновения МП-4 внутрь клеток линии HL-60.

3.3. Исследование характера проникновения МП-4 внутрь клеток линии HL-60.

3.4. Участие ионов Са в реализации дифференцировочной активности МП-4.

3.4.1. Са2+ ответы в недифференцированных клетках HL-60.

3.4.2. Са ответы в клетках HL-60, инкубированных с МП-4.

3.4.3. Изменение базального уровня [Са ]i под влиянием МП-4.

3.5. Измерение активности компонентов системы МАР-киназ в клетках линии HL-60 под влиянием МП-4 и МП-6.

3.5.1. Изменение активности компонентов системы МАР-киназ под влиянием МП-4.

3.5.2. Изменение активности компонентов системы МАР-киназ под влиянием МП-6.

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Миелопептиды, индуцирующие терминальную дифференцировку лейкозных клеточных линий»

Актуальность проблемы

Известно, что нарушение процессов пролиферации и дифференциров-ки клеток в костном мозге приводит к развитию тяжелых, а часто и неизлечимых заболеваний. К таким заболеваниям относятся различные типы лейкозов, в частности острые нелимфобластные (OJT или OHJIJI) и хронические (XJI). Это объясняет важность проблемы поиска новых дифференцировоч-ных факторов, особенно эндогенной природы, которые могли бы быть использованы в комплексной противолейкозной терапии.

OJT встречаются в разных странах с частотой от 2 до 4 на 100 ООО населения в год. У детей лейкозы являются наиболее частым злокачественным новообразованием (38-40%), они обуславливают высокую летальность, уступая первое место среди причин смертности у детей старше 2 лет лишь травмам. Частота лейкозов у детей составляет 3.2-4.4 на 100 000. Чаще болеют дети в возрасте 2-5 лет. У взрослых на долю OHJIJI приходится 80% среди всех острых лейкозов. Заболеваемость OHJ1J1 увеличивается с возрастом, достигая частоты 10-15 на 100 000 в год в популяции старше 65 лет. OJIJI составляют лишь 20% среди всех острых лейкозов взрослых. Мужчины и женщины заболевают с равной частотой. [Liesner RJ, Goldstone АН., 1997, EsteyE, Dohner Н. 2006]

В настоящий момент основой терапии всех OHJIJI, кроме варианта МЗ (острый промиелоцитарный лейкоз), является сочетание различных методов химиотерапии.

Наряду с химиотерапией, приводящей к гибели опухолевых бластов, получает развитие терапия, вызывающая дифференцировку незрелых опухолевых клеток. Однако следует отметить, что таких препаратов в настоящее время сравнительно мало. Так, терапия острого промиелоцитарного лейкоза основана на применении производных витамина A (ATRA) и AS2O3, вызывающих созревание лейкозных клеток. Ведутся активные исследования других соединений, потенциально способных к их использованию в клинике -это производные витамина D, Е, сАМР, препараты на основе цитокинов и др. Однако, применение дифференцировочной терапии и противоопухолевых препаратов часто сопровождается развитием побочных реакций. В связи с этим возрастает потребность в препаратах, применение которых в комплексной терапии лейкозов останавливая рост .опухолевых клеток и вызывая их дифференцировку, в тоже время оказывало бы минимальный побочный эффект.

В начале 1970-х годов группой российских иммунологов под руководством Р.В. Петрова впервые были обнаружены иммунорегуляторные пептиды костного мозга - миелопептиды (МП) (Petrov R.V., Mikhailova А.А., 1972). МП синтезируются клетками костного мозга человека и млекопитающих без какой-либо стимуляции антигенами или митогенами. Они лишены видовой специфичности и, таким образом, могут быть использованы для иммунокоррекции при различных заболеваниях человека. В настоящее время структурно охарактеризованы и синтезированы шесть МП, каждый из которых обладает собственной иммунокорригирующей активностью. Многочисленные экспериментальные данные по биологическим свойствам МП показывают, что функциональная активность этого класса эндогенных регуляторов направлена на поддержание иммунного гомеостаза организма. При возникновении сдвигов в иммунной системе определенный МП взаимодействует с соответствующей клеткой-мишенью и индуцирует цепь реакций, приводящих к исправлению возникших нарушений.

Показано, что МП-4 и МП-6 обладают дифференцировочной активностью в отношении клеток линий миелобластного и эритробластного лейкозов HL-60 и К-562. МП-4 и МП-6 увеличивают уровень экспрессии диффе-ренцировочных антигенов CD 14, CD38 и CD44, снижают уровень пролиферации властных клеток, вызывают характерные морфологические изменения. В связи с этим представляется возможным использование МГТ-4 и МП-6 в комплексной терапии острых лейкозов.

2. Цели и задачи

Целью данной работы является изучение дифференцировочных свойств и анализ возможных механизмов действия миелопептидов МП-4 и МП-6 на лейкозных клеточных линиях HL-60 и К-562.

В рамках данной работы решались следующие задачи

1. Изучить дифференцировочные свойства миелопептидов МП-4 и МП-6 на модели лейкозных клеточных линий HL-60 и К-562 по различным показателям дифференцировочного процесса;

2. Исследовать характер связывания МП-4 с клетками линии HL-60 и оценить возможность его проникновения внутрь клетки;

3. Определить влияние МП-4 на активацию/ингибирование компонентов системы MAP - киназ в клетках линии HL-60;

4. Изучить роль ионов Са2+ в индукции дифференцировки клеток HL-60 под влиянием МП-4.

Обзор Литературы

Заключение диссертации по теме «Аллергология и иммулология», Суворов, Николай Иванович

выводы

1. МП-4 и МП-6 являются факторами клеточной дифференцировки. Они индуцируют терминальную дифференцировку лейкозных клеточных линий HL-60 и К-562, что показано по различным показателям: снижению пролиферации, появлению морфологически зрелых клеток, экспрессии дифференцировочных антигенов на клеточной поверхности, проявлению функциональной активности клеток.

2. МП-4 специфически связывается с клетками линии HL-60 (Kd = 1,3 нМ). Затем пептид проникает внутрь клетки и локализуется вокруг клеточного ядра.

3. Проникновение пептида внутрь клетки является энергонезависимым процессом, который зависит от температуры, и, по-видимому, не связан с эндоцитозом.

4. Дифференцировка клеток линии HL-60 под влиянием МП-4 сопровождается увеличением амплитуды Са ответов, при этом МП-4 практически не влияет на базальный уровень свободных ионов Са в клетке, что выгодно отличает его от ряда других дифференцировочных агентов и указывает на перспективность его применения в клинике.

5. МП-4 вызывает ингибирование компонентов системы МАР-киназ JNK и ERK, а также подавляет активность общей формы белка р38, что свидетельствует о влиянии пептида на данные внутриклеточные пути.

6. МП-6 не вытесняет ФИТЦ-МП-4 из мест специфического связывания на поверхности клеток HL-60. В отличие от МП-4, МП-6 вызывает активацию как ERK, так и JNK-киназы, что указывает на различие в механизмах дифференцировочного действия МП-4 и МП-6.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Суворов, Николай Иванович, 2007 год

1. Априкян B.C., Петров Р.В. Способность биогенных иммуномодуля-торов изменять выработку соматотропина человека in vitro, 1998, Иммунология, 4, с. 24-26,

2. Баранова О.Ю., Волкова М.А., Возможности современной терапии острых нелимфобластных лейкозов взрослых, Русский медицинский журнал, т.9, № 22, 2001,

3. Белевская Р.Г., Калюжная М.В., Ляшенко В.А., и др., Аллергология, астма и клин. Иммунология, 2003, т.9, с 63-67,

4. Белевская Р.Г., Михайлова А.А., Фонина Л.А., Ефремов М.А., Петров Р.В. Миелопептид-3 костномозговой медиатор, стимулирующий фагоцитарную активность макрофагов, 1998, Доклады Академии Наук, 358, № 6, с. 847-849,

5. Белевская Р.Г., Елкина С.И., Калина Н.Г., Михайлова А.А. Миелопептид-3 эндогенный иммунорегулятор, обладающий противобак-териальной активностью, 2003, №6, с.324-327,

6. Владимирская Е.Б., Биологические основы точечной терапии при он-когематологических заболеваниях, Вопросы гематологии/онкологии и иммунопатологии в педиатрии, 2004, т.З, №4, с 5-13,

7. Дамбаева С.В., Мазуров Д.В., Климова С.В., Бахус Г.О., Ярилин А.А., Пинегин Б.В. //Оценка основных параметров иммунной системы с помощью проточной лазерной цитометрии// Аллергология и иммунология, 2002, № 3, с. 371-379,

8. Добреньков К.В., Тимаков A.M., Варфоломеева СР., Урмаева М.М., Ерина Т.А., Проблемы лечения лейкозов у детей, Русский медицинский журнал, 1998, 6, №23,

9. Есипова JI.B., Кирилина Е.А., Михайлова А.А. (1996) Иммунорегуля-торный гексапептид миелопептид-1 и его возможный предшественник, Иммунология, 3, с. 37-40,82

10. Ю.Кирилина Е.А., Михайлова А.А., Малахов А.А., Гурьянов С.А., Ефремов М.А., Механизм иммунокорригирующего действия миелопеп-тида-1, 1998, Иммунология, 4, с. 26-29,

11. Козлов В.К. и др. Сб. "Успехи клинической иммунологии и аллергологии", том III., Под ред. А.В. Караулова. М: изд. Регионального отделения РА-ЕН,2002, с.263-279.

12. Копнин Б.П., Неопластическая клетка: основные свойства и механизмы их возникновения, Практическая онкология, т.З, №4. 2002, с.229-235,

13. Молотковская И.М., Зеленова Н.А., Михайлова А.А,. Роль кальциевого транспорта в механизме иммунорегуляторного эффекта миело-пептида-1, 1998, Иммунология, 1, с. 30-33,

14. Михайлова А.А., 4-ый конгресс РААКИ "Современные проблемы аллергологии, иммунологии и иммунофармакологии", т.1, с. 375-383, 2001.

15. Михайлова А.А., Регуляторные пептиды костного мозга иммуно-модуляторы нового поколения, Аллергология и иммунология, 2001, т.2, № 1, с. 46-52.

16. П.Михайлова А.А., Петров Р.В., Захарова Л.А., Докл. АН, 1971, т. 197, с. 209-211.

17. Михайлова А.А., Степаненко Р.Н. (1998) Миелопептиды и их клиническое применение, 2-ой конгресс РААКИ "Современные проблемы аллергологии, иммунологии и иммунофармакологии", 2, с. 34-39.

18. Петров Р.В. и др., Миелопептиды, М:, Наука, 2000, 181 е.,

19. Петров Р.В., Михайлова А.А., Фонина JI.A., Костномозговые имму-норегуляторы миелопептиды, Рос. Хим. Ж. (Ж. Рос. хим. об-ва им. Д.И. Менделеева), 2005, t.XLIX, №1.

20. Райе Р.Х, Гуляева Л.Ф., Биологические эффекты токсических соединений: курс лекций / Новосиб. гос. ун-т. Новосибирск, 2003, 208с.

21. Ромейс Б. Микроскопическая техника: Пер. с англ. М.: Иностр.лит., 1954

22. Стрелков JI.A., Михайлова А.А., Фонина JI.A., Гурьянов С.А., Петров Р.В. Миелопид (Бивалфор), обладающий противоопухолевой активностью, Онкология, 1995, 5, с. 530-532.

23. Степаненко Р.Н. Иммуностимулирующий лекарственный препарат миелопид как средство форсификации вакцинных препаратов, Аллергия, астма и клиническая иммунология, 2001, 1, с. 66-69.

24. Фонина Л.А., Гурьянов С.А., Ефремов М.А., Смирнова О.В., 1998, Миелопептиды: выделение и структура, Биоорганическая химия, 24, № 6, с. 403-407.

25. Хаитов P.M., Пинегин Б.В., Современные иммуномодуляторы: основные принципы их применения, Иммунология, 2000, 5, с. 4-7.

26. Швыдченко И.Н., Стресс-индуцированные дисфункции в системе84нейтрофильных гранулоцитов и их коррекция миелопептидами. Дисс. канд. биол. наук, 2000, Кубанская Государственная Медицинская Академия.

27. Alessi DR, Cuenda A, Cohen Р, Dudley DT, Saltiel AR., PD 098059 is a specific inhibitor of the activation of mitogen-activated protein kinase kinase in vitro and in vivo. J Biol Chem. 1995 Nov 17; 270(46):27489-94.

28. Arias-Montano J.A., Gibson W.J., Young J.M. // Biochem Pharmacol., 1998, vol.56, pp. 1023-1027.

29. Bast Robert C, Kufe Donald W., Pollock Raphael E., Weichselbaum Ralph R., Holland James F. and Frei Emil, Cancer medicine 5th edition, an Official Publication of the American Cancer Society, 2000, 2900 pages.

30. Bayes M, Rabasseda X, Prous JR. Gateways to clinical trials. Methods Find Exp Clin Pharmacol. 2005 Dec;27(10):711-38.

31. Bonnet D., Normal and leukaemic stem cells. Br J Haematol. 2005 Aug; 130(4):469-79,

32. Bootman MD, Lipp P, Berridge MJ., The organisation and functions of local Ca(2+) signals. J Cell Sci. 2001 Jun;l 14(Pt 12):2213-22

33. Bowen DT., Etiology of acute myeloid leukemia in the elderly. Semin Hematol. 2006 Apr;43(2):82-8.

34. Brechard S, Brunello A, Bueb JL, Tschirhart EJ., Modulation by cADPr of Ca2+ mobilization and oxidative response in dimethylsulfoxide- or retinoic acid-differentiated HL-60 cells. Biochim Biophys Acta. 2006 Jan; 1763(1): 129-36.

35. Bruserud O, Gjertsen B.T., New strategies for the treatment of acute myelogenous leukemia: differentiation induction—present use and future possibilities. Stem Cells, 2000; 18(3): 157-65.

36. Bryan A. Ballif and John Blenis, Molecular Mechanisms Mediating Mammalian Mitogen-activated Protein Kinase (МАРК) Kinase (MEK)-MAPK Cell Survival Signals. Cell Growth & Differentiation, Vol. 12, August 2001, 397-408.

37. Bufler Philip, Stiegler Gabor, Schuchmann Marcus, Hess Sigrun, et al., Soluble lipopolysaccharide receptor (CD 14) is released via two different mechanisms from human monocytes and CD 14 transfectants, Eur. J. Immunol. ,1995, 25, pp. 604-610,

38. Cornelissen JJ, Lowenberg В., Role of allogeneic stem cell transplantation in current treatment of acute myeloid leukemia. Hematology Am Soc He-matol Educ Program. 2005;: 151 -5.

39. Chao NJ, Emerson SG, Weinberg KL, Stem cell transplantation (cord blood transplants). Hematology (Am Soc Hematol Educ Program). 2004;:354-71.

40. Cho YJ, Kim JY, Jeong SW, Lee SB, Kim ON., Cyclic AMP induces activation of extracellular signal-regulated kinases in HL-60 cells: role in cAMP-induced differentiation. Leuk Res. 2003 Jan; 27(1):51-6.

41. Chung-Ren Jan, Ching-Jiunn Tseng, Mechanisms underlying ketocona-zole-induced Ca(2+) mobilization in Madin-Darby canine kidney cells, Biochem Pharmacol, 2000, v.59(8), pp. 947-951.

42. Cullen PJ., Decoding complex Ca2+ signals through the modulation of Ras signaling. Curr Opin Cell Biol. 2006 Apr; 18(2): 157-61.

43. Das D, Pintucci G, Stern A. MAPK-dependent expression of p21 (WAF) and p27 (kipl) in PMA-induced differentiation of HL60 cells. FEBS Lett. 2000 Apr 21; 472(1 ):50-2.

44. Deaglio S, Mehta K, Malavasi F. Human CD38: a (r)evolutionary story of enzymes and receptors. Leuk Res. 2001 Jan;25(l): 1-12

45. Drin G, Cottin S, Blanc E, Rees AR, Temsamani J. Studies on the internalization mechanism of cationic cell-penetrating peptides. J Biol Chem. 2003 Aug 15;278(33):31192-201

46. Estey E, Dohner H. Acute myeloid leukaemia. Lancet. 2006 Nov 25;368(9550): 1894-907.

47. Edmunds JW, Mahadevan LC., MAP kinases as structural adaptors and enzymatic activators in transcription complexes. J Cell Sci. 2004 Aug 1; 117(Pt 17):3715-23.

48. El-Andaloussi S, Holm T, Langel U.Cell-penetrating peptides: mechanisms and applications. Curr Pharm Des. 2005;11(28):3597-611.

49. Fan YZ, Chang H, Yu Y, Liu J, Zhao L, Yang DJ, Wang R., Thymopentin (TP5), an immunomodulatory peptide, suppresses proliferation and induces differentiation in HL-60 cells. Biochim Biophys Acta. 2006 Oct; 1763(10): 105 9-66

50. Fan YZ, Chang H, Yu Y, Liu J, Wang R., Thymosin alpha 1 suppresses proliferation and induces apoptosis in human leukemia cell lines. Peptides. 2006 Sep;27(9):2165-73

51. Frankel SK, EardleyA, Lauwers G. et al. The "retinoic acid syndrome" in acute promyelocytic leukemia. Ann Intern Med 1992; 117:292-6,

52. Gibson RJ, Keefe DM. Cancer chemotherapy-induced diarrhoea and constipation: mechanisms of damage and prevention strategies. Support Care Cancer. 2006 Apr 8;

53. Gilliland DG, Jordan CT, Felix С A, The molecular basis of leukemia, Hematology (Am Soc Hematol Educ Program). 2004;:80-97.87

54. Grynkiewicz G., Poenie P., Tsien R.Y.// J.Biol.Chem., 1985, vol.5., pp.249-258,

55. Goswami A, Ranganathan P, Rangnekar VM. The phosphoinositide 3-kinase/Aktl/Par-4 axis: a cancer-selective therapeutic target. Cancer Res. 2006 Mar 15;66(6):2889-92

56. Hindley A, Kolch W., Extracellular signal regulated kinase (ERK)/mitogen activated protein kinase (MAPK)-independent functions of Raf kinases. J Cell Sci. 2002 Apr 15; 115(Pt 8): 1575-81.

57. Hommes D.W., Peppelenbosch M.P., S.J.H. van Deventer, Mitogen activated protein (MAP) kinase signal transduction pathways and novel antiinflammatory targets, Gut, 2003; 52:144-151,

58. Huang C, Jacobson K, Schaller MD., MAP kinases and cell migration. J Cell Sci. 2004 Sep 15; 117(Pt 20):4619-28.

59. Jason A. Lehman, Cassandra C. Paul, Michael A. Baumann and Julian Gomez-Cambronero MAP kinase upregulation after hematopoietic differentiation: role of chemotaxis, Am J Physiol Cell Physiol, 280:183-191, 2001

60. Jones KT., Mammalian egg activation: from Ca2+ spiking to cell cycle progression. Reproduction. 2005 Dec;130(6):813-23.

61. John Alison M., N. Shaun B. Thomas, Mufti Ghulam J., Padua Rose Ann, Targeted therapies in myeloid leukemia, Seminars in Cancer Biology 14, 2004, 41-62

62. Kantaijian HM, Cortes J., New strategies in chronic myeloid leukemia. Int J Hematol. 2006 May;83(4):289-93.

63. Kersey J.H. Fifty years of studies of the biology and therapy of childhood leukemia, Blood 1997; 90: 4243-51

64. Kharbanda S, Saleem A, Emoto Y, Stone R, Rapp U, Kufe D., Activation of Raf-1 and mitogen-activated protein kinases during monocytic differentiation of human myeloid leukemia cells. J Biol. Chem. 1994 Jan 14; 269(2):872-8.

65. Konoplev S, Bueso-Ramos CE. Advances in the pathologic diagnosis and biology of acute myeloid leukemia. Ann Diagn Pathol. 2006 Feb;10(l):39-65.

66. Kunzelmann К., Ion channels and cancer. J Membr Biol. 2005 Jun;205(3): 159-73

67. Launay S, Gianni M, Kovacs T, Bredoux R, Bruel A, Gelebart P, Zas-sadowski F, Chomienne C, Enouf J, Papp В., Lineage-specific modulation of calcium pump expression during myeloid differentiation. Blood. 1999 Jun 15;93(12):4395-405.

68. Lee JK, Jung JC, Chun JS, Kang SS, Bang OS., Expression of p21WAFl is dependent on the activation of ERK during vitamin E-succinate-induced monocytic differentiation. Mol Cells. 2002 Feb 28; 13(1): 125-9.

69. Lengfelder E, Saussele S, Weisser A, Buchner T, Hehlmann R., Treatment concepts of acute promyelocytic leukemia. Crit Rev Oncol Hematol. 2005 Nov;56(2):261-74

70. Leone G, Sica S, Voso MT, Rutella S, Pagano L., Treatment of acute leukaemias with monoclonal antibodies: current status and future prospects. Cardiovasc Hematol Agents Med Chem. 2006 Jan;4(l):33-52,

71. Liesner RJ, Goldstone AH. ABC of clinical haematology. The acute leukaemias. BMJ. 1997 Mar 8;314(7082):733-6,

72. Liu TX, Zhang JW, Tao J, et al. Gene expression networks underlying retinoic acid-induced differentiation of acute promyelocytic leukemia cells.

73. Blood. 2000 Aug 15;96(4): 1496-504.90

74. Lowenberg Bob, Downing James R. and Burnett Alan, Acute myeloid leukemia, The New England Journal of Medicine, 1999, 341, NO 14, pp. 1051-1062.

75. Luo LY, Huang J, Gou BD, Zhang TL, Wang K. Induction of human promyelocyte leukemia HL-60 cell differentiation into monocytes by arsenic sulphide: Involvement of serine/threonine protein phosphatases. Leuk Res. 2006 Nov;30(l l):1399-405.

76. Magzoub M, Graslund A. Cell-penetrating peptides: corrected. from inception to application. Q Rev Biophys. 2004 May;37(2): 147-95

77. Malavasi Fabio, Funaro Ada, Roggero Stefano, Horenstein Alberto, Calosso Liliana and Mehta Kapil, Human CD38: a glycoprotein in search of a function, Immunology today, 1994,15, № 3, pp. 95-97.

78. Marcinkowska E, Kutner A., Side-chain modified vitamin D analogs require activation of both PI 3-K and erkl,2 signal transduction pathways to induce differentiation of human promyelocytic leukemia cells. Acta Bio-chim Pol. 2002; 49(2):393-406.

79. Marshall CJ., Specificity of receptor tyrosine kinase signaling: transient versus sustained extracellular signal-regulated kinase activation. Cell. 1995 Jan 27; 80(2):179-85.

80. Martins C, Lacerda JF, Lourenco F, Carmo JA, Lacerda JM. Autologous stem cell transplantation in acute myeloid leukemia. Factors influencing outcome. A 13 year single institution experience. Acta Med Port. 2005 Sep-Oct;18(5):329-37.

81. Mazzella Femina M., Alvares Carmelita, Kowal-Vern Areta, Schumacher Harold R., The acute erythroleukemias, Clinics in laboratory medicine, 2000, 20, № 1, pp. 119-137.

82. Mehta K, Shahid U, Malavasi F., Human CD38, a cell-surface protein with multiple functions. FASEB J. 1996 Oct; 10(12): 1408-17

83. Michalak M, Robert Parker JM, Opas M., Ca2+ signaling and calcium binding chaperones of the endoplasmic reticulum. Cell Calcium. 2002 Nov-Dec;32(5-6):269-78

84. Michele Milella, Steven M. Kornblau, Zeev Estrov, Bing Z. Carter et al. Therapeutic targeting of the MEK/MAPK signal transduction module in acute myeloid leukemia, J Clin Invest. 2001 Sep; 108(6):851-9

85. Mikhailova A.A., Shanurin S.Yu. and Petrov R.V, Immu-noregulatory effects of two bone-marrow hexapeptides (myelopeptides) in experimental models of immunodeficiency, 1995, Immunology letters, 47, pp. 199-203.

86. Mikhailova A.A., Fonina L.A., Kirilina E.A., Shanurin S. Yu., Gur'yanov S.A., Malakhov A. et. al. Immunoregulatory properties of hexapeptide isolated from porcine bone marrow cell culture. Regul. Pept., 1994, N. 53, 203-209.

87. Neglia J.P., Meadows A.T., Robison L.L., et al. Second neoplasms after acute lymphoblastic leukemia in childhood. New Engl J Med 1991; 325: 1330-3.

88. Ozdemir E, Кос Y, Kansu E.Successful treatment of chronic myeloid leukemia with imatinib mesylate in a patient with chronic renal failure on hemodialysis. Am J Hematol. 2006 May 5;81(6):474,92

89. Papa S, Zazzeroni F, Pham CG, Bubici C, Franzoso G., Linking JNK signaling to NF-kappa B: a key to survival. J Cell Sci. 2004 Oct 15; 117(Pt 22):5197-208. Review.

90. Pare S., Picard F. and Dreyfus F. Erythroleukemia: a need for a new definition, Leukemia, 2002,16, pp. 1399-1401.

91. Parekh AB, Putney JW Jr., Store-operated calcium channels. Physiol Rev. 2005 Apr;85(2):757-810.

92. Pearson G., Robinson F., Gibson T.B, Bing- E Xu et al., Mitogen-Activated Protein (MAP) Kinase Pathways: Regulation and Physiological Functions, Endocrine Reviews, 2001, 22(2), 153-183.

93. Pereira FG, Metze K, Costa FP, Lima CS, Lorand-Metze I., Phenotypic quantitative features of patients with acute myeloid leukemia. Neoplasma. 2006;53(2): 155-60.

94. Petrov R., Myelopeptides: new immunoregulatory peptides. Allergy Proc. 1995 Jul-Aug; 16(4): 177-84.

95. Petrov R.V., Mikhailova A.A. Cell interactions in the immune response: collaboration at the level of mature antibody producers, Cell Immunol, 1972 Vol. 5. p. 393,

96. Petrov R.V., Mikhailova A.A. Gamma globulin synthesis in mixed cultures of allogeneic lymphoid cells., J. Immunol 1969, Vol. 103, p. 679-82,

97. Petrov R., Mikhailova A., Fonina L. Myelopeptides, Journal of Journals, 1,1997, pp. 53-57.

98. Platanias L.C., Map kinase signaling pathways and hematologic malignancies, Blood, 15 June 2003 Vol. 101 No 12,4667-4679.

99. Plosker GL, Keam SJ.Trastuzumab : A Review of its Use in the Management of HER2-Positive Metastatic and Early-Stage Breast Cancer. Drugs. 2006;66(4):449-75.

100. Quintas-Cardama A, Cortes J., Kinase inhibitors in chronic myelogenous leukemia. Clin Adv Hematol Oncol. 2006 May;4(5):365-74.93

101. Ravandi F, Talpaz M, Estrov Z., Modulation of cellular signaling pathways: prospects for targeted therapy in hematological malignancies. Clin Cancer Res. 2003 Feb; 9(2):535-50. Review.

102. Roovers K, Assoian RK., Integrating the MAP kinase signal into the G1 phase cell cycle machinery. Bioessays. 2000 Sep; 22(9): 818-26. Review.

103. Roux PP, Blenis J., ERK and p38 MAPK-activated protein kinases: a family of protein kinases with diverse biological functions, Microbiol Mol Biol Rev. 2004 Jun; 68(2):320-44. Review.

104. Reuter CW, Morgan MA, Bergmann L., Targeting the Ras signaling pathway: a rational, mechanism-based treatment for hematologic malignancies? Blood, 2000 Sep 1;96(5): 1655-69. Review.

105. Rezacova M, Vavrova J, Vokurkova D, Zaskodova D.Effect of valproic acid and antiapoptotic cytokines on differentiation and apoptosis induction of human leukemia cells. Gen Physiol Biophys. 2006 Mar;25(l):65-79.

106. Richard M.D. Pazdur et al, Cancer Management: A Multidisciplinary Approach; Medical, Surgical, & Radiation Oncology, F. A. Davis Company; 8th edition, 1050 p.,

107. Reichrath J., Will analogs of 1,25-dihydroxyvitamin D(3) (calcitriol) open a new era in cancer therapy?, Onkologie. 2001 Apr;24(2): 128-33.,

108. Santella L, Ercolano E, Nusco GA., The cell cycle: a new entry in the field of Ca2+ signaling. Cell Mol Life Sci. 2005 Nov; 62(21):2405-13.

109. Schaeffer HJ', Weber MJ, Mitogen-activated protein kinases: specific messages from ubiquitous messengers. Mol Cell Biol, 1999 Apr; 19(4):2435-44.

110. Schreiber R., Ca2+ signaling, intracellular pH and cell volume in cell proliferation. J Membr Biol. 2005 Jun;205(3): 129-37.

111. Schulz Wolfgang A., Molecular Biology of Human Cancers. An Ad94vanced Student's Textbook, Dordrecht, Springer Verlag, 2005, 508 с

112. Seger R, Krebs EG., The МАРК signaling cascade. FASEB J. 1995 Jun; 9(9):726-35. Review.

113. Sharma JS, Mohindroo S. FAB classification of leukemia: a cyto-chemical study. Indian J Pathol Microbiol. 2004 Jul; 47(3):336-9.

114. Sirulnik LA, Stone RM., Acute promyelocytic leukemia: current strategies for the treatment of newly diagnosed disease. Clin Adv Hematol Oncol. 2005 May;3(5):391-7,429

115. Stone RM, O'Donnell MR, Sekeres MA., Acute myeloid leukemia. Hematology (Am Soc Hematol Educ Program). 2004; 98-117. Review.

116. Strelkov L.A., Mikhailova A.A., Fonina L.A., Petrov R.V. A new endogenous differentiating factor (myelopeptide-4) for myeloid cells, 2000, FEBS Letters, 470, pp. 281-284,

117. Strelkov L.A., Mikhailova A.A., Sapozhnikov A.M., Fonina L.A., Petrov R.V., The bone marrow peptide (myelopeptide-2) abolishes induced by human leukemia HL-60 cell suppression of T lymphocytes, 1996, Immunology letters, 50, pp. 143-147

118. Takayama H, Kittaka A, Fujishima T, Suhara Y. Design, synthesis, and biological studies of the A-ring-modified 1,25-dihydroxyvitamin D3 analogs.

119. Recent Results Cancer Res. 2003;164:289-317.

120. Takeshima K, Chikushi A, Lee KK, Yonehara S, Matsuzaki K. Translocation of analogues of the antimicrobial peptides magainin and buforin across human cell membranes, J Biol Chem. 2003 Jan 10;278(2):1310-5

121. Telen MJ. Erythrocyte blood group antigens: not so simple after all. Blood. 1995 Jan 15;85(2):299-306

122. Telford W.G., King L.E., Fraker P.J., Rapid quantitation of apoptosis in pure and heterogenous cell populations using flow cytometry, J.Immun.Meth., 1994 V.172,pp. 1-16

123. Treigyte G, Navakauskiene R, Kulyte A, Gineitis A, Magnusson KE., Tyrosine phosphorylation of cytoplasmic proteins in proliferating, differentiating, apoptotic HL-60 cells and blood neutrophils. Cell Mol Life Sci. 2000 Dec; 57(13-14):1997-2008,

124. Wang ZY., Ham-Wasserman lecture: treatment of acute leukemia by inducing differentiation and apoptosis, Hematology (Am Soc Hematol Educ Program). 2003; 1-13,

125. Yalcintepe L, Albeniz I, Adin-Cinar S, Tiryaki D, Bermek E, Graeff RM, Lee HC., Nuclear CD38 in retinoic acid-induced HL-60 cells. Exp Cell Res. 2005 Feb 1;303(1): 14-21.

126. Zarubin T, Han J., Activation and signaling of the p38 MAP kinase pathway. Cell Res. 2005 Jan; 15(l):ll-8,1. Благодарности