Микрореологические характеристики эритроцитов в диагностике наследственных гемолитических анемий у детей и подростков тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.29, кандидат медицинских наук Румянцева, Юлия Васильевна

• Румянцева, Юлия Васильевна
• кандидат медицинских наук
• 2002

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Румянцева, Юлия Васильевна

ВВЕДЕНИЕ стр.

ГЛАВА 1. Обзор литературы

1.1 Реологические параметры крови стр.

1.2 Мембрана эритроцита и ее роль в регуляции микрореологических свойств клетки стр.

1.3 Исследования реологических свойств эритроцитов стр.

1.4 Изменения микрореологических параметров эритроцитов при различных патологических состояниях стр.

ГЛАВА 2 материалы и методы

2.1 Общая характеристика пациентов стр

2.2 Методы исследования

2.2.1 Общеклинические стр.

2.2.2 Микрореологические стр.

2.2.3 Статистические стр.

ГЛАВА з Клиническая характеристика

ГРУПП стр.

ГЛАВА 4 Результаты исследований стр.

ГЛАВА 5. Использование микрореологических характеристик эритроцитов в дифференциальной диагностике наследственных гемолитических анемий стр.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Микрореологические характеристики эритроцитов в диагностике наследственных гемолитических анемий у детей и подростков»

Гемолитические анемии представляют собой группу заболеваний, при которых происходит повышенное разрушение эритроцитов, обусловленное сокращением продолжительности их жизни. При наследственных гемолитических анемиях сокращение продолжительности жизни эритроцитов генетически детерминировано. Наследственные гемолитические анемии могут быть обусловлены поражением мембраны эритроцита, нарушением синтеза гемоглобина или дефицитом эритроцитарных ферментов, что также приводит к повреждению мембраны клетки [13,14,37,73].

В последнее время достигнут значительный прогресс в изучении мембраны эритроцитов в норме и при различных патологических состояниях. Активное развитие биореологии привело к детальному изучению биофизических параметров эритроцитов, возможностей их измерения и применения полученных данных в клинической практике [3,6,30].

Микрореологические характеристики эритроцитов представляют собой способность клеток к агрегации, дезагрегации и деформации и зависят от электрокинетических зарядов, формы и размера клеток, состояния и химического состава мембраны эритроцита. Деформируемость эритроцитов в значительной степени зависит от внутренней вязкости, определяемой состоянием гемоглобина, его концентрацией, а также соотношением площади поверхности и объема эритроцита [5,6,37,48,98,143,157].

В связи с наличием того или иного генетически обусловленного дефекта, при наследственных анемиях меняется и способность эритроцитов к агрегации и деформации. В настоящий момент в литературе имеется большое количество данных об изменении реологических свойств крови при различных патологических состояниях, в том числе и при некоторых наследственных анемиях. Однако, эти данные большей частью разрозненны, а иногда даже противоречивы. Более того, отсутствуют сообщения об одномоментных исследованиях нескольких микрореологических параметров у больных с различными наследственными анемиями.

Данная работа направлена на изучение различий в микрореологических характеристиках эритроцитов при различных формах наследственных гемолитических анемий у детей для использования их в качестве дополнительного дифференциально-диагностического критерия.

ЦеЛЬ исследования: оценить возможность использования микрореологических характеристик эритроцитов в дифференциальной диагностике наследственных гемолитических анемий у детей и подростков.

Задачи исследования:

1. Провести анализ микрореологических характеристик эритроцитов у здоровых детей и подростков;

2. Исследовать микрореологические характеристики эритроцитов у детей и подростков с различными формами наследственных гемолитических анемий;

3. Провести анализ зависимостей между микрореологическими характеристиками и клиническими проявлениями наследственных гемолитических анемий.

4. Сравнить микрореологические характеристики эритроцитов при различных формах наследственных гемолитических анемий.

Научная новизна

Впервые при помощи стандартной методики исследован полный комплекс микрореологических характеристик эритроцитов у здоровых детей и подростков.

У здоровых детей выявлена взаимосвязь мевду микрореологическими параметрами и составом клеточной популяции (количество ретикулоцитов, количество лейкоцитов), а также характеристиками эритроцитов (форма, размер, количественный и качественный состав гемоглобина).

Выявлено увеличение амплитуды агрегации эритроцитов и прочности образующихся эритроцитарных агрегатов у здоровых детей с возрастом.

Установлено отсутствие различий в микрореологических параметрах эритроцитов в зависимости от пола.

Впервые при помощи стандартной методики исследован полный комплекс микрореологических характеристик эритроцитов у детей и подростков с различными наследственными гемолитическими анемиями.

Установлены микрореологические особенности характерные для каждого типа наследственных гемолитических анемий.

Научно-практическая значимость

Получены референтные значения для оценки микрореологических параметров эритроцитов у детей.

Наследственные гемолитические анемии имеют специфические микрореологические характеристики эритроцитов, проявляющиеся независимо от пола и возраста пациентов, что может служить дополнительным дифференциально диагностическим критерием.

Степень проявления специфических изменений микрореологических характеристик при наследственных гемолитических анемиях зависит от выраженности клинико-лабораторных признаков заболевания.

Работа выполнена на базе Научно-исследовательского института Детской гематологии МЗ РФ (директор - академик РАЕН, доктор медицински наук, профессор А.Г.Румянцев), Российской Детской Клинической больницы (главный врач - профессор Н.Н.Ваганов), Морозовской Детской Клинической больницы г.Москвы (главный врач - заслуженный врач России, профессор М.А.Корнюшин), кафедры физики медико-биологического факультета Российского Государственного Медицинского Университета (ректор - академик РАМН, профессор В.Н.Ярыгин).

Заключение диссертации по теме «Гематология и переливание крови», Румянцева, Юлия Васильевна

выводы

1. У здоровых детей выявлены возрастные различия микрореологических характеристик: амплитуда агрегации, время образования двумерных агрегатов, а также прочность агрегатов увеличиваются с возрастом и не зависят от пола.

2. При отсутствии генетически обусловленного дефекта эритроцитов имеется положительная корреляционная зависимость между параметрами агрегации эритроцитов (амплитуда и время агрегации, прочность агрегатов) и показателями МСУ, МСН, МСНС. Прочность эритроцитарных агрегатов также обратно пропорциональна количеству лейкоцитов и ретикулоцитов и прямо пропорциональна содержанию в крови холестерина. Деформируемость эритроцитов является стабильным показателем и изменяется только при наличии генетического дефекта.

3. Основными микрореологическими характеристиками наследственной сфероцитарной гемолитической анемии являются сниженная деформируемость клеток, удлинение времени спонтанной агрегации и низкая прочность образующихся агрегатов. Удаление селезенки приводит к улучшению, как клинических проявлений, так и основных микрореологических показателей.

4. Эритроциты при Р-талассемии обладают повышенной склонностью к агрегации и повышенной деформируемостью, что наиболее выражено при большой форме заболевания.

5. Уменьшение времени образования трехмерных агрегатов характерно дня наследственной несфероцитарной гемолитической анемии I типа

6. Специфические микрореологические особенности эритроцитов проявляются при наследственных гемолитических анемиях независимо от пола и возраста пациентов и могут использоваться для дифференциальной диагностики заболеваний.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

1. Алгоритм, основанный на измерении и сравнении микрореологических характеристик эритроцитов в норме и при патологии, рекомендуется в качестве • дополнительного критерия в дифференциальной диагностике наследственных анемий.

2. Данные, полученные при оценке комплекса микрореологических характеристик эритроцитов у здоровых детей различных возрастных групп, рекомендуется использовать в качестве референтных величин при проведении исследований.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Румянцева, Юлия Васильевна, 2002 год

1. Бычков С.М., Кузьмина С.А. Агрегация эритроцитов в крови при различных состояниях организма животного. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 1993, №6, стр. 604-607.

2. Вельтшцев Ю.Е. Проблемы патологии детского возраста в аспекте нарушения структуры и функции биологических мембран. М, 1982 г.

3. Ершова Л.И., Лиховецкая З.М., Горбунова H.A. Корреляция гемореологических показателей с параметрами гемолиза эритроцитов в гематологической практике. Реологические исследования в медицине, сб. ст., вып. 1, под ред. Дементьевой М.Г., М, 1997.

4. Захарова Н.Б. Целик Н.И., Клячкин М.Л. Методы изучения деформируемости эритроцитов. Лабораторное дело. 1983. №9 3-6

5. Захарченко В.Н. Возможности и проблемы вискозиметрии крови. Реологические исследования в медицине, сб. ст., вып.1, под ред. Дементьевой М.Г., М, 1997.

6. Карабанов Г.Н. Деформируемость эритроцитов в клиническом аспекте. Вестник хирургии им. Грекова, 1986, т. 137, №12,99-103

7. Катюхин Л.Н. Реологические свойства эритроцитов. Современные методы исследования. Физиологический журнал им. И.М.Сеченова, 1995, 81, №6, стр. 122-128

8. Левин Г.Я. Метод определения деформируемости эритроцитов в искусственном сдвиговом потоке. Лабораторное дело, 1988, Т5, стр.22-24

9. Левин Г.Я., Шереметьев Ю.А., Яхно В.Г. Новый подход к изучению агрегации эритроцитов. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 1982, №3, стр. 94-97.

10. Левтов В.А., Левкович Ю.Н. Об исследовании агрегационных свойств крови. Физиология человека, 1978, т4,№3, 504-513

11. Левтов В.А., Регирер С.А., Шадрина Н.Х. Реология крови. М, Медицина, 1982.

12. Лиховецкая З.М., Ершова Л.И., Курбанова Г.Н. Реологические свойства крови у больных гемофилией. Реологические исследования в медицине, сб. ст., вып. 1, под ред. Дементьевой М.Г., М, 1997.

13. Наследственные анемии и гемоглобинопатии. Под. Ред. Токарева Ю.Н., М, Медицина, 1983

14. Папаян A.B., Жукова Л.Ю. Анемии у детей. Санкт-Петребург, 2001

15. Ройтман Е.В. Биореология. Клиническая гемореология. Основные понятия, показатели, оборудование. Клиническая лабораторная диагностика, 2001, №5, 25-32

16. Ройтман Е.В., Фирсов H.H., Дементьева М.Г. Термины, понятия и подходы к исследованиям реологии крови в клинике. Тромбоз, гемостаз и реология, 2000, №3(3), стр.5-12

17. Сарычева Т.Г., Козинец Г.И. Морфофункциональная характеристика

18. Сигал B.JI. Фильтрационные методы определения деформационных (вязкоупругих) свойств мембран биологических клеток. Лабораторное дело, 1989, №5, стр.4-9

19. Сороколетов С.М., Проценко Е.А. Современные взгляды на гемореологию и определяющие ее факторы. Реологические исследования в медицине, сб. ст., вып.1, под ред. Дементьевой М.Г., М, 1997.

20. Степанова И.И., Лисовская И. Л., Еременко Л. Л. Исследование деформируемости эритроцитов при нефрогенной анемии у больных ХПН. Успехи теоретической и клинической медицины, 1997, №2, стр.67

21. Сторожок С.А., Соловьев C.B. Структурные и функциональные особенности цитоскелета мембраны эритроцита. Вопросы медицинской химии, 1992, т38, №2, стр. 14-17.

22. Тухватулин Р.Т. Фотометрическое исследование обратимой агрегации эритроцитов в микрообъемах крови. Автореферат диссертации КБН, 1987, Красноярск.

23. Тухватулин Р.Т., Левтов В.А., Шуваева В.Н. Агрегация эритроцитов в крови, помещенной в макро и микрокювете. Физиологический журнал СССР им. И.М.Сеченова, 1986, т LXXII, N6, cip. 775-785

24. Фирсов H.H. Агрегация и дезагрегация эритроцитов: исследование нефелометрическими методами. Современные проблемы биомеханики, вып.9, М, 1994, стр. 85-97

25. Фирсов H.H. Агрегация эритроцитов. 3 Всесоюзная конференция по проблемам биомеханики. 1983, Т. 1,262-264.

26. Фирсов Н.Н., Жвания Г.М. О механизмах регуляции макрореологических свойств 1фови. Физиологический журнал СССР им. И.М.Сеченова, 1985, т LXXI, N11, стр. 1362-1367.

27. Фирсов Н.Н., Сирко И.В., Приезжее А.В. Современные проблемы агрегометрии цельной крови. Тромбоз, гемостаз и реология, 2000, №2, 9-11

28. Черницкий Е.А., Воробей А.В. Структура и функции эритроцитарных мембран. Минск, Наука, 1981.

29. Шабанов В.А. Общие и клинические вопросы гемореологии. Н. Новгород, 1998 г.

30. Advani R, Sorenson S, Shinar E, Lande W, Rachmilewitz E, Schrier SL. Characterization and comparison of the red blood cell membrane damage in severe human alpha- and beta-thalassemia. Blood, 1992, 79(4), 1058-1063

31. Agre P, Orringer EP, Bennett V. Deficient red-cell spectrin in severe, recessively inherited spherocytosis. N Engl J Med 1982;306(19): 1155-1161

32. Barshtein G, Wajnblum D, Yedgar S. Kinetics of linear rouleaux formation studied by visual monitoring of red cell dynamic organisation. Biophisical J, 2000, 78, 2470-2474

33. Baskurt OK, Meiselman HJ, Kayar E. Measurement of red blood cell aggregation in a "plate-plate" shearing system by analysis of light transmission. Clin Hemorheol Microcirc 1998;19(4):307-14

34. Baskurt OK, Meiselman HJ. Determination of red blood cell shape recovery time constant in a Couette system by the analysis of light reflectance and ektacytometry. Biorheology, 1996,33(6), 489-503

35. Ben Ami R, Barshtein G, Zeltser D, Goldberg Y, Yedgar S. Parameters of red

36. Benz EJ. The eruthrocyte membrane and cytoskeleton: structure, function and disorders. In: The molecular basis of blood diseases. 2nd edition. W.B.Saunders Company, 1994, Philadelphia, 257-292

37. Berthold F, Engel R, Lohmann W, Seiffge D, Unsicker K, Lampert F. Red cell membrane abnormalities in two cases with a special type of a hereditary megaloblastoid hemolytic anemia. Blut, 1983;46(l):23-37

38. Bertoluzzo SM, Bollini A, Rasia M, Raynal A. Kinetic model for erythrocyte aggregation. Blood Cells Mol Dis, 1999 ;25(5-6):339-349

39. Bor-Kucukatay M, Yalcin O, Meiselman HJ, Baskurt OK. Erythropoietin-induced rheological changes of rat erythrocytes. Br J Haematol, 2000, 110: 82-88

40. Bossi D, Russo M. Hemolytic anemias due to disorders of red cell membrane skeleton. Mol Aspects Med 1996; 17(2): 171-88

41. Bruce LJ, Tanner MJ. Erythroid band 3 variants and disease. Baillieres Best Pract Res Clin Haematol 1999;12(4):637-54

42. Bull BS, Brailsford JD. A new method of measuring the deformability of the red cell membrane. Blood 1975;45(4):581-586

43. Bull BS, Brailsford JD. The biconcavity of the red cell: an analysis of several hypotheses. Blood 1973;41(6):833-844

44. Chasis JA, Agre P, Mohandas N. Decreased membrane mechanical stability and in vivo loss of surface area reflect spectrin deficiencies in hereditary spherocytosis. J Clin Invest 1988;82(2):617-623

45. Chasis JA, Mohandas N. Erythrocyte membrane deformability and stability: two

46. Chasis JA, Prenant M, Leung A, Mohandas N. Membrane assembly and remodeling during reticulocyte maturation. Blood 1989;74(3): 1112-1220

47. Chen S, Eldor A , Barshtein G. Enhanced aggregability of red blood cells of p-thalassemia major patients. Am J. Physiol, 1996,270 (6 Pt 2), H 1951-H1956.

48. Chien S, Jan K. Ultrastructural basis of the mechanism of rouleaux formation. MicrovascRes 1973;5(2): 155-166

49. Chien S, Sung LA, Kim S. Determination of aggregation force in rouleaux by fluid mechanical technique. MicrovascRes 1977;13(3):327-333

50. Chien S. Force balance at the surfaces of aggregating cells. Bibl Anat 1973; 11:303309

51. Chien S. Red cell deformability and its relevance to blood flow. Annu Rev Physiol 1987;49:177-192.

52. Chung TW, Ho CP Changes in viscosity of low shear rates and viscoelastic properties of oxidative erythrocyte suspensions. Clin Hemorheol Microcirc, 1999, 21(2): 99-103

53. Cicco G., Pirrelli A. Red blood cell deformability, RBC aggregability and tissue oxygenation in hypertension. Clin Hemorheol Microcirc 1999, 21: 169-177

54. Cicha I, Suzuki Y, Tateishi N, Maeda N. Enhancement of red blood cell aggregation by plasma triglycerides. Clin Hemorheol Microcirc 2001;24(4):247-255

55. Cooper RA. Lipids of human red cell membrane: normal composition and variability in disease. Semin Hematol 1970; 7(3):296-322

56. Corbett JD, Golan DE. Band 3 and glycophorin are progressively aggregated in density-fractionated sickle and normal red blood cells. Evidence from rotational and lateral mobility studies. J Clin Invest 1993;91(1):208-217

57. Dintenfass L, Jedrrejczyk H. Photographic, stereological and statistical methods in evaluation of aggregation of RBC in disease: Part I. Kinetics of aggregation. Biorheology, 1982, 19(4), 567-577.

58. Dintenfass L. Blood viscosity, internal fluidity of the red cell, dynamic coagulation and the critical capillary radius as factors in the physiology and pathology of circulation and microcirculation. Med J Aust 1968;l(16):688-696

59. Dintenfass L. Methods and instrumentation used in practice of clinical haemorheology. Biorheology 1984; Suppl 1:63-69

60. Dong C, Chadwick RS, Schechter AN. Influence of sickle hemoglobin polymerization and membrane properties on deformability of sickle erythrocytes in the microcirculation. Biophisical J, 1992, vol 63, 774-783

61. Donner M, Siadat M, Stoltz JF. Erythrocyte aggregation: approach by light scattering determination. Biorheology 1988;25(l-2):367-375

62. Evans E, Mohandas N. Developments in red cell rheology at the institut de Pathologie Cellulaire. Blood Cells, 1986, 12: 43-56

63. Evans EA, La Celle PL. Intrinsic material properties of the erythrocyte membrane indicated by mechanical analysis of deformation. Blood, 1975 ;45(l):29-43

64. Evans EA. Bending elastic modulus of red blood cell membrane derived from buckling instability in micropipet aspiration tests. Biophys J, 1983;43(l):27-30

65. Fabry T. Mechanism of erythrocytes aggregation and sedimentation. Blood, 1987, 70(5), 1572-1576.

66. Firsov NN, Bjelle A, Korotaeva TV, Priezzhev AV, Ryaboshapka OM. Clinical application of the measurement of spontaneous erythrocyte aggregation and disaggregation. A pilot study. Clin Hemorheol Microcirc ,1998, 18 (2-3): 87-97

67. Flieger R, Grebe R Cell-elastometry: a new method to measure erythrocyte membrane elasticity. Biorheology, 1997, 34(3): 223-234

68. Foresto P, D'Arrigo M, Carreras L, Cuezzo RE, Valverde J, Rasia R. Evaluation of red blood cell aggregation in diabetes by computerized image analysis. Medicina, 2000;60(5 Pt l):570-2

69. Fortier N, Snyder LM, Garver F. The relationship between in vivo generated hemoglobin skeletal protein complex and increased red cell membrane rigidity. Blood, 1988;71(5): 1427-1431

70. Gedde MM, Davis DK, Huestis WH. Cytoplasmic pH and human erythrocyte shape. Biophys J, 1997;72(3): 1234-1246

71. Gedde MM, Huestis WH. Membrane potential and human erythrocyte shape. Biophys J, 1997;72(3): 1220-1233

72. Gimsa J. A possible molecular mechanism governing human erythrocyte shape. Biophisical J, 1998, 75: 568-570

73. Goodman SR, Shiffer K. The spectrin membrane skeleton of normal and abnormal human erythrocytes: a review. Am J Physiol, 1983 ;244(3):C 121-141

74. Goodman SR, Shiffer KA, Casoria LA, Eyster ME. Identification of the molecular defect in the erythrocyte membrane skeleton of some kindreds with hereditary spherocytosis. Blood, 1982;60(3):772-784

75. Greenquist AC, Shohet SB. Phosphorylation in erythrocyte membranes from abnormally shaped cells. Blood, 1976;48(6):877-86

76. Hansen J, Skalak R, Chien S, Hoger A. Spectrin properties and the elasticity of the red blood cell membrane skeleton. Biorheology, 1997, 34 (4-5): 327-348

77. Huisman THJ. The structure and function of normal and abnormal haemoglobins. In: The Haemoglobinopathies, edited by DJ Weatherall and DR Higgs, Bailliere's Clinical Haematology, London, 1993, Vol 6, pp 1-39

78. Hochmuth RM, Mohandas N, Blackshear PL Jr. Measurement of the elastic modulus for red cell membrane using a fluid mechanical technique. Biophys J, 1973;13(8):747-762

79. Hochmuth RM, Waugh RE. Erythrocyte membrane elasticity and viscosity. Annu Rev Physiol 1987;49:209-219

80. Hovav T, Goldfarb A, Artmann G, Yedgar S, Barshtein G. Enhanced adherence of beta-thalassemic erythrocytes to endothelial cells. Br J Haematol, 1999, 106: 178181

81. Huang Y, Liu D, Sun S. Mechanism of free radicals on the molecular fluidity and chemical structure of the red cell membrane damage. Clin Hemorheol Microcirc, 2000;23(2-4):287-90

82. Ibragimova L.A., Makeeva G.K., Makarova V.A., Nizamova E.I. Membrane index resistance of erythrocytes in patients having hémorragie fever with renal syndrom. International J on immunoreabilitatkn, 1997,4, 162

83. Izzo P, Spagnuolo A, Manicone A. Assessment of erythrocyte deformability with the laser-assisted optical rotational cell analyzer (LORCA). Boll Soc Ital Biol Sper, 1999, 75 (1-2): 9-15

84. Izzo P, Spagnuolo A, Manicone A, Nazzaro P, Lauta VM Reduced deforaiability of erythrocytes as feature of congenital dyserythropoietic anaemia type II (HEMPAS).Clin Hemorheol Microcirc, 1999, 21(3-4): 425-430

85. Janzen J, Elliott TG, Carter CJ, Brooks DE. Detection of red cell aggregation by low shear rate viscometry in whole blood with elevated plasma viscosity. Biorheology 2000;37(3):225-37

86. Jarolim P, Palek J, Amato D, Hassan K, Sapak P, Nurse GT, Rubin HL, Zhai S, Sahr KF, Liu S-C. Deletion in erythrocyte band 3 gene in malaria-resistant Southeast Asian ovalocytosis. Proc Natl Acad Sci USA, 1991,88: 11022-11026

87. Johnson RM. Ektacytometry of red blood cells. Methods Enzymol, 1989;173:35-54

88. Jones JG, Adams RA, Cook AM, Evans SA Examination of a rheological profile for blood using micropore filters. Br J Haematol, 1999,104(1): 100-107

89. Kahane I, Ben-Chetrit E, Shifter A, Rachmilewitz EA. The erythrocyte membranes in p-thalassemia. Lower sialic acid levels in glycophorin. Bioch Bioph Acta, 1980, 596: 10-17

90. Kalofoutis A, Stratakis N, Diskakis E, Koutselinis A. Erythrocyte phospholipid fatty acid fluctuations in patients with beta-thalassemia minor. Clin Biochem, 1980, 13(6): 273-276

91. Khaled S, Bran JF, Wagner A, Mercier J, Bringer J, Prefaut C. Increased blood viscosity in iron-depleted elite athletes. Clin Hemorheol Microcirc, 1998;18(4):309-318

92. Kuzman D, Znidarcic T, Gros M, Vrhovec S, Svetina S, Zeks B. Effect of pH on red blood cell deformability. Pflugers Arch, 2000, 440 (suppl 5): R193-R194

93. Linderkamp O, Meiselman HJ. Geometric, osmotic, and membrane mechanical

94. Linderkamp O. Blood rheology in the newborn infant. Baillieres Clin Haematol, 1987;1(3):801-825

95. Lisovskaya IL, Shurkhina ES, Nesterenko VN, Rosenberg JM, Ataullakhanov FI. Determination of the content of nonfilterable cells in erythrocyte suspensions as a function of the medium osmolality. Biorheology, 1998, 35(2): 141-153

96. Liu SC, Derick LH, Agre P, Palek J. Alteration of the erythrocyte membrane skeletal ultrastructure in hereditary spherocytosis, hereditary elliptocytosis, and pyropoikilocytosis. Blood, 1990;76(1): 198-205

97. Liu SC, Derick LH, Palek J. Visualization of the hexagonal lattice in the erythrocyte membrane skeleton. J Cell Biol, 1987;104(3):527-536

98. Liu SC, Derick LH. Molecular anatomy of the red cell membrane skeleton: structure-function relationships. Semin Hematol, 1992, 29(4):231-243

99. Lowe GD. Blood rheology in vitro and in vivo. Baillieres Clin Haematol, 1987;l(3):597-636

100. Maeda N, Nakajima T, Izumida Y, Suzuki Y, Tateishi N, Seiyama A . Decreased deformability of red cells in refractory anemia and the abnormality of the membrane skeleton. Biorheology, 1994, 31(4): 395-405

101. Maeda N, Seike M, Kon K, Shiga T. Erythrocyte aggregation as a determinant of blood flow: effect of pH, temperature and osmotic pressure. Adv Exp Med Biol 1988;222:563-70

102. Maeda N, Seike M, Nakajima T, Izumida Y, Sekiya M, Shiga T. Contribution of glycoproteins to fibrinogen-induced aggregation of erythrocytes. Biochim BiophysActa, 1990;1022(l):72-8

103. Martinez M, Vaya A Server R, Gilsanz A, Aznar J. Alterations in erytrocyte aggregability in diabetics: the influence of plasmatic fibrinogen and phospholipids of the red blood cell membrane. Clin Hemorheol Microcirc, 1998, 18 (4):253-258

104. Mirossay L, Mojzis J, Jandosekova M, Lukacin S, Nicak A. Comparison of two methods in erythrocyte microrheology determination using glutaraldehyde-treated cells. Clin Hemorheol Microcirc, 1997, 17(3): 187-192

105. Mohandas N, Chasis JA, Shohet SB. The influence of membrane skeleton on red cell deformability, membrane material properties, and shape. Semin Hematol, 1983;20(3):225-42

106. Mohandas N, Phillips WM, Bessis M. Red blood cell deformability and hemolytic anemias. Semin Hematol, 1979; 16(2):95-114

107. Mohandas N, Winardi R, Knowles D, Leung A, Parra M, George E, Conboy J, Chasis J. Molecular basis for membrane rigidity of hereditary ovalocytosis. A novel mechanism involving the cytoplasmic domain of band 3. J Clin Invest, 1992;89(2):686-92

108. Mohandas N. Molecular basis for red cell membrane viscoelastic properties. Biochemical Society Transactions, 1992, 20: 776-781

109. Mohandas N., Clark MR, Shohet SB. Analysis of factors regulating erythrocyte

110. Mtiller GH. Effect of selective alteration of membranous or cytoplasmic properties on erythrocyte elongation in shear flow. Biorheology, 1997, 34(2): 8598

111. Nagaprasad V, Singh M. Sequential analysis of the influence of blood storage on aggregation, deformability and shape parameters of erythrocytes. Clin Hemorheol Microcirc, 1998, 18(4): 273-284

112. Nakashima K, Beutler E. Erythrocyte cellular and membrane deformability in hereditary spherocytosis. Blood, 1979;53(3):481-485

113. Nash GB, Johnson CS, Meiselman HJ. Mechanical properties of oxygenated red blood cells in sickle cell (HbSS) disease. Blood, 1984;63(l):73-82

114. Nash GB, Parmar J, Reid ME. Effects of deficiencies of glycophorins C and D on the physical properties of the red cell. Br J Haematol, 1990 ;76(2):282-287

115. Noji S, Taniguchi S, Kon H. Spin label study of erythrocyte deformability. Ca2+-induced loss of deformability and the effects of stomatocytogenic reagents on the deformability loss in human erythrocytes in shear flow. Biophisical J, 1987, 52: 221-227

116. Obiefuna PC. Rouleaux formation in sickle cell traits. J Trop Med Hyg, 1991;94(l):42-44

117. Palek J, Jarolim P. Clinical expression and laboratoiy detection of red blood cell membrane protein mutations. Semin Hematol, 1993, 30(4): 249-283

118. Palek J. Hereditary elliptocytosis, spherocytosis and related disorders: consequences of a deficiency or a mutation of membrane skeletal proteins. Blood Rev, 1987; 1(3): 147-68

119. Parker KH, Winlove CP. The deformation of spherical vesicles with permeable, constant-area membranes: application to the red blood cell. Biophysical J, 1999, :, 3096-3107

120. Perrotta S, del Giudice EM, Iolascon A, De Vivo M, Di Pinto D, Cutillo S, Nobili B Reversible erythrocyte skeleton destabilization is modulated by beta-spectrin phosphorylation in childhood leukemia. Leukemia, 2001, 15(3): 440-444

121. Persson SU, Wohlfart G, Larsson H, Gustafson A. Correlations between fatty acid composition of the erythrocyte membrane and blood rheology data. Scand J Clin Lab Invest, 1996, 56(2): 183-190

122. Pinder JC, Weeds AG, Gratzer WB. Study of actin filament ends in the human red cell membrane. J Mol Biol, 1986;191(3):461-468

123. Rachmilewitz EA, Shohet SB, Lubin BH. Lipid membrane peroxidation in beta-thalassemia major. Blood, 1976,47(3): 495-505

124. Rogers ME, Williams DT, Niththyananthan R, Rampling MW, Heslop KE, Johnston DG. Decrease in erythrocyte glycophorin sialic acid content is associated with increased erythrocyte aggregation in human diabetes. Clin Sci , 1992;82(3):309-313

125. Samsel RW , Perelson AS. Kinetics of rouleau formation. I. A mass action approach with geometric features. Biophisical J, 1982, 37: 493-514

126. Schmid-Schonbein H, Gallasch G, von Gosen J, Volger E, Klose HJ. Red cell aggregation in blood flow. I. New methods of quantification. Klin Wochenschr, 1976;54(4): 149-57

127. Schmid-Schonbein H, Heidtmann H. Nonspecific rheological abnormalities in sickle cell disease. Blood Cells, 1982;8(1):89-101

128. Schmid-Schonbein H.,Kline KA, Volger E. Microrheology and light transmission of blood. III. The velocity of red cell aggregate formation. Pflugers Arch, 1975, 354(4):299-317.

129. Schrier SL, Mohandas N. Globin-chain specificity of oxidation-induced changes in red blood cell membrane properties. Blood, 1992;79(6): 1586-92

130. Sheetz MP, Casaly J. 2,3-Diphosphoglycerate and ATP dissociate erythrocyte membrane skeletons. J Biol Chem, 1980;255(20):9955-9960

131. Sheetz MP, Painter RG, Singer SJ. Biological membranes as bilayer couples. III. Compensatory shape changes induced in membranes. J Cell Biol, 1976;70(1): 193-203

132. Sheetz MP. Membrane skeletal dynamics: role in modulation of red cell deformability, mobility of transmembrane proteins, and shape. Semin Hematol, 1983;20(3): 175-188

133. Shen BW, Josephs R, Steck TL. Ultrastructure of the intact skeleton of the human erythrocyte membrane. J Cell Biol, 1986; 102(3):997-1006

134. Shiga T, Imaizumi K. Kinetics of roleaux formation using TV image analyser. 1. Human erythrocytes. Am J of Physiology, 1983, 245(2): H252-H258.

135. Shiga T, Sekiya M, Maeda N. Cell age-dependent changes in deformability and calcium accumulation of human erythrocytes. Biochim Biophys Acta, 1985;814(2):289-299

136. Shinar E, Shalev O, Rachmilewitz EA, Schrier SL. Erythrocyte membrane skeleton abnormalities in severe beta-thalassemia. Blood, 1987, 70(1): 158-164

137. Stoltz JF, Donner M. Erythrocytes aggregation: Experimental approaches and clinical implication. Internat. Angiology, 1987, 6(2): 193-201.

138. Tong X, Caldwell KD. Separation and characterization of red blood cells with different membrane deformability using steric field-flow fractionation. J Chromatography B, 1995, 674: 39-47

139. Tsukada K, Sekizuka E, Oshio C, Minamitani H. Direct measurement of erythrocyte deformability in diabetes mellitus with a transparent microchannel capillary model and high-speed video camera system. Microvascular Res, 2001, 61:231-239

140. Turchetti V, Bellini MA, Guerrini M, Forconi S. Evaluation of hemorheological parameters and red cell morphology in hypertension. Clin Hemorheol Microcirc, 1999, 21(3-4): 285-289

141. Van Oss CJ, Absolom DR. Zeta potential Van der Waals forces and hemagglutination. Vox Sanguinis, 1983, 44(3): 183-190.

142. Volger E, Schmid-Schonbein H, Gosen Jv, Klose HJ, Kline KA. Microrheology and light transmission of blood. IV. The kinetics of artificial red cell aggregation induced by Dextran. Pflugers Arch, 1975;354(4):319-337

143. Wang X, Wu Z, Song G, Wang H, Long M, Cai S. Effects of oxidative damage of membrane protein thiol groups on erythrocyte membrane viscoelasticities. Clin Hemorheol Microcirc, 1999,21(2): 137-146

144. Watanabe H, Kobayashi A, Yamamoto T, Suzuki S, Hayashi H, Yamazaki N. Alterations of human erythrocyte membrane fluidity by oxygen-derived free radicals and calcium. Free Radic Biol Med, 1990;8(6):507-514

145. Waugh RE, Mantalaris A, Bauserman RG, Wu JHD. Membrane instability in

146. Waugh RE, Narla M, Jackson CW, Mueller TJ, Suzuki T, Dale GL. Rheologie properties of senescent erythrocytes: loss of surface area and volume with red blood cell age. Blood, 1992;79(5): 1351-8

147. Waugh RE. Effects of 2,3-diphosphoglycerate on the mechanical properties of erythrocyte membrane. Blood, 1986;68(1):231-238

148. Waugh RE. Effects of inherited membrane abnormalities on the viscoelastic properties of erythrocyte membrane. Biophys J, 1987;51(3):363-369

149. Waugh RE. Reticulocyte rigidity and passage through endothelial-like pores. Blood, 1991;78(ll):3037-3042

150. Weatherall DJ, Clegg JB, Higgs DR, Wood WG. The Hemoglobinopathies. In: The metabolic and molecular bases of inherited disease, 7th ed, 1995, pp 3417-3474

151. Weatherall DJ. The thalassemias. In: The molecular basis of blood diseases. 2nd edition. W.B.Saunders Company, 1994, Philadelphia ,pp 157-205

152. Weed RI. Membrane structure and its relation to haemolysis. Clin Haematol, 1975;4(l):3-28

153. Weinstein RS, Tazelaar HD, Loew JM. Red cell comets: infrastructure of axial elongation of the membrane skeleton. Blood cells, 1986, 11: 343-357

154. Yuan J, Kannan R, Shinar E, Rachmilewitz EA, Low PS. Isolation, characterisation, and immunoprecipitation studies of immune complexes from membranes ofbeta-thalassemic erythrocytes. Blood, 1992, 79(11): 3007-3013

155. Zavodnik IB, Zaborowski A, Niekurzak A, Bryszewska M. Effect of free fatty acids on erythrocyte morphology and membrane fluidity. Biochem Mol Biol Int, 1997, 42(1): 123-133