Молекулярно-генетическое исследование местного иммунитета при вагинитах тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.03.03, кандидат биологических наук Непша, Оксана Сергеевна

• Непша, Оксана Сергеевна
• кандидат биологических наук
• 2012

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Непша, Оксана Сергеевна

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ИНФЕКЦИОННО-ВОСПАЛИТЕЛЬНЫЕ ЗАБОЛЕВАНИЯ НИЖНЕГО ОТДЕЛА ЖЕНСКОЙ РЕПРОДУКТИВНОЙ СИСТЕМЫ, ПРИНЦИПЫ ДИАГНОСТИКИ. СОСТОЯНИЕ МИКРОБИОЦЕНОЗА ВЛАГАЛИЩА И ЛОКАЛЬНЫЙ ИММУНИТЕТ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ).

1.1 Воспалительные заболевания влагалища. Условно-патогенные микроорганизмы как одна из причин развития инфекционно-воспалительных заболеваний.

1.2 Современные представления о микробиоценозе влагалища женщин репродуктивного возраста и беременных женщин, а также факторы, влияющие на его состояние.

1.3 Дисбиотические состояния микробиоценоза влагалища.

1.4 Состояние локального иммунитета влагалища.

1.5 Лабораторная диагностика инфекционно-воспалительных процессов, протекающих на слизистой влагалища.

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1 Общеклинические методы исследования.

2.2 Специальные методы исследования.

2.3 Статистические методы исследования.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1 Исследование микрофлоры влагалища небеременных женщин методом ПЦР.

3.3 Состояние локального иммунитета влагалища небеременных женщин репродуктивного возраста и беременных женщин.

3.4 Состояние локального иммунитета влагалища небеременных женщин репродуктивного возраста.

3.5 Состояние локального иммунитета влагалища беременных женщин.

3.6 Осложнения родов и послеродового периода.

ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Молекулярно-генетическое исследование местного иммунитета при вагинитах»

Актуальность

Проблема инфекционно-воспалительных заболеваний женской репродуктивной системы продолжает оставаться одной из самых важных в акушерско-гинекологической практике. В настоящее время, наряду со снижением доли абсолютных патогенов в развитии инфекционно-воспалительных процессов все большее значение приобретают условно-патогенные микроорганизмы (УПМ) - бактерии, грибы, микоплазмы, являющиеся составной частью нормальной микрофлоры влагалища [30; 33; 73].

Нарушение подвижного равновесия микрофлоры, сущность которого определяется характером качественных и количественных изменений в видовом составе микробных ассоциаций называется дисбиозом [8]. Результатом нарушений состава микрофлоры влагалища очень часто является развитие локального инфекционно-воспалительного процесса, характеризующегося рядом различных клинических проявлений: от бессимптомно носительства (например, кандидоносительство, мико-, уреаплазменная инфекция) до развернутой картины воспаления. Практическая диагностика таких состояний влагалища вызывает значительные трудности.

С развитием молекулярно-генетических методов, в частности количественной полимеразной цепной реакции в реальном времени (ПЦР), задачи лабораторной диагностики дисбиотических состояний стали решаться более успешно [8; 11].

Вопрос определения степени реактивности и динамического изменения компонентов локального иммунитета при воспалительных состояниях, обусловленных, в том числе, и дисбиотическими нарушениями, остается нерешенным. Оценка локального иммунитета слизистой влагалища в рутинной практике в настоящее время осуществляется в большинстве случаев единственным способом - путем подсчета количества лейкоцитов в поле зрения микроскопа в нативном материале. Ввиду многообразия микроорганизмов и многогранности иммунного ответа, единичный показатель - количество клеток - не отражает в полной мере состояние мукозального иммунитета и является малоинформативным. Кроме того, результаты данного теста являются достаточно субъективными и во многом зависят от квалификации врача клинической лабораторной практики [14; 169]. В связи с этим поиск объективных маркеров, способных более полно отразить состояние локального иммунитета является крайне актуальным.

На сегодняшний день в научной литературе существует большое количество информации относительно диагностической и прогностической значимости иммунологических показателей в алгоритме диагностики воспалительных состояний влагалища [90; 122]. Однако данные научные наработки до сих пор не нашли широкого применения в практике врачей акушеров-гинекологов.

Учитывая преимущества метода ПЦР, а именно: его быстроту (в среднем для проведения анализа биологического материала методом ПЦР необходимо от 2-х до 4-х часов) и объективность, перспективным является изучение транскриптов генов иммунного ответа непосредственно в тканях, что позволит дать оценку динамическому состоянию организма, которое является результатом взаимодействия его генотипа, фенотипа и факторов внешней среды.

Результатом совместного использования современных молекулярно-генетических методов оценки экспрессии генов иммунного ответа и методов математической статистики, может явиться новый способ диагностики локального воспаления слизистой влагалища, который будет отражать состояние местного иммунитета.

Цель работы

Целью настоящего исследования явилось изучение молекулярно-генетических особенностей местного иммунитета при вагинитах у беременных и небеременных женщин и оценка возможности использования транскрипционного профиля генов иммунного ответа для совершенствования методов диагностики локального воспаления.

Задачи

1. На основании клинической картины у небеременных женщин репродуктивного возраста и беременных женщин перед родами и оценки состояния биоценоза влагалища методом количественной ПЦР сформировать исследуемые группы.

2. С помощью количественной ПЦР и метода обратной транскрипции (ОТ-ПЦР) охарактеризовать и сравнить профиль представленности транскриптов генов цитокинов (IL1B, IL6, IL8, ILIO, IL 12 A, IL 15, IL 18, IL23, TNF A, IFNG, TGFB1 и LIF), транскрипционных факторов (ТВХ21, GAT A3, FOXP3 и RORC), ТоН-подобных рецепторов (TLR2, TLR4, TLR9), поверхностных клеточных молекул (CD45, CD68, CD69, IL2RA) и гранулизина (GNLY) в клетках слизистой влагалища здоровых небеременных женщин и здоровых беременных женщин и соответствующих женщин с вагинитами.

3. Сравнить профиль экспрессии исследуемых генов иммунного ответа в клетках слизистой влагалища в группах здоровых беременных и здоровых небеременных женщин.

4. На основании количественной оценки транскриптов в клетках вагинальных соскобов отобрать наиболее информативные гены для оценки состояния слизистой влагалища.

5. Выявить роль изменений локального иммунитета влагалища в развитии осложнений родового акта и послеродового периода.

6. На основании экспериментальных данных и методов математической статистики предложить диагностическую модель оценки воспалительных состояний влагалища, основанную на определении количества мРНК генов иммунного ответа.

Научная новизна

Впервые получены данные об уровне экспрессии мРНК широкого спектра генов иммунного ответа (IL1B, IL6, IL8, ILIO, IL12A, IL15, IL18, IL23, IL2RA, GNLY, TNF A, TGFB1, LIF, IFNG, TLR2, TLR4, TLR9, ТВХ21, GATA3, RORC, FOXP3, CD45, CD68, CD69) в клетках слизистой влагалища здоровых небеременных женщин и здоровых беременных женщин и соответствующих женщин с вагинитами.

Выявлена ассоциация экспрессии 14 генов (IL1B, IL8, ILIO, CD45, CD69, TLR2, TLR4, TNF A, GATA3, CD68, IL12A, IL18, TGFB1, RORC) из 24 исследуемых с проявлением местного воспаления.

В результате количественной оценки транскриптов генов провоспалительных цитокинов IL12A и IL 18, а также общего макрофагального рецептора CD68 и основного транскрипционного фактора Th2-клеток GATA3 показано достоверное снижение экспрессии этих генов в клетках слизистой влагалища при наличии местного воспаления, что не согласуется с представлениями классической иммунологии.

Разработан метод диагностики локального воспалительного процесса, протекающего на слизистых влагалища, на основании определения количества транскриптов генов IL1B, IL 18, ILIO, TLR4, CD68 и GATA3 для беременных и небеременных женщин репродуктивного возраста.

Практическая значимость

Установлены маркеры воспалительного процесса. При вагинитах в клетках слизистой влагалища беременных и небеременных женщин повышается количество транскриптов генов IL1B, IL8, ILIO, TNF A, TLR2, 9

TLR4, CD45, CD69, а количество транскриптов генов GATA3, CD68, TGFB1, IL 12А, RORC, IL18 уменьшается.

Предложен новый метод диагностики локального воспаления с использованием значений количества мРНК генов IL1B, IL18, ILIO, CD68, TLR4 и GATA3 с чувствительностью и специфичностью в области порогового значения 96% и 95% соответственно как для беременных женщин, так и для небеременных женщин.

Создана основа для разработки диагностических тест-систем с использованием предложенной модели.

Показана возможность практического использования разработанного метода для диагностики локального воспалительного процесса во влагалище в практике акушеров-гинекологов.

Определены перспективы практического использования количественной ОТ-ПЦР для оценки состояния локального иммунитета путем измерения мРНК генов иммунного ответа: учитывая схожее строение слизистых оболочек организма, полученные результаты могут быть перенесены на другие участки слизистых, что позволит расширить границы применения полученных результатов.

Показано, что наличие местной воспалительной реакции, определяемое по профилю экспрессии генов иммунного ответа, является важным диагностическим критерием, позволяющим объективно разграничить бессимптомное носительство условно-патогенной микрофлоры от проявлений вагинита.

Внедрение в клиническую практику современных методов исследования локального иммунитета влагалища у беременных женщин перед родами позволит объективно оценить наличие или отсутствие воспалительной реакции, а также своевременно предпринять меры по профилактике послеродовых воспалительных осложнений.

По результатам диссертационной работы подана заявка на изобретение № 201147924 «Способ диагностики вагинитов у беременных ю женщин по уровню экспрессии мРНК генов интерлейкинов во влагалищных мазках».

Апробация работы

По теме диссертации опубликовано 7 научных работ, в том числе 5 работ в журналах, рекомендованных ВАК РФ для публикаций материалов докторских и кандидатских диссертаций. Материалы исследований были представлены на Всероссийском форуме «Мать и дитя» (Москва, 2011г.), VI Региональном научном форуме «Мать и дитя» (Ростов-на-Дону, 2012г.), V Российской конференции "Иммунология репродукции. Теоретические и клинические аспекты" (Иваново, 2012г.).

Диссертация частично выполнена в рамках работ по государственному контракту №16.522.12.2009 от 29 сентября 2011г.

Объём и структура диссертации

Работа изложена на 128 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов, описания результатов исследований, их обсуждения, выводов и списка литературы, включающего 74 русскоязычных источника и 123 источника на иностранном языке. Работа содержит 11 таблиц и 24 рисунка.

Заключение диссертации по теме «Иммунология», Непша, Оксана Сергеевна

выводы

1. Получены новые научные данные, конкретизирующие предетравления о молекулярно-генетических особенностях местного иммунитета и его роли в иммунологии реподукции.

2. Впервые проведено систематическое исследование профиля экспрессии широкого спектра генов иммунного ответа (24 гена) и выявлена ассоциация экспрессии 14 из них (IL1B, IL8, ILIO, CD45, CD69, TLR2, TLR4, TNF A, G AT A3, CD68, IL12A, IL18, TGFB1, RORC) с проявлением местного воспаления.

3. Воспалительные состояния влагалища беременных и небеременных женщин сопровождаются изменением уровня транскриптов генов иммунного ответа (экспрессия генов IL1B, IL8, ILIO, CD45, CD69, TLR2, TLR4, TNF А повышается, a GATA3, CD68, IL12A, IL18, TGFB1, RORC снижается), что позволяет использовать данные маркеры для оценки воспалительного процесса.

4. Установлено повышение экспрессии генов ILIO, IL 12A, TGFB1, CD68 и снижение - IL 18, TNF A, CD45 в клетках слизистой влагалища здоровых беременных женщин в сравнении со здоровыми небеременными женщинами.

5. На фоне локального изменения экспрессии генов IL1B, IL8, ILIO, CD45, CD69, TLR2, TLR4, TNF A, GATA3, CD68, IL12A, IL18, TGFB1, RORC в предродовом периоде установлено статистически значимое повышение частоты осложнения родов (преждевременное излитие околоплодных вод, разрыв мягких тканей родовых путей) и послеродового периода (раневая инфекция, послеродовой эндометрит) в группе беременных женщин с вагинитами.

6. Оценка количества мРНК генов IL1B, IL18, ILIO, CD68, TLR4 и GATA3 может служить основой для создания метода диагностики воспалительных состояний влагалища с чувствительностью и специфичностью в области порогового значения 96% и 95% соответственно как для беременных, так и для небеременных женщин.

107

Заключение

С развитием молекулярно-генетических методов, в частности количественной ОТ-ПЦР, появилась возможность оценки профиля активности различных генов в широком спектре биологического материала.

В результате проведенных исследований был предложен новый метод объективной оценки локального воспалительного процесса для беременных и небеременных женщин на основании определения количества транскриптов генов иммунного ответа, что может использоваться в качестве дополнительного диагностического критерия, позволяющего объективно различать бессимптомное носительство условно-патогенных микроорганизмов от проявлений вагинита.

Лабораторная оценка профиля экспрессии генов иммунного ответа во влагалище на базе стандартной ПЦР лаборатории позволяет существенно повысить объективность диагностики инфекционно-воспалительных заболеваний и может быть использована для своевременной профилактики осложнений родов и послеродового периода.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Непша, Оксана Сергеевна, 2012 год

1. Айламазян Э. К., Кулаков В. И., Радзинский В. Е., Савельева Г. М. Акушерство: национальное руководство. / М.: «ГЭОТАР-Медиа», 2009. -1200 с.

2. Анкирская А. С. Исследование биоматериала при инфекциях женских половых органов.Методики клинических лабораторных исследований.Справочное пособие. / М.: "Лабора", 2009. 73 с.

3. Анкирская А. С., Муравьева В. В. Опыт микробиологической диагностики оппортунистических инфекций влагалища //Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия 2001 Т. 3 №2. С. 24-27

4. Анкирская А. С., Муравьева В. В. Лабораторная диагностика оппортунистических инфекций влагалища. //Concilium medicum. 2005. С. 51-64.

5. Ахапкина И. Г. Микоплазмозы и хламидиозы современный взгляд //Consilium Medicum 2011 - Т. 13 №4. С. 7-11

6. Ахматова Н. К., Киселевский М. В. Врожденный иммунитет: противоопухолевый и противоинфекционный. / М.: "Практическая медицина", 2008. 256 с. с.

7. Баранов И. И. Экология влагалища и воспалительные заболевания половых органов. //Гинекология. 2010. Т. 12 №3. С. 4-6.

8. Болдырева М. Н., Липова Е. В., Витвицкая Ю. Г. Новый высокочувствительный способ диагностики дисбаланса нормо-и условно-патогенной биоты у женщин на ранних стадиях. //Consilium medicum. 2009. -№6. С. 47-51.

9. Воропаева Е. А., Афанасьев С. С., Кудрявцева М. В. Микроэкология и показатели гуморального иммунитета влагалища женщин с неспецифическими воспалительными заболеваниями гениталий. //Микробиология. 2005. -№3. С. 65-69.

10. Ворошилина Е. С., Плотко Е. Э., Хаютин Л. В. Применение молекулярных методов диагностики для профилактики инфекционнойпатологии у беременных женщин. //Вестник уральской медицинской академической науки. 2009. Т. 27 №4. С. 114-116.

11. Ворошилина Е. С., Тумбинская Л. В., Донников А. Е., Плотко Е. Э., Хаютин Л. В. Биоценоз влагалища с точки зрения количественной ПЦР: что есть норма? //Акушерство и гинекология. 2011. №1. С. 57-65.

12. Гиммельфарб Е. И., Липова Е. В., Колупаев В. Е. Взаимосвязь концентрации уреа- и микоплазмы и распространения инфекционно-воспалительного процесса урогенитального тракта у женщин. 2009 №1. С. 34-36

13. Горбасенко Н. В. Современный взгляд на проблему бактериального вагиноза. //Медицинские аспекты здоровья женщины. 2007. Т. 4 №1. С. 68.

14. Дмитриев Г. А., Глазко И. И., Савенков В. В. Ошибки в лабораторной диагностике ИППП. //Вестник последипломного медицинского образования. 2009. №1. С. 19-22.

15. Доброхотова Э. Ю., Затикян Н. Г. Микроэкология и защитные механизмы влагалища. //ОРЖИН. 2007. -№2. С. 11-12.

16. Доброхотова Э. Ю., Затикян Н. Г. Современные представления о механизмах развития дисбиоза влагалища. //ОРЖИН 2008. -№1. С. 7-9.

17. Долгушина В. Ф., Долгушин И. И. Состояние факторов местной иммунной защиты репродуктивного тракта при вагинозе у беременных. //Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2001. -№4. С. 89-93.

18. Карапетян Т. Э., Муравьева В. В., Анкирская А. С., Емельянова А. И., Тютюн ник В. Л. Генитальные микоплазмы и исходы беременности //Проблемы репродукции 2012 -№3. С. 88-93

19. Касабулатов Н. М. Вагинальный кандидоз //Рус. мед. журн. 2003. Т. 11 №17. С. 985-989.

20. Кетлинский С. А., Симбирцев А. С. Цитокины. / СПб.: ООО "Издательство Фолиант", 2008. 552 с. с.

21. Кира Е. Ф. Бактериальный вагиноз. / Москва: ООО «Нева-Люкс», 2001. -364 с.

22. Кира Е. Ф., Артымук Н. В., Гайтукиева Р. А., Муслимова С. 3. Биоценоз и функциональная активность эпителия влагалища при местном лечении аэробного вагинита полижинаксом и тержинаном. //Журнал акушерства и женских болезней. 2010. -№5. С. 127-135.

23. Кира Е. Ф., Муслимова С. 3. Неспецифический вагинит и его влияние на репродуктивное здоровье женщины. //Проблемы репродукции. 2008. №5. С. 8-14.

24. Колупаев В. Е., Гиммельфарб Е. И., Липова Е. В. Взаимосвязь концентрации уреа- и микоплазмы и распространения инфекционно-воспалительного процесса урогенитального тракта у женщин. //Вестник последипломного медицинского образования. 2009. №1. С. 34-37.

25. Кремлева Е. А., Константинова О. Д., Черкасов С. В. Микроэкологическое состояние вагинального биотопа пациенток, оппозитных по фертильности в программе ЭКО. //Медицинский альманах. 2010 Т. 13 №4. С. 95-97.

26. Кремлева Е. А., Черкасов С. В. Продукция цитокинов вагинальными эпителиоцитами в процессе взаимодействия с доминантными и ассоциативными микросимбионтами. //Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии 2012 -№4. С. 114-118

27. Кузнецова А. В., Данилова Т. И., Гладских О. П. и. д. Дендритные клетки и их использование в иммунотерапии. //Молекулярная медицина 2003 -№3. С. 3-17.

28. Кулаков В. И., Прилепская В. Н., Радзинский В. Е. Руководство по амбулаторно-поликлинической помощи в акушерстве и гинекологии. / Москва: «ГЭОТАР-Медиа», 2006. 1056 с.

29. Лебедева О. П., Рудых Н. А., Полякова И. С., Пахомов С. П., Чурносов М. И., Самборская Н. И. Антимикробные пептиды первая линия антиинфекционной защиты женских половых путей. //Научные ведомости

30. Белгородского государственного университета. Медицина. Фармация. 2010. -Т. 12. №22 (93). С. 25-31.

31. Липова Е. В. Роль условно-патогенной биоты в патологии урогенитального тракта женщин. //Вестник последипломного медицинского образования. 2008. №1. С. 13-16.

32. Липова Е. В. Инфекция, вызванная микоплазмой, неуточненная. //Вестник последипломного медицинского образования 2009. №1. С. 29-31.

33. Липова Е. В., Витвицкая Ю. Г. Особенности клинического течения урогенитальных инфекций женщин на современном этапе. //Вестник последипломного медицинского образования. 2009. -№1. С. 15-16.

34. Ломоносов К. М., Горячкина М. В. Бактериальный вагиноз: мифы и реальность. //Дерматология. 2009. №3. С. 50-53.

35. Лузан Н. В. К вопросу о смешанных урогенитальных инфекциях у женщин. //Гинекология. 2008 Т. 10 №4. С. 9-13.

36. Манько В. М., Девришов Д. А. Иммунология / М.: «Агровет», 2011. 751 с. с.

37. Межевитинова Е. А., Бровкина Т. В., Довлетханова Э. Р. Бактериальный вагиноз: как снизить число рецидивов? //Гинекология 2012 №4. С. 12-15

38. Мирзабалаева А. К., Долго-Сабурова Ю. В. Кандидоз гениталий и бактериальный вагиноз в практике акушера-гинеколога. //Проблемы медицинской микологии 2004 Т. 6 №3. С. 18-24

39. Миронов А. Ю., Терехова Ю. Б. Лечение вульвовагинального кандидоза у женщин детородного возраста. //Акушерство. 2009. Т. 11 №4. С. 36-39.

40. Мордвинов В. А., Фурман Д. П. Цитокины: билогические свойства и регуляция экспрессии гена интерлейкина-5 человека. //Вестник ВОГиС. 2009. Т. 13 №1. С. 53-67.

41. Нестеров И. М., Тотолян А. А. Иммунокорригирующая терапия инфекционно-воспалительных заболеваний женской половой сферы. / Санкт-Петербург: «Тактик-Студио», 2007. 53 с.

42. Никоненко А. Г. Слизистые оболочки важный участок защитного барьера организма. //Здоровье Украины 2005. -№114. С. 3-5.

43. Ноконов А. П., Белова А. В., Асцатурова О. Р., Иванова Т. А., Гущин А. Е. Генитальные микоплазмы в структуре оппортунистических инфекций влагалища и шейки матки у беременных //Вопросы гинекологии, акушерства и перинатологии 2010-7. 9 №5. С. 5-9

44. Ордженекидзе Н. В., Басиладзе Е. Н. Современные направления в диагностике, профилактике и лечении послеродовой инфекции. //Журнал Российского общества акушеров-гинекологов. 2005. -№4. С. 18-20.

45. Орлова В. В., Набережнев Ю. И. Нормоценоз влагалища у женщин репродуктивного возраста, механизмы его регуляции и дисбиотические варианты. //Российский вестник акушера-гинеколога. 2007. №4. С. 36-39.

46. Пестрикова Т. Ю., Молодцова Л. Ю. Принципы терапии бактериального вагиноза и вагинального кандидоза у беременных. //Вопросы гинекологии, акушерства и перинатологии. 2006. Т. 5 №6. С. 7-12.

47. Пестрикова Т. Ю., Юрасов И. В., Юрасова Е. А. Воспалительные заболевания в гинекологии. / Москва.: «Литтерра», 2009. 256 с.

48. Подзолкова Н. М., Дамиров М. М., Сюч Н. И., Кузьмина Т. И., Липова Е. В., Полетова Т. Н. Диагностика и лечение бактериального вагиноза и урогенитального кандидоза (учебное пособие). / РМАПО: Москва., 2003. -53 с.

49. Подзолкова Н. М., Никитина Т. И., Некрасов П. И. Этиология, патогенез и особенности антибактериальной терапии воспалительных заболеваний у молодых женщин. //Гинекология 2011.-7. 13 №5. С. 30-36.

50. Прилепская В. Н., Байрамова Г. Р. Экзо- и эндоцервициты. Возможности терапии //Гинеколог : Научно-практический журнал. 2005 №2. С. 47-50

51. Прилепская В. Н., Байрамова Г. Р. Вульвовагинальный кандидоз. Клиника, диагностика, принципы терапии. / М.: ООО «ГЭОТАР-Медиа», 2010.- 80 с.

52. Прилепская В. Н., Байрамова Г. Р. Вульвовагинальный кандидоз: клинические и терапевтические аспекты. //Гинекология 2011. Т. 14 №4. С. 47-50.

53. Прилепская В. Н., Довлетханова Э. Р., Байрамова Г. Р., Фофанова И. Ю. Современный взгляд на вопросы этиологии, патогенеза и лечения бактериального вагиноза. //Гинекология 2010-7! 12 №2. С. 6-9

54. Прилепская В. Н., Кисина В. И., Соколовский Е. В., Савичева А. М., Гомберг М. А., Гущин А. Е., Забиров К. И. Ш., Е.В. К вопросу о роли микоплазм в урогенитальной патологии //Гинекология 2007 Т. 9 №1. С. 13-17

55. Рудакова Е. Б., Семенченко С. И., Панова О. Ю., Кучинская Н. В. Инфекционная патология нижнего отдела половых путей женщины и бесплодие. //Гинекология. 2004. Т. 6№3.

56. Савичева А. М., Башмакова М. А. Генитальные микоплазмы и вызываемая ими патология //Лечащий врач 2006 №2. С. 5-8

57. Савичева А. М., Шипицына Е. В. Генитальные микоплазмы. //Врач. 2009. №1. С. 9-12.

58. Саидова Р. А. Бактериальный вагиноз или бактериальный вагинит? //Русский медицинский журнал 2001 №19. С. 843-846.

59. Сафронова М. М., Гренкова Ю. М. Нарушение состояния влагалищного микробиоценоза: современные методы коррекции. //Клиническая дерматология и венерология. 2009. №6. С. 102-106.

60. Серов В. Н., Тихомиров А. Л., Олейник Ч. Г. Современные представления о бактериальном вагинозе. //Вопорсы гинекологии, акушерства и перинатологии. 2005. Т. 4 №1. С. 66-71.

61. Сидорова И. С. Микробиоценоз половых путей женщин репродуктивного возраста. //Акушерство и гинекология 2005. -№2. С. 7-9.

62. Синчихин С. JL, Мамиев О. Б., Лахилова Е. В., Буров А. В. Некоторые современные аспекты этиологии, клинической картины и лечения острых воспалительных заболеваний придатков матки. //Гинекология. 2010. Т. 12 №5. С. 10-14.

63. Сметник В. П., Марченко Л. А., Чернуха Г. Е. Опыт применения микофлюкана (флуконазола) для лечения кандидозного вульвовагинита. //Лечащий врач. 2004. -№2. С. 73-76.

64. Спиридонова Н. В., Басина Е. И., Мелкадзе Е. В. Неспецифический вагинит у беременных: возможно ли лечение с сохранением вагинальных лактобацилл? //Акушерство. Гинекология. Репродукция» 2012 Т. 6 №1. С. 6-13

65. Стрижаков А. Н., Давыдов А. И., Баев О. Р., Буданов П. В. Генитальная инфекция. / М.: "Династия", 2003. 140 с.

66. Тихомиров А. Л. Бактериальный вагиноз. Всегда ли и только ли антибиотики? //Consilium Medicum 2011 Т. 13 №6. С. 37-41

67. Торчинов А. М., Мазуркевич М. В. Современные аспекты в лечении вульвовагинального кандидоза //Гинекология : Журнал для практических врачей. 2007. Т. 9 №2. С. 54-58.

68. Тютюнник В. Л., Карапетян Т. Э. Современные аспекты в лечении вульвовагинального кандидоза. //Русский медицинский журнал. 2004. -№13. С. 752-754.

69. Шабашова Н. В. Иммунодефицита при хроническом кандидозе кожи и слизистых оболочек //Проблемы медицинской микологии 2009 Т. 11 №1. С. 3-10

70. Шелковая Н. Г. Вульвовагинальный кандидоз: современный взгляд на проблему. //Новости медицины и фармации. 2008. Т. 252 №15. С. 12-16.

71. Шеманаева Т. В., Хосева Е. Н. Нарушения микробиоценоза влагалищной флоры у беременных на разных сроках гестации и особенности их коррекции //Гинекология 2011 №6. С. 36-40

72. Шипицына Е. В., Мартикайнен 3. М., Воробьева Н. Е., Ермошкина М. С., Степанова О. С., Донников А. Е., Скоркина Ю. А., Тумбинская Л. В.,114

73. Савичева А. М. Применение теста Фемофлор для оценки микробиоценоза влагалища. //Журнал акушерства и женских болезней 2009. №3. С. 38-44.

74. Ширева Ю. В., Сандакова Е. А., Карпунина Т. И. Неспецифический аэробный вагинит «новое» или «старое» заболевание? //Медицинский альманах. 2010. - Т. 13 №4. С. 164-168.

75. Ярилин А. А. Иммунология: учебник. / Москва: ГЭОТАР-Медиа, 2010. -752 с.

76. ACOG Practice Bulletin. Clinical management guidelines for obstetrician-gynecologists, Number 72, May 2006: Vaginitis // Obstetrics and gynecology. -2006. Vol. 107. - №5. - P. 1195-1206.

77. Ahmad R., El Bassam S., Cordeiro P., Menezes J. Requirement of TLR2-mediated signaling for the induction of IL-15 gene expression in human monocytic cells by HSV-1 // Blood. 2008. - Vol. 112. - №6. - P. 2360-2368.

78. Akira S., Uematsu S., Takeuchi O. Pathogen recognition and innate immunity // Cell. 2006. - Vol. 124. - №4. - P. 783-801.

79. Anderson B. L., Cu-Uvin S., Raker C. A., Fitzsimmons C., Hillier S. L. Subtle perturbations of genital microflora alter mucosal immunity among low-risk pregnant women // Acta obstetricia et gynecologica Scandinavica. 2011. -Vol. 90. -№5. - P. 510-515.

80. Anderson M. R., Klink K., Cohrssen A. Evaluation of vaginal complaints // JAMA : the journal of the American Medical Association. 2004. - Vol. 291. -№11. - P. 1368-1379.

81. Anton G., Rid J., Mylonas I., Friese K., Weissenbacher E. R. Evidence of a TH1-shift of local vaginal inflammatory response during bacterial vaginosis // Infection. 2008. - Vol. 36. - №2. - P. 147-152.

82. Barton G. M., Kagan J. C. A cell biological view of Toll-like receptor function: regulation through compartmentalization // Nature reviews. Immunology. 2009. - Vol. 9. - №8. - P. 535-542.

83. Beagley K. W., Gockel C. M. Regulation of innate and adaptive immunity by the female sex hormones oestradiol and progesterone // FEMS immunology and medical microbiology. 2003. - Vol. 38. - №1. - P. 13-22.

84. Benoit M., Desnues B., Mege J. L. Macrophage polarization in bacterial infections // Journal of immunology. 2008. - Vol. 181. - .№6. - P. 3733-3739.

85. Biet F., Locht C., Kremer L. Immunoregulatory functions of interleukin 18 and its role in defense against bacterial pathogens // Journal of molecular medicine. 2002. - Vol. 80. - №3. - P. 147-162.

86. Bohbot J. M., Sednaoui P., Verriere F., Achhammer I. The etiologic diversity of vaginitis. // Gynecologie, obstetrique & fertilite. 2012. - Vol. 40. - №10. - P. 578-581.

87. Brincks E. L., Woodland D. L. Novel roles for IL-15 in T cell survival // F1000 biology reports. 2010. - Vol. 2. - P. 67.

88. Campos A. C., Murta E. F., Michelin M. A., Reis C. Evaluation of Cytokines in Endocervical Secretion and Vaginal pH from Women with Bacterial Vaginosis or Human Papillomavirus // ISRN obstetrics and gynecology. 2012. - Vol. 2012. - P. 342075.

89. Caramalho I., Lopes-Carvalho T., Ostler D., Zelenay S., Haury M.,

90. Demengeot J. Regulatory T cells selectively express toll-like receptors and are116activated by lipopolysaccharide // The Journal of experimental medicine. 2003. -Vol. 197. - №4.-P. 403-411.

91. Cassone A., De Bernardis F., Santoni G. Anticandidal immunity and vaginitis: novel opportunities for immune intervention // Infection and immunity. 2007. - Vol. 75. - №10. - P. 4675-4686.

92. Chaturvedi A., Pierce S. K. How location governs toll-like receptor signaling // Traffic. 2009. - Vol. 10. - №6. - P. 621-628.

93. Chou J., Provot S., Werb Z. GATA3 in development and cancer differentiation: cells GATA have it! // Journal of cellular physiology. 2010. -Vol. 222. -№1. - P. 42-49.

94. Colonna M., Trinchieri G., Liu Y. J. Plasmacytoid dendritic cells in immunity //Nature immunology. 2004. - Vol. 5. - №12. - P. 1219-1226.

95. Couper K. N., Blount D. G., Riley E. M. IL-10: the master regulator of immunity to infection // Journal of immunology. 2008. - Vol. 180. - №9. - P. 5771-5777.

96. Creagh E. M., O'Neill L. A. TLRs, NLRs and RLRs: a trinity of pathogen sensors that co-operate in innate immunity // Trends in immunology. 2006. -Vol. 27. - №8. - P. 352-357.

97. Cummins J. E., Jr., Doncel G. F. Biomarkers of cervicovaginal inflammation for the assessment of microbicide safety // Sexually transmitted diseases. 2009. -Vol. 36. - №3 Suppl. - P. S84-91.

98. Doaa M. Mahgoub, Nermine H. EL-Eishi, Rashed L. A. A Quantitative Study of the Antimicrobial Peptide Granulysin and its Possible Role in Atopic Dermatitis // J Egypt Women Dermatol Soc. 2010. - Vol. 7. - №2. - P. 117-122.

99. Donati L., Di Vico A., Nucci M., Quagliozzi L., Spagnuolo T., Labianca A., Bracaglia M., Ianniello F., Caruso A., Paradisi G. Vaginal microbial flora and outcome of pregnancy // Archives of gynecology and obstetrics. 2010. - Vol. 281,-№4.-P. 589-600.

100. Donders G. G., Vereecken A., Bosmans E., Spitz B. Vaginal cytokines in normal pregnancy // American journal of obstetrics and gynecology. 2003. -Vol. 189. - №5. - P. 1433-1438.

101. Dongari-Bagtzoglou A., Fidel P. L., Jr. The host cytokine responses and protective immunity in oropharyngeal candidiasis // Journal of dental research. -2005. Vol. 84. - №11. - P. 966-977.

102. Fan A. P., Xue F. X. Clinical characteristics of aerobic vaginitis and its mixed infections. // Zhonghua fii chan ke za zhi. 2010. - Vol. 45. - №12. - P. 904-908.

103. Farage M., Maibach H. Lifetime changes in the vulva and vagina // Archives of gynecology and obstetrics. 2006. - Vol. 273. - №4. - P. 195-202.

104. Farage M. A., Maibach H. I. Morphology and physiological changes of genital skin and mucosa // Current problems in dermatology. 2011. - Vol. 40. -P. 9-19.

105. Fazeli A., Bruce C., Anumba D. O. Characterization of Toll-like receptors in the female reproductive tract in humans // Human reproduction. 2005. - Vol. 20. - №5. - P. 1372-1378.

106. Fidel P. L., Jr. History and update on host defense against vaginal candidiasis // American journal of reproductive immunology. 2007. - Vol. 57. -№1. - P. 2-12.

107. Forsum U., Hallen A., Larsson P. G. Bacterial vaginosis~a laboratory and clinical diagnostics enigma // APMIS : acta pathologica, microbiologica, et immunologica Scandinavica. 2005. - Vol. 113. - №3. - P. 153-161.

108. Fredricks D. N., Fiedler T. L., Marrazzo J. M. Molecular identification of bacteria associated with bacterial vaginosis // The New England journal of medicine. 2005. - Vol. 353. - №18. - P. 1899-1911.

109. Gene M. R., Onderdonk A. Endogenous bacterial flora in pregnant women and the influence of maternal genetic variation // BJOG : an international journal of obstetrics and gynaecology. 2011. - Vol. 118. - №2. - P. 154-163.

110. Hamza T., Barnett J. B., Li B. Interleukin 12 a key immunoregulatory cytokine in infection applications // International journal of molecular sciences. -2010. Vol. 11. - №3. - P. 789-806.

111. Hedges S. R., Barrientes F., Desmond R. A., Schwebke J. R. Local and systemic cytokine levels in relation to changes in vaginal flora // The Journal of infectious diseases. 2006. - Vol. 193. - №4. - P. 556-562.

112. Home A. W., Stock S. J., King A. E. Innate immunity and disorders of the female reproductive tract // Reproduction. 2008. - Vol. 135. - №6. - P. 739-749.

113. Hornef M. W., Bogdan C. The role of epithelial Toll-like receptor expression in host defense and microbial tolerance // Journal of endotoxin research. 2005. - Vol. 11. - №2. - P. 124-128.

114. Hyman R. W., Fukushima M., Diamond L., Kumm J., Giudice L. C., Davis R. W. Microbes on the human vaginal epithelium // Proceedings of the National120

115. Academy of Sciences of the United States of America. 2005. - Vol. 102. - №22.- P. 7952-7957.

116. Iwasaki A. Antiviral immune responses in the genital tract: clues for vaccines //Nature reviews. Immunology. 2010. - Vol. 10. - №10. - P. 699-711.

117. Iwasaki A., Medzhitov R. Toll-like receptor control of the adaptive immune responses //Nature immunology. 2004. - Vol. 5. - №10. - P. 987-995.

118. Izcue A., Powrie F. Special regulatory T-cell review: Regulatory T cells and the intestinal tract—patrolling the frontier // Immunology. 2008. - Vol. 123. -№1. - P. 6-10.

119. Janeway C. A., Jr., Medzhitov R. Innate immune recognition // Annual review of immunology. 2002. - Vol. 20. - P. 197-216.

120. Juuti-Uusitalo K. M., Kaukinen K., Maki M., Tuimala J., Kainulainen H. Gene expression in TGFbeta-induced epithelial cell differentiation in a three-dimensional intestinal epithelial cell differentiation model // BMC genomics. -2006. Vol. 7. - P. 279.

121. Kelsall B. L., Rescigno M. Mucosal dendritic cells in immunity and inflammation //Nature immunology. 2004. - Vol. 5. - №11. - P. 1091-1095.

122. Kouros-Mehr H, Slorach E. M., Sternlicht M. D„ Werb Z. GATA-3 maintains the differentiation of the luminal cell fate in the mammary gland // Cell.- 2006. Vol. 127. - №5. - P. 1041-1055.

123. Krensky A. M., Clayberger C. Biology and clinical relevance of granulysin

124. Tissue antigens. 2009. - Vol. 73. - №3. - P. 193-198.121

125. Kumar H., Kawai T., Akira S. Toll-like receptors and innate immunity // Biochemical and biophysical research communications. 2009. - Vol. 388. - №4. -P. 621-625.

126. Larsen B., Hwang J. Mycoplasma, Ureaplasma, and adverse pregnancy outcomes: a fresh look // Infectious diseases in obstetrics and gynecology. 2010. - Vol. 2010.

127. LeBlanc D. M., Barousse M. M., Fidel P. L., Jr. Role for dendritic cells in immunoregulation during experimental vaginal candidiasis // Infection and immunity. 2006. - Vol. 74. - №6. - P. 3213-3221.

128. Linhares I. M., Giraldo P. C., Baracat E. C. New findings about vaginal bacterial flora. // Revista da Associacao Medica Brasileira. 2010. - Vol. 56. -№3. - P. 370-374.

129. Mares D., Simoes J. A., Novak R. M., Spear G. T. TLR2-mediated cell stimulation in bacterial vaginosis // Journal of reproductive immunology. 2008. -Vol. 77. -№1. - P. 91-99.

130. MasCasullo V., Fam E., Keller M. J., Herold B. C. Role of mucosal immunity in preventing genital herpes infection // Viral immunology. 2005. -Vol. 18. -№4. - P. 595-606.

131. Mashburn J. Etiology, diagnosis, and management of vaginitis // Journal of midwifery & women's health. 2006. - Vol. 51. - №6. - P. 423-430.

132. Mege J. L., Mehraj V., Capo C. Macrophage polarization and bacterial infections // Current opinion in infectious diseases. 2011. - Vol. 24. - №3. - P. 230-234.

133. Nasu K., Narahara H. Pattern recognition via the toll-like receptor system in the human female genital tract // Mediators of inflammation. 2010. - Vol. 2010.- P. 976024.

134. Patel M. A., Nyirjesy P. Role of Mycoplasma and ureaplasma species in female lower genital tract infections // Current infectious disease reports. 2010. -Vol. 12. -№6. - P. 417-422.

135. Philpott D. J., Girardin S. E. The role of Toll-like receptors and Nod proteins in bacterial infection // Molecular immunology. 2004. - Vol. 41. - №11. - P. 1099-1108.

136. Piccinni M. P. T cells in normal pregnancy and recurrent pregnancy loss // Reproductive biomedicine online. 2006. - Vol. 13. - №6. - P. 840-844.

137. Pudney J., Quayle A. J., Anderson D. J. Immunological microenvironments in the human vagina and cervix: mediators of cellular immunity are concentrated in the cervical transformation zone // Biology of reproduction. 2005. - Vol. 73. -№6.-P. 1253-1263.

138. Quan M. Vaginitis: diagnosis and management // Postgraduate medicine. -2010. Vol. 122. - №6. - P. 117-127.

139. Quayle A. J. The innate and early immune response to pathogen challenge in the female genital tract and the pivotal role of epithelial cells // Journal of reproductive immunology. 2002. - Vol. 57. - №1-2. - P. 61-79.

140. Raska M., Belakova J., Krupka M., Weigl E. Candidiasis—do we need to fight or to tolerate the Candida fungus? // Folia microbiologica. 2007. - Vol. 52. - №3. - P. 297-312.

141. Roeder A., Kirschning C. J., Rupee R. A., Schaller M., Korting H. C. Tolllike receptors and innate antifungal responses // Trends in microbiology. 2004. -Vol. 12. -№1. - P. 44-49.

142. Rydstrom A., Wick M. J. Monocyte recruitment, activation, and function in the gut-associated lymphoid tissue during oral Salmonella infection // Journal of immunology. 2007. - Vol. 178. - №9. - P. 5789-5801.

143. Sakaguchi S., Yamaguchi T., Nomura T., Ono M. Regulatory T cells and immune tolerance // Cell. 2008. - Vol. 133. - №5. - P. 775-787.

144. Say P. J., Jacyntho C. Difficult-to-manage vaginitis // Clinical obstetrics and gynecology. 2005. - Vol. 48. - №4. - P. 753-768.

145. Schellenberg J. J., Plummer F. A. The Microbiological Context of HIV Resistance: Vaginal Microbiota and Mucosal Inflammation at the Viral Point of Entry // International journal of inflammation. 2012. - Vol. 2012. - P. 131243.

146. Schwiertz A., Taras D., Rusch K., Rusch V. Throwing the dice for the diagnosis of vaginal complaints? // Annals of clinical microbiology and antimicrobials. 2006. - Vol. 5. - P. 4.

147. Sherrard J., Donders G., White D., Jensen J. S. European (IUSTI/WHO) guideline on the management of vaginal discharge, 2011 // International journal ofSTD& AIDS. -2011. Vol. 22. - №8. - P. 421-429.

148. Spear G. T., St John E., Zariffard M. R. Bacterial vaginosis and human immunodeficiency virus infection // AIDS research and therapy. 2007. - Vol. 4. -P. 25.

149. St John E. P., Martinson J., Simoes J. A., Landay A. L., Spear G. T. Dendritic cell activation and maturation induced by mucosal fluid from women with bacterial vaginosis // Clinical immunology. 2007. - Vol. 125. - №1. - P. 95102.

150. Stevens A., Lowe J. S. Human histology. /. Philadelphia: Elsevier Mosby, 2005.: -464 c.

151. Strober W. Epithelial cells pay a Toll for protection // Nature medicine. -2004. Vol. 10. - №9. - P. 898-900.

152. Strobl H., Knapp W. Myeloid cell-associated lysosomal proteins as flow cytometry markers for leukocyte lineage classification // Journal of biological regulators and homeostatic agents. 2004. - Vol. 18. - №3-4. - P. 335-339.

153. Tchilian E. Z., Beverley P. C. Altered CD45 expression and disease // Trends in immunology. 2006. - Vol. 27. - №3. - P. 146-153.

154. Tempera G., Furneri P. M. Management of aerobic vaginitis // Gynecologic and obstetric investigation. 2010. - Vol. 70. - №4. - P. 244-249.

155. Tezuka H., Abe Y., Iwata M., Takeuchi H., Ishikawa H., Matsushita M., Shiohara T., Akira S., Ohteki T. Regulation of IgA production by naturally occurring TNF/iNOS-producing dendritic cells // Nature. 2007. - Vol. 448. -№7156. - P. 929-933.

156. Trinchieri G. Interleukin-12 and the regulation of innate resistance and adaptive immunity // Nature reviews. Immunology. 2003. - Vol. 3. - №2. - P. 133-146.

157. Underhill D. M. Toll-like receptors and microbes take aim at each other // Current opinion in immunology. 2004. - Vol. 16. - №4. - P. 483-487.

158. Viscardi R. M. Ureaplasma species: role in diseases of prematurity // Clinics in perinatology. 2010. - Vol. 37. - №2. - P. 393-409.

159. Witkin S. S., Linhares I. M., Giraldo P. Bacterial flora of the female genital tract: function and immune regulation // Best practice & research. Clinical obstetrics & gynaecology. 2007. - Vol. 21. - №3. - P. 347-354.

160. Yamamoto M., Takeda K. Current views of toll-like receptor signaling pathways // Gastroenterology research and practice. 2010. - Vol. 2010. - P. 240365.

161. Yamamoto T., Zhou X., Williams C. J., Hochwalt A., Forney L. J. Bacterial populations in the vaginas of healthy adolescent women // Journal of pediatric and adolescent gynecology. 2009. - Vol. 22. - №1. - P. 11-18.

162. Yasodhara P., Raghunath M., Sreeramulu D., Venu L., Hemalatha R., Krishna T. P. Local immunity in Indian women with bacterial vaginosis // Journal of reproductive immunology. 2006. - Vol. 70. - №1-2. - P. 133-141.

163. Zhang D., Liu Z. H., Liao Q. P., Ma J. M., Sun Y. F., Fan S. R., Hu L. N., Jia H. J., Di W., Wang W. Study of local immunity of lower genital tract infections. // Zhonghua fu chan ke za zhi. 2009. - Vol. 44. - №1. - P. 13-15.

164. Zhou X., Bent S. J., Schneider M. G. Characterization of vaginal microbial communities in adult healthy women using cultivation-independent methods // Microbiology. 2004. - Vol. 150. - №8. - P. 2565-2573.

165. Zhou X., Westman R., Hickey R., Hansmann M. A., Kennedy C., Osborn T. W., Forney L. J. Vaginal microbiota of women with frequent vulvovaginal candidiasis // Infection and immunity. 2009. - Vol. 77. - №9. - P. 4130-4135.