Морфологические и функциональные изменения в органах и тканях пушных зверей при хронической почечной недостаточности тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 16.00.02, кандидат ветеринарных наук Мотылина, Наталья Сергеевна

  • Мотылина, Наталья Сергеевна
  • кандидат ветеринарных науккандидат ветеринарных наук
  • 2009, МоскваМосква
  • Специальность ВАК РФ16.00.02
  • Количество страниц 156
Мотылина, Наталья Сергеевна. Морфологические и функциональные изменения в органах и тканях пушных зверей при хронической почечной недостаточности: дис. кандидат ветеринарных наук: 16.00.02 - Патология, онкология и морфология животных. Москва. 2009. 156 с.

Оглавление диссертации кандидат ветеринарных наук Мотылина, Наталья Сергеевна

Введение.

1. Обзор литературы.

1.1. Этиология и патогенез при хронической почечной недостаточности.

1.1.1. Этиология хронической почечной недостаточности.

1.1.2. Морфологические изменения в почках животных при хронической почечной недостаточности, обусловленной хроническим токсическим поражением.

1.1.3. Патогенез эндогенной интоксикации при хронической почечной недостаточности

1.1.4. Структурно-функциональные изменения внутренних органов при хронической почечной недостаточности.

1.1.5. Вторичные поражения почек при заболеваниях печени.

1.2. Методы диагностики хронической почечной недостаточности и оценки степени тяжести поражения почек.

1.2.1. Лабораторная диагностика функционального состояния почек.

1.2.2. Методы определения тяжести морфологических повреждений почек на основе диагностики нарушений метаболизма при хронической почечной недостаточности.

1.3. Методы коррекции состояния организма при хронической почечной недостаточности.

1.4. Применение природных источников кобальта и селена в качестве кормовых добавок с лечебными свойствами.

Рекомендованный список диссертаций по специальности «Патология, онкология и морфология животных», 16.00.02 шифр ВАК

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Морфологические и функциональные изменения в органах и тканях пушных зверей при хронической почечной недостаточности»

Пушное звероводство является одной из ведущих отраслей сельского хозяйства. Тем не менее, в настоящий момент оно переживает тяжелейший кризис. Значительная часть звероводческих хозяйств разорилась, оставшиеся - едва справляются с конкуренцией иностранных производителей. Связано это с высокой- себестоимостью производства пушнины в нашей стране. Чтобы поправить ситуацию, предпринимаются попытки снизить затраты на производстве продукции. Как наиболее простой вариант - применяют корма с низкой себестоимостью. В периодических изданиях последних лет активно пропагандируются дешевые источники питательных веществ - например; отходы рыбного, птичьего производства, и даже тушки забитых зверей: Недостаток необходимых компонентов кормов рекомендуется заменять БАДами, имеющими направленное действие. К сожалению, ценность рекомендуемых добавок для организма зверя- сводится в основном к улучшению внешнего вида и товарного качества шкурок. Их применение оказывается неэффективным в случае заболевания животного. Вместе с тем, изменившийся рацион, а также несоблюдение норм приготовления и хранения кормов, могут неблагоприятным образом сказаться на состоянии здоровья животных (Слугин B.C., 2004).

Заболевания почек относятся к наименее изученным заболеваниям пушных зверей. Основной причиной развития болезней почек незаразной этиологии у пушных зверей является несбалансированное кормление, неф-ротоксичное воздействие многих препаратов, применяемых для профилактики заболеваний и повышения продуктивности животных (антигельминт-ные и инсектицидные средства, антибиотики группы аминогликозидов и цефалоспорина, статинов, стероидов и др.), а также длительное поступление с кормом в организм токсических веществ (например, солей тяжелых металлов, пестицидов) (Kopczewski A. et al., 1988; Поспишиль Ю.А., 1995; Майоров М.А., 2001; Nowakowicz-Debek В. et al., 2007). Эти заболевания отрицательно влияют на продуктивные свойства, вызывают задержку линьки и могут привести к гибели зверя. Как правило, указанная патология развивается у 2-3-летних самок пушных зверей маточного поголовья и 6-7-месячных самцов. В связи с этим возрастают потери при производстве пушной продукции.

На сегодняшний- день подробного изучения патоморфологических форм и функциональных изменений в организме пушных зверей- при подобных поражениях почек не проводилось. В патогенезе большинства заболеваний одно из центральных звеньев принадлежит синдрому интоксикации (токсикозу) (Мишнев О.Д.и др.,2003; Новочадов В.В., 2005). Особое значение имеет эндогенная, интоксикация, или эндотоксикоз, при котором происходит накопление в тканях и биологических жидкостях организма избытка продуктов нормального или извращенного обмена веществ и клеточного реагирования. Источниками эндогенной интоксикации могут быть очаги воспаления в организме, зоны ишемии или деструкции тканей любой другой природы. Процесс усугубляется при нарушении выведения токсических веществ из организма в случае поражения почек и печени как центральных органов детоксикации. В свою очередь, накопившиеся эндогенные токсины влияют на структуру и функцию, тканей органов, тем самым, усугубляя патологический процесс. При развитии хронической почечной недостаточности (ХПН) в организме накапливаются вещества средней молекулярной массы (ВСММ), продукты расщепления пластического материала (продукты деградации белков, глико- и липопротеидов, фосфолипи-дов) и другие токсины (Смирнов A.B., 1997; Суворова Т.С., Вольвич К.В., 2000). Многие лабораторные исследования подтверждают негативное влияние этих веществ на функциональное состояние, морфологическое строение внутренних органов животных (селезенку, печень, желудочно-кишечный тракт, легкие, костный мозг) и кожный покров, особенно дерму (Родионова A.A., 1970; Уша Б.В., 1979; Гончаров H.A., 1983; Шахбазян С.Н., 1983; Абдуллаев С.П., 1989; Клечиков В.В., Береснева О.Н., 1993; Богдан

Г.М., 1994; Школа Т.С., 2000; Popp J.-P., 1993). Известно, что при воздействии всех видов нефротоксичных веществ патологические изменения происходят прежде всего в почечных интерстиции и канальцах (Тареева И.Е., 1998, 2002; Шулутко Б.И.,2002). В свою очередь, тубулоинтерстициальные процессы являются ведущим фактором в прогрессировании заболевания, развитии нефросклероза и как клинического проявления - хронической почечной недостаточности (Нестеров Д.В., 1997; Команденко Н.С., Шостка Г.Д., 2002; Байнбридж Д., Эллиот Д., 2003).

В терапии животных-компаньонов (кошек, собак) разработаны достаточно эффективные методы коррекции нарушений метаболизма при ХПН и лечения заболеваний, их вызвавших. Однако все эти приемы требуют наличия дорогостоящего оборудования, применения лекарственных средств с высокой себестоимостью и желательного нахождения животного в условиях стационара под непрерывным наблюдением ветеринарного врача (Байнбридж Дж., Элиот Дж., 2003). Соблюдение этих требований при лечении пушных зверей в условиях зверохозяйства практически невозможно. Поэтому на сегодняшний день весьма актуальна разработка доступных методов восстановительной терапии, направленной на коррекцию метаболических нарушений при различных формах заболевания. Наиболее перспективным направлением в лечении и профилактике хронической почечной недостаточности является использование биологически активных добавок в рационе животных сорбционного и антиоксидантного действия растительного происхождения (Лоншакова К.С., 1999). В этом аспекте представлялось интересным выявить возможные варианты метаболических реверсий при нефропатиях токсического характера и оценить влияние природных лечебных факторов на ведущие морфологические нарушения при данных патологических состояниях.

Цель и задачи исследований. Целью данной работы явилось изучение морфофункциональных изменений в органах и тканях при хронической почечной недостаточности, обусловленной эндотоксикозом пушных зверей, а также определение степени обратимости этих изменений при применении смеси препарата «Бефунгин» и бобовой культуры нута.

Для достижения поставленной цели были определены следующие задачи:

1. Изучить цитологические, гистологические и гистохимические особенности изменений, происходящих в почках, печени и коже песцов с хронической почечной недостаточностью, обусловленной токсическим поражением почек.

2. Выявить зависимость между показателями эндогенной интоксикации и морфофункциональным состоянием органов у животных при хронической почечной недостаточности.

3. Определить воздействие кормовой добавки, состоящей из смеси препарата «Бефунгин» и нута на организм животных при хронической почечной недостаточности и возможность её применения для коррекции метаболических нарушений.

Научная новизна. Впервые приведены морфометрические параметры и цитологические изменения на световом и электронно-микроскопическом уровнях тканей почек, печени и кожи у песцов с хронической почечной недостаточностью латентной и интермиттирующей стадий вследствие хронического токсического поражения почек. Изучено состояние белково-жирового обмена и показателей эндогенной интоксикации при данной патологии.

Установлена роль изменений соотношения фракций холестерина и уровня веществ средней молекулярной массы в развитии ранних стадий эндогенной интоксикации при токсическом поражении почек у песцов.

Научно доказана возможность коррекции обменных нарушений при хронической почечной недостаточности, при применении кормовой добавки с лечебно-профилактическим действием, состоящей из смеси бобовой культуры нут и препарата «Бефунгин».

Практическая значимость работы.

1. Обоснованы подходы к лабораторной диагностике хронической почечной недостаточности на основе измерения уровня показателей эндогенной интоксикации. Показано их значение в диагностике латентной стадии хронической почечной недостаточности у песцов.

2. Полученные морфометрические характеристики тканевых и клеточных структур органов песцов5 использованы в научных работах.

3. Доказана эффективность применения смеси на основе нута и «Бе-фунгина» в коррекции метаболических нарушений при комплексной терапии токсических поражений почек, сопровождающихся хронической почечной недостаточностью.

Основные положения, выносимые на защиту.

• Морфофункциональные изменения в почках пушных зверей при хронической почечной недостаточности.

• Морфологические и биохимические изменения в организме животных при хронической почечной недостаточности.

• Эффективность применения комплекса на основе нута и «Бефунги-на» в коррекции морфофункциональных изменений при хронической почечной недостаточности.

Связь исследований с научной программой. Тема работы являлась частью научно-исследовательского направления кафедры незаразных болезней «Разработка методов диагностики, лечения и групповой профилактики внутренних незаразных болезней животных с целью повышения качества и количества животноводческой продукции» (код 68.41.63)

Апробация работы.

Материалы исследования доложены на Всероссийской научной конференции Актуальные проблемы ветеринарной медицины, ветеринарносанитарного контроля и биологической безопасности с.-х. продукции (М., МГУ lib, 2004); V и VII Международных научных конференциях студентов и молодых ученых «Живые системы и биологическая безопасность населения» (М., МГУПБ, 2004,2008).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 5 научных работ, в том числе 2 статьи в журналах входящих в список ВАК.

Структура и объем диссертации. Диссертационная работа изложена на 151 страницах машинописного текста и включает введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение результатов исследований и практические предложения, выводы, приложения. Диссертация содержит 14 таблиц и 49 рисунков. Список использованной литературы включает 176 источников, в том числе 124 отечественных и 52 иностранных авторов.

Похожие диссертационные работы по специальности «Патология, онкология и морфология животных», 16.00.02 шифр ВАК

Заключение диссертации по теме «Патология, онкология и морфология животных», Мотылина, Наталья Сергеевна

3. выводы

1. Функциональные изменения при эндотоксикозе, обусловленном хронической почечной недостаточностью у песцов, сопровождаются повышением уровня ВСММ, ОХ, ХС ЛПНП, билирубина, ЩФ, АЛаТ, АСаТ, креатинина и мочевины. Увеличение содержания ВСММ, ОХ и ХС ЛПНП наблюдается в латентную стадию ХПН, т.е. предшествует достоверному повышению уровня креатинина и мочевины.

2. На ранних стадиях токсического поражения почек (латентная стадия ХПН) у песцов в почках преобладают воспалительные процессы (отёк межуточной ткани, макрофагальная инфильтрация интерстиция). В эпителиоцитах проксимальных почечных канальцев наблюдаются явления гиалиновой или вакуольной дистрофий. Встречаются очаги физиологической регенерации эпителия. При электронно-микроскопическом исследовании обнаружено удлинение и истончение ворсинок эпителия, накопление лизосом и дезорганизация мембранных органелл.

3. При переходе в интермиттирующую стадию ХПН в почках преобладают процессы склерозирования, в то время как воспалительные и отёчные явления затихают (диффузный-нефросклероз). Процесс развития соединительной ткани идет по перитубулярному и перигломерулярому типу. Наблюдаются атрофия и жировая дистрофия эпителиоцитов проксимальных и дистальных канальцев, набухание гломерулярных и тубулярных базальных мембран.

4. В латентную стадию ХПН объёмная доля интерстиция мозгового слоя увеличивается в среднем на 39,7 %, коркового слоя — на 96,6 %; капсулярное пространство увеличивается до 1,6±0,3; канальцевый индекс — до 1,9±0,6 усл.ед; процент склерозированных клубочков составляет 25,4±5,5 %. В интермиттирующую стадию ХПН объёмная доля интерстиция мозгового слоя увеличивается на 58,6 %, коркового - на 239,0 %; канальцевый индекс и капсулярное пространство уменьшаются до 1,2 ±0,1 и 0,5±0,3 усл.ед. соответственно, 48,5±7,4 % клубочков склерозировано.

5. При ХПН в печени песцов с хроническим тубулоинтерстициальным нефритом с очаговым склерозом интерстиция обнаружены: жировая дистрофия (в 42,8 % случаев), вакуольная и гидропическая дистрофии (14,3 % и 21,4 % случаев), расширение перисинусоидальных пространств с кровепереполнением печеночных долек (21,4 % случаев). У животных с диффузным нефросклерозом преобладают процессы атрофии гепатоцитов. Морфологически выявлены мик-ронодуллярный цирроз, фиброз и перипортальный некроз. Площадь и объемная доля гепатоцитов уменьшена. По данным электронно-микроскопического исследования, большинство гепатоцитов находится в состоянии угнетения функции белоксинтезирующего аппарата.

6. В дерме подопытных животных обнаружены явления отека, преимущественно в сосочковом слое. Выявлены дистрофические и атрофические явления: разрыхление, истончение и пикринофилия коллагеновых, уменьшение количества эластиновых волокон. Электронно-микроскопически обнаружено му-коидное набухание волокон дермы, характеризующееся умеренными обратимыми изменениями. Установлено снижение синтетической активности клеток дермы, в частности, фибробластов. Данные изменения более выражены у животных с интермитгирующей ХПН.

7. Совместное применение смеси на основе препарата «Бефунгин», бобовой культуры нут и «Канефрона» имеет выраженное гепато- и нефропротектор-ное действие. Количество ВСММ крови снизилось на 47,2 %, креатинина — на 45,5 %, мочевины - на 54,3 %, билирубина - на 49,0 %, АлАТ - на 52,5 %, АсАт

- на 32,5 %, ЩФ - на 78,8 %, холестерина - на 43,8 %, ХС ЛПНП - на 80,9 % и индекса атерогенности — на 88,3 %. Морфологически это выражается уменьшением симптомов дистрофических и атрофических процессов в почках, в печени

- явлений жировой и вакуольной дистрофий. В коже исчезают явления мукоид-ного набухашш коллагеновых волокон дермы, восстанавливается синтетическая активность фибробластов, расположение пучков сетчатого слоя становится более плотным.

4. практические предложения

Для проведения диагностических мероприятий в зверохозяйстве при ХПН, а также научных работ разработаны рекомендации по определению степени эндогенной интоксикации при хронической почечной недостаточности (М: МГУПБ от 12.01.2009 г.).

Материалы исследования используются в учебном процессе на занятиях по курсу «Клиническая диагностика с рентгенологией» и «Внутренние незаразные болезни животных»

1.5. Заключение

Как показал анализ литературных данных, проблема заболеваний почек, сопровождаемых симтомокомплексом хронической почечной недостаточности, является актуальной и разносторонне изучаемой у сельскохозяйственных животных и животных-компаньонов. Проводимые исследования затрагивают изучение патогенеза развития синдрома, сопутствующие осложнения, в том числе воздействие на все системы органов, методы диагностики и возможные методы лечения.

Доказано, что при ХПН нарушаются все виды обмена - белкового, жирового, углеводного, водно-солевого и минерального. Это может быть связано с развитием адаптационно-приспособительных реакций в организме, так и с патологическими изменениями внутренних органов, обусловленных прямым воздействием накопившихся в результате нарушения их элиминации токсичных продуктов метаболизма. Морфологическим крете-рием ХПН при хронических токсических поражениях почек считают развитие нефросклероза.

Имеются данные о морфофункциональных изменениях в печени животных и людей при ХПН, которые сопровождаются билирубинемией, ги-поальбуминемией, нарушением детоксицирующих функций и развитием разнообразных структурных повреждений. В последнем случае морфологическими методами выявляют развитие зернистой, вакуольной — на ранних стадиях ХПН и жировую дистрофию, инфильтраты и цирроз - на поздних стадиях ХПН и при нефротическом синдроме. Данные изменений печени при болезнях почек весьма ограничены, имеются результаты исследований печени у норок. Чаще всего у них диагностировали жировую дистрофию.

Литературные данные результатов исследований кожи при ХПН гораздо более скудны и свидетельствуют о развитии дерматитов, гиперкератозов и дистрофии волоконных структур дермы кожи. Присутствует лишь одно исследование, посвященное изучению кожных структур при мочекаменной болезни у норок. Оно свидетельствует о значительных структурных изменениях в коже животных, приводящих к снижению сортности шкурок.

Морфологические изменения в почках при токсическом поражении, обусловливающем развитие ХПН, затрагивают прежде всего систему канальцев и интерстиций. При отравлениях мико- и бактериальными токсинами, солями тяжелых металлов в основном диагностируют хронический тубуло-интерстициальный нефрит.

Диагностика ХПН основана на лабораторных и функциональных методах исследований. Используют медоды исследования мочи, клиренса креатинина, биохимических исследований крови. Основными показателя I ми при определении стадии ХПН принято считать концентрацию креатинина в сыворотке и скорость клубочковой фильтрации. В ветеринарии принято определять уровень мочесвины и креатинина. Доказана низкая токсичность указанных соединений. Большее значение при определении 1 прогноза заболевания и выраженности интоксикации имеют следующие показатели: концентрация веществ средней молекулярной массы (ВСММ), общего холестерина (ОХ) и липидных фракций. Степень исследования данных показатей при ХПН остается недостаточно исследованной для возможного использования их в экспериментальных работах и диагностике изучаемой патологии у пушных зверей.

В гуманной медицине и при лечении животных-компаньонов используются следующие методы лечения: консервативные (применение ингибиторов АПФ, нефропротекторов растительного происхождения, стати-нов, стероидов, сорбентов), активных (диализ) и хирургических (пересадка почки). К сожалению, все эти методы неприменимы в условиях хозяйства в связи с их высокой стоимостью и трудности манипуляций.

Наиболее оптимально введение препаратов per os. При этом эффективность действия и низкая себестоимость диктует необходимость разработки методов фитотерапии или применения биологически активных добавок с лечебными свойствами растительного происхождения.

Доказана гиполипидемическая и антиоксидантная активность препарата «Бефунгин» при болезнях печени, диабете. Недостаток микроэлементов, в частности, селена, при эндотоксикозах обусловливает необходимость применения природных источников этого микроэлемента при откорме и содержании пушных зверей. Селен обладает выраженным антиок-сидантным эффектом, усиливающимся в присутствии кобальта, входящего в состав «Бефунгина».

2. СОБСТВЕННБ1Е ИССЛЕДОВАНИЯ

Экспериментальные исследования проводились в период с октября 2004 по май 2008 гг. на кафедре Незаразных болезней и лаборатории ветеринарной клиники при МГУПБ, в племсовхозе «Пушкинский» Пушкинского р-на Московской области, в виварии ГНУ ВНИИМП им. В.М. Горбатова РАСХН, лаборатории электронномикроскопических исследований ГУ НИИМЧ РАМН.

2.1. Материалы и методы исследования

Работа включала 2 этапа: 1-й этап — изучение патологии в условиях хозяйства (рис. 1) и 2-й этап — моделирование на лабораторных животных (рис. 2). Научно-производственные опыты в условиях хозяйства проводили на вуалевых песцах-самцах в возрасте 6 месяцев и самках из маточного поголовья в возрасте 2-3 года, подобранных по принципу аналогов.

Исследования на песцах заключались в выявлении клинико-морфологических форм токсических поражений почек с симптомоком-плексом хронической почечной недостаточности. Объектами исследования служили вуалевые песцы (А1орех кщориз): самцы в возрасте б месяцев и самки из маточного поголовья в возрасте 2-3 года, подобранные по принципу аналогов. Общее количество животных составило 220 голов.

По результатам проведенных исследований песцов опытной группы окончательно разделили на две группы (по классификации Ниберле и Кор-са): 1-я группа - с хроническим тубулоинтерстициальном нефритом с очаговым нефросклерозом, нефротическим синдромом, латентная стадия хронической почечной недостаточности (16 самцов, 12 самок); 2-я группа - с хроническим тубулоинтерстициальном нефритом, диффузным нефросклерозом, интермиттирующая стадия хронической почечной недостаточности (19 самок). В контрольную группу животных вошли животные без признаков отклонений в состоянии здоровья (10 самцов, 10 самок).

Подопытных животных содержали в отдельных клетках, согласно-принятым в хозяйстве технологии и нормам. Ежедневно определяли- кли-нико-физиологические показатели у песцов: температуру тела, двигательную активность, адекватность поведенческих реакций, сохранность аппетита, проводили пальпацию стенок мочевого пузыря, почек, определяли наличие характерных клинических признаков (отеки, нарушение акта мочеиспускания).

Пробы крови и мочи получали утром за 1-1,5 часа до кормления животных. Лабораторные исследования крови и мочи проводили в начале эксперимента, на 15-е, 30-е и 45-е сутки. На 45-й день исследования песцов выводили из эксперимента методом передозировки золетила, брали внутренние органы для морфологических исследований (рис.1).

Рис. 1. Схема эксперимента в условиях хозяйства.

Методика моделировании дисметаболической. нефропатии у лабораторных животных. В условиях экспериментальной клиники моделировали дисметаболическую нефропатию с явлением эндогенной интоксикации по методу В.В.Новочадова (74). Эксперимент ставили на 60 белых крысах-самках массой 250±11 гр (возраст 5 месяцев) (рис.2). Животных содержали в условиях вивария на стандартном рационе, свободном доступе к воде. Все манипуляции с животными проводили с соблюдением Правил гуманного обращения с животными. Для моделирования дисметаболической нефропатии крысам на протяжении 5 дней внутрибрюшинно ежедневно вводили раствор гентамицина из расчёта 20 мг/кг массы тела. Начиная с 6-го дня животным еженедельно вводили липополисахарид (ЛПС) S.typhi murium («Sigma», USA) 1 мг/кг массы тела. При такой модели развивается эндотоксикоз с преимущественными нефросклеротическими изменениями в почках (дисметаболическая нефропатия). Клинически и морфологически это согласуется с видом хронического токсического тубуло-интерстициального нефрита, осложненного ХПН (75). Контрольная группа состояла из 20 здоровых самок крыс. Животных из эксперимента выводили на 30-е, 60-е, 90-е и 111-е сутки в камере установки для эвтаназии углекислым газом фирмы VetTech. Начиная с 90-х суток введение ЛПС прекращали, и животным начинали давать испытуемые лечебно-профилактические добавки. Для этого животных с моделью дисметаболической нефропатии разделили на 4 опытные группы. 1-й группе животных в рацион кормления добавляли смесь из нута (20 г/кг массы) и «Бефунгина» (0,05 мл/кг); 2-й группе давали препарат «Канефрон» (0,15 мл/кг); животным 3-й группы смесь из нута и «Бефунгина» и «Канефрон» в тех же количествах. Крыс 4-й группы не подвергали лечению. Добавки и препарат смешивали с кормом, давали животным утром, деля на порции с контролем поедаемости.

До начала эксперимента, а также на 30-е, 60-е, 90-е и 111-е сутки у оглушенных в углекислотной камере животных брали кровь и внутренние органы.

Рис.2. Схема эксперимента на лабораторных животных.

Лабораторное исследование крови животных. У песцов кровь для исследования брали из подкожной вены предплечья в две пробирки, в одну пробирку для стабилизации добавляли 3,8% цитрат натрия в соотношении 1:9, а из крови второй пробирки готовили сыворотку. У крыс кровь брали из желудочков сердца, так же в две пробирки — с цитратом натрия и с активатором свёртывания (для исключения гемолиза) для приготовления сыворотки.

При исследовании клинических показателей проб крови применяли следующие методики:

Подсчет количества эритроцитов с использованием унифицированного метода подсчета в счетной камере Горяева.

Подсчет количества лейкоцитов проводили унифицированным методом в счетной камере Горяева.

Биохимические исследования проводили на автоматическом анализаторе MARS (Швеция).

Определение активности аланинаминотрансферазы (АлАТ) в сыворотке крови проводили унифицированным методом Райтмана-Френкеля. Использовали реактивы "Ольвекс-FL-E" ALT-11 Кат.№: 001.011 100 определений при конечном объеме пробы 6,1 мл.

Принцип метода: а) L-аланин + а-кстоглутарат <Ал АТ> пировино-градная кислота + L-глутамат; б) фотометрическое определение содержания пирувата в пробе на основе реакции с 2,4-динитрофенилгидразином.

Определение активности аспартатаминотрансферазы (АсАТ) в сыворотке крови проводили унифицированным методом Райтмана-Френкеля. С использованием реактивов AST-11 Кат. №: 002.011 определе- • ний при конечном объеме пробы 6,1 мл.

Принцип метода: а) L-аспартат + а-кетоглутарат <АсАТ> оксалоаце- • тат + L-глутамат б) фотометрическое определение содержания оксалоацетата в пробе на основе реакции с 2,4-динитрофенилгидразином.

Коэффициент Ритиса определяли расчетным методом как отношение АсАТ к АлАТ

Определение активности щелочной фосфатазы в сыворотке крови проводили унифицированным оптимизированным кинетическим методом с использованием набора реактивов «Витал-Европа», скомпонованным в соответствии с международными требованиями.

Принцип метода: n-нитрофенилфосфат с водой дает реакцию с образованием п-нитрофенола и фосфата. Количество образовавшегося в единицу времени n-нитрофенола, пропорциональное активности фермента, определяли по измерению оптической плотности образца в единицу времени при длине волны 405 нм. s

Определение концентрации общего холестерина (ОХ) в сыворот-' ке крови проводили унифицированным энзиматическим колориметрическим методом с использованием набора реактивов «Ольвекс-В», и скомпонованным в соответствии с международными требованиями CHOLESTEROL Кат.№: 013.012; CHOLESTEROL Кат.№: 013.022

Принцип метода: При гидролизе эфиров холестерина холестеролэсте-разой образуется свободный холестерин. Образовавшийся и имеющийся в пробе холестерин окисляется кислородом воздуха под действием холесте-ролоксидазы с образованием эквимолярного количества перекиси водорода. Под действием пероксидазы (POD) перекись водорода окисляет хромоген-ные субстраты с образованием окрашенного продукта. Интенсивность окраски пропорциональна концентрации холестерина в пробе.

Определение концентрации холестерина липопротеидов высокой плотности (КС ЛПВП) в сыворотке крови проводили энзиматическим методом с иммуноингибированием без осаждения с использованием набора НГОЕ-холестерин-Витал-05/15 производства фирмы Vital Diagnostic. Регистрационное удостоверение: ФС 01014578/3587-06

Определение концентрации триглицеридов в сыворотке крови проводили энзиматическим колориметрическим методом с использованием набора Триглицериды-Витал-02/12/22 производства фирмы Vital Diagnostic.

Концентрацию холестерина липопротеидов очень низкой плотности в сыворотке определяли расчетным методом по формуле: ХС ЛПОНП = ТГ : 5,

Концентрацию холестерина липопротеидов низкой плотности в сыворотке определяли расчетным методом по формуле: ХС ЛПНП = ОХ - (ХС ЛПВП+ХС ЛПОНП), Коэффициент атерогенности определяли по формуле: КА = (ОХ - ХС ЛПВП) : ХС ЛПВП,

Определяли соотношение ХС ЛПНП : ХС ЛПВП - рассчётно

Определение концентрации креатинина в сыворотке крови проводили унифицированным псевдокинетическим двухточечным методом с использованием реактивов CREATININES Кат. № 004.007 набор реактивов относится к серии "Ольвекс-FL-E", скомпонованным в соответствии с международными требованиями.

Принцип метода: Метод основан на реакции Яффе. Измеряли скорость образования окрашенного комплекса креатинина с пикриновой кислотой в щелочной среде.

Определение концентрации мочевины проводили уреазным фе-нол/гипохлоритным методом с использованием набора Мочевина-Витал-01 производства фирмы Vital Diagnostic.

Определение концентрации общего и прямого билирубина в сыворотке крови проводили унифицированным методом Ендрассика-Ерофа. С использованием реактивов BILIRUBIN-TD Кат.№ 003.012. Метод, использованный в наборе реактивов, относится к серии «Ольвекс-FL-E», отличается от методов, используемых в ряде зарубежных стран, но является унифицированным в России.

Принцип метода: общий билирубин определяется на основе реакции с диазотированной сульфаниловой кислотой, после диссоциации неконъ-югированного (непрямого, свободного) билирубина при участии кофеинового реагента. Для определения содержания конъюгированного (прямого, связанного) билирубина из реакционной смеси исключается кофеиновый реагент. Концентрация неконъюгированного билирубина рассчитывается по разнице концентрации между общим и конъюгированным билирубином.

Определение концентрации общего белка в сыворотке крови проводили унифицированным биуретовым методом. Набор реактивов относится к серии "Ольвекс-FL-E", скомпонованной в соответствии с международными требованиями.

Принцип« метода: белок образует окрашенный комплекс с ионами меди в щелочной среде (сыворотке или плазме крови).

Определение концентрации альбумина в сыворотке крови проводили унифицированным колориметрическим методом с использованием набора Альбумин-Витал производства фирмы Vital Diagnostic.

А/Г коэффициент определяли рассчётно

Дня определения степени эндогенной интоксикации из стабилизированной крови, оставшейся после подсчёта эритроцитов и лейкоцитов, методом центрифугирования при 3000 об/мин. в течение 10 минут, получали плазму. Далее в полученной плазме определяли концентрацию Веществ средней молекулярной массы по методу М.Я.Малаховой (1995). Принцип метода заключается в осаждении крупномолекулярных частиц плазмы крови раствором ТХУ и регистрации спектральной характеристики водного раствора супернатанта при длинах волн 230-290 нм. Для этого к 1 мл надосадочной плазмы добавляли 20 % ТХУ (2:1) и центрифугировали 30 минут при 3000 об/мин. После осаждения белков к 0,5 мл надосадочной жидкости добавляли 4,5 мл дистиллированной воды. Определяли оптическую плотность раствора при длинах волн 230-290 нм против контроля -дистиллированной воды.

Экстинкция измерялась на двулучевом спектрофотометре Сагу 50 Bio. Общее содержание ВСММ определялось по формуле:

Количество ВСММ = Е230 +Е24о+ Е25о+--- +Е29о (усл. ед.)

Лабораторное исследование мочи животных. У песцов мочу собирали при естественном мочеиспускании в поддоны с решётками для исключения попадания каловых масс, а также непосредственно из мочевого пузыря во время забоя.

Сбор мочи у крыс осуществляли в метаболических клетках для грызунов-массой 150-250 гр. фирмы Techniplast. Мочу собирали у крыс до начала эксперимента, на 30-е; 60^е, 90-е и 111-е сутки эксперимента. Анализ мочи проводили на автоматическом анализаторе «Цшсап Э-ЗОО».

Общий анализ мочи включал оценку физико-химических показателей и микроскопическое исследование осадка. В условиях хозяйства химическое экспресс-исследование мочи проводили с помощью1 диагностических полосок фирмы «Лахема» - «ЭЕСА-фан». Данный экспресс-анализ мочи позволяет провести качественное определение кетонов, билирубина, нитритов; полуколичественное определение рН, относительной плотности мочи, белка, глюкозы, крови, уробилина, лейкоцитов. В условиях лаборатории анализ мочи проводили на автоматическом анализаторе «ипБсап 8300».

Микроскопическое исследование нативных препаратов мочевого осадка, полученного при центрифугировании 10 мл мочи в лабораторной центрифуге ЦЛН -2 ТУБ. 375. 4171. 73 в течение 7 мин при 2000 об/мин.

Микроскопию полученного осадка проводили на световом микроскопе с последующим увеличением х120, х400, х900. Отмечали наличие эритроцитов, лейкоцитов, цилиндров, слизи, микроорганизмов, морфологию эпителиальных клеток и структуру неорганизованного осадка.

Методики морфологических исследований органов и тканей подопытных животных. Для светооптического и электронно-микроскопического исследований у животных после забоя в течение 10 мин отбирали внутренние органы (почки и печень) и участок шкурки с области лопатки. Материал для гистологического исследования, полученный после убоя песцов, фиксировали в 10% нейтральном водном растворе формалина в течение 48 часов при комнатной температуре. После окончания фиксации и промывки органов в холодной проточной воде, проводили обезвоживание кусочков исследуемых органов в спиртах восходящей крепости (от 70° до 100°), после чего образцы заключали в парафин по общепринятой методике [Меркулов Г.А., 1969; Ромейс , 1969; Семченко В.В.и др., 2006]. В дальнейшем на роторном микротоме Microm HM 315 изготавливали срезы ткани органов толщиной 2-3 мкм. Срезы внутренних органов окрашивали гематоксилином Эрлиха и водно-спиртовым эозином, Суданом III, пикрофуксином по ван Гизон, ставили ШИК-реакцию. Препараты заключали под покровные стекла в полистирол.

Изучение микроструктурных препаратов и их фотографирование проводили на световом микроскопе «Axio Imager AI» (Carl Zeiss, Германия). Изображение выводили на экран компьютерного монитора с помощью видеокамеры AxioCam MRc 5. Обработку изображения и проведение морфометрических измерений производили в программе AxioVision Rel.4.6. Морфометрическое исследование было проведено в соответствии с принципами системного количественного анализа [Автандилов Г.Г., 1996, 2002].

Полученные после аутопсии кусочки органов для электронно-микроскопического исследования помещали в 2,5% раствор глутарового альдегида на буфере Хенкса при +4°С. Время префиксации составляло 3 часа. По завершении префиксации препараты обрабатывали по следующей схеме [Б.Уикли, 1975; A.A. Миронов, Я.Ю.Комиссарчик, 1994]:

1. Отмывка от глутарового альдегида в среде Хенкса, две смены по 15 мин.

2. Постфиксация в 1%-ном растворе четырехокиси осмия на среде Хенкса с pH 7,4 - 3 часа

3. Ополаскивание в том же буфере 3*5 минут

4. Обезвоживание в 50% ацетоне 3x15 минут

5. Обезвоживание в 70% ацетоне 3x15 минут

6. Обезвоживание в 90% ацетоне 3x15 минут

7. Обезвоживание в 100% ацетоне 4x30 минут

8. Пропитка кусочков в смеси эпоксидная смола (все компоненты) -ацетон (1:1) - 12 часов

9. Выветривание кусочков от ацетона — 15 минут

10. Заливка в плоские ванночки в смесь эпоксидных смол

11. Полимеризация блоков при 48°С - 2 часа

12. Окончательная ориентация кусочков в ванночках

13. Полимеризация блоков при 60°С - 48 часов

Полутонкие и ультратонкие срезы изготавливали на ультратоме «LKB III» (Sweden) традиционным способом. Полутонкие срезы окрашивали последовательно двумя красками, 1-я из которых содержала метиле-новый синий и азур II, 2-я - основной фуксин. Ультратонкие срезы контрастировали уранилацетатом и цитратом свинца.

Фотографирование подготовленных препаратов органов проводили на электронном микроскопе «JEOL JEM-100 СХ П».

На срезах окрашенных гематоксилином и эозином определяли следующие морфометрические характеристики. В почках: объемную долю (ОД) интерстиция мозгового и коркового слоёв, %; среднюю площадь кагу пилляров клубочка (SKK), мкм"; среднюю общую площадь клубочка (S0K), мкм ; капсулярное пространство как отношение S0K к SKK, усл.ед., канальце-вый индекс как отношение толщины стенки канальца к диаметру его просвета, усл.ед., площадь ядер эпителия проксимальных и дистальных канальцев (SflnK, SWK), мкм2, % клубочков с признаками склерозирования (на срезах окрашенных пикрофуксином по Ван Гизон). В печени: объемные доли (ОД), %: центральных вен, триад, соединительной ткани, гепатоци-тов, клеток Купфера, синусоидов, среднюю площадь гепатоцитов (Srn) и л клеток Купфера (Skk), мкм ; а также % двухъядерных гепатоцитов.

Морфометрическое исследование было проведено в соответствии с принципами системного количественного анализа (Автандилов Г.Г., 1996, 2002).

Всего было проведено 450 гистологических, 1143 гистохимических и 198 электронно-микроскопических исследований.

Методы статистической обработки результатов. Достоверность полученных результатов, основных научных положений и выводов, подтверждается достаточно большим объемом проведенных исследований.

Для обработки полученных результатов использовали общепринятые статистические методы, а достоверность различий между контролем и опытными группами определяли по критерию Стьюдента (26, 74, 109), при помощи пакета программ 81а1з1лса 6.0.

Достоверность различия показателей, определенных параметрическими и непараметрическими методами, считалась подтвержденной при уровне значимости «р» не выше 0,05.

Учитывали значения V превышающие значения 1а, взятые из таблицы В.Ю. Урбаха «Статистический анализ в биологических и медицинских исследованиях». Нулевая гипотеза отвергается с вероятностью 0,95, расхождения между значениями до лечебного воздействия и значениями после него считали значимыми (достоверными). Если значения Г < Х.а, то, нулевая гипотеза не отвергается, расхождения между значениями до лечебного воздействия и значениями после него считали недостоверными.

Список литературы диссертационного исследования кандидат ветеринарных наук Мотылина, Наталья Сергеевна, 2009 год

1. Абдуллаев С.П. Структурно-функциональные особенности печени при экспериментальном поэтапном уменьшении массы почек. Автореф. дисс. . канд. мед. наук. Ташкент. — 1989. - 16 с.

2. Автандилов Г.Г. Основы количественной патологической анатомии / ЗбГ.Г.Автандилов. М.: Медицина, 2002. - 240 с.

3. Агаев М.М. Функциональное состояние паращитовидных желез и ли-пидного обмена у больных хронической почечной недостаточностью / М.М. Агаев, М.А. Шиндян, Г.С. Хачатурова, С.А. Ахундова // Азерб. мед. журнал. 1989. - №4. - С. 16-21.

4. Аксенова В.М. Лабораторная диагностика синдрома эндогенной интоксикации. Методические рекомендации. // В.М. Аксенова, В.Ф. Кузнецов, Ю.Н. Маслов, В.В. Щекотов, А.П. Щекотова. Пермь, 2005. - 35 с.

5. Апрайонг С. Дифференциальная диагностика заболеваний почки / С. Апрайонг//Ветеринар. 1999. - №1. - С. 14-25.

6. Арутюнян В.М. Ошибки диагностики поражений почек при заболеваниях внутренних органов / В.М. Арутюнян, A.C. Багдасарян. Ереван: Айстан, 1996.-212 с.

7. Архипов В.В. Оценка сохранности функционирующей паренхимы почки / В.В. Архипов // Нефрология. 2002. - №2. - С.63-66.

8. Бабаева А.Г. Морфологические эквиваленты лимфоцитарно-эпителиального взаимодействия при восстановительных процессах в почке и печени / А.Г. Бабаева, В.Л. Шахнамов // Арх.патол. — 1998. т. 60. - №5.-С. 58-61.

9. Байнбридж Д. Нефрология и урология собак и кошек / Д. Байнбридж, Д.

10. Элиот.^М.: Аквариум ЛТД, 2003.-272с. „

11. Балкаров И.М. Клиника, диагностика и лечение хронического тубуло-интерстициального нефрита / И.М. Балкаров, М.В. Лебедева, Н.В. Щербак // Клин, фармакология и терапия. 2000. — т. 9. - №5. - С. 81-85.

12. Берестов В.А. Лабораторные методы оценки состояния пушных зверей / В.А. Берестов. Петрозаводск: Карелия, 1981. — 151 с.

13. Богдан Г.М. Некоторые данные о состоянии печени у больных с хронической почечной недостаточностью / Г.М. Богдан // Печень, стресс,экология: Материалы 1 Междунар. симп: 23-25 мая 1994 г., Иркутск. — Новосибирск. 1994. - С. 76-80.

14. Бонне Ж-Mt Патофизиология:почечной недостаточности / Ж.М. Бонне, Ж.М. Кадоре // Ветеринар. 1998. - №9. - С.4-13.

15. Братюха С.И. Болезни пушных зверей / С.И. Братюха, А.Ф. Евтушенко, A.A. Швецов. Киев: Урожай; 1987. — 181 с.

16. Быков В.Л. Цитология и общая гистология. Функциональная морфология клеток и тканей человека / В.Л. Быков. — С-Пб.: СОТИС,. 1998. — 520 с.

17. Валькович Э.И. Проявления адаптационно-приспособительных процессов в эпителии клубочкового фильтра почек / Э.И. Валькович. // Арх. анатомии, гистологии и эмбр. 1990. - т. 99. — №7 — С.83-86.

18. Велып У. Введение в цитологию и гистологию животных / У. Велын, Ф. Шторх. М.: Мир, 1976. - 264 с.

19. Волкова 0;В: Основы гистологии с гистологической техникой / 0:В. Волкова, ЮТКГГЕлецкийГ-МТМедицина, 1982. 318 с.

20. Воронцов А.А. Лечение почечной недостаточности у кошек и собак перитонеальным диализом / A.A. Воронцов // Ветеринария. 2007. - № 7. - С. 60-61ю

21. Выриков К.А. Функционально-морфологические особенности проксимальных извитых канальцев и интерстиция почек при хронической почечной недостаточности и ее экспериментальном моделировании. Дисс. .канд. мед, наук. — СПб. 1993. - 184 с.

22. Ганзен Т.Н. Морфологическая характеристика нефросклероза: электронно-микроскопическое, иммуногистохимическое и спектрофото-метрическое исследование / Т.Н. Ганзен, С.М. Секамова // Арх. патологии.- 1994. №6. - С. 16-21.

23. Гевондян Т.А. Способ иссечения кусочков» с сохранением ориентации гистоструктур органов для электронно-микроскопических исследований / Т.А. Гевондян, Г.Г. Автандилов // Арх. патологии. 1982. - т. 44.-№6.-С. 66-68.

24. Глазун JI.O. Допплерографическая оценка степени выраженности хронической почечной недостаточности у больных хроническим гло-мерулонефритом / JI.O. Глазун, М.И. Петриченко, Е.В. Полухина // Эхография. 2002. - т. 3. - №2. - С. 165-171.

25. Глотов Н.В. Биометрия / Н.В. Глотов, Л.А. Животовский, Н.В. Хова-нов, Н. Н. Хромов-Борисов. Под ред. М. М. Тихомировой. JI. : Ленинград. 1982.-264 с.

26. Гончаров H.A. Состояние кожи (функциональное и морфологическое) и особенности клинического течения дерматозов при заболеваниях почек. Автореф. дисс. Д-ра. мед. наук. — 1983. -27 с.

27. Грибель Н.В. Шрот чаги при расстройствах пищеварения у телят (Бефунгин в профилактике диспепсии) / Н.В. Грибель, В.Г. Пашинский, С.В. Герман // Ветеринария. 1993. - № 10. - С. 50-51.

28. Данилов Е.П. Болезни пушных зверей / Е.П. Данилов, А.И. Майоров, В^АТ Чйжов и дрГ^МТ Колос, 19847^33 6~сГ

29. Джавад-Заде М.Д. Динамика функционального состояния печени при хронической почечной недостаточности по данным радиоизотопногоисследования? / М.Д. Джавад-Заде, TI.C. Мальков, А.К. Бабаев и- др; // Урология и нефрология. — 1980; №3-С. 51-55.

30. Джавад-Заде М.Д. Хроническая почечная недостаточность / М.Д. Джавад-Заде-М.: Медицина, 1989. — 336 с:

31. Дзурик Р. Патогенез; метаболических нарушений при почечной, недостаточности / Р. Дзурик, В. Спустова // Чехословацкая? медицина. — 1984. т.7. - №4. - С. 207-217. ■

32. Досаев Т.М. Морфометрия в электронной' микроскопии биологических объектов / Т.М. Досаев, A.A. Абдрахманов- Алма-Ата, 1981. — 28 с.

33. Дроздова Е.Г. Морфология печени !■ пушных зверей в сравнительном аспекте / E.F. Дроздова // Материалы всесоюзшауч.конф.морфологов.-Омск. 1992. - ч.1. - С. 157-160.

34. Дубынин T.JL Восстановительные процессы,при экспериментальном нефросклерозе. Автореф.дисс. . канд. мед. наук.,-М. 1965. - 11 с.

35. Ежков В.О. Совершенствование диагностики и профилактики гепатоза норок в условиях клеточного содержания. Автореф. дисс------канд.ветерин. наук. — Екатеринбург. 1995. - 17 с.

36. Ермоленко В.М. Хроническая почечная недостаточность: некоторые вопросы патогенеза и лечения / В ;М. Ермоленко // Терапевт, арх. — 1982;- №7. С. 114-118.

37. Закиров Д.Ф. Функциональное состояние печени при терминальной почечной недостаточности / Д.Ф. Закиров, Р:Н. Акалаев и др: // Вопр. трансплантологии и иммунокоррекции. Ташкент. - 1991. - С.30-31.

38. Зверев К.В. Клиническое значение почечного функционального резерва / К.В. Зверев, И.Ш. Кутырина // Клинич.медиц. 1995. - т. 73. -№3. - С. 99-102.

39. Калинин А.П. Вторичный гиперпаратиреоз при хронической почечной недостаточности / А.П. Калинин, И.А. Иванов, Е.О. Щербакова Н Терапев.арх. 1986. - № 8. - С. 143-148.

40. Камышников B.C. Справочник по клинико-биохимическим исследованиям и лабораторной диагностике / B.C. Камышников. — М.: МЕДпресс-информ, 2006. 920 с.

41. Касьяненко И.И. Патологическая анатомия болезней мочеполовой системы сельскохозяйственных животных: Учебное пособие / И.И.Касьяненко, В.Э. Прусак-Глотов. М.: МГАПБ, 1996 - 30 с.

42. Клечиков В.В. Сравнительный структурный анализ печени и почек при экспериментальной хронической почечной недостаточности / В.В.Клечиков, О.Н. Береснева // Бюл. эксп. биол. и медиц. 1993. - 115. - №5. - С.546-548.

43. Ковтун Т.И. Изменения почечных канальцев при гломерулонефрите: дис. канд. мед. наук. М. - 1983. - 185 с.

44. Команденко М.С. Изменения сосудов при заболеваниях почек / МХЖоманденко, Л.иГАниконова, С.БГМальцев // Тезисы докладов I съезда нефрологов России. Казань, 1994. — С. 12.

45. Команденко Н.С. Основные механизмы развития тубулоинтерстици-альных повреждений при болезнях почек /Н.С. Команденко, Г.Д. Шо-стка // Нефрология. 2000. - т.4. - №1. - С. 10-17.

46. Коровина H.A. Тубуло-интерстициальный нефрит: морфофункцио-нальная диагностика и лечение / H.A. Коровина, И.Н. Захарова // Рос.педиатр. ж-л. 1998. - т. 6. - №1. - С.22-26.

47. Кутепов А.Ю. Аккумуляция ДАФС-25 и его лечебное действие при гипоселеновых элементозах животных: автореф. дис. .канд. ветерин. наук. Саратов, 2003. - 24 с.

48. Лилли Р. Патогистологическая техника и практическая гистохимия / Р. Лилли- М.: Мир, 1969. 646 с.

49. Логинов A.C. Клиническая морфология печени / A.C. Логинов, Л.И. Аруин. М.: Медицина, 1985. - 240 с.

50. Лоншакова К.С. Морфофункциональные основы регенерационной терапии повреждений печени, билиарной системы, почек и желудка лекарственными средствами природного происхождения: автореф. дис. .д-ра биол. наук. Улан-Удэ, 1999. 52 с.

51. Лопаткин H.A. Развитие почечной недостаточности при хроническом пиелонефрите / H.A. Лопаткин, А.П.' Данилков // Пленум Правления Всерос. общества урологов. — М. 1996. - С. 171-172.

52. Луппа X. Основы гистохимии / X. Лупа. М.: Мир, 1980. - 343 с.

53. Маждраков Г. Лекарственная болезнь / Г. Маждраков, П. Попхри-стов. София: Медицина и физкультура, 1976. - 622 с.

54. Меркулов Г.А. Курс патолого-гистологической техники / Г.А. Меркулов. Л:: Медицина, 1969. - 422 с.

55. Минлин Р.Б. Болезни почек / Р.Б. Минлин. JI.: Медицина, 1990. -159 с.62: Миронов A.A. Методы электронной микроскопии в биологии и медицине: Методическое руководство. / A.A. Миронов, Я.Ю. Комиссар-чик, В.А1. Миронов. СПб.: Наука, 1994. - 400 с.

56. Мишнев О.Д. Печень и почки при эндотоксинемии / О.Д; Мишнев, А.И.Щеголев, H.JI. Лысова и др. — М.: Виртуальная хирургия, 2003. -212 с.

57. Мухин И.В. Вторичная профилактика нефрогенной дислипопротеи-демии в эксперимент и клинике / И.В. Мухин // Вестник гигиены и эпидемиологии. 2000. - Т. 4. - № 2. - С. 236-238.

58. Мяделец О.Д. Морфофункциональная дерматология / О.Д. Мяделец. М.: Медицинская литература, 2006. — 752 с.

59. Неверов Н.И. Гиперлипидемия и гломерулосклероз при нефропати-ях: клинико-морфологические сопоставления / Н.И. Неверов, A.A. Иванов // Терапевтический архив: 1994. - Т. 66. - № 7. - С.73-76.

60. Непомнящих Д.Л. Биопсия печени: Патоморфогенез хронического гепатита и цирроза / Д.Л. Непомнящих, C.B. Айдагулова, Г.И. Непомнящих. М.: Издательство РАМН, 2006. - 368 с.

61. Нестеров Д.В. Патоморфологический анализ биоптатов почки при хроническом гломеруло- и тубулоинтерстициальном нефрите: дис: . канд. мед. наук. — Новосибирск, 19977^200~с^

62. Нестеров Д.В. Функциональная способность почек, при различной выраженности интерстициального склероза / Д.В. Нестеров // Новыеметоды диагностики, лечения^ заболеваний и управления в медицине. -Новосибирск 1997. - С. 38-39.

63. Николаев А.Ю. Особенности поражений почек при заболевании печени: автореф. дисс. канд. мед. наук. 1978. - 20 с.

64. Ниманд Х.Г. Болезни собак: практическое руководство для ветеринарных врачей / Х.Г. Ниманд, П.Ф. Сутер. М. : Аквариум, 19981I816 с.

65. Новиков Д.А. Статистические методы в медико-биологическом эксперименте (типовые случаи) / Д.А. Новиков; В.В. Новочадов, Волгоград: Изд-во ВолГМУ, 2005. 84 с.

66. Новочадов В.В. Патология липидного обмена при эндотоксикозе: Автореф. дис. д-ра мед. наук. Волгоград, 2001. - 35 с.

67. Новочадов В.В. Эндотоксикоз: моделирование и органопатология: монография /В.В. Новочадов, В.Б. Писарев. — Волгоград: Изд-во ВолГМУ, 2005. 240 с.

68. Носова Н.Г. Методика! изготовления гистологических препаратов кожи норок / Н.Г. Носова // Сб. науч. тр. НИИПЗК. 1968.- т.7. - С.42-45.

69. Пальцева Е.А. Влияние иммуносупреесоров на ремоделирование внеклеточного матрикса при экспериментальных нефропатиях / Е.А.Пальцева, О.П. Гладских, A.A. Иванов // Арх.патол. 2002. - 64. -№4. - С.31-34.

70. Пашкар А. Субмикроскопические структуры клеток и тканей в норме и патологии, их физиологическое и патологическое значение / А. Пашкар, Ш.А. Бо- М.: Медицина, 1962. 472 с.

71. Плоткин В.Я. Гломерулонефрит и роль протеинурии в развитии его клинико-морфологических проявлений: дис. . д-ра мед. наук. Д., 1985.-359 с.

72. Половинкин JT.B. Инструкция по определению веществ средней молекулярной массы и продуктов перекисного окисления белков в токсикологическом эксперименте / JI.B. Половинкин, С.В. Ткачев, Т.И. По-ловинкина и.др. Респ.Беларусь: МинЗрав, 2005. 11 с.

73. Поспишиль Ю.А. Патоморфология поражений почек, обусловленных нестероидными противовоспалительными преператами / Ю.А. Поспишиль // Арх. патологии. 1995. - т. 57. - №5. - С. 70-73.I

74. Потапова A.B. Клинико-функциональные особенности первичного и вторичного тубуло-интерстициального нефрита: автореф. дис. . канд. мед. наук. 1989. - 24 с.

75. Клар С. Почки и гомеостаз в норме и при патологии. / С. Клар, Э.Белло-Ресе, А. Робсон. -М.: Медицина, 1987.-445 с.

76. Родионова A.A. Морфологические и гистохимические изменения в коже при уремии: дисс. канд. мед. наук. Харьков, 1968. - 250 с.

77. Родионова, A.A. К морфологии кожи при< азотемической уремии / A.A. Родионова // Здравоохранение Казахстана. — 1970. №5. - С. 41-42.

78. Румянцев. А.М: Факторы, определяющие выраженность уремической. интоксикации1 в процессе развития хронической почечной недостаточности / A.M. Румянцев // Терапев. арх. — 1991. №6. - С.71-75.

79. Рябов С.И. Нефрология: .Руководство для врачей / О.И. Рябов: -СПб.: СпецЛит, 2000. 672 с.

80. Савченко Р1П. Метаболические нарушения функции печени1 у. больных хронической почечной недостаточностью / Р.П. Савченко // Тез. III всесоюзного съезда врачей-лаборантов. М., 1985. — С.132-134.

81. Сапожников A.F. Гистологическая и микроскопическая техника: Руководство / А.Г. Сапожников, А.Е. Доросевич. Смоленск: САУ, 2000.- 476 с.=

82. Семченко В.В: Гистологическая техника: учебное пособие / В.В. Семченко, С.А. Барашкова, В.Н. Ноздрин, В Н. Артемьев. Омск-Орел: Омская областная типография, 2006. — 290 е.

83. Серов В.В. Морфологическая диагностика заболеваний печени / В.В. Серов. М.: Медицина, 1989 - 336 с.

84. Серов В.В. Ультраструктурная патология / В.В. Серов, B.C. Пауков.- М:: Медицина, 1975 432 с. .

85. Серов В.В. Ультрамикроскопическая структура- нефрона и ее значе-~—ние в патологии-/ В:ВгСеров7/^Арх. патологии. 19627-~№Т07~СГЗ-18.

86. Серов-В.В. Соединительная ткань: Функциональная морфология и общая патология /В.В. Серов, А.Б. Шехтер. М.: Медицина, 1981. -312 с.

87. Слугин B.C. О профилактике незаразных болезней пушных зверей / B.C. Слугин // Кролиководство и звероводство. 2004. - № 4. - С. 2629.

88. Смирнов A.B. Дислипопротеидемия как один из неиммунных механизмов прогрессирования склеротических процессов в почечной паренхиме / A.B. Смирнов // Нефрология. 1997. - 1. - №2. - С. 7-12.

89. Суворова Т.С. Клинико-морфологические параллели тубуло-интерстициального нефрита / Т.С. Суворова, К.В. Вольвич // Фундаментальные и прикладные проблемы современной медицин. Новосибирск, 2000. - С. 114-115.

90. Тареева И.Е. Тубулоинтерстициальные нефропатии / И.Е. Тареева //

91. Рус. мед. журнал. 1998. - т. 6. - №1. - С. 22-26.

92. Тареева И.Е. Диагностика и лечение болезней почек / И.Е. Тареева / 2-е изд. 2002.-541 с.

93. Техвер Ю.Т. Гистология кожного покрова домашних животных / Ю.Т. Техвер. Тарту, 1971. - 45 с.

94. Трушина Э.М. Морфо-функциональные изменения почек крыс при алиментарных поражениях печени: автореф. дисс. . кад. мед. наук. -1984.-23 с.

95. Уикли Б. Электронная микроскопия для начинающих / Б. Уикли. -М.: Мир, 1975.-324 с.

96. Урбах В.Ю. Статистический анализ в биологических и медицинских исследованиях / В. Ю. Урбах. М: Медицина, 1987. - 378 с.

97. Уша Б.В. Ветеринарная гепатология / Б.В. Уша. — М.: Колос, 1979. -263 с.

98. Уша Б.В. Болезни печени собак / Б.В. Уша, И.М. Беляков. М.:1. ПАЛЪМА"пресс720027- 3 6с.

99. Уша Б.В. Пропедевтика внутренних незаразных болезней / Б.В. Уша, И.М. Беляков. М.: Квадрат-С, 1998. - 480 с.

100. Холод В.М. Сравнительная оценка патоимунобиохимических проявлений при заболеваниях почек у крупного рогатого скота и свиней / В.М. Холод, В.А. Пушняков, В.В. Вантеев // Известия Академии аграрных наук Республики Беларусь. 1996. - № 1. — С. 76-78.

101. Чумакова О.В. Особенности течения сочетанных болезней почек и печени у детей: дисс.дра. мед. наук. 1999. - 299 с.

102. Шантанова JI.H. Морфофункциональная характеристика повреждений почек и их фармакотерапия Фитотерапия в опытах на белых крысах и мышах.: автореф. дис. .д-ра биол. наук. Улан-Удэ, 1998. 35 с

103. Шахбазян С.Н. Динамика функциональных изменений печени по стадиям хронической почечной недостаточности при разных формах почечной патологии. Метод. Рекомендации / С.Н. Шахбазян. Ереван. - 1979.-8 с.

104. Шахбазян С.Н. Изменения функциональных показателей печени5 в зависимости от стадии хронической почечной недостаточности и от характера поражения почек: автореф. дисс. канд. мед. наук. 1983. - 26 с.

105. Школа Т.С. Морфо-функциональные изменения при мочекаменной болезни у норок: дисс. канд. вет. наук. М., 2000. - 161 с.

106. Шпигель А.Н. Влияние некоторых факторов на характер течения и темпы прогрессирования хронической почечной недостаточности убольньссспоражениямипочек различной этиологии / AJi. Шпигель // Тер.архив. 1992. - т. 64. - № 11. - С.59-66.

107. Шулутко Б.И. Вторичные нефропатии: клинико-морфологическое исследование / Б.И. Шулутко. JL: Медицина, 1987. - 207 с.

108. Шулутко Б.И. Гепаторенальный синдром / Б.И. Шулутко. Д.: Медицина, 1983.-296 с.

109. Шулутко Б.И. Нефрология 2002. Современное состояние проблемы / Б.И. Шулутко. СПб.: Ренкор, 2002. - 780 с.

110. Яргин С.В. Морфогенез нефросклероза: дисс. кан. мед.наук.1986.- 183 с.

111. Atkins R.C. Mononuclear cell infiltration and its correlation with interstitial injury and renal failure / R.C. Atkins, H.Y. Lan, D.J. Nikolic-Paterson // Xllth Intern, cong. of Nephrol. Irusalem, Israel, June 13-18, 1993: Abstracts.- 1993.-P. 550.

112. Bohle A. The long-term prognosis of the primary glomerulonephritidies. A morphological and clinical analysis of 1747 cases / A. Bohle, M. Wehrmann, O. Bogenschutz // Pathol. Res. Pract. 1992. - №188. - P. 908924.

113. Careddu P. Liver-kidney relation in the nephrotic syndrome / P. Careddu // Pediatría (Napoli). 1957. - Vol. 65. - P. 112-133.

114. David H. Quantitative ultrastructural date of animal and human cells / H. David-Leipzig, 1977. 542 p.

115. Dellmann H.-D. Textbook of veterinary histology / HJ-D. DellmannPhiladelphia: Lea & Fabiger, 1993. 414 p.

116. Faludi G. Liver changes in kidney disease / G. Faludi, P. Siegler // Z. Gesamte. Inn. Med. 1955. Vol. 10. - P. 874-878.

117. Fine L.G.-Mechanisms of tubulointertitial injury in progressive renal diseases/ L.G. Fine, A.C.M. Ong, J.T. Norman // Europ: J. Clin. Invest. 1993. -Vol. 23.-P. 259-265.

118. Fitzgerald S.D. Diagnosing the underlying cause of end-stage kidney disease in a Shar Pei puppy / S.D. Fitzgerald, W. Van Alstine // Veter.Med. -1990. Vol. 85(4). - P. 332-338.

119. Giatras I. Effect, of angiotensin-converting enzyme inhibitors on the progression of nondiabetic, renal disease: a meta-analysis of randomized trials / I. Giatras, J. Lau, A.S. Levey // Ann Intern Med. 1997. - № 127. - P. 337345.

120. González-Santiago L. Regulation of endothelin synthesis by. extracellular matrix in human endothelial cells / L. González-Santiago, S. López-Ongil,

121. M. Griera et al. // Kidney Int: 2002. - Vol. 62. - P.537-543.

122. Han W.K. Kidney Injury Molecule-1 (KIM-1): a novel biomarker for hu-—man^renahproximaLtubule~injury7 W;K7Man, V. Báilly^ R. Abichandani //

123. Kidney Int: 2002 . -Vol. 62. - 237-244.

124. Hori M. Role of hepatic arterial blood flow and hepatic nerves on renal circulation and function. II. Chronic studies in the dog / M. Hori, W.G. Austen, W.V. McDermott //Ann. Surg. 1965. - Vol. 162(6). PI 949-958.

125. Jafar T. H. Angiotensin-Converting Enzyme Inhibitors and Progression of Nondiabetic Renal Disease / T. H. Jafar, C.H. Schmid, M. Landa et al. // Ann. of Int. Med. Vol. 135. - № 2. -P. 73-87.

126. Jones W.K. Chronic renal failure in yong Old English Cheepdogs' / W.K.Jones, T.M. Jones, W. Chen // N. Z. veter. 1990. - Vol. 38. - № 3. -P.118-121.

127. Kenaway A.A. Experimental laparascopy and instrumentation in dogs / A.A. Kenaway // Assiut veter. med. J. 1998. - Vol. 39. - № 78. - P.51-62.

128. Klahr S. Comparative effects of ACE inhibition and angiotensin II receptor blockade in the prevention of renal damage / S. Klahr, J. Morrissey // Kidney Int. Suppl. 2002. - Vol. 82. - P. 23-26.

129. Kopczewski A. Zawartosc metali w tkankach lisow i ich wplyw na zdrowic i reprodukcje / A. Kopczewski, J. Falandysz, H. Lorenc, M. Wroblewska // Hodowca drobn. Zuwent. 1988. - Vol. 36. - № 3. - S. 4-6.

130. Kuncio G.S. Mechanisms of tubulointerstitial fibrosis / G.S. Kuncio, E.G. Neilson, T. Haverty // Kidney Int. 1991. - № 39. - P. 370-381.

131. LaBrecque D. Liver regeneration: a picture emerges from the puzzle / D. LaBrecque // Am.J.Gastroenterol. 1994. - Vol.89 (Suppl). - P.86-96.

132. Li Moli S. Hepatic participation in nephrotic syndrome of childhood. (Functional and histological studies) / S. Li Moli, G. Pisconti // Minerva Pe-diatr.-1961.-Vol. 13.-P. 934-945.

133. Mezzano S.A.Tubular NF-kappaB and AP-1 activation in human proteinuric renal disease / S.A. Mezzano, M. Barria, M.A. Droguett et al. // Kidney1.tr--200 It—Vol-60"№47^rprl3 66-13 IT. "**

134. Mezzano S.A. Angiotensin II and renal fibrosis / S.A. Mezzano, M.Ruiz-Ortega, J. Egido // Hypertension. 2001. - Vol. 38 (3 Pt 2). - P. 635-638.

135. Moqrhead'J.F. Lipids and pahogenesis of kidney disease / J.F. Moqrhead 11 Nephrology (XI Internatinal congress of nephrology) / M. Hatano. Tokyo: Springer-Verlag, 1991.-Vol. l.-P. 166-177.

136. Nath K.A. Tubulointerstitial changes as a major determinant in the progression of renal damage / K.A. Nath // Amer. J. Kidney Dis. 1992. - Vol. 20.-P. 1-17.

137. New perspectives in chronic renal insufficiency // American journal of kidney diseases Philadelphia. 2000 - Vol.36. - №6. - suppl. 3.

138. Nowakowicz-Debek B. Residues of volatile gaseous substances in the tissues of polar foxes / B. Nowakowicz-Debek, G. Buszewicz, A.Chmielowiec-Korzeniowska et al. // Med. weter. 2007. - Vol.63 - № 6. - P. 688-691.

139. Nowicki M. Biopsja nerek u psow i kotow / M. Nowicki, A. Depta //

140. Medycyna Wet.-2001.-Vol. 57.-№2.-P. 97-101.t

141. Ong A.C.M. Loss of glomerular function andftubulointerstitital fibrosis: Cause or effect / A.C.M. Ong, L.G. Fine // Kidney Int. 1994. - Vol.45. -P. 345-351.

142. Osborne C.A. Clinical evaluation of needle biopsy of the kidney and its complications in the dog and cat / C.A. Osborne // J.A.V.M.A. Vol. 158. -№7. -P.1213-1228.

143. Pak J.T. Scanning electron microscopic study on collagen fibrils in the mink dermis during the hair cycle and growth / J.T. Pak, F. Nakamura, K.Tacenouchi, K. Kondo // Anim. sci. technol. (Jpn.). 1994. - Vol.65. -№12. -P.1111-1118.

144. Platt R. Structural and functional adaptation in renal failure / R. Piatt // Br. Med. J. 1952. - Vol. 28. - P. 1372-1377.

145. Ren Y. Role of mesangial cells and gap junctions in tubuloglomerular feedback / Y. Ren, O.A. Carretero, J.L. Garvin // Kidney Int. 2002. -Vol.62.-P. 525-531.

146. Seger T. Nierenbiopsie bein Rind / T. Seger, J. Behage, C. Schulze // Der practische Tierarst. 1995. - № 10. - P. 894-904.

147. Slauson D.O. Comparative Pathology of Glomerulonephritis in Animals / D.O.Slauson, R.M. Lewis // Vet. Pathol. 1979. - №16. - P. 135-164.

148. Shuster S. Dermatology in internal medicine / S. Shuster Oxford ets., 1979.-290 p.

149. The Kidney in>liver disease / Ed. By M.Epstein. 2-nd ed. - 1983. -XXII.-6-18 p.

150. Wheeler D.C. Receptor mediated binding of human low density lipopro-tein^(LDL) ~ to rat"mesangial 15ell^in^itfcT7"DTCrWHeeler, J7Persaud7 DT Kingstone et al. // Kidney Int. 1989. - Vol. 35. - P.439.

151. Zeisberg M. Role of fiboblast activation in inducing interstitital fibrosis / M.Zeisberg, F. Strutz, G.A. Miller // J. Nephrol. 2000. - Vol. 13 (suppl. 3). -P. 111-120.

152. Zhou J. Experimental Studies on Pathogenesis of Endotoxin-induced Acute Renal Failure / J. Zhou, L. Wu // Acta veter. zootechn. sinica. 2005. - Vol. 36, - № 3. - P. 283-287.

153. Zollinger H. Renal pathology in biopsy / H. Zollinger, M. Mihatsch -Springer-Verlag, Berlin, 1978. 684 p.

Обратите внимание, представленные выше научные тексты размещены для ознакомления и получены посредством распознавания оригинальных текстов диссертаций (OCR). В связи с чем, в них могут содержаться ошибки, связанные с несовершенством алгоритмов распознавания. В PDF файлах диссертаций и авторефератов, которые мы доставляем, подобных ошибок нет.