Мутагенная и антимутагенная активность крови и ее компонентов у человека и животных тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, кандидат биологических наук Кошпаева, Елена Святославовна

• Кошпаева, Елена Святославовна
• кандидат биологических наук
• 2001

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Кошпаева, Елена Святославовна

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Основные функции крови человека и животных.

1.2. Факторы и процессы, обеспечивающие мутагенный потенциал крови.

1.2.1. Экзогенные факторы, обеспечивающие мутагенный потенциал крови.

1.2.2. Эндогенные вещества-мутагены крови.

1.2.3. Свободнорадикальные процессы в организме как источник мутагенных активных форм кислорода.

1.3. Факторы крови, способные формировать антимутагенный потенциал крови

1.3.1. Метаболиты-антимутагены крови.

1.3.2. Антиоксидантные системы крови - элемент защиты генома организма.

1.3.3. Комплексообразуюгцая способность крови в формировании антимутагенеза.

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. Характеристика исследуемых биокомпонентов и индукторов мутаций.

2.1.1. Биокомпоненты крови человека и животных.

2.1.2. Индукторы мутаций — тиофосфамид и этилметансульфонат.

2.2. Методы регистрации генетической активности крови и ее компонентов.

2.2.1. Метод регистрации генных мутаций в тесте Эймса.

2.2.2. Метафазный метод изучения хромосомных и хроматидных аберраций.

2.3. Статистическая обработка результатов.

2.4. Методы изучения некоторых механизмов генетической активности крови и ее компонентов.

2.4.1. Определение комплексообразования мутагенов с биокомпонентами.

2.4.2. Регистрация прооксидантных и антиоксидантных свойств биокомпонентов.

2.4.2.1. Модельные системы генерации активных форм кислорода.

2.4.2.2. Метод оценки антиокислительной активности веществ по ингибированию пе-рекисного окисления желточных липопротеидов.

2.4.2.3. Хемилюминесцентный метод определения окислительного метаболизма пери-тонеальных макрофагов.

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

3.1. Кластогенная активность крови и ее компонентов в системе Crépis capillaris

3.1.1. Кластогенная активность крови человека и животных.

3.1.2. Кластогенный эффект плазмы крови человека и животных.

3.1.3. Индукция мутаций белками крови человека и животных.

3.1.4. Кластогенный эффект диализата сыворотки крови человека.

3.2. Антикластогенная активность крови и ее компонентов у человека и животных в тест-системе Crépis capillaris.

3.2.1. Антикластогенный эффект крови человека и животных в зависимости от индуктора мутаций и условий обработки.

3.2.2. Антикластогенная эффективность плазмы крови человека и животных в зависимости от индуктора мутаций и условий обработки.

3.2.2.1. Модификация мутагенного эффекта ТФ и ЭМС сывороточным альбумином человека и животных в зависимости от условий обработки.

3.2.2.2. Защитный эффект у-глобулина человека и животных в зависимости от условий обработки.

3.2.3. Протекторный эффект белков крови человека и животных в зависимости от индуктора мутаций и условий обработки в тест-системе Crépis capillaris.

3.2.4. Антимутагенная активность диализата сыворотки крови человека в условиях ЭМС-индуцированного мутагенеза, в тест системе Crépis capillaris.

3.3. Регистрация активности компонентов крови путем учета генных мутаций в тесте Эймса.

3.4. Изучение некоторых механизмов мутагенной и генопротекторной активности крови.

3.4.1. Исследование комплексообразующих свойств плазмы и белков крови.

3.4.2. Радикал-модулирующая активность компонентов крови в модельных химических и ферментативных системах.

3.4.3. Оценка антиоксидантной активности компонентов крови по окислению желточных липопротеидов.

3.4.4. Модификация окислительного метаболизма перитонеальных макрофагов компонентами крови человека.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Мутагенная и антимутагенная активность крови и ее компонентов у человека и животных»

Актуальность темы. С момента открытия Новиком и Сциллардом антимутагенного эффекта пуриновых нуклеозидов прошло более 50 лет (Novik, Szilard, 1952). За это время были предложены несколько классификаций антимутагенов и рассмотрены механизмы антимутагенеза (De Flora, Ramel, 1988; Гончарова, 1993; Порошенко, 1994). Резкое ухудшение экологической ситуации привело к тому, что прикладной аспект в проблеме антимутагенеза стал существенно преобладать над фундаментальным (O'Nell, 1982; Johnston et al., 1992; Бочков и др., 1992; Худолей, 1993).

Анализ литературы последних 10 лет показал, что значительное место в проблеме антимутагенеза занимает разработка новых подходов, связанных с повышением устойчивости генома человека к мутагенным факторам среды путём применения антимутагенов в качестве пищевых добавок и лекарственных средств (Алекперов, 1984; Середенин, Дурнев, 1992; Ревазова, Брашлавский, 1993; Засухина, 1994; Bhunya, Jena, 1996). Теоретической основой этого направления является разработанная концепция "фармакологической защиты генома" (Середенин, Дурнев, 1992; Дурнев, 1998), ориентирующая исследователей на фармакологические подходы в вопросах изыскания антимутагенов и их профилактического применения.

Понятно, что успешная реализация такого подхода может быть осуществлена только при условии решения целого ряда сопутствующих задач. Одной из них является изучение физиологических и биохимических аспектов проблемы антимутагенеза на уровне систем: - сердечно-сосудистой, нервной, иммунной и т.д. Работы по изучению мутагенных эффектов эмоционально-стрессовых воздействий (Меерсон, 1981; Середенин, Дурнев, 1992; Ингель, и др., 1993), показали не только целесообразность проведения такого рода исследований, но и заложили основы системного подхода к изучению проблемы антимутагенеза.

Особо следует отметить цикл работ, выполненных в 80 годах Керкис с сотрудниками, а также работы (Ингель, 1993), в которых проблема антимутагенеза рассматривается как физиологическая категория. Несомненно, такой подход будет только способствовать решению главной задачи - разработки наиболее оптимальных путей защиты генома человека.

С этих позиций вполне обоснованными являются исследования закономерностей антимутагенеза сердечно-сосудистой системы. Основанием для такого выбора является не только то, что кровь представляет собой важное звено в механизме обеспечения гомеостаза организма, но и то, что в крови, ещё до проникновения в клетки, циркулируют экзогенные факторы, и эндогенные продукты метаболизма, обладающие мутагенной активностью. Поэтому, можно предположить, что эволюционное становление протекторных барьеров крови шло не только в направлении обеспечения защиты от инфекционных агентов, но и от не менее опасных генотоксикантов.

Вышесказанное определило цель и задачи нашего исследования.

Цель и задачи исследования. Целью настоящей работы явилась оценка мутагенных и антимутагенных свойств крови и ее компонентов у человека и животных, а также выявление механизмов, определяющих генопротекторные свойства крови.

Для достижения указанной цели были поставлены следующие задачи:

1. Оценить мутагенную активность крови и ее компонентов на тестерных штаммах Salmonella typhimurium штамм В А 13 и в клетках воздушно-сухих семян Crépis capillaris.

2. Определить антимутагенную активность крови и ее компонентов в тесте на генные (тест Эймса) и хромосомные мутации (тест-система Crépis capillaris).

3. Оценить зависимость антимутагенного эффекта крови и ее компонентов от условий обработки и видоспецифичности биокомпонентов в тесте на хромосомные аберрации.

4. Изучить комплексообразующие способности сывороточного альбумина, у-глобулина и плазмы крови человека.

5. Дать оценку способности крови и ее компонентов модулировать свободно-радикальные процессы в модельных химических, ферментативных и клеточных системах.

6. Дать сравнительную оценку антимутагенеза крови у животных в зависимости от вида.

Научная новизна. Участие кроветворной системы в реализации большинства механизмов гомеостаза не вызывает сомнений. Однако до сих пор остается практически не выясненной роль крови в сохранении генетического гомеостаза - системы, сохраняющей стабильность генетического аппарата. В работе впервые показано, что кровь и её компоненты, помимо целого ряда жизненно необходимых свойств, обладают ранее неизвестным свойством - защищать геном клеток целого организма от повреждающего действия экзо- и эндомутагенов. На основании экспериментов сделан вывод, что это свойство крови присуще не только человеку, но и животным стоящим на различных ступенях эволюционного развития. Это даёт основание отнести генопротекторные свойства к общебиологическому феномену, присущему существам с развитой кровеносной системой. Впервые установлено, что антимутагенный статус крови зависит от видовой принадлежности особи.

Впервые дано экспериментальное обоснование наличию в крови нескольких механизмов, способных снижать мутационное давление ксенобиотиков на организм. К числу таких механизмов можно отнести способность белков взаимодействовать с мутагенами, инактивируя их активные центры, участие белков крови в ингибирова-нии генерации свободных радикалов, активацию генопротекторных систем клетки находящимися в крови активными антимутагенами, химическая нейтрализация мутагенов неорганическими соединениями жидкой части крови.

В совокупности на основании полученных данных сделан вывод о наличии в организме человека неспецифических физиологических систем защиты генома.

Практическая значимость. Экспериментально обосновано наличие у крови и ее компонентов мутагенных и антимутагенных эффектов, которые необходимо учитывать при обсуждении патогенеза различных заболеваний и их лечения. На основании исследований разработаны методические рекомендации "Оценка антимутагенной активности веществ на семенах Crépis capillaris в скрининговых исследованиях", позволяющие оценить мутагенный и антимутагенный потенциал крови и ее компонентов. Комплексный подход к изучению мутагенных и антимутагенных свойств крови, предложенный в работе, может быть использован при создании концепции о генопротекторных системах организма, что приведет к более эффективному лечению больных с нарушением генетического аппарата. Подана заявка на изобретение "Способ оценки состояния генетического гомеостаза организма" (приоритетная справка №.2001105360 от 13.03.2001).

Положения, выносимые на защиту. 1. Кровь и её компоненты человека и животных способны в разной степени повреждать генетический аппарат клеток живых организмов других видов (микроорга8 низмов, клеток растений и животных), что является одним из способов защиты внутренней среды организма от чужеродных агентов.

2. Кровь и её компоненты в немутагенных концентрациях эффективно ингибируют индуцированный кластогенез. Степень антикластогенной активности крови зависит от режима обработки и видовой принадлежности крови.

3. Неспецифический механизм антимутагенеза крови обусловлен способностью белков крови образовывать комплексы с мутагенами, а также антиоксидантными и антирадикальными свойствами некоторых компонентов крови.

4. Мутагенную и антимутагенную активность крови следует рассматривать как функцию наследственно и эволюционно детерминированной системы сохранения генетической стабильности организма.

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Кошпаева, Елена Святославовна

ВЫВОДЫ

1. Цельная и разведенная в два раза кровь и плазма крови человека и животных проявляют кластогенную активность в клетках Crépis capillaris. Белки крови и диализат сыворотки не обладали кластогенной активностью.

2. Кровь и компоненты крови человека и животных обладают способностью блокировать мутагенный эффект алкилирующих соединений. Регистрация антикласто-генной активности крови возможна только при снижении мутагенного эффекта биожидкости при разведении.

3. Максимальный антимутагенный эффект в условиях предварительной и совместной обработки в тесте Crépis capillaris кровь и плазма крови проявляют в зависимости от видовой принадлежности, а белки крови - независимо от видоспецифич-ности.

4. Плазма и белки крови не обладают мутагенной активностью в тесте Эймса. Плазма крови снижает уровень этилметансульфонат-индуцированного мутагенеза на Salmonella typhimurium, а у-глобулин проявляет комутагенность по отношению к эффекту алкилирующих соединений.

5. Основной белковой фракцией, образующей комплекс с мутагеном, и нейтрализующим его действие является сывороточный альбумин, для у-глобулина характерна невысокая способность связывать мутагены, а минимальная комплексообра-зующая активность была установлена для плазмы крови.

6. Плазма крови и альбумин проявляют высокую антирадикальную и антиокислительную активность, а у-глобулин - антирадикальный эффект в модельных химических, ферментативных и клеточных системах.

7. Феномен системы антимутагенеза в крови характерен для гомойотермных животных, что позволяет отнести его к общебиологическим явлениям.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Оценивая полученные результаты, следует отметить, что кровь в зависимости от используемой концентрации обладает мутагенным и антимутагенным эффектом.

Показанная в наших экспериментах кластогенная активность крови, скорее всего, обусловлена факторами химической природы. Так, имеются данные (Ильинских и др., 1990; Ames, Gold, 1991; Lazutka, 1996; Дурнев, Середенин, 1998), свидетельствующие об образовании в клетках метаболитов, обладающих мутагенным эффектом (эндомутагенов). Их постоянная нейтрализация, выведение или включение в последующие биохимические циклы, безусловно, снижает их генетическую опасность, однако реальная угроза повреждения генома все же сохраняется. Подавляющее большинство химических соединений в организме человека и животных подвергается метаболическим превращениям в основном за счет ферментативных систем микросо-мального окисления в печени. В результате большинства этих превращений в кровь происходит выброс свободных радикалов, в том числе и активных форм кислорода, которые могут возникать не только в непосредственной близости от молекулы мишени, но и продуцироваться во внеклеточном пространстве, и также оказывать повреждающее действие на ДНК (Дурнев, Середенин, 1994; 1998).

Попадая в организм с продуктами питания, водой, воздухом и т.д. экзомутаге-ны, прежде чем проникнуть в клетки и молекулы-мишени, некоторое время циркулируют в крови, и в совокупности с эндомутагенами могут определять мутагенный потенциал крови.

Мутагенный эффект крови мы обнаружили по отношению к чужеродному для крови животных объекту - клеткам Crépis capillaris. Вполне очевидно, что в норме кровь вряд ли будет оказывать повреждающее действие на генетический аппарат собственных клеток, или форменных элементов совместимой крови донора. Эволюцион-но выработанные адаптационные механизмы, скорее всего, довели индуцированный кровью мутагенез в собственных клетках до безопасного уровня (определяемого как спонтанный). Спорным остаётся вопрос, нарушается ли геном донорских клеток при аллотрансплантации, если они различаются по целому ряду параметров (группе крови, резус - фактору и т.д.). При ксенотрансплантации, в чужеродной крови могут содержаться инградиенты (чаще всего продукты метаболизма), к которым генетический аппарата клеток реципиента не адаптирован; кроме того, может формироваться иммунный ответ, сопровождающийся появлением веществ. В любом случае, возникающая тканевая несовместимость может привести к повреждению генетического аппарата клеток (Ильинских и др., 1990). Скорее всего, по такому же сценарию происходит формирование перестроек в клетках Crépis capillaris, обработанных кровью человека в наших опытах. В дополнении к этому можно отметить возможное участие в поддержании мутагенного потенциала крови АФК. Образуясь внутриклеточно при "дыхательных взрывах", синтезе простагландинов и лейкотриенов, процессах биотрансформации ксенобиотиков и т.д. они способны проникать через клеточные мембраны и с молекулами переносчиками (например, нитрозотиолы для оксида азота), попадать в кровеносное русло, а затем, повреждать ДНК (Середенин, 1994; 1998). В любом случае остаётся несомненным, то, что способность крови индуцировать мутагенез в чужеродных клетках определяется эндомутагенами-метаболитами и является неоднозначным событием в условиях целого организма. Например, при попадании в кровяное русло микроорганизмов, эндомутагены могут приводить к инициированию у них мутационной изменчивости и появлению новых генераций с опасными для организма свойствами. Но, мутагенное воздействие крови может привести к потере жизнеспособности и гибели инфицирующего агента. С другой стороны отмена апоп-тоза в результате хромосомных аберраций, приведших к нарушению опухолево-супрессорных генов может привести к иммортализации дефектных клеток (Грачёва, 1996). Неожиданным в наших исследованиях были результаты, полученные при обработке штамма В А 13 Salmonella typhimurium у-глобулином человека: частота микроорганизмов, ревертировавших к прототрофности в вариантах с культивацией суспензии бактерий в у-глобулине резко возрастала, даже по сравнению с позитивным контролем. Альбуминовая фракция таким действием не обладала. Fialcov (1966) полагал, что существует прямая связь между аутоантителами и хромосомными аберрациями. Поэтому если учесть, что у-глобулин является молекулой во многом определяющей иммунологический статусе живых систем, в частности, в механизмах приобретённого иммунитета против бактерий, то можно предположить, что объяснение обнаруженного нами явления лежит на границе иммунологии и генетики. В любом случае факт присутствия в крови человека компонентов, оказывающих влияние на стабильность генетического аппарата чужеродных клеток, несомненно, интересен не только с медицинской точки зрения, но и заслуживает более широкого изучения.

Интересные закономерности выявлены нами и при изучении другого биологического свойства крови - антимутагенеза. К изучению этого явления мы подошли с позиций "физиологической гипотезы мутационного процесса", сформулированной в 1940 - 1947 годах Керкисом и Лобашовым, а также с учётом неоднократно высказываемых предположений о наличии в организме системы антимутагенной защиты (По-рошенко, 1988; Гончарова, 1993). И действительно, как показали наши исследования, кровь как физиологическая система обладает характерными, присущими только ей механизмами защиты генетического аппарата клеток. Эти механизмы можно условно разделить на два типа: внеклеточные и повышающие активность внутриклеточных систем антимутагенеза. Особенностью всех механизмов является их полифункциональность: выполняя специфические физиологические функции, они одновременно предохраняют генетический аппарат клеток от повреждений. Наиболее ярким примером является механизм комплексообразования веществ с белками крови. В крови этот механизм выполняет транспортную, депонирующую, антитоксическую и другие роли. Наши исследования однозначно показали, что попадая в кровь ксенобиотики в значительной степени теряют свою мутагенную активность. Анализ этого явления показал, что в основе его лежит образование комплекса мутагена и белка крови. Проводя аналогию между образованием комплекса белок-токсин (Кивман, 1993) можно предположить, что белок обратимо связываясь с мутагеном, препятствует его проникновению через мембрану клетки. В условиях целого организма образование комплексов мутаген - белок увеличивает время циркуляции мутагена в крови и способствует выведению мутагена, например, почками, где такие комплексы, как правило, распадаются. Попутно отметим, что комплексообразование косвенных мутагенов с белками крови снижают возможность их биотрансформации, уменьшая тем самым вероятность превращения в активные мутагены (Абилев, 1986). Наиболее активными белками в комплексообразовании с мутагенами по данным спектрофотометрии (раздел 3.4.1.) являются альбумины крови. То, что большинство мутагенов в крови находится в связанном с белками состоянии, подтверждаются опытами с диализатом сыворотки крови (раздел 3.2.4.). Очень высокий уровень антимутагенного эффекта ДСК во всех условиях обработки можно объяснить тем, что в диализате в основном содержатся низкомолекулярные соединения, катионы и анионы солей и кислот, которые могут проявлять антимутагенный и антиоксидантный эффект и очень немного эндогенных мутагенов и веществ, продуцирующих СРК. Большинство мутагенов крови оказываются связанными с белками и не проникают через полупроницаемую мембрану. Все эти результаты, полученные разными методами, подтверждают исследования Кивма-на и Рудзит (1993), которые показали, что белки крови могут активно связывать и переносить многие фармакологические препараты, и основной белковой фракцией, взаимодействующей с ними, является сывороточный альбумин. Высокая реакционная активность молекулы альбумина связана с его способностью изменять свою конфор-мацию и обусловлена большим объемом гидрофобных областей относительно объема всей белковой глобулы по сравнению с другими белками (Ландау, 1985).

При действии алкилирующих агентов, как в нашем случае, немаловажное значение имеет образование стабильных эфиров при алкилировании карбоксильных групп в глутаминовой и аспарагиновой кислотах (Росс, 1964), которые в большом количестве входят в состав альбумина. Некоторые аминокислоты помимо карбоксильных групп, имеют и другие центры (например, аминогруппы), которые так же могут подвергаться алкилированию. Сюда также относятся иминогруппы в гистиди-не, триптофане, пролине, фенольная группа в тирозине, сульфгидрильная группа в цистеине (Росс, 1964). Таким образом, помимо обратимого связывания алкилирующих агентов с белками, последние могут нейтрализовать алкилирующие мутагены в прямой химической реакции за счёт амино-, карбокси-, имино- и некоторых других активных групп, находящихся в аминокислотах. Если учесть, что в плазме крови в свободном состоянии находится значительное количество заменимых и незаменимых аминокислот, то, очевидно, что система белок-аминокислота является важной составляющей генопротекторной системы крови, осуществляющий свою функцию как путём образования неактивных комплексов с мутагенами, так и путём перехватывания их функциональных (например, алкильных) групп.

Важной характеристикой комплексообразования является стабильность комплекса. Если мутаген образует прочные, не способные к диссоциации комплексы, то его потенциальная активность вряд ли реализуется в условиях организма. Отсюда следует важный методологический вывод - при исследовании мутагенных и антиму-тагеных характеристик веществ, следует учитывать присутствие в среде или растворе наличие высокомолекулярных соединений способных формировать с исследуемым веществом комплексы. Попутно отметим, что алкилирующие агенты также могут реагировать с витаминами, ко-факторами, липидами, но со значительно меньшей эффективностью, чем с белками и свободными аминокислотами (Лавлес, 1970). Можно полагать, что все перечисленные органические соединения могут представлять серьёзную конкуренцию ДНК в качестве мишеней для алкилирующих соединений. Однако, имеются данные (Росс, 1964), что связывание алкилирующих препаратов нуклеиновыми кислотами обычно протекает более эффективно, чем реакция с белком. Возможно, этим объясняется тот факт, что полного снижения частоты ТФ- и ЭМС-индуцированных мутаций до спонтанного уровня при обработке их совместно с кровью или белками крови не наблюдается.

Многие алкилирующие агенты проявляют прооксидантные и мутагенные эффекты в клеточных суспензиях в одних и тех же концентрациях (Середенин, Дурнев, 1992; Дурнев, Середенин, 1998). Поэтому предполагают, что помимо основного алки-лирующего механизма мутагенного действия, препараты частично опосредуют свои повреждающие эффекты через стимуляцию образования АФК. Это подтвердилось и другими исследованиями (С1пщш, Ре1каи, 1987). А так как АФК являются мутагенами, то следовало ожидать, что вещества, обладающие антиоксидантным эффектом будут частично снижать цитогенетическую активность алкилирующего агента за счет устранения из механизма повреждающего действия свободно-радикального компонента. Однако в работе Дурнева, Середенина (1998) было показано отсутствие снижения мутагенного эффекта тиофосфамида при действии супероксиддисмутазы и ката-лазы. Это свидетельствует о том, что выявленные у этого препарата прооксидантные свойства не играют заметной роли в его кластогенном действии на генетические структуры культивируемых клеток и мутагенный эффект в большей степени обуславливается его алкилирующим действием. Снижение мутагенного действия ТФ в наших экспериментах, по-видимому, происходит в основном за счет компонентов крови, модифицирующих алкилирующий эффект этого мутагена и конкурирующих с нуклео-фильными центрами ДНК за присоединение алкильной группы.

Для этилметансульфоната имеются данные (С1пщш, Ре1каи, 1987), указывающие на взаимосопряженность его прооксидантных и мутагенных эффектов. Следовательно снижение мутагенного и кластогенного эффекта ЭМС частично может происходит за счет нейтрализации свободных радикалов антиоксидантами крови. Так, снижение частоты ihs -ревертантов у Salmonella typhimurium при обработке плазмой крови, и отсутствие снижения уровня ревертантов при обработке альбумином, в частности, может объясняться высокой антиоксидантной активностью биожидкости, по сравнению с альбумином. у-Глобулин, не обладающий антиоксидантной активностью, не снижал частоты ревертантов, индуцированных ЭМС, более того, в экспериментах на микроорганизмах этот белок проявил комутагенный эффект. Комутагенный эффект у-глобулина может быть обусловлен его прооксидантным эффектом, что проявилось в эксперименте с изучением влияния компонентов крови на окислительный метаболизм перитонеальных макрофагов.

Не менее важным механизмом генопротекторной активности крови является активация естественных клеточных антимутагенных систем биологически активными веществами - нейромедиаторами, гормонами, цитокинами и другими через рецептор-ные системы клетки. Так, медиаторы синаптической, парасимпатической и пуринер-гической нервной системы могут выходить из синапсов, попадать в кровь и повышать резистентность клеток к мутагенам. Их присутствие в крови необходимо также для поддержания антимутагенных систем клетки в рабочем состоянии (Семёнов, 1997; Семёнов и др., 1999). Существенная роль в качестве модуляторов резистентности клетки к мутагенам принадлежит цитокинам - ФНО, у-интерферону и др. (Грачёва, 1996).

Таким образом, в процессе возникновения антимутагенного эффекта крови принимают участие следующие факторы и механизмы: содержащиеся в крови вещества-антимутагены — белки, аминокислоты, витамины, гормоны, полиамины и т.д.; вещества, обладающие антиоксидантной активностью и являющиеся "ловушками" свободных радикалов; большое значение имеют неспецифические механизмы комплексообразования белков крови с эндо- и экзомутагенами; в качестве антимутагенов могут выступать низкомолекулярные неорганические соединения, находящиеся в крови и нейтрализующие мутаген в химической реакции (соли, кислоты, щелочи и т.д.).

Учитывая, что большинство перечисленных факторов находится в динамической связи с метаболизмом всего организма можно констатировать, что

103 кровь выполняет функцию защиты клеточного генома, которая совместно с мутагенными факторами обеспечивает генетический гомеостаз целостного организма. Поскольку кровь всех исследованных животных показала ярко выраженный протекторный эффект, можно предположить, что развитая система антимутагенной защиты в крови характерна для всех гомойотермных организмов, и является эволюционно детерминированной функцией крови.

В заключение необходимо отметить, что на основании полученных результатов возможно создание модели, дающей представление о генопротекторном потенциале крови и прогнозирующей вероятность возникновения мутационных событий в геноме организма. Кроме того, изучение мутагенной и антимутагенной активности крови человека может быть использовано в качестве метода сравнительного анализа мутагенных и антимутагенных свойств крови у здоровых и больных людей, с учетом индивидуальных и популяционных особенностей (патент РФ № 2001105360, приоритет от 13.03.2001 г.). Выявленные при этом различия можно рассматривать как индикаторы генетического гомеостаза и использовать при выработке решений о профилактике и коррекции мутационного процесса в организме.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Кошпаева, Елена Святославовна, 2001 год

1. Абилев С.К. Основные классы химических соединений, мутагенное действие которых связано с активностью их метаболитов // Итоги науки и техн. ВИНИТИ Сер.общая генетика,- 1988,- №9,- 197 с.

2. Абилев С.К., Порошенко Г.Г. Ускоренные методы прогнозирования мутагенных и бластомогенных свойств химических соединений. Итоги науки и техники.Сер. Токсикология. 1986. т. 14. - 173 с.

3. Алекперов У.К. Антимутагены и проблема защиты генетического аппарата. Баку: ЭММ, 1979,- 114 с.

4. Алекперов У.К. Антимутагенез.- М.: Наука.- 1984,- 101 с.

5. Антоненко В.Т. Лимфоидная система как основа резистентности организма и ее роль в гуморальной регуляции лимфопептидами реактивности и резистентности // Врачебное дело. 1993,- № 2-3.- С. 3-8.

6. Ароне З.М., Глейзер В.В. Об определении бактерицидной активности и активности |3-лизинов сыворотки крови // Лаб. дело. -1982,- №8,- С. 42-44.

7. Ауэрбах Ш. Проблемы мутагенеза,- М.: Мир, 1978,- 464 с.

8. Афанасьев И.Б. Кислородные радикалы в биологических процессах // Хим,-фармацевт. журнал,- 1985,- №1,- С. 11-23.

9. Афанасьев И.Б. Свободно-радикальные ингибиторы и промоторы в биологических процессах // Кислородные радикалы в химии, биологии, медицине,- Рига: РМИ, 1988,- С. 9-25.

10. Ю.Бабаев М.Ш. Антимутагенное действие антиоксидантов при радиоактивном мутагенезе растений// 1 Всес. радиобиол. съезд, Пущино, 1989, т.З. С. 569-570.

11. Балонов М.И., Померанцева М.Д., Рамайя Л.К., Четчуева М.Э. Мутагенное действие трития на половые клетки млекопитающих // Радиационный мутагенез и его роль в эволюции и селекции,- М.: Наука, 1987,- С. 66-73.

12. Берлинских Н.К., Савцова З.Д., Санина O.JI. Антиоксидантное ииммуномодули-рующее воздействие церрулоплазмина при экспериментальной грипозной инфекции// Бюл. эксперим. биологии и медицины. 1994. - т. 118, № 9. - С. 285-287.

13. Биктимиров В.В. Микрометод определения бактерицидной активности сыворотки крови у детей // Клинич. лаб. диагностика,- 1993,- № 4,- С. 74.

14. Биленко М.В., Ладыгина В.Г., ФедосееваС.В. Цитотоксический эффект на культуру эндотелиальных клеток перекиси водорода// Вопр. мед. химии. 1988. - т. 44, вып. З.-С. 229-239.

15. Болонина В.П., Михеев B.C. Эффект витамина С на мутагенность простатилена у мышей// Генетика. 1993. - т. 29, № 7. - С. 1095-1099.

16. Бондаренко JI.B., Ромашкина Т.Б., Шварцман Л.Я. Изучение скорости рекомбинации и мутагенеза в половых и соматических клетках мутагенчувствительных линий дрозофилы при действии химических мутагенов // IV съезд ВОГиС. Кишинев: Штиинца, 1981,-Ч.1.- С. 36.

17. Бочков Н.П., Чеботарев А.И. Наследственность человека и мутагены внешней среды. М.: Медицина, 1989. - 270 с.

18. Бочков Н.П., Дурнев А.Д., Журков B.C. и др. Система поиска и изучения соединений с антимутагенными свойствами (Методические рекомендации)// Хим.-фарм-журн. 1992. - т. 26, № 9-10. - С. 42-46.

19. Бышевский А.Ш., Галян С.Л., Ельцова С.Н. и др. Связь между тромбинемией и свободнорадикальными процессами в крови// Укр. биохим. журн. 1994. - т. 66, №5. - С. 56-62.

20. Виленчик М.М. Закономерности молекулярно-генетического действия химических канцерогенов,- М.: Наука, 1987,- 141 с.

21. Владимиров Ю.А., Шерстнев М.П. Хемилюминесценция клеток животных. М.: ВИНИТИ, сер. Биофизика, 1989. т. 24. - 43 с.

22. Владимиров Ю.А., Азизова O.A., Деев А.И. и др. Свободные радикалы в живых системах. ВИНИТИ, сер. Биофизика. М., 1991. т. 29.

23. Власова И.И., Вахрушева Т.В., Азизова O.A. и др. Влияние оксидантных ЛПНП на АДФ-индуцированную агрегацию тромбоцитов в плазме// Вопр. мед. химии. -1998. т. 44, вып. 1. - С. 43-54.

24. Волгарева Г.М. Генотоксичность вакцин: эколого-генетическая проблема с незавершенным решением // Генетика,- 1995,- т. 31, № 4,- С. 437-457.

25. Воскресенский О.Н., Жутаев И.А., Бобырев В.Н.Безуглый Ю.В. Антиоксидантная система, онтогенез и старение // Вопросы мед. химии,- 1982,- №1.- С. 14-27.

26. Георгиев В.Н., Дурнев А.Д., Середенин С.Б. Убихиноны и антимутагенная защита организма // Вопр. мед. химии. 1994. - Т. 40, № 5. - С. 8-9 1994.

27. Георгиев В.Н. Фармакологическое изучение антимутагенных свойств убихинона-10 // Вестник РАМН,- 1997,- №7,- С. 3-8.

28. Гизатуллин Ф.Ш., Бабынин Э.В. Специфичность и время возникновения His -реаерсий, индуцированных гистидиновым голоданием, у Salmonella typhimuriumlУ Генетика. 1996. - Т. 32, № 9. - С. 1-8.

29. Головин В.В., Мохорт М.А., Борищук О.В. Вибрення зв'язування лифенапешу на-триево1 coni 13 структурними компонентами кров1// Фармац. ж. 1997. - № 3. -С.48-50.

30. Гонский Я.И. Роль микроэлементов в ферментативных и неферментативных окислительных процессах при опухолевом росте// Тез докл. XI Всес. конф. "Микроэлементы в биологии и их прменение в с/х и медицине". Самарканд, 1990. С. 403.

31. Гончарова Р.И. Антимутагенез как генетический процесс// Вестник РАМН. 1993. - № 1.-С. 26-33.

32. Горизонтов П.Д. Система крови как основа резистентности и адаптации организма // Физиол. журнал,- 1981,- т. 24, № 3,- С. 317-321.

33. Грачева J1.A. Цитокины в онкогематологии. М.: Алтус. - 1996. - 168 с.

34. Грибанов Г.А., Головко М.Ю. Влияние бычьего сывороточного альбумина на характер аутолитических изменений липидного компонента ткани серого и белого вещества головного мозга крыс in vitro// Вопр. мед. химии. 1998. - т. 44, вып. 3. -С. 241-247.

35. Джеджелава Д.А., Егоров И.А., Тарасов В.А. Индукция SOS-функций в клетках Esherishia coli при действии различных типов химических мутагенов // Генетика,-1989,- т. 25, №9,- С. 1551-1557.

36. Дубинин Н.П., Щербаков В.К. Цитологический анализ антимутагенного действия аргинина и стрептомицина//Докл. АН СССР,- 1964,-т. 159, №5,-С. 1148-1150.

37. Дубинин Н.П. Потенциальные повреждения в ДНК и мутации. Молекулярная ци-тогенетика. М.: Наука, 1978,- 246 с.

38. Дубинин Н.П. (ред.) Химические мутагены окружающей среды.-М.: Наука, 1983,202 с.

39. Дубинина Л.Г. Структурные мутации в опытах на Crépis capillaris. M.: Наука, 1978, 187 с.

40. Дурнев А.Д., Середенин С.Б. Мутагены (скрининг и фармакологическая профилактика воздействий). М.: Медицина, 1998. - 328 с.

41. Ерин А.Н., Скрыпин В.И., Прилипко Л.Л. и др. Кислородные радикалы в биохимии, биологии и медицине. Рига, 1988. - 109-129

42. Ильинских H.H., Медведев М.Э., Бессуднова С.С. и др. Мутагенез при различных функциональных состояниях. Томск.: Изд-во Томского университета, 1990.

43. Ильинских H.H., Новицкий В.В., Ванчугова H.H., Ильлинских И.Н. Микроядерный анализ и цитогенетическая нестабильность. -Томск. Изд-во Томского университета, 1992,- 272 с.

44. Керкис Ю.Я. Физиологические изменения в клетке как причина мутационного процесса // Усп. совр. биол. 1940,- № 1,- С. 344 - 350.

45. Кивман Г.Я., Рудзит Э.А., Белоусов Ю.Б. Клиническая фармакология и фармакотерапия. М.: Наука, 1993. 398 с.

46. Клебанов Г.И., Бабенкова И.В., Теселкин Ю.О. и др. Оценка антиокислительной активности плазмы крови с применением желточных липопротеидов// Лаб. дело.1988. -№5. -С. 59-62.

47. Коломоец М.Ю., Кузьменко И.В., Чернухина Л.А. и др.Роль альфа-токоферола и ретинола в антирадикальной защите организма при язвенной болезни// Укр. биох. журн. 1992. - т. 64, № 2. - С. 79-84.

48. Кудряпюв Б.А., Ульянов A.M., Тарасов Ю.А. Профилактическове действие витамина А, нейтрализующего развитие в организме животных экспериментального инсулинзависимого диабета// Вопр. мед. химии. 1993. - № 1. - С. 20-22.

49. Кузнецов В.И., Станишевская О.Б. Хемилюминесценция компонентов крови здоровых людей// Лаб. дело. 1991. - № 2. - С 54-56.

50. Куриний А.И., Кравчук А.Р. и др. Оценка мутагенного фона и мутагенной изменчивости у населения в регионе с высокой интенсивностью применения пестицидов// Цитология и генетика. 1993. - т. 27, №. 4. - С. 82-86.

51. Лавлес А. Генетические эффекта алкилирующих соединений. М.:Наука, 1970. -255 с.

52. Ландау М.А. Молекулярная природа отдельных физиологических процессов. М.:Наука, 1985.-264 с.

53. Лебедь О.И., Примак Р.Г., Тищенко Р.И. Комплексообразование бычьего сывороточного альбумина с фосфотидилхолиновыми липосомами// Укр. биохим. журн.1989.-т. 61, №3,- С. 101-106.

54. Литвицкий П.Ф. Патофизиология.- М.: Медицина, 1997,- 752 с.

55. Лобашов М.Е. Физиологическая (паранекротическая) гипотеза мутационного про-цесса.-Вестник ЛГУ. 1947. - № 8. - с. 10-29.

56. Лозовская Е.Л., Большакова И.В., Макарова E.H. и др. Потенциально опасные фо-тосинсебилизаторы среди лекарственных веществ и экстрактов лекарственных растений// Вопросы мед. химии. 1998. - т. 44, вып. 2. - С. 118-134.

57. Луйк А.И., Лукьянчук В.Д. Сывороточный альбумин и биотранспорт ядов. М.: Медицина, 1984. 222 с.

58. Макшанов И.Я., Абакумов Г.З., Цилиндзь И.Т. Антиокислительная активность плазмы крови при операционном стрессе// Здравоохр. Беларуссии. 1992. - № 10. -С. 34-36.

59. Матюшин В.Н., Логинов A.C., Якимчук Г.Н., Ткачев В.Д. Активность антиокси-дантных ферментов в крови при хронических поражениях печени // Вопр. мед. химии,- 1995,- т. 41, №4,- С. 54-56.

60. Машковский М.Д. Лекарственные средства. М.: "Медицина", 1989. -Ч. 2. С. 437.

61. Меерсон Ф.З. Адаптация, стресс и профилактика. М.: Наука, 1981. - 192 с.

62. Меньшикова Е.Б., Зенков Н.К., Шергин С.М. Биохимия окислительного стресса. Оксиданты иантиоксиданты. Новосибирск, 1994. 203 с.

63. Микаевич О.Д., Горожанская Э.П. Некоторые особенности ПОЛ в неизмененных и опухолевых тканях онкологических больных и возможности его коррекции// Экс-перим. онкология. 1994. - т. 16, № 4. - С. 4-6.

64. Микаелян Э.М. Регуляция перекисного окисления липидов при стрессе антиокси-дантами // Сб. науч. тр. "Перекисное окисление липидов в норме и патогенезе различных заболеваний", Ереван.: Айстан, 1988.- С. 93-99.

65. Михеев B.C., Анисимова Л.Е. Мутагенность гормонов и гормональных препаратов// Деп. в ВИНИТИ № 8871-В88. 1988.

66. Осипов А.Н., Азизова O.A., Владимиров Ю.А. Активные формы кислорода и их роль в организме // Успехи биологической химии. 1990. - Т. 31. - С. 180-208.

67. Пархоменко Л.В., Ковальчук В.К., Опенько Л.В. Механизмы устойчивости Proteus murabillis к бактерицидному действию сыворотки крови // Микробиол. журнал. 1992,-т. 54, №2,-С. 81-87.

68. Пашин Ю.В., Торопцев С.Н. Индукция Сг6+ микроядер в эритроцитах мыши/ Бюлл. эксперимент, биол. и медицины. 1984. - т. XCV, № 1. - С. 72-74.

69. Порошенко Г.Г. Механизмы антимутагенеза//Междунар. Симп. "Мутагены и канцерогены окружающей среды и наследственность человека". Москва, 1994. ч. И. -С 178-191.

70. Порошенко Г.Г., Абилев С.К. Антропогенные мутагены и природные антимутагены // Итоги науки и техники. Сер. "Общая генетика". Т. 12. - ВИНИТИ, 1988. -С.1 -206.

71. Ревазова Ю.А., Брацлавский В.А. Изучение фармакокинетической модуляции мутагенеза// Вестн. РАМН. 1993. - № 1. - С. 14-19.

72. Рослый И.М. Антиоксидантная активность сыворотки крови и ферментемия при менингококковой инфекции у детей и взрослых// Вопр. мед. химии. 1994. - Т. 40, №2.-С. 33-34.

73. Семенов В.В. Антимутагенное действие неантихолинэстеразных фосфорорганиче-ских соединений, особенности и механизмы. Дисс. . док. мед. наук. Казань 1995.

74. Семенов В.В., Кошпаева Е.С., Семенов A.B. Оценка антимутагенной активности веществ на семенах Crépis capillaris в скрининговых исследованиях. (Методические рекомендации). Казань. КГМУ. 2000. 30 с.

75. Середенин С.Б., Дурнев А.Д. Фармакологическая защита генома. М.? ВИНИТИ, 1992. 160 с.

76. Слоним A.A., Толчеев Ю.В. Определение бактерицидной активностисыворотки крови и лимфы // Даб. дело. 1989.- № 7,- С. 65-66.

77. Солдатова A.M., Воскресенский О.Н. Витамины антиоксидантного действия и возрастная дистрофия сетчатки// Вопр. мед. химии. 1994. - Т. 40, № 2. - С.2-6.

78. Сорокин А.Б., Бубнова В.И., Русаков В.В. Активность церрулоплазмина сыворотки крови при язвенной болезни желудка и двенадцатиперстной кишки// Вестн. хирургии им. И.И. Грекова. 1990. -т. 145, №12.-С. 11-13.

79. Сучков Б.П. Гигиеническое значение селена как микроэлемента. Автореф. дис . д-ра мед. наук. К., 1991. 44 с.

80. Теселкин Ю.О., Бабенкова И.В., Любицкий О.Б. и др. Определение антиоксидант-ной активности плазмы крови с помощью системы гемоглобин-пероксид водорода-люминол//Вопр. мед. химии.- 1998,-т. 44, вып. 1,- С. 70-76.

81. Тимченко О.И. Влияние некоторых гормонов щитовидной железы и гонад на целостность хромосом клеток печени// Цитология и генетика. 1995. - т. 29, № 1. -С.41-45.

82. Толкачева И.В., Кулакова С.Н., Лысенко И.Н., Бабусайли Абдула Ахмед, Стогова Э.В. Изучение жирнокислотного состава сывороточного альбумина у больных с онкологией легких молочной железы // Вопр. мед. хим. 1997,- т. 43, вып. 4,-С.261-263.

83. Тырсина Е.Г., Россихина О.Г. и др. Аскорбинпальмитат антимутаген мембранного действия// Докл. АН СССР. - 1991. - т. 318, № 4 -С. 992-994.

84. Филев Л.В., Тулупов А.Н., Шейпак Л.Н. Нарушение противовирусной клеточной резистентности при острых гнойно-деструктивных заболеваниях легких / Воен,-мед. журн. 1992.- № 12,- С. 32-34.

85. Филиппов В.Д. Антимутагенное действие аминокислот на УФ-облученные клетки Е. coli; доказательство существования метаболической регуляции антимутагенной активности // ДАН СССР,- 1990,- т. 315,- С. 222-225.

86. Хмелевский Ю.В., Поберезкина Н.Б. Витамины и возраст человека. Киев: Науко-ва Думка, 1990.- 168 с.

87. Худолей В.В. Модификация мутагенеза и антимутагенеза// Вестн. РАМН. № 1. — С. 34-41.

88. Чаяло П.П. Содержание церрулоплазмина, фабронектина и селена в крови больных острых инфарктом миокарда// Врачебное дело. 1992. - № 3. - С. 15-17.

89. Черкасов О.А., Щербаков В.К. и др. Цитогенетическое действие валина и лизина на проростки лука А. сераЛ Генетика. 1977. - т. 12, № 2. - С. 340-342.

90. ЮО.Шашкина М.Я., Шашкин П.Н., Сергеев А.В. Биодоступность каротиноидов // Вопр. мед. хим.- 1999,- т. 45, вып. 2,- С. 105-116.

91. Abraham S.K. Antigenotoxic effects in mice after the interaction between coffee and dietary constituents// Food Chem. Toxicol. 1996. - V. 34. - P. 15-20.

92. Aejmelaeus R., Metsa Ketela Т., Laippala P., Alho H. Is there an unidentified defence mechanism against infection in human plasma? // FEBS. Lett.- 1996,- V. 364, № 2.-P. 128-130.

93. Ames Bruce N., Gold Lois S. Endogenous mutagens and the causes of aging and cancer// Mutat. Res. Fund, and Mol. Mech. Mutagen. 1991,- V. 250, № 1-2. - P. 3-16.

94. Anghileri L.J. Iron intracellular calcium ion// Anticancer Res. 1995. - V. 15, № 1. -P. 1395-1400.

95. Aslam M., FatimaN., Rathman Q. Cytotoxic and genotoxic effects of calcium silicates on human lymphocytes in vitro// Mutat. Res. 1993. - V. 300, № 1. - P. 45-48.

96. Bakhtiar R., Stearns R.A. Studies on non-covalent associations of immunosuppressive drugs with serum albumin using pneumatically assisred electrospray ionization mass spectrometry // Rapid.Commun.Mass.Spectrom.- 1995,- V. 9, №3,- P. 240-244.

97. Ballow M., Wahg W. et al. Modulation of B-cells immunoglobulin synthesis by retinoic acid // Clin. Immunol. Immunopathol. 1996. - V. 80, № 9. - P. 873-881.

98. Bannister G.V., Bannister W.H., Hill H.A.O. et al. Some current aspects of oxygen radicals in biological systems // Life Chemistry Repirts. 1982. - № 1. - P. 49-53.

99. Basaga H.S. Biochemical aspects of free radicals// Biochimical aspects of free radicals.-1990,- V. 68,- P. 989-998.

100. Basalp A., Bermek E., Cirakoglu B., Coka V., Mustafaev M.I., Sarac A.S. Immune response to 17 beta-estradiol in polyelectrolyte complex: antigen specificity and affinity of hybridoma clones // Hybridoma.- 1996,- V. 15, № 3,- P. 233-238.

101. Bellavite P. The superoxide-forming enzymatic system of phagocytes // Free Radic. Biol, and Med.- 1988,- №4,- P. 225-261.

102. Belch J.J., Maskay I.R., Hill A., Jennings P., McCollum P. Oxidative stress is present in atherosclerotic peripheral arterial disease and futher increased by diabetes mellitus// Int. Angiol.- 1995,- V. 14, №4,- P. 385-388.

103. Beyersmann D., Hartwig A. The genetic toxicology of cobalt // Toxicol. Appl. Pharmacol.- 1992,-V. 115,-P. 137-145.

104. Bhunya S.P., Jena G.B. Clastogenic effects of copper sulphate in chick in vivo test sys-tem|| Mutat. Res. 1996. - V. 367. - P. 57-63.

105. Borek C. Molecular mechanisms in cancer induction and prevention// Environ. Health. Perspect. 1993. -V. 101, Suppl. 3.-P. 237-245.

106. Brown K.M., Morrice P.C., Arthur J.R., Duthie G.G. Effects of vitamin E supplementation on erythrocyte antioxidant defence mechanisms of smoking and non-smoking men // Clin. Sci. Colch.- 1996,- V. 91, №1,- P. 107-111.

107. Byczkowski J.ZZ., Channel S. Chemically induced oxydative stress and cell proliferation// Tox. Subst. Mech. 1996. - V. 15, № 2. - P. 101-128.

108. Canova S., Degan P., et al. Tissue dose DNA adducts, oxidative DNA damage and CYP lA-immunopositive// Mutat. Res. 1998. - V. 399, № 1. - P. 17-30.

109. Ceballos P., Merad B. et al. Periferal antioxidant enzyme activities and selenium in elderly subjects and in dementia of Alzheimer's type plase of the extracellular glutatione peroxides// Free Radic. Biol. Med. - 1996. - V. 20, № 4. - P. 579-587.

110. Chainy G.B., Samanta L. et al. Effect of aluminium on superoxide desmutase, catalase and lipid peroxidation of rat liver// Res. Commun. Mol. Pathol. Pharmocol. 1996. - V. 94, №2. - P. 217-220.

111. Chaskadbi S., Vaidya V.G. In vivo antimutagenic effect of ascorbic acid against mutagenicity of the common antiamebic drug diiodohydroxyquinoline // Mutat. Res. Genet. Toxicol. Test.- 1989,-№222,- P. 219-222.

112. Chuqui C.A., Petkau A. Chemical reactivity and biological effects of superoxide radicals // Radiat. Phys. and Chem.- 1987.- №30,- P. 365-373.

113. Clemente C.F., Belloni P., Di Pietro S. Tritium and plutonium content of the Italian diet and transfer to man // Biological implications of radionuclides relased from nucleor industries. ViennaA IAEA, 1979,- V. 2,- P. 257-263.

114. De Flora S., Ramel C. Mechanisms of inhibitors of mutagenesis and carcinogenesis. Classification and overview// Mutat. Res. 1988. - Y. 202. - P. 285-306.

115. De Flora S., Bennicelli C., Rovi da A., Scatolini L., Camoirano A. Inhibition of the spontaneous mutagenicity in Salmonella typhimurium TA102 and TA104 // Mutat. Res.1994,-V. 307,-P. 157-167.

116. Dhillon S., Von Burg R. Venilcyclochexene dioxide// J. Appl. Toxicol. 1996. - V. 16, №5.-P. 465-468.

117. Dhir H., Ghosh S.,Ghosh C. et al. Comparativ efficacy of ascorbic acid and extract from Phyllanthus emblica fruit in modifyind metal clastogenicity// Enveron. and Mol. Mutagenes. 1989. - V. 14, Suppl. - P. 48.

118. Diplock A.T. Safety of antioxidant vitamins and beta-carotene// Am. J. Clin Nutr.1995. V.62, №6 Suppl. - P. 1510-1516.

119. Dizdaroglu M., Bergtold D.S. Characterization of free radical-induced base damage in DNA at biological relevant levels//Ann. Biochem.- 1986,-V. 156.-P. 182-188.

120. Durak I., Akyol O., Basesme E., Canbolat O., Kavutcu M. Reduced eythrocyte defense mechanisms against free radical toxicity in patients with chronic renal failure // Nephron.1994,- V. 66, № 1,- P. 76-80.

121. Enobero R.M., Lauridsen C. et al. Inclusion of oxidized vegetable oil in brailer diet. It;s influence on nutrient balanct and on the antioxidative status of broters// Poult. Sci. 1996. -V. 75, №8.-P. 1003-1011.

122. Fernandes A.C., Filipe P.M., Freitas J.P., Manso C.F. Different effects of thiol and nonthiol ace inhibitors on copper-induced lipid and protein oxidative modification // Free. Radic. Biol. Med. 1996,- V. 20, № 4,- P. 507-514.

123. Fialkow P. Autoimmunity and chromosomal aberration // Am.J. Human. Genet. 1966. -Vol. 18.-P. 93.

124. Fiorio R., Vellosi R., Bronzetti G. Effects of spermine on formation of HGPRT-mutants induced by ethylmethanesulphonate, methylmethansulphonae and mitomycin C in V79 Chinese hamster cells // Environ. Mol. Mutagen.- 1994,- V. 23, №4,- P. 294-298.

125. Fleming J.E., Orr P.L., Shibuya R.B. et al. Hydroxyl radical scavenging in Drosophila melanogaster// Age. 1988. -V. 11, № 4. - P. 75.

126. Gatto L.M., Samman S. The effect of zinc supplementation on plasma lipids and low-density lipoprotein oxidation in males // Free. Radic. Biol. Med. 1995,- V. 19, №4,-P.517-521.

127. Gebbart E., Wagner H., Grziwok K. The action of anticlastogenis in human lymphocyte cultures and their modification by rat-liver S9 mix. II. Studies with vitamins C and E // Mutat. Res.- 1985,-V. 149,-P.83-94.

128. Geller D.A., Lowenstein C.J. et al. Molecular cloning and expression of inducible nitric oxide synthase from human hepatocytes// Proc. nat. Acad. Sci. USA.- 1993,- V. 90,-P.491-3495.

129. Gennard J.P., Baleux G., Verellen-Dumoulin C. et al. Increased sister chromatid exchanges and tumor markers in workers exposed to elemental chromium-cobalt and ni-kel-containing dust// Mutat. Res. - 1993.- V. 299,- P.55-61.

130. Ghahramani P., Rowland-Yeo K et al. A new in vitro method for measuring protein binding of drugs// Brit. J. Uin. Pharmacol. 1997. - V. 43, № 2. - P. 207-208.

131. Glascott Peter A. Tsyganskaya M. et al. The antioxidant function of the physiological content of vitamin C// Mol. Pharmacol. 1996. - V. 50, № 4. - P. 994-999.

132. Greene L.S. Asthma and oxidant stress: nutritional, environmental and genetic risk factors // J. Am. Coll. Nutr.- 1995,- V. 14, №4,- P. 317-324.

133. Gross C.L., Innace J.K. et al. Biochemicalmanipulation of intracellular glutatione levels influennces cytotoxicity to isolated human lymphocytes by sulfur mustard// Cell. Biol. Toxicol. 1993. - V. 9, № 3. - P. 259-267.

134. Halliwell B., Gutteridge J.M.C. Free radicals in biology and medicine.- Oxford: Clarendon Press, 1986,- 346 p.

135. Halliwell B., Grootveld M. The measurement of free radical reactions in humans. Some thoughts for future experimentation // FEBS Lett.- 1987,- V. 213,- P. 9-14.

136. Halliwell B., Aruoma O.I. DNA damage by oxygen-derived species. Its mechanisms and measurement in mammalian systems// FEBS Lett.- 1991.- V. 281,- P. 9-19.

137. Halliwell B., Gutteridge J.M.C. Biologically relevant metal ion-dependet hydroxyl radical generation// FEBS Lett.- 1992,- V. 307,- P. 108-112.

138. Hamasaki N. Erythrocyte anion exhander, band epsilon protein: structure and function // Nippon. Rinsho.- 1996,- V. 54, №3,- P. 618-624.

139. Hartman P.E., Shankel D.M. Antimutagens and anticarcinogens: a survey of putative interceptor molecules // Environ, and Mol. Mutag. 1990.- №15 P. 145-182.

140. Hartman A., Speit G. comparative investigations of the genotoxic effects of metals in the single cells gel (SCG) assay and the sister chromatid exhange (SCE) test // Environ Mol. Mutagen.- 1994,- V. 23,- P. 299-305.

141. Hoffman D.J., Zanelli S.A., Kubin J., Delivoria-Papadopoulos M. The in vivo effect of bilirubin on the N-methyl-D-aspartate receptor / ion channel complex in the brains of newborn piglets // Pediatr. Res.- 1996,- V. 40, №6,- P. 804-808.

142. Hosomo M., Iwamoto N., Hayashi H., Takeuchi N., Iwamura J. Measurement of cerum catalase activity and its clinical significance // Rinsho. Biori.- 1996,- V. 44, №5,- P. 444448.

143. Hulea S.A., Wasowicz E., Kummerow F.A. Inhibition of metal-catalyzed oxidation of low-density lipoprotein by free and albumin-bound bilirubin // Biochim. Biophys. Acta. -1995,-V. 1259, № 1,-P. 29-38.

144. Heussen G.A., Schefferlie G.J. et al. Effects on thyroid hormone metabolism and denle-tion of lung vitamin A in rats by airborne particulate matter// J. Toxicol. Environ. Helth. 1993. - V.38, № 4. - P. 419-434.

145. Jernstrom B., Morgenstern R., Moldeus P. Protective role of glutathione, thiols, and analogues in mutagenesis and carcinogenesis // Basic. Life. Sci.- 1993.- №61,- P. 137147.

146. Johnston J.D., Jamieson G.G., Wright S. Reproductiveand developmental hazards and employment policies// Brit. J. Ind. Med. 1992. - V. 49, - P. 85-94.

147. Kada T., Joue T., Ohta T., et al. Antimutagens and their models of action // An-timutagenesis and anticarcinogenesis mechanisms. N.Y.; L: Plenum press, 1986. - P. 181-196.

148. Kasai T., Inoue K., Komatsubara H., Tsujimura M. Synthesis and antiscorbutic actyvity of vitamin C analogue : L-threo-hex-2-etano-l,4-lactone ethyl ester in the guinea pig // Int. J. Vitam. Nut. Res. -1993.- V. 63, № 3,- P. 208-211.

149. Kedderis G.L., Batra R. et al. Rodent tissue distribution of 2-cyanoethylene oxide, the epoxide metabolite of acrilonitrile// Toxicol. Lett. 1993. - V. 69, № 1. - P. 25-30.

150. Kontush Anatol, Finckh Barbara et al. Antioxidant and prooxidant activity of a-tocopherol in human plasma and low density lipoprotein// J.Lipid. Res. 1996. - V. 37, №7.-P. 1436-1448.

151. Kose K., Dogan P. Lipoperoxidation induced by hydrogen peroxide in human erythrocyte membranes// J. Int. Med. Res. 1995. - V. 23, № 1. - P. 9-18.

152. Kumari O., Sinha S.P. Effect of retinol on ochratoxin-produced genotoxity in mice// Food. Chem. Toxicol.- 1994.- V. 32, №5,- P. 471-475.

153. Kuroda Y., Antimutagenic mechanism of vitamin C and its derivatives in mammalian cells in culture // Mutat. Res. Environ. Mutagenes. and Related Subj.- 1987,- V. 182,-P.365-370.

154. Lacava Z.G., Luna H. The anticlactogenic effects of tocopherol in peritoneal macrophages of benznidasole-trested and ovariectomized mice // Mutat. Res.- 1994.- V.305, №2,-P. 145-150.

155. Laval F., Wink D.A. Inhibition by nitric oxide of the repair protein, 06-methylguanine-DNA-methyltransferase// Carcinogenesis.- 1994,- V. 15,- P. 443-447.

156. Lazutka J.R. Genetic toxicity of cytokines// Mutat. Res. 1996. - V. 361, № 2-3. - P. 5-105.

157. Lau S.I., Sarkar B. Biochem. J. 1981. - V. 199. - P. 649-656.

158. Le Curieux F., Marzin D., Erb F. Comparison of three short term assays: results on seven shemicals potential contribution to the control of water genotoxicity// Mutat. Res. -1993. V.319, № 3. - P. 223-236.

159. Lethem Rosemary, Orrel Martin Antioxidants and dementia// Lancet. 1997. V. 349, №9060. - P. 1189-1190.

160. Linn W., Schimshaw C., Kapoor M. Selenium suppresses the methabolism of benzo(a)purene by rat liver extracts and exerts a dual effect on its mutagenicity// Xenobi-otica.- 1984,- № 14,- P. 898-902.

161. Littarru G.P., Battino M., Tomasetti M., Mordente A., Santini S., Oradei A., Manto A., Ghirlanda G. Metabolic implicatios of coenzyme Q10 in red blood cells and plasma lipoproteins // Mol. Aspects. Med.- 1994,- Suppl. 15,- P. 67-72.

162. Liu Z., Foote R.H. Effects of amino acids on the development of in-vitro matured in vitro fertilization bovine embryos in a simple phrotein-free medium // Him. Reprod. -1995,- V. 10, № 11,- P. 2985-2991.

163. Liu R.H., Hotchkiss J.H. Potential genotoxicity of chronically elevated nitric oxide: a review// Mutat. Res.- 1995,- V. 339,- P. 73-89.

164. Marietta M.A. Nitric oxide synthase structure and mechanism// J. Biol. Chem.- 1993,-V. 268,-P. 12231-12234.

165. May J.M., Qu Z.C., Whitesell R.R., Cobb C.E. Ascorbate recycling in human erythrocytes: role of GSH in reducing dehydroascorbate // Free. Radie. Biol. Med. 1996,- V. 20, №4,-P. 543-551.

166. Medda R., Calabres L., Musci G., Padiglia A., Floris G. Effect of ceruloplasmin on 6-hydroxydopamine oxidation // Biochem. Mol. Biol. Int.- 1996,- V.38, №4,- P. 721-728.

167. Mc Dowell I.F., Brennan G.M. et al. The effect of probucol and vitamin E treatment on the oxidation of low-density lipoprotein and forearm vascular responses in humans// Eur. J. Clin. Invest. 1994. - V. 24, № 11. - P. 759-765.

168. Me Grath L.T., Douglas A.F., McClean E., Brown J.H., Doherty C.C., Johnston G.D., Archbold G.P. Oxidative stress and erythrocyte membrane fluidity in patients undergoing regular dialysis // Clin. Chim. Acra.- 1995,- V. 235, № 2,- P. 179-188.

169. Miles A.T., Rodilla V., Jenner W. Et al. Relative toxicity and induction of metal-lothionein by heavy metals in cultered human proximal tubular cells// Hum. and Exp. Toxicol. 1996/ - V. 15, № 8. - P. 674.

170. Miura T., Muraoka S., Ogiso T. Inhibition of lipid peroxidation by estradiol and 2-hydroxyestradiol // Steroids.- 1996.- V. 61, № 6,- P. 379-383.

171. Mukendi N., de Meester C, Rollman B. Detoxification of aflotoxin B by different chemicals: (Abstr) // Pharm. Belg. 1991. - V. 46, № 2. - P. 116.

172. Mukhopadhyay C.K., Ehrenwald E., Fox P.L. Ceruloplasmin enhances smooth muscle cell- and andothelial cell-mediated low density lipoprotein oxidation by a superoxide-dependent mechanism // J. Biol. Chem.- 1996,- V. 271, №25,- P. 14773-14778.

173. Pâlit S., Ghosh A.K., Sharma A., Talukder G. Modification of the clastogenic effects of cobalt by calcium in bone marrow cells of mice in vivo // Cytologia.- 1991,- Y. 56, № 3,-P. 373-377.

174. Paolini M., Mesirca R., Pozzetti L., Maffei F., Yigagni F., Hribia P. Genetic and non-genetic biomarkers related to carcinogenesis in evaluating toxicological risk from Fenarimol // Mutat. Res.- 1996,- V. 368, №1.- P. 27-39.

175. Parker R., Von Borestel R. Antimutagenesis in yeast by sodium chloride, potassium chloride and sodium sacharin // Antimutagenesis and Anticarcinogenesis Mech. 11.: Proc. 2nd Int. Cont., Ohito Des. 4-9. 1990. New-York; London.- 1990,- P. 367-371.

176. Patrie M.H., Haynes R.H., Uretz R. Dark recovery phenomen in yeast comparative effects with various inactivating agent// Radiat. 1964. - V. 21. - P. 144-163.

177. Phillips B.J., James T.E.B., Anderson D. Genetic damage in CHO cells exposed to en-zymically generated active oxygen species// Mutat. Res.- 1984,- V. 126,- P. 265-271.

178. Pizer B., Boyse J. et al. Neonatal vitamin K administration and in vivo somatic mutation// Mutat. Res. 1995. - V. 347, № 3-4. - P 135-139.

179. Prevedzentsev K.V., Sirota N.P. et al. The genotoxic effects of cadmium studied in vivo// Tsitol. Genet. 1995. -V. 30, № 3. - P. 45-51.

180. Qin S., Huang C.C. Influence of mouse liver stored vitamin A on the induction of mutations (Ames test) and SCE of bone marrow cells by aflatoxin Bl, benzo(a)pyrene, of cyclophosphamide// Environ. Mutagenes. 1986. - V. 8. - P. 836-846.32

181. Randerath K., Yang P., Danna T.F. et al. Bulky adducts detected by P-postlabeling in DNA modified by oxidative damade in vitro. Comparison with rat lung I-compaunds// Mutat- Res.- 1991,- V. 250,- P. 135-144.

182. Rathore H.S. Protection againgt ill effects of asparagin on chromosomes in Allium root tips by ascorbic acid or magnesium ions-pilot stady// Indian J. Med. Sci. 1986. - Y. 40, № 12.-P. 304-306.

183. Renner H.W. Antimutagenic effects in mammalians// Mutat. Res. Environ. Mutagenes. and Related Subj. 1990. - V. 182, № 5. - P.289-290.

184. Ribas G., Surralles J., Carbonell E. et al. Genotoxic evaluation of the herbicide triflura-tion on human lymphocytes exposed in vitro// Mutat. Res. 1996. - V. 371, № 1-2. - P. 15-21.

185. Ross D., Moldeus P., Sies H. et al. Mechanism and relevance of glutathione mutagenicity// Mutat. Res. Mutat./Res. Lett. 1986. - V. 175. - P. 127-131.

186. Sabbioni G., Schutre D. Hemoglobin binding of bicyclic aromatic amines// Chem. Res. Toxicol. 1998. -V. 11, № 1. - P. 471-483.

187. Salvadori D.M., Ribeiro L.R., Natarajan A.T. Effect of beta-carotene on clastogenic effects of mitomycin C, methyl methanesulphonate and bleomicin in Chinese hamster ovary cells // Mutagenesis.- 1994,- V. 9, №1.- P. 53-57.

188. Santamaria L., Bianchi Santamaria A. Carotenoids and vitamin A in prevention, adjuvant cancer therapy, mastaglia threatment, and AIDS-related complex // Ann. N. Y. Acad. Sci.- 1993,- №691,- P. 255-258.

189. Sarkar A., Bishayee A., Chatterjee M. Beta-carotene prevents lipid peroxidation and red blood cell membrane protein damage in experimental hepatocarcinogenesis // Cancer. Biochem. Biophys.- 1995,-V. 15, №2,-P. 111-125.

190. Schiffman D., Boni U de. et al. Micronuclei induced by diethylstibestrol analog are formed from chromatin elements logging during chromosome migrating in mitosis// EEMS 18 Annu. Meeting.: Abstr. Varna. 1988. - P. 43.

191. Serbinova E.A., Packer L. Antioxidant properties of alpha-tocopherol and alpha-tocotrienol // Methods. En2ymol.- 1994,- V. 234,- P. 354-366.

192. Shamberger K.I. Genetic toxicology of ascorbic acid// Ibid. 1984. - V. 133. - P. 135159.

193. Smalls E., Patterson R.M. Reduction of benso(a)pyrene induced chromosomal aberrations by DL-alfa-tocopherol// Eur. J. cel. Biol. 1982. - V. 28. - P. 92-97.

194. Stark A.A., Zeiger E., Pagano D.A. Glutathione mutagenesis in Salmonella Typhi-murium is a gamma-glutamyltranspeptidase-enhanced process involving active oxigen apecies// Carcinogenesis. 1988. - V. 9. - P. 771-777.

195. Thorgeirsson S.S., Davis C.D. et al. Possible relationship between tissue distribution of DNA adducts and genotoxity of food-derved heterocyclic amines// Princess Takamatsu Sump. 1995. - № 23. - P. 85-92.

196. Serbinova E.A., Packer L. Antioxidant properties of alpha-tocopherol and alpha-tocotrienol// Methods. Enzymol. 1994. - V. 234. - P. 354-366.

197. Simic M.G., Bergtold D.S., Karam L.R. Generation of oxy radicals in biosystems// Mutat. Res. 1989. - V. 214. - P. 3-12.

198. Smith J.E., Solomons G. et al. Role of mycotoxins in human and animal nutrition and health//Nat. Toxins.- 1995,-V. 3,- P. 187-192.

199. Spotheim-Maurizot M., Ruiz S., Sabattier R. et al. Radioprotection of Dna by polia-mines// Int. J. Radiat. Biol. 1995. - V. 68, № 5. - P. 571-577.

200. Sugimoto Akiko Kagaku to kyoiku// Chem. and Educ. 1997. - V. 45, № 3. - P. 142143.

201. Takeda K., Kand H. Inhibitory effects of fatty acids on mutagenicity and DNA alkyla-tion with N-nitrosocompounds// Mutat Res. Environ. Mutagenes. and Related. Subj. -1991. V. 253, № 3. - P. 281-282.

202. Thust R. The mechanism of cytogenetic genotoxicity of exogenous glutathione in V-79 cells in vitro implication of hydrogen peroxidase and general traits of oxidative chromosome damade// Cell Biol, and Toxicol. - 1988. - V. 4. - P. 241-257.

203. Tsai E.C., Hirsch I.B., Brunzell J.D., Chait A. Reduced plasma radical trapping capacity and IDDM // Diabetes. 1994,- V. 43, № 8,- P. 1010-1014.

204. Tyrsina E.G., Rossikhina O.G., Abilev S.K., Tyrsin Yu.A. Inhibition of the bacterial mutagenicity of N-methyl-N'-nitro-N-nitrosoguanidine by ascorbic acid and ascorbyl palmitate // Mutat. Res.- 1994,- V. 321, №1-2,- P. 81-87.

205. Wayner D.D.M., Bunton G.W., Ingold K.U. The oxidant efficiency of vitamin C is concentration-dependent// Biochim. etBiophys. Acta. 1986. - V. 884. - P. 119-123.

206. Weitberg Alan B. Effect of combinations of antioxidants on phagocyte-induced sister-chromatid exchanges// Mutat. Res. 1989. - V. 224. - P. 1-5.

207. WeitzmannS.A., Stossel T.P. Phagocyte-induced mutation in Chinese hamster ovary cells// Cancer Lett. 1984. - Y. 221. - P. 337-341.

208. Wen Y., Killalea S., McGettingan P., Feely J. Lipid peroxidation and antioxidant vitamins C and E in hypertensive patients // Ir. J. Med. Sci.- 1996,- V. 165, №3,- P. 210-212.

209. Wilpart M., Speder A., Ninane P et al. Antimutagenic effects of natural and synthetic hormonal steroids// Teratogen., Carcinogen, and Mutagen. 1986. - V. 4. - P. 265-273.

210. Yamaguchi Tokio, Teracado Masaniro et al. Role of bilirubin as an antioxidant in an ishemia reperfusion of rat liver and induction of heme oxygenase// Biochem. and Bio-phys. Res. Commun. - 1996. - V. 223, № 1. - P. 129-135.

211. Yamamoto Yorihiro, Sone Hideco et al. Oxidative stress in LeC pats evaluated by plasma antioxidants and free fatty acids// J. Trace Elem. Exp. Med. 1997. - V. 10, № 2. -P. 129-134.

212. Yushmanov V.E., Tominaga T.T., Borissevich I.E., lmasato H., Tabak M. Binding of manganese and iron tetraphenilporphirine sulfonates to albumin is relevant to their cjntrast properties // Magn. Reson. Imaging.- 1996,- V. 14, №3,- P. 255-261.

213. Yu B.P. Cellular defenses against damage from reactive oxygen species// Physiolog. ReV. 1994. - V. 74. - P. 139-162.125

214. Zhang Er-Xian, Yu Li-Jue et al. Shengwuhuaxue yu shengwu wuli xuebao// Acta bio-chim. et biophys sin. 1996. - V. 28, № 2,- P. 218-222.

215. Zhou Yang, Gopalakrishnan Venkat et al. Actions of neurotoxic (3-amiloid on calcium homeostasis and viability of PC 12 cells are bloked by not by calcium channel antagonists// J. Newrochem. 1996. - V. 67, № 4. - P. 1419-1425.