Повышение эффективности промышленного производства хитозана с использованием метода высокоэффективной жидкостной хроматографии и разработка методики определения молекулярно-массового распределения тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, кандидат биологических наук Гринь, Андрей Владимирович

  • Гринь, Андрей Владимирович
  • кандидат биологических науккандидат биологических наук
  • 2008, Щёлково
  • Специальность ВАК РФ03.00.23
  • Количество страниц 132
Гринь, Андрей Владимирович. Повышение эффективности промышленного производства хитозана с использованием метода высокоэффективной жидкостной хроматографии и разработка методики определения молекулярно-массового распределения: дис. кандидат биологических наук: 03.00.23 - Биотехнология. Щёлково. 2008. 132 с.

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Гринь, Андрей Владимирович

Введение.

1. Литературный обзор.

1.1. Хитин как сырье для получения хитозана.

1.2. Способы получения хитозана.

1.3. Хроматографические методы в контроле качества хитозана.

1.4. Биологические свойства низкодисперсного хитозана

Рекомендованный список диссертаций по специальности «Биотехнология», 03.00.23 шифр ВАК

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Повышение эффективности промышленного производства хитозана с использованием метода высокоэффективной жидкостной хроматографии и разработка методики определения молекулярно-массового распределения»

Актуальность темы. Хитин был открыт в 1811 г. (Н. Braconnot, A. Odier), хитозан - в 1859 г. (С. Rouget), хотя свое нынешнее название получил в 1894 г. (F. Hoppe-Seyler). В первой половине XX в. к хитину и его производным был проявлен заслуженный интерес, в частности, к нему имели непосредственное отношение три Нобелевских лауреата: Е. Fisher (1903) синтезировал глюкозамин, P. Karrer (1929) провел деградацию хитина с помощью хитин аз и, наконец, W.N. Haworth (1939) установил абсолютную конфигурацию глюкозамина. В России первые работы по хитину относятся к 1933-1934 гг. (П.П. Шорыгин), хотя широкомасштабные исследования были начаты около 30 лет назад. Сегодня интерес к этим биополимерам небывало возрос. Чем больше ученые узнают о свойствах хитина и хитозана, тем шире сфера их практического использования. И с каждым годом возникают совершенно новые и неожиданные направления. К числу основных областей использования хитозана можно отнести медицину, ветеринарную медицину, сельское хозяйство, косметологию и пищевую промышленность.

Источники получения хитозана имеются во многих странах, но промышленное производство хитина и хитозана освоено преимущественно в Японии (в 1998 г. произведено 2500 т хитина и хитозан) США (производится около 1000 т хитозана в год) и Китае (около 400 т в год).

От способа получения хитозана и методов контроля зависит его качество и стандартность (К.Г. Скрябин, Г.А. Вихорева, В.П. Варламов, 2002; В.М. Быкова, С.В. Немцев, 2002; А.И. Албулов и др., 2005).

В ряде работ показаны технологические и методические проблемы получения стандартных препаратов хитозана и пути их решения (Д.В. Герасименко, 2005 и др.).

В настоящее время высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ) является наиболее информативным методом анализа биологически активных соединений - исследования белков, ферментов, аминокислот, пептидов, моно-, олиго- и полисахаридов и др. (Я.И. Яшин, А.Я. Яшин, 2003).

Эксюпозионная ВЭЖХ является одним из основных методов определения молекулярно-массового распределения (ММР) полимеров (Б.Г. Беленький, JI.3. Виленчик, 1978; W. W. Yau, J.J. Kirkland, D.D. Bly, 2001); ММР хитозана (J. Brugnerotto, J. Desbrieres, G. Roberts, M. Rinaudo, 2001; C.A. Лопатин, M.C. Дербенева, C.H. Куликов, В.П. Варламов, О.А. Шпигун, 2008).

Цель и задачи работы. Целью настоящей работы является разработка методов повышения эффективности промышленного производства хитозана с использованием метода ВЭЖХ и разработка методики определения ММР полимерных молекул хитозана и содержания примесных соединений.

Для достижения этой цели поставлены следующие задачи:

1. Усовершенствовать отдельные технологические стадии получения хитозана и содержания примесных соединений.

2. Разработать методику определения качества хитозана с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Оценить пригодность высокосшитого ПДВБ сорбента для приготовления высокоэффективных хроматографических колонок (ВЭХК). Выбрать стандарты молекулярных масс для их градуировки.

3. Применить метод ВЭЖХ для контроля в технологическом процессе разработки и совершенствования препаратов хитозана для народного хозяйства.

4. Оценить биологическую активность полученого хитозана.

Научная новизна работы.

Впервые усовершенствован и оптимизирован технологический процесс производства хитозана с использованием экструдеров для измельчения и деацетилирования хитина.

Впервые использованы коммерческие ферментные препараты, широко применяемые в кормопроизводстве для неспецифического гидролиза хитозана и получения низкомолекулярных олигомеров.

Впервые определено ММР полимерных молекул хитозана, содержание хитозан-хитиновых полимерных молекул и хитозан-белковых комплексов в препаратах хитозана при использовании ВЭХК (150 х 3 мм), заполненной моносферическими зёрнами высокосшитого ПДВБ сорбента диаметром 10 мкм [патент России № 2295127].

Впервые в качестве элюента и для растворения проб препаратов хитозана использован 3-4 % водный раствор уксусной кислоты. Определение ММР полимерных молекул хитозана в препаратах хитозана осуществляли на рефрактометрическом детекторе по первому хроматографическому пику, а содержание хитозан-хитиновых полимерных молекула и хигозан-белкового комплекса рассчитывали по площадям второго и третьего хроматографических пиков.

Впервые установлено, что на ВЭХК с высокосшитым ПДВБ сорбентом разделяются полимерные молекулы хитозана по эксклюзионному механизму, а элюирование хитозан-хитиновых полимерных молекул и хитозан-белкового комплекса по сорбционному механизму.

Впервые определены качественные отличия промышленно выпускаемых хитозанов, полученных различными способами.

Впервые показана биологическая активность промышленно получаемых хитозанов с различной молекулярной массой, охарактеризованных по молекулярно-массовому распределению и содержанию примесных соединений.

Практическая значимость работы.

1. Оптимизированы и усовершенствованы существующие технологии промышленного производства хитозана, улучшены его физико-химические характеристики, повышена биологическая активность.

2. Разработана методика определения в препаратах хитозана ММР полимерных молекул хитозана и содержания примесных соединений при использовании ВЭХК (150 х 3 мм), заполненной моносферическими зёрнами высокосшитого ПДВБ сорбента и 3-4 % водного раствора уксусной кислоты в качестве элюента.

3. Разработанная методика позволяет проводить качественный экспресс-контроль на производстве, обеспечивая высокие характеристики препаратов хитозана.

4. Разработанная методика позволяет контролировать физико-химические процессы, протекающие в препаратах хитозана при хранении.

5. Проведённые исследования позволили произвести промышленные партии хитозана с заданными свойствами и исследовать их в качестве лечебных и профилактических препаратов в животноводстве и ветеринарии.

На защиту выносятся:

1. Способы повышения эффективности промышленного производства хитозана.

2. Исследования высокосшитого ПДВБ сорбента, размер пор 500 А, в виде моносферических зёрен диаметром 10 мкм для приготовления хроматографических колонок. Исследования по оценке подвижных фаз для разделения на ВЭХК, детектированию полимерных молекул хитозана, проведению пробоподготовки высоко- и низкомолекулярного хитозана для хроматографического анализа.

3. Исследования ММР высоко- и низкомолекулярного хитозана, содержания примесных соединений в препаратах, полученных различными способами с использованием разработанной методики.

4. Применение метода ВЭЖХ по разработанной методике для определения качественных характеристик в промышленных препаратах хитозана ЗАО "Биопрогресс" и фирмы "Флюка".

5. Исследование биологических свойств хитозана с дифференцированной молекулярной массой.

Апробация работы. Материалы диссертации докладывались на заседаниях Ученого Совета Всероссийского научно-исследовательского и технологического института биологической промышленности, Щелково, 20042006; Международной научно-практической конференции, посвященной 35-летию Всероссийского научно-исследовательского и технологического института биологической промышленности. Щелково, 2005; Международной научно-практической конференции "Актуальные проблемы ветеринарной медицины в условиях современного животноводства", посвященной 75-летию института экспериментальной ветеринарии им. С.Н. Вышелесского НАН Беларуси и 100-летию со дня рождения академика Р.С. Чеботарева, Минск, 2005; Международноц научно-практической конференции "Перспектива и проблемы развития биотехнологии в рамках единого экономического пространства стран содружества", Минск-Нарочь, 2005; VIII Международной конференции "Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана", Казань, 2006; Международной научно-практической конференции "Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов", Щёлково, 2007; конференции "Основные проблемы ветеринарной медицины и стратегия борьбы с заболеваниями сельскохозяйственных животных в современных условиях", Махачкала, 2007; Всероссийском симпозиуме "Хроматография в химическом анализе и физико-химических исследованиях", посвящённом юбилею профессора О.Г. Ларионова, Москва-Клязьма, 2007; Всероссийском симпозиуме "Хроматография и хромато-масс-спектрометрия", посвящённом 100-летию со дня рождения профессора А.В. Киселёва, Москва-Клязьма, 2008; IX Международной конференции "Современные перспективы в исследовании хитина и хитозана", Ставрополь, 2008.

Публикация результатов исследований. По теме диссертации опубликовано 13 научных работ, в том числе патент РФ.

Внедрение. В 2006-2008гг. изготовлены и паспортизированы по разработанной методике 80 кг низкомолекулярного хитозана, полученного путем ферментативного и химического гидролиза, 60 кг сукцината хитозана, 40 кг гидрохлорида хитозана. Изготовлена опытная партия зубной пасты с хитозаном в количестве 4 кг.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 117 страницах машинописного текста и включает введение, обзор литературы, материалы и методы исследований, собственные исследования, обсуждение

Похожие диссертационные работы по специальности «Биотехнология», 03.00.23 шифр ВАК

Заключение диссертации по теме «Биотехнология», Гринь, Андрей Владимирович

5. Выводы

1. Усовершенствована технология получения хитозана, повышена стабильность качественных показателей получаемых продуктов, снижены затраты сырья в 2,8 раза и энергоемкость процесса в 4-8 раз.

2. Получен низкомолекулярный хитозан методом неспецифической деполимеризации хитозана с помощью коммерческих ферментных препаратов.

3. Определены ММР полимерных молекул хитозана с ММ 504 Да — 2000 кДа, содержания хитозан-хитиновых полимерных молекул и хитозан-белковых комплексов в препаратах хитозана на ВЭХК с высокосшитым ПДВБ сорбентом в виде моносферических зёрен диаметром 10 мкм. В качестве элюента использован 3-4 %-й водный раствор уксусной кислоты.

4. Разработана методика, позволяющая проводить исследования качества препаратов произведенного хитозана и коммерческих образцов после продолжительного хранения.

5. Проведены исследования по оптимизации молекулярной массы и молекулярно — массового распределения хитозанов, применяемых в животноводстве, ветеринарии и биотехнологии.

6. Скармливание хитозана телятам повышало привесы живой массы на 12,7% и 13,6% после 3 и 5 месяцев откорма, соответственно, по сравнению с контролем.

7. Хитозан обладает высокой антимикробной активностью в отношении микобактерий М. Smegmatis и грибов Penicillium vermaesseni.

8. Показано, что хитозан в качестве ранозаживляющего средства эффективен при лечении ран различной этиологии.

1.5. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Анализ литературных сведений показывает расширение спектра направлений и объёма использования хитозана и его производных. В народном хозяйстве постоянно возрастает потребление и совершенствуются способы получения хитозана, различающегося по своим свойствам. Разрабатываемые и внедряемые технологии ориентируют на снижение энергозатрат, ресурсосбережение, повышение экологической чистоты производства. Все это достигается за счет применения современных технических средств и автоматизации процессов.

Разрабатываются новые методы оценки качества хитозана. Со второй половины XX века быстрыми темпами идет внедрение хитозана и продуктов на его основе во многие сферы народного хозяйства, лавинообразно расширяются направления исследования этого полимера. По оценкам специалистов хитозан станет одним из основных полимеров ХХЗ века.

Поэтому разработка и усовершенствования новых методов исследования хитозана, оценки его свойств, совершенствования промышленных технологий его производства, и расширение областей применения, применения, являются актуальными задачами для научных исследований, что, несомненно, имеет важное народно-хозяйственное значение.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Материалы и методы.

Использованное оборудование.

Хроматографическую систему, состоящую из следующих частей: насосы высокого давления ("Кнауер", Германия), которые обеспечивают расходы элюента в изократическом и градиентном режимах 0,1-10,0 мл/мин; инжектор ("Кнауер", Германия) с объёмом дозирующей петли 10 и 20 мкл; хроматографическая колонка из стекла (150 мм х 3 мм) с металлическими фильтрами, заполненная высокосшитым ПДВБ сорбентом с размером пор 500 А, в виде моносферических зёрен диаметром 10 мкм; дифференциальный рефрактометрический детектор RIDK-102 с проточной кварцевой кюветой объемом 10 мкл ("Laboratorni pristroje prana", Чехословакия); ультрафиолетовый детектор — спектрофотометр 195-900 нм с проточной кварцевой кюветой объемом 7 мкл ("Хитачи", Япония); программа "Экохром" с интерфейсом, обеспечивающая соединение детекторов с компьютером для записи и расчёта хроматограмм (разработана ведущим конструктором Института органической химии им. Н.Д. Зелинского РАН Бойцовым В.Н.); самописец TZ-4620 ("Laboratorni pristroje prana", Чехословакия). Пробы вводили с помощью стеклянного микрошприца объёмом 25 мкл (Hamilton, США).

Устройство для набивки колонок для ВЭЖХ (Россия); колонки из стекла длиной 150 мм, внутренним диаметром 3 мм с металлическими фильтрами (Чехословакия).

Высокосшитый ПДВБ сорбент, с размером пор 500 А, в виде моносферических зёрен диаметром 10 мкм синтезирован Сочилиной К.О. и Сочилиным В.А. в соответствии с [32] АНО "Синтез полимерных сорбентов"

Упаковку хроматографических колонок из стекла высокосшитым ПДВБ сорбентом в виде моносферических зёрен диаметром 10 мкм осуществляли совместно с Хабаровым В.Б. и Прониным А.Я. в соответствии с [45] в лаборатории физико-химических основ хроматографии и хромато-масс-спектрометрии Института физической химии и электрохимии им. А.Н. Фрумкина РАН.

Для градуировки ВЭХК с ПДВБ сорбентом использовали стандарты молекулярных масс декстранов Т-серии с ММ 504 Да - 2000 кДа фирмы "Serva" [181].

Для измерения рН использовали рН-метр-иономер "Экотест-2000" (НПП "Эконикс", Россия). Центрифуга марки OTP 101К; ультратермостат марки <<Sanyo»[50].

Лабораторные исследования проводили в двухшнековом экструдере фирмы "Berstorff" (Германия) в течение 3 мин при различной температуре (5-180°С) и влажности полимера (5 и 70 %). Дезацетилировали хитин при 180 °С 5-кратным мольным избытком NaOH с последующей очисткой полученного хитозана. В очищенных и высушенных образцах весовым методом определяли содержание растворимой в 0,1 М НС1 фракции. Гранулометрический анализ проводили с использованием набора сит [167].

Микрофотографии получены на растровом электронном микроскопе JSM-5300LV фирмы "Jed"[67].

Получение коллоидного хитина краба: 20 г хитина краба заливали 200 мл 85% ортофосфорной кислоты, размешивали и оставляли на 24 ч при комнатной температуре. Далее смесь прогревали на бане при температуре 40-50°С в течение 30 мин, после чего добавляли дистиллированную воду и фильтровали через стеклянный фильтр. Коллоидный хитин отмывали до нейтрального значения рН. Содержание сухого вещества, определенное после лиофильного высушивания аликвоты суспензии, составило 10 мг/мл. Использован крабовый высокомолекулярный хитозан (СД 85%, MM (Mw) 790 кДа), предоставленный ВНИТИБП и ЗАО "Биопрогресс".

Для сравнительных исследований использовали три образца хитозана низкой, средней и высокой вязкости фирмы "Флюка" (Япония)[196].

Хитиназную активность определяли по количеству восстанавливающих Сахаров по реакции с 3,5-динатросалициловой кислотой [64], используя в качестве субстрата коллоидный хитин.

А=показание прибора' 3/0,11 0,22 15 (мк моль/мин мл ), где

15 - время реакции (мин);

0,11 - коэффициент прибора;

0,22 — молекулярный вес N-ацетил-Б-глюкозамина;

3 - разведение реакционной среды.

Определение хитобиазной активности: 0,5 мл п-нитрофенил-ГЧ-ацетил-В-D-глюкозаминида в ОД М Na-фосфатном буфере рН 6,5 с концентрацией 1 мг/мл инкубировали с 0,5 мл раствора фермента в том же буфере при 37 С в течение 15 мин. Реакцию останавливали добавлением 2,5 мл 0,5 М Na2C03. Измеряли оптическое поглощение на спектрофотометре "Spekol-11" (Германия) при длине волны (А,) 440 нм. За единицу активности принимали количество фермента, выделяющегося 1 мин в условиях опыта.

Активность рассчитывали по формуле:

A=D4o5 ' V0/18,5" Ve' t (uM п-нитро фенола/ мл мин), где

Vo-объем реакционной среды (мл);

Уе-объем ферментного препарата (мл); t-время реакции (мин);

18,5-коэффициент молярной экстинкции п-нитрофенола или A=D405 'Уо/18,5 Ve t с (uM п-нитрофенола/мг мин), где с-концентрация белка в ферментном препарате (мг/мл). Удельная активность F выражали в единицах на мл раствора или на мг белка.

Протеазную активность определяли по количеству растворимых продуктов гидролиза, используя в качестве субстрата азоказеин: ПА=А44о/время инкубации (ед/мл).

Степень деацетилирования (СД) хитозана определяли методом кондуктометрического титрования [73]. Для этого навеску образцов хитозана (50-100 мг) суспендировали в 5 мл 0,1 н HCI и 25 мл дистиллированной воды. Полученный раствор титровали 0,1 М NaOH, добавляя его порциями по 0,1 мл через каждые 30 сек при постоянном перемешивании. Количество щелочи в мл, необходимое для титрования свободных аминогрупп, определяли из графика зависимости электропроводности раствора от объема щелочи, рассчитывая «плато» на двоякоизломанной кривой титрования. Расчет СД вели по формуле: СД=Мх'УШр+(Мх+Мхт)-У1Ч х 100%=203'V'N/p+42'VN х 100%, где: Мх - молекулярная масса звена хитина; Мхщ - молекулярная масса звена хитозана;

V - разница объемов NaOH («плато»), определяем из графика, мл; N - нормальность NaOH; р - навеска хитозана, мг.

2.2. Усовершенствование технологии производства хитозана.

2.2.1. Усовершенствование технологии производства хитозана с высокой молекулярной массой.

Деацетилароваиие хитина экструзионным способом.

Как уже было отмечено в литературном обзоре, среди производных хитина наиболее изучен хитозан - продукт дезацетилирования хитина, получаемый обработкой хитина концентрированными водными растворами NaOH. При всех имеющихся различиях известным способам получения хитозана присуши общие недостатки: использование большого избытка агрессивных дезацетилирующих реагентов и, как следствие этого, необходимость утилизации сточных вод для обеспечения экологической чистоты процесса.

Разработка новых методов синтеза производных хитина, в частности хитозана, является одним из перспективных направлений современной химии полисахаридов.

Поскольку в условиях совместного воздействия высокого давления и сдвиговых деформаций протекают реакции получения некоторых производных целлюлозы в тех случаях, когда все компоненты реакции являются твердыми веществами, можно было ожидать, что в таких условиях будет происходить взаимодействие в твердой фазе между другим представителем класса полисахаридов — хитином и щелочью с образованием хитозана.

Полученные результаты по дезацетилированию хитина в твердом состоянии при различных молярных соотношениях и различных температурах представлены в таблице 1. Как видно из приведенных данных, увеличение избытка (количества) NaOH приводит к повышению степени дезацетилирования (СД) и растворимости получаемых продуктов. Для получения практически полностью дезацетилированного продукта с растворимостью 90 % достаточным является 5-кратный мольный избыток едкого натра, в то время как в известных способах получения хитозана используют не менее 10 молей NaOH на 1 моль хитина.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Гринь, Андрей Владимирович, 2008 год

1. Беленький Б.Г., Виленчик JI.3. Хроматография полимеров. М.: Химия, 1978, с. 139-145.

2. Бондаренко В.М., Червинец В.М., Воробьев А.А. Роль персистирующих условнопатогенных бактерий в патогенезе язвенной болезни желудка и 12-перстной кишки // Журнал микробиологии, эпидемиологии и иммунобиологии. 2003. № 4. С. 11-17.

3. Быков В.П. Состояние и перспективы развития производства хитина, хитозана и продуктов на их основе из панциря ракообразных // Материалы Пятой конф. «Новые перспективы в исследовании хитина и хитозана». -М.: ВНИРО. 1999. С. 15-17.

4. Варламов В.П. Антибактериальная активность водорастворимых низкомолекулярных хитозанов в отношении различных микроорганизмов // Прикладная биохимия и микробиология.-2004.-Т.40.-№3.-С.301-306.

5. Варламов В.П., Ильина А.В., Банникова Г.Е., Немцев С.В., Ильин Л.А., Чертков К.С., Андрианова И.Е., Платонов Ю.В., Скрябин К.Г. Патент РФ № 2188829. Способ получения низкомолекулярного хитозана для противолучевых препаратов / Опубл. в Б.И. 2002. - № 25.

6. Варламов В.П., Стояченко И.А., Буданов М.В. Патент РФ № 2073016. Способ получения низкомолекулярного водорастворимого хитозана / Опубл. в Б.И. 1997. -№4.

7. Герасименко Д.В., Авдиенко И.Д., Банникова Г.Е., Зуева

8. Горовой Л.Ф., Косяков В.Н. Сорбционные свойства хитина и его производных // Хитин и хитозан: Получение, свойства и применение / Под ред. К.Г. Скрябина, Г.А. Вихоревой, В.П. Варламова. -М.: Наука. 2002. С. 217246.

9. Етсуко Накао (Япония). Патент РФ № 2057760. Олигомер хитина или хитозана и способ его получения./ Опубл. в Б.И. 1996. - № 10.

10. Ильина А.В., Варламов В.П., Мелентьев A.M., Актуганов Г.Э.

11. Деполимеризация хитозана хитинолитическим комплексом бактерии рода Bacillus sp. 739 // Прикладная биохимия и микробиология. 2001. Т. 37. № 2. С. 160-163.

12. Ильина А.В., Татаринова Н.Ю., Тихонов В.Е., Варламов В.П. Внеклеточные протеиназа и хитиназа, продуцируемые культурой Streptomyces kursanovii II Прикладная биохимия и микробиология. 2000. Т. 36. №2. С. 173-177.

13. Ильина А.В., Ткачева Ю.В., Варламов В.П. Деполимеризация низкокомолекулярного хитозана ферментным препаратом Целловиридин Г20Х // Прикладная биохимия и микробиология. 2002. Т. 38. №2. С. 132-135.

14. Кайминын И.Ф. Физико-химические свойства хитозана и возможности его практического использования // Матер. V Междунар. конф. «Новые перспективы в исследовании хитина и хитозана». -М.: ВНИРО. -1999.-С.230-231.

15. Кленкова Н.И. Структура и реакционная способность целлюлозы.-JL: Наука. Ленинградское отделение, 1976.- с. 152-191.

16. Кочкина З.М., Чирков С.Н. Влияние производных хитозана на репродукцию колифагов Т2 и Т7 // Микробиология. 2000. Т.69. № 2. С. 257260.

17. Кочкина З.М., Сургучева Н.А., Чирков С.Н. Инактивация колифагов производными хитозана // Микробиология.-2000.-Т.69.-№2.-С.261-265.

18. Кулев Д.Х., Львова Е.Б. Хитинсодержащая пищевая добавка из мицелиальной биомассы Aspergillus niger II Матер. VI Междунар. конф. «Новые достижения в исследовании хитина и хитозана». -М.: ВНИРО. 2001. С. 204-207.

19. Куприна Е.Э., Водолажская СВ. Способы получения и активации хитина и хитозана // Хитин и хитозан: Получение, свойства и применение / Под ред. К.Г. Скрябина, Г.А. Вихоревой, В.П. Варламова. -М.: Наука. 2002. С. 44-63.

20. Максимов В.И., Родоман В.Е., Лунцевич В.Г. Фитоактивные хитиновые соединения (Обзор) // Прикладная биохимия и микробиология. 1997. Т. 33. №4. С. 355-362.

21. Максимов В.И., Денисов В.М., Макаров Н.В. Патент РФ № 1571047. Способ получения водорастворимых олигосахаридов / Опубл. в Б.И. 1990. - № 22.

22. Маслова Г.В. Теория и практика получения хитина электрохимическим способом // Хитин и хитозан: Получение, свойстваи применение / Под ред. К.Г. Скрябина, Г.А. Вихоревой, В.П. Варламова. — М.: Наука. 2002. С. 24-43.

23. Мелентьев А.И., Актуганов Г.Э. Выделение, очистка и характеристик^-хитиназы Bacillus sp. 739 // Прикладная биохимия и микробиология. 1999. Т 35. № 6. С. 624-628.

24. Пириева Д.А., Чигалейчик А.Г., Тиунова Н.А., Рылкин С.С Физиолого-биохимические свойства Actinomyces kurssanovii активного продуцента хитиназы // Микробиология. 1977. Т. 46. № 4. С. 661 — 665.

25. Плиско Е.А., Нудьга JI.A. Хитин и его химические превращения /*У Успехи химии. 1984. Т. 46. № 8. С. 14704487.

26. Порфирьева О.В., Юсупова Д.В., Зоткина H.JL, Соколова Р.Б, Габдрахманова JI.A. Хитинолитический комплекс Serratia marcesceixsи особенности его биосинтеза//Микробиология. 1997. Т. 66. № 3. С. 347-353.

27. Пронин А.Я., Хабаров В.Б., Оспенникова О.Г., Пикулина JI.B., Антипине

28. JI.M., Ларионов О.Г. Патент РФ № 2280252. Способ определения молекулярно— массового распределения олигомеров этоксисилоксанов в гидролиз ованных je^ негидролизованных этилсиликатах / Опубл. в Бюл. № 20, 2006 г.

29. Роговина С.З. Химическая модификация природных полисахаридов целлюлозы, хитина и хитозана в твердой фазе под действиезкя: сдвиговых деформаций: Дисс. Доктора хим. Наук. Москва. 2003. 163с.

30. Сео С.-Б., Рю Ч.-С, Ким Х.-Б., Ан Г.-В., Джо Б.-К., Каджиучи "Г. Получение многофункционального низкомолекулярного хитозана jetего применение в косметике // Косметическая химия. 2003. № 1. С. 26-30.

31. Сочилина К.О., Сочилин В.А. Патент РФ № 2163911. Способ получениесорбентов для хроматографии. Опубл. в Бюл. № 7, 2001 г.

32. Степнова Е.А., Тихонов В.Е., Лопатин С.А., Варламов В.П., Ямсков Зависимость фунгицидной активности хитозана от его молекулярного веса. Вестник Московского университета им. М.В. Ломоносова. Серия 2. Химия. 200~7. Т. 48. №5. С. 314-316.

33. Стояченко И.А. Выделение, очистка хитиназ Str. kurssanovii и ферментативное расщепление хитина и хитозана. Диссертация к.х.н. Институт Биохимии. 1992. 169с.

34. Тиунова Н.А. Хитинолитические ферменты микрорганизмов // Успехииологической химии. 1989. Т. 30. С. 199-219.

35. Тюпенко Г.И., Скорикова Е.Е., Зязин А.Б. Электрофорез хитозана при лечении заболеваний пародонта // Матер. VI Междунар. конф. «Новые достижения в исследовании хитина и хитозана». -М.: ВНИРО. 2001. С. 241248.

36. Тютерев C.JI. Молекулярные механизмы действия хитозана вкачестве средства, повышающего болезнеустойчивость растений // Материалы Седьмой Междунар. конф. «Новые перспективы в исследовании хитина и хитозана». -М.: ВНИРО. 2003. С.118-121

37. Усманов Т.И., Рашидова С.Ш., Ашуров Н.Ш., Султанов А.Ж. Исследование микроструктуры цепи хитозанов методом ЯМР-спектроскопии// Материалы Пятой конференции «Новые перспективы в исследовании хитина и хитозана».- М. ВНИРО, 1999. С.263-265.

38. Феофилова Е.П. Клеточная стенка грибов.-М.: Наука. 1983. 315с.

39. Хабаров В.Б., Пронин А.Я., Антипин JI.M. Некотрые особенности хроматографического поведения олигомеров кремнийорганических соединений.// Всероссийский симпозиум "Хроматография и хроматографические приборы". Сборник тезисов. М. 2004. С. 101.

40. Хабаров В.Б., Пронин А.Я., Буряк А.К. Патент РФ № 2330280. Способ определения форм существования и молекулярно-массового распределения полимерных молекул кремниевой кислоты в геотермальных водных растворах / Опубл. в Бюл. № 21, 2008 г.

41. Хабаров В.Б., Пронин А.Я., Ермаков В.В., Буряк А.К., Хабаров М.В. Патент Рф № 2278379. Способ приготовления высокоэффективных колонок с полимерными сорбентами для жидкостной хроматографии / Опубл. в Бюл. № 17, 2006 г.

42. Химическая энциклопедия. М., 1988. Т. 1. С. 147.

43. Чирков С.Н. Противовирусная активность хитозана // Прикладнаябиохимия и микробиология. 2002. Т. 38. № 1. С. 5-13.

44. Яшин Я.И., Яшин А.Я. Высокоэффективная жидкостная хроматография.

45. Состояние и перспективы. Ж. Рос. хим. об-ва им. Д.И. Менделеева "100 лет хроматографии", 2003, т. XLVII, № 1, с. 64-79.

46. Allenmark S.G., Andersson S.// Chromatogr., 666, 167-179, 1994.

47. Alonso M.J., Sanchez A. The potential of chitosan in ocular drug delivery //J. Pharm. Pharmocol. 2003. V. 55. № 11. P. 1451-1463.

48. AlsarraLA., Betigeri S.S., Zhang H., Evans B.A., Neau S.H. Molecular weight and degree of deacetylation effects on lipase-loaded chitosan bead characteristics // Biomaterials.-2002.-V.23.-P.3637-3644.

49. Anthonsen M.W., Verum K.M. Solution properties of chitosans: Conformation and chian stiffness with different degress of N-acetylation // Carbohydrate Polymers, 1993. -V. 22. — P. 193-201.

50. Bacon A., Makin J., Sizer P.J., Jabbal-Gill I., Hinchcliffe M., Ilium L., Chatfleld S., Roberts M. Carbohydrate biopolymers enhance antibody responses to mucosally delivered vaccine antigens // Infec. Immunity. 2000. V. 68. № 10. P. 5764-5770.

51. Berger J., Reist M., Mayer J.M., Felt O., Gurny R. Structure and interactions in chitosan hydrogels formed by complexation or aggregation for biomedical applications //Eur. J. Pharm. Biopharm. 2004. V. 57. № 1. P. 35-52.

52. Berger J., Reist M., Mayer J.M., Felt O., Peppas N.A., Gurny R. Structure and interactions in covalently and ionically crosslinked chitosan hydrogels for biomedical applications //Eur. J. Pharm. Biopharm. 2004. -V. 57. P. 19-34.

53. Berth G., Dautzenberg H. The degree of acetylation of chitosans and its effect on the chain conformation in aqueous solution // Carbohydr. Polym. -V.47. -2002. -P.39-51.

54. Bough W.A., Solter W.L., Wu A.C.M. et al. // Biotechnol., Bioengin. 1978. V. 20.-P. 1931-1943.

55. Brugnerotto L, Lizardi J., Goycoolea F.M., Argiielles-Monal W., Desbrieres J. An infrared investigation in relation with chitin and chitosan characterization //Polymer. 2001. V. 42. P. 3569-3580.

56. Brugnerotto J., Desbrieres J., Roberts G., Rinaudo M. Characterization of chitosan by steric exclusion chromatography / J. Polymer, 2001, v. 42, p. 9921-9927.

57. Brurberg M.B., Eijsink G.H., Haandrikman F.J. Chitinase В from S.marcescens BJL 200 is exported to the periplasm without processing // Microbiol. 1994. V.141. №2. P.123-131.

58. Budanova N., Shapovalova E., Lopatin S., Varlamov V., Shpigun O. // Chromatographia. 2004. -V. 59. -N 11/12. -P. 709-713.

59. Byun H.G., Kim Y.T., Park P.J., Kim S.K. // Carbohydr. Polym. 2005. V. 61. -P. 198-202.

60. Carunchio V., Girelli A.M., Messina A. // J. Chromatogr., 23, 731-735, 1987.

61. Cass Q.B., Bassi A.L., Matlin S.A. // Chirality, 8, 131-135, 1996.

62. Chatelet C, Damour O., Domard A. Influence of the degree of acetylation on some biological properties of chitosan films // Biomaterials. 2001. V. 22. P. 261-268.

63. Chimiak V., Poionski J. // J. Chromatogr., 115, 635-641, 1975.

64. Chitin Handbook / Eds. Muzzarelli R.A.A., Peter M.G. Grottammare: Atec Edizioni. 1999. P. 534.

65. Choi B.-K., Kim K.-Y, Yoo Y.-J., Oh S.-J., Choi J.-H., Kim C.-Y. In vitro antimicrobial activity of a chitooligosacharide mixture against Actitinomyces emcomitans and Streptococcus mutants II Int. J. Antimicrob. Agents.-200l.-V. 18.-P.553-557.

66. Chung Y.C., Wang H.L., Chen Y.M., Li S.L. Effect of abiotic factors on the antibacterial activity of chitosan against waterborne pathogens // Bioresour. Technol.-2003.-V.88.-№> 3.-P.179-184.

67. Cuero R.G. Antimicrobial action of exogenous chitosan // EXS.-1999.-V.87.-P.315-333.

68. Davankov V. //Adv. Chromatogr., 18, 139-144, 1980.

69. DomarA.//Ibid. 1993.-N2.-P. 10-15.

70. Felt O., Carrel A., Baehni P., Buri P., Gurny R. Chitosan as tear substitute: a wetting agent endowed with antimicrobial efficacy // J. Ocul. Pharmacol. Ther.-2000.-V.16.-№3.-P.261-270.

71. Feofilova E.P., Mar'in A.P., Tereshina V.M., Nemsev D.M., Kozlov V.P. Role of components of cell walls in metal uptake by Aspergillus niger II Res. Environ. Biotech.-2000.-V.3.-P.61-69.

72. Focher В., Naggi A. et al. Chitosans from Euphausia superba. 2: Characterization of solid state structure // Carbohydr. Polym. 1992. -V. 18. -N 1. P. 43-49.

73. Foster A.B., Hackman R.H. // Nature. 1957. V. 180. - P. 40-44.

74. Franko R, Senso A., Minguillon C., Olivtros L. // J. Chromatogr., 796, 265-272, 1998.

75. Gil G., del Monaco S., Cerrutti P., Galvagno M. Selective antimicrobial activity of chitosan on beer spoilage bacteria and brewing yeasts // Biotechnology Letters.-2004.-V.26.-P.569-574.

76. Guggi D., Kast C.E., Bernkop-Schnurch A. In vivo evaluation of an oral salmon calcitonin-delivery system based on a thiolated chitosan carrier matrix // Pharm. Res. 2003. V. 20. № 12. P. 1989-1994.

77. Graslund S., Nordlund P., Weigelt J. et al. Protein production and purification // Nature Methods. 2008. V. 5. - N 2. - P. 135-145.

78. Harpster M.H., Dunsmuir P. Nucleotide seguence of the chitinase В gene of S.marcescens QMB 1466 //Nucl. Acids Research. 1989. V.17. № 13. P.5395-5402.

79. Heterogeneous N-deacetylation of chitin in alkaline solution / K.L.B.Chang, G. Tsai, J. Lee, W.-R. Fu//Carbohydr. Res. 1997. -V. 303. P. 327-332.

80. Hirano S., Matsumura T. // Carbohydr. Res. 1987. V. 165. - P. 12-122.

81. Howling G.I., Dettmar P.W., Goddard P.A., Hampson F.C., Dornish M, Vood E.J. The effect of chitin and chitosan on the proliferation of human skin ibroblasts and keratinocytes in vitro // Biomaterials. 2001. V. 22. P. 2959-2966.

82. Hsu S., Whu S.W., Tsai C-L., Wu Y.-H., Chen H.-W., Hsieh K.-H. Chitosan as scaffold materials: effects of molecular weight and degree of deacetylation // J. Polymer Research. 2004. V. 11. P. 141-147.

83. Huang M., Khor E., Lim L.-Y. Uptake and cytotoxicity of chitosan molecules and nanoparticles: effects of molecular weight and degree of deacetylation // Pharmaceutical Research. 2004. V. 21. № 2. P. 344-353.

84. Isogai A. Molecular mass distribution of chitin and chitosan // In book: Chitin handbook. Ed.: R.A.A. Muzarelli, M.G. Peter Italy: Atec, Grottamare. -1997. -P. 103108.

85. Jeon Y.J., Kim S.K. Production of chitooligosaccharides using an ultrafiltration membrane reactor and their antimicrobial activity // Carbohydr. Polym. -V.41. -2000. -P.133-141.

86. Jia Z., Shen D., Xu W. Synthesis and antibacterial activities of quaternary ammonium salt of chitosan // Carbohydr. Res.-2001.-V.333.-P.1-6.

87. Juang R-S., Shao H-J. A simplified equilibrium model for sorbtion of heavy metal ions from aqueous solutions on chitosan // Water Research. -V.36, N12. -2002. -P.2999-3008.

88. Kato Y., Onishi H., Machida Y. Application of chitin and chitosan darivatives in the pharmaceutical field // Curr. Pharm. Biotechnol. 2003. V. 4. № 5. P. 303-309.

89. Kelly H.M., Deasy P.B., Ziaka E., Claffey N. Formulation and preliminary in vivo dog studies of a novel drug delivery system for the treatment of periodontitis // Int. J. Pharm. 2004. V. 274. № 1-2. P. 167-183.

90. Khor E., Lim L.Y. Implantable applications of chitin and chitosan // Jiomaterials. 2003. V. 24. P. 2339-2349.

91. Koga D., Mitsutomi M., Kono M. etal. //Exs. 1999. -V. 87. P. 111-123.

92. Kollar R, Petracova E., Ashwell G., Robbins P.W., Cabib E. Architecture of the yeast cell wall // J.Biol.Chem. 1995. V.270. №3 P.I 170-1178.

93. Kuberka M., Heschel I., Glasmacher В., Rau G. Preparation of collagen scaffolds and their applications in tissue engineering // Biomed. Tech. 2002. V. 47. Suppl. l.Pt 1. P. 485-487.

94. Kumar A.B.V., Varadaraj M.C., Lalitha R.G., Tharanathan R.N. Low molecular weight chitosans: preparation with the aid of papain and characterization/ZBiochim. Biophys. Acta.- 2004.-V.1670.-P. 137-146.

95. Kumar B.A., Varadaraj M.C, Tharanathan R.N. Low molecular weight chitosan—preparation with the aid of pepsin, characterization, and its bactericidal activity // Biomacromolecules. -2007.-V.8.-N.2.-P.566-572.

96. Kumar M.N.V.R. A review of chitin and chitosan applications (Review) // Leact. Functional Polymers. 2000. V. 46. P. 1-27.

97. Kuprina E., Batchische E. Electrochemical method for obtaining water-soluble oligomers of chitin // Book of abstracts of 10th International Conference on Chitin & Chitosan, 6-9 September 2006. Le Corum-Montpellier France, 2006. - P. 84.

98. Kurashi Y., Ono H., Wang В., Egashiram O. Kazuya, Anal. Sci., 13, 47-52, 1997.

99. Kurita K. Chitin and chitosan: functional biopolymers from marine Crustaceans // Marine Biotech. 2006. V. 8. - P. 203-226.

100. Kurita K., Sannan Т., Iwakura Y. Studies on chitin. 4. Evidence for formation of block and random copolymers of N-acetyl-D-glucosamine and D-glucosamine by hetero- and homogeneous hydrolysis // Macromol. Chem. 1977. V. 178.-N 12.-P. 3197-3202.

101. Lamarque G., Chaussard G., Domard A. Thermodynamic aspects of the heterogeneous deacetylation of beta-chitin: Reactionn mechanisms // Biomacromolecules. 2007. -V. 8. -N 6. P. 1942-1950.

102. Lim S.-H., Hudson S.M. Review of chitosan and its derivatives as antimicrobial agents and their uses as textile chemicals // J. Macromol. Sci. 2003. V. 43. №2. P. 223-269.

103. Lim H.-S., Kim Y.-S., Kim S.-D. Pseudomonas stutzeri YPL-1 genetic transformation and antifungal mechanism against Fusarium solani, an agent of plant root rot//Appl. Environ. Microbiol. 1991. V.57. № 2. P.510-516.

104. Lim S.-H., Hudson S.M. Application of a fiber-reactive chitosan derivative о cotton fabric as an antimicrobial textile finish // Carbohydr. Polym. 2004. V. 56. P. 227-234.

105. Liu H., Mao J., Yao K., Yang G., Cui L., Cao Y. A study on a chitosan-gelatin-hyaluronic acid scaffold as artificial skin in vitro and its tissue engineering applications // J. Biomater. Sci. Polym. Ed. 2004. V. 15. № 1. P. 25-40.

106. Liu X.F., Guan Y.L., Yang D.Z., Li Z., Yao K.D. Antibacterial action of chitosan and carboxymethylated chitosan // J. Appl. Polym. Sci.-2001.-V.79.-P.1324-1335.

107. Lusena C.V., Rose R.C. // J. Fish Res. Board Can. 1953. V. 10. - P. 521525.

108. MacLaughlin F.C., Mumper R.J., Wang J., Tagliaferri J.M., Gill I.,Hinchcliffe M., Rolland A.P. Chitosan and depolimerized chitosan oligomers as condensing carriers for in vivo plasmid delivery // J. Control. Release.-1998.-V.56.-№1-3.-P.259-272.

109. Madhavan P., Ramachandran Nair K.G. // Fishery Technol. 1974. V. 11.-P. 50-53.

110. Malaeh M., Charlet G., Arul J. Depolymerisation of chitosan // In book: Chitin and chitosan in life and science. Ed.: T. Uragimi, K. Kurita, T. Fukamizo. Tokyo: Kodasha Scientific LTD. -2001. P.28-35.

111. Margot M., Hauk H.E. // Chromatographia, 26, 3-11, 1988.

112. Meyer H., Butte W., Schlaak M. Influence of chitosan on bacterial growth// Chitosan in Pharmacy and Chemistry. Eds.: R.A.A. Muzzarelli, C. Muzzarelli.

113. Mima S., Miya M., Iwamoto R., Yoshikawa S. // J. Appl. Polym. Sci. 1983. -V. 26.-N6.-P. 1909-1917.'

114. Mima S., Miya M., Iwamoto R., Yoshikawa S. Highly deacetylated chitosan and its properties //J. Appl. Polym. Sci. 1983. V. 28. -N 6. -P. 1909-1917.

115. Moorjani M.N., Achuta V., Khasim D.I. // J. Food Sci. Technol. 1975. V. 12.-P. 187-190.

116. Muzzarelli R.A.A. Chitin. Oxford: Pergamon Press, 1977. 309 p.

117. Muzzarelli R.A.A., Muzzarelli C. Chitosan chemistry: relevance to the biomedical sciences //Adv. Polym. Sci. 2005. -V. 186. P. 151-209.

118. Muzzarelli R.A.A., Muzzarelli C, Tarsi R., Miliani M., Gabbanelli F.,Cartolari M. Fungistatic activity of modified chitosans against Saprolegnia paras//7ca//Biomacromolecules.-2001.-V.2.-P. 165-169.

119. No H.K., Park N.Y., Lee S.H., Meyers S.P. Antibacterial activity of chitosans and chitosan oligomers with different molecular weights // Int. J. Food. Microbiol.-2002.-V.74.-№l-2.-P.65-72.

120. Okazaki K., Kato F., Watanabe N. Purification and properties of twochitinases from Streptomyces sp. J-13-3 // Biosci. Biotech. Biochem. 1995. V.59. № 8. P.1586-1587.

121. Onsoyen E., Skaugrud O. Metal recovery using chitosan // J. Chem. fechnol. Biotechnol. 1990. V. 49. № 4. P. 395-404.

122. Ottoy M.H., Varum K.M., Christensen B.E., Anhonsen M.W., Smidsrod O. // Carbohydr. Polym. 1996. -V. 31. P. 253-261.

123. Ottoy M.H., Varum K.M., Smidsrod O. Compositional heterogeneity of heterogeneously deacetylated chitosans // Carbohydr. Polym. 1996. V. 29. -N 1. - P. 17-24.

124. Park, Pyo-Jam, Lee H., Kim S. Preparation of hetero-chitooligosaccharides and their antimicrobisl activity on Vibrio parahaemolyticus // J. Microbiol. Biotechnol. -V.14, №1. -2004. -P.41-47.

125. Pash H., Trathnigg В. HPLC of Polymer. Berlin. Springer. 1998. P. 47. Atec.Italy. -2002.-P. 157-163.

126. Pat. 4066735 US С 01 F 11/46.

127. Payne G.F., Raghavan S.R. Chitosan: a soft interconnect for hierarchical assembly of nano-scale components // Soft Matter. 2007. -V. 3. P. 497-652.

128. Peluso G., Petillo O., Ranieri M., Santin M., Ambrosio L., Calabro D., Avallone В., Balsamo G. Chitosan-mediated stimulation of macrophage function // Biomaterials. 1994. V. 15. № 15. P. 1215-1220.

129. Percot A., Chaussard G., Sorlier P. et al. Overall consideration on the evolution of the study of chitosan properties // Advances in Chitin Science. Vol. VII / Ed. by I. Boucher, K. Jamieson, A. Retnakaran. Montreal, 2004. P. 1-6.

130. Pettersen H., Sannes A., Holme H.K., Kristensen A.H., Dornish M, Smidsrod O. Thermal depolymerization of chitosan salts // In: Advan. Chitin Sci. / Ed M.G. Peter, A. Domard, R.A.A. Muzzarelli. Potsdam. Germany. 1999. P. 422-428.

131. Pyo-Jam P., Lee H., Kim S. // J. Microbiol. Biotechnol. 2004. V. 14. - P. 41-47.

132. Rabea E.I., Badawy M. E.-T., Stevens C.V., Smagghe G., Steurbaut W. Chitosan as antimicrobial agent: applications and mode of action // Biomacromolecules.-2003.-V.4.-№6.-P. 1457-1465.

133. Rauws A.G., Groen K. // Chirality, 6, 72-75, 1994.

134. Rinaudo M., Domard A. Solution properties of chitosan // Chitin and Chitosan, G. Skjek-Braek, T. Anthonsen, P. Sandford (eds.), Elsevier Applied Science, London, 1989.-P. 71-86.

135. Roberts G.F.A. // Advances in chitin science. 7th ICCC, 3-5 September 1997, Lyon, France, 1997. - P. 22-31.

136. Roberts G.F.A. // Chitin Newsletter, 1993. N 1. -P. 21-23.

137. Roberts G.F.A. Chitin Chemistry. L.: Macmillan Press, 1992. 352 p.

138. Robertas J.D., Monzingo A.F. //Exs. 1999.-V. 87.-P. 125-135.

139. Roller S., Covill N. The antifungal properties of chitosan in laboratory media and apple juice // Int. J. Food. Microbiol.-1999.-V.47.-№ 1-2,- P.67-77.

140. Rowena L., Cabib R., Cabib E. // Anal, biochem. 1982. V. 127. - P. 402412.

141. Sabnis S.,. Block L.H. Chitosan as an enabling excipient for drug delivery systems. I. Molecular modifications // Int. J. Biol. Macromol. 2000. V. 27. № 3. P. 181-186.

142. Sano H., Shibasaki K., Matsukubo Т., Takaesu Y. Effect of molecular mass and degree of deacetylation of chitosan on adsorption of Streptococcus sobrinus 6715 to saliva treated hydroxyapatite // Bull. Tokyo Dent. Coll.2002.-V.43.-№2.-P.75-82.

143. Savard Т., Beaulieu C, Boucher Г, Champagne C.P. Antimicrobial action of hydrolyzed chitosan against spoilage yeasts and lactic acid bacteria of fermented vegetables // J. Food Prot.-2002.-V.65.-№5.-P. 828-833.

144. Schatz C., Viton C., Delair Т., Pichot C., Domard A. Typical physicochemical behaviors of chitosan in aqueous solution // Biomacromol. -V.4.2003. -P.641-648.

145. Send S., Ikinci G., Kas S., Yousefi-Rad A., Sargon M.F., Hincal A.A. Chitosan films and hydrogels of chlorhexidine gluconate for oral mucosal delivery Ш. J. Pharm.-2000.-V.l 93 .-№2.-P. 197-203.

146. Senel S., McClure S.J. Potential applications of chitosan in veterinary medicine//Adv. Drug. Deliv. Rev. 2004. V. 56. № 10. P. 1467-1480.

147. Shahabuddin M., Vinetz J.M. // Exs. 1999. V. 87. - P. 223-234.

148. Shepherd R., Reader S., Falshaw A. Chitosan functional properties // Glycoconjugate J. 1997. V. 14. P. 535-542.

149. Shibata Т., Okamoto I., Ishi K. // J. Liq. Chromatogr., 9, 313-340, 1986.

150. Singla A.K., Chawla M. Chitosan: some pharmaceutical and biological aspects an update // J. Pharm Pharmocol. 2001. V. 53. № 8. P. 1047-1067.

151. Sionkowska A., Wisniewski M., Skopinska J., Kennedy C.J., Wess T.J. Molecular interactions in collagen and chitosan blends // Biomaterials. 2004. V. 25. P. 795-801.

152. Smith J., Wood E., Dornish M. Effect of chitosan on epithelial cell tight junctions //Pharmaceutical Research.-2004.-V.21.-№l.-P.43-49.

153. Sorlier P., Denuziere A., Viton C, Domard A. Relation between the degree of acetylation and electrostatic properties of chitin and chitosan //Biomacromolecules.-2001.-V.2.-№3.-P.765-772.

154. Sosa M.A., Fazely F., Koch J.A., Vercellotti S.V., Ruprecht R.M. N-carboxymethylchitosan-N, O-sulfate as an anti-HIV-l agent//Biochem. Biophys.Res.Commun.-1991.-V.174.-№2.-P.489-496.

155. Stevens W.F., Win N.N., Ng H. et al. // Advances in chitin science, 7th ICCC, Lyon, 1997. P. 40-47.

156. Stoyachenko LA., Varlamov V.A.S Davankov V.A. Chitinases of Streptomyces kurssanovii: purification and some properties // Carbohydr. Polym. 1994. V. 24. №1. P. 47-54.

157. Stoyachenko I.A., Varlamov V.P., Davankov V.A. // Carbohydr. Polym. 1994.-V. 24.-P. 47-54.

158. Suryanarayana R.Y., Yashodho S.V., Mahendrakak N.S. et al. // Indian J. Technol. 1987.-V. 25.-N4.-P. 194-196.

159. Synowiecki J., Al-Khateeb N.A. Production, properties, and some new applications of chitin and its derivatives // Crit. Rev. Food. Sci. Nutr. 2003. V. 43. № 2. P. 145-171.

160. TOinmeraas K., Varum K.M.,Christensen B.E., Smidsrad O. Preparation and characterization of oligosaccharides produced by nitrous acid depolymerization of chitosans //Carbohydr. Res. 2001. V. 333. P. 137-144.

161. Tang Z.H., Hou C.L., Chen Q.Q. Experimental study on bacteriostatic of chitosan and sodium hyaluronate // Zhongguo. Xiu. Fu. Chong. Jian. Wai. Ke. Za. Zhi.-2002.-V.16.-№4.-P.259-261.

162. Terbojevich M., Carraro C., Cosani A. Solution studies of the chitin-lithium chloride-N,N,dimethylacetamide system // Carbohydrate Research, 1988. V. 180. - P. 73-86.

163. Terbojevich M., Cosani A. Molecular weight determination of chitin and chitosan // In book: Chitin handbook. Ed.: R.A.A. Muzarelli, M.G. Peter Italy: Atec, Grottamare. -1997. -P.87-101.

164. Terbojevich M., Cosani A., Como G., Marsano E., Bianchi E. Chitosan: chain rigidity and mesophase formation // Carbohydrate Research, 1991. V. 209. — P. 251-260.

165. Thongngam M., McClements D.J. Characterization of interactions between chitosan and an anionic surfactant // J. Agric. Food Chem. 2004. V. 52. № 4. P. 987-991.

166. Torrado S., Prada P., Torre P.M., Torrado S. Chitosan-poly (acrylic) acid polyionic complex: in vivo study to demonstrate prolonged gastric retention // Biomaterials. 2004. V. 25. P. 917-923.

167. Tsai G.-J., Hwang S.-P. In vitro and in vivo antibacterial activity of shrimp chitosan against some intestinal bacteria // Fisheries Sci.-2004.-V.70.-P.675-681.

168. Tsezos, M., Voiesky, B. Biotechnology and Bioengineering. 1981.23.-P. 583-604.

169. Tsezos, M., Voiesky, B. Biotechnology and Bioengineering. 1982.24.-P. 385-401.

170. Ueno H., Mori Т., Fujinaga T. Topical formulations and wound healing applications of chitosan //Adv. Drug. Deliv. Rev. 2001. V. 52. № 2. P. 105-115.

171. Vaara M. Agents that increase the permeability of the outer membrane // Microbiol. Rev.-1992.-V.56.-№ 3.-P.395-411.

172. Ward H.D., Alroy J., Lev B.I., Keusch G.T., Pereira M.E.A. Identification of chitin as a srtuctural component of Giardia cysts II Infection and Immunity. 1985. V. 49. №3. P. 629-634.

173. Wu A.C.M., Bough W.A., Conrad E.C., Alden K.E. Determination of molecular-weight distribution of chitosan by high-performace liquid chromatography / J. of Chromatography, 1976, v. 128, p. 87-99.

174. Xie W., Xu P., Wang W., Liu Q. Preparation of water-soluble chitosan derivatives and their antibacterial activity // J. Appl. Polym. Sci. 2002. V. 85. P. 1357-1361.

175. Yamato M., Mitamura S., Fujimoto C. // JP 02127401.1990. Japan.

176. Yau W. W., Kirkland J.J., Bly D.D. Modern Size-Exclusion liquid chromatograhy. Practice of Gel permleation and Gel Filtration Chromatograhy. New York-Chichester-Brisban-Toronto, 1979. P. 393.

177. Yi H., Wu L.-Q., Bentley W.E., Ghodssi R., Rubloff G.W., Culver J.N., Payne G.F. Biofabrication with chitosan // Biomacromolecules. 2005. V. 6. - P. 28812894.

178. Yoon H.G., Kim H.Y., Hong B.S. et al. // Biosci. Biotechnol. Biochem. 2001.-V. 65.-P. 802-809.

179. You H.J., Park K.H., Kim Y.H., Kim Y.J., Choi J.H., Lee S.H. Separation and purification of low molecular weight chitosan using multi-step membrane separation process. US Patent 5.730.876., 2002.

180. Zarzycki R., Modrzejewska Z. Use of chitosan in medicine and biomedical engineering//Polim. Med. 2003. V. 33. № 1-2. P. 47-58.

181. Zhang H., Neay S.H. In vitro degradation of chitosan by a commertial enzyme preparation effect of molecular weight and degree of deacetilation //Biomaterials. 2001. V. 22. P. 1653-1658.

182. Zhang M., Tan Т., Yuan H., Rui C. Insecticidal and fungiddal activities ofchitosan and oligo-chitosan//J. Bioact. Compat. Polym. 2003. V. 18. P. 391-400.

Обратите внимание, представленные выше научные тексты размещены для ознакомления и получены посредством распознавания оригинальных текстов диссертаций (OCR). В связи с чем, в них могут содержаться ошибки, связанные с несовершенством алгоритмов распознавания. В PDF файлах диссертаций и авторефератов, которые мы доставляем, подобных ошибок нет.