Применение тканевых экстрактов плодов коров при репродукции вирусов на перевиваемых линиях клеток тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 16.00.03, кандидат биологических наук Закиров, Рафис Рафикович

• Закиров, Рафис Рафикович
• кандидат биологических наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Закиров, Рафис Рафикович

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ.

1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Влияние сыворотки крови в составе питательных сред на культивируемые клетки.

1.2. Использование альтернативных стимуляторов роста клеток в культуральных средах для репродукции вирусов.

1.3. Биохимический состав различных тканей животных.

1.3.1. Сыворотка крови животных.

1.3.2. Мышечная ткань.

1.3.3. Паренхиматозная ткань печени и почек.

2 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Материалы исследований.

2.2. Методы исследований.

3 РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1. Физико-химический и биохимический состав экстрактов из мышц, печени и почек плодов коров.

3.2. Влияние экстрактов на пролиферативную активность клеток

3.3. Влияние экстрактов в составе питательных сред на репродукцию вирусов.

3.4. Корреляционные отношения биохимических свойств экстрактов плодов коров с пролиферативной активностью клеток и репродукцией вирусов.

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ.

ВЫВОДЫ.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Применение тканевых экстрактов плодов коров при репродукции вирусов на перевиваемых линиях клеток»

Имели место попытки замены сывороточного компонента питательной среды различными белковыми гидролизатами животного происхождения, в частности казеина, легкого эмбриона крупного рогатого скота (КРС), лактальбумина, мышечных белков, а также пептоном Витте и бактопептоном. Но они позволяют частично заменить сыворотку в среде.

Согласно отдельным литературным источникам, перспективно использование в этом качестве препаратов на основе натуральных белков из продуктов животноводства, не подвергнутых гидролизу. Так, сырая фракция молока, полученная стерилизующей фильтрацией, являлась адекватной заменой сыворотке крови в культуральной среде для клеток L, VERO, MDCK ("www.biotechnolog.ru). Можно предположить возможность успешного применения как добавки в питательные среды для культивирования клеток тканевых материалов из мышц, печени и почек плодов коров. Основанием для этого является более разнообразный и богатый, чем у молока, биохимический состав перечисленных препаратов.

Известно, что экстракты животного происхождения, используемые в качестве компонентов питательных сред, ускоряют рост тканей www.biptechnolog.ru). Между тем, в настоящее время они не нашли широкого применения (Тихонов И.В. и др., 2008), хотя обладают рядом преимуществ:

- в фетальных экстрактах отсутствуют специфические антитела к патогенным вирусам, имеющиеся, как правило, в сыворотке крови взрослых животных;

- экономически выгодно максимально полное использование плодного материала и получение от него не только сыворотки крови, но и экстрактов тканей.

Цель и задачи исследований. Цель работы состояла в изучении возможности применения экстрактов из мышц, печени и почек плодов коров в качестве биологических добавок в питательные среды для выращивания культур клеток и репродукции на них вирусов.

Для достижения указанной цели решались следующие задачи:

1. Разработать технологию получения экстрактов тканей плодов коров (ЭТПК) на основе раствора Хэнкса;

2. Определить физико-химические и биохимические показатели ЭТПК, и сравнить их с сыворотками крови крупного рогатого скота (СККРС) и плодов коров;

3. Изучить ростостимулирующий эффект ЭТПК на перевиваемых культурах клеток MDB К, ВНК-21/13-02, LEK, SPEV, VERO и сравнить его с таковым при использовании СККРС;

4. Оценить репродукцию вирусов инфекционного ринотрахеита (ИРТ) и парагрипа-3 (ПГ-3) КРС на перевиваемой линии клеток LEK, а также реовируса, тип 1 штамм "Lang", на перевиваемой культуре клеток VERO, выращенных с использованием ЭТПК.

Научная новизна работы. Впервые рассматривается возможность введения в практику получения вирусной массы на перевиваемых линиях клеток с использованием в качестве биологически активной добавки в питательные среды экстрактов из мышц, печени и почек плодов коров.

Дается их характеристика по основным физико-биохимическим показателям, необходимым для полноценной жизнедеятельности клеток в культуре. Показаны особенности влияния ЭТПК на рост и морфологию перевиваемых культур клеток, полученных из разных органов и от животных разных видов (SPEV - почки эмбриона свиньи, ВНК-21/13-02 - почки новорожденного сирийского хомячка, VERO - почки африканской зеленой мартышки, MDB К - почки эмбриона КРС, LEK - легкого эмбриона КРС). Впервые проведена оценка репродукции вирусов ИРТ и ПГ-3 КРС, а также реовируса тип 1, штамм "Lang", на культурах клеток LEK и VERO, соответственно, при выращивании их с добавлением в ростовую среду экстрактов из мышц, печени и почек плодов коров в качестве замены СККРС.

Практическая значимость работы. Разработана технология получения экстрактов мышц, печени, почек плодов коров и показана возможность их применения в средах для культивирования перевиваемых линий клеток с целью репродукции на них вирусов. Результаты выполненных исследований используются в производственном процессе в лаборатории культур клеток и гибридомной технологии Федерального государственного учреждения «Федеральный центр токсикологической и радиационной безопасности животных» (ФГУ «ФЦТРБ-ВНИВИ», г. Казань) при культивировании перевиваемых линий животных клеток в процессе изготовления вакцин. Рекомендуется повышение коэффициента использования плодного материала, получение от него не только сыворотки крови, но и экстрактов тканей в качестве биологической добавки в питательные среды для культивирования животных клеток и репродукции на них вирусов.

Апробация работы. Основные положения диссертации доложены и обсуждены, на научных сессиях Ученого совета ФГУ «ФЦТРБ-ВНИВИ» по итогам НИР за 2006-2009 гг.; научно-практической конференции «Актуальные проблемы ветеринарии» (Казань, 2007); научно-практической конференции «Достижения молодых ученых - в производство», посвященной 100-летию со дня рождения профессора Х.Х. Абдуллина (Казань, 2008); пятом съезде Общества биотехнологов России им. Ю.А. Овчинникова (Москва, 2008), международной научно-практической конференции «Достижения супрамолекулярной химии и биохимии в ветеринарии и зоотехнии» (Москва, 2008); всероссийской научно-практической конференции «Современные тенденции развития ветеринарной медицины и инновационные технологии в ветеринарии и животноводстве» (Казань, 2009).

Публикации результатов исследований. По теме диссертации опубликовано 7 научных работ, в том числе 1 - в издании, рекомендованном ВАК РФ.

Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

1. Технология получения тканевых экстрактов плодов коров на основе раствора Хэнкса, с использованием в качестве одного из этапов процесса замораживания-размораживания субстрата;

2. Ростовые свойства экстрактов плодов коров относительно перевиваемых линий клеток MDB К, ВНК-21/13-02, LEK, SPEV, VERO при добавлении в культуральную среду.

3. Репродукция вирусов на перевиваемых культурах клеток, выращенных на среде с использованием тканевых экстрактов плодов коров.

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 110 страницах компьютерного текста, состоит из следующих разделов: введения, обзора литературы, материалов и методов исследований, результатов собственных исследований и их обсуждения, заключения, выводов, практических предложений, библиографического списка литературы и приложений. Работа содержит 13 таблиц, проиллюстрирована 16 рисунками. Список использованной литературы включает 213 библиографических источников, в том числе 74 - на иностранном языке.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение диссертации по теме «Ветеринарная эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология», Закиров, Рафис Рафикович

ВЫВОДЫ

1. Разработана технология получения экстрактов тканей плодов коров на основе раствора Хэнкса, с включением в качестве дополнительного звена технологической цепочки этапа замораживания-размораживания субстрата.

2. Установлен биохимический состав экстрактов мышц, почек и печени плодов коров. Показано низкое содержание белковых фракций во всех экстрактах тканей плодов коров по сравнению с сывороткой крови крупного рогатого скота.

3. Максимальная пролиферативная активность клеток MDBK (5,0±0,19), SPEV(4,5±0,07), ВНК 21/13-02 (4,3±0,22), VERO (4,2±0,09), LEK (4,5±0,07) после 72-х часовой инкубации проявляется при добавлении в ростовую среду экстракта мышц плодов коров; промежуточный уровень занимает экстракт почек плодов коров и минимальный — экстракт печени плодов коров на основе раствора Хэнкса.

4. Репродукция реовируса в культуре клеток VERO, выращенной на питательной среде с экстрактом мышц плодов коров (титр = 1:64) на основе раствора Хэнкса, превышает таковую при общепринятом использовании сыворотки крупного рогатого скота (титр = 1:32).

5. Репродукция вируса инфекционного ринотрахеита, сопоставимая с таковой при использовании в ростовой среде сыворотки крупного рогатого скота (титр = 6,7±0,1), определена в культуре клеток LEK, выращенной на среде с использованием в качестве биологически активной добавки экстракта мышц плодов коров (титр = 6,2±0,1) на основе раствора Хэнкса.

6. Титр вируса парагриппа - 3, в культуре клеток LEK, выращенной на среде с использованием в качестве биологически активной добавки экстрактов плодов коров на основе раствора Хэнкса был ниже, по сравнению с использованием в ростовой среде сыворотки крупного рогатого скота.

7. Установлена обратная корреляция между индексом пролиферации перевиваемых культур клеток MDBK (г = -0,84), SPEV(r = -0,39), ВНК 21/13

02 (г = -0,77), VERO (г = :0,52), LEK (г = -0,95) и у- глобулиновой фракцией белков экстрактов печени плодов коров.

8. Выявлена прямая корреляция между содержанием глюкозы в экстрактах мышц (г = 0,87) и печени (г = 0,65) плодов коров, используемых в качестве биологически активной добавки в культуральных средах, и титрамии вирусов инфекционного ринотрахеита, парагриппа-3 крупного рогатого скота на перевиваемой культуре клеток LEK.

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

1. Для стимуляции пролиферативной активности клеток и репродукции вирусов на них в качестве биологической добавки в питательные среды рекомендуется использовать экстракт мышц плодов коров на основе раствора Хэнкса

2. Применение экстрактов плодов коров расширяет спектр биологически активных компонентов ростовой среды, обеспечивает в определенных сочетаниях высокий уровень пролиферации клеток и репродукции вирусов на них.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Закиров, Рафис Рафикович, 2009 год

1. Аганин, A.B. Ветеринарно-санитарная экспертиза, стандартизация и сертификация продуктов / A.B. Аганин, И.Г. Береза, Ю.И. Бойков и др.. КомСнаб, 2005. - т. 1. - С. 71-76.

2. Адаме, Р. Методы культуры клеток для биохимиков / Р. Адаме М.: Мир. 1983.-264 с.

3. Анисимова, Л.И. Получение перевиваемых культур клеток, адаптированных к росту в питательных средах с пониженным содержанием сыворотки крови крупного рогатого скота / Л.И. Анисимова // Автореф. дис. канд. биол. наук. Покров, 2003. - 25 с.

4. Антонов, Б.И. Лабораторные исследования в ветеринарии. Бактериальные инфекции: Сборник / Б.И. Антонов, В.В. Борисова, П.М. Волкова и др. М.: Агропромиздат, 1986. - 352 с.

5. Белун, О.В. Клонирование перевиваемой линии клеток почки поросенка / О.В. Белун, В.А. Сокова, А.Н. Курносов // «Вопр. ветеринарной вирусологии, микробиологии и эпизоотологии». Тезисы докл. науч. ВНИИВВиМ. Покров, 1978. - С. 16 - 17.

6. Билирубин общий Электронный ресурс.: Медицинский портал. -Режим доступа: http://www.eurolab.ua (дата обращения 21.04.2009).

7. Борхсениус, С.Н. Микоплазмы: молекулярная и клеточная биология, взаимодействие с иммунной системой млекопитающих, патогенность, диагностика / С.Н. Борхсениус, O.A. Чернова, М.С. Вонский СПб.:1. Наука, 2002.-319 с.

8. Бутко, М.П. Чувствительность перевиваемой культуры клеток СПЭВ, выращенных на среде гемогидролизат к корона и энтеровирусам свиней / М.П. Бутко, А.Г. Батиашвили, В.Ф. Нестеренко

9. Вопросы зоогигиены, дератизации и санитарной микробирлогии в промышленном животноводстве. М., 1983. - С. 102 - 104.

10. Велева, Е. Новые питательные среды для выращивания культур клеток / Е. Велева, П. Текерлеков // Ветер. Сб. 1984. - Т. 82. - №3. - С. 13 -15.

11. Волкова, О.Н. Сыворотка тюленя компонент ростовой среды для клеточных культур млекопитающих / О.Н. Волкова, С.И. Поликарпова, A.M. Седова, О.Г. Саканделидзе // Биотехнология. - 1991. - №2. - С. 38-40.

12. Гаврилов, В.И. Перевиваемые клетки в вирусологии / В.И. Гаврилов М.: Медицина, 1964. - 268 с.

13. Гаврилов, С.Н., Опарин В.Н., Курносов А.Н. // Вопросы ветеринарной вирусологии, микробиологии, эпизоотологии. Покров, 1981. - С.36 -38

14. Гаенко, Т.П. Бессывороточное культивирование генно-инженерных клеток продуцентов ГМ - КСФ. Условия культивирования и синтез ГМ - КСФ / Т.П. Гаенко, P.A. Алибаева // Биотехнология. - 1993. - № 11 - 12. - С. 39-41.

15. Гайдай, А.Е. Качество и биологическая ценность белковой добавки, изготовляемой из крови убойных животных /А.Е. Гайдай // Вопр. зоогигиены, дератизации и санитйрной микробиологии в промышленном животноводстве. М., 1983. - С. 105 - 108.

16. Галахарь, • H.J1. Культивирование гибридом в среде, содержащей сыворотку эмбрионов овец / H.J1. Глахарь, С.Н. Дьяченко // Цитология. 1987. - т.29. - №9. - С. 1078.

17. Гальвидис, И.А. Исследование противодифтерийных сывороток в иммунохимических и культуральных тестах / И.А. Гальвидис, Свиридов В.В. // ЖМЭИ. 2007. - №4. - С. 28 - 32.

18. Ганиткевич, М.И., Черняк Б.И. Питательная основа для культивирования патогенных микроорганизмов. А. с. 1151577 СССР // Открытия. 1985. - №15.

19. Гаспарян, Г.Г. Межклеточные контакты ускоряют рост клеточных колоний в культуре клеток куриного эмбриона / Г.Г. Гаспарян, A.B. Саркисян, P.M. Саядян и др. // Цитология. 1997. - т. 39. - № 7. - С. 566 - 570.

20. Гаффаров, Х.З. Моно- и смешанные инфекционные диареи новорожденных телят и поросят / Х.З. Гаффаров, A.B. Иванов, Е.А. Непоклонов и др. Казань: Фэн, 2002. - 592 с.

21. Гендон, Ю.З., Дальнейшая разработка культуральной живой холодоадаптированной гриппозной вакцины / Ю.З. Гендон, С.Г. Маркушин, И.И. Акопова // Вопр. вирусол. 2005. - №2. -С.4-9

22. Гендон, Ю.З. Разработка культуральной живой холодоадаптированной реассортантной гриппозной вакцины /Ю.З. Гендон, С.Г, Маркушин, И.И. Акопова и др. // Вопр. вирусол. 2003. - №2. - С. 12-17.

23. Герасимов, В.Н. Получение постоянных линий клеток из органов козы, свиньи и кролика / В.Н. Герасимов // Ветеринария. 1998. - №3. - С. 27 - 29.

24. Гизитдинов, H.H. Разработка паточного способа изготовления сухих белковых гидролизатов гороха и сои ' / H.H. Гизитдинов, Ю.Х. Бахтахунов, М.Т. Велямов // Вестник с.-х. науки Казахстана. 1984. -№1.- С. 62-64.

25. Гильмутдинов, Р.Я. Влияние степени контаминаций микоплазмами культуры клеток ГТПЭС на электрофоретическую подвижность клеток / Р.Я. Гильмутдинов // Цитология. 1992. - т. 34. - № 9. - С. 62.

26. Гильмутдинов, Р.Я. Зависимость электрофоретической подвижности клеток от их плотности в культуре / Р.Я. Гильмутдинов // Цитология. 1996. - т. 38. - № 2. - С. 192 - 193.

27. Гильмутдинов, Р.Я. Физиология крови / Р.Я. Гильмутдинов, Р.З. Курбанов Казань: ТГТИ, 1999. - 184 с.

28. Гиршович, Е.С. и др. Способ получения основы питательных сред для культивирования микроорганизмов. А. с. 1402616 СССР // Открытия. -1988. № 22.

29. Гудкова, Д.А. Зависимость пролиферации клеток линии ЗТ6 в полностью бессывороточной среде от эпидермального фактора роста /Д.А. Гудкова, А.Б. Сорокин // Цитология. 1987. - т. 29 - № 2. - С. 1309- 1313.

30. Гурбанов, С.М. Культивирование линий лимфобластоидных и миеломных клеток в среде на основе ферментативного гидролизата мышечных белков / С.М. Гурбанов, В.А. Сергеев, В.К. Сологуб, В.И. Кис//С.-х. биол.- 1987.-№2.-С. 112-116.

31. Гурьянов, Н.И. Ростстимулирующее вещество для культур клеток / Н.И. Гурьянов // Ветеринария. 1995. - №12. - С. 26 - 29.

32. Гурьянов, Н.И. Качество сыворотки крови крупного рогатого скота / Н.И. Гурьянов // Ветеринария. 1997. - №10. - С. 21 - 22.

33. Гурьянов, Н.И. Качество сыворотки крови коров и бычков / Н.И. Гурьянов // Ветеринария. 2000. - №4. - С.24 - 25.

34. Гуненков, В.В. Свойства сыворотки крови северных оленей и результаты применения ее в вирусологии и биотехнологии / В.В. Гуненков, О.И. Сухарев, В.Ф. Сирота // Вопр. вирусол. 2003. - № 6. -С. 38-39.

35. Децина А.Н. Косметологическая практика в области разработки питательных кремовых композиций Электронный ресурс.: Библиотека природы / А.Н. Децина. Режим доступа: http://www.golklom.ru (дата обращения 12.03.2009).

36. Джон, П. Культура клеток и тканей / П. Джон Медгиз, 1963. - 348 с.

37. Дзагуров, С.Г. Проблема безопасности профилактических препаратов / С.Г. Дзагуров // Междунар. симп. по стандартизации медицинских биологических препаратов М., 1976. - С. 1-4.

38. Дмитриева, Э.А. Изучение динамики распределения сульфгидрильных соединений в культурах клеток, тканях и органах животных при репродукции вируса ящура и вируса осповакцины / Э.А. Дмитриева // Автореф. дис. канд. биол. наук. Казань, 1968. -20 с.

39. Дьяконов, Л.П. Животная клетка в культуре (методы и применение в биотехнологии) / Л.П. Дьяконов, В.И. Ситьков М.: Компания Спутник+, 2000. - 400 с.

40. Дьяконов, Л.П. Животная клетка в культуре (методы и применение в биотехнологии) / Л.П. Дьяконов М.: «Спутник+», 2009. - 656 с.

41. Елисеев, Т.А. Питательная среда для суспензионного культивирования клеток ВНК-21 / Т.А. Елисеев, К.Г. Шмаленко //■ Ветеринарная биотехнология. Матер. Междунар. науч.-практ. конф., посвящ. 80-летию ФГУП. Щелково, 2004. - С. 136 - 138.

42. Жестерев, В.И. / В.И. Жестерев, В.А. Сергеев, В.П. Хижинская и др. // Цитология. 1986. - №4. - С. 465-469.

43. Зайцев, С.Ю. Биохимия животных. Фундаментальные и клинические аспекты: Учебник. 2-е изд-ие, испр. / С.Ю. Зайцев, Ю.В. Конопатов -СПб.: Лань, 2005.-384 с.

44. Збарский, Б.И. Биологическая химия / Б.И. Збарский, И.И. Иванов, С.Р. Мардашев Ленинград.: Медицина, 1965. - 520 с.

45. Иванюшенкова, И.В. Культивирование вакцинных штаммов вируса африканской чумы лошадей в суспензии клеток с использованием гидролизата белков крови / И.В. Иванюшенкова, Г.Н. Дороненкова,

46. B.Г. Костюченко и др. // Вирусные и микробные болезни животных. Сб. науч. тр. Владимир, 1995. - С. 179 - 181.

47. Игудин, Л.И. Связь между составом сыворотки КРС и ее способностью стимулировать рост клеточных культур / Л.И. Игудин,

48. C.Д. Орлов, Н.В. Кацнельсон и др. // Цитология. 1983. - т. 25. -№ 10.-С. 1216-1218.

49. Иржанов, С.Д. Органные культуры в вирусологических исследованиях. / С.Д. Иржанов, Я.Е. Хесин М.: Медицина, 1977. -159 с.

50. Кармолиев, Р.Х. Современные биохимические методы исследования в ветеринарии и зоотехнии / Р.Х. Кармолиев М.: Колос, 1971. -288 с.

51. Кармолиев, Р.Х., Соколов, В.Д. О дифференциации белковых веществ крови крупного рогатого скота / Р.Х. Кармолиев, В.Д. Соколов // Сб. научн. трудов Московской ветеринарной академии. 1973. - т. 65. - С.32.38.

52. Каталог специализированной коллекции перевиваемых соматических клеточных культур сельскохозяйственных и промысловых животных РККК (П), (СХЖ РАСХН). М.: 2006. - С. 11 - 22.

53. Кира, Е.Ф. Клиника и диагностика бактериального вагиноза / Е.Ф. Кира // Акушерство и гинекология. 1994. - № 2. - С. 32 - 35.

54. Клеточная культура без использования сыворотки крови Электронный ресурс.: Инициативная группа студентов «За гуманное образование». Режим доступа: http://www.human.org.ru (дата обращения 17.03.2009).

55. Конки, Д. Культуры животных клеток. Методы / Д. Конки, Э. Эрба, Р. Фрелини и др. М.: Мир, 1989. - 333 с.

56. Коренева, А.И. Разработка питательных сред для культур клеток млекопитающих на основе ферментативного гидролизата казеина /А.И. Коренева // Автореф. дис. канд. техн. наук. М., 1995. - 28 с.

57. Корнидаева, Г.В Культивирование Т-лимфобластоидных клеточных линий в средах, содержащих ростовые протеины / Г.В. Корнидаева, Р.Я. Подчерняева, Е.И. Мельниченко и др. // Вопр. вирусол. 1997. -т. 42. -№3.-С. 133- 134.

58. Коротич, A.C. и др. Питательная среда для выращивания микроорганизмов. А. с. 1237707 СССР // Открытия. 1986. -№22.

59. Костина, Г-.А. Свиная сыворотка как компонент питательных среды для культур клеток / Г.А. Костина, И.Ф. Радаева, Л.Ф. Бакулина // Биотехнология. 2001. - № 1. - С. 48 - 53.

60. Костина, Г.А. Сравнительный анализ аминокислотного состава сывороток крови различных видов животных при культивировании клеточных линий / Г.А. Костина, И.Ф. Радаева, М.А. Андреева, С.Б. Шмелева // Цитология. 1994. - т. 36. - № 6. - С. 559.

61. Кравченко, А.Т. Проблема контаминации живых вакцин / А.Т. Кравченко // Микробиология. 1971. - № 5. - С. 66 - 71.

62. Кудинов, В. Убойные качества бычков при разных рационах / В. Кудинов, С. Жаймышева // Комби-Корма. 2008. - №1. - С. 71.

63. Кузнецова, А.Ф. Справочник по ветеринарной медицине / Под ред. А.Ф. Кузнецова. СПб: Лань, 2004. - 912 с.

64. Куликова, К.С. // Тезисы докл. 2-ой науч. конф. МНИИВП, М., 1960. -С. 57.

65. Культуры животных клеток Электронный ресурс.: Основы биотехнологии. Режим доступа: http://www.biotechnolog.ru (дата обращения 06.10.2007).

66. Ласкавый, В.Н. Культивирование и накопление онкогенных вирусов в анаэробных условиях / В.Н. Ласкавый, Л.П. Дьяконов, Г.В. Мельников // Вет. врач. 2004. - № 2. - С. 32 - 38.

67. Манцыгин, Ю.А. О преимуществах использования свиной сыворотки при культивировании некоторых линий клеток животных и человека / Ю.А. Манцыгин, Н.В. Святухина, С.А. Павулсоне // Цитология. -1983. т. 25. - № 10. - С. 1197 - 1200.

68. Милютин, В.Н. и др. Способ получения питательной основы микробиологических сред. А. с. 1222676 СССР // Открытия. 1986. - № 13.

69. Монастырев, A.M. Динамика общего белка и его фракций у бычков при разных способах нагула и откорма / А.К. Монастырев, P.P. Фаткуллин, Т.В. Половникова // Вет. врач. 2008. - № 5. - С. 44 - 45.

70. Мусаева, А.К. Пролиферативные свойства культур клеток, выращенных в среде с добавлением сыворотки крови плодов овец /

71. A.K. Мусаева, H.H. Гизитдинов, Л.П. Дьяконов // Вестн. с.-х. науки Казахстана. 1990. - т. 6. - С. 82 - 84.

72. Нариманов, A.A. Бессывороточная среда для культивирования лимфоидных клеток человека и миеломных клеток мышей /A.A. Нариманов // Биотехнология. 1991. - № 1. - С. 49 - 52.

73. Нариманов, A.A. Сравнительное исследование действия экстракта плацентарной ткани и фибронектина на клетки млекопитающих in vitro / A.A. Нариманов, Б.К. Гаврилюк // Биотехнология. 1990. - № 5. - С. 38-40.

74. Неклюдов, А.Д. Получение белковых гидролизатов с заданными свойствами / А.Д. Неклюдов, С.М. Навашин // Прикл. биохимия и микробиология. 1985. -т.21. - вып.1. - С.З - 17.

75. Неклюдов, А.Д. Дрожжи как источник получения аминокислотных препаратов / А.Д. Неклюдов, Х.А. Купов // Антибиотики и химиотерапия. 1988. - №9. - С.708 - 713.

76. Никитин, Ю.И. Физиология сельскохозяйственных животных: учеб. пособие / Ю.И. Никитин, В.К. Гусанов, Н.С. Мотузко и др. Минск: Техно-перспектива, 2006. - 463 с.

77. Никольский, H.H. Эпидермальный фактор роста / H.H. Никольский, А.Д. Соркин, А.Б. Сорокин Л.: Наука, 1987. - 200с.

78. Новохатский, A.C. Тканевые и клеточные культуры в вирусологии и молекулярной биологии // В книге: "Итоги науки и техники", Вирусология М.: 1979. - т. 8. - С. 85 - 89.

79. Новохатский, A.C. Ростовые факторы сыворотки и крови. Новые возможности получения и применения / A.C. Новохатский // Цитология. 1994. - т. 36. - № 6. - С. 506.

80. Одинцова, H.A. Ростовой фактор из тканей морского моллюска Mytilus edulis / H.A. Одинцова, A.M. Нестеров, Д.А. Корчагина // Цитология. 1992. - т. 34. - №10. - С. 90 - 95.

81. Панкова, Г.Е., Сергеев В.А., Дьяконов Л.П. и др. А. с. 1025722 СССР, 1981.

82. Панкова, Г.Е. Гидролизаты мышечных белков при культивировании тканей животных in vitro / Г.Е. Панкова, Д.А. Цуверкалов // Ветеринария. 1963. - №5. - С. 62 -63.

83. Пиле, Э.Р. Обезьяны как источник вирусных заболеваний человека / Э.Р. Пиле //Вопр. вирусол. 1985. - т. 30. - С. 138 - 144.

84. Пиле, Э.Р. Современное состояние проблемы контроля биологических препаратов -на отсутствие вирусов-контаминантов / Э.Р.Пиле, С.Г. Дзагуров // Матер, науч. конф. Гос. контрольного института им. Л.А. Тарасевича. М.: 1970. - С. 129 - 141.

85. Пиотрович, В.А. Разработка питательных сред для культивирования культур клеток / В.А. Пиотрович // Автореф. дис.канд. вет. наук. -Киев, 2002.- 18 с.

86. Плохинский, Н.А. Математические методы в биологии / Н.А. Плохинский М.: МГУ, 1978. - 226 с.

87. Подчерняева, Р.Я. Замена нативных сывороток ростстимулирующими белками при культивировании клеток млекопитающих / Р.Я. Подчерняева, Е.Н. Мельниченко, Э.Н. Конду // Вопр. вирусол. 1995. - № 1. - С. 39 - 41.

88. Позняковский, В.М. Экспертиза мяса и мясопродуктов / В.М. Позняковский Учеб. - справ, пособие. - 2-е изд-ие, стер. -Новосибирск: Сиб. унив. изд-во, 2002. - 526 с.

89. Пономарев, А.П. Электронно-микроскопическое выявление вирусов животных в неконцентрированных вируссодержащих суспензиях / А.П. Пономарев, О.Г. Андреева, Т.Н. Артомонова // Вестник РАСХН. -2002.-№2.-С. 77-77.

90. Прозоровский, С.В. и др. Питательная • среда для культивирования Legionella pneumophila. А. с. 1359291 СССР // Открытия. 1987. - № 46.

91. Прозоровский, C.B. Медицинская микоплазмология / C.B. Прозоровский, И.В. Раковская, Ю.В. Вульфович М.: Медицина, 1995. - 285 с.

92. Простяков, А.П. Гидролизат белков сыворотки молока для питательных сред клеточных культур / А.П. Простяков, С.П. Сергеева Л.П. Дьяконов, Г.М. Строкина // Ветеринария. 1990. - №.7 - С. 67-69.

93. Радаева, И.Ф. Получение и применение сывороток оленей и овец для культивирования клеточных линий / И.Ф. Радаева, Г.А. Костина, О.П. Аверихин, В.В. Шапров // Биотехнология. 1990. - № 4. - С. 36 -38.

94. Раковская, И.В. Биологическая характеристика микоплазм-контаминантов тканевых культур / И.В. Раковская // Автореф. дис. канд. биол. наук. М., 1966. - 23 с.

95. Раскин, Б.М. и др. // Всесоюзный съезд микробиологов и эпидемиологов, 16-й: Тезисы докладов.- М., 1977. 4.1 - С.310-311.

96. Романюка, E.H. Опыт получения препарата сыворотки крови эмбрионов коров / E.H. Романюк, Г.Н. Буденая, Л.К. Шамгина и др. // Цитология. 1983. - т. 25. - № 9. - С. 1093.

97. Романюк, E.H. Сыворотка крови свиней как компонент питательных сред для культивирования клеток / E.H. Романюк, Л.П. Ходько, A.B. Ефимов // Цитология. 1987. - т.29. - №9. - С. 1102.

98. Рянский, А.Л. Сравнительное исследование трипсина различных фирм, используемого для получения первичной культуры клеток / А.Л. Рянский // Тезисы докл. Всерос. науч. конф. М., 2001. - С. 217.

99. Сергеев, В.А. Репродукция и выращйвание вирусов животных / В .А. Сергеев М.: Колос, 1976. - 302 с.

100. Сергеев, В.А. Суспензионное культивирование вируса трансмиссивного гастроэнтерита свиней / В.А. Сергеев, С.М. Гурбанов,

101. Е.А. Непоклонов, А.Н. Курносов // Вопр. вирусол. 1989. - №1. - С.103 - 106.

102. Сергеев, В.А. Ферментативный гидролизат мышечных белков как основа питательных сред для клеточных культур / В.А. Сергеев, В.И. Жестеров, Г.А. Сафонов и др. // Вопр. вирусол. 1989. - т.34. - №5 -С. 623 - 627.

103. Сергеев, В.А. Культуры клеток в ветеринарии и биотехнологии / В.А. Сергеев, Ю.А. Собко К.: Урожай, 1990. - 152 с.

104. Смирнова, Н.С. Ветеринарно-санитарная оценка мяса птицы и эффективность использования диарина в рационе бройлеров / Н.С. Смирнова // Вет. практика. 2007. - т.36. - №1. - С. 26 - 32.

105. Сорокин, А.Б. Пролиферация и синтез ДНК в культуре клеток СНО-К1 при различной концентрации сыворотки в среде / А.Б. Сорокин // Цитология. 1981. - т. 23. - № 4. - С. 468 - 472.

106. Сюрин, В.Н. Руководство по ветеринарной вирусологии / В.Н. Сюрин М.: Колос., 1979. - 687 с.

107. Сюрин, В.Н., Гуненков В.В. Парагриппозная инфекция крупного рогатого скота / В.Н. Сюрин, В.В. Гуненков // Ветеринария. 1968. - № 6.-С. 109-112.

108. Сюрин, В.Н. Вирусные болезни животных / В.Н. Сюрин, А.Я. Самуйленко, Б.В. Соловьев, Н.В. Фомин М.: ВНИТИБП, 1998. - С. 242-243.

109. Таранов, М.Т. Биохимия и продуктивность животных / М.Т. Таранов М.: Колос, 1976, - 240 с.

110. Тартаковский, А.Д. Питательные среды для культивирования клеток млекопитающих / А.Д. Тартаковский // Методы культивирований клеток. Сб. науч. трудов - Л.: Наука. - 1995. - С.44 -63.

111. Тарунина, М.В. Ростстимулирующая активность сред, кондиционированных клетками бессывороточных вариантов / М.В. Тарунина, Е.В. Березкина, В.А. Плескач и др. // Цитология. 1987. -т. 29. -№9.-С. 1106.

112. Телишевская, Л.Я. Разработка методов изготовления гидролизатов для питательных сред / Л.Я. Телишевская, С.П. Сергеева // Аграр. наука. 2000. - №10. - С. 22 - 23.

113. Тихонов, Н.В. Биотехнология / И.В. Тихонов, Е.А. Рубан, Т.Н. Грязнева и др. СПб.: ГИОРД, 2008. - 704 с.

114. Трошкова, Г.П. Совершенствование технологии приготовления питательных сред на основе ферментативных гидролизатов рисовой и соевой муки / Г.П. Трошкова, Л.Д. Мартынец, Е.В. Кирова и др. // Биотехнология. 2006. - №4. - С. 74-78.

115. Федотова, A.B. Выращивание клеток щитовидной железы при пониженных концентрациях сыворотки крови / A.B. Федотова, А.Г.

116. Снежко, A.B. Федотов, Н.С. Белавкина // Цитология. 1994. - т.36. -№6. - С. 538-539.

117. Хазипов, Н.З. Избранные труды / Н.З. Хазипов Казань: Центр информационных технологий КГАВМ. 2007. - 338 с.

118. Холод, В.М. Электрофорез белков сыворотки крови крупного рогатого скота в полиакриламидном геле / В.М. Холод // Вестник сельскохозяйственных наук. 1974. - № 2. - С. 93 - 97.

119. Цыренов, В.Ж. Основы биотехнологии: культивирование клеток человека и животных. Учебно-методическое пособие / В.Ж. Цыренов -Улан-Удэ: ВСГТУ, 2005. 48 с.

120. Шаланда А. Новая биомиметическая добавка к бессывороточным средам Электронный ресурс.: Интернет журнал «Коммерческая биотехнология» / А. Шаланда . Режим доступа: http://www.cbio.ru (дата обращения 10.04.2008).

121. Шарабрин, О.И., Сухарев О.И., Гуненков В.В. и др. A.c. № 1228487,1984.

122. Шелудько, Н.С. Биофизические и биохимические методы исследования мышечных белков /Н.С. Шелудько Л.: Наука, 1978. -262 с.

123. Шептун, Н.Г. Биохимическое обоснование к получению и использованию гидролизатов фибрина и отходов производства препаратов иммуноглобулинов / Н.Г. Шептун // Автореф. дис. канд. биол. наук. Воронеж, 1989. - 22 с.

124. Шитикова, Г.С. Пролиферативная активность перевиваемых и диплоидных клеточных линий в разных условиях культивирования / Г.С. Шитикова, Т.П. Лисок, Л.Ф. Литвинчук и др. // Цитология. -1987.-т. 29. -№ 9. С. 1111.

125. Юсупов, Р.Х. Адаптация вируса болезни Ауески на новой культуре клеток / Р.Х. Юсупов, B.C. Угрюмова, Г.Ф. Ильясова и др. // Ветеринария. 2003. - №11. - С. 22 - 25.

126. Ballard, F. Effects of Growth factors on protein turnover in cultured cells / F. Ballard // Hoppe-Beyler's Z. Physiol Chem. 1982. - v.363. - №9. -p. 977.

127. Barile, M. Isolation of Mycoplasma arginini from commercia bovine sera its implication in contaminated cultures / M. Barile, J. Kern // Proc. Soc. Exp. Biol, and Med. 1971. - v. 138. - № 2. - p. 432 - 437.

128. Beran, M. Serum inhibitors of in vitro colony formation: relation to haematopoetic tissue in vivo / M. Beran // Exp. Hemat. 1974. -v. 2. -№1. - p. 58 64.

129. Bergman, H. Isolirung and Charakterisierung boviner Parainfluenza -3 Viren in der DDR / H. Bergmann, H. Lieberman // Arch. Exp. Veterinarmed. - 1967. - Bd.21. - s. 1485 - 1497.

130. Bertolero, F. Effects of serum and serum-derived factors on gowth and differentiation of mouse kerattinocytes/ F. Bertolero, M. Kaighn, R. Camalier, U. Saffoiotti // In Vitro. 1986. - v. 22. - P. 423 - 428.

131. Brown, D. Platelets contain a peptide inhibitor of endothelial cell replication and growth / D. Brown, D. Clemmons // Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1986. - v. 83. - № 10. - p. 3321 - 3325.

132. Buno, W. Effect of cortisone on growth in vitro of femur of the chick embryo / W. Buno, H. Goyena // Proc. Soc. Exp. Biol. (N. Y.). 1955. - v. 89.-p. 622.

133. Burgu, I. Hucre kulturleri ve sigir serumlarinda pestivirus kontaminasyonu / I. Burgu, F. Alkan, A. Ozkul // Ankara Univ. Veter. Fak. Derg. 1992. - Cilt 39. - № 3. - s. 372 - 380.

134. Burke, J. Growth in retinal glial cells in vitro is affected differentially by two types of contact mediated interactions / J. Burke // Exp. Cell Res. - 1989.-v. 180.-p. 13-19.

135. Calad de Itturi, G. Effects of prolactin and growth hormone on DNA synthesis of rat mammary carcinomas in vitro / de Itturi G. Calad, C. Welsch // Experientia (Basel). 1976. - v. 32. - p. 1045 - 1046.

136. Chan, S. Inhibition of bone marrow colony formation by normal and leukemia human serum / S. Chan, D. Metcalf // Nature. 1970. - v. 227. -p. 845 - 846.

137. Cornman, I. Selective damage to fibroblasts by deoxycorticosterone in cultures /1. Cornman // Science. 1951. - v. 113. - p. 37.

138. Foley, G. Isolation and serial propagation of malignant and normal cells in semi-defined media. Origins of CCRF cell lines / G. Foley, B. Drolet, R. Mekarthy // Cancer Res. 1960. - v. 20. - N 6. - p. 930-938.

139. Frazatti-Galina, N. Vero-cell rabies vaccine produced using serumfree mefium / N. Frazatti-Galina, R. Mourao-Fuches, R. Paoli et al. // Vaccine. 2004. - №4. - p. 511 - 517.

140. Gaunt, S. Cell cycle variation associated with feeder effects in cultures of Chiness hamster fibroblasts / S. Gaunt, S. Subak-Sharpe // Exp. Cell Res. 1977. - v. 109. - p. 341-348.

141. Gospodarowicz, D. Growth factors in mammalian cell culture /D. Gospodarowic, J. Moran //Annu Rev Biochem. 1976. - v. 45. - p. 531558.

142. Granstrom, M. Conditions influencing inhibitors of the colony-stimulating factors (CSF) / M. Granstrom // Exp. Cell. Res. 1974. - v. 87. -p. 307-312.

143. Grossfeld, H. Action of adrenalcortical steroids on cultured cells / H. Grossfeld // Endocrinology. 1959. - v. 65. - p. 777.

144. Ham, R. Growth of normal human cells in defined media / R. Ham // Hormonally defined media. Berlin, 1983. p. 16-30

145. Ham, R. Selective media / R. Ham // Cell separation. New York, 1984. v. 3. - P. 209-236.

146. Ham, R. The impotance of matching the culture milieu to the cellular model system / R. Ham // Uses and standardization of vertebrate cell cultures. New York, 1984. P. 71 - 79.

147. Hearn, H. Detection elimination and prevention of contamination of cell cultures with pleuropneumonia-like organisms / H. Hearn, J. Officer, V. Eisner, F. Brown // J. Bacteriol. 1959. - v. 78. - p. 575 - 582.

148. Hedy, C„ Curry K. / Patent №4520107, MKI3 CI2 №5/00, 1/38; A61K 35/14; C07 G 7/00 (USA), 1986.

149. Holmes, R. Longterm cultivation on human cell (Chang) in chemically defined medium and effect on added peptone fraction / R. Holmes // J. Biophys. and Biochem. Cytol. 1959. - v. 6 - p. 535 - 536.

150. Jayme, D. Culture media for propagation of mammalian cells, viruses, and other biological / D. Jayme, K. Blackman // Adv. in biotechnol. Processes. New York, 1985. - v. 5 . - p. 1 - 30.

151. Jingyuan, L. In vitro study of drug accumulation in cancer cells via specific association with CdS nanoparticles / L. Jingyuan, W. Chunhui, G. Feng et al. // Bioorg. and Med. Chem. Lett. 2006. v. 16. - № 18.-p. 4808-4812.

152. Keay, L. Production of sindbis, influenza, and wesicular stomatitis viruses in chicken embryo and rat embryo cell suspensions / L. Keay, Schlesinger // Biotechnol Bioeng. 1974. - № 16(8). - p. 1025 - 1044.

153. Leffert, H. Growth control of differetiared fetal rat hepatocytes in primary monolayer culture / H. Leffert, D. Weinstein // J. Cell. Biol. 1976. - v. 70. -№ 1. - p. 20 - 32.

154. Lockwood, D. Insulin-dependent DNA polymerase and DNA Synthesis in mammary epithelial cells in vitro / D. Lockwood, A. Voytovich, Y. Stockdale // Proc. Nat. Acad. Sei. (Wash.). 1967. - v. 58. -p. 658 - 664.

155. Ludwig, T. Derivation of human embryonic stem cells in defined conditions. / T. Ludwig, M. Levenstein, J. Jones et al. // Nat. biotechnol. -2006. v. 24. —№ 2. - p. 185 - 187.

156. Macleod, A. Serum quality: an analysis of its components. / A. Macleod, O. Drumond // In: Develop. Boil. Standard. 3rd General Meeting of ESACT, Oxford Basel, 1979 1980. - v. 46. - p. 17 - 20.

157. Madin, S., Darby N. // Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1958. - v. 98. - p. 574.

158. Melnick, J., Riordan J. // Proc. Soc. Exp. Biol. (N.Y.). 1952. - v. 81. -P. 208-210.

159. Metzger, O. Separation on growth promoting activity from horse serum by dialysis / O. Metzger, M. Moscowitz // Proc. Nat. Acad. Sei. USA.- 1960. v. 104. - p. 363 - 365.

160. Miyazono, K. A platelet factor stimulating the proliferation of vascular endothelial cells. Partial purification and characterization / K. Miyazono, T. Okabe, S. Ishibashi // Exp. Cell Res. 1985. - v. 159. - № 2.- p. 487 494.

161. Moniander, C., Kniazeff A., Boone C. et al. // In Vitro. 1972. - v. 7. -№ 3. - p. 168- 173.

162. Ohtani, J. The influence of cortisone acetate on the growth of tissues cultivated in vitro / J. Ohtani // Jap. J. Bacteriol. 1955. - v. 10.-p. 145.

163. Overell, B. Effects of hormones and their analogues upon uptake of glucose by mouse skin in vitro / B. Overell, S. Condon, W-. Petrov // J. Pharm. 1960. - v. 12. - p. 150.

164. Paul, D. 3T3 cell growth initiation and multiplication in defined medium supplemented with growth factors and hormones that replace serum / D. Paul // Horm. Defined Media: Tool Cell Biol. Berlin e. a. - 1982. - p. 79-87.

165. Price, P. Relationship between in vitro growth promotion and biophysical and biochemical properties of the serum supplement / P. Price, E. Gregory // In Vitro. 1982. - v. 18. - p. 576-584.

166. Puck, T. Genetics of somatic mammalian cells. Long term cultivation of enploid cells from human and animal subjects / T. Puck, S. Ciecura, A. Robinson // J. Exp. Med. - 1958. - v. 108. -№ 6. - p. 945955.

167. Pumper, R. Multiplication of vaccinia virus in serum-free and serum-containing cell cultures / R. Pumper, L. Alfred, D. Sackett // Nature. 1960. - v. 185. - № 4706. - p. 123-124.

168. Reed, L. A simple method of estimating 50 % endpoints / L. Reed, H. Muench // Amer. J. Hyg. 1938. - v. 27. - p. 493- 497.

169. Reuveny, S., Velez D., Miller L., Macmillan J. // J. Immunol. Methods. 1986. - v. 86. - p. 61-69.

170. Rightsel, W. Detection of latent viruses / W. Rightsel // Nat. Cancer Inst. Monogr. -1968. v. 29. - p. 359-363.

171. Robinson, L. Contamination of human cell cultures by PPLO / L. Robinson, R. Wichelnansen, B. Roirman // Science. 1956. - v. 124. - p. 1147-1148.

172. Sell, S. Alpha-fetoprotein / S. Sell, F. Becker // J. Nat. Cancer Inst. -1978.-v. 60.-p. 19-26.

173. Sheffield, L. Control of mammary gland fibroblast growth by insulin, growth hormone and prolactin / L. Sheffield, R. Anderson // Cell. Biol. Int. Repts. 1986. - v. 10.-№ l.-p. 33-40.

174. Smith, M. The Haemagglutinin of Echovirus SAI / M. Smith //Arch. Ges. Virusforsch. 1969. - Bd. 28. - P. 417 - 420.

175. Stanbridge, E. Mycoplasmas and cell cultures / E. Stanbridge // Bact. Rev. 1971. - v. 35 - № 2. - p. 206 - 227.

176. Stocker, M. Density dependent inhibition of cell growth in cultures / M. Stocker, H. Rubin // Nature. - 1967. - v. 215. - p. 171 - 172.

177. Schwartz, K. Serum from outdated human platelet concentrates: an alternative supplement for tissue (fibroblast) culture media / K. Schwartz, G. Lu, J. Trosko, C. Chang // Amer. J. Hematol. 1984. - v. 17. - №1. - P. 23-27

178. Tayler, W. Feeding the baby serum and other supplements to chemically defined medium / W. Tayler // J. Nat. Cancer Inst. - 1974. - v. 53.-p. 1449-1457.

179. Tjio, J., Puck T. Genetics of somatic mammalian cells, Chromosomal constitution of cells in tissue culture // J. exp. Med. 1958. - v. 108. - №2. -P. 259 - 268.

180. Trowell, O. Cool. Intern / O. Trowell // CNRS. 1961. - v. 101. - p. 237.

181. Uittenbogaart, C. Growth of human malignant lymphoid cell lines in serum-free medium. / C. Uittenbogaart, Y. Cantor, J. Fahey // In Vitro. -1983.-v. 19.-p. 67-72.

182. Van Wyk, J. Chemical properties and some biological effects of human somatomedine / J. Van Wyk, L. Underwood, R. Hintz et al. // Advances in human growth hormone research. DHEW Publ. - Baltimore.- 1973.-p. 25-45.

183. Velez, D., Kinetics of monoclonal antibody production in low serum growth medium. / D. Velez, S. Reuveny, L.Miller et al. // J. Immunol. Methods. 1986. - v. 86. - p. 45.

184. Welke, G. Die Vervendung von Diploidsellinien als Vermehrungssubstrat fur die Virusimpfstoffproduction / G. Welke // Gbl. Gesamte Hyg. 1980. - Bd. 26. - p. 365 - 372. '

185. Westermark, B. Initiation of DNA synthesis of stationary human glia- like cells by a polypeptide fraction from human plasma containing somatomedine activity / B. Westermark, A. Wasteson, K. Uthene // Exp. Cell Res. 1975. - v. 96. - p. 58 - 62.c/

186. Wosu, L. Optimal parameters for in vitro growth of parvoviruses / L. Wosu // Comp. Immunol. Microbiol, infect. Dis. 1987. - v. 10. - № 1. - p.25 32.

187. Yoshikura, H. Transient inhibition of mitotic activity by addition of calf serum / H. Yoshikura // Exp. Cell Res. 1972. - v. 74. - p. 403-406.