Профилактика реакции трансплантат против хозяина у больных гемобластозами после трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток с помощью мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток д тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.21, кандидат медицинских наук Петинати, Наталия Арнольдовна

• Петинати, Наталия Арнольдовна
• кандидат медицинских наук
• 2013

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Петинати, Наталия Арнольдовна

Список использованных сокращений.

1. Введение.

1.1. Актуальность проблемы.

1.2. Цель работы.

1.3. Задачи исследования.

1.4. Научная новизна и практическая ценность работы.

1.5. Основные положения, выносимые на защиту.

1.6. Структура диссертации.

1.7. Благодарности.

2. Обзор литературы.

2.1. Реакция трансплантат против хозяина.

2.2. Острая реакция трансплантат против хозяина.

2.2.1. Механизм развития острой РТПХ.

2.2.2. Клинические проявления острой РТПХ.

2.3. Хроническая реакция трансплантат против хозяина.

2.4. Профилактика реакции трансплантат против хозяина.

2.5. Характеристика ММСК.

2.6. Иммуномодулирующие свойства ММСК.

2.7. Применение ММСК в клинике.

3. Материалы и методы.

3.1. Клиническое исследование.

3.1.1 Дизайн исследования.

3.1.2. Характеристика больных.

3.1.3. Режимы кондиционирования.

3.1.4. Профилактика РТПХ.

3.1.5. Сопроводительная терапия.

3.1.6. Характеристика доноров костного мозга.

3.1.7. Диагностика реакции трансплантат против хозяина.

3.2. Лабораторные исследования.

3.2.1. Получение и характеристика ММСК.

3.2.2. Введение ММСК.

3.2.3. Анализ относительного уровня экспрессии генов ИЛ-6, ИЛ-10, фактора комплемента И, Ю01, РТвЕЭ, КСФ1, РРАИу.

3.2.4. Выделение РНК.

3.2.5. Построение комплементарных цепей ДНК.

3.2.6. Анализ экспрессии генов.

3.3. Статистический анализ.

4. Результаты и обсуждение.

4.1. Клиническое исследование.

4.1.1. Сопоставимость групп.

4.1.2. Профилактика острой РТПХ с помощью ММСК.

4.1.3. Профилактика хронической РТПХ с помощью ММСК.

4.1.4. Оценка безопасности введения ММСК.

4.1.5. Влияние профилактики РТПХ с помощью ММСК на вероятность развития инфекционных осложнений и рецидивов.

4.2. Лабораторные исследования.

4.2.1. Экспрессия генов некоторых факторов, модулирующих иммунный ответ, в неактивированных ММСК доноров.

4.2.2. Экспрессия генов ИЛ-6, ИЛ-10, фактора комплемента Н, Ю01, простагландин Е синтетазы, КСФ1, а также РРАИу в случаях неэффективной профилактики.

4.2.3. Связь экспрессии генов ИЛ-6, ИЛ-10, фактора комплемента Н, Ю01, простагландин Е синтетазы, КСФ1 с эффективностью лечения РТПХ с помощью ММСК.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Профилактика реакции трансплантат против хозяина у больных гемобластозами после трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток с помощью мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток д»

1.1. Актуальность проблемы

Трансплантация аллогенных гемопоэтических стволовых клеток (алло-ТГСК) является единственным методом излечения многих гемобластозов. Однако ее проведение связано с развитием тяжелых осложнений. Одним из основных осложнений алло-ТГСК является реакция трансплантат против хозяина (РТПХ), влияющая на качество жизни и продолжительность жизни больных после алло-ТГСК.

С 1980 года за счет уменьшения смертности от инфекционных осложнений увеличилась выживаемость пациентов после алло-ТГСК, однако частота рецидивов и частота развития РТПХ не изменились. Смертность, связанная с трансплантацией, напрямую зависит от степени тяжести развившейся РТПХ. Следует учитывать также, что РТПХ тесно связана с реакцией трансплантат против опухоли, и ее развитие значительно снижает риск рецидива заболевания.

С целью профилактики РТПХ применяют различные препараты, включая ингибиторы кальциневрина (циклоспорин А, такролимус), антиметаболиты (метотрексат, микофенолата мофетил), глюкокортикостероиды (преднизолон, метилпреднизолон), сиролимус, антитимоцитарный глобулин (АТГ), моноклональные антитела (алемтузумаб, даклизумаб), циклофосфамид. Действие иммуносупрессивных препаратов только на одно звено развития РТПХ приводит к недостаточной эффективности профилактики одним препаратом. Следствием же сочетанного применения препаратов является увеличение токсичности. Несмотря на проводимую профилактику, у 19-74% пациентов после алло-ТГСК развивается острая РТПХ II—IV степени и у 30-76% -хроническая РТПХ.

Мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки (ММСК) обладают уникальными иммуномодулирующими свойствами, которые были подтверждены in vitro и in vivo. Эти клетки могут быть культивированы, их источником могут служить костный мозг, жировая ткань, эмбриональная печень и др. При введении в организм ММСК не вызывают иммунного ответа. Эти характеристики сделали возможным применение ММСК в клинике. В настоящее время проводятся исследования по применению ММСК при таких заболеваниях, как боковой амиотрофический склероз, рассеянный склероз, язвенный колит, болезнь Крона, системная красная волчанка, полимиозит и дерматомиозит, сахарный диабет II типа. Множество исследований посвящено лечению РТПХ с помощью ММСК. В данной работе представлены результаты проспективного рандомизированного исследования по профилактике РТПХ с помощью ММСК в сравнении с классическими режимами.

1.2. Цель работы

Изучить эффективность профилактики реакции трансплантат против хозяина у больных гемобластозами после трансплантации аллогенных стволовых гемопоэтических клеток с помощью мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток донора.

Заключение диссертации по теме «Гематология и переливание крови», Петинати, Наталия Арнольдовна

6. Выводы

1. В результате проведения проспективного рандомизированного клинического исследования установлено, что введение мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток больным гемобластозами после трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток в дозе 0,9-1,65х106 на килограмм массы тела в момент восстановления числа лейкоцитов до 1x109 на литр снижает риск развития острой реакции трансплантат против хозяина II—IV степени в 3,5 раза (относительный риск=3,5; 95% доверительный интервал: 2,4-5,0).

2. Профилактическое применение мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток не изменяет частоту развития хронической реакции трансплантат против хозяина.

3. Введение мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток не увеличивает вероятность развития рецидивов, инфекционных осложнений и отторжения трансплантата.

4. Введение мультипотентных мезенхимальных стромальных клеток после трансплантации аллогенных гемопоэтических стволовых клеток с целью профилактики реакции трансплантат против хозяина у 36%» пациентов вызывает кратковременное повышение температуры тела и у 24% - озноб, но не сопровождается тяжелыми осложнениями.

5. Мультипотентные мезенхимальные стромальные клетки, полученные от разных доноров, характеризуются высокой разнородностью по экспрессии генов интерлейкина 6, интерлейкина 10, фактора комплемента Н, индолеамин-2,3-диоксигеназы, простагландин Е синтетазы, макрофагального колониестимулирующего фактора.

5. Заключение

Проведенное исследование показало эффективность профилактики острой РТПХ у реципиентов алло-ТГСК от НЬА-идентичных родственных доноров с помощью ММСК, полученных от донора гемопоэтических клеток. Предложенный метод профилактики предполагает внутривенное введение ММСК в момент восстановления числа лейкоцитов до 1х109/л в дозе 1х106/кг массы тела. Чтобы исключить контакт с продуктами животного происхождения и минимизировать риск развития иммунологических и инфекционных осложнений, культивирование ММСК проводилось с использованием плазмы, обогащенной тромбоцитами, полученной от донора гемопоэтических клеток. Острая РТПХ у пациентов, получавших с целью профилактики ММСК, развивалась значительно реже, чем в контрольной группе. В группе пациентов, получивших ММСК, острая РТПХ П-1У степени развилась только у 2 из 25 пациентов (8%). В контрольной группе у 8 из 24 (33%) пациентов развилась РТПХ П-1У степени. Данные различия статистически достоверны. После введения ММСК не было отмечено серьезных осложнений. У пациентов, получавших ММСК с целью профилактики РТПХ, не было отмечено увеличения частоты рецидивов, инфекционных осложнений и отторжения трансплантата по сравнению с контрольной группой. Введение ММСК в момент восстановления числа лейкоцитов не влияет на частоту развития хронической РТПХ.

Предложенная методика профилактики острой РТПХ с помощью ММСК является оригинальной и ранее не была описана в литературе.

В данной работе также была проанализирована экспрессия генов ИЛ-6, ИЛ-10, фактора комплемента Н, ГО01, простагландин Е синтетазы, КСФ1, участвующих в механизмах взаимодействия ММСК с клетками иммунной системы. Выявлена прямая зависимость относительного уровня экспрессии ИЛ-10 и роста у доноров-мужчин, то есть чем выше донор, тем выше у него экспрессия ИЛ-10 (связь умеренной тесноты, коэффициент Спирмена 0,651404). Кроме того, у мужчин была выявлена обратная зависимость относительного уровня экспрессии ИЛ-10 и фактора комплемента Н (связь умеренной тесноты, коэффициент Спирмена -0,690909).

Экспрессия была проанализирована в неактивированных ММСК, которые были использованы для профилактики и лечения острой РТПХ, резистентной к терапии глюкокортикостероидами.В случаях неэффективной профилактики РТПХ с помощью ММСК анализ экспрессии генов ИЛ-6, КСФ1, ИЛ-10, ГО01 и фактора комплемента Н, а также РРАЯу позволил предположить, что повышенный уровень экспрессии ИЛ-6 в сочетании с повышением уровня экспрессии РРАЯу и возрастом донора старше 40 лет могут являться факторами, снижающими уровень иммуномодулирующей активности ММСК.

При анализе экспрессии генов ИЛ-6, ИЛ-10, ГО01 связи с эффективностью лечения РТПХ обнаружено не было, однако выявлена прямая связь между относительным уровнем экспрессии РТвЕБ и эффективностью лечения (коэффициент Спирмена 0,567227) и обратная связь между относительным уровнем экспрессии КСФ1 и эффективностью лечения (коэффициент Спирмена -0,507519).

Полученные данные позволяют предположить, что эффективность введения ММСК с иммуномодулирующей целью зависит от уровня экспрессии исследованных генов.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Петинати, Наталия Арнольдовна, 2013 год

1. Abo-Zena, R. A. Immunomodulation in stem-cell transplantation / R. A. Abo-Zena, M. E. Horwitz // Curr Opin Pharmacol. 2002. - N 2. - P. 452-457.

2. Anasetti, C. Effect of HLA incompatibility on graft-versus-host disease, relapse, and survival after marrow transplantation for patients with leukemia or lymphoma / C. Anasetti, P. G. Beatty, R. Storb, P. J. Martin, M. Mori, J. E. Sanders,

3. E. D. Thomas, J. A. Hansen // Hum. Immunol. 1990. -N 29. P. 79-91.

4. Appelbaum, F. R. Haematopoietic cell transplantation as immunotherapy/

5. F. R. Appelbaum // Nature. 2001. - N 411. - P. 385-389.

6. Appelbaum, F. R. The current status of hematopoietic cell transplantation / F. R. Appelbaum // Annu Rev Med. 2003. - N 54. - P. 491-512.

7. Aschan, J. Risk assessment in haematopoietic stem cell transplantation: conditioning / J. Aschan // Best Pract Res Clin Haematol. 2007. - N 20. - P. 295310.

8. Bartholomew, A. Mesenchymal stem cells suppress lymphocyte proliferation in vitro and prolong skin graft survival in vivo / A. Bartholomew,

9. C. Sturgeon, M. Siatskas, K. Ferrer, K. Mcintosh, S. Patil, W. Hardy, S. Devine,

10. D. Ucker, R. Deans, A. Moseley, R. Hoffman // Exp. Hematol. 2002. - N 30. - P. 42-^18.

11. Behar, E. Polymorphism of adhesion molecule CD31 and its role in acute graft-versus-host disease/ E. Behar, N. J. Chao, D. D. Hiraki, S. Krishnaswamy,

12. B.W.Brown, J. L. Zehnder, F. C. Grumet// N. Engl. J. Med. 1996.- N334.-P. 286-291.

13. Berger, C. L. Induction of human tumor-loaded dendritic cells/

14. C. L. Berger, A. L. Xu, D. Hanlon, C. Lee, J. Schechner, E. Glusac, I. Christensen,

15. E. Snyder, V. Holloway, R. Tigelaar, R. L. Edelson // Int. J. Cancer. 2001. - N 91. -P. 438^47.

16. Billingham, R. E. The biology of graft-versus-host reactions/ R. E. Billingham // Harvey Lect. 1966. - N 62. - P. 21-78.

17. Bohrnsen, F. Human mesenchymal stromal cells from adipose tissue of the neck/ F. Bohrnsen, N. Rotter, U.Lindner, M.Meier, B. Wollenberg, J. Rohwedel, J. Kramer // Eur. Arch. Otorhinolaryngol. 2012. - N 269. - P. 2561-2570.

18. Butcher, E. C. Lymphocyte homing and homeostasis / E. C. Butcher, L. J. Picker // Science. 1996. - N 272. - P. 60-66.

19. Cai, S. F. Granzyme B is not required for regulatory T cell-mediated suppression of graft-versus-host disease/ S. F. Cai, X. Cao, A.Hassan, T. A. Fehniger, T. J. Ley // Blood. 2010. N 115. - P. 1669-1677.

20. Campagnoli, C. Identification of mesenchymal stem/progenitor cells in human first-trimester fetal blood, liver, and bone marrow / C. Campagnoli,

21. A. Roberts, S. Kumar, P. R. Bennett, I. Bellantuono, N. M. Fisk // Blood. 2001. -N98.-P. 2396-2402.

22. Cannon, M. J. The role of major histocompatibility complex molecules in luteal function / M. J. Cannon, J. L. Pate // Reprod. Biol. Endocrinol. 2003. - N 1. -P. 93.

23. Chao, N. J. Graft-versus-host disease: the viewpoint from the donor T cell / N. J. Chao // Biol. Blood Marrow Transplant. 1997. N 3. - P. 1-10.

24. Corcione, A. Human mesenchymal stem cells modulate B-cell functions / A. Corcione, F. Benvenuto, E. Ferretti, D. Giunti, V. Cappiello, F. Cazzanti, M. Risso, F. Gualandi, G. L. Mancardi, V. Pistoia, A. Uccelli // Blood. 107 (2006). 367-72.

25. Cutler, C. and Antin, J.H., Sirolimus for GVHD prophylaxis in allogeneic stem cell transplantation// Bone Marrow Transplant. 2004. - N 34. - P. 471—476.

26. G. D'Amico//Leukemia. -2012. -N26.-P. 1681-1684.

27. De Waal Malefyt, R. Interleukin-10 / R. de Waal Malefyt, H. Yssel, M. G. Roncarolo, H. Spits, J. E. Vries // Curr Opin Immunol. 1992. - N 4. - P. 314320.

28. Deng, W. Effects of allogeneic bone marrow-derived mesenchymal stem cells on T and B lymphocytes from BXSB mice / W. Deng, Q. Han, L. Liao, S. You,

29. H. Deng, R. C. Zhao // DNA Cell Biol. 2005. - N 24. - P. 458^163.

30. Djouad, F. Mesenchymal stem cells inhibit the differentiation of dendritic cells through an interleukin-6-dependent mechanism / F. Djouad, L. M. Charbonnier,

31. C. Bouffi, P. Louis-Plence, C. Bony, F. Apparailly, C. Cantos, C. Jorgensen,

32. D. Noel // Stem Cells. 2007. - N 25. - P. 2025-2032.

33. Duijvestein, M. Autologous bone marrow-derived mesenchymal stromal cell treatment for refractory luminal Crohn's disease: results of a phase I study/

34. M. Duijvestein, A. C. Vos, H. Roelofs, M. E. Wildenberg, B. B. Wendrich,

35. H. W. Verspaget, E. M. Kooy-Winkelaar, F. Koning, J. J. Zwaginga, H. H. Fidder, A. P. Verhaar, W. E. Fibbe, G. R. van den Brink, D. W. Hommes// Gut. -2010. N59.-P. 1662-1669.

36. Efimov, I. Structure and reaction mechanism in the heme dioxygenases /

37. Efimov, J. Basran, S. J. Thackray, S. Handa, C. G. Mowat, E. L. Raven // Biochemistry. 2011. - N 50. - P. 2717-2724.

38. Fang, B. Favorable response to human adipose tissue-derived mesenchymal stem cells in steroid-refractory acute graft-versus-host disease / B. Fang, Y. Song, L. Liao, Y. Zhang, R. C. Zhao // Transplant. Proc. 2007. - N 39. - P. 3358-3362.

39. Ferrara, J. L. Graft-versus-host disease / J. L. Ferrara, J. E. Levine, P. Reddy, E. Holler //Lancet. -2009. -N 373. P. 1550-1561.

40. Ferrara, J. L. Pathophysiologic mechanisms of acute graft-vs.-host disease / J. L. Ferrara, R. Levy, N. J. Chao // Biol. Blood Marrow Transplant. 1999. - N 5. -P. 347-356.

41. K. Schultz, H. Shulman, M. Turner, G. Vogelsang, M. E. Flowers // Biol. Blood Marrow Transplant. 2005. - N 11. - P. 945-956.

42. Fong, T. A. Alloreactive murine CD8+ T cell clones secrete the Thl pattern of cytokines / T. A. Fong, T. R. Mosmann // J. Immunol. 1990. - N 144. - P. 17441752.

43. Freyman, T. A quantitative, randomized study evaluating three methods of mesenchymal stem cell delivery following myocardial infarction / T. Freyman,

44. G. Polin, H. Osman, J. Crary, M. Lu, L. Cheng, M. Palasis, R. L. Wilensky // Eur. Heart. J.-2006.-N27.-P. 1114-1122.

45. Gale, R. P. Risk factors for acute graft-versus-host disease / R. P. Gale, M. M. Bortin, D. W. van Bekkum, J. C. Biggs, K. A. Dicke, E. Gluckman, R. A. Good, R. G. Hoffmann, H. E. Kay, J. H. Kersey and et al. // Br. J. Haematol. -1987.-N67.-P. 397-406.

46. Gao, J. The dynamic in vivo distribution of bone marrow-derived mesenchymal stem cells after infusion / J. Gao, J. E. Dennis, R. F. Muzic, M. Lundberg, A. I. Caplan // Cells Tissues Organs. 2001. - N 169. - P. 12-20.

47. Glennie, S. Bone marrow mesenchymal stem cells induce division arrest anergy of activated T cells / S. Glennie, I. Soeiro, P. J. Dyson, E. W. Lam, F. Dazzi // Blood. 2005. - N 105. - P. 2821-2827.

48. Goker, H. Acute graft-vs-host disease: pathobiology and management /

49. H. Goker, I. C. Haznedaroglu, N. J. Chao // Exp. Hematol. 2001. - N 29. - P. 259277.

50. Gratwohl, A. Cause of death after allogeneic haematopoietic stem cell transplantation (HSCT) in early leukaemias: an EBMT analysis of lethal infectious complications and changes over calendar time / A. Gratwohl, R. Brand, F. Frassoni,

51. V. Rocha, D. Niederwieser, P. Reusser, H. Einsele, C. Cordonnier // Bone Marrow Transplant. 2005. -N 36. - P. 757-769.

52. Grumet, F. C. CD31 mismatching affects marrow transplantation outcome/ F. C. Grumet, D. D. Hiraki, B. W. M. Brown, J. L. Zehnder, E. S. Zacks, A. Draksharapu, J. Parnes, R. S. Negrin // Biol. Blood Marrow Transplant. 2001. -N7.-P. 503-512.

53. Harris, S. G. Prostaglandins as modulators of immunity / S. G. Harris, J. Padilla, L. Koumas, D. Ray, R. P. Phipps // Trends Immunol. 2002. - N 23. -P. 144-150.

54. Hashimoto, D. Pretransplant CSF-1 therapy expands recipient macrophages and ameliorates GVHD after allogeneic hematopoietic cell transplantation / D. Hashimoto, A. Chow, M. Greter, Y. Saenger, W. H. Kwan, M. Leboeuf,

55. F. Ginhoux, J. C. Ochando, Y. Kunisaki, N. van Rooijen, C. Liu, T. Teshima, P. S. Heeger, E.R.Stanley, P. S. Frenette, M. Merad// J. Exp. Med.- 2011.-N208.-P. 1069-1082.

56. Hill, G. R. The role of cytokines in acute graft-versus-host disease/

57. G.R.Hill, W. Krenger, J. L. Ferrara// Cytokines Cell Mol Ther. 1997,- N 3.-P. 257-266.

58. Horowitz, M. M. Graft-versus-leukemia reactions after bone marrow transplantation / M. M. Horowitz, R. P. Gale, P. M. Sondel, J. M. Goldman, J. Kersey,

59. H. J. Kolb, A. A. Rimm, O. Ringden, C. Rozman, B. Speck and et al. // Blood. -1990.-N75.-P. 555-562.

60. Horwitz, E. M. Transplantability and therapeutic effects of bone marrow-derived mesenchymal cells in children with osteogenesis imperfecta / E. M. Horwitz, D. J. Prockop, L. A. Fitzpatrick, W. W. Koo, P. L. Gordon, M. Neel, M. Sussman,

61. P. Orchard, J.C.Marx, R. E. Pyeritz, M.K.Brenner// Nat. Med. 1999.- N 5.-P. 309-313.

62. Horwitz, M. E. Chronic graft-versus-host disease / M. E. Horwitz, K. M. Sullivan // Blood Rev. 2006. - N 20. - P. 15-27.

63. Jiang, R. Transplantation of placenta-derived mesenchymal stem cells in type 2 diabetes: a pilot study / R. Jiang, Z. Han, G. Zhuo, X. Qu, X. Li, X. Wang, Y. Shao, S. Yang, Z. C. Han // Front Med. 2011. - N 5. - P. 94-100.

64. Jiang, X. X. Human mesenchymal stem cells inhibit differentiation and function of monocyte-derived dendritic cells / X. X. Jiang, Y. Zhang, B. Liu, S. X. Zhang, Y. Wu, X. D. Yu, N. Mao // Blood. 2005. - N 105. - P. 4120-1126.

65. Jones, B. J. Immunosuppression by mesenchymal stromal cells: from culture to clinic / B. J. Jones, S. J. McTaggart // Exp. Hematol. 2008. - N 36. - P. 733-741.

66. Jones, E. Human bone marrow mesenchymal stem cells in vivo / E. Jones,

67. D. McGonagle//Rheumatology (Oxford). -2008.-N47.-P. 126-131.

68. Kansu, E. The pathophysiology of chronic graft-versus-host disease/

69. E. Kansu // Int. J. Hematol. 2004. - N 79. - P. 209-215.

70. Kebriaei, P. Adult human mesenchymal stem cells added to corticosteroid therapy for the treatment of acute graft-versus-host disease / P. Kebriaei, L. Isola, E. Bahceci, K. Holland, S. Rowley, J. McGuirk, M. Devetten, J. Jansen, R. Herzig,

71. M. Schuster, R. Monroy, J. Uberti // Biol. Blood Marrow Transplant. 2009. -N 15.- P. 804-811.

72. Kebriaei, P. Mesenchymal stem cell therapy in the treatment of acute and chronic graft versus host disease / P. Kebriaei, S. Robinson // Front. Oncol. — 2011.— N l.-P. 16.

73. Kern, S. Comparative analysis of mesenchymal stem cells from bone marrow, umbilical cord blood, or adipose tissue/ S.Kern, H. Eichler, J. Stoeve, H. Kluter, K. Bieback // Stem. Cells. 2006. - N 24. - P. 1294-1301.

74. Kimura, A. IL-6: regulator of Treg/Thl7 balance/ A. Kimura, T. Kishimoto // Eur. J. Immunol. 2010. -N 40. - P. 1830-1835.

75. Korngold, R. Surface markers of T cells causing lethal graft-vs-host disease to class I vs class II H-2 differences / R. Korngold, J. Sprent // J. Immunol. 1985. -N 135.-P. 3004-3010.

76. Le Blanc, K. Treatment of severe acute graft-versus-host disease with third party haploidentical mesenchymal stem cells / K. Le Blanc, I. Rasmusson, B. Sundberg, C. Gotherstrom, M. Hassan, M. Uzunel, O. Ringden // Lancet. 2004. -N 363.-P. 1439-1441.

77. Le Blanc, K. HLA expression and immunologic properties of differentiated and undifferentiated mesenchymal stem cells / K. Le Blanc, C. Tammik, K. Rosendahl, E. Zetterberg, O. Ringden // Exp. Hematol. 2003. - N 31. - P. 890896.

78. Lechler, R. I. Restoration of immunogenicity to passenger cell-depleted kidney allografts by the addition of donor strain dendritic cells / R. I. Lechler, J. R. Batchelor // J. Exp. Med. 1982. - N 155. - P. 31-41.

79. Lee, S. J. New approaches for preventing and treating chronic graft-versus-host disease / S. J. Lee // Blood. 2005. -N 105. - P. 4200^1206.

80. Li, N. Anti-CD3 preconditioning separates GVL from GVHD via modulating host dendritic cell and donor T-cell migration in recipients conditioned with TBI / N. Li, Y. Chen, W. He, T. Yi, D. Zhao, C. Zhang, C. L. Lin, I. Todorov,

81. F. Kandeel, S. Forman, D. Zeng // Blood. 2009. - N 113. - P. 953-962.

82. Liang, J. Allogeneic mesenchymal stem cell transplantation in seven patients with refractory inflammatory bowel disease / J. Liang, H. Zhang, D. Wang, X. Feng, H. Wang, B. Hua, B. Liu, L. Sun // Gut. 2012. - N 61. - P. 468^69.

83. Lim, J. H. Mesenchymal stromal cells for steroid-refractory acute graft-versus-host disease: a report of two cases / J. H. Lim, M. H. Lee, H. G. Yi, C. S. Kim, J. H. Kim, S. U. Song // Int. J. Hematol. 2010. - N 92. - P. 204-207.

84. Lucchini, G. Platelet-lysate-expanded mesenchymal stromal cells as a salvage therapy for severe resistant graft-versus-host disease in a pediatric population /

85. G. Lucchini, M. Introna, E. Dander, A. Rovelli, A. Balduzzi, S. Bonanomi, A. Salvade, C. Capelli, D. Belotti, G. Gaipa, P. Perseghin, P. Vinci, E. Lanino,

86. P. Chiusolo, M. G. Orofino, S. Marktel, J. Golay, A. Rambaldi, A. Biondi, G. DAmico, E. Biagi // Biol Blood Marrow Transplant. 2010. - N 16. - P. 12931301.

87. Maeda, A. Intravenous infusion of syngeneic apoptotic cells by photopheresis induces antigen-specific regulatory T cells / A. Maeda, A. Schwarz, K. Kernebeck, N. Gross, Y. Aragane, D. Peritt, T. Schwarz // J. Immunol. 2005. -N 174.-P. 5968-5976.

88. Majumdar, M. K. Characterization and functionality of cell surface molecules on human mesenchymal stem cells / M. K. Majumdar, M. Keane-Moore,

89. D. Buyaner, W. B. Hardy, M. A. Moorman, K. R. Mcintosh, J. D. Mosca // J. Biomed. Sci. -2003.-N 10.-P. 228-241.

90. Mareschi, K. Isolation of human mesenchymal stem cells: bone marrow versus umbilical cord blood / K. Mareschi, E. Biasin, W. Piacibello, M. Aglietta,

91. E. Madon, F. Fagioli // Haematologica. 2001. -N 86. - P. 1099-1100.

92. Maziarz, R. T. Blood and marrow transplant handbook comprehensive guide for patient care / R. T. Maziarz, S. Slater. N. Y. : Springer, 2011. - 324 p.

93. McCormick, L. L. Anti-TGF-beta treatment prevents skin and lung fibrosis in murine sclerodermatous graft-versus-host disease: a model for human scleroderma / L. L. McCormick, Y.Zhang, E. Tootell, A. C. Gilliam /7 J. Immunol. 1999. -N 163.-P. 5693-5699.

94. McCune, J. S. Cyclophosphamide following targeted oral busulfan as conditioning for hematopoietic cell transplantation: pharmacokinetics, liver toxicity,and mortality/ J. S. McCune, A. Batchelder, H. J. Deeg, T. Gooley, S.Cole,

95. B. Phillips, H. G. Schoch, G. B. McDonald // Biol Blood Marrow Transplant. -2007.-N 13.-P. 853-862.

96. Meisel, R. Human bone marrow stromal cells inhibit allogeneic T-cell responses by indoleamine 2,3-dioxygenase-mediated tryptophan degradation/ R. Meisel, A. Zibert, M. Laryea, U. Gobel, W. Daubener, D. Dilloo // Blood. 2004. -N103.-P. 4619-4621.

97. Mohty, M. Mechanisms of action of antithymocyte globulin: T-cell depletion and beyond / M. Mohty // Leukemia. 2007. - N 21. - P. 1387-94.

98. Munn, D. H. Indoleamine 2,3-dioxygenase and tumor-induced tolerance/ D. H. Munn, A. L. Mellor // J. Clin. Invest. 2007. -N117.-P.il 47-1154.

99. Murphy, W. J. Revisiting graft-versus-host disease models of autoimmunity: new insights in immune regulatory processes / W. J. Murphy // J. Clin. Invest. 2000. - N 106. - P. 745-747.

100. Nash, R. A. Acute graft-versus-host disease: analysis of risk factors after allogeneic marrow transplantation and prophylaxis with cyclosporine and methotrexate / R. A. Nash, M. S. Pepe, R. Storb, G. Longton, M. Pettinger,

101. C. Anasetti, F. R. Appelbaum, R. A. Bowden, H. J. Deeg, K. Doney and et al. // Blood. 1992. - N 80. - P. 1838-1845.

102. Nauta, A. J. Immunomodulatory properties of mesenchymal stromal cells / A. J. Nauta, W. E. Fibbe // Blood. 2007. - N 110. - P. 3499-3506.

103. Niscola, P. Mucositis in patients with hematologic malignancies: an overview / P. Niscola, C. Romani, L. Cupelli, L. Scaramucci, A. Tendas, T. Dentamaro, S. Amadori, P. de Fabritiis // Haematologica. 2007. - N 92. - P. 222231.

104. Norton, J. ICAM-1 expression on epidermal keratinocytes in cutaneous graft-versus-host disease / J. Norton, J. P. Sloane // Transplantation. 1991. - N 51. -P. 1203-1206.

105. Pidala, J. Graft-vs-host disease following allogeneic hematopoietic cell transplantation / J. Pidala // Cancer Control. 2011. - N 18. - P. 268-276.

106. Plumas, J. Mesenchymal stem cells induce apoptosis of activated T cells / J. Plumas, L. Chaperot, M. J. Richard, J. P. Molens, J. C. Bensa, M. C. Favrot // Leukemia. -2005.-N 19.-P. 1597-1604.

107. Ramasamy, R. Mesenchymal stem cells inhibit dendritic cell differentiation and function by preventing entry into the cell cycle / R. Ramasamy, H. Fazekasova, E. W. Lam, I. Soeiro, G. Lombardi, F. Dazzi // Transplantation. 2007. - N 83. -P. 71-76.

108. Sakihama, T. Molecular recognition of antigen involves lattice formation between CD4, MHC class II and TCR molecules / T. Sakihama, A. Smolyar, E. L. Reinherz // Immunol. Today. 1995. -N 16. - P. 581-587.

109. Samuelsson, H. Optimizing in vitro conditions for immunomodulation and expansion of mesenchymal stromal cells / H. Samuelsson, O. Ringden, H. Lonnies, K. Le Blanc // Cytotherapy. 2009. - N 11. - P. 129-136.

110. Scambi, C. Comparative proteomic analysis of serum from patients with systemic sclerosis and sclerodermatous GVHD. Evidence of defective function of factor H / C. Scambi, V. La Verde, L. De Franceschi, G. Barausse, F. Poli,

111. F. Benedetti, M. Sorio, F. Deriu, P. Roncada, O. Bortolami, F. Turrini, P. Caramaschi, C. Stranieri, L. M. Bambara, D. Biasi // PLoS One. 2010. - N 5. - el2162.

112. Schallmoser, K. Human platelet lysate can replace fetal bovine serum for clinical-scale expansion of functional mesenchymal stromal cells / K. Schallmoser,

113. C. Bartmann, E. Rohde, A. Reinisch, K. Kashofer, E. Stadelmeyer, C. Drexler,

114. G. Lanzer, W. Linkesch, D. Strunk // Transfusion. 2007. - N 47. - P. 1436-1446.

115. Schmittgen, T. D. Analyzing real-time PCR data by the comparative C(T) method / T. D. Schmittgen, K. J. Livak // Nat. Protoc. 2008. - N 3. - P. 1101-1108.

116. D. Parenti, J. Gallo, F. Foss, J. At^erley, M. J. Zhang, M. M. Horowitz,

117. S. Abhyankar // Bone Marrow Transplant. 2010. - N 45. - P. 1068-1076.

118. Simpson, D. Drug therapy for acute graft-versus-host disease prophylaxis /

119. D. Simpson // J. Hematother. Stem. Cell. Res. 2000. -N 9. - P. 317-325.

120. Soiffer, R. J. Hematopoietic stem cell transplantation / R. J. Soiffer. L. : Humana ; Springer distributor, 2008. - 736 p.

121. E. K. Waller, M. M. Horowitz, M. Eapen//Blood. -2011. -N 117. P. 6963-6970.

122. Spisek, R. Maturation state of dendritic cells during the extracorporeal photopheresis and its relevance for the treatment of chronic graft-versus-host disease / R. Spisek, Z. Gasova, J. Bartunkova // Transfusion. 2006. - N 46. - P. 55-65.

123. Sun, L. Mesenchymal stem cell transplantation reverses multiorgan dysfunction in systemic lupus erythematosus mice and humans / L. Sun, K. Akiyama, H. Zhang, T. Yamaza, Y. Hou, S. Zhao, T. Xu, A. Le, S. Shi // Stem Cells. 2009. -N27.-P. 1421-1432.

124. Sundin, M. HSCT recipients have specific tolerance to MSC but not to the MSC donor / M. Sundin, A. J. Barrett, O. Ringden, M. Uzunel, H. Lonnies, A. L. Dackland, B. Christensson, K. L. Blanc // J. Immunother. 2009. - N 32. -P. 755-764.

125. Swanson, K. A. CDllc+ cells modulate pulmonary immune responses by production of indoleamine 2,3-dioxygenase / K. A. Swanson, Y. Zheng, K. M. Heidler, T. Mizobuchi, D. S. Wilkes // Am J. Respir. Cell. Mol. Biol. 2004. -N30.-P. 311-318.

126. Tabbara, I. A. Allogeneic hematopoietic stem cell transplantation: complications and results / I. A. Tabbara, K. Zimmerman, C. Morgan, Z. Nahleh // Arch. Intern. Med. -2002.-N 162.-P. 1558-1566.

127. Taga, K., Mostowski, H. and Tosato, G., Human interleukin-10 can directly inhibit T-cell growth// Blood. 1993. - N 81. - P. 2964-2971.

128. Taylor, P. A. CD4(+)CD25(+) immune regulatory cells are required for induction of tolerance to alloantigen via costimulatory blockade / P. A. Taylor, R. J. Noelle, B. R. Blazar // J. Exp. Med. 2001. - N 193. - P. 1311-1318.

129. Tu, Z. Mesenchymal stem cells inhibit complement activation by secreting factor H / Z. Tu, Q. Li, H. Bu, F. Lin // Stem Cells Dev. 2010. - N 19. - P. 18031809.

130. Tyndall, A. Successes and failures of stem cell transplantation in autoimmune diseases / A. Tyndall // Hematology Am Soc. Hematol. Educ. Program. -2011.-280-4.

131. Wagner, J. E. Effect of graft-versus-host disease prophylaxis on 3-year disease-free survival in recipients of unrelated donor bone marrow (T-cell Depletion

132. Trial): a multi-centre, randomised phase II-III trial / J. E. Wagner, J. S. Thompson, S. L. Carter, N. A. Kernan // Lancet. 2005. - N 366. - P. 733-741.

133. Wang, J. Kynurenic acid as a ligand for orphan G protein-coupled receptor GPR35 / J. Wang, N. Simonavicius, X. Wu, G. Swaminath, J. Reagan, H. Tian, L. Ling // J. Biol. Chem. 2006. -N 281. - 22021-22028.

134. Welniak, L. A. Immunobiology of allogeneic hematopoietic stem cell transplantation / L. A. Welniak, B. R. Blazar, W. J. Murphy // Annu. Rev. Immunol. -2007.-N25.-P. 139-170.

135. Zhang, L. S. Mesenchymal stem cells for treatment of steroid-resistant chronic graft-versus-host disease / L. S. Zhang, Q. F. Liu, K. Huang, Y. Zhang, Z. P. Fan, S. L. Huang // Zhonghua Nei Ke Za Zhi. 2009. - N 48. - P. 542-546.

136. Zhang, W. Effects of mesenchymal stem cells on differentiation, maturation, and function of human monocyte-derived dendritic cells / W. Zhang, W. Ge, C. Li, S. You, L. Liao, Q. Han, W. Deng, R. C. Zhao // Stem Cells Dev. -2004.-N 13.-P. 263-271.

137. Zhang, Y. Murine sclerodermatous graft-versus-host disease, a model for human scleroderma: cutaneous cytokines, chemokines, and immune cell activation/ Y.Zhang, L.L.McCormick, S. R. Desai, C. Wu, A.C.Gilliam// J. Immunol. -2002.-N 168.-3088-3098.