Протеомное исследование белков культивируемых мышечных и эпителиальных клеток человека тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, кандидат биологических наук Макаров, Андрей Александрович

• Макаров, Андрей Александрович
• кандидат биологических наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Макаров, Андрей Александрович

Список сокращений

Введение

ГЛАВА 1. Современные подходы к изучению белков в скелетномышечных миобластах, а также в некоторых других нормальных и злокачественных клетках человека (обзор литературы).

1.1. Общая характеристика сателлитных клеток скелетной мускулатуры.

1.2. Ростовые факторы и их роль в регуляции роста сателлитных 17 клеток.

1.3. Исследование мышечных белков с помощью постгепомных 21 технологий.

1.4. Использование постгеномных технологий для исследования 36 белкового состава предстательной железы.

Глава 2. Материалы и методы.

2.1. Реактивы и биологические материалы.

2.2. Методы культивирования клеток человека.

2.3. Определение влияния исследуемых препаратов на 40 пролиферацию культивируемых клеток.

2.4. Электрофоретическое разделение белков.

2.5. Детекция белков на гелевых пластинах с 45 использованием кумасси голубого R-250 и азотнокислого серебра.

2.6. Фотодокументирование изображений и архивирование гелей. 46 2.7 Масс-спектрометрическая идентификация белков. 46 2.8. Методы статистической обработки результатов.

Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ. 48 3.1. Исследование белкового состава культивируемых миобластов человека на разных сроках дифференцировки.

3.2. Идентификация новых белков в культивируемых миобластах 57 человека.

3.3. Сопоставление данных протеомного анализа белков 58 культивируемых мышечных клеток человека с информацией о конфликтных определениях аминокислотной последовательности белков, содержащейся в базе данных Swiss-Prot.

3.4. Сравнительный протеомный анализ белков культивируемых ^ миобластов человека и некоторых опухолевых клеток мышечного и эпителиального происхождения.

3.5. Оптимизация клеточной тест-системы, использующей в качестве 74 тест-объекта культивируемые миобласты человека.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Протеомное исследование белков культивируемых мышечных и эпителиальных клеток человека»

Актуальность темы. Одним из актуальных направлений современной науки является изучение пролиферации и дифференцировки клеток, так как эти процессы определяют ход роста, развития и регенерации различных тканей и органов. Рост, регенерация и гипертрофия скелетной мускулатуры происходят в результате пролиферации и дифференцировки сателлитных клеток [Goldring et al., 2002; Charge, Rudnicki, 2004; Dhawan, Rando, 2005]. Экспериментальное изучение молекулярных механизмов, вовлеченных в протекание указанных биологических процессов, является важной задачей современной биомедицинской науки, так как позволяет выработать новые подходы к диагностике, профилактике и лечению ряда распространенных и социально значимых заболеваний. Завершение в 2001 году проекта «Геном человека» позволило достигнуть качественно нового уровня исследования молекулярных механизмов функционирования клетки за счет сочетания традиционных биохимических методов с рядом подходов, разработанных в рамках геномных и постгеномных дисциплин [Anderson, Anderson, 1998; Арчаков, 2000; Говорун, Арчаков, 2002; Шишкин, 2002; Шишкин и др., 2004]. Так, сочетание традиционных электрофоретических и хроматографических методов фракционирования белков с их идентификацией методами масс-спектрометрии позволяет существенно расширить возможности изучения белкового состава различных биологических объектов [Tomlinson et al., 2001; Koomen et al., 2005; Chen et al., 2006; Doran et al., 2007]. Использование нормальных и опухолевых культивируемых клеток человека в качестве экспериментальной модели для изучения процессов дифференцировки и злокачественного перерождения позволяет приблизиться к пониманию молекулярных механизмов указанных процессов в организме человека, не сталкиваясь с разнообразными трудностями (в том числе и этическими), неизбежно возникающими при постановке соответствующих экспериментов на животных или человеке.

Цель и задачи исследования. Целью настоящего исследования являлось изучение протеомными технологиями особенностей белкового состава миобластов человека, культивируемых в условиях, обеспечивающих пролиферацию и индуцирующих дифференцировку, а также выяснение возможного участия отдельных белков в этих процессах и при опухолевой трансформации на примере злокачественных клеток мышечного и эпителиального происхождения.

В соответствии с целью исследования в работе решались следующие задачи:

1. Провести сравнительный протеомный анализ белков пролиферирующих и дифференцирующихся миобластов человека, направленный на выявление и идентификацию белков, изменяющихся в ходе дифференцировки.

2. Сопоставить результаты протеомного анализа идентифицированных белков миобластов человека с материалами баз данных NCBI и Swiss-Prot.

3. Изучить различия белкового состава пролиферирующих нормальных миобластов человека и некоторых культивируемых опухолевых клеток мышечного и эпителиального происхождения с целью идентификации потенциальных онкомаркеров.

4. Оптимизировать клеточную тест-систему, использующую в качестве тест-объекта культивируемые миобласты человека, для определения эффектов биологически активных соединений, подавляющих пролиферацию клеток.

Научная новизна работы. Получены новые данные об особенностях белкового состава пролиферирующих и дифференцирующихся культивируемых миобластов человека. В культивируемых миобластах человека обнаружено 3 новых белка.

Для 40 аминокислотных конфликтов в 12 белках культивируемых мышечных клеток человека подтверждена достоверность определения одного из вариантов аминокислотной последовательности.

Научно-практическая значимость. Работа имеет фундаментальный характер и направлена на изучение особенностей белкового состава культивируемых клеток человека и механизмов их дифференцировки. Использование культивируемых опухолевых клеток человека позволило уточнить специфичность некоторых потенциальных онкомаркеров. В частности, показано присутствие белка AGR2, рассматриваемого в качестве перспективного онкомаркера, в культивируемых клетках рака предстательной железы, но не в культивируемых клетках мышечного происхождения.

Оптимизация клеточной тест-системы (в частности, использование бессывороточного контроля) позволила использовать ее для тестирования ростовых факторов, не только стимулирующих, но и подавляющих пролиферацию культивируемых миобластов человека. Основные положения, выносимые на защиту.

1. Протеомными технологиями изучен белковый состав культивируемых миобластов человека на разных этапах дифференцировки; при этом идентифицировано 42 белковых фракции (в том числе 13 фракций, количество которых меняется в ходе дифференцировки) и три новых белка.

2. Подтверждено существование по одному из вариантов для 40 расчетных «конфликтных» определений в аминокислотных последовательностях 12 идентифицированных белков культивируемых мышечных клеток человека.

3. Проведенный сравнительный протеомный анализ белков нормальных миобластов человека и некоторых опухолевых культивируемых клеток мышечного и эпителиального происхождения позволил выявить ряд белков, потенциально вовлеченных в процессы опухолевой трансформации.

4. Оптимизирована клеточная тест-система, что позволило использовать ее для тестирования как стимулирующих, так и подавляющих пролиферацию рекомбинантных белковых факторов роста. Апробация работы. Материалы данной работы докладывались на международных и российских конференциях, симпозиумах и школах, в том числе на Всероссийском симпозиуме «Биология клетки в культуре» (2006 г., Санкт-Петербург), Международном симпозиуме «Проблемы биохимии, радиационной и космической биологии» (2007 г., г.Дубна), 2-м съезде Общества клеточной биологии (2007 г., Санкт-Петербург), 6-й Парнасовской конференции «Molecular Mechanism of Cellular Signaling» (2007 г., Польша, г.Краков), 32-м Конгрессе Федерации европейских биохимических обществ (2007 г., Австрия, г.Вена), Летней школе «Hottest Topics in Protein Research» (2008 г., Хорватия, г.Сплит), Европейском мышечном конгрессе (2008 г., Великобритания, г.Оксфорд), Европейском симпозиуме по калыдий-связывающим белкам (2008 г., Бельгия, г.Левен), Школе молодых ученых «Методы культивирования клеток» (2008 г., Санкт-Петербург), Совещании «Muscle regeneration and Stem Cells: a multiorganismic approach» (2008 г., Польша, г.Неполомице) и др. Работа была отмечена присуждением стипендии им. члена-корреспондента РАН В.Л. Кретовича на 2008 г.

Публикации. По теме диссертации опубликовано 17 научных работ (из них 5 в зарубежной печати), включая 6 статей в профильных рецензируемых российских и международных журналах, 3 статьи в сборниках и 8 тезисов докладов.

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Макаров, Андрей Александрович

выводы.

1. С помощью протеомного анализа белков в пролиферирующих и дифференцирующихся миобластах человека: а) идентифицировано 42 белковых фракции, в том числе актин, кальций- и актин-связывающие белки (кофилин, кальдесмон, трансгелии, тропомиозины, S100A10, S100A11), белки теплового шока и другие. б) выявлено и идентифицировано 11 белковых фракций, количество которых значительно уменьшалось при дифференцировке; уменьшение количества немышечной формы кофилина и белка S100A11 предлагается рассматривать как ранние признаки, отражающие дифференцировку одноядерных пролиферирующих миобластов с немышечным типом подвижности в многоядерные миотубы. в) в дифференцирующихся миобластах обнаружено увеличение 2 белковых фракций; появление изоформы 1 p-тропомиозина, типичной для зрелых мышечных клеток, можно рассматривать как один из ранних признаков дифференцировки миобластов.

2. В культивируемых миобластах человека обнаружено 3 новых белка (Мм/р1 38,0/4,90; 59,0/8,30; 58,0/7,90), сходных с гипотетическими белками -потенциальными продуктами трансляции транскриптов, зарегистрированных в базе данных NCBI.

3. По итогам сопоставления результатов протеомного анализа с информацией баз данных NCBI и Swiss-Prot подтверждено существование по одному из вариантов для 40 расчетных «конфликтных» определений в аминокислотных последовательностях 12 идентифицированных белков культивируемых мышечных клеток человека.

4. Сравнительное изучение белкового состава нормальных и опухолевых культивируемых клеток мышечного и эпителиального происхождения позволило идентифицировать в клетках рабдомиосаркомы и рака предстательной железы 3 белка (NM23B, DJ-1 и шаперонин-10), рассматриваемых в качестве потенциальных онкомаркеров; белок AGR2, рассматриваемый как потенциальный маркер рака предстательной железы, был обнаружен только в клетках рака предстательной железы. 5. Клеточная тест-система, использующая в качестве тест-объекта культивируемые миобласты человека, оптимизирована для определения активности рекомбинантных ростовых факторов и других биологически активных веществ, подавляющих пролиферацию клеток.

БЛАГОДАРНОСТИ.

Выражаю свою искреннюю благодарность д.б.н. Л.И.Ковалеву за чуткое и доброжелательное научное руководство, проф. С.С.Шишкину за терпение и неоценимую помощь в работе, к.б.н. М.А.Ковалевой за помощь в работе с компьютерными изображениями, к.м.н. Л.С. Ереминой и асп. К.В.Лисицкой за помощь в постановке экспериментов, а также другим сотрудникам лаборатории биомедицинских исследований за всестороннюю поддержку. Благодарю к.б.н. Т.В.Крохину, к.б.н. В.С.Ахунова и д.б.н. Шемякина за предоставленные образцы культивируемых клеток человека, д.б.н. А.Б.Шевелева за предоставленные препараты рекомбинантных миостатина и механо-зависимого ростового фактора, к.б.н. И.В.Кравченко за организационную помощь.

Я искренне признателен всем сотрудникам Института биохимии им.А.Н.Баха РАН за доброту и моральную поддержку.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ.

Завершение в 2001 году Международного проекта «Геном человека» ознаменовало собой начало так называемой постгеномной эры в биологии. В результате этого возник целый ряд подходов к изучению биологических объектов, основанный на использовании современных постгеномных технологий. Особый интерес при этом представляет изучение генной экспрессии на белковом уровне, осуществляемое при помощи протеомных технологий. Культивируемые клетки являются распространенной моделью для экспериментального изучения многих биологических процессов. Одним из существенных преимуществ использования культивируемых клеток в биомедицинских исследованиях является возможность изучать молекулярные процессы в клетках человека, не сталкиваясь с различными трудностями (как техническими, так и этическими), неизбежно возникающими при постановке экспериментов на животных и человеке.

Данная работа была выполнена с использованием в качестве экспериментальной модели неиммортализованных культивируемых миобластов человека, клеток рабдомиосаркомы (злокачественной опухоли скелетной мышцы) человека и клеток рака предстательной железы человека. В ряде случаев имело место сопоставление белкового состава культивируемых клеток и образцов ткани человека.

Миобласты, вступая в дифференцировку, претерпевают ряд изменений -выходят из клеточного цикла, превращаются в миоциты и начинают сливаться с образованием многоядерных миотуб. Соответственно этому происходит изменение генной экспрессии, что закономерно проявляется в изменении белкового состава. Используя протеомные технологии, удалось выявить 13 белковых фракции, претерпевавших выраженные количественные изменения в ходе дифференцировки, и идентифицировать их. К ним относились белок S100A11, немышечная форма кофилина, ряд изоформ тропомиозинов и другие белки. Помимо этого, было идентифицировано 29 белков, не претерпевающих значительных количественных изменений.

Кроме того, было обнаружено 3 новых белка, не описанных ранее в базах данных NCBI и Swiss-Prot. Информация, полученная при масс-спектрометрической идентификации, позволила подтвердить по одному из вариантов для 12 конфликтных определений аминокислотной последовательности 40 белков, зарегистрированных в базе данных Swiss-Prot.

Сравнительный протеомный анализ белков нормальных миобластов и некоторых опухолевых культивируемых клеток мышечного и эпителиального происхождения позволил установить, что белок AGR2, рассматриваемый как потенциальный маркер рака предстательной железы, присутствует как в ткани, так и в культивируемых клетках рака предстательной железы, но отсутствует в мышечных клетках (как нормальных, так и опухолевых). Белки NM23B, DJ-1 и шаперонин-10, рассматриваемые как потенциальные участники процессов опухолевой трансформации и онкомаркеры, были идентифицированны в клетках рабдомиосаркомы и рака предстательной железы, но не в нормальных миобластах.

Оптимизация клеточной тест-системы, использующей в качестве тест-объекта культивируемые миобласты человека, позволила использовать ее для определения как стимулирующих, так и подавляющих пролиферацию кульвируемых миобластов человека рекомбинантных ростовых факторов -миостатина и механозависимого ростового фактора. С использованием указанной тест-системы была проведена проверка эффектов различных препаратов миостатина и механозависимого ростового фактора. Тестирование позволило различать физиологически активные и неактивные препараты и разумно подходить к усовершенствованию технологии их получения.

Таким образом, сочетание использования культивируемых клеток человека, выступающих в качестве моделей ряда нормальных (пролиферация, дифференцировка) и патологических (опухолевый рост) процессов, и протеомных технологий позволило выявить ряд существенных фактов, представляющих как чисто научный, так и практический интерес.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Макаров, Андрей Александрович, 2009 год

1. Арчаков А.И. (2000) Что после геномики? Протеомика. Вопр. мед. химии, 46, 335-343.

2. Баев А.А. (1990) Программа «Геном человека»: ее возникновение, содержание и развитие. Итоги науки и техники. Сер. Геном человека, 1,4-33.

3. Гланц С. (1999) Медико-биологическая статистика. М., Практика, 459 с.

4. Говорун В.М., Арчаков А.И. (2002) Протеомные технологии в современной биомедицинской науке. Биохимия, 61, 1341 — 1359.

5. Громов П.С., Целис Х.Э. (2000) От геномики к протеомике. Молекулярная биология, 34, 597—611.

6. Ивахно С., Корнелюк А. (2006) Количественная протеомика и ее применение в системной биологии. Биохимия, 71, 1312-1327.

7. Ковалев Л.И., Шишкин С.С., Хасигов П.З., Дзеранов Н.К., Казаченко А.В., Ковалева М.А., Торопыгин И.Ю., Еремина Л.С., Грачев С.В. (2006) Новые подходы к молекулярной диагностике рака простаты. Урология, 5, 16-19.

8. Ковалев Л.И., Шишкин С.С., Иволгина Г.Л., Громов П.С., Шандала A.M. (1986)Выявление межлинейного полиморфизма белков сердечной мышцы мышей методом двумерного электрофореза. Биохимия, 51, 896908.

9. Кушлииский Н.Е., Соловьев В.Ю., Трапезникова М.Ф. (2002) Рак предстательной железы. М., Издательство РАМН, 432 с.

10. Остерман Л.О. (1983) Исследование биологических макромолекул электрофокусированием, иммуноэлектрофорезом и радиоизотопными методами. М., Наука, 304 с.

11. Примроуз С., Тваймен Р. (2008) Геномика. Роль в медицине. М., Из-во «БИНОМ. Лаборатория знаний», 277 с.

12. Пуляева Е.В., Ковалев Л.И., Цветкова М.Н., Шишкин С.С., Болдырев Н.И. (1990) Двумерная карта белков левого желудочка сердца человека. Биохимия, 55, 489-498.

13. Ригетти П. (1986) Изоэлектрическое фокусирование. Теория, методы и применение. М., Мир, 398 с.

14. Шишкин С.С. (1985) Молекулярно-анатомическое направление в биохимической генетике. Вестник АМН СССР, 1, 78-84.

15. Шишкин С.С. (2002) От структурной геномики к функциональной: теоретические и прикладные аспекты. Вест. РАМН, 4, 11-16.

16. Шишкин С.С. (2004) Миостатин и некоторые другие биохимические факторы, регулирующие рост мышечных тканей у человека и ряда высших позвоночных. Успехи биол. химии, 44, 209-262.

17. Шишкин С.С., Егоров Ц.А., Ковалев Л.И., Лаптев А.В., Цветкова М.Н., Пуляева Е.В., Барбашов С.Ф. Идентификация альфа-тропомиозина сердечной мышцы человека двумерным электрофорезом и секвенированием. (1991) Биохимия, 56, 136-140.

18. Шишкин С.С., Калинин В.Н. (1992) Медицинские аспекты биохимической и молекулярной генетики. М., Из-во ВИНИТИ, 216 с.

19. Шишкин С.С., Ковалев Л.И., Громов П.С. (2000) Функциональная геномика человека и протеомика, как раздел функциональной геномики. // В кн.: "Многоликость современной генетики человека" под ред. С.С.Шишкина. Москва-Уфа, "Гилем", 17-50.

20. Шишкин С.С., Ковалев Л.И., Ковалева М.А. (2004) Протеомные исследования мышечных белков человека и некоторых других позвоночных. Биохимия, 69, 1574- 1591.

21. Шубникова Е.А., Юрина Н.А., Гусев Н.Б., Балезина О.П., Большакова Г.Б. (2001) Мышечные ткани. Москва, «Медицина», 235 с.

22. Adams GR. (2006) Satellite cell proliferation and skeletal muscle hypertrophy. Appl Physiol Nutr Metab, 31, 782-790.

23. Alaiya A, Roblick U, Egevad L, Carlsson A, Franzen B, Volz D, Huwendiek S, binder S, Auer G. (2000) Polypeptide expression in prostate hyperplasia and prostate adenocarcinoma. Anal Cell Pathol., 21, 1-9.

24. Allen RE, Sheehan SM, Taylor RG, Kendall TL, Rice GM. (1995) Hepatocyte growth factor activates quiescent skeletal muscle satellite cells in vitro. J Cell Physiol, 165, 307-312.

25. Anderson JE. (2000) A role for nitric oxide in muscle repair: nitric oxide-mediated activation of muscle satellite cells. Mol Biol Cell, 11, 1859-1874.

26. Anderson NG, Anderson NL. (1982) The human protein index. Clin.Chem., 28, 739-748.

27. Anderson NG, Matheson A, Anderson NL. (2001) Back to the future: the human protein index (HPI) and the agenda for post-proteomic biology. Proteomics, 1, 3-12.

28. Anderson NL, Anderson NG. (1991) A two-dimensional gel database of human plasma proteins. Electrophoresis, 12, 883-906.

29. Anderson NL, Anderson NG. (1998) Proteome and proteomics: new technologies, new concepts, and new words. Electrophoresis, 19, 18531861.

30. Asakura A, Rudnicki MA. (2002) Cellular and molecular mechanisms regulating skeletal muscle development. In: Mouse Development. Orlando, FL: Academic, p. 253-278.

31. Baker CS, Corbett JM, May AJ, Yacoub MH, and Dunn MJ. (1992) Electrophoresis, 13, 723-726.

32. Balcerzak D, Poussard S, Brustis JJ, Elamrani N, Soriano M, Cottin P, Ducastaing A. (1995) An antisense oligodeoxyribonucleotide to m-calpain mRNA inhibits myoblast fusion. J Cell Sci, 108, 2077-2082.

33. Barton ER, Morris L, Musaro A, Rosenthal N, Sweeney HL. (2002) Muscle-specific expression of insulin-like growth factor I counters muscle decline in mdx mice. J Cell Biol, 157, 137-148.

34. Bischoff R. (1986) Proliferation of muscle satellite cells on intact myofibers in culture. Dev Biol, 115, 129-139.

35. Bischoff R. (1997) Chemotaxis of skeletal muscle satellite cells. Dev Dyn, 208, 505-515.

36. Blau HM, Pavlath GK, Hardeman EC, Chiu CP, Silberstein L, Webster SG, Miller SC, Webster C. (1985) Plasticity of the differentiated state. Science, 230, 758-766.

37. Blum H, Beir H, Cross HG. (1987) Improved silver staining of plant proteins, RNA and DNA in polyacrylamide gels. Electrophoresis, 8, 126129.

38. Campion DR, Richardson RL, Reagan JO, Kraeling RR. (1981) Changes in the satellite cell population during postnatal growth of pig skeletal muscle. J AnimSci, 52, 1014-1018.

39. Celis J, Honore B, Bauw G, Vandekerckhove J. (1990) Comprehensive computerized 2D gel protein databases offer a global approach to the study of the mammalian cell. BioEssays, 12, 93-98.

40. Celis JE, Leffers H, Rasmussen HH, Madsen P, Honore B, Gesser B, Dejgaard K, Olsen E, Ratz GP, Lauridsen JB, Bassen B, Andersen AN,

41. Celis JE, Bravo R. (1984) Two-Dimensional Gel Electrophoresis of Proteins: Methods and Applications, N.Y., Academic Press.

42. Charge SB, Rudnicki MA. (2004) Cellular and molecular regulation of muscle regeneration. Physiol Rev, 84, 209-238.

43. Charlton CA, Mohler WA, Radice GL, Hynes RO, Blau HM. (1997) Fusion competence of myoblasts rendered genetically null for N-cadherin in culture. J Cell Biol, 138, 331-336.

44. Chen EI, Hewel J, Felding-Habermann B, Yates JR 3rd. (2006) Large scale protein profiling by combination of protein fractionation andmultidimensional protein identification technology (MudPIT). Mol Cell Proteolytics, 5, 53-56.

45. Chi N, Epstein JA. (2002) Getting your Pax straight: Pax proteins in development and disease. Trends Genet, 18, 41-47.

46. Chung LW, Kao C, Sikes RA, Zhau HE. (1997) Human prostate cancer progression models and therapeutic intervention. Hinyokika Kiyo, 43, 815820.

47. Comings D. (1982) Two-dimensional gel electrophoresis of human brain proteins. Clin. Chem., 28, 782-789.

48. Cornelison DD, Filla MS, Stanley HM, Rapraeger AC, Olwin BB. (2001) Syndecan-3 and syndecan-4 specifically mark skeletal muscle satellite cells and are implicated in satellite cell maintenance and muscle regeneration. Dev Biol, 239, 79-94.

49. Cossu G, Cicinelli P, Fieri C, Coletta M, Molinaro M. (1985) Emergence of TPA-resistant "satellite" cells during muscle histogenesis of human limb. Exp Cell Res, 160, 403-411.

50. Cottin P, Brustis JJ, Poussard S, Elamrani N, Broncard S, Ducastaing A. (1994) Ca2+-dependent proteinases (calpains) and muscle cell differentiation. Biochim Biophys Acta, 1223, 170-178.

51. Craven RA, Totty N, Harnden P, Selby PJ, Banks RE. (2002) Laser capture microdissection and two-dimensional polyacrylamide gel electrophoresis: evaluation of tissue preparation and sample limitations. Am. J. Pathol., 160, 815-822.

52. Dedieu S, Dourdin N, Dargelos E, Poussard S, Veschambre P, Cottin P, Brustis J J. (2002) Calpain and myogenesis: development of a convenient cell culture model. Biol Cell, 94, 65-76.

53. Dhawan J, Rando ТА. (2005) Stem cells in postnatal myogenesis: molecular mechanisms of satellite cell quiescence, activation and replenishment. Trends Cell Biol., 15, 666-673.

54. Doran P, Donoghue P, O'Connell K, Gannon J, Ohlendieck K. (2007) Proteomic profiling of pathological and aged skeletal muscle fibres by peptide mass fingerprinting. IntJMol Med, 19, 547-564.

55. Dvorzhinski D, Thalasila A, Thomas PE, Nelson D, Li H, White E, Dipaola RS. (2004) A novel proteomic coculture model of prostate cancer cell growth. Proteomics, 4, 3268-3275.

56. Emmert-Buck MR, Bonner RF, Smith PD, Chuaqui RF Zhuang Z, Goldstain SR, Weiss RA, and Liotta LA. (1996) Laser capture microdissection. Science, 274, 998-1001.

57. Fairbanks G, Steck TL, Wallach DFH. (1971) Electroforetic analysis of the major peptides of the erytrocyte membrane. Biochemistry, 10, 2607-2617.

58. Fawcett JS, Vicchio D, Chrambach A. (1988) The adsorbtion of large proteins in electro focusing on immobilized pH gradients: II. Dependence of the oligomeric state of Immobiline. Electrophoresis, 9, 469-474.

59. Fields S, Kohara Y, Lockhart DJ. (1999) Functional genomics. Proc Natl AcadSci USA, 96, 8825-8826.

60. Fritzsche FR, Dahl E, Dankof A, Burkhardt M, Pahl S, Petersen I, Dietel M, Kristiansen G. (2007) Expression of AGR2 in non small cell lung cancer. Histol Histopathol, 22, 703-708.

61. Fritzsche FR, Dahl E, Pahl S, Burkhardt M, Luo J, Mayordomo E, Gansukh T, Dankof A, Knuechel R, Denkert C, Winzer KJ, Dietel M, Kristiansen G.2006) Prognostic relevance of AGR2 expression in breast cancer. Clin Cancer Res, 12, 1728-1734.

62. Gal-Levi R, Leshem Y, Aoki S, Nakamura T, Halevy O. (1998) Hepatocyte growth factor plays a dual role in regulating skeletal muscle satellite cell proliferation and differentiation. Biochim Biophys Acta, 1402, 39-51.

63. Gamble HJ, Fenton J, Allsopp G. (1978) Electron microscope observations on human fetal striated muscle. JAnat, 126, 567-589.

64. Giometti CS, Williams K, Tollaksen SL. (1997) A two-dimensional electrophoresis database of human breast epithelial cell proteins. Electrophoresis, 18, 573-81.

65. Golaz O. Plasma and red blood cell protein map: Update 1993. (1993) Electrophoresis, 14, 1223-1231.

66. Goldring K, Partridge T, Watt D. (2002) Muscle stem cells. J Pathol, 197, 457-67.

67. Gorg A, Postel W, Gunther S. (1988) The current state of two-dimensional electrophoresis with immobilized pH gradients. Electrophoresis, 9, 531-546.

68. Goulding MD, Chalepakis G, Deutsch U, Erselius JR, Gruss P. (1991) Pax-3, a novel murine DNA binding protein expressed during early neurogenesis. EMBOJ, 10, 1135-1147.

69. Hartley RS, Bandman E, Yablonka-Reuveni Z. (1992) Skeletal muscle satellite cells appear during late chicken embryogenesis. Dev Biol, 153, 206216.

70. Hasegawa N, Mizutani K, Suzuki T, Deguchi T, Nozawa Y. (2006) A comparative study of protein profiling by proteomic analysis in camptothecin-resistant PC3 and camptothecin-sensitive LNCaP human prostate cancer cells. Urol Int, 77, 347-354.

71. Hasty P, Bradley A, Morris JH, Edmondson DG, Venuti JM, Olson EN, Klein WH. (1993) Muscle deficiency and neonatal death in mice with a targeted mutation in the myogenin gene. Nature, 364, 501-506.

72. Hawke TJ, Garry DJ. (2001) Myogenic satellite cells: physiology to molecular biology. JAppl Physiol, 91, 534-551.

73. Hollnagel A, Grund C, Franke WW, Arnold HH. (2002) The cell adhesion molecule M-cadherin is not essential for muscle development and regeneration. Mol Cell Biol, 22, 4760-4770.

74. Hubank M, Schatz DG. (1994) Identifying differences in mRNA expression by representational difference analysis of cDNA. Nucleic Acids Res, 22, 5640-5648.

75. Irintchev A, Zeschnigk M, Starzinski-Powitz A, Wernig A. (1994) Expression pattern of M-cadherin in normal, denervated, and regenerating mouse muscles. DevDyn, 199, 326—337.

76. Israeli D, Benchaouir R, Ziaei S, Rameau P, Gruszczynski C, Peltekian E, Danos O, Garcia L. (2004) FGF6 mediated expansion of a resident subset of cells with SP phenotype in the C2C12 myogenic line. J Cell Physiol, 201, 409^119.

77. Jackowski G, Liew CC. (1980) Fluorescamine staining of nongistone chromatine proteins as revealed by two-dimensional polyacrylamid gel electrophoresis. Anal. Biochim., 102, 321-325.

78. Jacquemin V, Furling D, Bigot A, Butler-Browne GS, Mouly V. (2004) IGF-1 induces human myotube hypertrophy by increasing cell recruitment. Exp Cell Res, 299, 148-158.

79. Jostes B, Walther C, Gruss P. (1990) The murine paired box gene, Pax7, is expressed specifically during the development of the nervous and muscular system. Mech Dev, 33, 27-37.

80. Joulia D, Bernardi H, Garandel V, Rabenoelina F, Vernus B, Cabello G. (2003) Mechanisms involved in the inhibition of myoblast proliferation and differentiation by myostatin. Exp Cell Res, 286, 263-275.

81. Kablar B, Asakura A, Krastel K, Ying C, May LL, Goldhamer DJ, and Rudnicki MA. (1998) MyoD and Myf-5 define the specification of musculature of distinct embryonic origin. Biochem Cell Biol, 76, 1079— 1091.

82. Kahn EB, Simpson SB Jr. (1974) Satellite cells in mature, uninjured skeletal muscle of the lizard tail. Dev Biol, 37, 219-223.

83. Kaufmann U, Martin B, Link D, Witt K, Zeitler R, Reinhard S, and Starzinski-Powitz A. (1999) M-cadherin and its sisters in development of striated muscle. Cell Tissue Res, 296, 191-198.

84. Kislinger T, Gramolini AO, Pan Y, Rahman K, MacLennan DH, Emili A. (2005) Proteome dynamics during C2C12 myoblast differentiation. //Mol Cell Proteomics, 4, 887-901.

85. Klerk H, Jespers A. (1990) GELANAL, a personal computer-program to compare protein pat-terns on two-dimensional polyacrylamide gels. Electrophoresis, 11, 420-424.

86. Klose J. (1975) Protein mapping by combined isoelectric focusing and electrophoresis of mouse tissue. A novel approach to testing for induced point mutations in mammals. Hum. Genet., 26, 231-243.

87. Klose J. (1989) Systematic analysis of the total proteins of a mammalian organism: principles, problems and implications for sequencing the human genomo,. Electrophoresis, 10, 140-152.

88. Koomen JM, Shih LN, Coombes KR, Li D, Xiao LC, Fidler IJ, Abbruzzese JL, Kobayashi R. (2005) Plasma protein profiling for diagnosis of pancreatic cancer reveals the presence of host response proteins. Clin Cancer Res, 11, 1110-1118.

89. Kovalyov LI, Shishkin SS, Efimochkin AS, Kovalyova MA, Ershova ES, Egorov ТА, Musalyamov AK. (1995) The major protein expression profile and two-dimensional protein database of human heart. Electrophoresis, 16, 1160-1169.

90. Kurek JB, Bower J J, Romanella M, Roentgen F, Murphy M, Austin L. (1997) The role of leukemia inhibitory factor in skeletal muscle regeneration. Muscle Nerve, 20, 815—822.

91. Kwak KB, Chung SS, Kim OM, Kang MS, Ha DB, Chung CH. (1993) Increase in the level of m-calpain correlates with the elevated cleavage of filamin during myogenic differentiation of embryonic muscle cells. Biochim Biophys Acta, 1175, 243-249.

92. Laemmli UK. (1970) Cleavage of structural proteins during the assembly of the head of bacteriophage T4. Nature, 227, 680-685.

93. Lefaucheur J, Sebille A. (1995) Muscle regeneration following injury can be modified in vivo by immune neutralization of basic fibroblast growth factor, transforming growth factor beta 1 or insulinlike growth factor I. J Neuroimmunol, 57, 85-91.

94. Lemkin PF, Lester EP. (1989) Database and search techniques for two-dimensional gel protein data: a comparison of paradigms for exploratory data analysis and prospects for biological modeling. Electrophoresis, 10, 122-140.

95. Liu Z, Bengtsson S, Krogh M, Marquez M, Nilsson S, James P, Aliaya A, Holmberg AR. (2007) Somatostatin effects on the proteome of the LNCaP cell-line. Int J Oncol, 30, 1173-1179.

96. Lopez MF. (1999) Nonequilibrium pH gel electrophoresis (NEPHGE).-Methods Mol Biol, 112,129-131.

97. Mansouri A, Goudreau G, Gruss P. (1999) Pax genes and their role in organogenesis. Cancer Res, 59, 1707s—1710s.

98. Mansouri A, Stoykova A, Torres M, Gruss P. (1996) Dysgenesis of cephalic neural crest derivatives in Pax7-/- mutant mice. Development, 122, 831—838.

99. Maroto M, Reshef R, Munsterberg AE, Koester S, Goulding M, Lassar AB. (1997) Ectopic Pax-3 activates MyoD and Myf-5 expression in embryonic mesoderm and neural tissue. Cell, 89, 139-148.

100. Martin DB, Gifford DR, Wright ME, Keller A, „Yi E, Goodlett DR, Aebersold R, Nelson PS. (2004) Quantitative proteomic analysis of proteins released by neoplastic prostate epithelium. Cancer Res, 64, 347-355.

101. Martin JF, Li L, Olson EN. (1992) Repression of myogenin function by TGF-bl is targeted at the basic helix-loop-helix motif and is independent of E2A products. J Biol Chem, 267, 10956-10960.

102. Mauro A. (1961) Satellite cells of skeletal muscle fibres. J Biophys Biochem Cytol, 9, 493^195.

103. McCroskery S, Thomas M, Maxwell L, Sharma M, Kambadur R. (2003) Myostatin negatively regulates satellite cell activation and self-renewal. J Cell Biol, 162, 1135-1147.

104. McPherron AC, Lawler AM, Lee SJ. (1997) Regulation of skeletal muscle mass in mice by a new TGF-beta superfamily member. Nature, 387, 83-90.

105. Meehan KL, Holland JW, Dawkins HJ. (2002) Proteomic analysis of normal and malignant prostate tissue to identify novel proteins lost in cancer. Prostate, 50, 54-63.

106. Meehan KL, Sadar MD. (2004) Quantitative profiling of LNCaP prostate cancer cells using isotope-coded affinity tags and mass spectrometry. Proteomics, 4, 1116-1134.

107. Melle C, Bogumil R, Ernst G, Schimmel B, Bleul A, von Eggeling F. (2006) Detection and identification of heat shock protein 10 as a biomarker in colorectal cancer by protein profiling. Proteomics, 6, 2600-2608.

108. Merril C, Harrington MG. (1984) Two-dimensional electrophoresis and ultrasensitive silver staining of cerebrospinal fluid proteins in neurological disease. Clin. Chem., 30, 1933-1937.

109. Miller JB, Schaefer L, Dominov JA. (1999) Seeking muscle stem cells. Curr Top Dev Biol, 43,191-219.

110. Miller KJ, Thaloor D, Matteson S, Pavlath GK. (2000) Hepatocyte growth factor affects satellite cell activation and differentiation in regenerating skeletal muscle. Am J Physiol Cell Physiol, 278, 174-181.

111. Monteoliva L, Albar JP. (2004) Differential proteomics: an overview of gel and non-gel based approaches. Briefings in functional genomics and proteomics, 3, 220—239.

112. Moore R Walsh FS. (1993) The cell adhesion molecule M-cadherin is specifically expressed in developing and regenerating, but not denervated skeletal muscle. Development, 117, 1409-1420.

113. Musaro A, McCullagh KJ, Naya FJ, Olson EN, Rosenthal N. (1999) IGF-1 induces skeletal myocyte hypertrophy through calcineurin in association with GATA-2 and NF-ATc 1. Nature, 400,581-5.

114. Nabeshima Y, Hanaoka K, Hayasaka M, Esumi E, Li S, Nonaka I. (1993) Myogenin gene disruption results in perinatal lethality because of severe muscle defect. Nature, 364, 532-535.

115. Nakamura T, Nishizawa T, Hagiya M, Seki T, Shimonishi M, Sugimura A, Tashiro K, Shimizu S. (1989) Molecular cloning and expression of human hepatocyte growth factor. Nature, 342, 440-443.

116. Nakamura T, Teramoto H, Ichihara A. (1986) Purification and characterization of a growth factor from rat platelets for mature parenchymal hepatocytes in primary cultures. Proc Natl Acad Sci USA, 83, 6489-6493.

117. Nam HW, Simpson R, Kim YS. (2005) N-terminal isotope tagging with propionic anhydride: proteomic analysis of myogenic differentiation of C2C12 cells. J Chromatogr В Analyt Technol Biomed Life Sci, 826, 91-107.

118. Nelson DL, Cox MM. (2004) Lehninger Principles of Biochemistry. 4th Edition. W.H.Freeman and Co.

119. O'Farrell PH, Goodman HM, O'Farrell PZ. (1977) Hight resolution two-dimensional electrophoresis of basic as well as acidic proteins. Cell, 12, 1133-1142.

120. O'Farrell PH. (1975) Hight resolution two-dimensional electrophoresis of proteins. J. Biol. Chem., 250, 4007-4021.

121. Ordahl CP, Williams BA, Denetclaw W. (2000) Determination and morphogenesis in myogenic progenitor cells: an experimental embryological approach. Curr Op Dev Biol, 48, 319-367.

122. Parekh DJ, Ankerst DP, Troyer D, Srivastava S, Thompson IM. (2007) Biomarkers for prostate cancer detection. J. Urol, 178, 2252-2259.

123. Patterson SD, Aebersold R. (1995) Mass spectrometric approaches for the identification of gel-separated proteins. Electrophoresis, 16, 1791-1814.

124. Popiela H. (1976) Muscle satellite cells in urodele amphibians: faciliatated identification of satellite cells using ruthenium red staining. J Exp Zool, 198, 57-64.

125. Potter DJ. (1990) A review of the CLIP system for the quantitative analysis of two-dimensional electrophoresis gels. Electrophoresis, 11, 415-419.

126. Ramachandran V, Arumugam T, Wang H, Logsdon CD. (2008) Anterior gradient 2 is expressed and secreted during the development of pancreatic cancer and promotes cancer cell survival. Cancer Res, 68, 7811-7818.

127. Rios R, Carneiro I, Arce VM, Devesa J. (2002) Myostatin is an inhibitor of myogenic differentiation. Am J Physiol Cell Physiol, 282, 993-999.

128. Rowland JG, Robson JL, Simon WJ, Leung HY, Slabas AR. (2007) Evaluation of an in vitro model of androgen ablation and identification of the androgen responsive proteome in LNCaP cells. Proteomics, 7, 47-63.

129. Sakaguchi M, Miyazaki M, Sonegawa H, Kashiwagi M, Ohba M, Kuroki T, Namba M, Huh NH. (2004) PKCalpha mediates TGFbeta-induced growth inhibition of human keratinocytes via phosphorylation of S100C/A11. J Cell Biol, 164, 979-984.

130. Sardana G, Jung K, Stephan C, Diamandis EP. (2008) Proteomic analysis of conditioned media from the PC3, LNCaP, and 22Rvl prostate cancer celllines: discovery and validation of candidate prostate cancer biomarkers. J ProteomeRes, 7, 3329-3338.

131. Scheele GA. (1975) Two-dimensional gel analysis of soluble proteins. Characterization of guinea pig exorcine pancreatic proteins. J Biol Chem, 250, 5375-5385.

132. Schultz E. (1996) Satellite cell proliferative compartments in growing skeletal muscles. Dev Biol, 175, 84-94.

133. Seale P, Sabourin LA, Girgis-Gabardo A, Mansouri A, Grass P, Rudnicki MA. (2000) Pax7 is required for the specification of myogenic satellite cells. Cell, 102, 777-786.

134. Semsarian C, Wu MJ, Ju YK, Marciniec T, Yeoh T, Allen DG, Harvey RP, Graham RM. (1999) Skeletal muscle hypertrophy is mediated by a Ca2+-dependent calcineurin signalling pathway. Nature, 400, 576-81.

135. Sheehan SM, Tatsumi R, Temm-Grove CJ, Allen RE. (2000) HGF is an autocrine growth factor for skeletal muscle satellite cells in vitro. Muscle Nerve, 23, 239-245.

136. Shinin V, Gayraud-Morel B, Gomes D, Tajbakhsh S. (2006) Asymmetric division and cosegregation of template DNA strands in adult muscle satellite cells. Nat Cell Biol, 8, 677-687.

137. Skvortsova I, Skvortsov S, Stasyk T, Raju U, Popper В A, Schiestl B, von Guggenberg E, Neher A, Bonn GK, Huber LA, Lukas P. (2008) Intracellular signaling pathways regulating radioresistance of human prostate carcinoma cells. Proteomics, 8, 4521-4533.

138. Smythe GM, Davies MJ, Paulin D, Grounds MD. (2001) Absence of desmin slightly prolongs myoblast proliferation and delays fusion in vivo in regenerating grafts of skeletal muscle. Cell Tissue Res, 304, 287-294.

139. Sonegawa H, Nukui T, Li DW, Takaishi M, Sakaguchi M, Huh NH. (2007) Involvement of deterioration in S100C/A11-mediated pathway in resistance of human squamous cancer cell lines to TGFbeta-induced growth suppression. J Mol Med, 85, 753-762.

140. Stamey ТА, Caldwell M, McNeal JE, Nolley R, Hemenez M, Downs J. (2004) The prostate specific antigen era in the United States is over for prostate cancer: what happened in the last 20 years? J. Urol, 172, 12971301.

141. Sun W, Ye Z, Mi Z, Shi T, Han C, Guo S. (2008) A comparative study on proteomics between LNCap and DU145 cells by quantitative detection and SELDI analysis. JHuazhong Univ Sci Technolog MedSci, 28, 174-178.

142. Suzuki J, Yamazaki Y, Li G, Kaziro Y, Koide H. (2000) Involvement of Ras and Ral in chemotactic migration of skeletal myoblasts. Mol Cell Biol, 20, 4658^4665.

143. Suzuki S, Yamanouchi K, Soeta C, Katakai Y, Harada R, Naito K, Tojo H. (2002) Skeletal muscle injury induces hepatocyte growth factor expression in spleen. Biochem Biophys Res Commun, 292, 709—714.

144. Tajbakhsh S, Rocancourt D, Cossu G, Buckingham M. (1997) Redefining the genetic hierarchies controlling skeletal myogenesis: Pax-3 and Myf-5 act upstream of MyoD. Cell, 89, 127-138.

145. Tatsumi R, Anderson JE, Nevoret CJ, Halevy O, Allen RE. (1998) HGF/SF is present in normal adult skeletal muscle and is capable of activating satellite cells. Dev Biol, 194, 114-128.

146. Tatsumi R, Hattori A, Ikeuchi Y, Anderson JE, Allen RE. (2002) Release of hepatocyte growth factor from mechanically stretched skeletal muscle satellite cells and role ofpH and nitric oxide. Mol Biol Cell, 13, 2909-2918.

147. Temm-Grove CJ, Wert D, Thompson VF, Allen RE, Goll DE. (1999) Microinjection of calpastatin inhibits fusion in myoblasts. Exp Cell Res, 247, 293-303.

148. Thomas M, Langley B, Berry C, Sharma M, Kirk S, Bass J, Kambadur R. (2000) Myostatin, a negative regulator of muscle growth, functions by inhibiting myoblast proliferation. J Biol Chem, 275, 40235-40243.

149. Thompson IM, Ankerst DP. (2007) Prostate-specific antigen in the early detection of prostate cancer. CMAJ, 176, 1853-1858.

150. Tiffin N, Williams RD, Shipley J, Pritchard-Jones K. (2003) PAX7 expression in embryonal rhabdomyosarcoma suggests an origin in muscle satellite cells. Br J Cancer, 89, 327-332.

151. Tomlinson IM, Holt LJ. Protein profiling comes of age. Genome Biol, 2, REVIEWS1004.1-1004.3.

152. Tschiedel S, Gentilini C, Lange T, Wolfel C, Wolfel T, Lennerz V, Stevanovic S, Rammensee HG, Huber C, Cross M, Niederwieser D. (2008) Identification of NM23-H2 as a tumour-associated antigen in chronic myeloid leukaemia. Leukemia, 22, 1542-1550.

153. Unlu M, Morgan ME, Minden JS. (1997) Difference gel electrophoresis: a single gel method for detecting changes in protein extracts. Electrophoresis, 18, 2071-2077.

154. Wagner ICR, Liu X, Chang X, Allen RE. (2005) Muscle regeneration in the prolonged absence of myostatin. Proc Natl Acad Sci USA, 102, 2519—2524.

155. Wagner KR, MePherron AC, Winik N, Lee SJ. (2002) Loss of myostatin attenuates severity of muscular dystrophy in mdx mice. Ann Neurol, 52, 832-836.

156. Wallace A, Saluz H. (1994) Detection of subpicogram quantities of protein in polyacrylamide gels. / In: Cell biology (Ed. J.Celis), N.Y., Acad.Press, 3, 288-298.

157. Wallenius V, Wallenius K, Ahren B, Rudling M, Carlsten H, Dickson SL, Ohlsson C, Jansson JO. (2002) Interleukin-6-deficient mice develop mature-onset obesity. Nat Med, 8, 75-79.

158. Wang Z, Hao Y, Lowe AW. (2008) The adenocarcinoma-associated antigen, AGR2, promotes tumor growth, cell migration, and cellular transformation. Cancer Res, 68, 492-497.

159. Wasinger VC, Cordwell. SJ, Cerpa-Poljak A, Yan JX, Gooley AA, Wilkins MR, Duncan MW, Hams R, Williams KL, Humphery-Smith I. (1995) Progress with gene-product mapping of the Mollicutes: Mycoplasma genitalium. Electrophoresis, 16, 1090-1094.

160. Weintraub H, Tapscott SJ, Davis RL, Thayer MJ, Adam MA, Lassar AB, Miller AD. (1989) Activation of muscle-specific genes in pigment, nerve, fat, liver, and fibroblast cell lines by forced expression of MyoD. Proc Natl AcadSci USA, 86, 5434-5438.

161. Wilkins MR, Williams KL, Appel RD, Hochstrasser DF. (1997) Proteomic research: new frontiers in functional genomics (principle and practice). Berlin, Springer Verlag 1997, 464 p.

162. Wulfkuhle JD, Liotta LA, Petricoin EF. (2003) Proteomic applications for the early detection of cancer. Nat Rev Cancer, 3, 267-275.

163. Yaffe D, Saxel O. (1977) Serial passaging and differentiation of myogenic cells isolated from dystrophic mouse muscle. Nature, 270, 725-727.

164. Yan JX, Harry RA, Wait R, Welson SY, Emery PW, Preedy VR, Dunn MJ. (2001) Separation and identification of rat skeletal muscle proteins usingtwo-dimensional gel electrophoresis and mass spectrometry. Proteomics, 1, 424-434.

165. Yang SY, Goldspink G. (2002) Different roles of the IGF-I Ec peptide (MGF) and mature IGF-I in myoblast proliferation and differentiation. FEBS Lett, 522, 156-160.

166. Yuen HF, Chan YP, Law S, Srivastava G, El-Tanani M, Мак TW, Chan KW. (2008) DJ-1 could predict worse prognosis in esophageal squamous cell carcinoma. Cancer EpidemiolBiomarkers Prev, 17, 3593-3602.

167. Zakharov S, Kwok S, Sokoloff H, Chang H, Radko S, Chrambach A. (1998) The band areas of proteins determined by fluorescent scanning in the commercial automated gel electrophoresis apparatus. Electrophoresis, 19, 1625-1630.

168. Zammit PS, Partridge ТА, Yablonka-Reuveni Z. (2006) The skeletal muscle satellite cell: the stem cell that came in from the cold. J Histochem Cytochem, 54, 1177-1191.

169. Zeschnigk M, Kozian D, Kuch C, Schmoll M, Starzinski-Powitz A. (1995)41.volvement of M-cadherin in terminal differentiation of skeletal muscle cells.JCellSci, 108, 2973-2981.

170. Zhang Y, Forootan SS, Liu D, Barraclough R, Foster CS, Rudland PS, Ke Y. (2007) Increased expression of anterior gradient-2 is significantly associated with poor survival of prostate cancer patients. Prostate Cancer Prostatic Dis, 10, 293-300.

171. Zweitzig DR, Smirnov DA, Connelly MC, Terstappen LW, O'FIara SM, Moran E. (2007) Physiological stress induces the metastasis marker AGR2 in breast cancer cells. Mol Cell Biochem, 306, 255-260.