Разработка технологии иммобилизованного биосорбента из пивоваренных дрожжей для интенсификации процесса брожения тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 05.18.07, кандидат технических наук Крупичёва, Александра Николаевна

• Крупичёва, Александра Николаевна
• кандидат технических наук
• 2006

Оглавление диссертации кандидат технических наук Крупичёва, Александра Николаевна

1. Введение

2. Обзор литературы

2.1. Иммобилизованные биосорбенты

2.2. Методы иммобилизации. 24 2.2.1. Методы иммобилизации различных биологических объектов. 25 2.2.1.1. Методы механической иммобилизации объектов. 25 2.2.1.2 Иммобилизация с использованием полупроницаемых оболочек 26 (мембран).

2.2.1.3. Методы физической иммобилизации.

2.2.1.4. Иммобилизация с использованием систем двухфазного типа.

2.2.1.5. Химические методы иммобилизации.

3. Экспериментальная часть

3.1. Материалы и методы.

3.1.1. Получение порошкообразного биосорбента «ОД-2».

3.1.2. Ускоренный метод определения спирта.

3.1.3. Метод определения ионов железа (III) с салициловой кислотой.

3.1.4. Метод определения ионов Са

3.1.5. Определение аминокислот и пептидов по числу карбоксильных групп 43 в водно-спиртовом растворе.

3\ 1.6. Метод определения влажности.

3.1.7. Методы получения иммобилизованного препарата «ОД-2»

3.1.8. Определение редуцирующих веществ с калием железосинеродистым

3.1.9. Метод определения сухих веществ в растворах.

3.1.10. Метод определения временной жесткости.

3.2. Результаты и обсуждение. 47 3.2.1. Разработка способов иммобилизации дрожжевого биосорбента «ОД- 47 2» и оценка их результатов.

3.2.1.1. Разработка способа получения иммобилизованного препарата на 47 основе клеточных стенок пивных дрожжей "ОД - 2".

3.2.1.2. Изучение сорбционной способности иммобилизованного 50 препарата "ОД - 2".

3.2.1.3. Изучение влияния "степени нагрузки" иммобилизованного 52 препарата "ОД-2" на его сорбционную способность по отношению к Fe3+.

3.2.1.4. Изучение влияния механического воздействия на структуру и 55 сорбционную способность пластинчатого иммобилизованного препарата "ОД-2".

3.2.1.5. Изучение влияния продолжительности гидратации на сорбционную 57 способность гранулированного иммобилизованного препарата "ОД-2".

3.2.1.6. Определение влияния формы и размера частиц ИП «ОД-2» на его 58 сорбционную способность по отношению к ионам железа (III).

3.2.1.7. Определение сорбционной способности иммобилизованного 60 препарата "ОД-2" по отношению к ионам железа (III) при работе в полупериодическом режиме.

3.2.1.8. Изучение влияния дозировки иммобилизованного препарата "ОД-2" 62 на характер связывания железа (III) при работе в полупериодическом режиме.

3.2.1.9. Изучение влияния концентрации обрабатываемого раствора ионов 65 железа (III) на сорбционную способность иммобилизованного препарата "ОД-2" в непрерывном режиме.

3.2.1.10. Изучение прочности связывания ионов железа (III) 68 иммобилизованным препаратом "ОД - 2" при работе в непрерывном режиме.

3.2.1.11. Сопоставление эффективности применения иммобилизованного 70 препарата "ОД - 2" и активированного угля.

3.2.1.12. Применение препаратов "ОД - 2" для обработки пивного сусла в непрерывном режиме.

3.2.2. Разработка способа иммобилизации дрожжевого биосорбента «ОД-2» 76 за счёт поперечной сшивки его частиц щавелевой кислотой. 3.2.2.1. Результаты иммобилизации хлебопекарных дрожжей с использованием различных сшивающих реагентов.

3.2.2.2 Изучение влияния соотношения компонентов ИП «ОД-2» на механическую прочность его частиц.

3.2.2.3. Сравнение сорбционной способности иммобилизованного препарата 82 и препарата «ОД-2».

3.2.2.4. Изучение влияния формы частиц иммобилизованного препарата 84 «ОД-2» на его сорбционную способность по отношению к ионам железа

III).

3.2.2.5. Сравнение сорбционной способности гранулированных 86 иммобилизованных препаратов с различным размером частиц.

3.2.2.6. Определение зависимости сорбционной способности ИП «ОД-2» от 87 объема обрабатываемой среды.

3.2.2.7. Изучение влияния концентрации обрабатываемого раствора на 89 сорбционную способность иммобилизованного препарата «ОД-2» по отношению к ионам железа (III).

3.2.2.8. Определение влияния продолжительности гидратации ИП на его 90 сорбционную способность по отношению к ионам железа (III).

3.2.2.9. Изучение возможности восстановления сорбционной способности 92 ИП «ОД-2» после гидратации различной продолжительности.

3.2.2.10. Определение зависимости сорбционной способности ИП «ОД-2» 94 от температуры.

3.2.2.11. Изучение влияния хранения на сорбционную способность 95 иммобилизованного биосорбента «ОД-2»

3.2.2.12. Изучение микробиологического состояния иммобилизованного биосорбента «ОД-2».

3.2.2.13. Изучение сорбционной способности ИП при работе в 99 полупериодическом режиме.

3.2.2.14. Определение количества ионов железа (III), связанных различными 100 количествами иммобилизованного препарата «ОД-2» при работе в непрерывном проточном режиме.

3.2.2.15. Изучение влияния скорости потока обрабатываемого раствора на 104 количество ионов Fe3+, связанных иммобилизованным препаратом «ОД-2».

3.2.2.16. Определение влияния концентрации обрабатываемого раствора на 109 сорбционную способность иммобилизованного препарата «ОД-2» при работе в непрерывном режиме.

3.3.3. Разработка способов применения иммобилизованного сорбирующего 110 препарата «ОД-2».

3.3.3.1. Определение результатов применения иммобилизованного 110 препарата «ОД-2» в периодическом режиме с целью снижения содержания ионов кальция в растворе.

3.3.3.2. Изучение влияния обработки иммобилизованным препаратом «ОД- 112 2» в непрерывном режиме на содержание ионов кальция в растворе.

3.3.3.3. Определение влияния обработки иммобилизованным препаратом 113 «ОД-2» на устранимую жесткость воды в непрерывном режиме.

3.3.3.4. Изучение влияния обработки технологической воды ИП «ОД-2» на 114 результаты стадии затирания пивоваренного производства.

3.3.3.5. Определение влияния обработки пивного сусла иммобилизованным 117 препаратом «ОД-2» в непрерывном режиме на результаты стадий главного брожения и дображивания.

4. Выводы.

5. Технологическая часть

6. Экономическая часть

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Разработка технологии иммобилизованного биосорбента из пивоваренных дрожжей для интенсификации процесса брожения»

Актуальность работы. В настоящее время успех производства пищевых продуктов, в том числе, и напитков брожения зависит от учета ряда факторов: качества готовой продукции, экологичности и технологичности производственных процессов. Решению этой задачи может способствовать применение, в дополнение к классической технологии, новых, высокоэффективных вспомогательных материалов. Одними из них являются сорбирующие препараты биологического происхождения, целесообразность использования которых для решения широкого спектра задач убедительно доказана.

В большинстве случаев такие препараты являются порошкообразными или мелкодисперсными, что может ограничить область их применения. Устранить этот недостаток можно за счет получения гранулированных, механически или химически, форм биосорбентов. При сохранении сорбционной способности на удовлетворительном уровне такие препараты могут использоваться многократно или в проточном режиме, что особенно актуально в связи с переходом целых производств или отдельных стадий на непрерывные рабочие циклы.

Цели и задачи исследования. Целью наших исследований являлась разработка способа получения иммобилизованного сорбирующего препарата на основе порошкообразного биосорбента дрожжевой природы «ОД-2» и установление возможных областей его применения в бродильных и других пищевых производствах.

Для реализации поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

- изучить современные методы, применяемые для иммобилизации различных биологических объектов, определить их пригодность для достижения цели исследований;

- разработать способ иммобилизации дрожжевого биосорбента, обеспечивающий получение препарата с высокими механическими и сорбционными характеристиками;

- выявить параметры, влияющие на эффективность применения иммобилизованного биосорбента в бродильных производствах и установить их оптимальные значения;

- изучить характеристики полученного разработанным способом иммобилизованного препарата;

- разработать способы применения иммобилизованного биосорбента «ОД-2» для интенсификации технологических процессов на ключевых стадиях пивоваренного производства;

- определить качественные характеристики готового пива, полученного с применением иммобилизованного препарата и сопоставить их с аналогичными у пива, произведенного обычным способом.

Научная новизна работы.

Впервые проведена иммобилизация сорбирующего препарата дрожжевой природы путем поперечной сшивки его частиц.

Изучено влияние предложенного способа иммобилизации на основные характеристики полученного сорбирующего препарата дрожжевой природы.

Установлена зависимость сорбционной способности иммобилизованного препарата «ОД-2» от ряда условий: концентрации удаляемого компонента в обрабатываемом растворе, дозировки иммобилизованного биосорбента, продолжительности и температуры обработки, скорости подачи обрабатываемого раствора.

Впервые установлено влияние обработки иммобилизованным биосорбентом «ОД-2» технологической воды, используемой на стадии затирания, на улучшение состава пивного сусла.

Впервые выявлено интенсифицирующее влияние обработки пивного сусла иммобилизованным биосорбентом «ОД-2» на накопление этанола.

Практическая значимость.

Разработан эффективный способ иммобилизации микробных клеток или их оболочек на основе поперечной сшивки, не требующий использования носителя.

Установлена эффективность применения иммобилизованного биосорбента для решения различных технологических задач в различных режимах: периодическом, полупериодическом, непрерывном.

Доказана возможность улучшения результатов стадии затирания за счет обработки технологической воды иммобилизованным биосорбентом «ОД-2» в непрерывном проточном режиме.

Применение иммобилизованного препарата «ОД-2» позволяет интенсифицировать сбраживание пивного сусла при сохранении или улучшении аналитических и органолептических характеристик готового пива.

Рассчитана экономическая эффективность от применения иммобилизованного биосорбента для обработки пивного сусла, которая составит 3137,8 тыс. руб. на 1 млн. дал. пива (условно-годовая экономия 10323,37 тыс. руб.).

Апробация работы. Основные результаты диссертационной работы представлены на Научно-технической конференции «Молодые ученые - пищевым и перерабатывающим отраслям АПК (технологические аспекты производства)», 13 -14 декабря 2000 г, Москва, МГУПП; Юбилейной международной научно-практической конференции «Пищевые продукты XXI века», Москва, МГУПП, 21 -23 ноября 2001 г; Всероссийской научно-технической конференции-выставке «Качество и безопасность продуктов питания», МГУПП, Москва, 18-19 декабря 2002 г.

Публикации. По материалам диссертационной работы опубликовано 9 печатных работ.

Структура и объем диссертации. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части, выводов, списка использованной литературы, включающего 138 источников, и 4 приложения. Работа изложена на 149 страницах машинописного текста, включая 45 таблиц и 13 рисунков.

Заключение диссертации по теме «Биотехнология пищевых продуктов (по отраслям)», Крупичёва, Александра Николаевна

Заключение

Таким образом, благодаря новой технологии предприятие увеличивает выпуск продукции на 439,8 тыс. дал, может получить условно-годовой экономии 10323,37 тыс. руб. С уменьшением себестоимости единицы продукции на 3,22% предприятие имеет возможность снизить цену и расширить рынок сбыта пива.

Список литературы диссертационного исследования кандидат технических наук Крупичёва, Александра Николаевна, 2006 год

1. Абишева А.К., Мансурова P.M., Жубанова А.А., Мансуров З.А. Изучение сорбционной активности адсорбентов на основе зауглероженной скорлупы грецких орехов. // Вестник КазГУ, серия «Экология». 1999. - №1. - С. 18-20.

2. Арипов Э.Л. Природные минеральные сорбенты, их активирование и модифицирование. Ташкент: Изд-во ФАН СССР, 1970. - 250 с.

3. Березин И. В., Клячко H.JL, Левашов Ф.В., Мартинек К., Можаев В.В., Хмельницкий Ю.Л. Иммобилизованные ферменты. М.: Высшая школв, 1987, с.47 -96.

4. Бидей С.П., Броделиус П., Кабрал И.М.А., Кафлэн М.П., Нето Г. де О. И др. Иммобилизованные клетки и ферменты, Методы: Пер. с англ. / Под ред. Дж. Вудворда. М.: Мир, 1988.-215 с.

5. Биотехнология: Учеб.пособие для вузов. В 8 кн./Под ред. Н.С. Егорова, В.Д.Самуилова. Кн.8: Инженерная энзимология /И.В.Березин и др.-М.:Высш.шк.,1987.-143с.

6. Бирюков В.В., B.C. Барбот. Иммобилизованные клетки в биотехнологии, Пущино, 1987.163-173.

7. Быков В.А., Монаков М.Н., В.И. Панфилов и др.- Биотехнология. Производство белковых веществ; М., 1987. 142 с

8. Валуйко Г. Г. Виноградные вина. М.:Пищевая промышленность, 1978. - 254 с.

9. Великая Е. И., Суходол В. Ф. Лабораторный практикум по курсу общей технологии бродильных производств (общие методы контроля). М.: Легкая и пищевая промс-ть, 1983.-312 с.

10. Виестур У.Э., Шмите И.А., Жилевич А.В. Биотехнология. Биологические агенты, технология, аппаратура. Рига, 1987.263 с.

11. Волошенко М.И., Дислер Е.Н., Кощевнко К. А. Биотехнология. 1, 1985, №5, 43-47.

12. Войнар А.О. Микроэлементы в живой природе. М.: «Высшая школа», 1962. -94 с. с ил.

13. Ганиткевич Я. В. Биотехнология, Поверхностно - активные вещества микробного происхождения, 4, 1988, №5, 575-582.

14. Гачева И.Н., Гаврилова Н.Н., Иванова J1.A. Технология микробных белковых препаратов, аминокислот и жиров. М., 1980.448.

15. Гвоздак П.И. Иммобилизованные клетки в биотехнологии, Пущино, 1987,56-61.

16. Горленко В.М. Экология водных микроорганизмов. М.: Наука, 1977. - 137 с.

17. Давидович А., Ксиецкий А. Способ получения носителей для иммобилизации микроорганизмов. Пат. 153105 ПНР, МКИ (5) А61К 47/00; Uniwersytet Marii Curie-Sklodowskiej. -N 267945; Заявл. 28.09.87; Опубл. 30.08.91.

18. Дубровский. B.C., Виестур Э.У. Метановое сбраживание с/х отходов. Рига, 1988.303 с.

19. Дунец Р.В. Разработка технологии получения угольно-минеральных сорбентов из отходов АПК и их применение для обработки напитков. Диссертация на соискание ученой степени кандидата технических наук. Краснодар, 2002. - 152 с.

20. Егоров. Н.С., Олескин А.В., Самуилов В.Д. Биотехнология. Проблемы и перспективы. М., 1 , 1987.459с.

21. Егорова Н.С., Самуилова В.Д. Биотехнология. Иммобилизованные ферменты-М.: Высш. шк., 1987. 159 с.

22. Ермолаева Г.Л., Колчева Р.А. Технология и оборудование производства пива и безалкогольных напитков: Учеб. для нач. проф. образования. М.: ИРПО; Изд. Центр "Академия", 2000, - 416 с.

23. Илялетдинов А.Н., Алиева Р.М. Иммобилизованные клетки в биотехнологии, Пущено, 1987,62-72.

24. Иммобилизованные клетки в биотехнологии. Сб.науч.тр. /Под ред.К. А.Кощеенко.-Пу щино. 1987.-174с.

25. Карпенко Д.В. Разработка способа получения иммобилизованной циклодекстрингликозилтрансферазы из Bacillus macerans.- Диссертация на соискание ученой степени кандидата технических наук. Москва, 1990

26. Кислухина О., Кюдулас И. Биотехнологические основы переработки растительного сырья. Каунас, «Технология», 1997. - 183 с.

27. Кист А.А. Биологическая роль химических элементов и периодический закон. Ташкент: «Фан», 1973. - 65 с. с граф.

28. Коваленко Г.А., Комова О.В., Симаков А.В., Рудина Н.А., Хомов В.В. Углеродсодержащие макроструктурированные керамические носители для адсорбционной иммобилизации ферментов и микроорганизмов. I Адсорбция глюкоамилазы. Биотехнология, 2002,3, С. 55-56.

29. Кретович В. J1. Биохимия растений. М.:Высшая школа, 1986. - 503 с.

30. Кружкова Р.В. Методика указанания к выполнению организационно -экономической части дипломных научно исследовательских работ (для студентов специальности 24.05.01). - М.: 2002.

31. Лебедева Ж. Д., Волкова И. М., Рубан Е. JI. Влияние йонов металлов на липолитическую активность Mycobacteriub и Actinomyces streptomycini. II Микробиология. 1976, т. 45, вып. 1.-С. 104 -116.

32. Малашенко Ю.Р., Гри нберг Т. А., Пирог и др. Биотехнология, Образование экзополисахаридов иммобилизованным клеткам Microcus Sp.,растущими на этаноле, 3, 1987, №3,386-390.

33. Мальцев П.М., Великая Е.И., Колотуша П.В. Химико-технологический кнтроль производства солода и пива. М.: Пищевая промышленность, 1976. - 448 с.

34. Медведева Н.Г, Гриднева Ю.А., Лысенко А.А., Сухаревич В.И. Иммобилизация уксуснокислых бактерий на углеродных волокнах и использование их для трансформации тиодигликоля, Биотехнология, 2001, 5, С. 5157.

35. Нахапетян ЛД Меняилова И.И. Биотехнология, Получение глюкозо - фрукгозных сиропов из крахмалсодфжащего сырья, 4.1988,№ 5,564-574.

36. Никовская Г.Н., Глоба Л.И. Иммобилизация бактерий в зависимости от гидратации поверхностей клеток и сорбентов. // Доклады АН СССР. 1989. - № 10. -С. 79-82.

37. Никовская Г.Н., Гордиенко А.С., Глоба Л.И. Гидрофильно-гидрофобные свойства микроорганизмов при различных условиях культивирования. // Микробиология. 1989. - т. 58, № 3. - С. 448 - 451.

38. Патент РФ N 2177503, С 12 N 11/10, 12.01.1995.

39. Патент РФ № 2233327, С 12 N 11/04,20.08.2002

40. Полычалина Г.В., Чередниченко B.C., Рухлядева А.П. "Инструкции по техническому контролю спиртового производства ", М, Агропромиздаг, 1986.

41. Сиденко. В.П., Мордвинова Д.И., Яроцкая Н.Е. и др. Микробиолог. Журн., 48, 1987, №2,209-215.

42. Синицин А.П., Райкина Е.И., Лозинский В.И. Иммобилизованные клетки микроорганизмов. М.: Изд - во МГУ, 1994. - 288 с.

43. Тривен М. Иммобилизованные ферменты.-М.:Мир, 1983,213с.

44. Химическая энзимология/Под ред.И.В.Березина, К.Мартинека.-М:Изд-во Моск. ун-та, 1983.-278с.

45. Шеламова С.А., Ковалева Т.А., Селеменев В.Ф., Трофимова О.Д., Бондарева Н.В. Иммобилизация липазы Rhizopus japonicus 1403 на анионообменной смоле АВ-17-2П путем ковалентного связывания. Биотехнология, 2001, 5, С. 32-39.

46. Ютта Людерс. Brauwelt, Иммобилизованные дрожжи в пивоварении, № 6,1996,51 -54.

47. Allcock Harry R., Pucher Shawn R., Visscher Karyn B. Activity of urea amidohydrolase immobilized within poly(di(methoxyethoxyethoxy)phosphazene) hydrogels. Biomaterials. 1994. - 15, N 7. - C. 502-506. - Англ. - ISSN 0142-9612.

48. Arnold; Talsky, Gerhard. Effect of pressure on immobilized enzyme, (Inst. Tech. Chem. Univ. Muenchen, 8046 Garching, Fed. Rep. Ger.). GBF Monogr. Ser. 1988 (Pub. 1989), 11 (Enzyme Lebensmitteltechnol.), 221-5 (Ger).

49. Bales, Vladimir; Meraros. Effect of hydrodynamic condilions on sucrase hydrolysis in a fixed bed of immobilized yeasts (Chemickotechnihol Fak, SVST. 81237 Bratislava, Czech.). Kvasny Prum. 1989,35 (5), 138 141 (Czech).

50. Barbotin Jean-Noel. Comportement physiologique et stabilite des cellules immobillisees. Biofutur. 1994, N 132. - С/ 22, 24-27. - Фр. -ISSN 0294-35-06.

51. Bauge, Salam Rajendra P. Immobilization of a amylase and glucoamylase on a modified cellulose matrix (Dep. Chem. Eng. Idian. Inst. Technol., Madras, 600 036 India). Indian Chem. Eng. 1989, 31 (2), 49 - 54 (Eng).

52. Baumgardt, Wolfgang, Mensshel, Claudia. Carriers for immobilization of m/o, substrates, and biologically active polymers, (VEB Projektierung Wasserwirtschaft Holte) Ger. (EAST) DD 264, 887, (CI. B29C67/16), 15 Feb. 1989, Appl. 309,236,20 Na 1987; 3 pp.

53. Borman Stu. Enzymes immobilized in polymeric microcapsule arrays. Chem. and Eng. News. 1994. - 72, N 22. - C. 17. - Англ. - ISSN 0009-2347

54. Brink L.E., Tramper J. J.Chem. Techol. Biotechnol., 37, 1987, 21 -44.

55. Carmichael. R.P, Jones A., Piekard A. Appl. Env. Microbiol., 51, 1986,1 2, 276 -280.

56. Cheap encapsulation. Eur. Biotechnol. Newslett. 1994, N 177. - C. 3-4. Англ. -ISSN 0765-2046

57. Chen Jyh-Ping, Chang Ko-Chang. Immobilization of chitinase on a reversibly soluble-insoluble polymer for chitin hydrolysis. Chem. Technol. and Biotechnol. 1994. - 60, N 2. - C. 133-140. - Англ. - ISSN 0268-2575.

58. Crumbliss A. L., Stonehuerner J., Henkens R.W., O'Daly J.P., Zhao J. The use of inorganic materials to control or maintain immobilized enzyme activity. New J. Chem. -1994. 18, N 3. - С/ 327-339. - Англ. -ISSN 1144-0546.

59. Das, A., Kundu P. J.Sci.and Ind.Res., 46, 1987, 307-311

60. De la Noije, D. Pronlx. Appl. Microbiol. Biotechnol, 29, 1988, 292 - 297.

61. Gonzalez Gustavo, Alea Jacqueline/ Pepsin immobilized by covalent binding to a chitosan derivative. Chem. Technol. and Biotechnol. 1995. - 63< N 3. - С/ 247-248. -Англ.-ISSN 0268-2575.

62. Gorff, Hans; Koenig, Steffen. Immobilization of yeast of cellulose gels, (Ingenieurschule fuer Lebensmittelindustrie Dippoldiswalde) 26 Oct., 1988, Appl. 303, 259, 28 May 1987,3 pp.

63. Gorff, Hans. Immobilization of yeast of cellulose gels, (Ingenieurschule fuer Lebensmittelindustrie Dippoldiswalde) Ger (East) DD 261,374 (CI. С12 G1 / 06), 26 Oct., 1988, Appl. 303,262,28 May 1987; 2 pp.

64. Gorff, Hans. Manufacture of beer, using yeast immobilized on derevatized cellulose, (Ingenieurschule fuer Lebensmittelindustrie Dippoldiswalde) Ger (East) DD 261,374 (CI. C12 G1 / 06), 26 Oct., 1988, Appl. 303, 260, 28 May 1987; 3 pp.

65. Gorff, Hans. Manufacture of beer, using yeast immobilized on derevatized cellulose, (Ingenieurschule fuer Lebensmittelindustrie Dippoldiswalde) Ger (East) DD 261,373 (CI. C12 G1 / 00), 26 Oct., 1988, Appl. 303, 261, 28 May 1987; 3pp.

66. Groom. C.A., Dauduli A. J., White B.N. Appl. Microbiol. Biotechnol., 8, 1988, 8 -11.

67. Heindrich, Guenter, Lange, Luts. Manufacture of wine and champagne with microorganism immobilized in plant material, (VEB Kombinat Spirtuosen, Wein und Sekt). Ger, (EAST) DD 261, 206,02 Jul 1987; 4 pp.

68. Hertzberg S., Moen E., Vogelsang C., Ostgaard K. Mixed photo-cross-linked polyvinyl alcohol and calcium-alginate gels for cell entrapment.

69. Higham D.P., Sadler P.J., Scawen M.D. Cadmium resistance in Pseudomonas putida: growth and uptake of cadmium. // J. Gen. Microbiol. 1985. - Vol. 131. - P. 2539-2544.

70. Horbach, Ute; Hartmeiner, Winfried. Immobilization of invertase on the basis of matrix covered yeast cells, (Abt. Tech. Biochem., Univ. Hoheuheim, D 7000 Stuttgart, 70 Fed. Rep. Ger.). Gordian 1989, 89 (7 - 8), 134 - 6 (Ger).

71. Kamiya, Yoshihiro; Kawase, Mitsno, Takeshi. Immobilization of m / о on ceramic carriers, (NGK Insulators, Ltd.) ) Jpn. Kokai Tokkyo Koho Jp 63, 202, 384 88, 202, 384. (CI. С 12 1 11 /14), 22 Aug 1988, Appl. 87 / 34, 257, 17 Feb 1987; 3 pp.

72. Katagai, Nobujoshi; Senda, Susuki, Rie. Method of microbial immobilization. (Hitashi Chemical Co., Ltd.) Jpn. Kokai Tokkyo Koho Jp 63, 152, 980 88, 152, 980. (CI. С 12 1 11 / 08), 25Jun 1988, Appl. 86 / 298, 307,15 Dec 1986; 6

73. Kaul. R. , P.Adlercreutz, B.Mattiasson Biotechnol. Bioeng., Coimmobilization of Substrate and Biocatalyst: A Method for Bioconversion of Poorly Soluble Substrances in Water Milien, 28,1986, 1432 - 1437.

74. Kihkawa, Masayoshi; Sugara. Immobilization of alkaline phoshate on scleroprotein membranes prepared in the presence of sorbitol, (Nate. Chem. Lab. Ind., Tsukuba, Japan), Kagaku Gijutsu Kenkyusho Hohoku 1989, 84 (7), 459 63 (Japan).

75. Kimura, Takashi; Yoshida, Masahiro. Immobilization of exo maltotetraohydrolase and pullulanase, (Eng. Dev. Div., Chiyoda Corp. Yokohama, Japan 221). Agric. Biol. Chem. 1989, 53 (7), 1843-8 (Eng).

76. Koga, Naoki; Maehashi, Notuyuki. Ceramic filter membranes for enzyme immobilization, (Toto Ltd.) Jpn. Kokai Tokkyo Koho Jp 63, 242, 340 88, 242, 340. (CI. В 01J20 / 02), 07 Oct 1988, Appl. 87 / 79, 343, 30 Mar 1987; 4 pp.

77. Konishi, Hidenori; Tanaka, Funada. Manufacture of immobilized biocatalysis (ensymes), (Nippon Oies and Fats Co., Ltd.) Jpn. Kokai Tokkyo Koho Jp 63, 222, 690 88,222, 690. (CI. С 12 1 11 / 04), 16 Sep 1988, Appl. 87 / 56, 880, 13 Mar 1987; 10 pp.

78. Konishi, Hidenori; Tanaka, Funada. Manufacture of immobilized biocatalysis (ensymes), (Nippon Oies and Fats Co., Ltd.) Jpn. Kokai Tokkyo Koho Jp 63, 222, 688 88,222,688. (CI. С 12 1 11/04), 16 Sep 1988, Appl. 87/56, 878, 13 Mar 1987; 10 pp.

79. Konishi, Hidenori; Tanaka, Funada. Manufacture of immobilized biocatalysis (ensymes), (Nippon Oies and Fats Co., Ltd.) Jpn. Kokai Tokkyo Koho Jp 63, 222, 691 88,222, 691 . (CI. С 12 1 11 / 04), 16 Sep 1988, Appl. 87 / 56, 881, 13 Mar 1987; 9 pp.

80. Kovalenko G.A., Sokolovskii V.D. Epoxidation of propene by microbial cells immobilized on inorganic supports. Biotechnol. and Bioeng. 1992. - 39, N 5. - C. 522-528. - Англ. - ISSN 0006-3592.

81. Kumakura M., Yoshida M., Asano M. Preparation of immobilized yeast cells with porous substrates. Process Biochem. 1992. - 27, N4. - C. 225-229. - Англ. - ISSN 0032-9592.

82. Lovely D.R., Phillips E.J.P., Gorby Y.A., Landa E.R. Microbial reduction of uranium. // Nature. 1991. - Vol. 350. - P. 413 - 416.

83. Lovely D.R., Widman P.K. Woodward J.C., Phillips E.J.P. Reduction of uranium by cytochrome C3 of Desulfovibrio vulgarism. II J. Appl. Environ. Microbiol. 1993. - Vol. 59.-P. 3572-3576.

84. Macaskie L.E., Dean A.C.R. Cadmium accumulation by Citrobacter sp. // J. Gen. Microbiol. 1984. - Vol. 130. - P. 53 - 62.

85. Miyawaki.O, L. Wingard, J. Brackin et al. Biotechnol. Bioeng., 28, 1986, 343 -348.

86. Moellgaard, Henric. Biologicals immobilization by crosslinking with polyazetidine, (Novo Industri A / S) Eur/ Pat. Appl. EP 297, 912 (CI. С 12 1 11 / 02), 04 Jan 1989, DK Appl. 87 / 3, 369, 01 Jul 1987; 10 pp.

87. Mullen M.D., Wolf D.C., Ferris F.G., Beveridge T.J. Fleming C.A., Bailey G.W. Bacterial sorption of heavy metals. // Appl. Environ. Microbiol. 1989. - Vol. 55, № 12. -P. 3143-3149.

88. Nakajima A., Sakaguchi T. Selective accimulation of heavy metals by microorganisms. // Appl. Microbiol. Biotechnol 1986. - Vol. 24. - P. 59 - 64.

89. Nakanishi, Koishi. Beer production with immobilized yeast celts, (Lap Bren, Sci., Kirin Bren. Co., Ltd., Takasati, Japan). Bioprocess Technol. 1990 5. (YEAST),85 - 102 / (Eng).

90. Niu H., Xu X.S. Wang J.H. Removal of lead from aqueous solution by penicillin biomass. // Biotechnol. and Bioeng. 1993. - Vol. 42. - P. 785 - 787.

91. Nmuray,Y.,M.Iwahara,M.Hongo. Biotechnol.Bioeng., 30, 1987, 788-793.

92. Norberg A., Persson H. Accumulation of heavy metals ions by Zoogloea ramigera. // Biotechnol. and Bioeng. 1984. - Vol. 26. - P. 239 - 246.

93. Oliveera, E.A.; Silva, M.P.C.; Figueiredo, Z.M.B. Immobilization of proteins on plates of Dacron, (Cent. Cienc. Biol., Univ. Fed. Pernambuco, 50000 Recife, Brazil). Appl. Biochem. Biotechnol. 1989, 22 (1), 109 14 (Eng).

94. Okita.W.B., D.J. Kirwan Biochemi. Eng., 5, 1987, 256 - 259.

95. Oriel.P. Biotechnol. Lett. Amylase Production by Ecnericuia Coli Immobilized in silicone FOAM, 10, 1988,1 2, 113 - 116.

96. Pan Jinlun, Tong Mignrong, Han Lijun, Yu Yaoting. Study cell Arthrobacter sumplex immobilized in polyvinyl alcohol gel. Lizi jiaowan yu xifu Ion Exch. and Absorp. - 1994. - 10, N 4. - C. 334-337. - Кит.; рез. Англ. - ISSN 1001-5493.

97. Phillips E.J.P., Landa E.R., Lovely D.R. Remediation of uranium contaminated soils with bicarbonate extraction and microbial uranium (VI) reduction. // J. Indust. Vicrobiol. -Vol. 14. -p. 203-207.

98. Ryder, D.S, Masschelein, C.A.:Proc. Eur. Brew. Conv, Lisbon, Elsevier, New York, 1990, s. 345

99. Saha U., Sen. A.K., Bakshi K. Simple speetrophoto metric method for determination of cooper (II) in pharmocentical raw materials and in lotion using salicylic acid as colour developer, Indian Drugs, May, 1987, 24 (8), 413-415.

100. Sanroman A., Pintado J., Lema J.M. A comparison of two techniques (Adsorbtion and Entrapment) for the immobilization of Aspergillus niger in polyurethane foam. Biotechnol. Techn. 1994. - 8, N 6. - C. 389-394. - Англ. - ISSN 0951-208X.

101. Sarkar Jawed M., Bollag Jean M., Leonowicz Andrzej. Sposob otrzymywania immobilizowanych enzymow. ПАТ. 152548 ПНР, МКИ {5} C12N 11/14; Uniwersytet Marii Curie-Sklodowskiej. -N 861230; Заявл. 15.09.88; Опубл. 28.06.91.

102. Sheffield Deborah J., Harry Yim R., Smith Arnold J., Rogers Lyndon J. Immobilisation of bromoperoxidase from Corallina officinalis. Biotechnol. Techn. -1994. 8, N 8. - C. 579-582. - Англ. - ISSN 0951-208X.

103. Simmons P., Tobin J.M., Singleton I. Consideration of the use of commercially available yeast biomass for the treatment of metal containing effluents. // J. Indust. Microbiol. 1995. - Vol. 14. - p. 240 - 246.

104. Stark, May Britt, Holenberg. Covalent immobilization of lipase in organic solvents, (Dep. Histol. Univ. Goeteborg, 400 33 Goeteborg, Swed.). Biotechnol. Bioeng. 1989, 34 (7), 942 50 (Eng).

105. Sudi, Dala, Szajani. Preparation, characterization, and application of a novel immobilized carboxypeptidase, (Reanal Fact. Lab. Chem., Budapest, Hung.). Appl. Biochem. Biotechnol. 1989,22 (1), 31 -43 (Eng).

106. Tamada.M., N. Kasai, M. Kumakura et al. Biotechnol., 1, 1984, 97 - 104.

107. Tijero J., Guardiola E. et al. Effect of Cu2+, Ni2+ and Zn2+ on an anaerobic digestion system. // J. Environ. Sci. and Health. 1991. - Vol. 26, N6. - P. 799 - 811.

108. Tonemura K., Kida K., Twasaki K., Sonoda Y. Operation conditions for anaerobic treatment of wastewater from a beer brewery. // Journal of Fermentation Bioengeneering.- 1992. Vol 73, №4. - P. 332 - 335.

109. Trace elements. Ed. By Lamb C.A., Bently O.G. and Beattie. Acad. Press, New York-London, 1958.

110. Tsezos M., Volesky B. Biosorpion of uranium and thorium. // Biotech. Bioeng. -1981,-Vol. 24.-P. 385 -401.

111. Vlach, D., J.E.Prenosil J.Molec.Catalysis, 26, 1984, 173-185.

112. Wang. D.I.C., C.L.Cooney, A.L.Deman et al. Fermentation and Enzyme Technology. N.Y., 1979. 341 350.

113. Wingar. L.B., R.P.Roach., O. Miyawaki et al. Enz . Microb. Technol/, 7, 1985, 503-509.

114. Uragamy, Todashi, Aketa. Hydrolysis of through urease immobilizing polyion complex membrane, (Fac. Eng. Kansai Univ. Suita, Japan 564). Maku 1989, 14 (3), 211 -16 (Eng).

115. US Pat. № 6280983 (1999) Enzyme immobilization in a gel containing 30 to 50 persent gelatin.

116. USA-microcapsule arrays for enzyme immobilization. Biosens. and Bioelectron. -1994. 9, N 8. - X. - Англ. - ISSN 0956-5663.

117. Van Dyk M.S., Thomas E. Hydrolysis of finalyl acetate and a-terpinyl acetate by yeasts. // Biotechnology Letters. 1998. - Vol. 20, №4. - P. 417-421.

118. Varalakshmi P., Lathika К. M., Raghavan K. G., Singh В. B. Altered physiochemical characteristics of polyethyelen glycol linked beet stem oxalate oxidase. Biotechnol. and Bioeng. 1995. - 46, N 3. - C. 254-257. - Англ. - ISSN 0006-35-2.

119. Venkaiah Betapudi, Kumar Anil. A process for the recovery and immobilization of starch phospharylase from starch-based industrial wastewater. Biotechnol. and Appl. Biochem. 1995. - 21, N 1. - C. 77-85. - Англ. - ISSN 0885-4513.

120. Verma G., Nigam P., Singh D., Chaudhary K. Bioconversion of starch to ethanol in a single step process by coculture of amylolytic yeasts and Saccharomyces cerevisiae. II Bioresource Technology. 2000. - Vol. 72, №3. - P. 261 - 266.

121. Walt David R., Agayn Vanetka I. The chemistry of enzyme and protein immobilization with glutaraidehyde. TrAC: Trends Anal. Chem. 1994. - 13, Suppl. N 2. - C. 425-430. - Англ. - ISSN 0165-9936.

122. Wu Kuo-Ying Amanda, Wisecarver Keith D. Cell immobilization using PVA crosslinked with boric acid. Biotechnol. and Bioeng. 1992. - 39, N 4. - C. 447-449. -Англ. - ISSN 0006-3592.

123. Wurdig G., Muller T. Vergliechnde Untensuchngen uber die Anwendung der blausehonung und von Fesslers compound zur Reduzierung des Schwermetallgehaltes von Wein. // Wein-Wiss. 1988. - Vol. 43, N1. - S. 61 - 65.

124. Yamaguchi N., Wada О., Ono Т., Yazaki K., Toyakawa K. Detection of heavy metal toxicity by Tetrahymena pyriformis culture method. // Ind. Health. 1973. - Vol. 11.-P. 27-31.

125. Yuhui Yang, Howard A. Chase. Immobilization of a*amilase on polyvinyl alcohol)-coated perfluoropolymer supports for use in enzyme reactors. Biotechnol. Appl. Biochem., 1998, 28, C. 145 154.

126. Zhon, Hui, Che, Wei. The study of immobilizing trypsin to triethanolamine -polystyrene resin by covalenting method, (Dep. Chem. Julin Univ., Changchnu, Peop. Rep. China). Shengwu Huaxe zazhi 1989, 5 (3), 209- 13 (ch).

127. Zhu, Petty, Ancelin, Yarwood. On the formation of Langmuir Blodgett films contating enzymes, (Sch. Eng. Appl. Sci. Univ. Durham, Durham, UK DH 1 3 LE). Thin Solid Films 1989, 176(1), 151 -6 (Eng).