Роль механизма РНК-интерференции в регуляции экспресии теломерных ретротранспозонов Drosophila melanogaster тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.03, кандидат биологических наук Шпиз, Сергей Григорьевич

  • Шпиз, Сергей Григорьевич
  • кандидат биологических науккандидат биологических наук
  • 2009, Москва
  • Специальность ВАК РФ03.00.03
  • Количество страниц 100
Шпиз, Сергей Григорьевич. Роль механизма РНК-интерференции в регуляции экспресии теломерных ретротранспозонов Drosophila melanogaster: дис. кандидат биологических наук: 03.00.03 - Молекулярная биология. Москва. 2009. 100 с.

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Шпиз, Сергей Григорьевич

Содержание

Введение

Список сокращений

Обзор литературы

Структурно-функциональная организация теломер Drosophila

Структура теломерных ретротранспозонов

Регуляция длины и поддержание структуры теломер Drosophila

Механизмы РНК интерференции

Dicer, Drosha и их белки-помощники

Семейство белков Argonaute

Роль РНК-хеликаз в РНК-интерференции

Другие РНК-связывающие белки в составе RISC

Механизм образования piPHK

Материалы и методы

Лабораторные линии Drosophila и линии культур клеток, использованные в работе

Выделение геномной ДНК

Выделение РНК

Полуколичественный RT-PCR

РНК in situ гибридизация

Нозерн-блот анализ тотальной РНК Drosophila melanogaster

Нозерн-блот анализ коротких РНК Drosophila melanogaster

Сочетание методов РНК, ДНК FISH и иммуноокрашивания

Стандартные генно-инженерные методики

5' RACE (rapid amplification of cDNA ends) анализ

Клонирование промоторной области ретротранспозона НеТ-А для измерения ее активности

Трансфекция культуры клеток Drosophila и количественное определение активности галактозидазы

Вестерн-анализ

Получение экспрессирующих конструкций и конструкций для Р-элементной трансформации

Окрашивание тканей на Р-галактозидазу. Количественное определение активности [3-галактозидазы

Результаты

Короткие РНК теломерных ретротранспозонов в мутантах piPHK пути

Регуляция экспрессии TAHRE в мутантах piPHK пути

Исследование экспрессии гена гена-репортера, находящегося под контролем НеТ-Л и TART элементов

Экспрессия репортерного гена yellow, находящегося под промотором НеТ-А и расположенного в области теломеры, контролируется генами piPHK пути

Экспрессия репортерного гена lacZ, находящегося под промотором НеТ-А и расположенного в эухроматине, контролируется генами piPHK пути

Антисмысловая транскрипция теломерных ретротранспозонов Drosophila

Картирование антисмыслового промотора НеТ-А

3' область НеТ-А обладает промоторной активностью в антисмысловом направлении

Анализ антисмысловой экспрессии теломерных ретротранспозонов

Особенности локализации транскриптов НеТ-А и TART в ядре

Обсуждение

Выводы

Рекомендованный список диссертаций по специальности «Молекулярная биология», 03.00.03 шифр ВАК

Обратите внимание, представленные выше научные тексты размещены для ознакомления и получены посредством распознавания оригинальных текстов диссертаций (OCR). В связи с чем, в них могут содержаться ошибки, связанные с несовершенством алгоритмов распознавания. В PDF файлах диссертаций и авторефератов, которые мы доставляем, подобных ошибок нет.