Совершенствование лабораторной диагностики вирусных инфекций у онкогематологических больных тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.01.21, кандидат биологических наук Бурылев, Виталий Владимирович

• Бурылев, Виталий Владимирович
• кандидат биологических наук
• 2012

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Бурылев, Виталий Владимирович

Список сокращений.

Общая характеристика работы.

Обзор литературы.

Глава I Вирусные инфекции в структуре инфекционных осложнений у онкогематологических больных.

1.1 Герпесвирусные инфекции и проблемы инфекционной безопасности гемотрансфузий у иммуносупрессивных онкогематологических больных.

1.2.Респитаторные вирусные инфекции и их ассоциации с герпесвирусами при инфекционных осложнениях у онкогематологических больных.

1.3 Лабораторная диагностика вирусных инфекций.

Собственные данные.

Глава II Объект, материалы и методы исследования.

2. Характеристика обследованных контингентов.

2.2 Биологические материалы.

2.3 Методы исследования.

2.4 Разработка биочипа.

Глава III Этиологическая структура вирусных инфекционных осложнений у онкогематологических больных.

3.1 Исследование маркеров герпесвирусных инфекций у больных гематологического стационара и доноров крови.

3.2 Этиологические и клинические особенности герпесвирусных и респираторных инфекционных осложнений при гемобластозах.

Глава IV. Разработка биочипа для молекулярно-биологической диагностики герпесвирусных нфекций.

4.1 Подбор праймеров и зондов.

4.2 Печать биочипа и подбор условий гибридизации.

4.3 Выявление герпесвирусов с помощью разработанного биочипа.

Обсуждение и заключение.

Выводы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Совершенствование лабораторной диагностики вирусных инфекций у онкогематологических больных»

Несмотря на значительный прогресс, достигнутый в лечении опухолевых заболеваний системы крови с внедрением в клиническую практику новых препаратов, моноклональных антител, трансплантации гемопоэтических стволовых клеток, борьба за продление жизни пациентов сохраняет свою актуальность до настоящего времени. Одной из ведущих причин гибели больных продолжают оставаться инфекционные осложнения. Число возможных этиологических агентов этих осложнений достаточно велико -бактерии, грибы и вирусы. Подверженность больных смешанным инфекциями обусловлена нарушениями в клеточном и гуморальном звеньях иммунитета, расширением входных ворот, вследствие повреждения кожи, слизистых оболочек, длительной катетеризации центральных вен, активизацией эндогенной инфекции. Особенно часто такие осложнения наблюдаются у больных при проведении им высокодозовой химиотерапии (ХТ) или после осуществления больному трансплантации гемопоэтических стволовых клеток, когда организм ослаблен как за счет опухолевого заболевания, так и за счет использования агрессивных программ ХТ [3].

У онкогематологических больных и реципиентов гемопоэтических стволовых клеток тяжелые инфекционные осложнения выявлены у 42% умерших [7]. Риск возникновения тяжелых бактериальных, грибковых, вирусных инфекций существенно повышается при развитии гранул оцитопении. Особенно высок риск развития инфекционных осложнений при уровне гранулоцитов менее 0,1хЮ9/л. [3]. В целом частота инфекционных осложнений при гемобластозах составляет 60-70%, цитомегаловирусной инфекции - 22-45%, ассоциированных инфекций - 2030%. Разработка эффективных методов терапии позволила добиться значительных успехов в лечении бактериальных и грибковых инфекций. Благодаря своевременному и грамотному применению антибактериальных препаратов у больных гемобластозами с глубокой нейтропенией летальность от инфекционных осложнений удалось снизить с 50% до 10% [117].

Определенные результаты достигнуты и в лечении вирусных инфекций. Так, внедрение мониторинга ЦМВ-виремии и превентивной терапии ЦМВ-инфекции привело к значительному снижению встречаемости ЦМВ болезни у иммунокомпрометированных пациентов, в том числе у онкогематологических больных [1,48, 95].

Тем не менее, вирусные инфекции, остаются актуальной проблемой для больных с иммуносупрессиями. Наиболее изученным из группы герпесвирусов является цитомегаловирус. Мало исследованы респираторные вирусы, хотя они играют большую роль в развитии инфекций у онкогематологических больных [42, 45 134]. Высокая частота вирусных инфекций наблюдается у больных лейкозами, особенно при использовании современных методов высокодозовой химиотерапии [16]. Течение вирусных, в частности герпетических инфекций, у данных групп больных, как правило, тяжелое и при отсутствии своевременной диагностики и терапии может угрожать жизни пациентов [15].

Не меньшую проблему представляет инфекционный контроль донорской крови т.к. гемотрансфузионная терапия широко используются для лечения онкогематологических больных и других пациентов с иммуносупрессиями. Современные методы контроля донорской крови позволили до минимума снизить риск гемотрансфузионных инфекций у иммунокомпетентных пациентов. Этого удалось добиться совершенствованием отбора доноров, широким набором тестов скрининга крови на основные инфекционные агенты и внедрением эффективных методов инактивации патогенов в гемокомпонентах [18, 21, 33].

Значительно сложнее обеспечить инфекционную безопасность гемотрансфузий у иммуносупрессивных больных, для которых представляют смертельную опасность инфекционные агенты, безвредные в большинстве случаев для иммунокомпетентных реципиентов. К ним в первую очередь относятся вирусы группы герпеса.

Для диагностики вирусных инфекций у больных чаще всего используют молекулярно-биологические методы, в частности ПЦР. При необходимости обследования большого количества образцов при скрининге донорской крови на вирусы гепатита и ВИЧ разрабатываются методы ПЦР мультиплексного анализа в формате минипулов [10]. Разработаны методы ПЦР в реальном времени в мультиплексном формате и для выявления герпесвирусов среди доноров крови [20]. Однако предлагаемый в настоящее время спектр наборов для определения вирусов группы герпеса не полон и не позволяет проводить одновременную детекцию всех типов вирусов этой группы. Дальнейшее совершенствование методов диагностики возможно при использовании нанотехнологических методов, в частности биочипов. Анализ с использованием биологических микрочипов - один из новейших и наиболее быстро развивающихся методов современной биологии и медицины. Эффективность применения микрочипов обусловлена возможностью параллельного проведения большого числа специфических взаимодействий молекул биополимеров. При этом удается в достаточно простых экспериментах собрать и обработать на отдельных элементах биочипа огромное количество биологической информации [25] нескольких сотен генов вирусов в рамках одного эксперимента [26], что особенно важно при необходимости проведения массовых исследований, в частности, при скрининге донорской крови и необходимости индикации большого количества инфекционных агентов в биоматериалах.

Таким образом, разработка новых методов диагностики инфекционных осложнений у онкогематологических больных с использованием биологических микрочипов является актуальной проблемой в современной гематологии и вирусологии. Аналогичная работа до настоящего времени не проводилась, что и послужили основанием для проведения настоящего исследования.

Цель исследования.

Определение частоты и значимости вирусных инфекций у онкогематологических больных и маркеров герпес вирусов у доноров крови и совершенствование лабораторной диагностики герпесвирусных инфекций путем использования олигонуклеотидных биочипов. Задачи исследования:

1. Выявить частоту респираторных и герпесвирусных инфекций у онкогематологических больных.

2. Определить диагностическую ценность методов иммуноферментного анализа (ИФА) и полимеразной цепной реакции (ПЦР) при выявлении герпесвирусов у доноров крови.

3. Установить частоту выявления маркеров герпесвирусных инфекций у доноров крови.

4. Разработать олигонуклеотидный биочип для выявления герпесвирусов человека и определить возможность его использования для индикации вирусов в биологическом материале.

Научная новизна исследования.

Впервые в России проведен мониторинг на расширенный спектр инфекционных агентов, включающий 15 возбудителей респираторных инфекций и вирусов группы герпеса. Установлен высокий удельный вес респираторных вирусов в структуре инфекционных осложнений у больных различными формами гемобластозов (до 62%)

Убедительно показано, что развитие острой пневмоний у онкогематологических больных в 42% случаев происходит на фоне активации вирусов группы герпеса, из которых наибольшую роль играет вирус Эпштейна-Барр.

Проведено изучение молекулярно-биологических (в ПЦР) маркеров герпесвирусных инфекций у доноров крови. Установлено, что чаще всего у доноров выявлялись маркеры активной ВЭБ инфекции(4,6%), реже других герпесвирусов (ЦМВ - 0 %, ВПГ1/2- 0,2% и ВГЧ6 -1,75%).

Разработан биочип для определения вирусов группы герпеса в биологическом материале (крови, ликворе, моче и др.). Доказана возможность использования биочипа для своевременной идентификации различных герпесвирусов у онкогематологических больных. Практическая значимость

На основании полученных данных о распространенности вирусных инфекций у онкогематологических больных представлено обоснование для проведения скрининга на маркеры этих инфекций с помощью ПЦР в реальном времени.

Использование скрининга в комплексе с общепринятыми бактериологическими и микологическими исследованиями позволит проводить раннюю этиотропную терапию инфекционных осложнений у больных.

Разработан и апробирован олигонуклеотидный биочип для выявления герпесвирусов человека и определена возможность его использования для индикации вирусов в биологическом материале.

Изучение частоты выявления серологических (ИФА) и молекулярно-биологических (ПЦР) маркеров ЦМВ герпесвирусных инфекций у доноров крови показало возможность выделения группы серонегативных доноров. Из-за вероятности сероконверсии эти лица требуют периодического контроля.

Основные положения выносимые на защиту

1. У онкогематологических больных респираторные вирусы выявляются чаще при инфекционных осложнениях, чем без них.

2. Оптимальным методом лабораторной диагностики вирусных инфекций при имуносупрессии является ПЦР в реальном времени, позволяющий выявлять геномы возбудителей в любом биологическом материале.

3. Предложенный олигонуклеотидный биочип является высокочувствительным и позволяет проводить определение восьми известных видов герпесвирусов человека. Лабораторный образец биочипа специфично выявляет герпесвирусы как в контрольных образцах, накопленных на культивируемых клетках человека, так и в клинических образцах от пациентов. Апробация работы. Результаты работы представлены на Всероссийской научно-практической конференции «Инфекционные осложнения при иммунодепрессиях» 11-12 февраля 2010, СПб; в материалах VII Всероссийской научно-практической конференции «Молекулярная диагностика-2010» 24-26 ноября 2010, Москва; на Всероссийской научно-практической конференции молодых ученых «Современные проблемы гематологии и трансфузиологии» 24-25 марта 2011 года, СПб; на Всероссийской научно-практической конференции «Актуальные вопросы диагностики и лечения заболеваний системы крови» 16-17 ноября 2011 года, СПб; в материалах Всероссийской научно-практической конференции «Инфекции и инфекционная безопасность в гематологии и службе крови», посвященной 70-летию лаборатории бактериологии Российского научно-исследовательского института гематологии и трансфузиологии 22-23 марта 2012 года СПб; на конференции «Актуальные вопросы гематологии и трансфузиологии», посвященной 80-летию Российского научно-исследовательского института гематологии и трансфузиологии 24-25 октября 2012 года СПб.

Внедрение результатов исследований в практику. Результаты диссертационной работы используются в Российском научно-исследовательском институте гематологии и трансфузиологии, в учебном процессе на кафедре гематологии и трансфузиологии Северо-Западного государственного медицинского университета им. И.И. Мечникова, кафедре микробиологии ИМО Новгородского государственного университета им. Ярослава Мудрого. При проведении данной работы нами была предложена подложка для биочипа на основе халькогенидных стекол. Патент на полезную модель № 121081 (заявка № 2012109347, приоритет полезной модели от 12 марта 2012 года).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 12 научных работ, из них 3 - в журналах, рекомендованных ВАК РФ.

Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 108 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, 3 глав собственных исследований, выводов, практических рекомендаций и списка литературы, который включает 138 источников (49 отечественных и 89 иностранных). Диссертация иллюстрирована 11 рисунками и 12 таблицами.

Заключение диссертации по теме «Гематология и переливание крови», Бурылев, Виталий Владимирович

Выводы

1. Определена частота и значимость вирусных инфекций у онкогематологических больных. Геном ВЭБ определяется в крови у 24,9% больных, причем чаще при хронических лейкозах и множественной миеломе. Реже обнаруживается ВГЧ-6 (11,0%). Геномы ЦМВ и ВПГ выявлены в 4,8% и 3,0% соответственно

2. В развитии инфекционных осложнений у онкогематологических больных значительную роль играют респираторные вирусы. В целом, возбудители респираторных инфекций обнаруживаются у 62% больных в группе с инфекционными осложнениями и только в 22,8% - в группе сравнения.

3. Респираторные инфекции в 42% случаев протекают на фоне выявления геномов герпесвирусов в крови. Эти данные дают основание предположить, что герпесвирусные инфекции значительно повышают риск развития респираторных инфекционных осложнений и указывают на необходимость тщательного мониторинга респираторных и герпесвирусных инфекций у онкогематологических больных.

4. Разработан олигонуклеотидный биочип, специфически выявляющий 8 известных типов герпесвирусов человека, который может быть успешно использован для индикации вирусов в биологическом материале.

5. На основании изучения серологических и молекулярно-биологических маркеров герпес-вирусов показана необходимость и возможность выделения группы серонегативных по ЦМВ доноров для обеспечения инфекционной безопасности гемотрансфузий у иммуносупрессивных больных.

Практические рекомендации.

1. С целью ранней диагностики инфекционных осложнений следует включить в диагностический алгоритм обследования онкогематологических больных выявление возбудителей респираторных инфекций и вирусов группы герпеса.

2. Решением проблемы индикации герпесвирусов может стать разработанный олигонуклеотидный биочип. Диагностическое исследование с применением биочипа необходимо проводить при подозрении на инфекционный процесс.

3. Для обеспечения «ЦМВ безопасности» донорской крови, предназначенной для гемокомпонентной терапии иммунокомпрометированных пациентов, необходимо включить в комплекс обследования доноров определение серологических и молекулярных маркеров герпесвирусных инфекций.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Бурылев, Виталий Владимирович, 2012 год

1. Балашов Д.Н., Трахтман П.Е., Скоробогатова Е.В., Скворцова Ю.В., Шипицына И.П., Масчан A.A. Факторы риска цитомегаловирусной инфекции у пациентов после аллогенной трансплантации гемопоэтических стволовых клеток // Онкогематология. 2010. №4. С. 20-26.

2. Бессмельцев С.С., Абдулкадыров K.M. Множественная миелома/ СПб: Диалект, 2004. 448с

3. Вирусология в 3-х томах / под ред. Филдс Б., Найл Д. (пер. с англ.). М: Мир. 1989. т.З. 452с.

4. Вирусные инфекции у онкогематологических больных (патогенез, диагностика, клиника, профилактика и лечение) / под ред. проф.В.Н.Чеботкевича, проф. К.М.Абдулкадырова. СПб: Роза мира, 2002. 134 с.

5. Вопросы общей вирусологии: учебное пособие / под ред. О.И.Киселева, И.Н. Жилинской. СПб: СПбГМА им. И.И.Мечникова. 2007. 374 с.

6. Голосова Т.В., Файнштейн Ф.Э., Мартынова В.А., Абакумов Е.М. Инфекции и естественный иммунитет при лейкозах / М., 1980. 200 с.

7. Ю.Горская O.A., Попова М.В., Онохина Я.С., Сельков С.А. Опыт использования ПЦР при обследовании доноров крови // Вестник гематологии. 2012. т.VIII. №1.С.35.

8. П.Гришаев М.П. Цитомегаловирусная инфекция и ее лабораторная диагностика // Информационный бюллетень "Новости "Вектор-Бест". 1996, декабрь. N 1.

9. Гурцевич В.Э. Роль вируса Эпштейна-Барр в онкогематологических заболеваниях человека // Клиническая онкогематология. 2010. т.З. № 3. С.222-234.

10. Данилюк Н.К. Вирус Эпштейна-Барр и серодиагностика связанных с ним заболеваний // Информационный бюллетень "Новости "Вектор-Бест". 2000, декабрь. N 4(18).

11. Н.Исаков В.А., Архипова Е.И., Исаков Д.В. Герпесвирусные инфекции человека: руководство для врачей / СПб: СпецЛит. 2006. 303 с.

12. Исаков В.А., Исаков Д.В. Иммунопатогенез ВПГ-инфекции: новые особенности и перспективы для разработки современных методов лечения // Вестник гематологии. 2012. т.VIII. № 1. С. 11-16.

13. Йовдий A.B., Шардаков В.И., Загоскина Т.П., Назарова Е.Л., Демьянова В.Т. Частота реактивации вирусных инфекций у больных Неходжкинскими лимфомами // Вестник гематологии. 2012. т.VIII. № 1. С.48-49.

14. Киселев О. И. и др. Вопросы общей вирусологии: учебное пособие / СПб: СПбГМА им. И. И. Мечникова, 2007. 374 с.

15. Колотвин B.B. Инновационные решения для автоматизации скрининга донорской крови на наличие вирусов гепатита (С/В) и иммунодефицита человека (1/2) // Вестник гематологии. 2012. т.VIII. № 1. С.53-54.

16. Костин А.И., Майорова O.A., Ложкин A.B. и др. К вопросу о контроле качества эритроцитсодержащих компонентов крови, обедненных лейкоцитами//Трансфузиология. 2011. № 2. т. 12. С. 12-33.

17. Кузнецов O.E., Матвеев A.B., Дашкова Н.Г., Рагимов A.A. Использование мультиплексной тест-системы для выявления герпесвирусов среди доноров крови // Вестник гематологии. 2012. т.VIII. № 1. С.59-60.

18. Маниатис Т., Фрич Э., Сэмбрук Д. Молекулярное клонирование / (пер. с англ). 1984. Москва: Мир. 480с.

19. Мельникова В.Н., Селиванов Е.А., Кирьянова Г.Ю. и др. Метод заготовки лейкофильтрованных отмытых эритроцитов // Трансфузиология. 2010. № 3. т.11. С.4-11.

20. Мельникова В.Н., Селиванов Е.А., Кирьянова Г.Ю. Значение лейкофильтрации при криоконсервировании эритроцитов с целью их карантинизации // Вестник Службы крови России. 2010. № 4. С.3-7.

21. Мирзабеков А. Д. Применение матричных биочипов с иммобилизованной ДНК в биологии и медицине // Информационные медико-биологические технологии. 2002. № 6. С.166-198.

22. Мирзабеков А. Д. Биочипы в биологии и медицине XXI века // Вестник РАН. 2003. т. 73. № 5. С.412-—422.

23. Покровский В.И. Инфекционные болезни и эпидемиология. М, 2007. 296 с.

24. Приказ МЗ СССР № 535 от 22 апреля 1985 г. «Об унификации микробиологических (бактериологических) методов исследования, применяемых в клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений»

25. Руководство по приготовлению, использованию и обеспечению качества компонентов крови. Рекомендации NR(95)15 16 / Европейский директорат по качеству лекарственных средств и здравоохранения. 2011. С.153.

26. Румель Н.Б., Чеботкевич В.Н., Абдулкадыров K.M. Респираторные вирусные инфекции у онкогематологических больных (обзор) // Тер.архив. 2001. т.73. № 4. С. 11-15.

27. Селиванов Е.А., Данилова Т.Н., Дегтерева И.Н. и др. Служба крови России: современное состояние и перспективы развития // Трансфузиология. 2010. № 4. т. 11. С.4-31.

28. Селиванов Е.А., Чечеткин A.B., Данилова Т.Н., Григорьян М.Ш., Макеев А.Б. Частота выявления маркеров вирусных инфекций у доноров крови и ее компонентов в Российской Федерации // Вестник гематологии. 2012. т VIII. №1. С.77-78.

29. Степанова Е.В. Герпесвирусные заболевания и ВИЧ-инфекция: учебно-методическое пособие для врачей / СПб. 2009. 60с.

30. Техническое руководство Американской ассоциации банков крови /пер. с англ. 2000. Милан: Европейская школа трансфузионной медицины, издание на русском языке. С.825-826, 969.

31. Зб.Чеботкевич В.Н. Инактивация патогенов в эритроцитной массе // Вестник гематологии. 2012 . т. VIII. № 1. С.89.

32. Чеботкевич В.Н., Абдулкадыров K.M. Цитомегаловирусная инфекция и проблемы гемотрансфузионной терапии // Трансфузионная медицина. 1995. № 5. С.78-79.

33. Чеботкевич В.Н., Абдулкадыров K.M., Румель Н.Б. и др. Ускоренный метод диагностики вирусных инфекций у больных острыми лейкозами //Метод.рекомендации .СПб. 1997. 10 с.

34. Чеботкевич В.Н., Бессмельцев С.С., Волков A.B., Шилова Е.Р. Молекулярно-биологическое изучение роли респираторных вирусов при инфекционных осложнениях у больных гемобластозами и депрессиями кроветворения // Вопросы онкологии. 2006. т.52. №4. С.421-426.

35. Чеботкевич В.Н., Боженко JI.B., Лисин В.В., Есипенко Г.Г. Состояние клеточного иммунитета и фагоцитарных факторов при микоплазма пневмонии инфекции у морских свинок // Ж. микробиол. эпидемиол. и иммунобиол. 1981. № 1. С.84-89.

36. Чеботкевич В.Н., Волков A.B., Казначеева А.И., Куклина Т.Г., Румель Н.Б., Абдулкадыров K.M. Инфекционные осложнения у больных различными формами лейкоза при трансплантации костного мозга. // Материалы Всероссийского съезда микробиологов. 1997. С.25.

37. Чеботкевич В.Н., Осидак JI.B., Румель Н.Б. Состояние клеточного и гуморального иммунитета при острых респираторных вирусных и микоплазменных инфекциях // Педиатрия. 1981. № 5. С.53-54.

38. Чеботкевич В.Н., Румель Н.Р. Абулкадыров К.М Респираторные вирусные инфекции у онкогематологических больных // Тер. архив. 2001. № 11. C.I 1-15

39. Чечёткин A.B., Данилова A.B., Игнатович Г.П. и др. Новые возможности приготовления фильтрованной эритроцитной взвеси // Вестник Службы крови России. 2011. № 2. С. 14-17.

40. Швец Е.Ю. Клинико-эпидемиологические особенности и диагностика бокавирусной инфекции у детей: автореф. дис. . канд. мед. наук. М., 2009. 20 с.

41. Allander T, Tammi MT, Eriksson M. et al. Cloning of a human parvovirus by molecular screening of respiratory tract samples // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. 2005. vol. 102. P.12891-12896.

42. Andreone P, Gramenzi A, Lorenzini S. et al. Posttransplantation lymphoproliferative disorders // Arch. Intern. Med. 2003. vol 163. P. 19972004.

43. Benson DA, Karsch-Mizrachi I, Lipman DJ, Ostell J, Sayers EW. GenBank //Nucleic Acids Res. 2011. vol. 39. P.32-37.

44. Boeckh M. The challenge of respiratory virus infections in hemopoietic cell transplant recipients // Br. J. Haematol. 2008. vol.143. N 4. P.455-467.

45. Buss DH, Scharyj M, White DR. Visceral herpesvirus infections in leukemic patients receiving cytarabine. // JAMA. 1980. vol.243. N 19. P. 1903-1905.

46. Casper C, Redman M, Huang M.L. et al. HIV infection and human herpesvirus-8 oral shedding among men who have sex with men // J Acquir Immune Defic Syndr. 2004. vol. 35. P.233-228.

47. Casper C. The aetiology and management of Casterman disease at 50 years: translating pathophysiology to patient care // Br J Haematol. 2005. vol.129. P.3-17

48. Chan P, Chik K, To K, et al. Human herpesvirus-6 and human herpesvirus-7 associated fatal encephalitis in a peripheral blood stem cell transplant recipients // J Med Virol. 2002. vol. 66. P.493-496.

49. Chan P, Peiris J, Yuen K et al. Human herpesvirus-6 and human herpesvirus-7 infections in bone marrow transplant recipients // J Med Virol. 1997. vol.53. P.295-305.

50. Chatzidimitriou D, Gavriilaki E, Sakellari I, Disa E. Hematopoietic cell transplantation and emerging viral infections // J Med Virol. 2010. vol.82. N 3. P.528-538.

51. Chemaly RF, Torres HA, Hachem R, Kontoyiannis DP, Safdar A, Raad II. Human herpesvirus 6 DNAemia in immunosuppressed adult patients with leukemia at risk of mold infection // Haematologica. 2008. vol. 93, Issue 1. P.157-158

52. Christiansen NP, Haake RJ, Hurd DD. Early herpes zoster infection in adult patients with Hodgkins's disease undergoing autologus bone marrow transplant // Bone Marrow Transplant. 1991. N 7. P.435-437.

53. Clark DA, Emery VC, Griffiths PD. Cytomegalovirus, Human Herpesvirus-6, and Human Herpesvirus-7 in Hematological Patients // Semin Hematol . 2003 . vol. 40. N 2. P. 154-162.

54. Clark DA, Griffiths PD. Human herpesvirus 6: Revalence of infection in immunocompromised host // Br J Haematol . 2003. Vol. 120. N 3. P.384-395.

55. Clark DA. Human herpesvirus 6 // Rev Med Virol. 2000. vol.10. P. 155-173.

56. Davison A. J., Eberle R., Hayward G. S. Family Herpesviridae. In Virus Taxonomy, VHIth Report of the International Committee on Taxonomy of Viruses / 2005. London: Academic Press. P. 193-212.

57. Dollard SC, Nelson KE, Ness PM, Stambolis V, Kuehnert MJ, Pellett PE, Cannon MJ. Possible transmission of human herpesvirus-8 by blood transfusion in a historical United States cohort // Transfusion. 2005. vol. 45. P.500-503.

58. Dominguez C, Dambaugh TR, Stamey FR et al. Human herpesvirus 6B genome sequence: Coding content and comparison with human herpesvirus 6A // J Virol. 1999. vol.73. P.8040-8052.

59. Elting LS, Whimbey E, Lo W, Andreff M. et al. Epidemiology of influenza A virus infection in patients with acute or chronic leukaemia // Support. Care Cancer. 1995. vol. 3. P.198-202.

60. England JA, Piedra PA, Whimbey E. Prevention and treatment of Respiratory Syncytial virus and Parainfluenza viruses in immunocompromised patients // AmerJ.Med. 1997, March 17. vol.102. P.61-70.

61. England JA, Sullivan CJ, Jordan C. et al. Respiratory Syncitial virus infections in immunocompromised adults // Ann.Inter.Med. 1988. vol.109. P.203-208.

62. Gaulnerec-Dejean A, Dejean G, Vastel L, et al. Human herpesvirus-6 and human herpesvirus-7 in the bone marrow from healthy subjects // Transplantation. 2000. vol.69. P. 1722-1723.

63. Gerna G, Vitulo P, Povida F. et al. Impact of human metapneumovirus and human cytomegalovirus viruses in the lower respiratory tract infections of lung transplant recipients// J. Med. Virol. 2008. vol.80. N 10. P. 1869.

64. Harrington R.D., Hooton T.M., Hockman R.C. et al. An outbreak of Respiratory Syncytial virus in a bone marrow transplant center // J.Infect.Dis. 1992. vol. 165. P.987-993.

65. Hecker M, Qiu D, Marquardt K, Bein G, Hackstein H: Continuous cytomegalovirus seroconversion in a large group of healthy blood donors // Vox Sang. 2004. vol. 86. N 1. P.41-44.

66. Heid C, Stevens J., Livak K. Real time quantitative PCR // Genome Res. 1996. Vol. 6. P. 986-994.

67. Hjalgrim H., Askling J., Sorensen P. et al. Risk of Hodgkin's disease and other cancer after infectious mononucleosis // J. Natl. Cancer Inst. 2000.vol.92. P.1522-1528.

68. Hodgson J., Zuckerman M., Smith M. Development of a novel internal control for a real-time PCR for HSV DNA types 1 and 2 // J.Clin.Virology. 2007.vol. 38. Issue 3. P.217-220.

69. Hoogen BG van den, de Jong JC, Groen J, Kuiken T, de Groot R, Fouchier RAM, et al. A newly discovered human pneumovirus isolated from young children with respiratory tract disease // Nat Med. 2001. vol.7. P.719-724.

70. Hudnall SD, Chen T, Allison P, Tyring SK, Heath A. Herpesvirus prevalence and viral load in healthy blood donors by quantitative real-time polymerase chain reaction. // Transfusion. 2008. vol. 86. P. 1180-1187.

71. Jaaskelainen A., Piiparinen Н., Lappalainen-M. Improved multiplex-PCR and microarray for herpesvirus detection from CSF // J.Clin.Virology. 2008. vol. 42. Issue 2. P. 172-175.

72. Khera P, Haught JM, McSorley J, English JC 3rd. Atypical presentations of herpesvirus infections in patients with chronic lymphocytic leukemia. // J Am Acad Dermatol. 2009. vol.60. N 3. P.484-486.

73. Kondo K, Kondo T, Okuno T, et al. Latent human herpesvirus-6 infection of human monocytes/macrophages // J Gen Virol. 1991. vol.72. P.1401-1408.

74. Koskenvuo M., Mottonen M.,Waris M. et al. Human bocavirus in children with acute lymphoblastic leukemia// Eur. J. Pediatr. 2008. vol. 187. N 9. P.1011-1015.

75. Kiihn JE. Transfusion-Associated Infections with Cytomegalovirus and Other Human Herpesviruses. // Transfusionsther Transiusionsmed. 2000. vol.27. N3.P.138-143.

76. Leach CT, Sumaya CV, Brown NA. Human herpesvirus-6: clinical implications of a recently discovered, ubiquitous agent // J Pediatr. 1992. vol.121. P.173-181.

77. Lenaerts L., De Clerq E., Naesens L. Clinical features and treatment of adenovirus infections // Rev. Med. Virol. 2008, Nov-Dec. Vol. 18. N 6. P.357-374.

78. Ljungman P. Strategies for prevention of CMV infection and disease in transplant recipients // Clin.Microbiol. and Infect. 1997. vol.3. Suppl.2. abstr.125.

79. Ljungman P., Gleaves C.A., Meyer J.D. Respiratory virus infections in immunocompromised patients // Bone Marrow Transplantation. 1989. vol.4. P.35-40.

80. Lovmar L, Fock C, Espinoza F, Bucardo F, Syvanen AC, Bondeson K. Microarrays for genotyping human group a rotavirus by multiplex capture and type-specific primer extension // Journal of Clinical Microbiology. 2003. vol. 41. N. 11. P.5153-5158.

81. Luppi M, Barozzi P, Morris C, et al. Human herpesvirus-6 latently infects early bone marrow progenitors in vivo // J Virol. 1999. vol.73. P.754-759.

82. Lusso P, Secchiero P, Crowley RW, et al. CD4 is a critical component of the receptor for human herpesvirus-7: Interference with human immunodeficiency virus // Proc Nat Acad Sci USA. 1994. vol.91. P.3872-3876.

83. Mackay I, Gardam T, Arden K. Co-detection and discrimination of six human herpesviruses by multiplex PCR-ELAHA // J.Clin.Virology. 2003. vol. 28. Issue 3.P.291-302.

84. Maraninchi D. The clinical consequences of haematological and non-haematological toxicity following bone marrow transplantation and the possible impact of haematopoietic growth factors // Bone marrow transplantation. 1993. vol.11. s.2. P. 12-22.

85. Martin M.A., Bock M. J., Pfaller M. A., Wenzel R.P. Respiratory syncytial virus infections in adult done marrow transplant recipients // Lancet. 1988. P.1396-1397.

86. McGinnis S., Madden T. L. BLAST: at the core of a powerful and diverse set of sequence analysis tools // Nucleic Acids Res. 2004. vol. 32. W20-W25.

87. Meyers JD. Infection in recipients of bone marrow transplants / Current Clinical topics in Infectious Diseases. / Remington JS, Schwartz MN, eds. New York: McGraw-Hill. 1985. P.261-292.

88. Miller WJ, McCullough J, Balfour HH, Haake RJ. et al. Prevention of cytomegalovirus infection after marrow transplantation: a randomised trial of blood product screening//Bone Marrow Transplant. 1991. vol.7. N3. P.227-234.

89. Nicholas WG, Price TH, Gooley L. Transfusion-transmitted cytomegalovirus infection after receipt of leukoreduced blood products // Blood. 2003. vol.101. P.4195-4200.

90. Pieters R, van der Meer PF, Seghatchian MJ. Update on leucocyte depletion of blood components by filtration // Transfus Sei. 1998, Dec. vol.19. N4. P.321-328.

91. Pross HF, Eidinger D. Antigenic competition: a review of nonspecific antigen-induced suppression // Adv Immunol. 1974. v. 18. PI33-168.

92. Roback JD, Bray RA, HiLLyer CD. Longitudinal monitoring of WBC subsets in packed RBC units after filtration: implications for transfusion tranmission of infections // Transfusion. 2000, May. vol.40. N5. P.500-506.

93. Schenk T, B.Strahm, U. Kontny, M. Hufnagel, D. Neumann-Haefelin, and V. Falcone. Disseminated bocavirus infection after stem cell transplant //Emerg. Infect. Dis. 2007. vol. 13. P.1425-1427.

94. Schildgen O, Muller A, Allander T. et al. Human bocavirus: passenger or pathogen in acute respiratory tract infections? // Clin. Microbiol. Rev. 2008. Vol.21. N2. P.291-304.

95. Schimpff S. C. Infection in neutropenic cancer patients: three decades of progress // Support Care cancer. 1997. Vol. 5. P.343-345

96. Snoeck R, de Clerq E. Herpesvirus infections in immunocompromised patients/ Infectious complications of cancer/ ed. Klastersky J. Boston et al. 1995. P.149-171.

97. Tafreshi N., Sadeghizadeh M., Amini-Bavil-Olyaee S. Development of a multiplex nested consensus PCR for detection and identification of major human herpesviruses in CNS infections // J.Clin.Virol. 2005. Vol. 32. Issue 4. P.318-324

98. Tanaka K, Kondo T, Torigoe S, et al. Human herpesvirus 7: Another causal agent for roseola (exanthem subitum) // Pediatr. 1994.vol.125. P. 1-5.

99. Taylor CE, Sviland L, Pearson ADJ. Dobb M, Reid MM, Kernahan J Craft AW, Hamilton PJ, Proctor S. Virus infections in bone marrowtransplant recipients: A three year prospective study // J Clin Pathol. 1990. № 43. P.633-637.

100. Tchebotkevitch V, Abdoulkadirov K, Kaitandjhan E, Volkov A, Moiseev S. Cytomegalovirus infection and the problems of blood transfusion //Neder. Milit. Geneesk .1996. T.49. N 3. P.82-85.

101. Tchebotkevitch V. Associated cytomegalovirus (CMV) infection in oncohaematological patients // J Clin Virol. 1999. vol.12. N.2. P. 10-18.

102. Thompson M.P., Kurzrock R. Epstein-Barr virus and cancer //Clin. Cancer Res. 2004. vol.10. P.803-821.

103. Turnbaugh PJ, Ley RE, Hamady M, Fraser-Liggett CM, Knight R, Gordon JI. The Human Microbiome Project // Nature. 2007. vol. 449. s.7164. P.804-810.

104. Ustapelebi I. Diagnosis of herpes simplex virus infections // J.Clin. Virol. 2001.vol. 21. Issue 3. P.255-259.

105. Vamvakas EC. Is human herpesvirus-8 transmitted by transfusion? // Transius Med Rev. 2010. vol. 24. P. 1-14.

106. Vamvakas EC. Is white blood cell reduction equivalent to antibody screening in preventing transmission of cytomegalovirus by transfusion? A review of the literature and meta-analysis // Transius Med Rev. 2005. vol. 19. P.181-199.

107. Wagner HJ, Kliiter H, Kruse A, Bucsky P, Hornef M, Kirchner H. Determination of the number of Epstein-Barr virus genomes in whole blood and red cell concentrates // Transius Med. 1995. vol.5. N 4.P.297-302.

108. Weller T.H. Varicella and herpes zoster. Changing concepts of the natural history, control, and importance of a not-so-benign virus (first of two parts) //N Engl J Med. 1983. vol.309. P. 1362-1368.

109. Weller T.H. Varicella and herpes zoster. Changing concepts of the natural history, control, and importance of a not-so-benign virus (second of two parts) //N Engl J Med. 1983. vol.309. P. 1434-1440.

110. Whimbey E, Champlin RE, Couch RB. et al. Community respiratory virus infection among hospitalized adult BMT recipients // Clin.Infec.Dis.1996. vol.22. P.778-782.

111. Whimbey E, Couch RB, England J. et al. Respiratory Syncytial virus (RSV) pneumonia among hospitalized adult with leukemia // Clin.Infec.Dis. 1995. vol.21. P.376-379.

112. Whimbey E, Englund JA, Chouch RB. Community respiratory virus infections in immunocompromised patients with cancer // Amer.J.Med.1997, March 17. vol.102. P.10-18.

113. Whimbey E, Ghosh S. Respiratory syncitial virus infections in immunocompromised adults // Curr.Clin.Top.Infect.Dis. 2000. vol. 20. P.235-255.

114. Whimbey E, Goodrich J, Bodey GP. Pneumonia in cancer patients / Infection complications of cancer /ed.Klastersky J. Boston et al., 1995. P. 185-20