Спектрофотометрический анализ смесей водорастворимых витаминов с применением хемометрических алгоритмов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 02.00.02, кандидат химических наук Масякова, Елена Николаевна

• Масякова, Елена Николаевна
• кандидат химических наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат химических наук Масякова, Елена Николаевна

Введение.

Глава 1. Общая характеристика и методы определения витаминов (обзор литературы).

1.1. Основные свойства витаминов.

1.2. Методы определения витаминов.

1.2.1. Оптические методы.

1.2.1.1. Флуориметрия.

1.2.1.2. Спектрофотометрия.

1.2.1.3. Производная спектрофотометрия.

1.2.2. Хроматографические методы.

1.2.2.1. Высокоэффективная жидкостная хроматография.

1.2.2.2. Другие виды хроматографии.

1.2.3. Другие методы определения витаминов.

1.3. Поливитаминные препараты, их состав и применение.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Спектрофотометрический анализ смесей водорастворимых витаминов с применением хемометрических алгоритмов»

Актуальность. Традиционно для молекулярного анализа многокомпонентных смесей органических веществ применяют хроматографические методы. Так, смеси водорастворимых витаминов обычно анализируют методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Анализировать несложные смеси можно и без разделения, используя экономичный и экспрессный метод - спектрофотометрию. В этом случае требуется более простое и доступное оборудование, не нужны токсичные растворители. Это весьма важно при проведении технического контроля. Спектрофотометриче-ский анализ неразделенных смесей при наложении спектров поглощения компонентов можно вести, применяя классический метод Фирордта (МФ), но результаты анализа оказываются достаточно точными только для двух- и трехкомлонентных смесей. При увеличении числа компонентов {q) до 4-6 этот метод дает неточные результаты. Поэтому для анализа поливитаминных смесей, например, широко используемых в животноводстве и птицеводстве премиксов, спектрофотометрию пока что не используют.

Применение хемометрических алгоритмов, таких как метод множественной линейной регрессии (МНР) или метод многомерной градуировки (проекция на латентные структуры, PLS), способно расширить возможности спектрофотометрии. В этом случае становится возможен анализ более сложных смесей. Однако заранее нельзя сказать, какой может быть точность соответствующих методик, особенно в тех случаях, когда, во-первых, светопо-глощение компонентов неаддитивно, во-вторых, содержания компонентов различаются на порядок и более.

Использование хемометрических алгоритмов особенно перспективно при спектрофотометрическом определении витаминов в кормах, пищевых продуктах и премиксах. Содержание витаминов в этих объектах строго регламентируется, так как для живого организма вреден как недостаток витаминов, так и их большой избыток. Аналитический контроль содержания витаминов в кормах, пищевых продуктах и премиксах является нерешенной за4 дачей. Контрольно-аналитические лаборатории пока что не имеют в своем распоряжении методик, позволяющих быстро и достаточно точно определять спектрофотометрическим методом все витамины, входящие в состав таких объектов. Известные методики хроматографического анализа премиксов также не позволяют количественно определять все компоненты, обычно определяют только 3 основных витамина (В5, В] и В2).

Цель и задачи исследования. Целью данной работы было изучение возможности применения хемометрических алгоритмов (MJIP и PLS) к спек-трофотометрическому анализу 4-6-компонентных смесей водорастворимых витаминов и разработка соответствующих методик анализа премиксов. В ходе исследований необходимо было решить следующие частные задачи'.

• оценить возможность применения методов МЛР и PLS для определения витаминов по спектрам поглощения 4-6-компонентных модельных смесей, близких по составу к экстрактам премиксов;

• оценить точность и оптимизировать соответствующие методики (выбор спектральных диапазонов, ограничение объема обучающих наборов и др.);

• подобрать условия для количественного извлечения витаминов из премиксов с учетом времени, температуры и кратности экстракции, затем разработать методики экспрессного спектрофотометрического анализа премиксов.

Для оценки правильности результатов спектрофотометрического определения витаминов необходимо было модифицировать методику хроматографического анализа премиксов. Затем следовало сравнить метрологические характеристики методик спектрофотометрического и хроматографического определения витаминов и дать рекомендации по применению тех и других методик в практике работы контрольно-аналитических лабораторий.

Объектами определения в настоящей работе были следующие водорастворимые витамины: тиамин гидрохлорид (В]), рибофлавин (В2), пантотено-вая кислота (В3), никотиновая кислота (В5), пиридоксингидрохлорид (В6), ви-касол (К3), аскорбиновая кислота (С), биотин (Н), цианоко бал амин (В]2), а также их модельные многокомпонентные смеси. Выбор этих витаминов объясняется тем, что они входят в состав премиксов, выпускаемых промышленностью, и являются важными составляющими полноценного питания.

Тематика работы зарегистрирована во ВНТИЦ (№ ГР 01.200.2 04679), исследования велись при финансовой поддержке Министерства науки и образования (единый заказ-наряд) и Федеральной целевой программы "Интеграция". Тема исследований является составной частью научно-исследовательской работы, проводимой в ГНУ «Сибирский НИИ птицеводства» РАСХН (далее СибНИИП) в соответствии с программой фундаментальных и приоритетных прикладных исследований по научному обеспечению развития агропромышленного комплекса Российской Федерации на 2005-2010 г.г., задание 07.02.02.

Научная новизна

1. Показано, что компьютерное моделирование УФ-спектров поглощения смесей витаминов позволяет адекватно прогнозировать случайные погрешности спектрофотометрического анализа этих смесей с применением MJIP и оптимизировать условия анализа;

2. Для повышения точности анализа предложено рассчитывать концентрацию каждого витамина методом МЛР по значениям светопоглощения смеси в некотором заранее подобранном для данного витамина диапазоне длин волн;

3. Впервые показаны применимость метода PLS к спектрофотометри-ческому анализу неразделенных смесей витаминов и возможность определения этим методом 5-6 витаминов с погрешностью до 5% отн. Установлено, что метод PLS применим даже в тех случаях, когда в спектрах есть участки с отклонениями от аддитивности, а содержания компонентов смеси отличаются более чем в 10 раз.

4. Установлено, что разработанные на основе хемометрических алгоритмов экспрессные спектрофотометрические методики определения витаминов в неразделенных смесях по точности не уступают методикам, основанным на использовании ВЭЖХ.

5. Доказано, что оптимизация условий разделения витаминов методом обращенно-фазовой хроматографии (ВЭЖХ) позволяет определять состав более сложных смесей (вплоть до q = 10), чем спектрофотометрический анализ с применением метода MJIP.

Практическая значимость работы. Выработаны общие рекомендации по применению хемометрических алгоритмов в спектрофотометрическом анализе неразделенных смесей органических веществ. Разработан ряд спек-трофотометрических и хроматографических методик определения витаминов группы В и витамина К в премиксах, некоторые из них внедрены в практику. Выявлены химико-аналитические задачи, которые рекомендуется решать с разделением (ВЭЖХ) и без разделения (спектрофотометрия + хемометрика) поливитаминных смесей.

Положения, выносимые на защиту

1. Возможность и целесообразность применения алгоритмов MJTP и PLS для экспрессного спектрофотометрического анализа витаминных смесей.

2. Применимость алгоритма PLS к анализу многокомпонентных смесей витаминов при неаддитивности спектров поглощения.

3. Алгоритм моделирования УФ-спектров поливитаминных смесей с учетом случайных погрешностей.

4. Выбор условий (спектральных диапазонов) для определения витаминов в многокомпонентных смесях по методу MJIP.

5. Условия разделения и количественного анализа поливитаминных смесей методом ВЭЖХ с определением 6-9 витаминов за один ввод пробы.

6. Новые методики спектрофотометрического и хроматографического анализа витаминных смесей (премиксов) и рекомендации по их применению.

Апробация работы. Основные результаты работы доложены на Всероссийской конференции "Менделеевские чтения" (Тюмень, 2005), на международном форуме "Актуальные проблемы современной науки" (Самара, 2005), 7 на VII и VIII Всероссийских конференциях молодых ученых по математическому моделированию и информационным технологиям (Красноярск, 2006, Новосибирск, 2007), на Всероссийских конференциях «Аналитика России» (Краснодар, 2007, 2009), на XVIII Менделеевском съезде по общей и прикладной химии (Москва, 2007), на VI международном симпозиуме по хемо-метрике "Современные методы анализа многомерных данных" (Казань, 2008), на Всероссийской научной молодежной школе-конференции «Химия под знаком Сигма» (Омск, 2008), на Всероссийской конференции "Аналитика Сибири и Дальнего Востока" (Томск, 2008), а также на заседаниях ученого совета СибНИИП (2005-2008 гг).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 15 работ в виде статей и тезисов докладов. Оформлена заявка на патент РФ «Способ определения водорастворимых витаминов в премиксах» (приоритет 02.03.2009) № 2009107447/15 (009960).

Заключение диссертации по теме «Аналитическая химия», Масякова, Елена Николаевна

Выводы

1. Для повышения точности спектрофотометрического анализа многокомпонентных смесей витаминов по методу множественной линейной регрессии (MJIP) следует оптимизировать спектральные диапазоны, по которым ведется расчет концентраций. При использовании широкого спектрального диапазона погрешности определения составляют 10-15% отн, а при расчете концентрации каждого витамина по специфичному для него узкому интервалу длин волн погрешности снижаются до 3-5% отн. Оптимизацию спектральных диапазонов целесообразно проводить путем компьютерного моделирование спектров смесей с учетом уровня случайных погрешностей.

2. Применение метода МЛР с оптимизацией спектральных диапазонов позволяет определять компоненты модельных смесей даже в том случае, когда содержания витаминов (по массе) различаются более чем в 10 раз. При этом участки, где наблюдаются отклонения от аддитивности, должны быть исключены из рассмотрения.

3. Метод проекции на латентные структуры (PLS) применим к анализу 4-6-компонентных смесей витаминов даже при небольших, но статистически значимых отклонениях от аддитивности. Для построения адекватной граду ировочной модели в таких случаях достаточно 13 обучающих смесей. С помощью этой модели все витамины в шестикомпонентных смесях определяются методом PLS с погрешностью менее 2% отн.

4. Найден состав элюента и режим хроматографического разделения витаминных смесей, позволяющий количественно определять все компоненты смесей, содержащих 6-9 витаминов с погрешностью 3-5 % отн. Время разделения - порядка 20 минут.

5. Разработана и внедрена в практику методика экстракционно-хроматографического определения шести и более витаминов в серийно выпускаемых поливитаминных препаратах - премиксах (0,1 - 1 %) . Методика характеризуется хорошим разрешением хроматографических пиков. Анализ занимает не более часа. Коэффициент вариации порядка 5 % отн.

6. Разработаны методики экстракционно-спектрофотометрического определения 5-6 витаминов в премиксах (ОД — 1%), основанные на расчете концентраций методами МЛР или PLS. Анализ с применением заранее построенной модели занимает 10-15 минут. Коэффициент вариации порядка 2-3 % Полученные результаты хорошо согласуются с рецептурой премиксов, а также с результатами экстракционно-хроматографического анализа.

7. Спектрофотометрическое определение витаминов по разработанным методикам может быть рекомендовано для массового анализа однотипных премиксов, в частности для экспрессного технологического контроля качества премиксов в процессе их производства. Хроматографическое определение может быть рекомендовано организациям-потребителям для разовых анализов премиксов, существенно различающихся по своему составу.

Список литературы диссертационного исследования кандидат химических наук Масякова, Елена Николаевна, 2009 год

1. Микулец, Ю.И. Биохимические и физиологические аспекты взаимодействия витаминов и биоэлементов / Ю.И. Микулец и др... - Сергиев Посад, 2002. - 192 с.

2. Труфанов, А.В. Биохимия витаминов и антивитаминов / А.В. Труфанов. М.: Колос, 1972.- 236 с.

3. Колотилова, А.И. Витамины (химия, биохимия и физиологическая роль) / А.И. Колотилова, Е.П. Глушанков. Л.: Изд-во Ленингр. ун-та, 1976.248 с.

4. Березовский, В.М. Химия витаминов / В.М. Березовский. М.: Пищевая промышленность, 1973.- 632 с.

5. Досон, Р. Справочник биохимика / Р.Досон, Д. Элиот, К. Джонс М.: Мир, 1991.-544с.

6. Ионов, И.А. Витамины группы К. Структура, свойства, биологические функции / И.А. Ионов, П.Ф. Сурай. Харьков, 1997. - 389 с.

7. United Stares Pharmacopeia, 23-th Ed., Rockville, United States Pharmacopeial Convention. Inc., 1994.

8. Государственная Фармакопея СССР. 11 изд.- М.: Медицина, 1991. - Вып. 1: Общие методы анализа. - 313с.

9. Премиксы. Методы определения витаминов группы В: ГОСТ Р 50929-96. Введ. 1996-07-26. - М.: Изд-во стандартов, 1996. - 35 с.

10. Gupta, S.K. Methods of control and standardization of drugs containing water-soluble vitamins (a review) / S.K. Gupta, C.L. Jain, J. Kasliwal // Indian Drugs. 1992. - V. 29. - № 8. - P. 372-374.

11. Lozano, C.M. Analytical procedures for water-soluble vitamins in foods and dietary supplements / C.M. Lozano, T.R. Ruiz, V. Thomas // Analyst. -1990.-V. 115.-P. 217-220.

12. Gonzalez, V. Determination of urinary thiamin by the thiochrome method / V. Gonzalez, S. Rubio, A.G Hens // Anal. Lett. 1988. - V. 21. - № 6. -P. 993-1008.

13. Guo, X.Q. Modified thiochrome procedure for the determination of thiamin / X.Q. Guo, J.G. Xu, Y.Z. Wu // Anal. Chim. Acta. 1993. - V. 276. - № 1. -P. 151-160.

14. Perez-Ruiz, T. Determination of thiamin in cooked sausages / T. Perez-Ruiz, C. Martinez-Lozano, V. Tomas // Talanta. 1992. - V. 39. - № 8. - P. 907-911.

15. Alonso, A. Fluorimetric determination of thiamine by the thiochrome method / A. Alonso, M.J. Almendral, M.J. Porras, Y. Curto // J. Pharm. Biomed. Anal.-2006.-V.42. -№2.-P.171-177.

16. Martinez-Calatayud, J. A Simple Spectrofluorimetric. Method for Determination Trace Amount of Periodate by Thiamine / J. Martinez-Calatayud, C. Gomez-Benitos, D. Gaspar-Gimenez // J. Pharm. Biomed. Anal. 19907- V. 8. -№8-12.-P. 667-670.

17. Mohamed, A.M.I. / A.M.I. Mohamed, S.A. Hussein, S.R. El-Shabouri // J. Assoc. Off. Anal. Chem. 1988. - V. 71. - № 6. - P. 1131-1133.

18. Yuan, Yan / Yan Yuan, Xu Jin-Gou, Lin Jiang, Chen Guo-Zhen // Chem. J. Chin. Univ. 1997. - V. 18. - № 6. - P. 877-879.

19. Huang, Reheng. Фосфориметрическое определение рибофлавина / Reheng Huang // Anal. Chem. 2000. - V. 28. - № 2. - P. 180-182.

20. Zandomeneghi, M. Biochemical fluorometric method- for the determination of riboflavin in milk / M. Zandomeneghi, L. Carbonaro, G. Zandomeneghi // Journal of agricultural and food chemistry. 2007. - V.55. - № 15. - P. 59905994.

21. Aaron, J.-J. Fluorimetric and phosphorimetric characteristics of several vitamins / J.-J. Aaron, J.D. Winefordner // Talanta. 1972. - V.19. - № 1. -P.15-19.

22. Berzas, Nevado J J. Spectrofluorimetric study of the b-cyclodextrin: vitamin K3 complex and determination of vitamin K3 / J.J. Berzas Nevado, J.A. Murello Pulgarin // Talanta. 2000. - V. 53. - № 5. - A. 951-959.

23. Perez-Ruiz, T. Flow injection determination of vitamin K3 by a photo induced chemiluminescent reaction / T. Perez-Ruiz, C. Martinez-Lozano // Analyst. 1999. - V. 124. - № 2. - P. 197-201.

24. Liu, X. Флуориметрическое определение фолиевой кислоты в таблетках с использованием перманганата калия в качестве окислителя / X. Liu, Н. Huang, L. Fenxi // Anal. Chem. 2003. - V. 28. - № 11. -P. 1406-1409.

25. Akbay, N. Determination of vitamin Bi2 by chemilyminescence flow system. / N. Akbay, E. Gok // Журнал аналит. химии. 2008. - Том 63. - № 11. -С. 1176-1180.

26. Chen, Н. Одновременное определение витаминов В2 и В6 с использованием трехмерной флуоресцентной спектрометрии при детектировании суммарной интенсивности флуоресценции / Н. Chen, J. Zhu, X. Cao // Analyst. 1998. - V. 123. - № 5. - P. 1017-1021.

27. Garcia, L. / L. Garcia, S. Blazquez, M.P. San Andres //Anal. chim. Acta. 2001. - 434(2). - C. 193-199.

28. Yong-nian, Ni. Guangpuxue yu guangpu fenxi / Ni Yong-nian, Cai Ying-jun // Spectrosc. and Spectral Anal. 2005. - V. 25. - № 10. - C. 1641-1644.

29. British Pharmacopeia CD 1998 v2.0, System Simulation Ltd., 1998.

30. Ahmad, I. Multicomponent spectrophotometric assay of riboflavine and photoproducts /1. Ahmad, H. David, C. Rapson // J. Pharm. Biomed Anal. -1990.-V. 8.-№3.-P. 217-223.

31. Миралимов, M.M. Спектрофотометрическое определение рутина в водной среде / М.М. Миралимов, Г.С. Юсупов, С.С. Камилова //Фармация. -1992.-Т.41.-№4.-С. 41-42.

32. Ortega-Bajrales, P.Microdetermination of Vitamin В. in the Presence of Vitamins B2, B6, and B12 by Solid-Phase UV Spectrophotometry / P.Ortega-Bajrales, M.L. Femandez-de Cordova, A. Molina-Diaz // Anal Chem. 1998. - V. 70.-№2.-P. 271-275.

33. Sena, M.M. / M.M. Sena, J.C.B. Femandes, L. Rover, R.J. Poppi // Anal. chim. acta.- 2000. №409.

34. Nepote, J.A. Chemometrics assisted spectroscopic determination of vitamin Bg, vitamin B^ and dexamethasone in injectables / J.A. Nepote, P.C.

35. Damiani, A.C. Olivieri. // Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis. -2003. № 31. - C. 621-627.ч

36. Aberasturi, F. UV-visible first-derivative spectrophotometry applied to an analysis of a vitamin mixture / F. Aberasturi, A.I. Jimenez // J. Chem. Educ. -2001. V. 78. - № 6. - P. 793-795.

37. Durmus, О. / O. Durmus, D. Erdal // Chem. and Pharm. Bull. 2004. -V. 52. -№ 7. - P.810-817.

38. Полюдек-Фабини, Р. Органический анализ / Р. Полюдек-Фабини, Т. Бейрих // Л., Химия, 1983. С. 624.

39. Лутцева, А.И. Методы контроля и стандартизации лекарственных препаратов, содержащих водорастворимые витамины (обзор) / А.И. Лутцева, Л.Г. Маслов // Химико-фармацевтический журнал. 1999. - № 9. -С. 30-35.

40. Srividya, К. Indirect spectrophotometric determination of pyridoxine / K.Srividya, N. Balasubramanian // J. Assoc. Off. Anal. Chem. 1997. - V. 80. - № 6.-P. 1368-1373.

41. Nirmalchandar, V. Determined of Pyridoxine whith spectrophotometry / V. Nirmalchandar, N. Balasubramanian // Analyst. 1988. - V. 113. - № 7. - P. 1097-1099.

42. Gupta, M.K. / M.K. Gupta, C.L. Jain. // Indian Drugs. 1991. - V. 28. - № 6. - P. 275-277.

43. Srividya, K. Indirect spectrophotometric determination of thiamine / K. v Srividya, N. Balasubramanian // Chem. and Pharm. Bull. 1997. -. V. 45. - № 12. -P. 2100-2103.

44. Perez-Ruiz, Т. / T. Perez-Ruiz, C. Martinez-Lozano, V. Tomas // Analyst. 1994. - V. 119. - № 6. - P. 1199-1203.

45. Caiping, Ch. / Ch. Caiping, D. Liming, D. Yali, Zh. Yan // J. Anal. Chem. 2005. - V. 33. - № 2. - P .237-240

46. Abdollahi, H. / H. Abdollahi, L. Bagheri / Anal. chim. Acta. 2004. -V. 514.-№2.- P. 211-218.

47. Фроленко, И.Ю. Определение витаминов спектроскопическими методами / И.Ю. Фроленко, Т.В. Щеглова, Н.В. Щеглова // Проблемы теоретической и экспериментальной химии. Екатеринбург: Изд-во УрГУ, 2004. -С. 58-59.

48. Берштейн, И .Я. Спектрофотометрический анализ в органической химии / И.Я. Берштейн, Ю.Л. Каминский. Л.: Химия, 1986. - 200 с.

49. Hewala, I.I. / I.I. Hewala // Anal. Lett. 1993. - V. 26. - № Ю. - P. 2217-2237.

50. Baranowslca, I. RPTLC and derivative spectrophotometry for the analysis of selected vitamins /1. Baranowska, A. Kadziolka // Acta chromatogr. -1996.-№6. -P. 61-71.

51. Morelli, B. High-resolution/higher-order derivative spectrophotometry for determination of fernery mixtures of B-complex vitamins in pharmaceuticals / B. Morelli, Fresenius // J. Anal. Chem. 1996. - V. 354. - № l. - p. 97-102.

52. Morelli, B. Determination of ternary mixtures of vitamins by ratio-spectra zero-crossing derivative spectrophotometry / B. Morelli // Anal. Lett. -1994. V. 27. - № 14. - P. 2751-2768.

53. Martinez, L.S. Determinacion de vitamina B12 en una formulacion multivitaminica por espectrofotometia de derivada de primer orden / L.S. Martinez, M.L. Soto, H.R. Gorzalez // Acta farm. Bonaerense. 1999. - V.18. - № 2.-P. 135-139.

54. Zinghe, Gang. Simultaneous determination of four components in composite vitamin В tablets using a square-root Kalman filter / Gang Zinghe, Han Rongjang, Su Benyu // Anal. Sci. 1998. - V. 14. - № 5. - P. 995-969.

55. Сапрыкин, Jl.В. Хроматографический анализ витамина Вб и полупродуктов его синтеза / Л.В. Сапрыкин, Н.В. Киселева, В.Н. Васильев // Заводская лаборатория. Диагностика материалов. 1990. - Т. 56. - № 5. - С. 16-18.

56. Kawamoto, Т. Post-column derivatization of vitamin B6 using 2,6-dibromoquinone-4-chlorimide / Т. Kawamoto, E. Okada, T. Fujita // Journal of Chromatography A. 1983. - V. 267. - P. 414-419

57. Via, M.A.M. A simple HPLC assay for vitamin B6 in foods / M.A.M. Via, H. McNair // Pittsburgh Conf. Anal. Chem. and Appl. Spectrosc., Chicago, Febr. 27- March 4,1994. Abstr: Chicago. - 1994. -187 p.

58. Hou, W. Determination of pyridoxine hydrochloride in pharmaceutical formulation / W. Hou, H. Ji, E. Wang // Anal. Chim. Acta. 1990: - V. 230. - № 1. -P. 207-211.

59. Wang,' E. Determination of water-soluble vitamins using high-performance liquid chromatography and electrochemical or absorbance detection / E.Wang, W. Hou // Microchem. J. 1988. - V. 37. - № 3. - P. 338-344.

60. Mann, D.L. Liquid chromatographic analysis of vitamin B6 in reconstituted infant formula: collaborative study / D.L. Mann, M.W. George, E. Bonnin, R.R. Eitenmiller // Journal of AO AC International. 2005. - V.88. - № 1. - P. 3037

61. Sierra, I. A simple method to determine free and glycosylated vitamin Вб in legumes / I. Sierra, C. Vidal-Valverde // J. Liq. Chromatogr. and Relat. Technol. 1997. - V. 20. - № 6. - P. 957-969.

62. Bailey, A.L. A normal phase high performance liquid chromatographic method for the determination of thiamin in blood and tissue samples / A.L. Bailey, P.M. Finglas // J. Micronutr. Anal. 1990. - V. 7. - № 2. - P. 147-157.

63. Григорьев, A.M. Высокоэффективная жидкостная хроматография синтетического витамина Bi / А.М. Григорьев, JI.A. Высочина, В.М. Староверов и др. // Журнал аналитической химии. -1992. Т. 47. - № 10-11. - С. 1904-1909.

64. Vidal-Valverde, С. An improved high performance liquid chromatographic method for thiamine analysis in foods / C. Vidal-Valverde, A. Reche // Z. Lebensm.-Untersuch. und Forsch. 1990. - V. 191. - № 4-5. - P. 313-318.

65. Vails, F. Determination of Total Riboflavin in Cooked Sausages / F. Vails, M.T. Sancho, M.A. Fernandez-Muino, M.A. Checa // J. Agric. Food Chem. 1999. - V. 47. - № 3. - P. 1067-1070.

66. Arai, Y. Capability of phatodiode detector for vitamin analysis / Y. Arai, T. Hanai // J. Liq. Chromatogr. 1986. - V. 11. - № 11. - P. 2409-2418.

67. Hou, W. Determination of water-soluble vitamins by liquid chromatography with a parallel dual-electrode electrochemical detector / W. Hou, E. Wang // Talanta. 1990. - V. 37. - № 8. - P. 841-844.

68. Vails, F. Simultaneous determination of Nicotinic Acid and Nicotinamide in Cooked Sausages / F. Vails, M.T. Sancho, МюА. Fernandez-Muino, M.A. Checa // J. Agric. Food Chem. 2000. - V. 48. - № 8. - P. 3392-3395.

69. Iwase H. Determination of vitamin B5 in food by column liquid chromatography with electrochemical detection using eluent for pre-run sample stabilization / H. Iwase // J. Chromatogr. 1992. - V. 625. - № 2. - P. 377-381.

70. Ульянова, С.В. Анализ водорастворимых витаминов Bj, В2, В6 и никотинамида в драже «Гексавит» методом ВЭЖХ / С.В. Ульянова, A.M. Щавлинский, С.Н. Морев // Фармация. 1993. - Т. 42. - № 3 . - С. 50-51.

71. Maeda, Y. The optimization of HPLC-UV conditions for use with FTIR detection in the analysis of В vitamins / M. Yamamoto, K. Owada // J. Assoc. Off. Anal. Chem. 1989. - V. 72. - № 2. - P. 244-247.

72. Lam, F.L. The simultaneous assay of riboflavin 5-phosphate sodium and other water-soluble vitamins in liquid multivitamin formulations by liquid chromatograph / F.L. Lam, A. Lowande // J. Pharm. Biomed. Anal. 1988. - V. 6. - № 1. - P. 87-95.

73. Blanco, D. Determination of water soluble vitamines by liquid chromatography with ordinary and narrow-bore columns / D. Blanco, L.A. Sanchez, M.D. Gutierrez // J. Liquid Cromatogr. 1994. - V. 17. - № 7. - P. 1525-1539.

74. Zafra-Gomez, A. Simultaneous Determination of Eight Water-Soluble Vitamins in Supplemented Foods by Liquid Chromatography / A. Zafra-Gomez, A. Garballo, J.C. Morales, L.E. Garcia-Ayuso //J. Agric. Food Chem. 2006. -V. 54.-№ 13.-P. 4531^4536.

75. Akiyama, S. Packing for chromatography and method for separating water soluble organic compounds using the same / S. Akiyama, K. Nakashima, N. Shirakawa // Bull. Chem. Soc. Jpn. 1990. - V. 63. - № 10. - P. 2809-2813.

76. Староверов, B.M. ВЭЖХ-анализ водорастворимых витаминов в составе поливитаминного сиропа «Олиговит» / В.М. Староверов и др. // Химико-фармацевтический журнал. 2004. - Том 38. - № 3. - С. 54-56.

77. Арбатский, А.П. Определение витаминов в кормовых и пищевых продуктах методом высокоэффективной жидкостной хроматографии / А.П.

78. Арбатский, Г.Н. Афоньшии, В.М. Востоков // Журнал аналит. химии. 2004. -Т. 59.-№12.-С. 1304-1307.

79. Bhushan, R. Separation of vitamin В complex and folic acid by HPLC, normal phase and reversed phase -TLC / R. Bhushan, Arora Meenashi // Nat. Acad. Sci. Lett. 2002. - V. 25. - № 5-6. - P. 159-167.

80. Heudi, O. Separation of water-soluble vitamins by reversed-phase high performance liquid chromatography with ultra-violet detection: Application to polyvitaminated premixes / O. Heudi, T. Kilinc // Journal of chrom. 2005. -1070.-P. 49-56.

81. Кожанова, JI.А. Определение водо- и жирорастворимых витаминов в поливитаминных препаратах методом ВЭЖХ / Л.А. Кожанова, -Г.А.Федорова, Г.И.Барам // Журнал аналит. химии. 2002. - Т.57.- № 1. - С. 49-54.

82. Колосова, И.Ф. Разделение синтетических витаминов группы В методом ион-парной высокоэффективной жидкостной хроматографии / И.Ф. Колосова, В.Н. Филимонов, Л.Н. Балятинская // Журнал физической химии. -1994. Том 68. - № 10. - С. 1832-1834.

83. Мочалова, B.C. Высокоэффективная жидкостная хроматография водорастворимых витаминов на модифицированных сорбентах / B.C. Мочалова, Г.Д. Брыкина, О.А. Шпигун // Вестник Московского университета, х Сер.2. Химия. 2006. - Том 47. - № 3. - С. 206-209.

84. Сирицо, С.И. Обращенно-фазовая изократическая ВЭЖХ для аналитического контроля водорастворимых витаминов в многокомпонентных рецептурах: автореф. дис. .канд. хим. наук / С.И. Сирицо. Москва, 2008. -23 с.

85. Хасанов, B.B. Анализ водорастворимых витаминов методом ионообменной хроматографии / В.В. Хасанов, К.А. Дычко, Г.Л. Рыжова // Химико-фармацевтический журнал. 1998. - Т. 32. - № 2. - С. 45-46.

86. Ja-an, А.Н. Using Liposomal Fluorescent Biolabels To Develop an Immunoaffinity Chromatographic Biosensing System for Biotin / A.H Ja-an, Ch.-H. Hung // Anal. Chem. 2008. - V. 80. - № 16. - P. 6405-6409.

87. ЮО.Игольникова, О.П. / О.П. Игольникова, H.M. Ахмедходжаева, А.Н. Свечникова // Фармацевтический журнал. 1992. - № 3. - С. 92-93.

88. Navas-Diaz, A. Thin-layer chromatography and fibre-optic fluorimet-ric quantitation of thiamine, riboflavin and niacin / A. Navas-Diaz, A. Guirado-Paniagua, F. Garcia-Sanchez // J. Chromatogr. A. 1993. - V. 655. - № 1. - p. 3943.

89. Postaire, E. Simultaneous, determination of water-soluble vitamins by over-pressure layer chromatography and photodensitometric detection / E. Postaire, M. Cisse, M.D. Le Hoang // J. Pharm. Sci. 1991. - V. 80. - № 4. - P. 368-370.

90. Стурова, И.В. Определение витамина Bi в растительных премиксах методами зонного капиллярного электрофореза и флуориметрии / И.В. Стурова, Н.В. Комарова, Н.Ю. Страшилина, А.В. Калач // Химия растительного сырья. 2007. - № 4. - С. 121-122.

91. Jegle, U. Separation of water-soluble vitamins via high-performance capillary electrophoresis / U. Jegle // J. Chromatogr. A. 1993. - V. 652. - № 2. -P. 495-501.

92. Roberts, M.A. Liposome Behavior in Capillary Electrophoresis / M.A. Roberts, L. Locascio-Brown, W.A. MacCrehan, R.A. Durst // Anal. Chem. 1996.- V. 68. № 19. - P. 3434-3440.

93. Zhong, M. Dual-Electrode Detection for Capillary Electrophoresis /Electrochemistry / M. Zhong, J. Zhou, S.M. Lunte, D.M. Giolando // Anal Chem.- 1996. V. 68. - № 1. - P. 203-207.

94. Fotsing, L. Determination of six water-soluble vitamins in a pharmaceutical formulation by capillary electrophoresis / L. Fotsing, M. Fillet, I. Bechet // J. pharm. belg. 1995. - V. 50. - № 4. - P. 332.

95. Sanchez, J.M. Сравнение применения мицеллярной и микроэмульсионной электрокинетической хроматографии для определения водо- и жирорастворимых витаминов / J.M. Sanchez, V. Salvado // J. Chromatogr. A. -2002. 950. - № 1-2. - P. 241-247.

96. Fujiwara, S. Analysis of water-soluble vitamins by micellar electroki-netic capillary chromatography / S. Fujiwara, S. Iwase, S. Honda // J. Chromatogr. 1988. - V. 447. - № 1. - P. 133-140:

97. Boonkerd, S. Separation and simultaneous determination of the components in an analgesic tablet formulation by micellar electrokinetic chromatography / S. Boonkerd, M.R. Detaevernier, Y. Michotte // J. Chromatogr. A. 1994. -V. 670.-№ 1-2.-P. 209-214.

98. Wang, Y. определения витаминов В п, Вб и С в таблетках витаминов методом мицеллярной электрофоретической капиллярной хроматографии / Y. Wang, Y. Deng// Univ.Natur. Sci.Ed. 2000. - V. 40. - № 6. - P. 1260- 4 1264.

99. Su, S-C. / S-C. Su, S.-S. Chou, C.-H. Liu // J.Food Sci. 2001. -V. 66. - № 1. - P.10-14.

100. Определение свободных форм водорастворимых витаминов в премиксах, витаминных добавках, концентратах и смесях: ГОСТ Р 527412007. Введ 2008-07-01. - М., 2007. - 23с.

101. Peng, W.F. / W.F. Peng, Н.М. Li, Е.К. Wang // J. Electroanal. Chem. -1994. V. 375. - № 1-2. - P. 185-192.

102. Halvatzis, S.A. / S.A. Halvatzis, M.M. Timotheou-Potamia, C.E. Ef- x stathiou // Talanta. 1993. - V. 40. - № 8. - P. 1213-1220.

103. Halvatzis, S.A. Kinetic-potentiometric determination of ascorbic acid, biotin, pyridoxine hydrochloride, thiamine hydrochloride with N-bromosuccinimide / S.A. Halvatzis, M. Timotheou-Potamia // Anal. chim. acta. -1989. V. 227. - № 2. - P. 405-419.

104. Femandes, R. Multi-task flow system for potenciometric analysis / R. Fernandes, M.G. Sales // J.Pharm. and Biomed. Anal. 2001. - V.25. - № 5-6. - P. 713-720.

105. Бакибаев, А.А. Вольтамперометрическое определение пиридок-сина (витамина В6) на модифицированном платиновом электроде / А.А. Бакибаев, А.С. Боев, Е.И. Короткова // Химия и химическая технология. 2008 . -Т. 51.-№5.-С. 21-24.

106. Kadara, R.O. Disposable Sensor for Measurement of Vitamin B2 in Nutritional Premix, Cereal, and Milk Powder / R.O.Kadara, B.G.D. Haggett, В.J. Birch //J. Agric. Food Chem. 2006. - V. 54. - № 14. - P. 4921-4924.

107. Ивановская, E. А. Определение аскорбиновой кислоты в биологических средах методом инверсионной вольтамперометрии / Е.А. Ивановская, Р.С. Карпов // Журнал аналитической химии. 1 997. - Т.52. - №7. -С.773-774.

108. Villiamil, MJ.F. Applications of adsorptive stripping voltammetry for the trace analysis of metals, pharmaceuticals and biomolecules / M.J.F.Villiamil, A.J. Miranda-Ordieres, A. Costa-Garcia // Anal Chim. Acta. 1993. - V. 273. - № 1-2.-P. 377-382.

109. Hai-Ying, Gu. Electrocamical behavior and simoltaneous determination of vitamin B2, B6 and С / Gu Hai-Ying, Yu Ai-Hin // Anal.Lett. -2001. V. 34. -№> 13.-P. 2361-2374.

110. Jaiswal, P.V. Voltammetric behavior of menadione in surfactant media and its determination in sodium dodecyl sulfate surfactant system / V. Jaiswal Priua, I. Vijaykumar // Chem.Soc.Jap. 2001. - V.74. - №11. - P. 2053-2057

111. Xi-ming, Jang. Anhui shifan daxue xuebao / Jang Xi-ming, Fang , Zhao, Tao Hai-sheng 11 J. Anhui Norm. Univ. Natur. Sci. 2006. - V. 29. - № 5. -P. 463-466.

112. Shakkthiver, P. / P. Shakkthiver, Ch. Shen-Ming // Biosens. And Bio-electron. 2007. - V. 22. - № 8. - P. 1680-1687.

113. Анисимова, Л.С.Определение водорастворимых витаминов Bi и В2 в пищевых продуктах и кормах / Л.С. Анисимова, Е.В. Михеева // Аналитика Сибири и Дальнего Востока-2000: VI конференция: Тез. докл. (Новосибирск, 21-24 ноября 2000). - 2000. - С. 367.

114. Анисимова, Л.С. Определение рибофлавина в витаминизирован- v ных подкормках и кормах вольтамперометрическим методом / Л.С. Анисимова, Е.В. Михеева, В.Ф. Слипченко // Журнал аналит. химии. 2001. - Том 56. - № 7. - С. 739-744.

115. Михеева, Е.В. Вольтамперометрическое определение витаминов в многокомпонентных сухих витаминизированных смесях: автореф. дис. . .канд. хим. наук / Е.В. Михеева. Томск, 2005. - 23с.

116. Пат. № 2090887 Российская Федерация, МКИ G 01 N 27/26 / Анисимова Л.С. и др..

117. Пат. № 2084885 Российская Федерация, МКИ G 01 N 27/26 / Анисимова Л.С. и др..

118. Стачинский, А.Н. Технология и анализ шипучих таблеток с витаминами С и Вб / А.Н. Стачинский, Т.Ю. Арчинова, С.Н. Шомахова // Фармация. 1988. - Т. 37. - № 3. - С. 29-31.

119. Кока, И.П. Количественное определение лекарственных препаратов в смесях с помощью гипойодита натрия / И.П. Кока // Фармация. 1988. -Т. 37. - № 2. - С. 74-76.

120. Safarik, L. / L. Safarik // Cesk. Farm. 1989. - V. 38. - № 10. - P. 443-445.

121. Менькин, В. Производство премиксов / В. Менькин // Комбикор- 4 ма.-2000. №5.-С. 31-32.

122. Скурихин, В.Н. Витаминное питание сельскохозяйственных животных и птиц / В.Н. Скурихин, С.В. Шабаев. М., 1998. - 46 с.

123. Миончинский, П.Н. Производство комбикормов / П.Н. Миончин-ский, JI.C Кожарова. М.: Агропомиздат, 1991. - 288 с.

124. Спиридонов, И.П. Кормление сельскохозяйственной птицы от А до Я / И.П. Спиридонов, А.Б. Мальцев, В.М. Давыдов. Омск: Областная типография, 2002. - 704с.

125. Околелова, Т.М Витаминно-минеральное питание сельскохозяй- 4 ственной птицы / Т.М Околелова, А.В. Кулаков, С.А. Молоскйн. М., 2000. -78с.

126. Андрианова, Е.Н. Качество премикса для птицы в зависимости от наполнителя: автореф. дис. .канд. с.-х. наук / Е.Н. Андрианова. Сергиев Посад, 2007. - 23 с.

127. Петрухин, И.В. Применение химических и биологических веществ в кормлении птицы / И.В. Петрухин. М.: Россельхозиздат, 1972. -239 с.

128. Дворкин, В.И. Метрология и обеспечение качества количественного химического анализа / В.И. Дворкин. М.: Химия, 2001. - 261с.

129. Шараф, М.А. Хемометрика / М.А. Шараф, Д.Л. Иллмэн, Б.Р. Ко-вальски.- Ленинград: Химия, 1989. 272 с.

130. Гмурман, В.Е. Теория вероятностей и математическая статистика / В.Е. Гмурман. М.: Высшая школа, 2003. - 298 с.ч.

131. Бережная, Е. В. Математические методы моделирования экономических систем / Е.В. Бережная, В. И. Бережной. М.: Финансы и статистика, 2001.-368 с.

132. Ермаков, С. М. Методы Монте-Карло и смежные вопросы / С.М. Ермаков. М.: Наука, 1971. - 262 с.

133. Эсбенсен, Ким. Анализ многомерных данных / Ким Эсбенсен. -Черноголовка: Изд-во ИПХФ РАН, 2005. 158 с.

134. Сапрыкин, Л.В. Динамическое модифицирование в практике ВЭЖХ / Л.В. Сапрыкин // Химический анализ. 2005. - № 8. - С. 20-36.158. www.bischoff.com159.www.agilent.com

135. Продукция комбикормовая. Термины и определения: ГОСТ Р 51848-2001.-Введ. 2004-01-01.-М., 2001.-14 с.1. УТВЕРЖДАЮ:

136. Зам. директора по науке, ^ -у, ^канд. с/х наук1. Акт внедрения

137. Зав. лабораторией физиологии и биохимических методов анализа1. ГНУ «СибНИИП» РАСХН1. Л.А.Богданова1. Старший научный сотрудникотдела кормления ГНУ «СибНИИП» РАСХН1. О.А.Ядрищенская

138. Ведущий научный сотрудник ГНУ «СибНИИП» РАСХН