Улучшение репродуктивных исходов программ экстракорпорального оплодотворения с селекцией сперматозоидов по мембранному дзета-потенциалу тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 00.00.00, кандидат наук Гамидова Парвин Сафаил кызы

• Гамидова Парвин Сафаил кызы
• кандидат наук
• 2025

Оглавление диссертации кандидат наук Гамидова Парвин Сафаил кызы

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОСОБЕННОСТИ ЛЕЧЕНИЯ ЖЕНСКОГО БЕСПЛОДИЯ, ВЫЗВАННОГО НАРУШЕНИЯМИ СПЕРМАТОГЕНЕЗА У СУПРУГА (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)

1.1. Фактор мужского бесплодия и его влияние на успех программы лечения бесплодия методами ВРТ

1.2. Влияние нарушений сперматогенеза на генетический статус преимплантационных эмбрионов в программах лечения бесплодия методами ВРТ

1.3. Нарушения сперматогенеза как причина ранних репродуктивных потерь в программах ВРТ

1.4. Возраст родителей и ранние репродуктивные потери в программах ВРТ

1.5. Возможности улучшения исходов программ лечения бесплодия методами ВРТ путем инновационных подходов к селекции мужских половых клеток

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Материал и дизайн исследования

2.2. Методы обследования мужчин и женщин в диссертационном исследовании

2.3. Проведение программы лечения бесплодия методами вспомогательных репродуктивных технологий

2.4. Селекция сперматозоидов в программах лечения бесплодия в исследовании

2.5. Оценка молекулярно-биологического профиля фертильности отобранных сперматозоидов у бесплодных мужчин

2.5.1.Оценка зрелости хроматина сперматозоидов мужчин с бесплодием

2.5.2. Анализ ДНК-фрагментации мужских половых клеток

2.5.3. Трансмиссионная электронная микроскопия сперматозоидов человека

2.6. Статистическая обработка данных. Анализ результатов

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Клинико-анамнестические данные супружеских пар, включенных в исследование на первом этапе

3.2. Анализ эффективности селекции сперматозоидов по мембранному

дзета-потенциалу в программах ВРТ в общей когорте пациентов

3.3. Анализ исходов программ ВРТ у супружеских пар с изолированным фактором мужского бесплодия

3.4. Клинико-анамнестические характеристики пациентов с ранними репродуктивными потерями в анамнезе

3.5. Оценка эмбриологической и клинической эффективности программ лечения бесплодия в группах с ранними репродуктивными потерями беременности в анамнезе

3.6. Оценка статуса фертильности мужских гамет, отобранных по мембранному дзета-потенциалу

ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

АЛГОРИТМ ДИФФЕРЕНЦИРОВАННОГО ВЕДЕНИЯ СУПРУЖЕСКИХ ПАР С БЕСПЛОДИЕМ И РАННИМИ РЕПРОДУКТИВНЫМИ ПОТЕРЯМИ БЕРЕМЕННОСТИ В АНАМНЕЗЕ В ПРОГРАММАХ ВРТ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Улучшение репродуктивных исходов программ экстракорпорального оплодотворения с селекцией сперматозоидов по мембранному дзета-потенциалу»

ВВЕДЕНИЕ АКТУАЛЬНОСТЬ ТЕМЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

Стратегия развития медицинской науки в Российской Федерации на период до 2025 г., утвержденная распоряжением Правительства Российской Федерации от 28 декабря 2012 г. №2580-р, предполагает развитие и поддержание технологии лечения бесплодия методами вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ), включая разработку инновационных подходов к лечению и совершенствование имеющихся технологий. Бесплодие в паре вызывает серьезные психологические и социальные проблемы и ложится значительным экономическим бременем на пациентов и систему здравоохранения. Только ранняя диагностика и надлежащее эффективное лечение могут смягчить эти факторы.

В России число супружеских пар с бесплодием к 2025 году достигло критического уровня. Согласно данным формы №12 Федерального статистического наблюдения, каждая шестая пара остается без детей в силу невозможности зачатия, даже при использовании ВРТ.

Актуальность лечения женского бесплодия в сочетании с мужским фактором в настоящее время не вызывает сомнения. Мужской фактор играет ключевую роль в структуре бездетного брака, однако его значимость недооценивается на социальном и медицинском уровнях. Журнал The Lancet в 2021 году опубликовал эпидемиологические данные о распространении именно мужского фактора бесплодия, назвав их угрожающими [1]. Исследование глобального бремени болезней показало, что в период с 1990 по 2017 год стандартизованная по возрасту распространенность бесплодия ежегодно увеличивалась на 0,370% у женщин и на 0,291% у мужчин. Согласно современным публикациям, мужской фактор бесплодия присутствует у 50% всех супружеских пар, обращающихся в лечебные учреждения для использования методов ВРТ [6,29,21].

Применение ВРТ значительно повысило вероятность супружеских пар иметь генетически родных детей. В последние десятилетия интрацитоплазматическая инъекция сперматозоидов (ИКСИ) стала наиболее востребованным методом ВРТ, особенно при наличии мужского фактора. Однако эта технология обходит барьеры естественного отбора, поскольку селективные процессы в женском репродуктивном тракте заменяются выбором эмбриолога, основанном на морфологических критериях. Именно поэтому целесообразность разработки новых подходов к селекции мужских гамет для оплодотворения не вызывает сомнений.

Выбор сперматозоидов хорошего качества — один из важных шагов к успешному исходу программ вспомогательных репродуктивных технологий. Выбор зрелых сперматозоидов, необходимых для проведения ИКСИ, в настоящее время основан на определении подвижности и морфологии имеющихся образцов спермы. Образцы эякулята у бесплодных пациентов могут иметь функциональные или морфологические дефекты. Обычное определение качества спермы (концентрация, подвижность, морфология) может не отражать патологические изменения самих половых клеток. Селекция сперматозоидов для оплодотворения может и должна быть улучшена другими методами.

С развитием молекулярно-генетических методов исследования

внимание ученых привлекла технология, основанная на анализе дзета-

потенциала мембраны сперматозоидов, которая позволяет улучшить

качество отбора и повысить успешность экстракорпорального

оплодотворения (ЭКО). Дзета-потенциал — это электростатический

потенциал на поверхности клетки, возникающий из-за разницы зарядов

между мембраной клетки и окружающей средой. У сперматозоидов

отрицательный заряд поверхности связан с наличием сиаловых кислот и

других заряженных молекул в мембране. Здоровые зрелые сперматозоиды

обладают более выраженным отрицательным зарядом, чем поврежденные

5

или незрелые клетки [48, 70]. Важно, что поверхностный заряд мембраны сперматозоида не связан с такими показателями эякулята, как концентрация, подвижность и морфология. Недостатки стандартного метода центрифугирования эякулята в градиенте плотностей заключаются в том, что обычное определение качества спермы перед оплодотворением может не отражать патологические изменения сперматозоидов, механическое воздействие на мужские половые клетки может снизить их качество и посредством индукции оксидативного стресса отразиться на целостности генетического материала. Именно поэтому исследователи обращают внимание на новые, более бережные методы отбора и пробоподготовки эякулята в программах лечения бесплодия, к которым можно отнести и дзета-потенциал. В научной литературе показано, что отобранные по дзета-потенциалу сперматозоиды обладают более высокой целостностью хроматина и являются более пригодными для оплодотворения [42]. Использование именно этих мужских гамет для введения в ооцит в рамках ВРТ может оказаться эффективным методом повышения качества лечения. Однако до настоящего времени не определена группа пациентов, которым показана данная технология отбора мужских половых клеток. В современной научной литературе имеются противоречивые данные по эффективности использования селекции сперматозоидов по мембранному дзета-потенциалу в разных когортах супружеских пар с фактором мужского бесплодия [12,42,43]. По данным журнала Fertility and Sterility (2021), метод снижает уровень фрагментации ДНК на 15% по сравнению с традиционными методами [65, 71, 68]. Особенно эффективен для пациентов с олигозооспермией, астенозооспермией или высоким уровнем оксидативного стресса. При этом другие исследования не подтвердили разницы в частоте наступления беременности при использовании отбора сперматозоидов по мембранному дзета-потенциалу [37].

Достоверно показано, что можно отобрать сперматозоиды с высоким отрицательным мембранным потенциалом, которые будут обладать меньшей ДНК-фрагментацией и более зрелым хроматином [65, 71]. Однако до настоящего времени не выработана тактика применения данного вида селекции, нет исследований, проведенных на выделенной когорте мужчин и женщин с бесплодием разного генеза.

В связи с вышеизложенным, представляется актуальным и крайне перспективным определение значимости селекции мужских половых клеток по мембранному дзета-потенциалу в результативности программы ВРТ и отработка показаний к ее использованию.

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ

Улучшение исходов программ лечения бесплодия методами вспомогательных репродуктивных технологий у супружеских пар с фактором мужского бесплодия в виде легкой и средней степени нарушений сперматогенеза с помощью технологии отбора сперматозоидов по мембранному дзета-потенциалу при выполнении процедуры ИКСИ.

ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ

1. Оценить клинико-анамнестические данные у обследуемых супружеских пар с легкой и средней степенью нарушения сперматогенеза, проходящих лечение бесплодия методами ВРТ.

2. Провести анализ эффективности применения селекции сперматозоидов по мембранному дзета-потенциалу в программах лечения бесплодия методами ВРТ у супружеских пар с мужским фактором бесплодия в виде легкой и средней степени нарушений.

3. Проанализировать эффективность применения селекции сперматозоидов по мембранному дзета-потенциалу в программах лечения бесплодия методами ВРТ у супружеских пар с изолированным фактором мужского бесплодия в виде легкой и средней степени нарушений сперматогенеза.

4. На основании клинических и эмбриологических показателей выявить супружеские пары с большей эффективностью лечения бесплодия методами ВРТ с применением селекции сперматозоидов по мембранному дзета-потенциалу.

5. Проанализировать молекулярно-биологические особенности мужских половых клеток, отобранных по мембранному дзета-потенциалу, в программах лечения бесплодия методами ВРТ.

6. Разработать алгоритм дифференцированного подхода к ведению супружеских пар с мужским фактором бесплодия в виде легкой и средней степени нарушений сперматогенеза с учетом показаний к проведению селекции сперматозоидов по мембранному дзета-потенциалу.

НАУЧНАЯ НОВИЗНА

Впервые показана эффективность и определена значимость применения селекции сперматозоидов по мембранному дзета-потенциалу в группе супружеских пар с ранними репродуктивными потерями в анамнезе и легкой и средней степенью нарушений сперматогенеза, проходящих лечение бесплодия методами ВРТ. С помощью современных молекулярно-биологических методов обоснован клинический эффект снижения ранних репродуктивных потерь. С помощью трансмиссионной электронной микроскопии (ТЭМ) исследована ультраструктура мужских половых клеток, отобранных по дзета-потенциалу, оценена зрелость хроматина сперматозоидов. Показано, что процедура селекции сперматозоидов по дзета-потенциалу позволяет отобрать субпопуляцию мужских гамет с высоким отрицательным мембранным потенциалом, обладающих более зрелым хроматином и нормальной морфологией.

ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ

Показано, что метод селекции сперматозоидов по мембранному дзета-потенциалу может быть рекомендован супружеским парам с бесплодием и ранними репродуктивными потерями беременности в анамнезе и легкой и средней степенью нарушений сперматогенеза в программах ВРТ для повышения эффективности лечения. Данная технология отбора мужских гамет позволяет индивидуализировать процесс лечения пациентов с бесплодием.

Селекция гамет по мембранному дзета-потенциалу позволяет улучшить эмбриологические показатели программы экстракорпорального оплодотворения, увеличить частоту формирования бластоцист хорошего и отличного качества у пациентов с мужским фактором бесплодия, что, в конечном счете, приводит к снижению частоты неудачных попыток ВРТ, частоты неразвивающихся беременностей и расширяет возможности эмбриолога при отборе лучших сперматозоидов для оплодотворения при проведении ВРТ, основываясь не только на их морфологических признаках.

ПОЛОЖЕНИЯ, ВЫНОСИМЫЕ НА ЗАЩИТУ

1. При изолированном факторе мужского бесплодия применение технологии отбора сперматозоидов по мембранному дзета-потенциалу способствует повышению частоты наступления беременности с 36,6% до 47,6% за счет формирования бластоцист отличного и хорошего качества, тогда как при сочетанных формах бесплодия супружеской пары применение технологии отбора сперматозоидов по мембранному дзету-потенциалу в программах ЭКО/ИКСИ при легкой и средней степени патозооспермии не улучшает клинические и эмбриологические результаты лечения.

2. Селекция сперматозоидов по мембранному дзета-потенциалу позволяет статистически значимо увеличить число бластоцист отличного и

хорошего качества при оплодотворении методом ИКСИ у супружеских пар с ранними репродуктивными потерями беременности в анамнезе и патозооспермией средней и легкой степени выраженности (Ме ^1; Q3): с 2 (1;3) до 3 (2;4), р<0,001).

3. У супружеских пар с легкой и средней степенью выраженности патозооспермии в программах лечения бесплодия методами вспомогательных репродуктивных технологий использование селекции сперматозоидов по мембранному дзета-потенциалу позволяет статистически значимо снизить ранние репродуктивные потери с 33,3% до 4,5% (р=0,03; ОР 0,13; 95% ДИ 0,01; 1,00).

4. Селекция сперматозоидов по мембранному дзета-потенциалу в программах ЭКО/ИКСИ позволяет отобрать для оплодотворения мужские половые клетки с более зрелым хроматином, что объясняет достоверное снижение ранних репродуктивных потерь беременности. Доля сперматозоидов с незрелым хроматином при отборе по дзета-потенциалу снижается с 24,43% в нативном эякуляте до 16,3%.

ЛИЧНЫЙ ВКЛАД АВТОРА

В рамках диссертационного исследования соискатель проявляла высокую научную инициативу и профессионализм. Он лично участвовала в формировании концепции научной работы, определении стратегических целей и ключевых исследовательских задач. На протяжении всего научного процесса исследователь осуществляла комплексное клиническое сопровождение супружеских пар в программах вспомогательных репродуктивных технологий. Профессиональная деятельность соискателя включала полный цикл медицинского сопровождения — от первичного обследования пациентов до переноса эмбриона в полость матки, включая назначение персонализированной лекарственной терапии.

Соискатель самостоятельно интерпретировала клинические и лабораторные данные, проводила статистическую обработку первичной медицинской документации, научно обосновывала полученные результаты с позиции современных международных стандартов репродуктивной медицины. Значительным вкладом в научную коммуникацию стала личная подготовка и публикация статей в профессиональных рецензируемых журналах, что подтверждает высокий научный потенциал исследователя.

СООТВЕТСТВИЕ ДИССЕРТАЦИИ ПАСПОРТУ НАУЧНОЙ

СПЕЦИАЛЬНОСТИ

Научные положения диссертации полностью соответствуют паспорту специальности 3.1.4 «Акушерство и гинекология». Результаты проведенной диссертационной работы соответствуют области исследования специальности, конкретно пунктам 4 и 5 паспорта «Акушерство и гинекология».

СТЕПЕНЬ ДОСТОВЕРНОСТИ ПОЛУЧЕННЫХ РЕЗУЛЬТАТОВ

Изложенные в настоящем диссертационном исследовании положения, выводы и рекомендации являются достоверными, поскольку основаны на достаточной выборке пациентов с выполнением описанных критериев включения/исключения, статистическая обработка полученных данных выполнена корректными методами. Технологии оценки качества мужских половых клеток, применяемые в работе, являются современными и используются в исследованиях зарубежных и российских авторов.

Методология работы заключалась в системном и комплексном подходе к отбору супружеских пар с бесплодием в программах ВРТ, анализе клинико-анамнестических данных, эмбриологических протоколов и их сопоставлении с мировыми и российскими данными. Достоверность также обеспечивается последовательным и логичным формулированием

задач и их решением с использованием убедительных методов.

11

АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ

Основные положения диссертационной работы доложены на XXXIII Ежегодной международной конференции Российской ассоциации репродукции человека (Нижний Новгород, 2023); XIV Всероссийском научном форуме «Мать и дитя» (Москва, 2023). Материалы диссертационной работы также обсуждены на межклинической конференции Института репродуктивной медицины (20.06.2024) и апробационной комиссии ФГБУ «НМИЦ АГП им. В.И. Кулакова» Минздрава России (02.06.2025).

МЕТОДОЛОГИЯ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

В процессе выполнения диссертационного исследования был выполнен критический анализ отечественных и зарубежных работ в области применения различных методов отбора сперматозоидов при лечении бесплодия методами ВРТ. На основании анализа были сформулированы цель и задачи исследования, а также подобраны критерии включения и исключения супружеских пар в исследование, была определена группа пациентов, наиболее перспективных в плане улучшения исходов лечения. В работе научно и клинически обосновано использование селекции сперматозоидов по мембранному дзета-потенциалу при ранних репродуктивных потерях и убедительно описан вклад фактора мужского бесплодия в невынашивание.

ВНЕДРЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ В

ПРАКТИКУ

Метод селекции сперматозоидов по мембранному дзета-потенциалу у пар в ранними репродуктивными потерями включен в клинические рутинные протоколы ведения супружеских пар с бесплодием в отделении вспомогательных технологий в лечении бесплодия имени профессора Б.В. Леонова ФГБУ «НМИЦ АГП им. В.И. Кулакова» Минздрава России.

В контексте научно-методической деятельности проводится разработка комплексных учебно-методических материалов для профессионального совершенствования врачей и эмбриологов. Методические пособия интегрируют инновационную методику селекции мужских гамет по мембранному дзета-потенциалу в образовательный процесс Научно-образовательного центра вспомогательных репродуктивных технологий имени Фредерика Паулсена-старшего, функционирующего на базе Национального медицинского исследовательского центра акушерства, гинекологии и перинатологии имени академика В.И. Кулакова Министерства здравоохранения Российской Федерации. Разработанные материалы направлены на повышение профессиональной компетентности специалистов в области репродуктивной медицины и внедрение передовых методик вспомогательных репродуктивных технологий в практическое здравоохранение.

ПУБЛИКАЦИИ

В научной печати, входящей в Перечень рецензируемых научных изданий, в которых должны быть опубликованы основные научные результаты диссертаций на соискание ученой степени кандидата наук, опубликовано 4 статьи.

СТРУКТУРА И ОБЪЕМ ДИССЕРТАЦИИ Диссертационная работа представлена в традиционном виде, содержит оглавление, список сокращений, введение, обзор современной литературы, описание собственных результатов, обсуждение полученных данных, выводы, практические рекомендации и список литературы. Диссертационное исследование представлено на 122 страницах машинописного текста, иллюстрировано 9 рисунками, 23 таблицами. Библиографический указатель включает 160 научных работ, из них 33 отечественные публикации и 127 зарубежные.

ГЛАВА 1. ОСОБЕННОСТИ ЛЕЧЕНИЯ ЖЕНСКОГО БЕСПЛОДИЯ, ВЫЗВАННОГО НАРУШЕНИЯМИ СПЕРМАТОГЕНЕЗА У СУПРУГА (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)

Лечение мужского и женского бесплодия на современном этапе

развития медицины невозможно представить без вспомогательных

репродуктивных технологий (ВРТ). Использование экстракорпорального

оплодотворения позволило многим супружеских парам по всему миру

познать радость материнства и отцовства. Однако остаются тревожными

повышенная частота неразвивающихся беременностей, повторных

нарушений имплантации эмбрионов отличного качества в полости матки и

ранние репродуктивные потери у супружеских пар с разными типами

бесплодия. Именно на улучшение данных показателей обращены усилия

научного сообщества, поскольку рассматриваемые факторы часто связаны

не только с женским бесплодием, но и нарушениями сперматогенеза у

партнера.

1.1. Фактор мужского бесплодия и его влияние на успех программы лечения бесплодия методами ВРТ

Вклад мужского фактора в проблему бесплодия составляет в настоящее время примерно 50% [1, 7, 54]. За несколько десятилетий с момента внедрения в практику методов ВРТ был достигнут значительный прогресс в преодолении мужского бесплодия [93, 140]. В частности, развитие методов микроманипуляций с гаметами, таких как интрацитоплазматическая инъекция сперматозоида в ооцит (ИКСИ), существенно снизило планку требований к мужским половым клеткам при применении ВРТ. Формально, ИКСИ не требует от сперматозоида наличия прогрессивной подвижности, способности распознавать яйцеклетку и реализовывать акросомальный экзоцитоз, в отличие от естественного зачатия, внутриматочной инсеминации и классического экстракорпорального оплодотворения [59]. Возможность использования ИКСИ практически при любых отклонениях в спермограмме сделала этот

метод настолько популярным, что он зачастую применяется даже без учёта этиологии мужского бесплодия и особенностей клинического случая [70]. В Австралии, например, ИКСИ применяется почти в двух третях всех циклов ВРТ, что говорит о пренебрежении показаниями и, следовательно, чрезмерном использовании метода [103]. Несмотря на это, результативность ИКСИ во всём мире остаётся скромной: частота наступления клинической беременности и частота рождения детей в пересчёте на один цикл овариальной стимуляции составляют 30,8% и 26%, соответственно [108]. К другим спорным моментам можно отнести гипотезу о повышении частоты аномалий развития у потомства, зачатого в результате ИКСИ, вследствие полного игнорирования механизмов естественной селекции сперматозоида, а также риск вертикального распространения генетически обусловленного мужского бесплодия. С одной стороны, ИКСИ нельзя применять бездумно у всех бесплодных пар, и свидетельствует о необходимости более информативной диагностики мужского бесплодия, стратификации пациентов и разработки методов лечения бесплодных мужчин, что лежит в зоне ответственности урологов-андрологов. С другой стороны, это должно подтолкнуть репродуктологов и клинических эмбриологов к разработке новых эффективных методов отбора сперматозоидов для ИКСИ, а также на более активное применение и изучение уже существующих [123].

В основе традиционного подхода к диагностике мужского бесплодия

лежит принцип, согласно которому фертильность мужчины можно

оценить по описанию характеристик его семенной жидкости, среди

которых наиболее важны концентрация, подвижность и морфология

сперматозоидов. Однако, такой подход не позволяет судить об этиологии

бесплодия и функциональной способности мужских гамет, а значит и не

даёт возможность прогнозировать результативность ВРТ [21, 115].

Несмотря на постоянное техническое и методологическое

совершенствование процедур для анализа эякулята, предлагаемых

15

Всемирной организацией здравоохранения (ВОЗ), значительная доля бесплодных мужчин может иметь нормальные показатели спермограммы согласно официальным критериям [48, 47, 58, 71]. Подобные случаи необъяснимого бесплодия свидетельствуют о наличии разнообразных недооценённых механизмов патогенеза, которые не учитываются в клинической практике и выборе метода ВРТ, а также об относительно низкой чувствительности стандартных алгоритмов андрологического обследования [115].

Применение технологии ультравысокого оптического увеличения в сочетании с машинным обучением сделало возможной углубленную автоматизированную оценку морфологии сперматозоидов - MSOME («motile sperm organelle morphology examination» - «исследование морфологии органелл подвижных сперматозоидов»). Потенциально MSOME способно привести к стандартизации описания морфологических аномалий сперматозоидов, но его практическая ценность не ясна, поскольку достоверно неизвестно, какие именно структурные элементы определяют функциональную компетентность этих клеток. Использование анализа сперматозоидов на сверхвысоком разрешении с машинным обучением в тандеме с ИКСИ (интрацитоплазматическая инъекция отобранного по морфологии сперматозоида - IMSI) является многообещающим в плане оптимизации результатов ВРТ [76]. Однако, доказательная база в отношении влияния IMSI на показатели клинической беременности, невынашивания и рождения детей остаётся слабой. Избирательная окраска, позволяющая выделять сперматозоиды по ключевым структурным и качественным признакам (жизнеспособность, акросомальный статус, капацитация, митохондриальный мембранный потенциал, пероксидация липидов мембраны, апоптоз, целостность ДНК), в настоящее время в клинической практике применяться не может, так как приводит к гибели или повреждению клеток, из-за чего их нельзя применять для ВРТ.

Некоторыми специалистами возлагаются надежды на детальное описание подвижности сперматозоидов. С этой целью предложена оценка кинетики сперматозоидов методом компьютер-ассистированного анализа спермы (computer-aided semen analysis - CASA). Известно, что существует положительная корреляция между долей прогрессивно подвижных сперматозоидов и результатом их взаимодействия с цервикальной слизью [106]. Однако, профиль подвижности сперматозоидов не является статичным. Под воздействием физиологических условий, в которых они оказываются по мере продвижения к месту оплодотворения, они могут либо быть прогрессивно подвижными, либо полностью останавливаться в перешейке фаллопиевой трубы, либо инициировать асимметричные движения хвостом с высокой частотой и амплитудой (гиперактивация) [134, 154]. CASA позволяет дифференцировать эти паттерны передвижения сперматозоидов, но их переменчивый характер не позволяет отобрать наилучший сперматозоид для ВРТ по кинетическим признакам. Этим же можно объяснить то, почему метод «всплытия» сперматозоидов не позволяет улучшить репродуктивные результаты по сравнению с методом центрифугирования в градиенте плотности [41]. Разрабатываются новые технологии для оценки подвижности, которые позволяют выполнять трёхмерную реконструкцию траектории движения сперматозоидов, отслеживая расположение хвоста в реальном времени. Некоторые методы дают возможность одновременно оценивать морфологию движущихся сперматозоидов [100]. Успешно была предпринята попытка картировать профиль рефракционного индекса головки движущегося сперматозоида с помощью высокоскоростной голографической системы [64]. Это позволило описать не только характер передвижения сперматозоида, но и сохранить детальные волюметрические измерения его органелл без окрашивания. Подобные технологии считают многообещающими, но пока находятся на слишком раннем этапе развития,

чтобы их можно было применять в рутинной клинической практике для отбора сперматозоидов для ВРТ.

Также как и соматические клетки, сперматозоиды человека имеют на своей поверхности сложно устроенный гликокаликс с разнообразными углеводными цепочками, связанными с белками и липидами клеточной мембраны [90]. По мере развития сперматозоида происходит ремоделирование гликокаликса, в результате которого мужские гаметы, успешно прошедшие все этапы созревания в придатке яичка, содержат больше гликопротеинов с терминальными остатками сиаловой кислоты [160]. «Сиаловый градиент» является маркером функциональной зрелости сперматозоида, а изменения гликокаликса, как считается, играют иммунологическую протективную роль в женском репродуктивном тракте. Углеводные цепочки маскируют аллогенные свойства сперматозоида и приводят к увеличению отрицательного заряда на его поверхности. Эта электрохимическая особенность лежит в основе методик электрофоретической сепарации, отделяющей зрелые сперматозоиды от контаминирующих элементов, таких как незрелые половые клетки, бактерии и лейкоциты [118]. Одна из подобных систем вышла на рынок под коммерческим наименованием «Felix Sperm Separation System» и позволяет выделять суспензию жизнеспособных, морфологически нормальных сперматозоидов с хорошей подвижностью и низкой степенью повреждения ДНК [141, 128]. Этот метод совместим с биопсийным материалом и криоконсервированными сперматозоидами. Изолированные с помощью электрофореза сперматозоиды были успешно использованы для достижения беременности, в результате которой родился здоровый ребёнок.

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Гамидова Парвин Сафаил кызы, 2025 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Бесплодный брак / Т.А. Назаренко, А.М. Бирбкова, Н.П. Макарова [и др.] //Клинические задачи и их решение. - 2023. - С. 144.

2. Влияние внеклеточных везикул фолликулярной жидкости с различным профилем миРНК на функциональные свойства сперматозоидов человека / А.П. Сысоева, О.С. Непша, Н.П. Макарова [и др.] // Клеточные технологии в биологии и медицине -2022. - №2 - С.117-126.

3. Влияние преимплантационного генетического тестирования на результаты программ вспомогательных репродуктивных технологий у супружеских пар с мужским фактором бесплодия / Н.П. Макарова, Н.Н. Лобанова, Е.В. Кулакова [и др.] // Акушерство и гинекология. -2021. - № 11. - С. 154-164.

4. Оксидативный стресс сперматозоидов: клиническое значения и коррекция / С.И. Гамидов, Т.В. Шатылко, А.Ю. Попова, Н.Г. Гасанов, Р.С. Гамидов // Медицинский совет. - 2021. - № 3. - С. 1927.

5. Роль антиоксидантных молекул в терапии мужского бесплодия и подготовке мужчины к зачатию ребенка / С.И. Гамидов, Т.В. Шатылко, К.И. Ли, Н.Г. Гасанов // Медицинский совет. - 2020. - № 3. - С. 122-129.

6. Успешный исход экстракорпорального оплодотворения при абсолютной тератозооспермии после отбора сперматозоида по дзета-потенциалу / П.С.К. Гамидова, В. Ю. Смольникова, Н.П. Макарова, Н.Н. Лобанова // Акушерство и гинекология. - 2023. - № 6. - С. 155159.

7. Роль пункционной биопсии яичка в ведении пациентов с азооспермией / Н.Г. Гасанов, С.И. Гамидов, Т. В. Шатылко [и др.] // Исследования и практика в медицине. —2020. — № 3.— С. 43-50.

8. Генетические полиморфизмы у женщин с привычным невынашиванием беременности. Выбор акушерской тактики / Е. П. Ганчар, М. В. Кажина, Л. В. Гутикова, Е. В. Зуховицкая // Медицинские новости. - 2024. - № 2(353). - С. 75-80.

9. Генетические причины привычного невынашивания беременности (обзор литературы) / Н. И. Зайцева, Д. Б. Ревина, Л. Н. Щербакова,

О. Б. Панина // Архив акушерства и гинекологии им. В.Ф. Снегирева.

- 2023. - Т. 10. - № 2. - С. 85-94.

10. Дисбаланс иммунорегуляторных молекулярно-клеточных механизмов как причина привычного невынашивания беременности / К. А. Артемьева, Т. А. Гусарова, И. М. Богданова [и др.] // Молекулярная медицина. - 2023. - Т. 21. - № 6. - С. 3-12.

11. Ассоциация фрагментации ДНК сперматозоидов с эмбриологическими показателями и результативностью программ вспомогательных репродуктивных технологий / А.Х. Дударова, В.Ю. Смольникова, Н.П. Макарова [и др.] // Акушерство и гинекология. - 2017. - № 6. - С. 91-8.

12. Прогностическое значение маркеров митохондриальной дисфункции клеток кумулюса в получении эмбрионов оптимального качества в протоколах вспомогательных репродуктивных технологий / Е.М. Комарова, Е.А. Лесик, К.В. Объедкова [и др.] // Проблемы репродукции. - 2023. - № 6. - С. 57-64.

13. Совершенствование тактики лечения бесплодия с использованием вспомогательных репродуктивных технологий с преимплантационным генетическим тестированием эмбрионов. Дисс. докт. мед. наук / Кулакова Елена Владимировна, 2022. - 254 с.

14. Мужское бесплодие в Российской Федерации: статистические данные за 2000-2018 годы. Г.С. Лебедев, Н.А. Голубев, И.А. Шадеркин [и др.] // Экспериментальная и клиническая урология. -2019. - №4. - С. 4-12.

15. Роль мужского фактора в реализации повторных ранних репродуктивных потерь / Е. И. Лебедева, С.Д. Яворская, А. И. Неймарк [и др.] // Проблемы репродукции. - 2022. - № 3. - С. 96 -104.

16. Эндогенные и экзогенные факторы, влияющие на мужскую фертильность / Н.А. Литвинова, А.И. Лесников, Т.А. Толочко, А.А. Шмелев // Фундаментальная и клиническая медицина. - 2021. - № 2.

- С. 124 -135.

17.Мужское бесплодие / О.Б. Жуков, Е.Е. Брагина, И.А. Корнеев [и др.] // От Национальных клинических рекомендаций к персональной медицине. -2021. - С. 308.

18. Агглютинация сперматозоидов и время разжижения эякулята как негативный прогностический фактор при ИКСИ / Н.П. Наумов, Т.В. Шатылко, С.И. Гамидов, А.Ю. Попова, Р.И. Сафиуллин // Андрология и генитальная хирургия. - 2022. - №3. - С. 61-71.

19. Классификация патозооспермии по степени тяжести у пациентов с бесплодием / Р.В. Назаренко, В. М. Здановский // Андрология и генитальная хирургия. - 2022. - № 3. - С. 54-60.

20. Ожирение как фактор риска привычного невынашивания беременности / С. А. Михалев, Д. Н. Масалимова // Акушерство и гинекология. Новости. Мнения. Обучение. - 2023. - Т. 11. - №5. - С. 105-108.

21. Мужское бесплодия: до и после эпохи коронавируса SARS-COV-2 / Р.И. Овчинников, С.И. Гамидов, А.Ю. Попова, С.Х. Ижбаев // Медицинский совет.— 2020.— № 13.— С.179-187.

22. Антиоксидантная терапия улучшает показатели НВА -теста у мужчин с бесплодием при подготовке к программам вспомогательных репродуктивных технологий (ЭКО/ИКСИ) / А.Ю. Попова, Р.И. Овчинников, С.И. Гамидов //Урология. — 2019.— № 1.— С. 90-96.

23.Привычный выкидыш. Клинические рекомендации (протокол лечения). Дата пересмотра 2022.

24.Роль полиморфизмов генов системы гемостаза и фолат -метионинового цикла в развитии привычного невынашивания беременности / Л. Д. Белоцерковцева, Л. В. Коваленко, И. И. Мордовина [и др.] // Журнал акушерства и женских болезней. - 2023. - Т. 72. - № 4. - С. 5-14.

25. Анеуплоидия в сперматозоидах у фертильных мужчин и пациентов с нарушением репродукции / А.О. Седова, А.И. Мартемьянова, В.Б. Черных //Андрология и генитальная хирургия. —2021. — Т.22.— № 4.— С. 27-35.

26. Современная тактика преодоления мужского бесплодия: селекция сперматозоидов по их способности к связыванию с гиалуроновой кислотой / А. В. Зобова, А. Х. Дударова, Г. К. Сахарова [и др.] // Андрология и генитальная хирургия. - 2015. - Т. 16. - № 4. - С. 1017.

27. Полноэкзомное секвенирование в комплексной диагностике генетически обусловленных форм мужского бесплодия, связанных с тяжелыми формами патозооспермии / О.А. Соловова, Н.В. Опарина, О.П. Рыжкова, Т.М. Сорокина, В.Б. Черных // Медицинская генетика. - 2022. - Т. 21. - № 10. - С. 46-50.

28. Структурные нарушения хроматина сперматозоидов. Патофизиологические аспекты. Клиническая значимость / М. Н. Коршунов, Е. С. Коршунова, П. С. Кызласов [и др.] // Вестник урологии. - 2021. - Т. 9. - № 1. - С. 95-104.

29. Особенности мужской инфертильности как единственного фактора бесплодия супружеской пары в клинике ВРТ / А.Н. Сулима, В.В. Литвинов, П.М. Клименко, Э.Л. Старовойтов, И.О. Колесникова // Экспериментальная и клиническая урология. - 2019. - №4. - С. 6873.

30. Эффективность дидрогестерона при угрожающем выкидыше: систематический обзор и метаанализ / Н. К. Тетруашвили, Е. В. Ших // Доктор.Ру. - 2022. - Т. 21. - № 5. - С. 53-61.

31. Гестагены при беременности высокого риска / Н. К. Тетруашвили,

B. Н. Серов // Акушерство и гинекология. Новости. Мнения. Обучение. - 2022. - Т. 10. - № 2(36). - С. 31-38.

32. Результаты лечения бесплодия методами вспомогательных репродуктивных технологий с использованием селекции сперматозоидов на ооцит-кумулюсных комплексах / А.В. Чистякова, Н.П. Макарова, О.С. Непша, В.Ю. Смольникова, Е.А. Калинина // Акушерство и гинекология. -2023. - №4. - С. 92-99.

33. Применение вспомогательных репродуктивных технологий при сложных формах мужского бесплодия и азооспермии / Т.В. Шатылко, С.И. Гамидов, А.Х. Тамбиев, Р.И. Сафиуллин, А.Ю. Попова А.Ю // Фармакология & Фармакотерапия. — 2022. № 3. -

C.10-16.

34. Embryo Culture Medium Has No Impact on Mosaicism Rates: a Sibling Oocyte Study / А. Abdala, I. Elkhatib, A. Bayram [et. al.] // Reprod Sci. — 2023. - Vol. 30. - № 11. - P. 3296- 3304.

35. Fertility-enhancing hysteroscopic surgery; multi-center retrospective cohort study of reproductive outcome / N. Al-Husban, O. Odeh, M.

AlRamahi, S. Qadri, H. Al-Husban // BMC Womens Health. - 2023. -Vol. 23. - № 1. - P. 459.

36. Does using microfluidic sperm sorting chips in bovine IVEP affect blastocyst development? / H. Alkan, F. Satilmis, M.A. Demirel [et. al.] // Reprod Domest Anim. - 2023. - Vol. 58. - №7. - P. 1012-1020.

37. Ovarian stiffness increases with age in the mammalian ovary and depends on collagen and hyaluronan matrices / F. Amargant, Q. Tu, W.S. Parkes [et. al.] // Aging Cell. - 2020. - Vol. 19, № 11. - P. e13259.

38. In vitro fertilisation during 40 years / A.N. Andersen // Ugeskr Laeger. -2021. - № 48. - P. 183.

39. Antimüllerian hormone (AMH) and age as predictors of preimplantation genetic testing for aneuploidies (PGT-A) cycle outcomes and blastocyst quality on day 5 in women undergoing in vitro fertilization (IVF) / A. Arnanz, A. Bayram, I. Elkhatib // J Assist Reprod Genet. - 2023. -Vol. 40. - № 6. - P. 1467-1477.

40. Cumulus expansion is impaired with advanced reproductive age due to loss of matrix integrity and reduced hyaluronan / E. Babayev, Ch Suebthawinkul, D. Gokyer // Aging Cell. - 2023. - Vol. 22, № 11. - P. E14004.

41. A fast and safe technique for sperm preparation in ICSI treatments within a randomized controlled trial (RCT) / D. Baldini, A. Baldini, E. Silvestris [et. al.] // Reprod Biol Endocrinol. - 2020. - Vol. 18. - № 1. - P. 88.

42. Sperm selection for HKCH: Do we have a winner? / D. Baldini, D. Ferri, G.M. Baldini [et. al.] // Cells. - 2021. - Vol. 10, № 12. - P. 3566.

43. Sperm Preparation with Microfluidic Sperm Sorting Chip May Improve Intracytoplasmic Sperm Injection Outcomes Compared to Density Gradient Centrifugation / M. Banti, Z. E. Van, D. Kafetzis // Reprod Sci.

- 2024. - № 6. - P. 1695-1704.

44. Endometrium immunomodulation to prevent recurrent implantation failure in assisted reproductive technology / M. Benkhalifa, F. Joao, C Duval [et. al.] // Int. J. Mol. Sci. - 2022. - Vol. 23, № 21. - P. 12787.

45. pH and male fertility: Making sense on pH homeodynamics throughout the male reproductive tract. R.L. Bernardino, D.F. Carrageta, M. Sousa, M.G. Alves, P.F Oliveira // Cell Mol Life Sci. - 2019. - Vol. 76 - № 19.

- P. 3783-800.

46. Meiotic cohesin and variants associated with human reproductive aging and disease / R. Beverley, M.L. Snook, M.A. Brieno-Enriquez // Front. Cell Dev. Biol. - 2021. - Vol. 9. - P. 710033.

47. A paradigmatic shift in the care of male factor infertility: how can the recommendations for basic semen examination in the sixth edition of the WHO manual and the ISO 23162:2021 standard help? / L. Bjorndahl // Reprod. BioMed. Online. - 2022. - Vol. 45. - P. 731-736.

48.Bjorndahl, L. The sixth edition of the WHO laboratory manual for the examination and processing of human semen: ensuring quality and standardization in basic examination of human ejaculates / L. Bjorndahl, J.K. Brown // Fertil. Steril. - 2022. - Vol. 117. - № 2. - P. 246-251.

49. Mullerian Anomalies: Presentation, Diagnosis, and Counseling P. Bortoletto, P.A. Romanski, S.M. Pfeifer // Obstet Gynecol. - 2024. -Vol.143. - № 3. - P. 369-377.

50. Pregravid preparation of women with chronic endometritis in IVF cycles / A.V. Boychuk, N.V. Kotsabyn, J.B. Yakymchuk, I.M. Nikitina // Wiad Lek. - 2024. - Vol. 77. - №1. - P. 25-28.

51. Efficacy of therapies and interventions for repeated embryo implantation failure: a systematic review and meta-analysis / A. Busnelli, E. Somigliana, F. Cirillo, A. Baggiani, P.E. Levi-Setti // Sci. Rep. - 2021. -Vol. 11. - № 1. - P. 1747.

52. Chronic endometritis and altered embryo implantation: a unified pathophysiological theory from a literature systematic review / G. Buzzaccarini, A. Vitagliano, A. Andrisani [et. al.] // J. Assist. Reprod. Genet. - 2020. - Vol. 37. - № 12. - P. 2897-2911.

53. The effect of extended cryo-storage following vitrification on embryo competence: a systematic review and meta-analysis / S. Canosa, D. Cimadomo, A. Conforti [et. al.] // J Assist Reprod Genet. - 2022. - Vol. 39. - № 4. - P. 873-882.

54. Aquaporins and male (in)fertility: Expression and role throughout the male reproductive tract / D.F. Carrageta, R.L. Bernardino, G. Soveral, [et. al.] // Arch Biochem Biophys. - 2020. - Vol. 679.

55. Factors associated with embryo mosaicism: a systematic review and meta-analysis / A. Cascales, R. Morales, A. Castro [et. al.] // J Assist Reprod Genet. - 2023. - Vol. 40. - № 10. - P. 2317-2324.

56. PGT-A: Houston, we have a problem / R.F. Casper // J Assist Reprod Genet. - 2023. - Vol. 40. - № 10. - P. 2325-2332.

57. Artificial intelligence for sperm selection-a systematic review / P. Cherouveim, C. Velmahos, C.L. Bormann // Fertil Steril. - 2023. - Vol. 120. - № 1. - P. 24-31.

58. The new 6th edition of the WHO laboratory manual for the examination and processing of human semen: is it a step toward better standard operating procedure? / E. Chung, M.M. Arafa, F. Boitrelle [et. al.] // Asian J. Androl. - 2022. - Vol. 24. - P. 123-124.

59. In Vitro Fertilization / J. Choe, A.L. Shanks // Treasure Island (FL). -2023.

60. How should the best human embryo in vitro be? Current and future challenges for embryo selection / D. Cimadomo, F. Innocenti, M. Taggi [et. al.] // Minerva Obstet Gynecol. - 2024. - Vol. 76. - № 2. - P. 159173.

61. Opening the black box: why do euploid blastocysts fail to implant? A systematic review and meta-analysis / D. Cimadomo, L. Rienzi, A. Conforti [et. al.] // Hum Reprod Update. - 2023. - Vol. 29. - № 5. - P. 570-633.

62. The Effect of Uterine Adenomyosis on IVF Outcomes: a Systematic Review and Meta-analysis / M. Cozzolino, S. Tartaglia, L. Pellegrini [et. al.] // Reprod Sci. - 2022. - Vol. 29. - № 11. - P. 3177-3193.

63. Update on preimplantation genetic testing for aneuploidy and outcomes of embryos with mosaic results / E.M. Dahdouh, A.M. Mourad, J. Balayla // Minerva Obstet Gynecol. - 2023. - Vol. 75. - № 5. - P. 468-481.

64. High-resolution 4-d acquisition of freely swimming human sperm cells without staining / G. Dardikman-Yoffe, S.K. Mirsky, I. Barnea, N.Shaked // Sci. Adv. - 2020. - Vol. 6, № 15. - P. eaay7619.

65. Enhanced motility in a binary mixture of active nano/microswimmers / D. Debnath, P.K. Ghosh, V.R. Misko [et. al.] // Nanoscale. - 2020. - Vol. 12. - № 17. - P. 9717-26.

66. MACS-annexin V cell sorting of semen samples with high TUNEL values decreases the concentration of cells with abnormal chromosomal content: a pilot study / S. El Fekih, N. Gueganic, C. Tous [et. al.] // Asian J. Androl. - 2022. - Vol. 24, № 5. - P. 445-450.

67. The effect of <6 cm sized noncavity-distorting intramural fibroids on in vitro fertilization outcomes: a systematic review and meta-analysis / M. Erden, E. Uyanik, M. Polat [et. al.] // Fertil Steril. - 2023. - Vol. 119. -№ 6. P. 996-1007.

68. ESHRE - https: //www. eshre. eu/Guidelines-and-Legal/Guidelines/Recurrent-pregnancy-loss.

69. ESHRE Working Group on Recurrent Implantation Failure / D. Cimadomo, G. Griesinger, G. Lainas // ESHRE good practice recommendations on recurrent implantation failure. Hum Reprod Open. -2023. - № 3.

70. Evolution of the world health organization semen analysis manual: where are we? / S.C. Esteves // Nat. Rev. Urol. - 2022. - Vol. 19. - P. 439-446.

71. Who cares about oligozoospermia when we have HKCH / S.C. Esteves // Reprod. BioMed. Online. - 2022. - Vol. 44. - P. 769-775.

72. Impact of FIGO type 3 uterine fibroids on in vitro fertilization outcomes: A systematic review and meta-analysis / A. Favilli, A. Etrusco, V. Chiantera // Int J Gynaecol Obstet. - 2023. - Vol. 163. - № 2. - P. 528539.

73. Evaluating the effect of conditioned medium from mesenchymal stem cells on differentiation of rat spermatogonial stem cells / H. Fazaeli, M. Sheykhhasan // Anat Cell Biol. - 2023. - Vol. 56. - № 4. P. 508-517.

74. High efficiency rare sperm separation from biopsy samples in an inertial focusing device / H. Feng, A. Jafek, R. Samuel [et. al.] // Analyst. - 2021. - Vol. 146. - № 10. - P. 3368-77.

75. Effects of sperm separation methods before intrauterine insemination on pregnancy outcomes and live birth rates: Differences between the swim-up and microfluidic chip techniques / B.S. Feyzioglu, Z. Avul // Medicine (Baltimore). - 2023. - Vol. 102. - № 46. - P. 36042.

76. Application of Intracytoplasmic Morphologically Selected Sperm Injection (IMSI) on a Teratozoospermic Patient and Its Effect on the In-Vitro Fertilization (IVF) Outcome / G. Gajabe, A. More, J. Shrivastava // Cureus. - 2024. - Vol. 16. - № 1. - P. e53268.

77. The Use of Non-Apoptotic Sperm Selected by Magnetic Activated Cell Sorting (MACS) to Enhance Reproductive Outcomes: What the Evidence

Says / N. Garrido, M. Gil Julia // Biology (Basel). - 2024. - Vol. 13. -№ 1. - 30.

78. LncRNA NEAT1 affects endometrial receptivity by regulating HOXA10 promoter activity / J. Geng, C. Cui, Y. Yin, Y. Zhao, C. Zhang // Cell Cycle. - 2022. - Vol. 21. - № 18. - P. 1932-1944.

79. Comparison of sperm telomere length between two sperm selection procedures: Density gradient centrifugation and zeta potential / R. Ghorbani-Sini, T. Izadi, M. Tavalaee // Int J Fertil Steril. - 2020. - Vol. 14. - № 51. - P. 56.

80. The utility of all-freeze IVF cycles depends on the composition of study populations / N. Gleicher, S.K. Darmon, P. Patrizio, D.H. Barad // J Ovarian Res. - 2023. - Vol. 16. - № 1. - P. 190.

81. Preimplantation genetic testing: where we are today / E. Greco, K. Litwicka, M.G. Minasi [et. al.] // Int. J. Mol. Sci. - 2020. - Vol. 21, № 12. - P. 4381.

82. High prevalence of chronic endometritis is associated with metabolic abnormality and reduced live birth rate among IVF women with nonuniform endometrial echogenicity / J. Guo, Y. Li, S. Liu, H. Ren // Am J Reprod Immunol. - 2023. - Vol. 90. - № 4. - P. e13771.

83. Risk of congenital malformations in live-born singletons conceived after intracytoplasmic sperm injection: a Nordic study from the CoNARTaS group / A.A. Henningsen, S. Opdahl, U.B. Wennerholm // Fertil Steril. -2023. - Vol. 120. - № 5. - P. 1033-1041.

84. FIGO statement: Fertility preservation / L. Henry, J.S. Berek, I. Diaz [et. al.] // Int J Gynaecol Obstet. - 2023. - Vol. 163. - № 3. - P. 790-794.

85. Design of a gradient-rheotaxis microfluidic chip for sorting of high-quality Sperm with progressive motility / C.H. Huang, C.H. Chen, T.K. Huang [et. al.] // iScience. - 2023. - Vol. 26. - № 8 - P. 107356.

86. Development of a thermotaxis and rheotaxis microfluidic device for motile spermatozoa sorting / T.K. Huang, C.H. Huang, P.A. Chen Biosens // Bioelectron. - 2024. - Vol. 258.

87. Zeta potential technique for analyzing semen quality / M. Ionov, W. Gontarek, M. Bryszewska // MethodsX. - 2020. - Vol. 18. - № 7.

88. Baller Label-free evaluation of chromatin condensation in human normal morphology sperm using Raman spectroscopy / M.Y. Jahmani, M.E.

Hammadeh, M.A. Al Smadi, M.K Baller // Reprod Sci. - 2021. - Vol. 28. - № 9. - P. 2527-39.

89. Impact of congenital uterine anomalies on reproductive outcomes of IVF/ICSI-embryo transfer: a retrospective study / J. Kang J, J. Qiao // Eur J Med Res. - 2024. - Vol. 29. - № 1. - P. 48.

90. Biological functions and Large-scale profiling of protein glycosylation in human semen / R. Lan, M. Xin, Z. Hao // J. Proteome Res. - 2020. - Vol. 19, № 10. - P. 3877-3889.

91. Chromatin remodeling of histone H3 variants by DDM1 underlies epigenetic inheritance of DNA methylation / S.C. Lee, D.W. Adams, J.J. Ipsaro // Cell. - 2023. - Vol. 186. - № 19. - P. 4100-4116.e15.

92. Nomogram for predicting the risk of preterm delivery after IVF/ICSI treatment: an analysis of 11513 singleton births / Z. Liao, L. Cai, C. Liu // Front Endocrinol (Lausanne). - 2023. - Vol. 14.

93. Reproductive aging: Biological pathways and potential interventive strategies / Y. Liu, J. Gao // J. Genet. Genomics. - 2022. - Vol. 50. - P. 141-150.

94. WISE: whole-scenario embryo identification using self-supervised learning encoder in IVF / M. Liu, C.I. Lee, C.R Tzeng // J Assist Reprod Genet. - 2024. - Vol. 41. - № 4. - P. 967-978.

95. Combined oral antibiotics and intrauterine perfusion can improve in vitro fertilization and embryo transfer pregnancy outcomes in patients with chronic endometritis and repeated embryo implantation failure / N. Ma, J. Li, J. Zhang // BMC Womens Health. - 2023. - Vol. 23. - № 1. - P. 344.

96. Advances in microfluidic technology for sperm screening and in vitro fertilization / J. Ma, Q. Xie, Y. Zhang [et. al.] // Anal Bioanal Chem. -2024. - Vol. 416. - № 16. - P. 3717 - 3735.

97. In cases with raised sperm DNA fragmentation, can sperm selection by magnetic-activated cell sorting or testicular sperm aspiration help improve reproductive outcomes? / K.C. Mantravadi, D. Rao // J Assist Reprod Genet. - 2024. - Vol. 41. - № 6. - P. 1507 - 1515.

98. Effect of a 20% intravenous fat emulsion therapy on pregnancy outcomes in women with RPL or RIF undergoing IVF/ICSI: a systematic review and meta-analysis / G.J. Marchand, A.T. Masoud, H. Ulibarri [et. al.] // J Clin Transl Res. - 2023. - Vol. 9. - №4. - P. 236-245.

99. Fibroinflammatory signatures increase with age in the human ovary and follicular fluid / J.H. Machlin, S.J. Barishansky, J. Kelesh [et. al.] // Int. J. Mol. Sci. - 2021. - Vol. 22. - № 9. - P. 4902.

100. What is the importance of sperm subpopulations? / F. Martínez-Pastor // Anim Reprod Sci. - 2022. - Vol. 246.

101. Sperm selection in assisted reproduction: A review of established methods and cutting-edge possibilities / G. Marzano, M.S. Chiriaco, E. Primiceri [et. al.] // Biotechnol Adv. - 2020. - Vol. 40.

102. Lactoferrin affects in vitro and in vivo fertilization and implantation in rats / E. Massa, A. Gola, M. Moriconi // Biometals. -2023. - Vol 36. - № 3. - P. 575-585.

103. Male factor infertility and assisted reproductive technologies: indications, minimum access criteria and outcomes / R. Mazzilli, C. Rucci, A. Vaiarelli [et. al.] // J Endocrinol Invest. - 2023. - Vol. 46. - № 6. - P. 1079-1085.

104. .] Magnetic-activated cell sorting of nonapoptotic spermatozoa with a high DNA fragmentation index improves the live birth rate and decreases transfer cycles of IVF/ICSI / J. Mei, L.J. Chen, X.X. Zhu [et. al ] // Asian J Androl. - 2022. - Vol. 24. - № 4. - P. 367-372.

105. Applications and Controversies in Preimplantation Genetic Testing for Aneuploidies (PGT-A) in In Vitro Fertilization / M. Current // Reprod Sci. - 2024. - Vol.31. -№ 1. - P. 66-80.

106. Mass Sperm Motility Is Correlated to Sperm Motility as Measured by Computer-Aided Sperm Analysis (CASA) Technology in Farmed Ostriches / P.T. Muvhali, M. Bonato, I.A. Malecki, S.W.P. Cloete // Animals (Basel). - 2022. - Vol. 12. - № 9. - P. 1104.

107. Effect of sperm selection method by cumulus oophorus complexes and conventional sperm preparation method on sperm quality and DNA fragmentation for assisted reproduction techonology / W. Naknam, L. Salang, J. Sothornwit // Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol. - 2019. -Vol. 243. - P. 46-50.

108. Deafening Silence of Male Infertility / C.S. Nam, K.J. Campbell, C. Acquati [et. al] // Urology. - 2023. - Vol. 182. - P. 111-124.

109. Advances in passively driven microfluidics and lab-on-chip devices: a comprehensive literature review and patent analysis / V.

Narayanamurthy, Z. E. Jeroish, K.S. Bhuvaneshwari [et. al] // RSC Adv.

- 2020. - Vol. 10. - № 20. - P. 11652-80.

110. Transmission ratio distortion of mutations in the master regulator of centriole biogenesis PLK4 / H. Neitzel, R. Varon, S. Chughtai [et. al] // Hum Genet. - 2022. - Vol. 141. - № 11. - P. 1785-1794.

111. Changing clinical significance of oocyte maturity grades with advancing female age advances precision medicine in IVF / C. Nicholas, S. Darmon, P. Patrizio [et. al] // iScience. - 2023. - Vol. 26. - № 8. - P. 107308.

112. Pregnancy Rates after Hysteroscopic Endometrial Polypectomy versus Endometrial Curettage Polypectomy: A Retrospective Study / M. Nishioka, T. Maezawa, H. Takeuchi [et. al] // Medicina (Kaunas). - 2023.

- Vol. 59. - № 10. - P. 1868.

113. Strategies and perspectives for UV resonance Raman applicability in clinical analyses of human sperm RNA / M. Pachetti, F. D'Amico, L. Zupin [et. al] // Int J Mol Sci. - 2021. - Vol. 22. - № 23. - P. 13134.

114. Ayoubi Endometrial receptivity in adenomyosis and/or endometriosis / P. Pirtea, D. de Ziegler, J.M [et. al] // Fertil Steril. - 2023.

- Vol. 119. - № 5. - P. 741-745.

115. Initial andrological evaluation of the infertile male / E. Pozzi, R. Ramasamy, A. Salonia // Eur. Urol. Focus. - 2022. - Vol. 9. - P. 51-54.

116. The combined effect of BMI and age on ART outcomes / F. Rafael, M.D. Rodrigues, J. Bellver [et. al] // Hum. Reprod. - 2023. - Vol. 38, № 5. - P. 886-894.

117. Endometrial Assembloids to Model Human Embryo Implantation In Vitro / T.M. Rawlings, M. Tryfonos, K. Makwana [et. al] // Methods Mol Biol. - 2024. - Vol. 2767. - P. 63-74.

118. Sperm selection by birefringence: a promising non-invasive tool to improve ICSI outcomes / M.A. Ribeiro, MGD. Broi, M.B. Rose [et. al] // JBRA Assist Reprod. - 2023. - Vol. 27. - №2. - P. 234-240.

119. Is a woman's chronological age or 'ovarian age' more important in determining perinatal outcome after assisted reproductive treatment? / A. Richardson, M.Mascarenhas, A.Balen // Hum. Fertil. - 2021. - Vol. 24, № 2. - P. 144-150.

120. Pronuclear and blastocyst morphology are associated age-dependently with embryo ploidy in in vitro fertilization cycles / M.I. Roos Kulmann, C. Lumertz Martello, A. Bos-Mikich, N. Frantz // Hum Fertil (Camb). - 2022. - Vol. 25. - № 2. - P. 369-376.

121. Donor oocyte cycle characteristics and outcomes: factors potentially linked with successful endings / F.K. Robin, G.M. Andrade, A. Bos-Mikich [et. al] // JBRA Assist Reprod. - 2023. -Vol. 27. - № 2. -P. 185-190.

122. MACS-DGC sperm preparation method resulted in high-quality sperm, top-quality embryo, and higher blastocyst rate in male factor infertile couples with high DNA fragmented sperm / M. Salehi Novin, A. Mehdizadeh, T. Artimani [et. al] // Hum Fertil (Camb). - 2023. - Vol. 26.

- № 6. - P.1408-1416.

123. ICSI for non-male factor infertility: time to reappraise IVF? / H. Sallam, F. Boitrelle, S. Palini [et. al] // Panminerva Med. - 2023. - Vol. 65. - № 2. - P. 159-165.

124. Sperm and Oocyte Chromosomal Abnormalities / O. Samura, Y. Nakaoka, N. Miharu // Biomolecules. - 2023. - Vol. 13. - № 6. - P. 1010.

125. Exploring the effect of cryopreservation in assisted reproductive technology and potential epigenetic risk / R. Sciorio, G. Campos, L. Tramontano [et. al] // Zygote. - 2023. - Vol. 31. - № 5. - P. 420-432.

126. Perinatal outcomes in 6640 singleton pregnancies after donor oocyte IVF across three continents over 7 years / J.S. Shah, F. Figueras, A. Blàzquez [et. al] // J Assist Reprod Genet. - 2023. - Vol. 40. - № 12.

- P. 2903-2911.

127. Can sperm quality affect reproductive outcomes? / P.N. Schlegel // Fertil Steril. - 2023. - Vol. 120. - № 4. - P. 707-708.

128. A comparison between the Felix electrophoretic system of sperm isolation and conventional density gradient centrifugation: a multicentre analysis / F. Shapouri, T. Mahendran, M. Govindarajan [et. al] // J. Assist. Reprod. Genet. - 2023. - Vol. 40, № 1. - P. 83-95.

129. Microfluidic sperm sorting selects a subpopulation of high-quality sperm with a higher potential for fertilization / N. Sheibak, F. Amjadi, A. Shamloo, F. Zarei, Z. Zandieh // Hum Reprod. - 2024. - Vol. 39. - № 5.

- P. 902-911.

130. Selection of high-quality sperm with thousands of parallel channels / M. Simchi, J. Riordon, J.B. You [et. al] // Lab Chip. - 2021. - Vol. 21. - № 12. - P. 2464-75.

131. Prevention of Pregnancy Loss: Combining Progestogen Treatment and Psychological Support / N. Tetruashvili, A. Domar, A. Bashiri // Journal of Clinical Medicine. - 2023. - Vol. 12, No. 5. - P. 1827.

132. Recurrent implantation failure: reality or a statistical mirage?: consensus statement from the July 1, 2022 Lugano Workshop on recurrent implantation failure / P. Pirtea, M.I. Cedars, K. Devine [et. al] // Fertil Steril. - 2023. - Vol. 20/ - № 1. - P. 45-59.

133. Effects of Alcohol Use on Sperm Chromatin Structure / A.Trautman // SD Med. - 2023. - Vol. 76. - № 9. - P. 408.

134. Co-adaptation of physical attributes of the mammalian female reproductive tract and sperm to facilitate fertilization / C.K. Tung, S.S. Suarez // Cells. - 2021. - Vol. 10, № 6. - P. 1297.

135. Female reproductive life span is extended by targeted removal of fibrotic collagen from the mouse ovary / T. Umehara, Y. E. Winstanley, E. Andreas // Sci. Adv. - 2022. - Vol. 8, № 24. - P. eabn4564.

136. Comparison of two culture media on morphokinetics and ploidy status of sibling embryos / M. Urich, M.R. Ugur, F. Li [et. al] // Zygote. -2022. - Vol. 30. - № 3. - P. 410-415.

137. The association between endometrial polyps, chronic endometritis, and IVF outcomes / C.C. Vaduva, C. Constantinescu, M. Serbanescu [et. al] // Eur Rev Med Pharmacol Sci. - 2023. - Vol. 27. - № 18. P. 88958904.

138. Comparison of zeta potential and physiological intracytoplasmic sperm injection in obtaining sperms with a lower DNA fragmentation index: A cross-sectional study / S. Vahidi, N. Narimani, L. Dehghan Marvast [et. al] // Int J Reprod Biomed. - 2022. - Vol. 20. № 5. - P. 357364.

139. The short abstinence may have paradoxical effects on sperms with different level of DNA integrity: A prospective study / S. Vahidi, N. Narimani, T. Ghanizadeh [et. al] // Urol J. - 2021. - Vol. 8. -№ 6. - P. 682-687.

140. Contribution of semen to early embryo development: fertilization and beyond / M. Vallet-Buisan, R. Mecca, C. Jones, K. Coward, M. Yeste // Hum Reprod Update. - 2023. - Vol. 29. - № 4. - P. 395-433.

141. Spermatozoa isolation with Felix TM outperforms conventional density gradient centrifugation preparation in selecting cells with low DNA damage / P. Villeneuve, F. Saez, E. Hug [et. al] // Andrology. -2023. - Vol. 11, № 8. - P. 1593-1604.

142. Chromosomal, gestational, and neonatal outcomes of embryos classified as a mosaic by preimplantation genetic testing for aneuploidy / M. Viotti, E. Greco, J.A. Grifo [et. al] // Fertil Steril. - 2023. - Vol. 120.

- № 5. - P. 957-966.

143. Single-cell analysis of human ovarian cortex identifies distinct cell populations but no oogonial stem cells / M. Wagner, M. Yoshihara, I. Douagi [et. al] // Nat. Commun. - 2020. - Vol. 11, № 1. - P. 1147.

144. Does the Risk of Embryo Abnormality Increase in PCOS Women? A Secondary Analysis of a Multicenter, Randomized Controlled Trial / J. Wang, W. Zhou, Z. Song [et. al] // J Clin Endocrinol Metab. - 2023. -Vol. 108. - № 6. - P. e249-e257.

145. Oxidative stress in oocyte aging and female reproduction / L. Wang, J. Tang, L. Wang [et. al] // J. Cell. Physiol. - 2021. - Vol. 236, № 12. - P. 7966-7983.

146. Analysis of human invasive cytotrophoblasts demonstrates mosaic aneuploidy / J.F. Weier, C. Ferlatte, A. Baumgartner [et. al] // PLoS One.

- 2023. - Vol. 18. № 7. - P. e0284317.

147. A fully integrated biomimetic microfluidic device for evaluation of sperm response to thermotaxis and chemotaxis / Y. Yan, B. Zhang, Q. Fu, J. Wu, R. Liu // Lab Chip. - 2021. - Vol. 21. - № 2. - P. 310-18.

148. Live birth with or without preimplantation genetic testing for aneuploidy / J. Yan, Y. Qin, h. Zhao [et. al] // N. Engl. J. Med. - 2021. -Vol. 385. - № 22. - P. 2047-2058.

149. Comparison of three sperm selection methods for ICSI-DGC, Cumulus column, and incubation with supernatant product of adipose tissue-derived adult stem cells: An experimental study / Z. Yazdanpanah, M.H. Nasrabadi, Z. Piravar // Int J Reprod Biomed. - 2021. - Vol. 19. -№ 1. - P. 97-104.

150. Effects of the microfluidic chip technique in sperm selection for intracytoplasmic sperm injection for unexplained infertility: A prospective, randomized controlled trial / S. Yetkinel, E.B. Kilicdag, P.C. Aytac [et. al] // J Assist Reprod Genet. - 2019. - Vol. 36. - № 3. -P. 4039.

151. Use of microfluidic sperm extraction chips as an alternative method in patients with recurrent in vitro fertilisation failure / K. Yildiz, S. Yuksel // J Assist Reprod Genet. - 2019. - Vol. 36. - № 7. - P. 1423-9.

152. Live sperm trap microarray for high throughput imaging and analysis / J.B. You, Y. Wang, C. McCallum [et. al] // Lab Chip. - 2019; - Vol. 19. - № 5. - P 815-824.

153. Human sperm cooperate to transit highly viscous regions on the competitive pathway to fertilization / S. Xiao, J. Riordon, A. Lagunov [et. al] // Commun Biol. - 2023. - Vol. 6. - № 1. - P. 495.

154. Mammalian sperm hyperactivation regulates navigation via physical boundaries and promotes pseudo-chemotaxis / M. Zaferani, S.S. Suarez, A. Abbaspourrad // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. - 2021. - Vol. 118, № 44. - P. e2107500118.

155. Clinical utility of office hysteroscopy following failed in vitro fertilization-embryo transfer: A retrospective cohort study / H. Zhang, L. Wu, T. Liao [et. al] // Int J Gynaecol Obstet. - 2024. - Vol. 166. - № 3. -P. 1345-1350.

156. Development and validation of a visualized prediction model for early miscarriage risk in patients undergoing IVF/HKCH procedures: a real-world multi-center study / M. Zhang, X. Ji, X. Hu [et. al] // Front Endocrinol (Lausanne). - 2024. Vol. 14.

157. Rates of live birth after mosaic embryo transfer compared with euploid embryo transfer / J. Zhang, D. Wei, Y. Zhu [et. al] // J. Assist. Reprod. Gen.— 2023, - Vol. 36. - P. 165-172.

158. Application and Progress of Raman Spectroscopy in Male Reproductive System / F. Zhang, Y. Tan, J. Ding [et. al] // Front Cell Dev Biol. - 2022. - Vol. 9.

159. Effects of sperm processing techniques on IVF pregnancy rates: a mini-review / C. Zhao, L. Sun, P. Zhao // Ther Adv Reprod Health. -2023. - Vol. 17.

160. Structures of sperm flagellar doublet microtubules expand the genetic spectrum of male infertility / L. Zhou, H. Liu, S. Liu [et. al] // Cell. - 2023. - Vol. 186. - №13. - P. 2897-2910.e19.