Защитное действие модуляторов эндогенной каннабиноидной системы при экспериментальной церебральной ишемии тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.03.04, кандидат биологических наук Генрихс, Елизавета Евгеньевна

• Генрихс, Елизавета Евгеньевна
• кандидат биологических наук
• 2012

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Генрихс, Елизавета Евгеньевна

Глава 1. Введение.

Список применяемых сокращений.

Глава 2. Обзор литературных данных.

2.1. Общее представление об эндогенной каннабиноидной системе. История изучения и методы исследования.

2.2. Синтез и распад эндоканнабиноидов.

2.2.1. Биосинтез эндоканнабиноидов.

2.2.2. Инактивация эндоканнабиноидов.

2.3. Основные механизмы ишемического повреждения нейронов головного мозга.

2.4. Участие эндоканнабиноидов в регуляции и модуляции синаптической передачи.

2.4.1. Сопряженность каннабиноидных рецепторов с каскадами сигнальных реакций.

2.4.2. Участие эндогенной каннабиноидной системы в регуляции синаптической передачи.

2.4.3. Ретроградная модуляция синаптической передачи эндоканнабиноидами.

2.5. Нейропротекторное действие эндоканнабиноидов in vitro и in vivo и возможность их терапевтического применения.

2.5.1. Нейропротекция in vivo.

2.5.2. Нейропротекция in vitro.

2.5.3. Новые подходы к разработке препаратов, влияющих на внутриклеточные деструктивные процессы, индуцированные возбуждающими аминокислотами, и возможность терапевтического применения эндоканнабиноидов.

Глава 3. Материалы и методы исследования.

3.1. Объекты исследования.

3.2. Реактивы.

3.3. Получение мембранного препарата из мозга крысы.

3.4. Методы получения и культивирования диссоциированных клеток различных структур мозга.

3.4.1. Приготовление субстратов для культивирования клеток.

3.4.2. Получение и культивирование диссоциированных монослойных культур мозжечка крыс.

3.4.3. Получение и культивирование диссоциированных монослойных культур новой коры и гиппокампа мышиных эмбрионов.

3.4.4. Культивирование диссоциированных монослойных культур гиппокампа на мультиэлектродной матрице.

3.5. Методы выделения и культивирования органотипических срезов гиппокампа.

3.6. Иммунногистохимическая идентификация каннабиноидных рецепторов 1-го и 2-го типа (КР1 и КР2) в диссоциированной культуре клеток-зерен мозжечка крысы.

3.7. Схемы проведения экспериментов.

3.7.1. Эксперименты на диссоциированных монослойных культурах клеток-зерен мозжечка крысы.

3.7.2. Схема экспериментов на диссоциированных монослойных культурах нейронов новой коры мышей.

3.7.3. Схема экспериментов на органотипических эксплантатах гиппокампа.

3.7.4. Схема экспериментов на диссоциированных клетках гиппокампа, культивированных на мультиэлектродной матрице.

3.7.5. Схема экспериментов in vivo.

3.7.6. Электронно-микроскопическое исследование.

3.8. Статистический анализ.

Глава 4. Результаты исследования.

4.1. Нейропротекторное действие модуляторов ЭКС in vitro.

4.1.1. Нейропротекторное действие N-ацилдофаминов при индукции апоптоза в культуре клеток мозжечка.

4.1.2. Иммуногистохимическая идентификация каннабиноидных рецепторов в культуре клеток мозжечка.

4.1.3. Нейропротекторные эффекты N-ацилдофаминов при цитотоксическом действии глутамата в культуре клеток новой коры.

4.1.4. Нейропротекторные свойства N-докозагексаеноилдофамина при цитотоксическом действии глутамата в органотипической культуре ткани гиппокампа.

4.1.5. Эффекты от добавления глутамата и N-ацилдофаминов к клеткам нейронной сети первичной культуры гиппокампа.

4.1.6. Нейропротекторное действие N-ацилдофаминов при их совместном применении с ингибиторами гидролазы амидов жирных кислот.

4.1.7. Нейропротекторные свойства метаболита эндогенного каннабиноида анандамида простамида Е2.

4.2. Нейропротекторное действие модуляторов ЭКС in vivo.

4.2.1. Патогистологическое исследование.

4.2.2. Электронно-микроскопическое исследование.

Глава 5. Обсуждение результатов.

5.1. Нейропротекторное действие модуляторов ЭКС in vitro.

5.1.1. Нейропротекторное действие N-ацилдофаминов при индукции апоптоза в культуре клеток мозжечка и при цитотоксическом действии глутамата в культуре клеток новой коры.

5.1.2. Нейропротекторные свойства N-докозагексаеноилдофамина при цитотоксическом действии глутамата в органотипической культуре ткани гиппокампа.

5.1.3. Модуляция спонтанной биоэлектрической активности нейронной сети первичной культуры клеток гиппокампа глутаматом и N-ацилдофаминами.

5.1.4. Совместное применение N-ацилдофаминов с ингибиторами основного фермента их гидролиза усиливает защитное действие каннабиноидов in vitro.

5.1.5. Собственный спектр активности метаболитов эндоканнабиноидов и их участие в защитных процессах.

5.2. Нейропротекторное действие модуляторов эндогенной каннабиноидной системы в экспериментах in vivo.

Выводы.