Действие некоторых фторхинолоновых препаратов на микоплазмы-контаминанты клеточных культур тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 16.00.03, кандидат биологических наук Брагина, Светлана Геннадьевна

• Брагина, Светлана Геннадьевна
• кандидат биологических наук
• 2001

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Брагина, Светлана Геннадьевна

ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ:

1.1. Классификация микоплазм.

1.2. Микоплазмы в патологии человека, животных и птиц.

1.3. Контаминация микоплазмами клеточных культур.

1.4. Виды микоплазм.

1.5. Методы обнаружения микоплазм.

1.6. Деконтаминация культур клеток от микоплазм.

2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ:

2.1. Материалы и методы.

2.1.1. Клеточные культуры, питательные среды и растворы.

2.1.2. Штаммы микоплазм.

2.1.3. Питательные среды для выделения и культивирования микоплазм.

2.1.4. Препараты для деконтаминации клеточных культур от микоплазм.

2.1.5. Методы выявления микоплазм в культурах клеток.

2.1.5.1. Микробиологический метод.

2.1.5.2. Цитохимический метод.

2.1.5.3. Морфологический метод.

2.1.5.4. Полимеразная цепная реакция (ПЦР).

2.2. Результаты исследований:

2.2.1. Изучение токсичности фторхинолоновых препаратов для клеточных культур.

2.2.2. Изучение ростовых свойств питательных сред для индикации микоплазм в культурах клеток.

2.2.2.1.Изучение бактерицидного действия фторхинолоновых препаратов HaM.arginini G-230 в сыворотке крови животных.

2.2.2.2.Изучение бактерицидных свойств фторхинолоновых препаратов на M.arginini G-230.

2.2.3. Бактерицидное действие на микоплазмы фторхинолоновых препаратов и поверхностно-активных веществ.

2.2.4. Изучение контаминации первично-трипсинизированных и перевиваемых линий клеток микоплазмами.

2.2.5. Возможность деконтаминации перевиваемой линии клеток RKпрепаратами фторхинолонового ряда.

2.2.6. Деконтаминации перевиваемых линий клеток энрофлоксацином и поверхностно-активным веществом - NP-40.

3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ.

4. ВЫВОДЫ.

5. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Действие некоторых фторхинолоновых препаратов на микоплазмы-контаминанты клеточных культур»

В настоящее время клеточные культуры находят все более широкое применение в производстве различного спектра диагностических и противовирусных препаратов. В последние годы в качестве клеточного субстрата широко используют первичные культуры и перевиваемые линии клеток (ПЛК), к которым В03(1983) предъявляет чрезвычайно высокие требования, особенно по уровню контаминации вирусами и микоплазмами.

Первичные клеточные культуры характеризуются неоднородностью, имеют ограниченный жизненный цикл, различную чувствительность к вирусам, что объясняется индивидуальными особенностями доноров ткани и частой контаминацией агентами самой разнообразной природы. Перевиваемая культура выведена из первичной культуры после 1-го пассажа и способна к неограниченному количеству пассажей.

Известно, что уровень контаминации ПЛК достигает в различных коллекциях РФ и мира от 45 до 96% (Barile М. et al.,1978, 1979; Малахова М.С. и др.,1986; Бердникова З.Е.,1991; Симонова Э.Г. и др., 1992).

В вирусологических исследованиях используются свыше 200 линий клеток из нормальных и злокачественных тканей. Большинство линий имеет ненормальную конфигурацию хромосом, что обусловлено их происхождением из опухолевых тканей или является результатом беспрерывного субкультивирования. По сравнению с первичными культурами различные линии клеток имеют неодинаковую восприимчивость к вирусу (Каган Г.Я. и др.,1968; Сюрин В.Н. и др.,1986; Раковская И.В.,1990; Сергеев В.А. и др.,1990; Стегнш Б.Т.,1994).

Для получения высокоактивных препаратов необходимо использовать чистое, не контаминированное сырье (культуру клеток, сыворотку крови, питательные среды).

Прозоровский С.В. и др.(1995) указывают на множественность контаминации. В качестве контаминантов выступают вирусы, бактерии и микоплазмы. Культура клеток, сыворотка крови, питательные среды, трипсин, инструменты, лабораторные животные и сами сотрудники лаборатории могут быть источником контаминации (Борхсениус С.Н. и др.,1987; Смирнова Т.Д. и др.,1987; Chicco D. et al.,1990; Юрков С.Г. и др.,1998; Ночевный В.Т. и др.,2001).

Микоплазменная контаминация имеет тенденцию распространяться на другие клеточные культуры, с которыми ведут работу в лаборатории. Латентная форма микоплазменной инфекции не сопровождается видимыми изменениями клеток и, без проведения специальных исследований по выявлению микоплазм, как правило, остается незаметной (Barile М.,1979; Неустроева В.В.,1983,1985; Смирнова Т.Д. и др.,1985; Дьяконов Л.П.,1987).

Характерным признаком микоплазменной инфекции клеточных культур является наличие зернистости, вакуолизации, в ряде случаев образуются гигантские многоядерные клетки, а при острой инфекции наблюдаются пикноз и деструкция клеток, изменения клеточного метаболизма и митотической активности (Миллер Г.Г. и др., 1983; Неустроева В.В.,1983; Kaplan D. et al.,1984; Куликова И.Л.,1989; Михайлова Г.Р. и др.,1991).

Микоплазменную контаминацию выявляют различными методами: цитохимическим, иммунофлюоресцентным, авторадиографическим, радиоиммунологическим, микробиологическим, с помощью электронной микроскопии, иммуноферментного анализа и другими (Щигловитова О.Н. и др.,1982; Горина Л.Г. и др., 1983; Смирнова Т.Д., 1986; Борхсениус С.Н. и др., 1987; Грошева Г.А.,1987; Whitaker A. et al., 1987; Куликова И.Л.,1989; Соловьева С.В. и др., 1994; Барышников П.И. и др.,1996,1997; Козлова В.И. и др.,1997).

В большинстве случаев малоценные загрязненные культуры уничтожают путем автоклавирования, а для деконтаминации ценных линий клеток ученые предлагают использовать антибиотики, химические вещества, применять физическое воздействие, а так же биологические методы: иммунные сыворотки, моноклональные антитела (Gori G. at al.,1964; Machatkova M. et al.,1986; Михайлова Г.Р. и др.,1991; Барышников П.И.,1994; Бусол В.А. и др.,1995; Weng В. et al.,1995; Раковская И.В.,1999).

Несмотря на то, что разные исследователи предлагали разнообразные методы и схемы деконтаминации с применением антибиотиков, эта проблема остается неразрешенной в связи с тем, что используемые антибиотики оказались малоэффективны или токсичны для культур клеток.

Поэтому совершенствование и разработка методов деконтаминации, особенно перевиваемых линий клеток от микоплазм остается актуальной.

Цель и задачи исследований

Целью нашей работы являлось усовершенствование методов деконтаминации клеточных культур.

На разрешение которой были поставлены следующие задачи:

1 .Изучить действие фторхинолоновых препаратов (ФХЛ), новой группы антибактериальных средств, которые по данным многих исследователей обладают широким спектром антимикробного действия и слабой токсичностью на первично-трипсинизированные и перевиваемые культуры эукариотических клеток.

2.Определить чувствительность микоплазм к различным фторхинолоновым препаратам и изучить влияние этих препаратов на микоплазмы в различных типах культур клеток.

3.Изучить эффективность деконтаминации клеточных культур с использованием фторхинолонов и поверхносно-активных веществ (ПАВ).

Научная новизна

Дано экспериментальное обоснование целесообразности использования модифицированной питательной среды для индикации микоплазм в клеточных культурах, проведена индикация микоплазм в культурах клеток микробиологическим, цитохимическим методами и полимеразной цепной реакцией. Изучены:

-цитотоксичность фторхинолоновых препаратов и поверхностно-активных веществ для клеточных культур;

-бактерицидные свойства энрофлоксацина, норфлоксацина, пефлоксацина и флюмеквина на микоплазмы разных видов.

Научно обоснована схема деконтаминации клеточных культур при помощи ФХЛ и ПАВ от различных видов микоплазм, наиболее часто обнаруживаемых в культурах клеток.

Практическая ценность работы

Предложена схема деконтаминации перевиваемых линий клеток на основе комплексного препарата, включающего в себя ФХЛ и ПАВ.

Результаты исследований используют в лаборатории ВГНКИ, на производстве ФГУП "Покровский завод биопрепаратов", в учебном процессе МГУПБ, при проведении практических занятий и чтении лекций. 8

Основные положения, выносимые на защиту

По результатам выполненных исследований на защиту выносятся следующие положения:

1.Подбор и изучение ростовых свойств различных питательных сред для тест-штамма M.arginini G-230.

2.Возможность использования фторхинолоновых препаратов для деконтаминации сыворотки крови животных.

3.Результаты изучения токсичности препаратов фторхинолонового ряда на первичные и перевиваемые линии клеток.

4.Изучение бактерицидного действия комплексных препаратов, включающих в себя ФХЛ и ПАВ, на микоплазмы.

5.Результаты деконтаминации перевиваемых линий клеток с помощью комплексного препарата на основе фторхинолона и поверхностно-активного вещества.

Заключение диссертации по теме «Ветеринарная эпизоотология, микология с микотоксикологией и иммунология», Брагина, Светлана Геннадьевна

выводы

1. С целью обнаружения микоплазм-контаминантов клеточных культур можно использовать микробиологический, цитохимический методы и полимеразную цепную реакцию. Из трех методов более простыми, доступными и достаточно эффективными являются микробиологический и цитохимический методы, применение которых обеспечивает контроль за контаминацией и деконтаминацией.

2. Для обнаружения микоплазм микробиологическим методом целесообразно использовать жидкую и полужидкую питательные среды на основе триптического перевара мышц сердца крупного рогатого скота с добавлением в них перед засевом 10% свежего дрожжевого экстракта и 15% стерильной сыворотки крови лошади. В этой среде вполне удовлетворительно растут все виды микоплазм наиболее часто обнаруживаемые в клеточных культурах как контаминанты.

3. Препараты фторхинолонового ряда (энрофлоксацин, норфлоксацин, пефлоксацин, флюмеквин) в высоких концентрациях (100.0мкг/мл) обладали выраженным цитотоксическим действием на культуру клеток. Максимальная не токсическая концентрация для энрофлоксацина составляла 50.0 - 40.0мкг/мл, норфлоксацина - 75.0 -50.0мкг/мл, пефлоксацина - 75.0 - 50.0мкг/мл, флюмеквина - 25.0 - 20.0мкг/мл Наиболее выраженный цитопатический эффект отмечен в суспензионной клеточной культуре.

4. Определены минимальные бактерицидные концентрации ФХЛ препаратов для микоплазм различных видов. Они составили для норфлоксацина 25.0мкг/мл, пефлоксацина 25.0мкг\мл, энрофлоксацина 5.0-1.0мкг/мл.

5. Изучена токсичность поверхностно-активных веществ (Tween-20,Tween-80, N-L,.NP-40). Определены минимальные не токсичные концентрации их, которые составили 10.0мкг/мл для Twen-20, Tween-80, N-L и 5.0мкг/мл для NP-40.

6. Обработка контаминированных линий RK-13, СПЭВ, ПО(П), MDCK, Ga, СТ, Vero, CRFK, РК-15 комплексным препаратом энрофлоксацином в дозе 35.0мкг/мл и NP-40 в дозе 5.0мкг/мл в течение пяти пассажей приводила к деконтаминации 7 из 9 клеточных линий (кроме Vero). При дальнейшем пассировании с антибиотиками деконтаминированные линии клеток оставались стерильными от микоплазм в течение пяти пассажей, реинфекция была отмечена в 10 пассаже.

Ill

7. Для поддержания линий клеток свободными от микоплазм необходимо в питательную среду для культур клеток добавлять энрофлоксацин (35.0мкг/мл) с поверхностно-активным веществом NP-40 (5.0мкг/мл) деконтаминацию необходимо проводить в течение трех последовательных пассажей и после трех-пяти пассажей без указанных прпаратов деконтаминацию повторять.

112

ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Для контроля чистоты клеточных культур необходимо проводить микробиологические исследования на жидких и полужидких питательных средах на основе триптического перевара мышц сердца.

Деконтаминацию клеточных культур необходимо проводить комплексным препаратом, включающим в себя ФХЛ (энрофлоксацин) и ПАВ (NP-40) в течение трех последовательных пассажей. После трех-пяти пассажей без использования комплексного препарата деконтаминацию культуры клеток следует повторить.

Результаты исследований используют в лаборатории культур тканей, питательных сред и растворов ВГНКИ и на ФГУП "Покровский завод биопрепаратов", а также в учебном процессе МГУПБ, при проведении практических занятий и чтении лекций.

113

Приношу сердечную благодарность научным руководителям:

- доктору ветеринарных наук, заслуженному деятелю науки, профессору М. А. Сидорову; доктору биологических наук, профессору В. Т. Ночевному за научное руководство и практическую помощь в выполнении диссертационной работы, а также научным сотрудникам лаборатории культур тканей, питательных сред и растворов ВГНКИ: Яковлевой Л. А., Ермаковой Е. В., Величко А. В., Пивоваровой О. С.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Брагина, Светлана Геннадьевна, 2001 год

1..Абрамз он А. А. Поверхностно-активные вещества. Свойства и применение. 2-е изд., перераб. и доп. - Л.:Химия, 1981.-304с.

2. Ананьева Е.Н., Афиногенов Г.Е., Блинов Н.П. Повышение активности тетрациклинов с помощью некоторых поверхностно-активных веществ. // Антибиотики. -1978. -№7.-С.605-609.

3. Андросик Н.Н. Применение РНГА для выявления противомикоплазменных антител в сыворотке крови свиней. // Ветеринария. -1986. -4. -С.32.

4. Использование иммуноферментного анализа для диагностики микоплазмозов крупного рогатого скота. / Барышников П. И., Бакулов И. А., Котляров В. М., Семенихин А. Л. и др. // Ветеринария. -1994. -№12. -С. 18-21.

5. Барышников П.И. Получение специфических микоплазменных сывороток. // Ветеринария. -1994. -№ 7. -С.24-26.

6. Барышников П. И. Идентификация микоплазм методом иммуноферментного анализа. // Ветеринария. -1995. -№ 2. -С.33-35.

7. Барышников П.И. Роль микоплазм в патологии крупного рогатого скота. // Актуал. пробл. ветеринарии. -Барнаул, 1995. -С. 116.

8. Барышников П.И., Цыганова А.А. Изучение возможности использования некоторых биохимических тестов для идентификации микоплазм. // Актуал. пробл. патологии животных и человека. -Барнаул, 1996. -С. 112-113.

9. Ю.Барышников П. И. Микоплазмозы в патологии крупного рогатого скота. // Ветеринария. -1997. -№ 10. -С.11.1. .Басова Н.Ю. Выявление антител к микоплазмам в сыворотке крови овец методом ИФА. // Тр. ВИЭВ. -1991. -№69. -С.44-49.

10. Методические указания по контролю сыворотки крови крупного рогатого скота на отсутствие вирусов-контаминантов и микоплазм / МЗ СССР. Гл. упр. карантин, инф. Разраб. ГИСК медбиопрепаратов им. Л.А.Тарасевича. Приняли участие:

11. Бердникова З.Е., Петручук Е.М., Шалунова Н.В. и др. М., 1988. - 254с.

12. М.Бердникова З.Е. Разработка и стандартизация методов выявления микоплазм контаминантов медицинских биологических препаратов: Дис. . канд. биолог, наук. -М., 1991.-136с.

13. Борхсениус С. Н., Шаги-Мухаметова Ф. Ф., Чернова О. А. Современные методы диагностики микоплазменных контаминаций в клеточных культурах. // Биотехнология. -1987. -Т.З. -№ 6. -С.775-783.

14. Борхсениус С.Н. Микоплазмы как объект биотехнологии. // Биотехнология. -1987.-Т.З.-С.50-58.

15. Борхсениус С. Н., Чернова О. А. Микоплазмы: молекулярная и клеточная биология, патогенность, диагностика. -Л.: Наука, 1989. -156 с.

16. Васильева В. И. Этиология и эпидемиология острых респираторных инфекций: Дис. . д-ра. мед. наук. -М., 1972. 462 с.

17. Вереников А. А. Транспорт ионов через клеточную мембрану. -Л.: Наука, 1978.285с.

18. Виолин Б.В., Абрамов В.Е., Ковалев В.Ф. Химиотерапия при бактериальных и паразитарных болезнях. // Ветеринария. -2001. -№1. -С.42-46.

19. Волькенштейн М. В., Фишман С. Н. Теория явления переноса в биологических мембранах.//Биофизика.-1970.-Т. 15. №1. -С.31-36.

20. Вульфович Ю.В., Жевержеева И.В., Ретиг В. Возможная этиологическая роль микоплазм при ревматойдном артрите. // Микоплазмы и микоплазмозы. М., 1985. -С.70-78.

21. Глузман М. X., Башура Г. С., Цагареишвили Г. В. Поверхностно-активные вещества и их применение в фармацеи. -Т.:Мацниераба, 1972,- С.90-97.

22. Горина Л.Г., Гончарова С.А., Игуменов А.В. Лабораторная диагностика микоплазмозов человека. // Вестн. академ. мед. наук СССР. М.: Медицина, 1991. -С.31-42.

23. Гриценко В.В. Сравнительное изучение и совершенствование методов диагностики микоплазма-контаминации в культурах клеток: Дис. . канд. биолог, наук. -М., 1982.

24. Грошева Г.А. Морфология и ультраструктура микоплазм. // Микоплазмы в патологии животных / Под ред. Г.Ф. Коромыслова. М.: Агропромиздат, 1987. - С. 9-14.

25. Грошева Г.А., Яблонская И.А., Шегидевич Э.А. Схема изучения культур микоплазм. // Микоплазмы в патологии животных / Под ред. Г.Ф. Коромыслова. М.: Агропромиздат, 1987. - С. 236-238.

26. Груздь О. В., Писько Г. Т. Совместное действие этония и антибиотиков на грам-положительные и грам-отрицательные микроорганизмы. // Антибиотики. -1982. -№ 9. -С.32-33.

27. Груздь О. В., Писько Г. Т. Взаимодействие антибиотиков с поверхностно-активными веществами. // Врачеб. дело. -1983. -№11. -С.103-108.

28. Дунаев Г.В. Патогенные микоплазмы. Ветеринарная микробиология и иммунология. М.: Агропромиздат, 1991. - 300с.

29. Культура клеток и тканей животных. / Дьяконов Л.П., Глухов В.Ф., Поздняков А.А. и др. Ставрополь, 1980. - С. 18-63.

30. Методические рекомендации по диагностике микоплазма-контаминации и деконтаминации клеточных культур. / Дьяконов Л. П., Поздняков А. А., Гололобова М. Т. и др. М.: ВАСХНИЛ, 1980. -28с.

31. Результаты исследований по диагностике микоплазма-контаминации и деконтаминации культур клеток. / Дьяконов Л.П., Поздняков А. А., Гололобова М. Т. и др. // Тр. ВИЭВ. -1981. -53. -С.63-77.

32. Дьяконов Л.П. Микоплазмы-контаминанты культур клеток // Микоплазмы в патологии животных. / Под ред. Г.Ф. Коромыслова. М.: Агропромиздат, 1987. -С. 159168.

33. Дьяконов Л.П. Способы обнаружения микоплазменной контаминации тканевых культур // Микоплазмы в патологии животных / Под ред. Г.Ф. Коромыслова. М.: Агропромиздат, 1987. - С.222-232.

34. Молекулярно-генетические подходы к изучению персистенции патогенных микоплазм. / Зингангирова Н.А., Раковская И.В., Неустроева В.В. и др. // Микробиол., эпидемиол. и иммунология. -1996. -№ 3. -С.39-42.

35. Методические рекомендации по контролю качества вирусологических питательных сред / МЗ СССР. Гл. упр. карантин, инф. Разраб. ГИСК медбиопрепаратов им. Л.А.Тарасевича. Приняли участие: Игудин Л.И., Карпович Л.Г., Шалунова Н.В.и др. -М., 1985,- 14с.

36. Икоев В.Н. Микоплазмы млекопитающих и птиц как возможные контаминанты вирусных вакцин: Дис. . канд. мед. наук. М., 1972. -241с.

37. Ишов А. М. Обнаружение капсулы у микоплазмы Acholeoplasma laidlawii: Автореф. дис. . канд. биолог, наук. Ин-та цитологии РАН. -С-П., 1994. -20с.

38. Каган Г. Я., Раковская И. В. Микоплазма-инфекция в культурах ткани. -Л.: Медицина, 1968. -173с.

39. Каган Г.Я. О патогенных потенциалах семейства Mycoplasmataceae. // ЖМЭИ. -1972. -11. -С.33-38.

40. Карайченцев В. Н., Дунаев Г. В., Русинов А. Ф. и другие. Изоляция Moraxella Bovis от молодняка крупного рогатого скота при инфекционном кератоконъюнктивите. // Ветеринария. -1992. -№ 2. -С.26.

41. Ковалев В. Ф. Пути повышения эффективности антибиотиков. // Ветеринария. -1983. -№ 10. -С.72-73.

42. Коваленко Я.Р., Сидоров М.А., Яблонская И.А. Устойчивость микоплазм к некоторым физическим факторам. // Бюлл. ВИЭВ. -1971. -11. -С.23-25.

43. Козлова В. И., Пухнер А. Ф. Вирусные, хламидийные и микоплазменные заболевания гениталий. 4-е изд., обнов, и доп. - М.:Филинь, 1997. - 536с.

44. К механизму влияния детергентов на плазмиды микроорганизмов. / Кривошейн Ю. С., Ачкасова Ю. А., Брызгунова Н. И. и др. // Тех. докл. Проб. клин, микробиол. в инфекц. клинике. -М., 1983. -С.298-299.

45. Куликова И. JL Диагностика микоплазма-контаминации в культурах клеток животных.//Ветеринария.-1989. -№ 8. -С.35-37.

46. Куликова И.Л., Дьяконов Л.П. Микоплазма-контаминация клеток животных в культуре (цитопатогенное действие, диагностика и деконтаминация). // Цитология. -1994. -Т. 36. -№ 6. -С.525-526.

47. Купинская О.А. О проблеме поражения клеточных линий рыб микоплазма-инфекцией.//Сб. науч. тр. ВНИИ пруд. рыб. хоз-ва. -1991. -Вып. 63,-С.26-32.

48. Курлович Д.В. Этиологическая роль микоплазм в нарушении воспроизводительной функции у свиноматок: Автореф. дис. . канд. вет. наук. Белорус. НИИ экспер. ветер, им. С.Н.Вышелесского. -Минск, 1994. -20с.

49. Изучение влияния катионных полимеров и ПАВ на устойчивость бактерий к канамицину. / Куценко Н.Н., Кузина З.А., Панарин Е.Ф. и др. // Антибиотики и мед. биотехнол. -1986. -6. -С.422-426.

50. Малахова М.С. Макаров В.В. Вирусы встречающиеся в клеточных культурах животного происхождения. // Вопросы вирусологии. -1986. -Т.31. -№ 6. -С.736-739.

51. Маркина О.С. Сравнительное изучение геномов микоплазм инфицирующих крупный рогатый скот: Автореф. дис. . канд. вет. наук, Всерос. н.-и вет. ин-т. -Казань. 1995.-15с.

52. Машковский М. Д. Лекарственные средства. В двух частях. 4.II -12-е изд., перераб. и доп. М.: Медицина, 1994. -688с.

53. Миллер Г. Г., Раковская И. В. Электронно-микроскопическое изучение ассоциации микоплазмы и бычьего лейкозного вируса в культуре ткани. // Вопросы вирусологии.-1983. -№5. -С.615-621.

54. Контаминанты клеточных культур / Миллер Г.Г., Раковская И.В., Неустроева В.В. и др. // Методы культивирования клеток: Сб. науч. тр.,- Л.: Наука, 1988. С. 104-126.

55. Михайлова Г. Р., Новохатский А. С., Родова М. А. Новый способ выявления микоплазм в перевиваемых культурах клеток. // Вопросы вирусологии. -1982. -Т.27. -№6. -С.119-121.

56. Михайлова Г. Р., Зорин Е. В., Князева В. Ф. и другие. Очистка перевиваемых клеточных линий от микоплазм. "Биология клетки в культуре". // Цитология. -1983. Т. 25. -№ 9. -С.1088.

57. Деконтаминация клеточных культур от микоплазм с помощью антибиотика оливомицина. / Михайлова Г. Р., Тихомирова Л. Г., Хижнякова Т. М., Глинских Н. П. // Вопросы вирусологии.-1991.-Т.36. -№ 3. -С.258-260.

58. Надь Г., Яблонская И.А., Штипкович Л. Антигенная структура микоплазм // Микоплазмы в патологии животных / Под ред. Г.Ф. Коромыслова. М.: Агропромиздат, 1987.-С.39-44.

59. Нестеренко Л. Н., Зингангирова Н. А., Попова О. В. Руководство по диагностике инфекционных заболеваний методом полимеразной цепной реакции. -М., 1998. -26с.

60. Неустроева В. В. Контаминация культур клеток микоплазмами. Принципы и методы деконтаминации: Дис. . канд. мед. наук. -М., 1969. -185с.

61. Неустроева В. В. Персистенция микоплазм в культурах клеток и индукция морфологических изменений. // Вест. АМН СССР. -1985. -№ 3. -С.22-25.

62. Неустроева В.В., Миллер Г.Г. Контаминанты клеточных культур. // Методы культивирования клеток.: Сб. науч. тр. JL, 1988. -С. 104-126.

63. Ночевный В.Т., Виолин Б.В., Карпухина О.Г. Стандартизация сыворотки крови животных квалификации для культур клеток. // Тез. докл. Всерос. науч. конф. 14-15 февраля 2001г., посвящ. 70-летию со дня организации ВГНКИ. -М., 2001. -С.214-215.

64. Ньютон Б. Поверхностно-активные бактерицидные вещества. // Стратегия химиотерапии. Пер. с анг. -М: Иностранная литература, 1960. -С.79-109.

65. Обухов И. Л., Груздев К. Н., Панин А. Н. Использование полимеразной цепной реакции в практических ветеринарных лабораториях. // Ветеринария. -1997. -№2. -С.24-26.

66. Использование некоторых антибиотиков для деконтаминации культур клеток от микоплазм. / Осколков B.C., Сидоров М.А., Осидзе Д.Ф. и др. // Бюлл. ВИЭВ. -1972. -13. -С.113-115.

67. Методические указания по диагностике возбудителей микоплазмоза методом полимеразной цепной реакции. / Панин А. Н., Груздев К. Н., Смоленский В. И. и др. М., 1997.-13с.

68. Пантина Р. А., Третьяков А. Н., Филатов М. В. Эффективный способ деконтаминации от микоплазм культур клеток млекопитающих. // Цитология. -1984. -Т.26. -№ 9. -С. 1076.

69. Першин Г. Н. Влияние бактерицидных и химиотерапевтических веществ на бактериальные ферменты. -М.: Медгиз. 1952. -С.26-87.

70. Писько Г.Т. Этоний. // Врачебное дело. -1977. -3. -С.4-9.

71. Медицинская микробиология. / Под. ред. Покровского В. И., Поздеева О. К. -М.: Гэотар мед., 1999. -С.513-528.

72. Полянская Г.Г., Ефремова Т.Н. Влияние микоплазменной контаминации и деконтаминации с помощью ципрофлоксацина на кариотипическую структуру клеточной линии легкого китайского хомячка У-19. II Цитология. -1993. -Т.35. -№ 8. -С.71-78.

73. Полянская Г.Г., Ефремова Т.Н., Фридлянская И.И. Деконтаминация культивируемых клеток от микоплазм с помощью ципрофлоксацина: отсутствие цито- и генотоксического эффекта. // Цитология. -1994. -Т.36. -№ 6. -С.534.

74. Прозоровский С. В., Раковская И. В., Вульфович Ю. В. Медицинская микоплазмология. РАМН. М.: Медицина, 1995. -288с.

75. Персистенция микоплазм в инфицированном организме наблюдения причины и механизмы, диагностика. / Прозоровский С. В., Раковская И. В., Горина Л.Г., и др. // ЖМЭИ. -1997. -№ 4. -С.47-51.

76. Пустовар А. Я., Кирпич В. В., Авдосьева И. К. Микоплазмозы сельскохозяйственных животных. -К.: Урожай, 1978. -116с.

77. Раковская И. В. Загрязнение тканевых культур плевро-пневмониеподобными организмами.//Вопросы вирусологии.-1965. -№ 2. -С.233-235.

78. Раковская И. В. Биологическая характеристика микоплазм, загрязняющих культуры тканей. // Вест. АМН СССР. -1965. -№ 8. -С.50-54.

79. Раковская И.В., Горина Л.Г. Колейкемогенный эффект отдельных компонентов клетки Mycoplasma arthritidis. // Микоплазмы и микоплазмозы. -М., 1985.-С.100-105.

80. Раковская И. В. Проблема микоплазмо-вирусных инфекций: Дис. . д-ра. биолог, наук (в форме научного доклада). М., 1990. -51с.

81. Раковская И. В. Микоплазмы и микоплазмозы человека. -М., 1999. -51с.

82. Раковская И.В., Горина Л.Г. Лабораторная диагностика микоплазмозов человека. // Клинич. лаб. диагн. -1999. -№11. -С.6-7.

83. Раковская И.В. Горина Л.Г. Лабораторная диагностика микоплазмозов человека. // Клинич. лаб. диагн. -2000. -№ 8. -С.50-53.

84. Расулев О.Ш. Совершенствование методов диагностики и микоплазма-контаминации и деконтаминации культур клеток животных: Дис. . канд. биолог, наук,-М., 1987. -169с.

85. Руденко А.В. Никонова Н.А. Метод количественного определения лекарственной чувствительности микоплазм. // Микробиол. -1982. -44. -№ 5. -С.83-84.

86. Рудзит Э. А, Ермаченко В. А., Нещадим Г. А. Сравнение антимикробных свойств котамина АБ и роккала и их действие на мембранные системы бактерий. // Антибиотики. -1981. -№ 1. -С.847-852.

87. Методические указания по применению физикохимических методов контроля питательных сред / МЗ СССР. Приняли участие: Рукова В.Ф., Бендас Л.Г., Максимова Г.А. и др. М., 1997. - 18с.

88. Самуилов В. Д. Иммуноферментный анализ. // Соровский образовательный журнал.-1999. -№12(49). -С.9-15.

89. Сафаров Э.Р., Бакшеева С.С. Чувствительность микроорганизмов к препаратам на основе антибиотиков и ПАВ. // Пробл. вет. биол. -М., 1997. -С.76-80.

90. Сергеев В.А. Собко Ю.А. Культуры клеток в ветеринарии и биотехнологии. -К.:Урожай, 1990.-С.110-112.

91. Сидоров М.А. Питательные потребности и метаболизм микоплазм. // Микоплазмозы животных / Под ред. Я.Р. Коваленко -М.: Колос, 1976. -С.30-38.

92. Сидоров М.А. Классификация, основные свойства и распространение микоплазм. // Микоплазмозы животных / Под ред. Я.Р. Коваленко -М.: Колос, 1976. -С.5-15.

93. Сидоров М. А., Скородумов Д. И., Федотов В. Б. Определитель зоопатогенных микроорганизмов. -М.: Колос, 1995. -319с.

94. Симонова Э.Г., Зуев В.В., Чевелев С.Ф. Применение электронной микроскопии для выявления контаминации клеточных культур. // Вопросы вет. вирус., микробиол. и эпизоотол., ч.П, -Покров, 1992. -С.295-296.

95. Смирнова И.Р. Культуральные и биохимические свойства различных штаммов микоплазм. // Ветеринария. -1983. -№ 4. -С.63-64.

96. Смирнова Т. Д. Деконтаминация клеточных культур от микоплазм. // Цитология. -1984. -Т.26. -№ 9. -С.1081-1082.

97. Ю.Смирнова Т. Д., Фридлянская И. И. Контаминация клеточных культур микоплазмами: методы обнаружения и возможные пути распространения микоплазма-инфекции. // Цитология. -1985. Т.27. -№ 3. -С.276-281.

98. Ш.Смирнова Т. Д. Деконтаминация клеточных культур от микоплазм: сравнение трех методов.//Цитология.-1986. Т.28. -№10. С.1113-1116.

99. Рекомендации по предупреждению внутрилабораторной контаминации клеточных культур микоплазмами и методы проверки клеточных культур на контаминацию микоплазмами. / Смирнова Т. Д., Миллер Г.Г., Неустроева В.В., Раковская И.В.// Л., 1987. -С.9-19.

100. Применение амплифицированной тест-системы для выявления персистирующих микоплазм. / Соловьева С.В., Зингангирова Н.А., Гончарова С.А. и др. // Микробиол. эпидемиол. и иммунология. -1994. Прил. (авг.-сент.). - С.60-64.

101. Применение полимеразной цепной реакции для выявления тетрациклиноустойчивых штаммов урогенитальных микоплазм. / Соловьева С.В., Цой Е.Г., Зингангирова Н.А. и др. // Клинич. лаб. диагн. -2000. -№1. -С.43-46.

102. Сологуб В. В., Писько Г. Т., Рожавин М. А. Комбинированное действие этония с антибиотиками на Staph, aureus. // Антибиотики. -1982. -№6. -С. 16-17.

103. Пб.Методы лабораторной диагностики вирусных болезней животных / Сюрин В. Н., Белоусова Р. В., Соловьев Б. В., Фомина Н. В. М.: Агропромиздат, 1986. -351с.

104. Тимаков В. Д., Каган Г. Я. L-формы бактерий и семейство Mycoplasmataceae в патологии.-М.:Медицина, 1973. -392с.

105. Тихомирова Л. Г. Микоплазма-инфекция клеточных культур, используемых в вирусологии, и методы их деконтаминации: Автореф. дис. . канд. биолог, наук. -М., 1989. -11с.

106. Трапезникова Т. М. Изучение биологических свойств микоплазм клеточных культур и разработка методов их деконтаминации: Дис. . канд. биолог, наук. -П., 1972. 165с.

107. Фукс П.П., Калашник Н.В., Герус Г.Б. К вопросу о лабораторной диагностике микоплазмоза. // Материалы междунар. науч. конф. "Общая эпизоотология: иммунол. и методологич. пробл.". -Харьков, 1995.-С.253-255.

108. Фукс П.П., Калашник Н.В., Гончарова Л.В. Влияние состава питательной среды на активность диагностикума при микоплазма-инфекции. // Материалы междунар. науч. конф. "Общая эпизоотология: иммунол. и методологич. пробл." -Харьков, 1995. -С.355-358.

109. Идентификация микоплазм методом полимеразной цепной реакции. / Чевелева Т.С., Цыбанова Л.Я., Вишняков И.Ф. и др. // Науч. основы технологии пром. пр-ва. вет. биол. препаратов: Тез. докл.-Щелково, 1996. -С.43-44.

110. Шегидевич Э.А. Чувствительность микоплазм к различным физическим и химическим воздействиям // Микоплазмозы животных / Под ред. Я.Р. Коваленко. -М.: Колос, 1976. -С.38-68.

111. Шегидевич Э.А. Питательные среды, методы выделения и идентификации микоплазм // Микоплазмозы животных / Под ред. Я.Р. Коваленко -М.: Колос, 1976. -С.68-83.

112. П1егидевич Э.А. Чувствительность микоплазм к физическим и химическим воздействиям // Микоплазмы в патологии животных / Под ред. Г.Ф. Коромыслова. М.: Агропромиздат, 1987.-С.30-38.

113. Шегидевич Э.А. Микоплазмы мелкого рогатого скота // Микоплазмы в патологии животных / Под ред. Г.Ф. Коромыслова. М.: Агропромиздат, 1987. -С.77-94.

114. Щигловитова О. Н., Эткинд Г. В., Jlone В. Д. и другие. Сравнительное изучение чувствительности методов индикации микоплазм в клеточных культурах. // Вопросы вирусологии. -1982. -Т.27. -№4. -С.72-77.

115. Штипкович Л. Номенклатура и классификация микоплазм // Микоплазмы в патологии животных / Под ред. Г.Ф. Коромыслова. М.: Агропромиздат, 1987. -С.5-9.

116. Штипкович Л. Молекулярно-биологические свойства микоплазм // Микоплазмы в патологии животных / Под ред. Г.Ф. Коромыслова. М.: Агропромиздат, 1987. -С.15-20.

117. Штипкович Л., Месарош Я. Микоплазмы крупного рогатого скота // Микоплазмы в патологии животных / Под ред. Г.Ф. Коромыслова. М.: Агропромиздат, 1987. -С.45-46.

118. Яблонская И.А. Контаминация микоплазмами культур клеток // Микоплазмозы животных / Под ред. Я.Р. Коваленко -М.:Колос, 1976. -С.268-272.

119. Яблонская И.А. Серологическая типизация микоплазм сельскохозяйственных животных. // Тр. ВИЭВ. -1977. -Т.46. -С. 13.

120. Abiven P. Pommier P. Technique de lavage tracheobronchique par voie transnasale pour la detection de Mycoplasma hyopneumoniae chez le pore vivant non anesthesie. // Veter. Res., -1993. -Vol. 24, № 6. -P.515-522.

121. Biochemical diversity within the Mycoplasma mycoides cluster. / Abu-Groun E.A.M., Taylor R.R., Varsani H., Wadher B.J., Leach R.H., Miles R.J. // Microbiol., -1994. -140. -P.2033-2042.

122. Breeder turkey hens seropositive and culturenegative for Mycoplasma synoviae. / Avakian A.P., Ley D.H., Berkhoff J.E., Ficken M.D. // Avian Dis., -1992. -Vol. 36, № 3. -P.782-787.

123. Balduzzi P., Charbonneau R. J. Decontamination of pleuropneumonia-like organism (PPLD) infected tissue cultures. // Experimentia, -1964. -20. -P.651-652.

124. Barile M. Mycoplasma and cell cultures. // Nat.Cancer Inst. Monogr.-1968. -№29. -P.201-204.

125. Barile M., Kern J. Isolation of Mycoplasma arginine from commercial bovine sera and its implication in contaminated cell cultures. // Proc. Soc. Exp. Biol. Med., -1971. -Vol.138, №2. -P.432-437.

126. Barile M. Mycoplasmal contamination of cell cultures: mycoplasma-viruscell culture interactions. // Contaminat.Tissue Cult. New York-London, -1973. -P.l31-172.

127. Barile M., Hopps H., Grabowski M. Incidence and sources of mycoplasma contamination; a brief review // Mycoplasma Infect. Cell Cult. Proc. Inst. Med. Res. Workshop, Camden, -N.Y., -1977, -New York-London, -1978. P.35-45.

128. Barile M. F. Mycoplasma-tissue cell interaction: In: the Mycoplasmas (ed. Barile M. F., Razin S., Tully J. G., Whitcomb R. F.) // N.Y. Acad. Press., -1979. -Vol. II. -P.206-227.

129. Belton D. Mycoplasmas of sheep and goats in New Zealand. // Surveillance, -1990. -Vol.17, №2. -P. 18-19.

130. Benet G. Infections mycoplasmiques des cultures cellulaires. // Sci. Vet. Med. Сотр., -1989.-91, № 5-6.-P.241-261.

131. Beyazova M.L., Darakchieva M.A., Georgieva B.L. Action of new antibiotic complexes on some mycoplasmic species. // Acad. Bulgar. Sci., -1984. -37, № 9. -P.1231-1232.

132. Birkelund S., Freundt E.A. The mycoplasmacidal effect of herbicolin A. // J. Antimicrob. Chemother, -1985. -16, № 4. -P.449-457.

133. Bolske G. Survey of Mycoplasma Infections in Cell Cultures and a Comparison of Defection Methods // Zbl. Bakt. Hyg., -1988. -A269, № 3. -P.331-340.

134. Bonissol C., Sasaki Т., Stoiljkovic B. Assay for detection of ad enosine phosphorylase from mycoplasmas. // Ann. Inst. Pasteur. Microbiol., -1988. -Vol.139, № 6. -P.705-715.

135. Breard A. Note sur un essai d: utilisation d' un substitut de seruni pour la croissance des mycoplasmes. // Rev. Elevage Med. veter., -1990. -T.43, № 4. -P.457-458.

136. Busolo F., Zanchetta R. The effect of Mycopl. hominis and Ureaplasma urealyticum on hamster egg in-vitro penetration by human spermatoroa. // Fertility and Sterility, -1985. -Vol.43, № 1. -P.110-114.

137. Assessment of the efficacy of tilmicosin as a treatment for Mycoplasma gallisepticum infections in chickens. / Charleston В., Gate J.J., Aitken I.A., Reeve- Johnson L. // Avian. Pathol. -1998. -Vol.27, № 2. -P.190-195.

138. Chen T. R. In situ detection of mycoplasma contamination in cell cultures by fluorescent Hoechst-33258 stain. // Exp. cell Res., -1971. -Vol.104. -P.255-262.

139. Chen Y., Krause D. Parasitism of Hamster Trachea Epithelial Cells by Mycoplasma pneumoniae. // Infection and Immunity, -1988. -Vol.56, № 3. -P.570-576.

140. Chiocco D., Cavaliere N., Bisceglia D. Isolamento di micoplasmi da vari organi di piccioni clinicamente sani. // Selez. veter. -1990. -Vol.31, № 11. -P.1435-1438.

141. Стегнш Б.Т. Проблеми стабшзацн юп тин них культур, ям використовують у бютехнологи ветеринарних бюпрепарат1в. // Вет. медицина. -1994. -Вии. 69. -С.29-32.

142. Dedieu L., Mady V., Lefevre Р.С. Development of a selective polymerase chain reaction assay for the detection of Mycoplasma mycoides subsp. Mycoides S.C. (contagious bovine pleuropneumonia agent). //Veter. Microbiol., -1994. -Vol.42, № 4.-P.327-339.

143. Doid P.A. Bovine genital, mycoplasmosis // Can. Vet. J., -1981. -Vol.22, № 11. -P.339-343.

144. Recombinant DNA probes and PCR for detection of Mycoplasma gallisepticum strain. / Dove P., Bencina D., Antes R. and Mann W. // IOM Letters, -1992. -№ 2. -P. 109.

145. Dybvig. K., Voelker L.L., Molecular biology of mycoplasmas. // Ann. Rev. Microbiol, Palo Alto (Calif), -1996. -Vol. 50. -P.25-57.

146. Edward D. G. A selective medium for pleuropneumonia-like organism. // J. Gen. Microbiol.,-1947.-1.-P.238.

147. Fischer O. Zasady kultivovani bunecnych linii se zretelem na opatreni protisireni mycoplasmat. // Veterinarstvi, -1992. -R.42, C.7. -S.268-269.

148. Foy H. Future Needs in Clinical Research on Mycoplasmal Disease in Humans // Isr. J. Med. Sci., -1987. -Vol.23, № 6. -P.774-775.

149. Gardella R. S., Giudice R. A. Antibiotic sensitivities and elimination of Mycoplasma from infected cell cultures. // Isr. J. Med. Sci., -1984. -Vol.20., № 10. -P.931-934.

150. Garg D.N., Kapoor P.K., Singh Y. Mollicutes associated with bovine reproductive disorders // 7th Int. Congr. Int. Organ. Mycoplasmol.(JOM), Baden near Vienna, -1988. Compend.

151. Rapid Detection of Mycoplasma Antibody. / Goldschmidt B.L., Mennona J.P., Dowling P.C. etal. //J. Immunol.,-1982. -117, №3. -P.1054-1056.

152. Gori G. В., Lee D. J. A method for eradication of mycoplasma infections in cell cultures. //Proc. Soc. Exp. Biol. Med., -1964. -117, 3, -P.918-921.

153. Granato P., Рое L., Weiner L. New York City medium for enhanced recovery of Mycoplasma pneumoniae from clinical specimens. // J. Clin. Microbiol., -1983. -Vol.17, № 6. -P.1077-1080.

154. Harbi M.S., Elhassan S.M. Isolation and identification of Mycoplasma bovigenitalium from imported semen of bulls // Vet. Res., -1983. -Vol.113, № 5. -P.l 14-115.

155. Hawkes R., Niday E., Gordon J. A dotimmunobinding assay for monoclonal and other antibodies // A nal. Biochem., -1982. -119. -P.142-147.

156. Hayflick L. Decontaminating tissue cultures infected with pleuropneumonia-like organisms.//Nature, -1960. -185. -P.778-784.

157. Hayflick L. Screening tissue cultures for mycoplasma infections. // Tissue Cult. Meth. and Appl. New York e. a., -1973. -P.722-728.

158. Jacobs E., Goeremdt U., Bredt W. Isolation and characterization of Uraplasma urealyticum u Mycoplasma hominis // Zbl. Bakteriol, -1990. -Bd.273, № 1. -P.98.

159. Jumanova K., Machatkova M. Detection of Mycoplasma in cell cultures and biologicals. //Arch. Exp. Veterinarmed., -1986. -40, № 1. -P.136-141.

160. Kahane J. In vitro studies on the mechanism of adherence and pathogenicity of mycoplasmas // Isr. J. Med. Sci., -1984. -Vol.20, № 9. -P.874-877.

161. Калашник Н.В. Удосконалення складу живильного середовища для культивування мшоплазм: Автореф. дис. . канд. вет. наук Укр. акад. аграр. наук 1н-т експерим., i клпич. вет. медицини. -Харюв, 1996.-17с.

162. Kaplan D., Hencel Т. Mycoplasma-infection of cell cultures: thymidine incorporation of culture supernatans as a screening test.//J. of Immunology., -1984. -Vol.32, № 1. P.9-11.

163. Kaprtova J., Jurmanova K., Spurna V. An autoradiographic method of doteiting A. Iaidlawii and Mhyorhinis in cell cultures. // In vitro, -1981. -Vol.17. -P.563-567.

164. Karsten U., Rudolf M. Monoclonal antibodies against Tumor-associated Antigens-Mycoplasma as a Major Technical obstacle and its possible circumvention by Azaserine selection medium // Archiv fur Geschwulstforschung, -1985. -55, № 5. -P.305-309.

165. Katoch R.C., Sodhi S.S., Baxi K.K. Distribution of mycoplasmas in the genital tract of dairy bulls // Indian Vet. J., -1984. -Vol.61, № 2. -P.89-95.

166. Kirchoff H., Runge M. 100 Jahre Mycoplasmen-Patogenitat fur Nutz- und Haustiere. // Berl. u. munch, tierarztl. Wschr., -1998. -Jg.lll, H.10. -S.387-392.

167. Kobayashi H. Molecular biological study of animal mycoplasmas. // Bull. Nat. Inst. Anim. Health, -1999. -№ 106. -P.35-36.

168. Isolation and identification of mycoplasma strains from various species of wild rodents. / Koshimizu K., Saito Т., Shinozuka Y., Tsuchiya K., Cerda O. // J. veter. med. Sc., -1993. -Vol.55, №2. -P.323-324.

169. Korting H., Schill W., Abeck D. Erhohte Nachweis-rate von Ureaplasma urealyticum in menschlichem Sperma nach Verdunnung // Fertilitat, -1988. -Bd.4, № 3. S.125-127.

170. Kotani H., Mc.Garrity G. Rapid and simple identification of mycoplasmas by immunobinding // J. Immunol. Meth., -1985. -85, № 2. -P.257-267.

171. Kotani H., Mc.Garrity G. Identification of Mycoplasma Colonies by Immunobinding //J.Clin. Microbiol., -1986. -23, № 4. -P.783-785.

172. Kumar A., Gard D.N., Mahajan S.K. Experimental pathogenicity of Mollicutes of bovine udder origin in hamster tracheal ring organ culture. // Indian J exper. Biol., -1992. -Vol. 30, №7. -P.607-610.

173. Mycoplasmas isolated from the respiratory tract of cattle and goats in Tanzania. / Kusiluka L.J.M., Ojeniyi В., Friis N.F., Kazwala R.R., Kokotovic B. // Acta, veter. scand., -2000. -Vol. 41, № 3. -P.299-309.

174. Larson E. and Brunk U. T. Tem and Sem findings in cat fibroblasts cultivated in vitro with and without mycoplasma. // Acta Pathologica et micr. scand sect A., -1981. -89, 1. -P.9-15.

175. Levine E. M. A simplified method for the detection of mycoplasmas. // Methods Cell Biologyil., -1974. -Vol.8. P.229-248.

176. Levisohn S. The role of mycoplasmas in animal diseases. // Mycoplasmas in veterinary medicine. Israel J. veter. Med., -1992. -Vol.47, №1. -P. 1-6.

177. Levy J., Summer P., Hooser L. Rapid Tissue Culture Method for Detection of Mycoplasma hyorhinis. //J. Gen. Microbiol., -1982. -128. -P.2817-2820.

178. Limb D. Mycoplasmas of the human genital tract. // Med. Lab. Sci., -1989. -Vol.46, №2. -P. 146-156.

179. Decontamination of cell lines by selective elimination of Mycoplasmas. / Machatkova M., Jurmanova K., Chlupova L et al. // Arch, exper. Vet. Med., -1986. -40, № 1. -P.151-156.

180. Macowan K.J. Mycoplasma mycoides infections in ruminants: the current situation // Isr. J. Med. Sci., -1984. -Vol.20, № 9. -P.854-858.

181. Maul G. Positive detection of mycoplasma contamination by the whole-mount preparation of cell cultures for transmission electron microscopy.//J. Bacteriol., -1978. -Vol.133. -P.1452-1456.

182. Martinez A., Cala 0., Barreras M. Immunoperoxidasa para la deteccion de micoplasmas en cultivos celulares. // Rev. Salud anim., -1994. -Vol.16, № 1/3. -P.1-4.

183. Martinez A., Fernandez C. Deteccion e identificacion de micoplasmas en cultivos celulares. // Rev. Salud anim. -1996. -Vol.18, № 1. -P.l-4.

184. A non-radioactive DNA probe for the detection of Mycoplasma pulmonis in murine mycoplasmosis. / Matsuzaki M., Harasawa R., Kimizuka F., Koshimizu K. // Microbiol, and Immunol., -1989. -Vol.33, № 2. -P.129-132.

185. Mc Garrity G.J., Kotani H. Cell culture mycoplasmas. // The mycoplasmas Orlando (Fla), -1985. -Vol.4. -P.353-390.

186. Pilaszck J., Trusczynski Affinity of microorganisms of the genus Ureaplasma to the reprodactive organs of cattle. // Сотр. Immunol. Microbiol, and Infect. Diseases., -1988. -Vol.11. №3-4. -P.177-180.

187. Polak-Vogelzang A., Reygers R. Isolation and subcultivation of fastidious mycoplasmas from cell cultures. // Zbl. Bakteriol. Parasitenk. Infectionskrankn und Hyg., 1. Abt. Orig., -1978. -A.241, №2. -P.273-276.

188. Polak-Vogelzang A., Reygers R., Hekkens F. Isolation of Mycoplasma Ryorhinis and Mycoplasma fermentans from cell cultures. // J. of Bid. Standartization., -1980. -8. -P.243-254.

189. Polloc M. E., Kenny G. E. Mammalian cell cultures contaminated with PPLO III. Elimination of PPLO with Specific Antiserum.//Proc. Soc. Exp. Biol. N.Y., -1963. -112. -P.176-181.

190. Rahman S. В., Semar J. В., Perlman D. Antibiotic resistance in mycoplasma isolated from tissue cultures. // Appl. Microbiol., -1967. -15. -4. -P.940.

191. Razin S., Hyman H., Nur. J., Yogev D. DNA probes for detection and identification of mycoplasmas (Mollicutes). // Isr. J. Med. Sci., -1987. -Vol.23, № 6. -P.735-741.

192. Caprine contagious agalactia caused bu Mycoplasma agalactiae in the Canary Islands. / Real F., Deniz S., Acosta В., Ferrer 0., Poveda J.B. // Veter. Rec. -1994. -Vol.135, №1. -P.15-16.

193. In vitro activity of new quinolones against human mycoplasmas. / Renaudin J., Quentin C., Barbey В., Bebear C. // The Intern. Congr. of the 10M Birmingham (Alabama), -1986. -P.275.

194. DNA probes for the detection of Mycoplasmas in Genital Specimens. / Roberts M., Hootow M., Stamm W. et al. // Isr. J. Med. Sci., -1987. -Vol.23, № 6. -P.618-620.

195. Robinson L., Wiechelhausen R., Roizman B. Contamination of human cell cultures by PPLO.//Science, -1956.-124.-P.l 147-1148.

196. Sancher P., Regan J.Vertical transmission of Ureaplasma urealyticum from mothers to preterm infants. // Pediat. Infec. Disease J., -1990. -Vol.9, № 6. -P.398-401.

197. Sauer H. Mykoplasmen: brologie-diagnostik-humanmedizische bedeutung. Tei.l. // Lab. Med., -1990. -Vol.13, № 5. -P.261-262, 264-267.

198. Schmidt J., Erfle V. Elimination of mycoplasma from cell cultures and establishment of mycoplasma free cell line. // Exp. Cell. Res., -1984. -Vol.l 52. -P.565-570.

199. Isolation of mycoplasmas from bull semen and serological examination of aborted cows sera for presence of mycoplasma antibodies. / Stipkovits L., Mc Szaros J., Pazmany В., Varga Zs. // Arch. exp. Veterinarmed, -1983. -Vol.37, № 3. -P.429- 433.

200. Thouvenot D., Bosshard S. Review of human Mycoplasma infections. // Sci.Vet. Med. Сотр., -1989. -Vol.91, № 5-6. -P.211-224.

201. Timenetsky J. Isolatento de Acholeplasma em diferentes culturas celulares // Rev. Microbiol,-1990.-Vol. 21, №2. -P.153-156.

202. Tully J. New laboratory techniques for isolation of Mycoplasma pneumoniae. // Yale J. Biol, and Med., -1983. -Vol.56, M 5-6. -P.511-515.

203. Weng Bifen, Chen Zhangliu. Pharmacodynamic studies of the combinations of antibacterial agents against Mycoplasma gallisepticum. // Acta veter. zootechn., sinica -1995. -Vol.26, № 6. -P.558-564.

204. Wolford R., Hetrik F. Elimination of Mycoplasma contaminants from virus stocks by treatment with WR-1339 ionic detergents. //Appl. Microbiol., -1972. -24, № 1. -P.18-21.1. Утверждаюнваря ЖХ>х г.н

205. Указанные результаты включены в материалы лекции по теме "Возбудитель микоплазмозов животных".зав. кафедройо,1. М.А. Сидоров

206. ЗАКЛЮЧЕНИЕ о внедрении в практику фторхинолоновых препаратов на ФГУП «Покровский завод биопрепаратов»

207. В концентрации 20,0 мкг/мл и ниже большинство фторхинолонов оказались не токсичными для исследуемых клеточных линий и первично трипсинизированных клеток млекопитающих.

208. Хорошими деконтаминирующими свойствами в отношении микоплазм обладали норфлоксацин и энрофлоксацин.

209. ПО начальника ПТО, кандидат биологических наук ФГУП «ПЗБ»1. Р.Ф.Гугина1. Начальник цехаэкспериментального производства, кандидат биологических наук ФГУП «ПЗБ»1. О.В.Белун

210. Подписи О.В.Белун и Р.Ф.Гугиной заверяю:1. Начальник ОЗКИ ФГУП «ПЗБ»1. А.А.Карпунин