Экспериментальное изучение противопаркинсонического действия фактора роста нервов, сорбированного на поли(бутил)цианоакрилатных наночастицах тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.25, кандидат биологических наук Курахмаева, Камила Башировна

• Курахмаева, Камила Башировна
• кандидат биологических наук
• 2009

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Курахмаева, Камила Башировна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Современные представления о болезни Паркинсона 12 и ее фармакотерапии

1.2. Фактор роста нервов (ФРН) как средство лечения 28 нейродегенеративных заболеваний

1.3. Полимерные наночастицы - перспективные транспортные системы 43 для направленной доставки лекарственных средств в мозг

ГЛАВА II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

2.1. Получения экспериментальной лекарственной формы. ФРН на 62 Поли(бутил)цианоакрилатных наночастицах (ПБЦА-НЧ), покрытых полисорбатом-80 (ПС-80) (ФРН-НЧ-ПС-80)

2.2. Материалы и методы, используемые для изучения направленного 66 транспорта ФРН через ГЭБ с помощью ПБЦА-НЧ, покрытых ПС

2.3. Методы изучения влияния ФРН-НЧ-ПС-80 на поведенческие 70 проявления МФТП-вызванного паркинсонического синдрома

2.3.1. Экспериментальные животные

2.3.2. Вещества и материалы

2.3.3. Методы регистрации поведенческих нарушений при 74 МФТП-вызванном паркинсоническом синдроме у мышей С57ВЬ/

2.4. Методика регистрации биоэлектрической активности мышей 76 линий С57В1/6 с МФТП-вызванном паркинсоническим синдромом

2.4.1. Методика вживления электродов

2.4.2. Методика регистрации ЭЭГ

2.5. Статистическая обработка результатов

ГЛАВА III. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ 80 3.1. Получение экспериментальной- лекарственной формы ФРН-НЧ-ПС- 80 80 и её стандартизация

3.1.1. Синтез ПБЦА-НЧ

3.1.2. Определение размеров,ПБЦА-НЧ с помощью фотонной 87 корреляционной спектроскопии

3.1.3. Электронно-микроскопическое изучение формы и размеров 88 ПБЦА-НЧ

3.1.4. Получение наносомальной формы ФРН

3.2. Изучение транспорта ФРН-НЧ-ПС-80 через ГЭБ

3.2.1. Морфологическое исследование ПБЦА-НЧ методами 93 флуоресцентной и электронной микроскопии

3.2.2. Количественное определение ФРН в тканях мозга 98 экспериментальных животных методом иммуноферментного анализа

3.3. Изучение эффектов ФРН-НЧ-ПС-80 на модели МФТП-вызванного 104 паркинсонического синдрома у мышей С57В1/

3.3.1. Сравнительное изучение антипаркинсонического действия 104 ФРН, ФРН-НЧ, ФРН-ПС-80 и ФРН-НЧ-ПС-80 при внутривенном введении после МФТП

3.3.1.1. Изучение антипаркинсонического действия ФРН, ФРН-НЧ, 106 ФРН-ПС-80 и ФРН-НЧ-ПС-80 по показателям олигокинезии

3.3.1.2. Изучение антипаркинсонического действия ФРН, ФРН-НЧ, 112 ФРН-ПС-80 и ФРН-НЧ-ПС-80 по показателям ригидности

3.3.1.3. Изучение антипаркинсонического действия ФРН, ФРН-НЧ, 115 ФРН-ПС-80 и ФРН-НЧ-ПС-80 по показателям тремора

3.3.2. Изучение антипаркинсонического действия ФРН-НЧ-ПС-80 116 при (в/б) введении до и после развития паркинсонического синдрома

3.3.3. Сравнительное изучение влияния ФРН-НЧ-ПС-80 и гимантана 124 на поведенческие проявления МФТП-вызванного паркинсонического синдрома

3.4. Анализ электрофизиологических механизмов 130 антипаркинсонического действия ФРН-НЧ-ПС-80 и гимантана на мышах линии С57В1У

3.4.1. Влияние МФТП на биоэлектрическую активность различных 130 структур мозга мышей линии C57BL/

3.4.2. Влияние ФРН-НЧ-ПС-80 на биоэлектрическую активность 135 мозга мышей линии C57BL/6 при паркинсоническом синдроме, вызванном МФТП

3.4.3. Изучение влияния гимантана на биоэлектрическую активность 140 мозга мышей линии C57BL/6, изменённую МФТП

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Экспериментальное изучение противопаркинсонического действия фактора роста нервов, сорбированного на поли(бутил)цианоакрилатных наночастицах»

Актуальность темы

В последние годы проблема нейродегенеративных заболеваний стала особенно острой в связи с ухудшающейся экологической ситуацией, более ранними проявлениями скрытой генетической патологии и увеличением продолжительности жизни в развитых странах Запада [Benjamin C.L., Tsui К.С. 2001; Elbaz A, Moisan F. 2008]'. Существующие на сегодняшний день подходы к медикаментозной коррекции не всегда позволяют тормозить прогрессирование заболевания, а лишь устраняют их симптоматику [Левин О.С., 2005; Alexi Т. et al., 2000], а длительное применение большинства противопаркинсонических средств сопровождается значительными побочными эффектами со. стороны различных органов и систем, что, в свою очередь, еще больше снижает качество жизни пациентов [Кучеряну В.Г. и соавт., 2001; Иллариошкин С.Н., 2004; Угрюмов М.В., 2007; Артемьев Д.В., 2008].

Одним из путей воздействия на процесс развития нейродегенеративных i заболеваний и, в частности, БП является применение нейротрофического фактора роста нерва (ФРН) [Yuen Е.С., Molbey W.C 1996; Mufson E.J. et al. 1999; Rattray M., 2001], который вовлечен в модуляцию нейромедиаторных систем, в том числе дофаминергической передачи в мозге [Hardy J., Gwinn-Hardy К. 1999; Pedre L.L. et al., 2002], регулирует выживаемость нейронов [Bibel М., Barde Y., 2000]. Снижение уровня ФРН наблюдается в крови и в структурах чёрной субстанции больных БП [Rinne J.O et. al., 1989; Garcia E. et al., 1992]. Существенным моментом, лимитирующим применение ФРН, является его невысокая способность проникать через гематоэнцефалический барьер ввиду высокой гидрофильности и большой молекулярной массы [Castellenos-Ortega М. R. et al., 1999; Banks W. et al., 2002].

В настоящее время наносистемы вызывают все возрастающий интерес, так как они способны транспортировать лекарственные вещества (ЛВ) внутрь клеток и при их циркуляции содержащееся в них биологически активное вещество защищено от инактивации и его действие пролонгируется [Сейфулла Р.Д. и соавт., 2008; Чехонин В.П. и соавт., 2009; Piotrovsky L.B., et al. 2004; Ringe К. et al. 2004; Kreuter J., 2002; Alyautdin R. et al., 1998]. Одним из способов доставки JIB в мозг является использование наночастиц (НЧ) на основе бутилцианоакрилата [Kreuter J., 1991; Vauthier С. et al., 2003]. Поли(бутил)цианоакрилатные НЧ (ПБЦА-НЧ) обладают высокой сорбционной емкостью, подвергаются биодеградации, обеспечивают доставку и высвобождение JIB, имеют низкую острую и хроническую токсичность [Grislain L. et al., 1983; Kreuter J. et al., 1984; Gelperina S.E., et al., 2002; Pereverzeva E. et al. 2008]. Синтез НЧ на основе бутилцианоакрилата впервые был описан в 1977 г. [Couvreur Р. et al., 1977], а позднее были изучены и свойства этих НЧ в Institut für Pharmazeutische Technologie, Goethe-Universität (Франкфурт-на-Майне, Германия) и кафедре фармакологии фармацевтического факультета Московской медицинской академии им. И.М. Сеченова [Kreuter J., 1994, Alyautdin R. et al., 1997, 2001]. При системном введении ПБЦА-НЧ покрывают сурфактантами, что приводит к уменьшению захвата НЧ клетками ретикулоэндотелиальной системы и, следовательно, к пролонгированию циркуляции НЧ в системном кровотоке и увеличению их концентрации в сосудах головного мозга [Kreuter J. et al., 1997; Brigger I. et al., 2002].

Ранее ПБЦА-НЧ уже использовались в качестве транспортных систем для целенаправленной доставки таких веществ, как лоперамид [Alyautdin et al., 1997], тубокурарин [Alyautdin R. et al., 1998], даларгин [Alyautdin R. et al., 1995], мет-энкефалин [Säbel B.A. et al 1998], лей-энкефалин [Kreuter J. et al., 2003], ФРН при изучении его антиамнестического эффекта [Джинждихашвили И.А. и соавт., 2008], феназепам [Развижина В.А., 2008] и доксирубицин [Gelperina S. et al., 2002], который в настоящее время находится на III фазе клинического изучения в США [Nicolas J., Couvreur Р., 2009].

Целью исследования« явилось экспериментальное изучение противопаркинсонического действия- фактора роста нервов, сорбированного на поли(бутил)цианоакрилатных наночастицах, покрытых ПС-80 (ФРН-НЧ-ПС-80) Задачи исследования:

1. Разработать состав и технологию получения наносомальной формы ФРН-НЧ-ПС-80, определить размер ПБЦА-НЧ и процент сорбции ФРН на ПБЦА-НЧ.

2. Определить концентрацию ФРН-НЧ-ПС-80 в сравнении с ФРН в субстанции, ФРН-НЧ, ФРН-ПС-80 и ПБЦА-НЧ плацебо в гомогенатах мозга мышей С57В1У6 методом иммуноферментного анализа.

3. Исследовать противопаркинсоническое действие ФРН-НЧ-ПС-80- в сравнении с действием ФРН в субстанции, ФРН-НЧ, ФРН-ПС-80 и ПБЦА-НЧ плацебо на поведенческие проявления паркинсонического синдрома (ПС), вызванного нейротоксином МФТП у мышей С57В1У6.

4. Провести сравнительное изучение антипаркинсонического действия ФРН-НЧ-ПС-80 при введении до и после развития ПС.

5. Изучить динамику развития ПС (в течение 21 дня), вызванного МФТП у мышей С57В1/6, и выявить особенности эффектов ФРН-НЧ-ПС-80 и гимантана на разных стадиях формирования ПС.

6. Изучить влияние ФРН-НЧ-ПС-80 и гимантана на биоэлектрическую активность мозга мышей линии С57В1/6 на различных стадиях формирования ПС, вызванного МФТП.

Научная новизна. Разработан состав и технология получения ФРН на ПБЦА-НЧ, покрытых ПС-80 для системного введения. Установлено, что ПБЦА-НЧ, покрытые ПС-80, обнаруживаются, в контакте с сосудистой стенкой, что указывает на их взаимодействие с эндотелием сосудов головного мозга и последующее проникновение в мозг.

Впервые показано, что ФРН-НЧ-ПС-80 при системном введении проникает в мозг мышей С57В1/6 и вызывает достоверное увеличение концентрации ФРН в гомогенатах мозга, тогда как субстанция ФРН, ФРН с ПБЦА-НЧ, ФРН-ПС-80 и ПБЦА-НЧ плацебо при системном введении не вызывают достоверного эффекта. Показано, что ФРН-НЧ-ПС-80 при системном введении оказывает антипаркинсоническое действие на модели МФТП-вызванного ПС у мышей С57В1/6, при этом эффект вещества выявляется как на этапах формирования паркинсонического синдрома (90 мин и 24 часа), так и в отдалённые сроки (через, 7 дней и 21день). Показано, что ФРН-НЧ-ПС-80 оказывает эффект на МФТП-вызванный ПС как при внутривенном; так и внутрибрюшинном введении. При этом, ФРН-НЧ-ПС-80 (в/в) влияет в наибольшей степени на показатели олигокинезии в открытом поле на первых этапах (90 мин и 24 часа) развития ПС.

Впервые проведён анализ ЭЭГ мышей С57В1/6, получавших МФТП, ФРН-НЧ-ПС-80 или гимантан после МФТП при длительной регистрации (в течение 21 дня) биопотенциалов мозга животных. Анализ электрофизиологических механизмов^ реализации антипаркинсонического действия ФРН-НЧ-ПС-80' и гимантана на мышах С57ВЬ/6 выявил различия в динамике развития эффектов-этих препаратов: активность ФРН-НЧ-ПС-801 более выражена в первые дни, а гимантана через 7 дней после введения нейротоксина.

Научно-практическая значимость. Выполненная работа подтверждает возможность доставки ФРН в мозг с помощью наночастиц при1 системном введении. Полученные данные об антипаркинсоническом действии. ФРН, сорбированного на ПБЦА-наночастицах, покрытых ПС-80 при разных путях системного введения и результаты, показывающие эффективность ФРН-НЧ-ПС-80 на различных этапах формирования и стабилизации ПС, свидетельствуют о перспективности разработки ФРН на наночастицах в качестве лекарственного средства для лечения нейродегенеративных заболеваний, в том числе болезни Паркинсона.

Личный вклад автора. Автором самостоятельно изготовлена лекарственная форма ФРН на ПБЦА-НЧ, покрытых ПС-80, для системного введения и выполнены её фармакологическое изучение, обработаны результаты, сформулированы выводы.

Апробация диссертации. Результаты работы были доложены на межлабораторных конференциях НИИ фармакологии им. В.В. Закусова, Научно-практической конференции «Высокие технологии в терапии и реабилитации заболеваний нервной системы» (Москва, 2008 год), Международном форуме по нанотехнологиям "Кизпагк^есИ" (Москва, 2008), Научно-методической конференции кафедры фармакологии фармацевтического факультета ММА им. И. М. Сеченова (Москва, 2008).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 5 статей, в том числе 4 статьи - в журналах, входящих в перечень, рекомендованных ВАК РФ и 1 - в зарубежном журнале, и 3 тезиса в материалах российских и международных конференций.

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 187 страницах машинописного текста и состоит из: введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, 4 глав результатов исследования, обсуждения, выводов и списка цитируемой литературы. Работа иллюстрирована 12 таблицами и 65 рисунками. Библиографический указатель включает 48 отечественных и 231 иностранных источников.

Заключение диссертации по теме «Фармакология, клиническая фармакология», Курахмаева, Камила Башировна

ВЫВОДЫ:

1. Установлено, что размер полученных ПБЦА-НЧ, лежит в пределах от 190 до 300 нм. Выявлена зависимость между уровнем рН полимеризационной среды и размерами ПБЦА-НЧ - размер НЧ увеличивается при снижении рН от 3 до 1,9. Процент сорбции ФРН на ПБЦА-НЧ, покрытых ПС-80, составляет 95,9%.

2. Методом иммуноферментного анализа показано, что после однократного введения ФРН-НЧ-ПС-80 (в/в) концентрация ФРН в гомогенатах мозга мышей линии С57В1/6 сначала увеличивается и сохраняется на высоком уровне в течение 90 мин и затем постепенно снижается. Введение субстанции ФРН, ФРН-НЧ, ФРН-ПС-80 и ПБЦА-НЧ плацебо не приводит к достоверному увеличению концентрации ФРН в гомогенатах мозга мышей.

3. Методами электронной микроскопии и флуоресцентного анализа показано, что после внутривенного введения ПБЦА-НЧ, покрытых ПС-80, НЧ обнаруживаются в эндотелиоцитах сосудов головного мозга и клетках мозга. При введении ПБЦА-НЧ плацебо без ПС-80 флуоресценции в клетках мозга не наблюдается.

4. Показано, что ФРН-НЧ-ПС-80 при системном (в/в, в/б) введении обладает выраженным антипаркинсоническим действием на модели МФТП-вызванного ПС у мышей С57В1/6, что проявляется в достоверном уменьшении олигокинезии, ригидности и тремора. Эффект вещества выявляется как на начальных этапах формирования ПС, с наиболее выраженным влиянием на олигокинезию, так и в отдалённые сроки. Эффект ФРН-НЧ-ПС-80 на олигокинезию выражен в большей степени при введении вещества до, чем при его введении после нейротоксина. ФРН-НЧ-ПС-80 по антипаркинсонической активности не уступает гимантану. Субстанция ФРН, ФРН-НЧ, ФРН-ПС-80 и ПБЦА-НЧ плацебо при системном введении не вызывают достоверного снижения проявлений ПС.

5. ПС, вызванный МФТП у мышей С57В1/6, сопровождается появлением на ЭЭГ пароксизмальных разрядов в ЧС, ХЯ, СМ и ГПК с максимальным проявлением через 90 мин и 7 суток после МФТП и достоверным усилением спектра мощности в эти периоды в диапазонах тета-2, бета-1,2 в ЧС, ХЯ и СМ. Через 21 день после МФТП выявлено достоверное снижение спектра мощности в тета-1,2, бета-1,2 диапазонах и усиление в дельта диапазоне во всех исследуемых структурах.

6. ФРН-НЧ-ПС-80 (в/б) и гимантан устраняют пароксизмальную активность, вызванную МФТП, и ослабляют изменения спектра мощности в тета-1,2, бета-1,2 диапазонах. Выявлены различия в динамике развития эффектов ФРН-НЧ-ПС-80 и гимантана на спектры мощности ЭЭГ: активность ФРН-НЧ-ПС-80 более выражена в первые дни, а гимантана — через 7 дней после введения нейротоксина.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

Как упоминалось в обзоре литературы, до настоящего времени существует необходимость поиска новых средств лечения БП, позволяющих не только облегчить симптомы заболевания, но приостановить или замедлить прогрессирование болезни путем воздействия на патогенетические звенья процесса.

Тот факт, что некоторые проявления БП возникают и при нормальном старении, заставляет предполагать, что одним из причинных факторов паркинсонизма может быть возрастное снижение количества мозговых нейронов [Riederer Р. et al., 2006]. И действительно, каждые 10 лет жизни человек теряет около 8% нейронов. Компенсаторные возможности мозга настолько велики, что симптомы паркинсонизма появляются лишь при потере 80% нейронной массы. В результате морфологических и молекулярно-биологических исследований установлено участие процессов апоптоза в формировании очагов поражения нервной ткани и влияние нейротрофинов на процессы программированной клеточной смерти [Bibel М., Barde Y., 2000; Dawbarn D and Allen S.J., 2003].

Апоптоз нейрона - это один из механизмов патогенеза при заболеваниях ЦНС. Современный уровень знаний о молекулярных механизмах гибели нейрона при нейродегенеративных заболеваниях недостаточен для понимания всех аспектов их патогенеза, однако представляется весьма вероятным, что одним из индуцирующих факторов при повреждении нервных клеток являются (главным образом в механизмах апоптоза) ростовые факторы [Rabizadeh S., 1993]. В 1993 г. был идентифицирован новый ген, индуцирующий апоптоз исключительно в нервной системе — ген низкоаффинного рецептора к фактору роста нервов (pTSNGFR) [Rabizadeh S., 1993]. Показано, что в нейронах зрелой нервной ткани нет экспрессии P15NGFR, который относится к семейству, включающему и гены рецепторов к Факторам некроза опухоли, однако при нейродегенеративных заболеваниях выявлена его повышенная экспрессия в нейронах головного и спинного мозна. Предполагается, что повышенная экспрессия p75NGFR способствует образованию арахидоновой кислоты, активации перекисного окисления липидов и развитию окислительного стресса. [BredesenD. Е., 1994].

Выявлено антиапоптотическое действие ФРН, которое 1) вызывает морфологическую дифференцировку клеток; 2) участвует в формировании длительного периода выживания клеток; 3) подавляет апоптоз, вызванный дефицитом цилиарного нейротрофического фактора (ciliary neurotrophic factor, CNTF) [Barrett G.L., 2000; Sastry P.S., Rao K.S., 2000].

Получены убедительные данные о вовлечении нейротрофических факторов в модуляцию дофаминергической передачи в мозге и показана способность ФРН препятствовать гибели дофаминергических нейронов [Olson L. et al., 1994; Reader Т.A., Dewar K.M., 1999; Stoof J.C. et al., 1999; Alexi T. et al., 2000].

Однако существенным моментом, лимитирующим разработку ФРН в качестве лекарственного средства, является его неспособность проникать через ГЭБ, поскольку ФРН, а также другие представители семейства нейротрофинов, являются белками - гидрофильными соединениями с высокой молекулярной массой, что и определяет их умеренное проникновение через ГЭБ.

Одной из возможных систем, способных транспортировать лекарственные вещества внутрь клеток является нанотранспортная система. С развитием нанотехнологий все чаще и чаще стали проводиться исследования, связанные с применением наночастиц для направленного транспорта лекарственных веществ. Доставка ФРН в мозг с помощью наночастиц является одним из новых способов поиска средств патогенетической терапии болезни Паркинсона. В рамках этой проблемы и было выполнено настоящее исследование.

В качестве наночастиц были выбраны давно известные (с 1977 г.) [Garnett Couvreur P. et al., 1977] ПБЦА-наночастицы, которые хорошо изучены [Kreuter J., 2007], малотоксичны [Kante et al., 1982; Grislain et al., 1983; Gelperina S.E., et al., 2002; Kreuter J., 2004; Pereverzeva E. et al. 2008], подвергаются быстрой биодеградации [Langer К. et al., 1994], обладают высокой сорбционной емкостью [Kreuter J., 2001], имеют низкую молекулярную массу полимера, в связи с чем полимер быстро выводится из организма. Показано, что ПБЦА-наночастицы эффективны в качестве транспортных систем для целенаправленной доставки таких веществ, как лоперамид [Alyautdin R. et al., 1997], тубокурарин [Alyautdin et al., 1998], даларгин [Alyautdin R. et al., 1995], мет-энкефалин [Sabel, Schroeder, et al 1998], лей-энкефалин [Kreuter J. et al., 2003], ФРН при изучении его антиамнестического эффекта [Джинждихашвили И.А. и соавт., 2008], феназепам [Развижина В.А.,2008] и доксирубицин [Gelperina S. et al., 2002], который в настоящее время находится на III фазе клинического изучения в США [Nicolas J., Couvreur P., 2009].

В наших исследованиях ПБЦА-НЧ были синтезированы методом анионной полимеризации, что позволило получить ПБЦА-НЧ однородные по размеру и пригодные для системного введения. Наносуспензия остаётся стабильной в течение 24 часов. При определении размеров полученных ПБЦА-НЧ методом фотонно-корреляционной спектроскопии, было выявлено, что размеры ПБЦА-НЧ лежат в пределах от 190 до 300 нм. Такие частицы представляют собой коллоидные образования и относятся группе НЧ с размерами от 1-1000 нм [Brian H. Кауе., 2006; J. Kreuter., 2004]. Согласно определению ГК «Роснанотех» «НЧ - аморфная или полукристаллическая структура, имеющая хотя бы один характерный размер в диапазоне 1-100 нм». Вместе с тем, для материалов, создаваемых для медицинских и фармацевтических целей существует иная классификация, которую используют многие исследователи [Geiser M, 2005; Garnett, M. С., 2006; Zohri M., 2009] и, согласно которой в медицине наноматериалами считают частицы с размерами от 10 до 1000 нм. Наиболее часто для системного введения в экспериментах in vivo используются НЧ с размерами от 50 до 300 нм, поскольку размер таких частиц превышает размер фенестров капилляров печени и они наиболее длительно циркулируют в системном кровотоке [Ilium L, Davis SS. 1984; Harivardhan RL, Murthy RSR, 2003; Nicolas J., Couvreur P., 2009].

При электронно-микроскопическом изучении абсорбции полисорбата-80 на ПБЦА-наночастицы было определено, что на поверхности наночастиц, обработанных полисорбатом-80, формируется слой тонковолокнистого материала, особенно четко видимый в зонах контакта частиц. Процент сорбции ФРН на наночастицах составляет 96,6% в случае суспензии НЧ без ПС-80 и 95,9% в случае с суспензией НЧ, покрытых ПС-80. Полученный высокий процент сорбции позволяют сделать вывод, что покрытие поверхности наночастиц полисорбатом-80 не влияет на степень сорбции ФРН.

При оценке антипаркинсонического действия ФРН-НЧ-ПС-80, на модели МФТП-вызванного ПС на мышах линии С57В1/6 установлено, что через 2-4 минуты после инъекции МФТП появлялась пилоэрекция, ретро- или латеропульсия; через 10-15 минут отмечалась ригидность, которая сохранялась в течение 21 дня; олигокинезия достигала пика через 90 мин, сохранялась 24 часа, затем к 7 дню её выраженность снижалась (до недостоверных величин), а к 21 дню вновь отмечалось достоверное снижение двигательной активности; тремор отмечался через 2-3 мин после введения нейротоксина, через сутки его выраженность значительно снижалась, но к 7 дню возникали новые достоверные показатели % животных с тремором. Вышеуказанные эффекты МФТП согласуются с данными литературы. Хорошо известно, что МФТП вызывает избирательное повреждение дофаминергических нейронов черной субстанции и при его внутрибрюшинном введении у животных возникает триада основных симптомов БП: олигокинезия, ригидность, тремор и ряд вегетативных нарушений [Крыжановский Г.Н. и др., 1995; Przedborski S., Vila М., 2001; Кучеряну В.Г., 2001; Воронина Т.А. и др., 2005; Капица И.Г. и др., 2008].

ФРН-НЧ-ПС-80, введенный в/в после МФТП, существенно и статистически достоверно повышал двигательную активность мышей, сниженную МФТП. Так, в тесте открытое поле, через 90 мин после введения ФРН-НЧ-ПС-80 горизонтальная активность увеличивалась в 8,3 раза, а вертикальная активность в 8,5 раза. Достоверное повышение (примерно в 2 раза) двигательной активности в открытом поле и в актометре ФРН-НЧ-ПС-80 вызывает через 24 часа, на 7 и 21 сутки после создания паркинсонического синждрома.

Таким образом, ФРН-НЧ-ПС-80 обладает выраженной способностью устранять олигокинезию у мышей С57В1/6, вызванную нейротоксином МФТП. При этом эффект вещества выявляется как на начальных этапах формирования паркинсонического синдрома (через 24 часа), так и в отдалённых сроках (через 7 и 21 день) после введения МФТП. Субстанция ФРН, ФРН-НЧ, ФРН-ПС-80 и ПБЦА-НЧ не оказывали эффекта на олигокинезию, вызванную МФТП.

ФРН-НЧ-ПС-80, введённый в/в после МФТП, уменьшал олигокинезию у животных, что выражалось в достоверном увеличении длины шага мышей, в уменьшении скованности и горбатости. Уменьшение ригидности наблюдалось через 90 мин, 24 часа, на 7 и 21 сутки после введения ФРН-НЧ-ПС-80 и МФТП.

ФРН-НЧ-ПС-80, введённый в/в после МФТП, через 90 мин и сутки после введения достоверно уменьшал % животных с тремором в 2 раза, а через 7 дней более чем в 10 раз по сравнению с контролем при введении МФТП.

ФРН-НЧ-ПС-80 при внутрибрюшинном введении как до, так и после нёйротоксина уменьшает проявление ПС, вызываемого введением МФТП, как в 1-е сутки, так и 7-е и 21-е сутки эксперимента. ФРН-НЧ-ПС-80 оказывает сходный эффект на олигокинезию при введении как до, так и после МФТП при регистрации эффектов через 90 мин и 21 день (после введения МФТП), но ФРН-НЧ-ПС-80 при введении до МФТП оказывает более выраженный эффект, чем ФРН-НЧ-ПС-80, введённый после МФТП через 24 часа и 7 дней после введения. Различий в эффектах ФРН-НЧ-ПС-80 на ригидность в течение всего периода наблюдения (21 день) при его введении как до, так и после МФТП выявлено не было.

В результате сравнительного изучения действия ФРН-НЧ-ПС-80, введенного в/б и ФРН-НЧ-ПС-80, введённого в/в после МФТП по показателям ПС, выявлено, что на показатели ригидности обе группы влияют в равной степени; на показатели олигокинезии выявлена разница - при внутривенном введении ФРН-НЧ-ПС-80 влияет в большей степени на показатели олигокинезии в открытом поле на ранних этапах наблюдения (90 мин - и 24 часа).

Показано, что внутривенное введение субстанции ФРН мышам линии С57В1/6 с МФТП не приводит к достоверному снижению основных проявлений ПС. Полученные результаты подтверждают, что свободный ФРН при его системном введении не проникает в ЦНС, что согласуется с данными литературы, свидетельствующими о его весьма ограниченном проникновении через гематоэнцефалический барьер [Castellenos-Ortega М. R. et al., 1999; Banks W. et al., 2002], однако при введении ФРН непосредственно в желудочки мозга животных, наблюдается значительное увеличение содержания дофамина и гомованилиновой кислоты в стриатуме [Е. Garcia et al., 1992]. Показано также, что внутрижелудочковых инъекциях пациентам ФРН оказывает отчётливое антипаркинсоническое действие [Randerson J., 2003].

Установлено, что ПБЦА-НЧ плацебо, ФРН-НЧ, ФРН-ПС-80 при внутривенном введении мышам линии С57В1/6 после нейротоксина МФТП не оказывают антипаркинсоническое действие по всем проявлениям ПС: не вызывают достоверного увеличения двигательной активности, снижения ригидности и тремора, вызванных МФТП, в экспериментах. Среди этих веществ наибольшей способностью увеличивать двигательную активность обладал ФРН-НЧ, однако, и его эффект был статистически недостоверным. Отсутствие достоверных изменений в показателях ПС на различных этапах исследования в группе ФРН-НЧ говорит о невозможности транспорта пептида без покрытия НЧ поверхностно-активным веществом — ПС-80. Данный результат согласуется с имеющимися данными литературы об участии ПС-80 в механизме транспорта лекарственных веществ в мозг с помощью полимерных наночастиц [Nerurkar MM et al., 1996; Gulyaev АЕ et al., 1999; Moghimi S.M. et al., 2001 Kreuter J., 2002].

Механизм транспорта лекарственных веществ через ГЭБ при использовании наносистем до конца не изучен. В проникновении ФРН через ГЭБ с использованием полимерных наночастиц могут быть задействованы такие процессы, как трансцитоз через эндотелиальные клетки кровеносных сосудов мозга, подавление функции Р-гликопротеина, открытие плотных контактов между эндотелиоцитами, адгезия наночастиц на стенках сосудов головного мозга и др. Предполагается, что наиболее значимым механизмом является рецептор-зависимый эндоцитоз [Аляутдин Р. Н. 2001; Аляутдин Р. Н и др., 2003; Gulyaev АЕ et al., 1999; Kreuter J., 2002]. Сочетание липосом с определенными лигандами приводит к их специфическому взаимодействию с соответствующими мишенями (например, рецепторами) с последующим эндоцитозом [Kreuter J., 2002]. ПС-80, покрывающий ПБЦА-НЧ, адсорбирует аполипопротеин Е, содержащийся в плазме крови [Kreuter J. et al., 2003]. Тем самым ПБЦА-НЧ приобретают характерные черты липопротеинов низкой плотности и взаимодействуют с ЛПНП - рецепторами, локализованными на поверхности эндотелиальных клеток капилляров мозга, благодаря чему наночастицы захватываются эндотелиальными клетками путем рецептор -зависимого эндоцитоза [В. Dehouck et al., 1997; Moghimi S.M. et al., 2001]. После деградации наносистем в лизосомах эндотелиальных клеток, ФРН диффундирует в ткани мозга. Можно предположить, что антипаркинсонический эффект ФРН, выявленный в настоящем исследовании, обусловлен модулирующим влиянием вещества на дофаминергическую систему мозга.

Получены убедительные данные о вовлечении нейротрофических факторов в модуляцию дофаминергической передачи в мозге и показана способность ФРН препятствовать гибели дофаминергических нейронов [Markus A. et al., 2002; Sofroniew M.V. et al., 2001; Olson L. et al., 1994; Salinas M. et al., 2003]. Установлено также, что ФРН зависимо от дозы усиливает высвобождение дофамина (in vitro) [Blochl A., et al. 1994]. Значительное увеличение содержания дофамина и гомованилиновой кислоты показано также в стриатуме мышей с ПС, вызванным МФТП, которым в головной мозг вводили ФРН [Garcia E.et al., 1992].

Выявлено, что у мышей линии С57В1/6 с МФТП-вызванным ПС гимантан (20 мг/кг внутрибурюшинно) вызывает достоверное ослабление основных симптомов паркинсонического синдрома: олигокинезии, тремора и ригидности, а также уменьшает выраженность пилоэрекции. Данные результаты согласуются с резултатами проведённых ранее доклинических исследований гимантана [Вальдман Е.А., 1999; Вальдман Е.А. и соавт., 2004].

Сопоставление действия ФРН-НЧ-ПС-80 и гимантана на различные этапы формирования ПС показывает, что эффект ФРН-НЧ-ПС-80 на олигокинезию был более выражен, чем у гимантана через 90 мин и 24 часа после введения. На 7-й день показатели двигательной активности в группе гимантана превышали таковые показатели группы ФРН-НЧ-ПС-80, а через 21 день оба препарата оказывали сходный эффект.

Для изучения возможности транспорта ФРН через ГЭБ с помощью ПБЦА-НЧ были проведено морфологическое исследование наночастиц в головном мозге мышей с помощью флуоресцентной и электронной микроскопий. При флуоресцентной микроскопии было выявлено, что ПБЦА-НЧ-плацебо в большей степени накапливаются в просвете сосудов, а не в эндотелиоцитах. При изучении ПБЦА-НЧ, покрытых ПС-80 была зафиксирована выраженная флуоресценция в телах клеток Пуркинье мозжечка. При этом в образцах тканей мозга экспериментальных животных, которым вводили ПБЦА-наночастицы, не покрытые ПС-80, подобного эффекта не наблюдали. Исходя из полученных данных, можно сделать вывод, что ПБЦА-НЧ, покрытые ПС-80, проникают в эндотелиоциты. Электронная микроскопия показала наличие ПБЦА-наночастиц, покрытых ПС-80 в эндотелиоцитах и клетках Пуркинье, что свидетельствует о том, что ПБЦА-НЧ, модифицированные ПС-80, подвергаются эндоцитозу эндотелиальными клетками сосудов головного мозга. Данные имму но ферментного анализа показали, что при системном введении ФРН-НЧ-ПС-80 (в/в, однократно) концентрация ФРН в гомогенатах тканей мозга у мышей линии С57В1/6 в разные промежутки времени постепенно увеличивалась достигала максимума на 45 минуте (311.6±16.5 пкг/мл), сохранялась на высоком уровне через 90 мин и затем постепенно снижалась, достигая 88.9±3.8 пкг/мл через 24 часа.

Было установлено, что системное введение субстанции ФРН, ФРН с ПБЦА-НЧ и ФРН с ПС-80 не приводит к достоверному увеличению концентрации ФРН в гомогенатах тканей мозга мышей. В результате можно заключить, что ПБЦА-наночастицы, покрытые полисорбатом-80, обеспечивают направленный транспорт ФРН в ЦНС. Увеличение концентрации ФРН (недостоверное) в тканях мозга на 45 минуте и через 24 часа относительно контрольной группы (натрия хлорид) было отмечено при введении раствора ФРН. Известно, что ФРН весьма ограниченно проникает в ЦНС [Backman С., et al., 1996, Tuszynski М. N. et al., 1996]. Однако имеются данные, свидетельствующие о наличии эндогенных транспортных систем для прохождения ФРН через ГЭБ [Anand Р., et al., 1997; Kaplan D.R., et al., 2000]. Эти данные являются предварительными и требуют дальнейшего изучения.

Для углублённого изучения противопаркинсонического эффекта ФРН-НЧ-ПС-80 были выполнены исследования с регистрацией биопотенциалов мозга мышей линии C57BL/6 в условиях свободного поведения животных. Биоэлектрическую активность мозга мышей линии C57BL/6 регистрировали в следующих структурах: сенсомоторной области коры, хвостатом ядре, гиппокампе и черной субстанции.

Было показано, что паркинсонический синдром, вызванный МФТП (30 мг/кг, в/б, однократно) у мышей С57В1/6 сопровождается появлением на ЭЭГ пароксизмальных разрядов высокоамплитудных медленных волн в ЧС,ХЯ, СМ и ГПК. Максимальное проявление пароксизмальной активности наблюдается в период 90 мин и 7 суток после МФТП, а через 21 день ее выраженность несколько снижается и сохраняется только в ХЯ и ГПК.

ФРН-НЧ-ПС-80 (0,25 мг/кг, 5 мкг/мышь, в/б, однократно) и гимантан (20 мг/кг, в/б, однократно) устраняют пароксизмальную активность, вызванную МФТП в ЧС, ХЯ, СМ и ГПК. ФРН-НЧ-ПС-80 оказывает максимальный эффект на начальных этапах формирования паркинсонического синдрома, а гимантан через 7 суток после введения МФТП.

МФТП вызывает достоверное усиление спектра мощности биоэлектрической активности в диапазонах тета-2, бета-1 и бета-2 частот в ХЯ, ЧС и СМ через 90 минут после введения. Через 24 часа и 7 суток эффект МФТП в этих структурах уменьшается, но появляется в ГПК и на 21 день после введения МФТП наблюдается достоверное снижение спектра в этих диапазонах мощности в ЧС и СК (реверсия эффекта). ФРН-НЧ-ПС-80 (0,25 мг/кг, 5 мкг/мышь, в/б, однократно) и гимантан (20 мг/кг, в/б, однократно) уменьшают мощность спектра биоэлектрической активности, усиленной МФТП, в диапазонах тета-2, бета-1 и бета-2 частот в ХЯ, ЧС и СМ, приближая его к фоновым показателям.

Полученные данные подтверждают и расширяют представления о значении бета-активности в реализации паркинсонического синдрома. В исследованиях на животных показано, что повреждение дофаминергических нейронов среднего мозга 6-OHDA ассоциируется со значительным увеличением мощности спектра и когерентнсти в бета-диапазоне биоэлектрической активности фронтальных отделов коры и субталамических ядер мозга крыс по сравнению с контрольными животными. Характер синхронизации между активностью в коре и субталамических ядрах на модели 6-OHDA - вызванной БП близок к тем, что наблюдается у больных БП. Частота пика когерентной активности в бета-диапазоне увеличивалась во время спонтанных и навязанных движений [Hutchison et al., 2004]. Zhao Ming и др., (2003) было показано, что при однократном введении МФТП крысам (25 мг/кг), увеличивается нейрогенез в чёрной субстанции на 3 неделю после введения, а при подостром введении МФТП (25 мг/кг, в течение 5 дней), нейротоксин вызывал пролиферацию в стриатуме и нигральной областях [Мао L. et al., 2001].

При внутрижелудочковом введении ФРН крысам в течение 3-х недель регистрировали ЭЭГ-активность на 4, 7, 14 и 21 день после введения. У животных, получавших ФРН, наблюдалось увеличение р2-активности. Кроме того, ФРН вызывал умеренное увеличение активности холинацетил-трансферазы в первую неделю наблюдения (4 и 7 дни), что свидетельствует о том, что ФРН вызывает изменения в холинергических нейронах. Существенно значимых изменений в последующие 2 недели не отмечалось [Daniel P. et ah, 1997].

МФТП достоверно снижает спектр мощности биоэлектрической активности в диапазоне дельта частоты через 24 часа (в ЧС, ХЯ, СМ и ГПК) и 7 суток (в ХЯ, СМ) и усиливает в диапазонах 1 и 3 кол/сек (в ХЯ, СМ и ЧС) через 21 день после введения нейротоксина. ФРН (0,25 мг/кг, 5 мкг/мышь, в/б, однократно) уменьшает спектр мощности в диапазоне дельта частоты через 90 мин и 24 часа и 21 день усиливает спектр мощности в этом диапазоне во всех структурах по сравнению с эффектом МФТП.

Изменения спектров мощности ЭЭГ у животных, получавших ФРН-НЧ-ПС после МФТП, были близки к фоновым записям ЭЭГ мышей С57В1/6 с максимальным эффектом на начальных этапах формирования ПС, что позволяет предполагать усиление в этот период процесса нейрогенеза, в который вовлечены многие нейротрофические факторы (ФРН, BDNF и др.). При снижении количества нейротрофических факторов нарушается пролиферация.и митоз клеток [Limin Мао, John Q. Wang, 2003]. Показано, что ФРН при внутрижелудочковом введении пациентам с гипоксической ишемией стимулирует перфузию головного мозга и нейрогенез, вызывает пролиферацию эндотелиальных клеток и снижает неврологический дефицит [Antonelli A et al., 2008]. Показано также, что BDNF усиливает нейрогенез и улучшает функциональное восстановление крыс с инсультом [Schâbitz W.R. et al., 2007].

Таким образом, ПС, вызванный МФТП, при длительной регистрации биоэлектрической активности мышей С57В1/6 проявляется стойкими динамичными нарушениями ЭЭГ для различных структур мозга в определённые периоды времени. Наиболее значимые изменения наблюдаются в диапазонах бета- и дельта- частот. Полученные данные подтверждают и расширяют представления о значении бета-активности в реализации ПС. ФРН-НЧ-ПС-80 устраняет, вызванную МФТП, пароксизмальную активность и ослабляет изменения спектра мощности в тета-1,2, бета-1,2 диапазонах. Сравнительное изучение влияния ФРН-НЧ-ПС-80 и гимантана на биоэлектричекую активность

154 мозга мышей С57В1/6 выявляет различия в динамике развития эффектов этих препаратов: активность ФРН-НЧ-ПС-80 более выражена в первые дни, а гимантана через 7 дней после введения нейротоксина.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Курахмаева, Камила Башировна, 2009 год

1. Аляутдин, Р.Н. Молекулярные механизмы направленного транспорта лекарственных веществ в мозг Текст. / Р.Н. Аляутдин // Рос. Медицинский журнал. -2001. — с. 3-7.

2. Аляутдин, Р.Н. Транспорт лекарственных веществ через гематоэнцефалический барьер Текст. / Р.Н. Аляутдин, Р. Дешмух, В.Е. Петров // Вестник НИИ Молекулярной медицины. -2003. -3: с.11-29.

3. Атаджанов, М.А. Экспериментальное моделирование паркинсонического синдрома и его патогенетическая терапия. Текст. / М. А. Атаджанов // Автореферат, д-ра мед. наук. -Москва. 1989.

4. Артемьев, Д.В. Современные подходы к лечению ранних стадий болезни Паркинсона. Текст. / Д.В. Артемьев, A.B. Обухова // Consilium Medicum. 2008. - 10.-7: с. 89-92.

5. Басел, A.A. Антиамнестическое действие фактора роста нервов, сорбированного на поли(бутил)цианоакрилатных наночастицах, покрытых полисорбатом 80. Текст. / A.A. Басел, В.Е. Петров, С.С. Трофимов, Т.А.

6. Воронина, Т.А. Антиоксидант мексидол. Основные нейропсихотропные эффекты и механизм действия. Текст. /Т.А. Воронина // Психофармакология и биологическая наркология. 2001.- 1: с. 2-13.

7. Воронина, Т.А. Мексидол®. Основные нейропсихотропные эффекты и механизм действия. Текст. / Т.А. Воронина // Медицинский вестник. — 6. — 475. -15 С.

8. Григорьян, Г.А. Экспериментальные модели болезни ; Паркинсона на . :- животных. Текст. / Г.А. Григорьян, А.С, Базян //.Успехи физиологических наук.

9. V;'-г"4':' -2007.-38. -4: С. 80-88. •;!"•, у.: • ^. ^.^.;■•.!';'.V■ Ч:; ;

10. Джинжихашвили, И.А. Использование наногехнологпй для направленного транспорта фактора роста нервов через гематоэнцефалический барьер. Текст. / И.А. Джинжихашвили // Автореф. канд. фарм. наук. Москва. - 2008.

11. Дюмаев, К.М. Антиоксиданты в профилактике и терапии патологий ЦНС. Текст. / К.М Дюмаев, Т.А. Воронина, Л.Д. Смирнов. — 1995 //М.: Изд-во инст. Биомедицинской химии РАМН. — 270 С.

12. Иллариошкин, С.Н. Основные принципы терапии болезни Паркинсона. Текст. / С.Н. Иллариошкин // Российский медицинский журнал. 2004. — 12. -10: С.604-608.

13. Каленикова, У.И. Фармакокинетика даларгина. Текст. / У.И. Каленикова, О Ф. Дмитриева, Н. Н. Коробов [и др.] //Ворп Мед Хим. 1988. - 34: С. 75-83.

14. Паркинсона. Текст. / Е.А Катунина, A.B. Петрухова, Г. Н. Авакян и др. // Журнал неврологии и психиатрии им. С.С. Корсакова. — 2008. —6: С. 43-4

15. Катунина, Е.А. Возможности применения ГИМанТсша при; лечении иилезни28; Крьтжановский, Т.Н. Новая модель депрессивного синдрома у крыс,биологии и медицины. 1995. - 2: С. 125—128.

16. Кучеряну, В.Г. Мексидол усиливает противопаркинсоническое действие L-ДОФА на модели МФТП-индуцированного паркинсонизма. Текст. / В.Г. Кучеряну // Эксп. и клин, фармакология.- 2001.- 1: С. 22-25.

17. Кучеряну, В.Г. Нарушение регуляции процесса перекисного окисления липидов в стриатуме крыс при паркинсоническом синдроме. Текст. / В.Г. Кучеряну, М.А. Атаджанов, Е.В. Никушкин, и др. // Бюл. экспер. биол. и мед. -1989. 107. — 1: С.39-41.

18. В.Г. Кучеряну, Г.Н. Крыжановский // Бюлл. эксп. биол. и мед. 2000.- 130. - 7:С. 20-23.

19. Левин, О.С. Эпидемиология Паркинсонизма и болезни Паркинсона. Обзор. / О.С. Левин, Л.В. Докадина // Неврол. журн. 2005. - 5: С. 41-49.

20. Машковский, М.Д. Лекарственные средства. Текст. / М.Д. Машковский // М.: Медицина. 1988. - 11. - 1: 624 С.

21. Митрофанов, A.A. Компьютерная система анализа и топографического картирования электрической активности мозга с нейрометрическим банком ЭЭГ данных "BrainSys". Текст. / A.A. Митрофанов // изд. СТТК 0.020.001.ПС. -2007. 72 С.

22. Мягких, М.В. Фактор роста нервов. Нейротрофины. структура и функции. Текст. / М.В. Мягких, В.Ю Катуков., Г.А. Посыпанова, И.И. Шмырев и др. // Нейрохимия. 1998. -15. - 2: С. 106-115.

23. Неробкова, Л.Н. Противопаркинсоническая активность нового производного адамантана. Текст. / Л.Н. Неробкова, Е.А. Вальдман, Т.А. Воронина и др.// Экспериментальная и клиническая фармакология. — 2000. — 63. 2: С. 3—6.

24. Развижина, В.А. Изучение эффектов феназепама на поли(бутил)цианоакрилатных наночастицах. Текст. / В.А. Развижина // Автореф. канд. биол. наук. Москва. - 2008.

25. Регистр лекарственных средств России РЛС Энциклопедия лекарств. Текст. /гл. ред. Г.Л. Вышковский // Москва. 2009: 1392 С.

26. Сейфулла, Р.Д. Проблемы использования нанотехнологии в фармакологии. Текст. / Р.Д. Сейфулла, А.Б. Тимофеев, З.Г. Орджоникидзе и др // Экспериментальная и клиническая фармакология. — 2008. 71. — 1: с. 61—69.

27. Сейфулла, Р.Д. Перспективы применения нанотехнологий в клинической неврологии. Текст. / Р.Д. Сейфулла, З.А. Суслина, Е.В. Куликов и др. // Анналы клинической и экспериментальной неврологии. 2008. — 2.-2: С. 35-45.

28. Угрюмов, М.В. Нейроны мозга, частично экспрессирующие моноаминергический фенотип: локализация, развитие и функциональноезначение. Текст. / М.В. Угрюмов // Успехи физиологических наук. — 2007. — 38. -2: Сс. 3-25

29. Угрюмов, М.В. Экспрессия ферментов синтеза дофамина в недофаминергических нейронах: функциональное значение и регуляция. Текст. / М.В. Угрюмов // Успехи физиол. Наук. 2007. - 38. - 4. - С. 3-20.

30. Чекалина, Н.Д. Нейротрофические факторы и рецепторы к ним. . Текст. / Н.Д. Чекалина // Нейрохимия. 1997. - 14. - 1: С. 30-38.

31. Чехонин, В.П. Моделирование болезни Паркинсона и объективизация дисфункции нигростриарной системы. Текст. / В.П. Чехонин, В.П. Баклаушев, Т.Б. Дмитриева // Журнал Неврологии и Психиатрии. 2004. - 1: С. 59-68.

32. Чехонин, В.П. Наносистемы и направленный транспорт лекарственных препаратов в мозг. Текст. / В.П. Чехонин, Т.Б. Дмитриева, Ю.А. Жирков [и др.] // Вестник Российский АМН. 2009. - 2: С. 32-38.

33. Acsadi, G. Increased Survival and Function of SOD1 Mice After Glial Cell-Derived Neurotrophic Factor Gene Therapy. Текст. / G. Acsadi, A. Anguelov Roumen, Yang H [et al.]. // Human Gene Therapy. 2002. - 13. - 9: P. 1047-1059.

34. Alessi, D.R. 3-Phosphoinositide-dependent protein kinase-1 (PDK1): structural and functional omology with the Drosophila DSTPK61 kinase . Текст. / D.R. Alessi, M. Deak, A. Casmayor, F.B. Caudwell [et al.] // Curr. Biol. 1997. - 7: P. 776-789.

35. Alexi, T. Neuroprotective strategies for basal ganglia degeneration: Parkinson's and Huntington's diseases. Текст. / T.Alexi, C.V. Borlongan, R.L. Faull et al. // Progress in Neurobiology. 2000. -60: P. 409-470.

36. Aloe, L. Nerve, growth factor and autoimmune diseases . Текст. / L. Aloe, S.D. Skaper, A. Leon and R. Levi-Montalcini. // Autoimmunity. 1994. -19: P. 141-150.

37. Alyautdin, R., Analgesic activity of the hexapeptide dalargin adsorbed on the surface of polysorbate 80-coated poly(butyl cyanoacrylate) nanoparticles Текст. /

38. R.Alyautdin, D. Gothier, V. Petrov, D. Kharkevich, J. Kreuter // Eur J Pharm Biopharm. 1995. - 41: P. 44^18.

39. Alyautdin R.N., Significant entry of tubocurarine into the brain of rats byiadsorption to polysorbate study Текст. / R.N Alyautdin, E.B. Tezikov, P. Ramge, D.A. Kharkevich, D.J. Begley, J. Kreuter // J Microencapsul. 1998. - 15: P. 67-74.

40. Alyautdin, R.N. Delivery of loperamide across the blood-brain barrier with polysorbate 80-coated polybutylcyanoacrylate nanoparticles. Текст. / R.N Alyautdin, V.E. Petrov, K. Langer et al. // Pharm Res. 1997. - 14: P. 325-328.

41. Anand, P. Endogenous NGF and CNTF levels in human peripheral nerve injury. Текст. / P. Anand, G. Terenghi, R. Birch et al. // Neuroreport. 1997. -8. - 8: P. 1935-1938.

42. Alyautdin, R.N. Interaction of poly(butyl)cyanoacrilate nanoparticles with blood-brain barrier in vivo and in vitro. Текст. / R.N. Alyautdin, J. Kreuter, D.A.Kharkevich // J. Drug Target. 2001. - 9: P. 209-221.

43. Backman, C. Systemic administration of nerve growth factor conjugated reverses age-related cognitive dysfunction and prevents cholinergetic neuron atrophy. Текст. / С. Backman, G. Rose, B. Hoffer et al. // J. Neurosci. 1996. - 16. - 17: P. 5437-5442.

44. Bankiewiez, K.S. Hemiparkinsonian in monkeys after unilateral internal carotid artery infusion of l-methyl-4-phenyl-l,2,3,6-tetrahydropiridine (МРТР). Текст. / K.S. Bankiewiez, E.H. Oldfield, C.C. Chiueh et al. // Life Sci. 1986. - 39: P. 7-16.

45. Banks, W. Permeability of the blood-brain barrier to albumin and insulin in the young and aged SAMP8 mouse. Текст. / W. Banks, J. Gerontol, S. Farr and J. Morley // Biol. Sci. Med. Sci. 2000. - 55. - 12: P. 601-606.

46. R.A. Murphy// Mol Cell Biochem —1992.^110.- 1: P. 1-15. !• ; 64. Barrett, G.L. The p75 neurotrophin receptor and neuronal apoptosis. Текст. / " G.L. Barrett // Prog. Neurobiol. 2000. - 61: P. 205-229.

47. Bax, B. Structure of mouse 7S NGF: a complex of nerve growth factor with four binding proteins. Текст. / В. Bax, T.L. Blundell, J. Murray-Rust, N.Q. // Structure. -1997.-5.-10: P. 1275-1285.

48. Behan, N. Polyn-butyl cyanoacrylate nanoparticles: a mechanistic study of polymerization and particle formation. Текст. / N. Behan, C. Birkinshaw, N. Clarke // Biomaterials. 2001. - 22: P. 1335-1344.

49. Benjamin, C.L., Epidemiology of Parkinson's disease. Текст. / C.L. Benjamin, K.C. Tsui // ВС Medical Journal.- 2001. 43. - 3: P. 133-137.

50. Bibel, M. Neurotrophins: key regulator of cell fate and cell shape in the vertebrate nervous system. Текст. / Bibel M., Barde Y. // Genes Dev. — 2000. — 14. — 23: P. 2919-2937.

51. Blochl, A. Neurotrophins Stimulate the Release of Dopamine from Rat Mesencephalic Neurons via Trk and p75Lntr Receptors. Текст. / A. Blochl, C. Sirrenberg // J Biol Chem. 1996. - 271. - 35: P. 21100-21107.

52. Blum D. Molecular pathways involved in the Neurotoxicity of 6-OHDA, dopamine and MPTP: Contribution to the apoptotic theory in Parkinson's disease. Текст. / D. Blum, S. Torch, N. Lambeng et al. // Prog Neurobiol. 2001. - 65: P. 135-172.

53. Bonini, S. Nerve Growth Factor: Neurotrophin or Cytokine? Текст. / S. Bonini, G. Rasi, M.L. Bracci-Laudiero, A. Procoli, L. Aloe // Int Arch Allergy Immunol. -2003.-131: P. 80-84.

54. Bothwell, M. Functional interactions of neurotrophins and neurotrophin receptors. Текст. / Bothwell M. // Annu. Rev. Neurosci. 1995. - 18: P. 223-253.

55. Bredesen, D.E. Neuronal apoptosis: genetic and biochemical modulation. Текст. / D.E. Bredesen // In. Apoptosis II: The molecular basis of apoptosis in disease. Ed L.D. Tomei, F.O. Cope. 1994: P. 397- 421.

56. Brian H. Kaye. Particle-Size Characterization Текст. edited by J.Swarbick / Marcel Dekker, New York / in Encyclopedia of Pharmaceutical Technology. — 2006. 4.- - p.2582-2657.

57. Brigger, I. Poly(ethylene glycol)-coated hexadecylcyanoacrylate nanospheres display a combined effect for brain tumor targeting. Текст. / I. Brigger, J. Morizet, G. Aubert et al. // J Pharmacol Exp Ther. 2002. - 303. - 3: P. 928-936.

58. Brigger, I. Poly(ethylene glycol)-coated hexadecylcyanoacrylate nanospheres display a combined effect for brain tumor targeting. Текст. / I. Brigger, J. Morizet, G. Aubert et al. // J Pharmacol Exp Ther. 2002. - 303. - 3: P. 928-936.

59. Brigger, I. Nanoparticles in cancer therapy and diagnosis. Текст. / I. Brigger, C. Dubernet, P. Couvreur // Adv. Drug Deliv. Rev. 2002. - 54: p. 631- 651.

60. Buzsaki, G. Hippocampal network patterns of activity in the mouse. Neuroscience . Текст. / G. Buzsaki, D.L. Buhl, K.D. Harris et al. 2003. — 116. — P. 201-211.

61. Castellenos-Ortega, M.R. Nerve growth factor: possibilities and limitations of its clinical application. Текст. / M.R. Castellenos-Ortega, R. Cruz-Aguado, L. Martinez-Marty // Rev. Neurol. 1999. -29. - 5: P. 439-471.

62. Chrisp, P. A rewiev of its pharmacology, symptomatic benefits and protective potential in Parkinson's disease. Selegiline. Текст. / P., Chrisp, G.J. Mammen, E.M; Sorkin//Drugs Aging. 1991.-1: P. 228-248. : ,

63. Choi, W.S. Two distinct mechanisms are involved in 6-hydroxydopamine- and MPP+-induced dopaminergic neuronal cell death: role of caspases, ROS, and JNK. Текст. / W.S. Choi, S.Y. Yoon, Т.Н. Oh et al. // J Neurosci Res. 1999. - 57: P.86-94

64. Corasaniti, M.T. Paraquat: a useful tool for the in vivo study of mechanisms of neuronal cell death. Текст. / M.T. Corasaniti, M.C. Strongoli, D. Rotiroti et al. // Pharmacol Toxicol. 1998. - 83. - 1: P. 1-7.

65. Cotzias, G.C. Modification of Parkinsonism — chronic treatment with L-dopa. Текст. / Cotzias G.C., Papavasiliou P.S., Gellene R. // N Engl J Med. 1969. -280: P. 337-345.

66. Couvreur, P. Nanocapsules: a new type of lysosomotropic carrier. Текст. / P. Couvreur, P. Tulkens, M. Roland et al. // FEBS Lett. 1977.- 84: P. 323-326.

67. Daan, S. Timing of human sleep: recovery process gated by a circadian pacemaker. Текст. / S. Daan, D.G.M Beersma, A.A. Borbely // Am J Physiol. -1984.-246: P. 161-178.

68. D'Amato, R .J. Selectivity of the parkinsonian neurotoxin MPTP: toxic metabolite MPP+ binds to neuromelanin. Текст. / RJ. D'Amato, Z.P. Lipman, S.H. Snyder // Science. -1986. 231. - 4741: P. 987 - 989.

69. Daniel, P. Changes in cortical EEG and cholinergic function in response to NGF in rats with nucleus basalis lesions. Текст. / P. Daniel, F. Andrew Leuchter et al. // Brain Research. 1997. - 765. - 2: P. 228-237

70. Dauer, W. Parkinson's disease: Mechanisms and Models. Текст. / W. Dauer, S. Przedborski // Neuron. 2003. - 39: P. 889-909.

71. Davies, A.M. Neurotrophin-4/5 is a mammalian-specific survival factor for distinct populations of sensory neurons. Текст. / A.M. Davies, A. Horton, L.E. Burton et al. // Neurosci. -1993. -13: P. 4961-4967.

72. Dawbarn, D. Neurotrophins and neurodegeneration. Текст. / D. Dawbarn, S .J. Allen //Neuropathol. Appl. Neurobiol. 2003. - 29: P. 211-230.

73. Dechant, G. The neurotrophin receptor p75 (NTR): novel functions and implications for diseases of the nervous system. Текст. / G. Dechant, Y.A. Barde // Nat. Neurosci. 2002. - 5: P.l 131 -1136.

74. Dehouck, B. A new function the LDL receptor: Transcytosis of LDL across the blood-brain barrier. Текст. / В. Dehouck, С. Fenart, М-Р. Dehouck, et al. // J Cell Biol. 1997. -138: P. 887-889.

75. Deumens, R. Modeling Parkinson's disease in rats: an evaluation of 6-OHDA lesions of the nigrostriatal pathway. Текст. / R. Deumens, A. Blokland, J. Prickaerts // Exp Neurol. 2002. -175: P. 303-317.

76. Dringen, R. Metabolism and functions of glutathion in grain. Текст. / R. Dringen // Progress in Neurobiology. 2000. - 62. - 6: P. 649-671.' ^M;''у- ■'

77. Elbaz, A. Update in the epidemiology of Parkinson's disease. | Текст. / Л. Elbaz, F. Moisan // Gurr Opin Neurol. -2008. 21. - 4: P. 454-460. :

78. Ericsson,D^Neurotrophin I: Treatment of Parkinson's Disease. Текст. / D. U\ Ericsson, B.V. Lipps, F.W. Lipps // Explore. 1992. -3. - 6: P.19-21.

79. Eveleth, D.D. Nerve growth factor receptors: Structure and function. Текст. / D.D. Eveleth // In vitro cell Dev. Biol. 1988. -24. - 12: P. 1148-1153.

80. Fahn, S. «On-off» phenomenon with levodopa therapy in Parkinsonism. Clinical and pharmacologic correlations and the effect of intramuscular pyridoxine. Текст. / S. Fahn//Neurology. 1974. - 24: P. 431-441.

81. Fahn, S. Is levodopa toxic? Текст. / S. Fahn // Neurology. 1996. - 47: P. 184195.

82. Fernandez, S.M. Chronic Oral Estrogen Affects Memory and Neurochemistry in Middle-Aged Female Mice. Текст. / S.M. Fernandez, K.M. Frick // J. Neurosci. —1997. 17. - №7: P. 2543-2550.

83. Flint Beal, M. Energetics in the pathogenesis of neurodegenerative diseases. Текст. / M. Flint Beal // Trends in Neurosciences. 2000. - 23. - 7: P. 298-304.

84. Forno, L.S. Similarities and differences between MPTP-induced parkinsonism and Parkinson's disease. Neuropathology considerations. Текст. / L.S. Forno, L.E. DeLanney, I. Irwin, J.W. Langston // Adv. Neurol. 1993. - 60: P. 600-608.

85. Franken, P. Genetic variation in EEG activity during sleep in inbred mice. Текст. / P. Franken, A. Malafosse, M. Tafti // Am J Physiol Integr Comp Physiol.1998.-275-4: P.l 127-1137.

86. Gabizon, A.A. Pegylated liposomal doxorubicin: metamorphosis of an old drug , into a new form of chemotherapy. Текст. / AiA. Gabizon // Cancer Invest. 2001 . — 9: P. 424-436. ; '

87. Garcia, E. Ventricular injection of nerve growth factor increases dopamine content in the striata of MPTP-treated mice. Текст. / E. Garcia, G. Rios, J. Sotelo // Neurochemical research. — 1992. —17 —10: P. 979-982.

88. Garnett, M.C. Nanomedicines and nanotoxicology: some physiological principles. Текст. / M.C Garnett, P. Kallinteri // Occupational Medicine. — 2006. -56.-5: P. 307-311.

89. Geiser, M. Ultrafine particles cross cellular membranes by nonphagocytic mechanisms in lungs and in cultured cells. Текст. / M. Geiser, B. Rothe-Rutishauser, N. Kapp et al.// Environ Health Perspect. 2005. - 113: P. 1555-1560.

90. Giovanni, T. Polymeric nanoparticles for the drug delivery to the central nervoussystem. Текст. / Т. Giovanni, С. Luca, В. Ruozi et al. // Expert Opinion on Drug : ^ VDelivery.-2ОО8. -5.-2: jp. 155-174. j f J^iV ^^ivr^'- '■:

91. Л• -; ■■.:•' /: / 123: Greene, L.A. Early events in neurotrophin signaling via Trk anid p75 receptors. ,' ; ¿V • ; •;: Текст. /.L.A. Greene, D.R. Kaplan // Gurr. Opin. Neurobiol. 1995. -5: P. 579-587; ■ /

92. Greene, L.A. The nerve growth factor: biochemistry, synthesis, and mechanism ¡'■V' of action. Текст. / L.A. Greene, Ё.М.,. Shooter// Annu. Rev. Neurosci. — 1980. 3:p- 353-402. : : ■" ' Й V'' .'

93. Grislain, L., Pharmacokinetics and distribution of a biodegradable drug-carrier. Текст./ L.Grislain, P. Couvreur, V. Lenaerts et al. // Int J Pharm. 1983. —15: P. 335-345.

94. Gulyaev, A.E .Significant transport of doxorubicin into the brain with polysorbate 80-coated nanoparticles. Текст. / A.E Gulyaev, S.E. Gelperina, I.N. Skidan et al. // Pharm Res. 1999. -16: P. 1564-1569.

95. Hallbook, F. Evolutionary studies of the nerve growth factor family reveals a novel member abundantly expressed in Xenopus ovary. Текст. / F. Hallbook, C.F. Ibanez, H. Persson//Neuron. 1991. -6: P. 845-858.

96. Hardy, J. / Neurodegenerative disease: a different view of diagnosis. Текст. / J. Hardy, K. Gwinn-Hardy // Molecular Medicine Today. 1999. -5: P. 514-517.

97. Hayashi, K. Biochemistry of nerve growth factor: structure, functions and biosynthesis. Текст. / К. Hayashi, S. Furukawa // Seikagaku. — 1992. —64. — 5: P. 289-307.

98. Hefti, F. Nerve growth factor and Alzheimer's disease. Текст. / F. Hefti, WJ. Weiner // Ann. Neurol. 1986. - 20.-3: P. 275-281.

99. Hughes, A J. Accuracy of clinical diagnosis of Parkinson;s disease: a clinicopathological study of 100 cases. Текст. / A.J. Hughes, S.E. Daniel, I. Kilrord et al. // J Neurol Psychiat. 1992. -55: P. 181-184.

100. Humpel, C. Nerve growth factor and cholinergic CNS neurons studied in organotypic brain slices. Implication in Alzheimer's disease. Текст. / С. Humpel, C.Weis // J. Neural Transm. 2002. - 62: P. 253-263.

101. Ilium, L. The organ uptake of intravenously administered colloidal particles can be altered using a non-ionic surfactant (Poloxamer 338). Текст. / L. Ilium, S.S. Davis // FEBS Lett. 1984. - 167. - P. 79-82.

102. Isaeson, O. Models of repair mechanisms for future treatment modalities of Parkinson's disease. Текст. / О. Isaeson // Brain Research Bulletin. — 2002. —57. — 6: P. 839-846.

103. Jafvert, C.T. Buckminsterfullerene's (C60) Octanol-Water Partition Coefficient (Kow) and Aqueous Solubility. Текст. / C.T. JafVert, P.P. Kulkarni // Environ. Sci. Technol. -2008. -42: P. 5945-5950.

104. Jellinger, K. New developments in the pathology of Parkinson's disease. Текст. /К. Jellinger//AdvNeurol. 1990. -53: P. 1-16.

105. Kante, B. Toxicity of polyalkylcyanoacrylate nanoparticles. I. Free nanoparticles. Текст./ В. Kante, В. Couverur, G. Dubois-Krack et al. // J. Pharm. Sci. 1981. -71. - 7: P. 786-790.

106. Kaplan, D.R. Neurotrophin signal transduction in the nervous system. . Текст./ D.R. Kaplan, F.D. Miller // Curr. Opin. Neurobiol. 2000. - 10. - P. 381-391.

107. Katz, L.C. Synaptic activity and the construction of cortical circuits. Текст. / L.C. Katz, C.J. Shatz//Science. 1996.-274: P. 1133-1138.

108. Katzenschlager, R. Anticholinergics for symptomatic management of Parkinson's disease. Текст. / R. Katzenschlager, C. Sampaio, J. Costa et al. // Cochrane Database Syst Rev. 2003. - 2: P. 142-145.

109. Kernie, S.G. The molecular Basis for Understanding Neurotrophins and their Relevance to Neurologic Disease. Текст. / S.G. Kernie, L.F. Parada // Arch Neurol. — 2000. -57: P. 654-657.

110. Kitada, T. Mutations in the parkin gene cause autosomal recessive juvenile parkinsonism. Текст. / Т. Kitada, S. Asakawa, N. Hattori et al. // Nature. 1998. -392: P. 605-608.

111. Klein, R. The trkB tyrosine protein kinase is a receptor for brain-derived neurotrophic factor and neurotrophin-3. Текст. / R. Klein, V. Nanduri, S.A. Jing, et al. // Cell. 1991.-66: P. 395-403.

112. Controlled Release. 1991. - 16: P. 169-176. :

113. Kreuter, J. Nanoparticles Текст. Edited by J.Swarbick and J.C. Boylan / Marcel Dekker, New York / in Encyclopedia of Phannaceutical Techjiology. 1994. —1. P. 165-190. '

114. Kreuter, J. Nanoparticulate systems for brain delivery of drugs. Текст. / J Kreuter. // Adv Drugs Rev. 2001. - 47: P. 65-81.

115. Kreuter, J. Transport of drugs across the blood brain barrier by nanoparticles. Текст. / J. Kreuter // Curr. Med. Chem. 2002. -2: P. 241-249.

116. Kreuter, J. Nanopaticles — a historical perspective. Текст. / J. Kreuter // Int. J. Pharm.-2007. — 331: p. 1-10.

117. Kreuter J. Using Nanoparticles to Target Drugs to the Central Nervous System. Текст. / J. Kreuter, R. Alyautdin // Marcel Dekker, New York. 2000: P. 205-223.

118. Kreuter, J. Passage of peptides through the blood-brain barrier with colloidal polymer particles. Текст. / J. Kreuter, R.N. Alyautdin, A.A. Ivanov, D.A. Kharkevich // 1995. - 4. - 67: P. 171-174

119. Kreuter, J. Toxicity and association of polycyanoacrylate nanoparticles with hepatocytes. Текст. / J. Kreuter, C.G. Wilson, J.R. Fry et al. // Journal of Microencapsulation. 1984. - 1. - 3:P. 253-257.

120. Kryzhanovsky, G.N. Some categories of general pathology and biology: health, disease, homeostasis, sanogenesis, adaptation, immunity. Текст. / G.N. Kryzhanovsky // Pathophysiology. 2004. 11: P. 135-138.

121. Kryzhanovsky, G.N. Effects of fibroblast growth factors on MPTP-induced parkinsonian syndrome in mice. Текст. / G.N. Kryzhanovsky, V.G. Kucheryanu, N.AKrupina et al. //Pathophysiology. 1997.- 4: P.59-67.

122. Kucheryanu, V.G. Progress in Drug Delivery Systems. Текст. / V.G. Kucheryanu, V.V. Yurasov, G.N. Kryzhanovsky et al // Biomedical Research Foundation.- 1996.-5: P. 179-182.

123. Kuppers, E. Dopamine regulates brain-derived neurotrophic factor (BDNF) expression in cultured embryonic mouse striatal cells. Текст. / E.Kuppers, C. Beyer // Neuroreport. 2001. - 12. - 6: P. 1175-1179.

124. Lamballe, F. TrkC, a new member of the trk family of tyrosine protein kinases, is a receptor for neurotrophin-3. Текст. / F. Lamballe, R. Klein, M. Barbacid // Cell. -1991.-66: P. 967-979.

125. Langer, K. Characterization of polybutylcyanoacrylate nanoparticles: I. Quantification of PBCA polymer and dextrans. Текст. / К. Langer, E. Seegmueller, A. Zimmer, J. Kreuter // Int. J. Pharm. 1994. -110: P. 21-27.

126. Langer, K. Optimization of the preparation process for human serum albumin (HSA) nanoparticles. Текст. / К. Langer, S. Balthasar, V. Vogel et al. // Int. J. Pharm.-2003.-257: P. 169-180.

127. Langston J.W. Etiology. Текст. / J.W. Langston // In: W. Koller (ed). Handbook of Parkinson's disease. NY. 1989: P. 297-308.

128. Lee, R. Regulation of cell: survival by secreted proneurotrophins. Текст. / R. ,

129. Lee, P. Kermahi, K.K Teng,ВШ. Hempstead // Science. 2001. - 294: P. 1945- .

130. Leemans, J.C. Depletion of* alveolar macrophages exerts protective effects ?in pulmonary tuberculosis in mice. Текст. / J.C. Leemans, N.P. Juffermans, S. Florquin // J. Immunol. • • 2001. 166. - 7: P. 4604-4611. \

131. Leibrock, J. Molecular cloning and expression of brain-derived neurotrophic factor. Текст. / J. Leibrock, F. Lottspeich, A. Hohn et al. // Nature. 1989. — 341: P. 149-152.

132. Levi-Montalcini, R. A diffusible agent of mouse sarcoma producing hyperplasia of sympathetic ganglia and hyperneurotization of the chick embryo. Текст. / R. Levi-Montalcini, V. Hamburger//Exp. Zool. 1953.-123: P. 233-388.

133. Levi-Montalcini, R. The nerve growth factor 35 years later. Текст. / R. Levi-Montalcini // Science. 1987. - 237: P. 1154-1162.

134. Lherm, C. Alkylcyanoacrylate drug carriers: II. Cytotoxicity of cyanoacrylate nanoparticles with different alkyl chain length. Текст. / С. Lherm, R.H. Muller, F. Puisieux, P. Couvreur // Int J Pharm. 1992. - 84: P. 13-22.

135. Liao, G.S. Pharmacological actions of nerve growth factor-transferrin conjugate on the central nervous system. Текст. / G.S. Liao, X.B. Li, C.Y. Zhang et al. // J. Nat. Toxins. -2001. 10.-4: P. 291-297.

136. Limin, Mao. Adult neural stem/progenitor cells in neurodegenerative repair. Текст. / Limin Mao, John Q. Wang. // Acta Phisiologica Sinica. 2003. - 55. — 3: P. 233-244.

137. Lindvall, O. Mesencephalic dopamine neurons projecting to neocortex. Текст. / О. Lindvall, A. Bjorklund, R.V. Moore, U. Sterevi // Brain Res. 1974. - 87: P. 325331.

138. Lloyd, K.G. CNS compensation to dopamine neuron loss in Parkinson's disease., Текст. / K.G. Lloyd // Adv Exp Med Biol. 1977. - 90: P. 255-266.

139. Lockman, P.R. Nanoparticle Technology for Drug Delivery Across the Blood-Brain Barrier. Текст. / P.R. Lockman, R.J. Mumper, M.A. Khan, D.D. Allen // Drug Development and Industrial Pharmacy. 2002. - 28. - 1: P. 1-13.

140. Lotharius, J. Distinct Mechanisms Underlie Neurotoxin-Mediated Cell Death in Cultured Dopaminergic Neurons. Текст. / J. Lotharius, L.L. Dugan, K.L. O'Malley // The Journal of Neuroscience. 1999. -19. - 4: P. 1284-1293.

141. Lozano, A.M. New developments in understanding the etiology of Parkinson's disease and in its treatment. Текст. / A.M Lozano, A.F. Lang, W.D. Hutchison et al. // Current Opinion in Neurobiology. 1998.-8: P. 783-790.

142. Maisonpierre, P. Neurotrophin-3: a neurotrophic factor related to NGF and BDNF. Текст. / P. Maisonpierre, L. Belluscio, S. Squinto et al. // Science. 1990. -247: P. 1446-1451.

143. Mao, L. Profound astrogenesis in the striatum of adult mice following nigrostriatal dopaminergic lesion by repeated MPTP administration. Текст. / L. Mao, Y.S. Lau, E. Petroske, J.Q. Wang // Dev Brain Res. 2001. - 131: P. 57-65.

144. Markus, A. Neurotrophic factors and axonal growth. Текст. / A. Markus, T.D. Patel, and W.D. Snider // Curr. Opin. Neurobiol. 2002. - 12. - 5: P. 523-531.

145. Martinez-Serrano, A. Protection of the Neostriatum against Excitotoxic Damage by Neurotrophin-Producing, Genetically Modified Neural Stem Cells. Текст. / A. Martinez-Serrano, A. Bjorklund // The Journal of Neuroscience. — 1996. -16.- 15: P. 4604-4616.

146. Maya, J.C. Melatonin prevents apoptosis induced by 6-hydroxydopamine in neuronal cells: implications for Parkinson's disease. Текст. / J.C. Maya, R.M. Sainz, H. Uria et al. // J Pineal Res. 1998. -24. - 3: P. 179-192.

147. McAllister, A. Neurotrophins and synaptic plasticity. Текст. / A. McAllister, L. Katz, D. Lo // Annu. Rev. Neurosci. 1999. - 22: P. 295-318.

148. McDonald, N.Q. New protein fold revealed by a 2-3-A resolution crystal structure of Nerve Growth Factor. Текст. / N.Q. McDonald, R. Lapatto, J.Murray-Rust et al. //Nature. 1991. - 354: P. 411-414.

149. Mizuta, I. Multiple candidate gene analysis identifies alpha-synuclein as a susceptibility gene for sporadic Parkinson's disease. Текст. / I. Mizuta, W. Satake, Y. Nakabayashi // Hum. Mol. Genet. 2006. -15: P. 1151-1158.

150. Mowla, S.J. Biosynthesis and post-translational processing of the precursor to brain-derived neurotrophic factor. Текст. / S.J. Mowla, H.F. Farhadi, S. Pareek et al. // Biol. Chem. 2001. - 276. - 16: P. 12660-12666.

151. Michaelis, K. Covalent linkage of apolipoprotein E to albumin nanoparticles strongly enhances drug transport into the brain. Текст. / К. Michaelis, M.M. Hoffmann, S. Dreis et al. // JPET 2006. - 317: P. 1246-1253.

152. Moghimi, S.M. Long-circulating and target-specific nanoparticles: theory to practice. Текст. / S.M. Moghimi, A.C. Hunter, J.C. Murray // Pharmacol Rev. — 2001.- 53: P. 283-318

153. Mueller, R.H. In vitro model for the degradation of alkylcyanoaciylate nanoparticles. Текст. / R.H. Mueller, C. Lherm, J. Herbort, P. Couvreur // Biomaterials. 1990. - 11: P. 590-595.

154. Murthy, R.S.R. Poly (Alkyl Cyanoacrylate) Nanoparticles for Delivery of AntiCancer Drugs. Текст. / R.S.R Murthy, L.H. Reddy // Nanotechnology for Cancer Therapy edited by Mansoor M. Amiji. 2007: P. 264-266.

155. Nerurkar, M.M. The use of surfactants to enhance the permeability of peptides through Caco-2 cells by inhibition of an apically polarized efflux system. Текст. / M.M. Nerurkar, P.S. Burto, R.T. Borchardt //Pharm Res. 1996. - 13: P. 528-534.

156. Williams& Wilkins. 2005. -5: P. 13-56. '' '

157. Obeso, J.A. Levodopa motor complications in Parkinson's disease. Текст. / J.A.Obeso, C.W. Olanow, J.G. Nutt // Trends Neurosci. 2000. - 23: P. 2-7.

158. Oppenheim, R.W. Brain-derived neurotrophic factor rescues developing avian motoneurons from cell death. Текст. / R.W. Oppenheim, Q.W. Yin, D. Prevette, Q. Yan//Nature. 1992. - 360: P. 755-757.

159. Owen, A.D. Oxidative stress and Parkinson's disease. Текст. / A.D. Owen A.H. Schapira, P. Jenner, C.D. Marsden // Ann NY Acad Sci. 1996. -786: P. 217-223.

160. Page-Clisson, M.E. Development of ciprofloxacin-loaded nanoparticles: physicochemical study of the drug carrier. Текст. / M.E. Page-Clisson, H. Pinto-Alphandary, M. Ourevitch et al. // J. of Controlled Release. 1998. - 56: P. 23-32.

161. Pardo, В. Toxic effects effects of L-DOPA on mesencephalic cell cultures: protection with antioxidants. Текст. / В. Pardo, M.A. Mena, MJ. Casarejos et al. // Brain Res. 1995. - 682: P. 133-143.

162. Pedre, L.L. Nerve growth factor levels in parkinson disease and experimentaliparkinsonian rats. Текст. / L.L. Pedre, N.P. Fuentes, L.A. González et al. // Brain Research. 2002. - 952. - 1: P. 122-127.

163. Peng, J. Fibroblast growth factor 2 enhances striatal and nigral neurogenesis in the acute l-methyl-4-phenyl-l,2,3,6-tetrahydropyridine model of Parkinson's disease. Текст. / J. Peng, L. Xie, K. Jin et al. // Neuroscience 2008. - 153. - 3: P. 664-70

164. Pereverzeva, E. Intravenous tolerance of a nanoparticle-based formulation of doxorubicin in healthy rats. Текст. / E. Pereverzeva, I. Treschalin, D. Bodyagin et al. // Toxicology Letters. 2008. - 178. - 1: p. 9-19.

165. Persson H. Neurotrophin production in the brain // Semin Neurosci. — 1993. — Vol. 5.-p. 227-237.

166. Pifl, C. Dopamine transporter expression confers cytotoxicity to low doses of the parkinsonism-inducing neurotoxin l-methyl-4-phenylpyridinium. Текст. / С. Pifl, В. Giros, M.G. Carón // Journal of Neuroscience. 2000. - 13: P. 4246-4253.

167. Piotrovsky, L.B. Fullerenes and viruses. Текст. / L.B. Piotrovsky, O.I. Kiselev // Fullerenes, Nanotubes and Carbon Nanostruct. 2004. -12: P. 397-403.

168. Poo, M. Neurotrophins as synaptic modulators. Текст. / M. Poo // Nature Rev. Neurosci. -2001.-2: P. 24-31.

169. Przedborski, S. Role of neuronal nitric oxide in l-methyl-4-phenyl-l,2,3,6-tetrahydropyridine (MPTP)-induced dopaminergic neurotoxicity. Текст. / S. Przedborski, V. Jackson-Lewis, R. Yokoyama et al. // Proc Natl Acad Sci. — 1996. -93: P. 4565-4571.

170. Rabizadeh, S. Induction of apoptosis by the low-affinity NGF receptor. Текст. / S. Rabizadeh, J. Oh, 1. Zhong et al. //Science. 1993. - 261: P. 345-348. V ; ■

171. Randerson, Jl Nerve growth factor shows promise in Parkinson's disease. Текст. /J. Randerson // New Scientist. 2003. - 23 89: P. 23

172. Rapoport, S. Quantitative aspects of reversible osmotic opening of the blood-brain barrier. Текст. / S. Rapoport, F. Fredericks, K. Ohno, P. Pettigrew // Am. J. Physiol. 1980.-238: P. 421-430.

173. Rattray, M. Is there nicotinic modulation of nerve growth factor? Implications for cholinergic therapies in Alzheimer's disease. Текст. / M. Rattray // Biol. Psychiatry. -2001.-49.-3: P. 185-193.

174. Riederer, P. Parkinson's Disease and Related Disorders. Текст. / P. Riederer, H. Reichmann, M.B.H. Youdim, M. Gerlach // Journal of Neural Transmission. — 2006. -70.-p. 506.

175. Ringe, K. Nanoparticle Drug Delivery to the Brain Текст. / К. Ringe, G.M. Walz, B.A. Sabel // Encyclopedia of Nanoscience and Nanotechnology. — 2004. — 7: P. 91-104.

176. Rinne, J.O. Dementia in Parkinson's disease is related to neuronal loss in the medial substantia nigra. Текст. / J.O. Rinne, J. Rummukainen, L. Paijarvi, U.K. Rinne//Ann Neural. 1989.-26: P. 47-50.

177. Sabel, В.A. Nanoparticle technology for delivery of drugs across the blood-brain barrier. Текст. / B.A. Sabel, U. Schroeder, P. Sommerfeld, S. Ulrich // J Pharm Sci. 1998. - 87. - 11: P. 1305-1307.

178. Sastry, P.S. Apoptosis and nervous system. Текст. / P.S. Sastry, K.S. Rao // J Neurochem. 2000. - 74. - 1: P. 1-20.

179. Savitt, M.J. Diagnosis and treatment of Parkinson disease: molecules to medicine. Текст. / M.J. Savitt, L.V. Dawson, M.T. Dawson // The Journal of Clinical Investigation. 2006. -116. -7: P. 1744-1754.

180. Schapira, A.H. Present and future drug treatment for Parkinson's disease. Текст. / A.H. Schapira // J Neurol Neurosurg Psychiatry. 2005. - 76: P. 1472-1478.

181. Schmidt, N. Neurochemical findings in the MPTP model of Parkinson's disease. Текст. I N. Schmidt, B. Ferger // J Neural Transm. 2001. - 108: P. 1263-1282.

182. Schabitz, W.R. Intravenous Brain-Derived Neurotrophic Factor Enhances Poststroke Sensorimotor Recovery and Stimulates Neurogenesis. Текст. / W.R Schabitz, T. Steigleder, C.M. Cooper-Kuhn et al. // Stroke. 2007. - 38 :P. 21652172.

183. Schindler, L. Studies of cellular immunity, serum interferon titers, and natural killer cell activity in schizophrenic patients. Текст. / L. Schindler, M. Leroux, J. Beck et al. // Acta Psychiatr Scand. 1986. - 73: P. 651-657.

184. Shooter, E.M. Biosynthesis and mechanism of action of nerve growth factor.

185. J , Текст. / E.M. Shooter, B.A. Yankrier, O.E. Landreth, A; Sutter // Recent Progr.

186. Shooter, E.M. Early days of thenervegrowth factorproteins; Текст. / E.M.

187. VShooter// Anriual ReviewNeuroscience. -2001. 24: P. 601-629. ; ; ; ; ; '■' ' V

188. Skidän, I.N. Enhanced activity of rifampicin loaded with polybütyl cyanoacrylate : r.,; nanoparticles in relation to intracellularly localized bacteria. Текст. / I.N. Skidan,

189. S.E. Gelperina,S.E: Severin, A.E. Guliaev // Antibiot Khimioter. 2003.- 48:- 1: P. : 23-26. .'.'. '•■;. • . V, " .■•'"•'■. : 7

190. Slotnick B.M., Leonard C.M. A Stereotaxic Atlas of the Albino Mouse Forebrain //U.S, Department of Health, Education and Welfare Public health service. 1975. — p. 174. v

191. Sofroniew M.V., Howe G.L., Mobley W.C. Nerve growth factor signaling, neuroprotection, and neural repair // Annu. Rev. Neurosci. — 2001. — Vol. 24. — p. 1217-1281.

192. Sommerfeld P., Schroeder U. and Säbel B.A. Sterilization of unloaded polybutylcyanoacrylate nanoparticles // Int. J. Pharm. 1998. - Vol. 164. -p. 113118.

193. Sommerfeld P., Säbel B.A., Schroeder U. Long-term stability of PBCA nanoparticle suspensions // J. Microencapsul. 2000. - V. 17. - p. 69-79.

194. Sommerfeld P., Schröder U. and Sabel B. A. Long-term stability of PBCA nanoparticle suspensions suggests clinical usefulness // Int. J. Pharm. — 1997. — Vol. 155.-p. 201-207.

195. Soppet D., Escandon E., Maragos J., Middlemas D.S., Reid S.W., Blair J.et al. The neurotrophic factors brain-derived neurotrophic factor and neurotrophin-3 are ligands for the trkB tyrosine kinase receptor. // Cell. 1991. - Vol.65. - P. 895-903.

196. Steiniger S.C, Kreuter J., Khalansky A.S., Skidan I.N., Bobruskin A.I., Smirnova Z.S., et al. Chemotherapy of glioblastoma in rats using doxorubicin-loaded . nanoparticles //Int J Cancer. -2004. Vol. 109.-p. 759-767.

197. Storchj A. Randomized, Double-blind, Placebo-Controlled Trial on Symptomatic Effects of CoeiLzyme Q10 in Parkinson Disease. Текст. / A .Storch, W.H. Jost, P. Vieregge // Arch Neurol. 2007. - 64: P. 93 8-944.

198. Takei, N. Brain-derived neurotrophic factor induces rapid and transient release of glutamate through the non-exocytotic Pathway from Cortical Neurons. Текст. / N. Takei, T. Numakawa, S. Kozaki et al. // J. Biol. Chem. 1998. - 273. - 42: P. 2762027624

199. Tapia-Arancibia, L. Physiology of BDNF: focus on hypothalamic function. Текст. / L. Tapia-Arancibia, F. Rage, L. Givalois, S. Arancibia // Neuroendocrinology. 2004. - 25: P. 77-107.

200. Taylor, J.R. Sham surgery does not ameliorate MPTP-induced behavioural deficits in monkeys. Текст. / J.R. Taylor, J.D. Elswirth, J.R. Sladek et al. // Cell Transplant. 1995. - 3. - 1: P. 13-26.

201. Thoenen, H. Physiology of nerve growth factor. Текст. / H. Thoenen, Y.A. Barde // Rev Physiol Biochem Pharmacol. 1987. - 109: P. 145-178.

202. Torchilin, V.P. Targeted polymeric micelles for delivery of poorly soluble drugs. Текст. / V.P. Torchilin // Cell Mol Life Sci. 2004. - 61: P. 2549-2559.

203. Vauthier, C. Poly(alkylcyanoacrylates) as biodegradable materials for biomedical applications. Текст. / С. Vauthier, С. Dubernet, E. Fattal et al. // Adv Drug Deliv Rev.-2003.-55.-4: P. 519-548.

204. Ventimiglia, R. The neurotrophins BDNF, NT-3 and NT-4/5 promote survival and morphological and biochemical differentiation of striatal neurons in vitro. Текст. / R. Ventimiglia, P.E. Mather, B.E. Jones, R.M. Lindsay // Neurosci. 1995. - 7: P. 213-222.

205. Walkinshaw, G. Induction of apoptosis in catecholaminergic PC 12 cells by L-DOPA. Implication for the treatment of Parkinson's disease. Текст. / G. Walkinshaw, C.M. Waters // J Clin Invest. 1995. - 95: P. 2458-2464.

206. Weber, C. Preparation of surface modified protein nanoparticles by introduction of sulfhydryl groups. Текст. / С. Weber, S. Reiss, J. Kreuter // Int. J. Pharm. 2000. -211: P. 67-78.

207. Weber, C. Desolvation process and surface characterisation of protein nanoparticles. Текст. / С. Weber, С. Coester, J. Kreuter, K. Langer // Int. J. Pharm. -2000a.-194: P. 91-102.

208. Wullner; I J. Cell death and apoptosis regulating proteins in Parkinson's disease: a cautionary note. Текст. / U. Wullner, J. Kornhuber, M. Weller et al. 7/ Acta

209. Ncuropathol. 1999. - 97: P. 408-412.

210. Xi Jun Tie. Evidence of Apoptosis in the Subventricular Zone and Rostral Migratory Stream in the MPTP Mouse Mpdel of Parkinson Disease. Текст. / Xi Jun He, H. Nakayama, M. Dong et al. // J Neuropathol Exp Neurol. 2006. - 65. - 9: P. 873-882.

211. Yuen, E.C. Therapeutic potential of neurotrophic factors for neurological disorders. Текст. / E.C. Yuen, W.C. Molbey // Ann. Neurol. 1996. - 40. - 2: P. 346-354.

212. Yurasov, V.V. Progress in Drug Delivery Systems. Текст. / V.V. Yurasov, V.G. Kucheryanu, G.N. Kryzhanovsky et al. // Biomedical Research Foundation. 1996. — 5: P. 171-174.

213. Zhang, X. Transport of nerve growth factor encapsulated into liposomes across the blood-brain barrier: in vitro and in vivo studies. Текст. / X .Zhang, Y. Xie, L. Ye et al. // J. Control Release. 2005. - 20: P. 106-119.

214. Zhao, M. Evidence for neurogenesis in the adult mammalian substantia nigra. Текст. / M. Zhao, S. Momma, K. Delfani et al. // PNAS. 2003. - 100. - 13: P. 7925-7930.

215. Zohri, M. Polymeric NanoParticles: Production, Applications and Advantage. Internet link./ M. Zohri, T. Gazori, S. Mirdamadi et al. // The Internet Journal of Nanotechnology. 2009. — 3. — 1.

216. Zordan-Nudo, Т. Effects of nonionic detergents on P-glycoprotein drug binding and reversal of multidrag resistance. Текст. / Т. Zordan-Nudo, V. Ling, Z. Liv, E. Georges. // Cancer Res. 1993. -53: P. 5994-6000.