Методы IN VITRO в селекции огурца (Cucumis Sativus L.) на устойчивость к фузариозу тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 06.01.05, кандидат сельскохозяйственных наук Ткачева, Анна Анатольевна

• Ткачева, Анна Анатольевна
• кандидат сельскохозяйственных наук
• 2007

Оглавление диссертации кандидат сельскохозяйственных наук Ткачева, Анна Анатольевна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

ЦЕЛИ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЙ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Природа устойчивости растений к фитопатогенам и способы создания сортов, устойчивых к болезням.

1.2. Клеточная селекция растений на устойчивость к фитопатогенам

1.2.1. Использование тканевых и клеточных культур в селекции на устойчивость к фитопатогенам.

1.2.2. Использование патогенов в клеточной селекции растений

1.3. Селекция огурца на устойчивость к фузариозу.

ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

ГЛАВА 2. УСЛОВИЯ, ИСХОДНЫЙ МАТЕРИАЛ, СХЕМА И МЕТОДИКИ ПРОВЕДЕНИЯ ОПЫТОВ

2.1. Исходный материал.

2.1.1. Растительный материал.

2.1.2. Штаммы возбудителя фузариозного увядания огурца

F. oxysporum.

2.2. Схема исследований.

2.3. Методы исследований.

2.3.1. Методы выращивания растений.

2.3.2. Методики лабораторных опытов.

2.4. Условия выращивания эксплантов.

2.5. Методы оценки огурца на устойчивость к фузариозу.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЯ

3.1. Оптимизация факторов, влияющих на морфогенетическую способность эксплантов огурца.

3.1.1. Стерилизация семян и сегментов растений огурца для введения в культуру in vitro

3.1.2. Обоснование выбора эксплантов.

3.1.3. Изучение влияния фитогормонов на морфогенетическую активность тканей огурца.

3.1.4. Получение растений - регенерантов огурца, укоренение и адаптация к почвенным условиям.

3.2. Разработка селективных условий для создания in vitro тканевых культур, устойчивых к фильтрату культуральной жидкости гриба

F. oxysporum и фузариевой кислоте.

3.2.1. Изучение влияния концентрации фильтрата культуральной жидкости F. oxysporum на тканевые культуры огурца in vitro.

3.2.2. Изучение влияния фузариевой кислоты на морфогенетическую активность тканей огурца при культивировании in vitro.

3.3. Усовершенствование экспресс - оценки огурца на устойчивость к фузариозу.

3.3.1. Усовершенствование экспресс - оценки огурца на устойчивость к фузариозу, основанные на проращивании семян на фильтрате культуральной жидкости гриба F. oxysporum.

3.3.2. Усовершенствование экспресс - оценки огурца на устойчивость к фузариозу, основанные на культивировании проростков in vitro на селективных средах, содержащих фильтрат культуральной жидкости гриба F. oxysporum.

3.3.3. Оценка огурца на устойчивость к фузариозу на искусственном инфекционном фоне.

3.4. Коэффициенты корреляции признаков при сравнительной оценке методов на устойчивость к фузариозу.

3.5. Биохимическая оценка растений огурца на основании колориметрического метода суммарного содержания фенольных соеди- 97 нений

3.6. Экономическая эффективность.

ВЫВОДЫ.

ПРЕДЛОЖЕНИЯ ДЛЯ ИСПОЛЬЗОВАНИЯ В СЕЛЕКЦИОННОЙ

ПРАКТИКЕ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Методы IN VITRO в селекции огурца (Cucumis Sativus L.) на устойчивость к фузариозу»

Актуальность темы. Одним из важных направлений селекции является создание форм, сортов и гибридов растений, устойчивых к биотическим факторам. Это обусловлено большими потерями урожая сельскохозяйственных растений, вызванными поражением их грибными, бактериальными, вирусными болезнями и повреждением вредителями. Снижение урожайности сельскохозяйственных культур до 30 % является следствием широко распространенного и вредоносного заболевания - фузариоз (Коновалов Ю.Б., 1999). Наиболее перспективным способом защиты растений от фитопатогенов является селекция, создание комплексно устойчивых сельскохозяйственных культур. Однако продолжительность периода создания сортов и гибридов достигает 10 и более лет, при этом часто степень устойчивости растений к вредным организмам является недостаточной и далеко не всегда отвечает требованиям производства (Калашникова Е.А., 2003).

Решение большинства практических задач селекции во многом может определяться эффективностью вовлечения современных методов в селекционный процесс. Значительное место в решении этих задач занимает клеточная селекция, основанная на отборе клеточных популяций, устойчивых к селективному фактору, и регенерации из них растений (Поляков А.В., 2003; Калашникова Е.А., 2003).

При использовании методов клеточной селекции в нашей стране и за рубежом достигнуты значительные результаты: созданы устойчивые линии люцерны (Мезенцева О.Н., 1992) и льна (Поляков А.В., 2000; Пролетова Н.В., Поляков А.В., 2003) к фузариозу; томатов (Нгуен Х.М., 1991) и моркови (Калашникова Е.А., Ипатова Н.В., 2004) к альтернариозу; картофеля - к фи-тофторозу и бактериальной гнили (Калашникова Е.А., 2000). Благодаря достижениям клеточной селекции стало возможным получение in vitro расте-ний-регенерантов с измененными признаками, среди которых селекционер может отобрать устойчивые к болезням формы и при этом сохранить положительные черты исходного образца (Бутенко Р.Г., 1999). Однако, несмотря на определенные успехи, имеющиеся в селекции огурца, до настоящего времени не созданы сорта и гибриды, устойчивые к фузариозному увяданию. В связи с этим необходимо шире использовать в селекционном процессе методы in vitro.

Большая роль по увеличению урожайности огурца, улучшению качества и стабильности урожая отводится селекции. Снижение урожайности на 30

- 50 % является следствием широко распространенного и вредоносного заболевания - фузариоз. Ее вызывает ряд патогенов, основными из них являются грибы рода Fusarium: F. oxysporum, F. solani. Провоцируют болезнь резкие перепады температуры воздуха, переувлажнение почвы, пониженная температура. Источником инфекции являются компосты, рассадные смеси, недостаточно продезинфицированные грунты, растительные остатки, а также семена, где патоген находится в состоянии глубокого покоя. Причиной заболевания являются в основном фитотоксичные выделения возбудителя заболевания - несовершенного гриба F. oxysporum, вызывающие нарушения физиологического гомеостаза растений. Реже наблюдается трахеомикозная закупорка сосудов проводящей системы, приводящая к увяданию и гибели растений из - за нарушений водного обмена. (Будынков Н.И. и др., 1999; На-стенко Н.В. и др., 1994; Юрина О.В., 1986).

Традиционным методом селекции огурца на повышенную устойчивость к фузариозу является отбор устойчивых растений из гибридов и сортов в фазе первого настоящего листа на искусственном инфекционном фоне. Этот метод хорошо себя зарекомендовал, но он остается трудоемким и длительным.

Одним из путей решения этой проблемы является получение растений

- регенерантов, характеризующихся повышенной устойчивостью к фузариозному увяданию. Их создание возможно с использованием методов биотехнологии.

Исходя из вышеописанных проблем, целью исследований являлось усовершенствование методов in vitro применительно к культуре огурца для повышения эффективности селекционного процесса этой культуры и создания форм, характеризующихся повышенной устойчивостью к фузариозу.

Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:

- оптимизировать факторы, влияющие на морфогенетическую способность эксплантов огурца;

- разработать селективные условия для создания in vitro тканевых культур, устойчивых к фильтрату культуральной жидкости (ф.к.ж.) гриба Fusarium oxysporum и фузариевой кислоте (ф.к.);

- усовершенствовать элементы методики экспресс-оценки огурца на устойчивость к фузариозу, основанные на проращивании семян на ф.к.ж. гриба F. oxysporum и культивировании проростков in vitro на селективных средах, содержащих ф.к.ж. гриба F. oxysporum;

- оценить полученные от гибридов и линий формы огурца на устойчивость к фузариозу на искусственном инфекционном фоне с использованием традиционных методов.

Объект исследований - методы культуры ткани и органов в селекции огурца и методы селекции на устойчивость к фузариозу.

Предмет исследований - каллус, почки, побеги, сегменты растений, растения - регенеранты, семена огурца.

Научная новизна работы. Усовершенствована методика экспресс-оценки огурца на устойчивость к фузариозу, основанная на культивировании семян и растений на ф.к.ж. и селективной среде, содержащей ф.к.ж. гриба F. oxysporum в концентрации 10 % в условиях in vitro, позволяющая в течение 12 и 14 суток оценить селекционный материал и выделить образцы с повышенной устойчивостью к фузариозу.

Усовершенствован метод клеточной селекции in vitro, основанный на ступенчатом культивировании эксплантов и трансплантов огурца на селективной среде, содержащей ф.к.ж. гриба F. oxysporum в концентрации 10 % и на среде без селективного фактора, позволяющий получать каллусные линии растения огурца с повышенной устойчивостью к фитопатогену.

Оптимизированы условия получения растений-регенерантов огурца. Подобран режимы стерилизации семян и сегментов растений для введения в культуру in vitro. Определено соотношение фитогормонов в питательной среде для культивирования эксплантов и трансплантов.

Практическая ценность работы состоит в том, что оптимизирован процесс получения растений - регенерантов огурца in vitro на основе верхушечных почек, гипокотильных сегментов и каллуса. Получены растения - регенераты, характеризующиеся повышенной устойчивостью к фузариозу. Разработаны и опубликованы методические рекомендации «Получение растений огурца с повышенной устойчивостью к фузариозному увяданию методами in vitro» (2006 г.).

Обоснование и достоверность научных положений. Исследования выполнены по методикам, рекомендованным научными учреждениями страны. Все выводы и предложения подтверждены экспериментальными исследованиями, статистической обработкой полученных данных.

Апробация работы. Основные результаты экспериментальной работы по диссертации, выводы и предложения были доложены или представлены на III Международной конференции, посвященной памяти Б.В. Квасникова (Москва, 2003), Международной научно - практической конференции «Биотехнология овощных, цветочных и малораспространенных культур» (Москва, 2004), Международной научно - практической конференции «Проблемы научного обеспечения овощеводства юга России» (Краснодар, 2004), III Московском международном конгрессе «Биотехнология: состояние и перспективы развития» (Москва, 2005), Всероссийской научно-практической конференции «Биотехнология как инструмент сохранения биоразнообразия растительного мира» (Волгоград, 2006).

Основные положения диссертации, выносимые на защиту:

- элементы технологии получения растений-регенерантов огурца в условиях in vitro;

- система селективных условий для создания in vitro тканевых культур, устойчивых к ф.к.ж. гриба F. oxysporum и ф.к.;

- усовершенствованный метод экспресс-оценки огурца на устойчивость к фузариозу.

Публикации результатов исследований.

По результатам исследований по теме диссертации опубликовано 8 работ. Объем и структура диссертации. Диссертационная работа состоит из введения, 3 глав, выводов, предложений для использования в селекционной практике, списка использованной литературы, содержащего 155 наименований, в том числе 37 иностранных авторов и приложений.

Заключение диссертации по теме «Селекция и семеноводство», Ткачева, Анна Анатольевна

выводы

1. Разработаны элементы технологии получения растений-регенерантов огурца в условиях in vitro, включающие оптимизацию условий стерилизации, выбор экспланта, усовершенствованную систему регенерации.

2. Стерилизация сегментов растений и семян, полученных in vivo, раствором гипохлорита натрия в концентрации 1% в течение 10 и 15 минут позволяет получать 85,0 - 97,5% стерильных эксплантов.

3. Культивирование тканей на среде MS, содержащей сахарозу в концентрации 30 г/л, агар -7 г/л и фитогормоны: 6-БАП - 0,1мг/л, а - НУК - 0,1 мг/л, сопровождается индуцированием геммогенеза у 54,2 - 75% эксплантов и трансплантов. Дальнейшее культивирование почек на аналогичной среде приводит к образованию жизнеспособных побегов, культивирование которых на безгормональной среде сопровождается хорошим укоренением (72,0 -88,0 %).

4. Разработана система селективных условий для получения in vitro растений - регенерантов с повышенной устойчивостью к фильтрату культуральной жидкости гриба F. oxysporum и фузариевой кислоте, предусматривающая чередование культивирования тканей на селективной и неселективной средах.

5. Культивирование морфогенного каллуса на среде MS, содержащей сахарозу в концентрации 30 г/л, агар - 7 г/л, 6 - БАП - 0,1 мг/л, а - НУК - 0,1 мг/л и фильтрат культуральной жидкости в концентрации 10% или фузарие-вую кислоту в концентрации 10 мг/л в течение 3-х пассажей, позволяет получать растения-регенеранты огурца с повышенной устойчивостью к фуза-риозному увяданию.

6. Усовершенствованы элементы методики экспресс-оценки огурца на устойчивость к фузариозу, основанные на проращивании семян на ф.к.ж. гриба F. oxysporum и культивировании растений in vitro на селективных средах, содержащих ф.к.ж. гриба F. oxysporum в концентрации 10 %. Устойчивость растений огурца, полученная при оценке на искусственном инфекционном фоне положительно коррелирует с устойчивостью, полученной в лабораторных условиях in vivo (г = 0,96), а также со всхожестью семян (г = 0,66 - 0,82) и длиной корней (г = 0,80 - 0,92) при оценке in vitro.

7. Проведение отборов на селективных фонах сопровождается повышением устойчивости селектируемого материала к фитопатогену (средний балл поражения снизился с 2,4 - 2,6 до 1,1 - 1,4) и снижением уровня образования фенолов (при двукратном отборе суммарное содержание фенольных соединений уменьшилось на 36 % - 44 %).

8. Усовершенствованные элементы методики экспресс - оценка позволяют в 2,1 - 2,5 раза сократить время необходимое для оценки селекционного материала и снизить расход семенного материала.

ПРЕДЛОЖЕНИЯ К ИСПОЛЬЗОВАНИЮ В СЕЛЕКЦИОННОЙ ПРАКТИКЕ И ПРОИЗВОДСТВЕ

1. Для получения растений-регенерантов огурца, рекомендуется осуществлять культивирование эксплантов и трансплантов на питательной среде MS, содержащей сахарозу в концентрации 30 г/л, агар - 7 г/л, 6 - БАП, а -НУК в концентрации 0,1 мг/л. Сегменты растений и семена, полученные in vivo, стерилизовать раствором гипохлорита натрия в концентрации 1% в течение 10 и 15 минут;

2. Для проведения клеточной селекции и получения растений с повышенной устойчивостью к фузариозу рекомендуется чередование культивирования каллуса на селективной и неселективной средах. Концентрация селективного агента в среде составляет: для фильтрата культуральной жидкости 10%, для фузариевой кислоты -10 мг;

3. Для проведения оценки огурца на устойчивость к F. oxysporum рекомендуется культивировать семена на среде или проращивать их на фильтровальной бумаге, содержащих фильтрат культуральной жидкости в концентрации 10%.

Список литературы диссертационного исследования кандидат сельскохозяйственных наук Ткачева, Анна Анатольевна, 2007 год

1. Аврова, А.О. Физиолого биохимические особенности взаимодействия томатов с Altemaria solani и селекция in vitro на устойчивость к альтернариозу: автореф. дисс. канд. биол. наук: ВИЗР, 1994 - 18 с.

2. Анненков, Б.Г. Клеточно тканевая культура огурца / Б.Г. Анненков, А.И. Ступина // Сиб. Вестник с. - х. Науки, 1997. - N 3 - 4. - С. 14 - 20.

3. Балашова, Н.Н. Токсины фузариума в культуре in vitro / Н.Н. Балашова, О.Б. Дараков, Н.Е. Гордей, А.И. Суржиу // Изв. АН МССР. Сер. биол. и хим. Наук, 1986. № 5. - С. 3 - 6.

4. Белякова, Г.А. Токсические метаболиты грибов и неспецифические ми-тотоксины / Г.А. Белякова, JI.M. Левкина // Миколог, и фитопатол, 1992. Т. 26. - Вып. 3. - С. 183 - 188.

5. Белякова, Г.А. Токсичность КФ грибов, вызывающих пятнистость на хлопчатнике / Г.А. Белякова, Б.С. Ермолинский, С.И. Свиридов // Вестник Московского ун-та, 1991. -№ 4. С. 56 - 61.

6. Берестецкий, О.А. Определение фитотоксичной активности культур микросеопических грибов / О.А. Берестецкий // Методы экспериментальной микологии. Киев, 1973. - С. 165 - 175.

7. Беттхер, И. Методы определения болезней и вредителей сельскохозяйственных растений / И. Беттхер, Т. Ветцель, Ф.В. Древе, X. Кеглер, К. Наумани, Б. Фрайер, К. Фрауэнштайн, Э. Фукс // Москва: Агропромиз-дат, 1987.-е. 79-130

8. Билай, В.И. Фузарии / В.И. Билай // Наукова думка. Киев: 1977. - 360 с.

9. Билай, В.И. Основы общей микологии / В.И. Билай // Вища школа. -Киев: 1986. - 14 с.

10. Бирюкова, Н.К. Простой хороший огурец / Н.К. Бирюкова, В. Леунова // М. Россия молодая, 1996. № 2. - С. 91 - 92.

11. Бирюкова, Н.К. Перспективные гибриды огурца селекции ВНИИО / Н.К. Бирюкова // М.: Мытищи, Семеновод, 2001.

12. Боровков, А.В. Метаболиты штаммов Fusarium oxysporum / А.В. Боровков, А.О. Барестецкий // Микология и фитопатология, 1983. т. 17. -вып. 4. - С. 349 - 358.

13. Будынков, Н.И. Фузариозное увядание огурца в защищенном грунте / Н.И. Будынков, Е.Ф. Никифорова, В.Н. Юваров // М.: Гавриш, 1999. N 6.-С. 16-17.

14. Бунин, М.С. Новые овощные культуры России / М.С. Бунин. М.: ФГНУ «Росинформагротех», 2002. - С. 190 - 208.

15. Бутенко, Р.Г. Клеточная селекция картофеля / Р.Г. Бутенко, JI.M. Хромова, Г.А. Седнина // Сельскохоз. Биология / М., 1983. № 11. - С. 347 -352.

16. Бутенко, Р.Г. Культура изолированных протопластов, клеток и тканей в решении задач физиологии растений / Бутенко Р.Г. // Новые направления в физиологии растений / М., 1985. С. 16 - 32.

17. Бутенко, Р.Г. Методическими указаниями по получению вариантных клеточных линий и растений у разных сортов картофеля / Р.Г. Бутенко, JI.M. Хромова, Г.А. Седнина // М., 1984.

18. Бутенко, Р.Г. Биотехнология растений: культура клеток / Р.Г. Бутенко // М.: Агропромиздат, 1989. 123 с.

19. Бутенко, Р.Г. Клеточная инженерия / Р.Г. Бутенко, М.В. Гусев, А.Ф.Киркин // Биотехнология / М.: Высшая школа, 1987. 128 с.

20. Бутенко, Р.Г. Биотехнология клеток высших растений in vitro и биотехнологии на их основе / Р.Г. Бутенко // М., ФБК Пресс, 1999.-159 с.

21. Бутенко, Р.Г. Культура изолтрованных тканей и физиология морфогенеза / Р.Г. Бутенко // М., 1964.

22. Вавилов, Н.И. Проблемы происхождения, географии, генетики, селекции растений, растениеводства и агрономии / Н.И. Вавилов // Избр. тр. /М., 1965. т. V.- 786 с.

23. Ван дер Планк Я. Проблемы иммунитета культурных растений / Ван дер Планк Я // М.: Колос, 1972. 254 с.

24. Ван дер Планк Я. / Проблемы иммунитета культурных растений // М.: Колос, 1963 . 254 с.

25. Васильев, С.В. Практические аспекты применения достижений биотехнологии в рстениеводстве / С.В. Васильев // Рекомбинационная селекция растений Сибири / Новосибирск, 1989. С. 92 - 100.

26. Вердеревский, Д.Д. Пути использования иммунитета растений / Д.Д. Вердеревский // Селекция и семеноводство, 1968. 3. - с. 12 -13.

27. Германович, С.Т. Отбор клеточных линий клевера лугового, устойчивых к КФ Fusarium oxysporum / С.Т. Германович // Материалы конф. Молодых ученых и аспирантов / Новые идеи в растениеводстве, и пути их реализации / М., 1991.- С. 90-91.

28. Герматюк, Г.Т. Селекция и семеноводство овощных и плодовых культур / Г.Т. Герматюк, И.А. Шевцов, В.А. Кравченко, В.П. Роенко, A.M. Молоцкий // Киев, 1989. 318 с.

29. Гешеле, Э.Э. Основы фитопатологической оценки в селекции растений / Э.Э. Гешеле // М.: Колос, 1978. 208 с.

30. Гиренко, М.М. Цели и методы селекции зеленных и пряно вкусовых овощных культур / М.М. Гиренко, Ю.И. Мухонова // Бюллетень ВИР, Д., 1985.- вып. 48. - С. 17-19.

31. Гирко, B.C. Оценка устойчивости к действию КФ грибного патогена в культуре незрелых зародышей / B.C. Гирко, К.Г. Волощук // С. х. биология. - сер. Биология растений / 1993. - № 9. - С. 62 - 70.

32. Гостимский, С.А. Генетическая изменчивость клеток растений при культивировании / С.А. Гостимский // Успехи совр. Генетики, 1977. № 14 С. 48-63.

33. Гладков, Е.А. Получение газонных трав, толерантных к засолению и ионам меди, методами биотехнологии: автореф. дисс. . канд. биол. наук: МГУ, 2003. 20 с.

34. Глеба, Ю.Ю. Станет ли клеточная инженерия новой технологией в селекционном процессе? / Ю.Ю. Глеба // Импакт: наука и общество, 1987.- № 2. С. 59-67.

35. Гусева, Н.Н. Продолжая дело великого ученого / Н.Н. Гусева // Защита растений, 1987. № 12. - С. 16.

36. Данлади Дада Кута. Маркеры сортовой устойчивости к пирикуляриозу в каллусной культуре риса: автореф. диссерт. канд. биол. наук: М., 2000.-21 с.

37. Данлади Дада Кута. Маркеры сортовой устойчивости к пирикуляриозу в каллусной культуре риса: автореф. диссерт. канд. биол. наук: М., 2000.-21 с.

38. Диксон, Р.А. Изолирование и поддержание каллусных и суспензионных культур клеток / Р.А. Диксон // В кн.: Биотехнология растений: культура клеток. Пер. с англ. В.И. Негрука - под ред. Р.Г. Бутенко. - М.: М.В.О. Агропромиздат, 1989. - С. 33 - 51.

39. Доспехов, Б.А. Методика полевого опыта (с основами стат. обработки результатов исследований) / Б.А. Доспехов // М.: Колос, 1979. 416 с.

40. Дудка, И.А. Методы экспериментальной микологии / И.А. Дудка, С.П. Вассер // Под ред. В.И. Билай. Киев: Наукова думка, 1982. - 364 с.

41. Запрометов, М.Н. Фенольные соединения / М.Н. Запрометов // М.: Наука, 1993.-272 с.

42. Запрометов М.Н. Колориметрическим метод с использованием реактива Фолина Дениса / М.Н. Запрометов // М.: Наука, 1974.

43. Иванова, О.С. Клеточная селекция на инфекционном фоне для получения фузариозоустойчивых форм томатов / О.С. Иванова // Материалы Всесоюз. конф. по с/х биотехнологии / Целиноград, 1991. С. 97 - 98.

44. Иванова, Н.Г. Разработка селективного фактора для проведения клеточной селекции на устойчивость к Corynebanium sepedorium / Н.Г. Иванова // Использование клеточной технологии в селекции картофеля /М., 1987-С. 26-28.

45. Игнатова, С.А. Культура in vitro биотехнологический прием для создания фузариозоустойчивых форм люцерны / С.А. Игнатова, С.Ф.

46. Лукьянюк, Т.К. Овсюк // Тез. докл. Всесоюз. Конф. Применение биотехнологий в животноводстве, растениеводстве и ветеринарной медицине/М., 1988.-С. 153 155.

47. Ильина, П. Р. Повышение устойчивости селекционных сортов льна-долгунца к фузариозу в процессе первичного семеноводства / П.Р. Ильина // Тр. ВНИИЛ. вып. 5. - 1958. - с. 33

48. Калашникова, Е.А. Клеточная селекция растений на устойчивость к грибным болезням: Дис. Док. Биол. наук: М.: ТСХА, 2003. 279 с.

49. Калашникова, Е.А. Клеточная селекция пшеницы на устойчивость к септориозу / Е.А. Калашникова // Сельскохозяйственная биотехнология /М.: Воскресенье, 2000. Т. -1. - С.61 - 71.

50. Катаева, Н.В. Клональное микроразмножение растений / Н.В. Катаева, Р.Г. Бутенко // М.: Наука, 1983. 97 с.

51. Кирай, 3. Методы фитопатологии / 3. Кирай, 3. Клемент // М.: Колос, 1974.- 145 с.

52. Кирай, 3. Результаты и перспективы использования биотехнологии в растениеводстве и защите растений / 3. Кирай, 3. Барабаш // Агропром. 1990.-№3.-с. 7-10.

53. Кирюхина, Р.И. Интенсивное растениеводство: проблемы иммунитета / Р.И. Кирюхина // Вестник с. х. науки, 1987. - № 5. - 36 с.

54. Кирьян, И.Г. Клеточная селекция клевера лугового на устойчивость к фузариозу / И.Г. Кирьян, В.В. Мазин // Тез. докл. 1 Всесоюзного симпозиума «Новые методы биотехнологии растений» / Пущино, 1991.

55. Коновалов, Ю.Б. Селекция растений на устойчивость к болезням и вредителям / Ю.Б. Коновалов // М.: Колос, 1999. 135 с.

56. Котляров В.В. Устойчивость сортов пшеницы к фузариозу и методы ее определения / В.В. Котляров // Селекция и семеноводство, 1986. № 6. -51 с.

57. Крылова, Т.В. Вирулентность местной популяции возбудителя ржавчины льна долгунца / Т.В. Крылова // Сб. трудов ВНИИЛ, 1994. - вып.28.29.-С. 47-56.

58. Куку шина, JI.H. Изучение оценки регенерантов картофеля по устойчивости к фитофторе in vivo и in vitro / J1.H. Кукушина, A.A. Дорошенко // Использование клеточных технологий в селекции картофеля / М., 1987.-С. 52-56.

59. Кунах, В.А. Изменчивость растииельного генома в процессе дедиффе-ренцировки и каллусообразования in vitro / В.А. Кунах // Физиология растений, 1999. т. 46. - № 6. - С. 919 - 929.

60. Курчакова, J1.H. Использование токсичности культуральной жидкости гриба Fusarium для отбора здоровых каллусов льна / J1.H. Курчакова // Селекция, семеноводство и агротехника возделывания льна долгунца /Торжок: ВНИИЛ, 1991.

61. Кучеренко, Л.А. Подходы к разработке технологии массовой регенерации растений in vitro / Л.А. Кучеренко // Биология культивируемых клеток и биотехнология растений / М.: Наука, 1991. С. 232 - 242.

62. Лейке, Г. Использование культуры тканей и органов в селекции растений и производстве посадочного материала / Г. Лейке, Р. Лабес, К. Эр-тель, М. Петерсдорф // Пер. с нем. и предисл. Ю.Л. Гужова / М.: Колос, 1980. 77 с.

63. Лети Джое. Получение форм пшеницы (Triticum aestivum) устойчивых к грибу Septoria nodorum в условиях in vitro: автореф. дис. канд. биол. наук: М., 1998.-22 с.

64. Лети Джое, Влияние гриба S. nodorum и его метаболитов на прорастание семян пшеницы / Лети Джое, Е.А. Калашникова // Известия ТСХА, 1996.-Вып. 4.-С. 150-155

65. Литвинов, С.С. Сорта и гибриды овощных, бахчевых и цветочныхкультур селекции ВНИИО / С.С. Литвинов // Каталог/ М., 2002 99 с.

66. Лихачев, А.Н. Использование жидких питательных сред для получения моноспоровых культур грибов / А.Н. Лихачев // Микология и фитопатология, 1994. Т. 28. - Вып. 5. - С. 14 -16.

67. Лутова, Л.А. Каллусо и побегообразование у различных форм гороха Pisum sativum L. в условиях in vitro / Л.А. Лутова, Е.К. Забелина // Генетика, 1988. - т. XXIV. - № 9. - С. 1632 - 1640.

68. Маркова, Н.В. Методы in vitro для ускорения м облегчения селекционной работы с растениями огурца (Cucumis sativus) / Н.В. Маркова: ав-тореф. дисс. канд. биол. наук: НИИОХ, 1991 26 с.

69. Маруненко, И.М. Клеточная селекция картофеля на устойчивость к патогенам / И.М. Маруненко, А.А. Кучко // Междунар. Конф. "Биология культивируемых клеток и биотехнология" / Новосибирск, 1988. Ч. 1. 169 с.

70. Маруненко, И.М. Отбор генотипов, устойчивых к мокрым гнилям картофеля, методами клеточной селекции / И.М. Маруненко // Создание ииспользование исходного материала в селекции картофеля / Киев, 1992. -С. 62-70.

71. Масленников, С.Е. Получение устойчивых к корневым гнилям растений люцерны с использованием методов культуры каллусов и клеток / С.Е. Масленников // Соврем, достижения биотехнологии / Ставрополь, 1995.-С. 24-25.

72. Мезенцева, О.Ю. Использование тканевых и клеточных культур в селекции на устойчивость к фитопатогенам / О.Ю. Мезенцева // Селекция и семеноводство, 1990. № 4. - С. 59 - 62.

73. Мезенцева, О.Н. Получение клеточных линий пшеницы, устойчивых к токсинам фузариоза / О.Н. Мезенцева // Доклады научно практич. Конф. "Ученые Нечерноземья - развитию сельского хозяйства" / М., 1991.-С. 179- 183.

74. Мезенцева, О.Н. Создание исходного селективного материала люцерны и пшеницы устойчивых к фузариозу методом биотехнологии: автореф. дис. канд. биол. наук: М.: ТСХА, 1992. 15 с.

75. Миллер, С.А. Методы культуры тканей в фитопатологии: грибы / С.А. Миллер // Биотехнология растений: культура клеток. Пер. с англ. В.И. Негрука. - Под ред. и с предисл. Р.Г. Бутенко / М.: ВО Агропромиздат. 1989.-С. 259-274.

76. Монастырский, О.А. Токсины фитопатогенных грибов / О.А. Монастырский // Защита и карантин растений, 1996. № 3. - С. 5 - 7.

77. Муромцев, Г.С. Основы сельскохозяйственной биотехнологии / Г.С. Муромцев, Р.Г. Бутенко, М.И. Прокофьев // М.: Агропромиздат, 1990. -384 с.

78. Настенко, Н.В. Разработка способа предварительной оценки растений огурца на устойчивость к фузариозу / Н.В. Настенко, Н.А. Шмыкова, Н.Н. Балашова, В.П. Кушнерева // 1994. С. 74 - 77.

79. Нгуен Хонг Минь Селекция in vitro на устойчивость к Fusarium oxysporum f. Sp. Lycopersici у томатов: автореф. дисс. канд. биол. наук /1. Минск, 1991.-21 с.

80. Никуленко, Т.Р. Токсины фитопатологических грибов и их роль в развитии растений / Т.Р. Никуленко, Д.И. Чкаников // М.: Агропромиздат, 1987.

81. Озерецковская, O.J1. Проблемы специфического фитоимунитета / O.J1. Озерецковская //Физиология растений, 2002 т.49 - № 1 .-С. 1-7.

82. Основные результаты научной деятельности ВНИИ фитопатологии за 1996-2000 гг.

83. Плащев, В.М. Клеточная селекция клевера и люцерны на устойчивость к фузариозному увяданию / В.М. Плащев // Гаметофитная и защитная селекция растений / Кишенев, 1987. С. 176 - 178.

84. Поляков А.В. Усовершенствование селекционного процесса льна-долгунца (Linum usitatissimum L.) на основе использования биотехнологических методов: автореф. дисс. д-ра биол. наук / РАСХН, 1998. -50 с.

85. Поляков, А.В. Биотехнология в селекции льна / А. В. Поляков // Тверь: Формат, 2000. 180 с.

86. Попова, Т.Т. Вопросы методики выявления, создания и повышения болезнеустойчивости льна / Т.Т. Попова // Труды ВНИИЛ / Калинин: ВНИИЛ, 1958.-Вып

87. Простакова, Ж.Г. Воздействие токсина Fusarium oxysporum на прорастание пыльцы сои / Ж.Г. Простакова, А.И. Бронштейн, JI.H. Показань-ева // М.: МСХА, 1991, С. 78 87.

88. Расколиева, В.А. Использование методов биотехнологии в получении исходных форм моркови, устойчивых к патогенному грибу Alternaria radicina / М., Dr. Et. Е.: автореф. дис. канд. биол. наук / М.,2001 -18 с.

89. Раскалиева, В.А. Использование методов биотехнологии в получении форм моркови, устойчивых к альтернариозу / В.А. Раскалиева, Е.А. Калашникова // Сельскохозяйственная биотехнология / М.: Воскресенье, 2001.-т. 2.- С. 81-91.

90. Родева, В. Биологичен эфект на културални филтрати от различии изо-пати на Alternaria solani върху растение доматени растение in vitro / В. Родева, И. Станчева // Биотехнология, 1990. Т. 4. - № 3/4. - С. 27 - 30.

91. Рубин, Б.А. Биохимия и физиология иммунитета растений / Б.А. Рубин, Е.В. Архиховская, В.А. Аксенова // М.: Высшая школа, 1975.

92. Рудаков, O.JI. Новая форма проявления фузариозного увядания огурца в защищенном грунте / O.J1. Рудаков, Н.И. Будынков, Е.Ф. Никифорова // АГРО XXI, 1998. -N 10. С. 9 -10.

93. Семенов, А.Я. Инфекция семян хлебных злаков / А.Я. Семенов // М.: Колос, 1984.-94 с.

94. Сидоров, В.А. Биотехнология растений / В.А. Сидоров // Клеточная селекция / Киев.: Наукова Думка, 1990. 360 с.

95. Симонян, Т.Г. Исследование механизмов действия токсических веществ из гриба Bipolaris sorokihiaki на ункционирование фотосинтетического аппарата пшеницы / Т.Г. Симонян, Т.Ш. Адешвили // Тез. докл.

96. Всесоюз. Научно-техн. Конф. "Применение биотехнологии в животноводстве, растениеводстве и ветеренарной медецине" / М., 1988. С. 153 -155.

97. Солодкая, JI.A. Методы создания форм клевера лугового с повышенной устойчивостью к раку / JI.A. Солодкая, Е.Ю. Новоселова // Сборн. Науч. Трудов ВНИИ кормов, 1989. Вып. 42. - С. 57 - 65.

98. Турбин, Н.В. Методические указания по селекции и семеноводству огурцов в защищенном грунте / Н.В. Турбин // М., 1976. С. 17-21.

99. Фадеев, Ю.Н. Действие токсической фракции веществ гриба на хлоропласта яровой пшеницы / Ю.Н. Фадеев, Т.Ш. Адеишвили // Достижения науки и техники АПК, 1990. № 1. - С. 19 - 20.

100. Фролова, JI.B. Динамика клеточных популяций в культуре ткани Vicia tabacum В кн.: Культура клеток растений / JI.B. Фролова, З.Б. Шамина //Труды II Всесоюзн. Конф./Киев:Наук. Думка, 1978.-С.27-32.

101. Хотин, Ю.А. Сохранение инфекционных свойств возбудителя ризокто-ниоза риса при культивировании на искусственных питательных средах / Ю.А. Хотин, Т.М. Полякова // Микология и фитопатология, 1991. Т. 25.-Вып. 1.-С. 80-84.

102. Шамина, З.Б. Генетическая изменчивость растительных клеток in vitro -В кн.: Культура клеток растений / З.Б. Шамина // Труды II Всесоюзн. Конф. / Киев: Наук. Думка, 1978. С. 80 - 93.

103. Шаяхметов, И.Ф. Особенности регенерации растений пшеницы из каллусной ткани выращенной на фоне фитотоксинов / И.Ф. Шаяхметов // 1 симпозиум Новые методы биотехнологии растений / Пущино, 1991.

104. Шаяхметов, И.Ф. Биологически активные метаболиты из культураль-ного фильтрата Fusarium oxysporum в связи с клеточной селекции злаков на устойчивость к фитопатогенам / И.Ф. Шаяхметов // Микология и фитопатология, 2001. - № 6. - С. 13 -14.

105. Шаяхметов, И.Ф. Особенности каллусообразования и регенерации растений в культуре незрелых зародышей яровой твердой пшеницы / И.Ф. Шаяхметов, Ф.К. Иштерякова, М.М. Хабирова, // Сельскохозяйственная биология, 1988. № 4. - С. 125 - 130.

106. Шаяхметов И.Ф., Биотехнология растений / И.Ф. Шаяхметов // УФА: Рио Баш ГУ, 2004. С. 6 - 99.

107. Шевелуха, B.C. Новая биотехнология в селекции и растениеводстве / B.C. Шевелуха // Вестник с / х науки, 1986. № 2. С. 25 31.

108. Шевелуха, B.C. Сельскохозяйственная биотехнология / B.C. Шевелуха //Москва, 2003.- 470 с.

109. Шевелуха, B.C. Сельскохозяйственная биотехнология / B.C. Шевелуха //Москва, 2003.- 470 с.

110. Шевелуха, С. Рост растений и его регуляция в онтогенезе / B.C. Шевелуха // М.: Колос, 1992. 594 с.

111. Шевелуха, B.C. Сельскохозяйственная биотехнология / B.C. Шевелуха, Е.А. Калашникова, Е.С. Воронин // М.: Высшая школа, 1994.-18 с.

112. Шевченко, Ф.П. Повышение устойчивости сортов к болезням / Ф.П Шевченко // Селекция и семеноводство, 1950. 8. - С. 19 - 20.

113. Шкларов, А.П. Условия внешней среды и урожайность огурца в открытом грунте / А.П. Шкларов, // "Овощеводство". Сборник научных трудов/Минск, 1998.-вып. 10.- С. 107- 109.

114. Юрина, О.В. Селекция огурца на устойчивость к болезням / О.В. Юри-на // Плодоовощное хозяйство, 1986. Т - 3. - С. 36 - 37.

115. Ячевский, А.А. Перспектива фитопатологических исследований в отношении болезней льна / А.А. Ячевский // Сб. трудов I совещания по селекции льна и конопли / JL, 1929.

116. Allard, R.W. Principles of Plant Breeding / R.W. Allard // John Wilei. New York, 1960.-P. 11-50.

117. Bar, H. Untersuchungen iiber die Wirkungsweise der Fusarinsaure / H. Bar // Phytopathol. Z., 1963. 48. - P. 149 - 177

118. Barakat, M.N. Plant regeneration from protoplast-derived tissues of Linum usitatissimum L. (flax) / M.N. Barakat, E.C. Cocking // Plant Cell Rep, 1985.-V. 4.-P. 164- 167.

119. Barker, H.D. Study of wilt resistance in Flax / H.D. Barker // Minn. Apr. Exnt. Sta Tech. Bui. 20,1923

120. Briggs F.N. / F.N. Briggs, P.F. Knowles // 1967

121. Daub, M.E. Tissue culture and the selection of resistance to patogens / M.E. Daub // Ann. Rev. Phitopathol, 1986. V. - 24. - P. 156 - 186.

122. Deadon, W.R. Expressed resistance to black shankamong tobacco callus cultures / W.R. Deadon, G.J. Keyes, G.B. Collins // Theer. And Appl. Genet., 1982.-V.-63. P. 65-70.

123. Durin, R.D. The biochemistry of fungal and bacterial toxins and their modes of action / R.D. Durin // Biochemistry Plant Pathology. Ed J. A. Callow, 1983.-P. 137- 162.

124. Foroughi Wehr, B. Pflanzenshuts / B. Foroughi Wehr, K. Stalle, D. Nachr // 1985.-V. 37.-P. 170- 173.

125. Johnson R., / R. Johnson, C.N. Law //1975

126. Haberlach, G.T. Modification of Disease Resistance of Tobacco Callus Tissues by Cytokinins / G.T. Haberlach, A.D. Budde, L. Sequeira, J.P.

127. Helgeson // Plant Physiol, 1978. V. 62. - № 6. - P. 522 - 525.

128. Hartman, G.L. Selection of alfalfa cell lines and regeneration of plant resistant to the toxin (S) produced by Fusarium oxsisporum / G.L. Hartman, T.Y. McCoy // 1984. vol. 34. - 31. 2. - P. 183 - 194.

129. Hedin, P.A. Biotechnology for Crop Protection / P.A. Hedin, J.J. Menn // Washington. Amer. Chem. Soc, 1988. 379 p.

130. Yoder, O.C. Toxins in Plant Disease / O.C. Yoder // New York, 1981. P. 45 -77.

131. Lupotto, E. Z. Pflanzenphysiology / E. Z. Lupotto // 1983. V. 111. -.95p.

132. Ludwig, R.A. Toxin production by Helminthosporium sativum P.K. et B. fnd its significance in disease development / R.A. Ludwig // Can. J, 1957. -Vol. 35.-№3.-P. 291 -304.

133. Mirocha, T.J. Mycotoxins ansthe Fungi that produce them / T.J. Mirocha // (Proc. of Amer. Phytophthora., 1986.

134. McCoy, T.J. Cytogenetic analysis of plants regenerated from oat (Avena sativa) tissue cultures: high frequency of partial chromosome loss / T.J. McCoy, R.L. Phillips, H.W. Rines // Can. J. Genet. Cytol, 1982. V. 24. - P. 37-50.

135. Murashige Т., Skoog F. A. revised medium for rapid growth and biossays with tobacco tissue culture // Physiol. Plant, 1962. V. 15. - № 13. P. 473 -497.

136. Chawa H.S. Thea. Appl. Gen. / H.S. Chawa, G. Wenzel // 1987 v. 74. p. 841 -845.

137. Chawa H.S. Thea. Appl. Gen. / H.S. Chawa, G. Wenzel // 1987 v. 74. p. 841 -845.

138. Nichterlein, K. Genotypic and exogenous factors affecting shoot regeneration from anther callus of linseed (Linnum usitatissimum L.) / K. Nichterlein, H. Umbach, W. Friedt // Institute of Agronomy and Plant Breeding, Giessen. -1991.-P. 125 128.

139. Robinson R.A. / R.A. Robinson // 1976

140. Scowcroft, W.R. Use of Tissue Culture and Protoplasts in Plant Pathology / W.R. Scowcroft, P.F. Larkin, R. Brettell // Syndey, New York, 1983. P. 139- 162.

141. Chawa H.S. Thea. Appl. Gen. / H.S. Chawa, G. Wenzel // 1987 v. 74. p. 841 -845.

142. Smith, G.A. Biotechnology and Ecology of pollen / G.A. Smith // New York, 1986.-P. 83 -88.

143. Stakman E.C. / E.C. Stakman//1954

144. Toyoda, Y. Phytopathol / Toyoda Y., et. al. // Soc. Janan, 1984. V. 50. - P. 538 - 540.

145. Turner, W.B. Fungal metabolities / W.B. Turner // Lond., Acad. Press, 1971. P. 29-36.

146. Wheeler, H. Plant. Dis. Rep / H. Wheeler, A.S. Williams, L.G. Young // 1971.-vol. 55, 8.-P. 667-671

147. Van Der Plank J.E. / J.E. Van Der Plank //1963

148. Vocho, H. Induced mutations and genetic correlations between scab risistance and sole agronomic characters in wheat / H. Vocho, F. Hirai // GTh International Wheat Genetics Semposiun. Japan, 1983. - 39 p.