Молекулярные механизмы иммуномодулирующего действия кукумариозида А2-2 тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.01.04, кандидат наук Пислягин, Евгений Александрович

• Пислягин, Евгений Александрович
• кандидат наук
• 2013

Оглавление диссертации кандидат наук Пислягин, Евгений Александрович

ОГЛАВЛЕНИЕ

ОГЛАВЛЕНИЕ

1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

1.1. Биологическая активность и механизм действия тритерпеновых

гликозидов

1.1.1. Структура тритерпеновых гликозидов

1.1.2. Распространение тритерпеновых гликозидов

1.1.3. Биологическая активность тритерпеновых гликозидов

1.1.4. Физико-химические основы механизма цитотоксического и мембранолитического действия тритерпеновых гликозидов

1.1.5. Иммуномодулирующая активность тритерпеновых гликозидов голотурий

1.2. Р2Х рецепторы

1.2.1. Классификация пуринорецепторов

1.2.2. Строение Р2Х рецепторов

1.2.3. Физико-химические свойства Р2Х рецепторов

1.2.4. Распространение Р2Х рецепторов и их физиологическая роль

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. Кукумариозид Аг-2

2.2. Животные

2.3. Получение клеток

2.4. Определение жизнеспособности клеток

2.5. Определение цитотоксической активности

2.7. Измерение микровязкости мембран клеток

2.8. Измерение мембранного потенциала клеток

2.9. Связывание 3Н-кукумариозида Аг-2 с перитонеальными макрофагами мыши

2.10. Микроцитофлуориметрическая оценка транспорта Са2+ в клетках

2.11. Регистрация трансмембранных токов в клетках методом пэтч-кламп

■ 2.12. Иммуноцитохимическое исследование перитонеальных макрофагов

2.13. Исследование фармакокинетики кукумариозида Аг-2

2.14. МАЬОЫМв

2.15. МАП)1-ТОР МБ

к 2.16. Построение модели пространственной структуры тР2Х4 рецептора мыши и

I

\ кукумариозида Аг-2

2.17. Статистический анализ

3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

V г

3.1. Цитотоксическая активность кукумариозида Аг-2

3.2. Иммуностимулирующая активность кукумариозида Аг-2

3.3. Взаимодействие кукумариозида Аг-2 с мембранами иммунокомпетентных клеток

3.3.1. Влияние на микровязкость мембран лимфоцитов селезенки мыши

3.3.2. Связывание 3Н-кукумариозида Аг-2 с перитонеальными макрофагами мыши

3.3.3. Влияние кукумариозида Аг-2 на мембранный потенциал перитонеальных макрофагов мыши

3.4. Изучение влияния кукумариозида А2-2 на транспорт

Са в перитонеальных макрофагах мышей

3.5. Влияние кукумариозида Аг-2 на функционирование пуриновых рецепторов в макрофагах

3.6. Регистрация ионных токов в одиночной клетке

3.7. Типирование популяции перитонеальных макрофагов мыши, принимающих участие в Са2+ ответе на кукумариозид Аг-2

3.8. Компьютерное моделирование пространственной структуры комплекса кукумариозида Аг-2 с пуриновым рецептором Р2Х4

3.9. Исследование фармакокинетики кукумариозида Аг-2

3.9.1. Исследование фармакокинетического поведения кукумариозида Аг-2 в гомогенате селезенки мышей

3.9.2. Идентификация и количественное определение кукумариозида Аг-2 в гомогенате селезенки мыши

3.9.3. Исследование стабильности кукумариозида Аг-2 в тканях селезенки и оценка метаболических превращений

3.9.4. Оценка пространственного распределения кукумариозида Аг-2 методом МА1Л)1-1МБ

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМЫХ СОКРАЩЕНИЙ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Молекулярные механизмы иммуномодулирующего действия кукумариозида А2-2»

ВВЕДЕНИЕ

Тритерпеновые гликозиды голотурий изучаются на протяжении длительного времени. Установлено, что они обладают широким спектром биологической активности. Для этих соединений отмечены такие свойства, как антимикробная, хемопревентивная, иммуномодулирующая, иммуноадьювантная и противовоспалительная активности. Кроме того, тритерпеновые гликозиды обладают выраженной мембранолитической активностью, проявляющейся в микромолярном диапазоне концентраций.

Механизм мембранолитического действия этих соединений хорошо изучен и заключается в способности гликозидов изменять ионную проницаемость мембран клеток посредством взаимодействия со стеринами мембран (главным образом с холестерином) и формирования ионопроводящих структур в липидном матриксе. Вследствие образования ионных каналов и пор в мембранах нарушается ионная избирательность клеток и их ионный гомеостаз, усиливается выход из клеток жизненно важных компонентов и ингибируется ряд мембран-ассоциированных ферментов, что в итоге приводит к гибели клеток. Вероятно, что именно этим мембранотропным механизмом действия и обусловлены цитотоксическая, гемолитическая и противогрибковая активности тритерпеновых гликозидов.

В то же время известно, что в низких, нецитотоксических концентрациях, некоторые из этих соединений активируют целый ряд внутриклеточных процессов. Ранее было показано, что тритерпеновый гликозид кукумариозид Аг-2, выделенный из дальневосточной голотурии Cucumaria japónica, в наномолярных концентрациях обладает иммуностимулирующим действием, которое выражаются, главным образом, в активации клеточного звена иммунитета: усиливается адгезия, распластывание и подвижность макрофагов, усиливается фагоцитоз и формирование активных форм кислорода, увеличивается скорость пролиферации лимфоцитов, количество антител-образующих клеток селезенки, индуцируется синтез некоторых цитокинов. Введение препарата кумазид экспериментальным животным приводит к существенному увеличению их резистентности к различным патогенным инфекциям, к торможению роста некоторых видов опухолей и увеличению средней продолжительности жизни животных при облучении сублетальными дозами радиации. Результатом успешной работы ТИБОХ ДВО РАН в этом направлении является созданный на основе моносульфатированных тритерпеновых гликозидов голотурии Cucumaria japónica (главным образом, кукумариозида Аг-2) эффективный иммуностимулирующий препарат кумазид, предназначенный для профилактики и лечения иммунодефицитных состояний человека и прошедший все официальные доклинические испытания.

j*

Однако, несмотря на большое количество работ, связанных с изучением физиологической активности тритерпеновых гликозидов голотурий, механизм их иммуномодулирующего действия на клеточном и субклеточном уровне изучен недостаточно. Имеющиеся в литературе данные об иммуномодулирующей активности тритерпеновых гликозидов голотурий не дают четкого представления о молекулярных механизмах, лежащих в основе проявления ими стимулирующего эффекта. Практически полностью отсутствуют сведения о мембранных и внутриклеточных мишенях действия гликозидов, сигнальных путях и фармакокинетике этих соединений в органах-мишенях.

Целью исследования являлось выяснение молекулярных механизмов иммуномодулирующего действия и изучение фармакокинетического поведения тритерпенового гликозида кукумариозида Аг-2, выделенного из голотурии Cucumaria japónica.

В рамках поставленной цели предполагалось решить следующие задачи:

1. провести сравнительное изучение и установление концентрационных диапазонов цитотоксической и лизосомальной активности кукумариозида Аг-2 in vitro;

2. изучить взаимодействие кукумариозида Аг-2 с мембранами иммунокомпетентных клеток, включая исследование изменения микровязкости и мембранного потенциала под действием гликозида, а также определение мест связывания кукумариозида Аг-2 с биомембранами;

3. исследовать влияние кукумариозида Аг-2 на транспорт ионов кальция в иммунокомпетентных клетках и фармакологически определить природу рецепторов, ионных каналов и переносчиков, принимающих участие в Са2+ ответе клеток на действие гликозида;

4. провести иммуноцитохимическое исследование перитонеальных макрофагов, принимающих участие во взаимодействии с кукумариозидом Аг-2;

5. провести исследование фармакокинетического поведения кукумариозида Аг-2 в органе-мишени (селезенке мыши).

Основные положения, выносимые на защиту.

1. Кукумариозид Аг-2 в наномолярных концентрациях связывается с мембранами иммунокомпетентных клеток мыши и вызывает временное обратимое изменение микровязкости мембран и мембранного потенциала, сопровождающееся резким обратимым входом Са2+ в цитоплазму клеток из внеклеточной среды.

2. На мембранах макрофагов существует два сайта связывания кукумариозида Аг-2 (высокоаффинный и низкоаффинный), характеризующихся различными константами диссоциации.

2+

3. Пуринергические рецепторы Р2Х семейства (Р2Х1 и Р2Х4 типа), обеспечивающие Са проводимость в мембранах макрофагов и активацию иммунных клеток, являются

«i

¡

It,

Ifeiv't-' ■ o¿,\'v.<\v.<,;b'' \,;¡....., 'h.'iíjf

Я' J и" i

молекулярными мишенями действия кукумариозида Аг-2, который выступает в качестве аллостерического модулятора этих рецепторов.

4. При внутрибрюшинном способе введения мышам кукумариозид к.г-2 быстро достигает максимальной концентрации в органе-мишени (селезенке) и относительно быстро выводится, практически не претерпевая метаболические превращения. Гликозид локализуется, главным образом, в области серозной оболочки селезенки и, в меньшей степени, в центральной части органа.

Научная новизна. В ходе данной работы было впервые изучено взаимодействие тритерпенового гликозида кукумариозида Аг-2 с иммунокомпетентными клетками мыши. Показано, что в основе иммуномодулирующего действия исследуемого природного соединения лежит его способность взаимодействовать, прежде всего, с клеточными мембранами и изменять их физико-химические свойства. Впервые показано, что кукумариозид Аг-2 обратимо увеличивает микровязкость биомембран. Такое взаимодействие приводит к обратимому изменению мембранного потенциала, деполяризации биомембран и резкому обратимому увеличению концентрации ионов Са2+ в цитоплазме за счет его поступления из внеклеточного пространства. Впервые показано, что на мембранах макрофагов мыши существуют как минимум два сайта связывания кукумариозида Аг-2 (высокоаффинный и низкоаффинный), характеризующихся различными константами диссоциации. Впервые установлено, что одними из молекулярных мишеней действия кукумариозида Аг-2 являются мембранные пуринергические рецепторы Р2Х семейства (Р2Х1 и Р2Х4 типа), обеспечивающие Са проводимость в мембранах макрофагов и активацию клеток. Показано, что кукумариозид Аг-2 действует в качестве аллостерического модулятора пуриновых рецепторов. Связываясь с ними, гликозид усиливает ответ клеток на АТФ и частично снимает эффект десенсибилизации рецепторов. Установлено, что в перитонеальной полости мыши присутствует популяция крупных зрелых Р4/80+ макрофагов, характеризующихся наличием высокой плотности пуриновых рецепторов Р2Х1 и Р2Х4 типа. Очевидно, именно крупные Р4/80+ / Р2Х+ перитонеальные макрофаги принимают участие в Са2+ ответе на аппликацию кукумариозида Аг-2. Методами радиоспектроскопии, МА1Ю1-ТОР МБ и МАЬБЫМБ впервые изучены и определены фармакокинетические параметры поведения кукумариозида Аг-2 в селезенке мыши при внутрибрюшинном введении препарата. Обнаружено, что кукумариозид Аг-2 локализуется, главным образом, в области серозной оболочки селезенки и, в меньшей степени, в центральной части органа, где располагается красная и белая пульпа.

Практическая значимость. Полученные результаты вносят вклад в понимание молекулярных механизмов иммуномодулирующего действия тритерпенового гликозида кукумариозида Аг-2 и углубляют существующие представления о влиянии низкомолекулярных

<

% '

^пг-ч!" »/л и ' ^ > Ь А 7л'/¡, О -V - ?

биорегуляторов на клетки иммунной системы. Фундаментальные знания, полученные в ходе выполнения диссертационной работы, дают фармакодинамическую и фармакокинетическую характеристику кумазида и создают методологическую основу для изучения механизма действия новых лекарственных средств, созданных на основе тритерпеновых гликозидов голотурий.

Апробация работы. Материалы диссертации были представлены на VI Научно-практической конференции «Фундаментальная наука - медицине» (Владивосток, 2011), 9th 1ST Asia pacific meeting on animal, plant and microbial toxins (Владивосток, 2011), XIII и XIV Всероссийской молодежной школе-конференции по актуальным проблемам химии и биологии (МЭС ТИБОХ, 2011, 2012), II Международной конференции "Перспективные направления биомедицинских технологий" (г. Владивосток, 2012), Symposium on marine enzymes and polysaccarides (Нячанг, Вьетнам, 2012), 2nd Bi-Annual International Practical Cytometry Workshop (Москва, 2011), II Международной конференции "Перспективные направления биомедицинских технологий" (г. Владивосток, 2012), Международной конференции «Рецепторы и внутриклеточная сигнализация (Пущино, 2013), 2nd International workshop on marine bioresources of Vietnam (Ханой, Вьетнам, 2013), 38th FEBS Congress "Mechanisms in Biology" (Санкт-Петербург, 2013).

Личный вклад автора. Автором самостоятельно были проведены исследования цитотоксической и иммуномодулирующей активности кукумариозида Аг-2, изучено влияние гликозида на микровязкость биомембран, мембранный потенциал клеток, определены места

л

связывания Н-кукумариозида Аг-2 с биомембранами, с помощью техники флуоресцентных зондов исследовано влияние гликозида на транспорт ионов кальция в иммунокомпетентных клетках и проведено фармакологическое определение природы рецепторов, ионных каналов и переносчиков, принимающих участие в Са2+ ответе клеток на действие гликозида, проведено иммуноцитохимическое исследование перитонеальных макрофагов для определения субпопуляций клеток, принимающих участие в иммунном ответе, осуществлены необходимые расчеты и статистическая обработка данных. Исследование фармакокинетики кукумариозида Аг-2 и его пространственного распределения в селезенке мыши методом MALDI-TOF MS и MALDI-IMS выполнено совместно с к.х.н., зав.лаб. Дмитренком П.С. (лаб. инструментальных и радиоизотопных ТИБОХ ДВО РАН). Электрофизиологические исследования проводили на базе лаборатории клеточной нейробиологии Института биофизики клетки РАН (г. Пущино) совместно с с.н.с., к.б.н. Асташевым М.Е. Компьютерное моделирование осуществлено к.ф.-м.н., с.н.с., Зелепуга Е.А. (лаб. химии пептидов ТИБОХ ДВО РАН).

Работа выполнена в Лаборатории биоиспытаний и механизма действия биологически активных веществ Федерального государственного бюджетного учреждения науки

Тихоокеанского института биоорганической химии им. Г.Б. Елякова ДВО РАН при финансовой поддержке ФЦПК Минобрнауки России (№ 14.132.21.1327), грантов РФФИ (№ 12-04-32232 и № 11-04-01084), гранта Дальневосточного отделения РАН № 12-Ш-В-05-022, гранта Дальневосточного и Уральского отделений РАН (№ 09-Н-УО-05-002), программы Президиума РАН «Фундаментальные науки - медицине» и гранта Президента РФ для поддержки ведущих научных школ НШ-546.1012.4.

Публикации. По материалам исследования опубликовано 4 статьи в рецензируемых журналах и 13 тезисов докладов конференций.

Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, обсуждения результатов, заключения, выводов и списка цитируемой литературы. Список литературы включает 262 публикаций. Диссертация изложена на 121 странице машинописного текста, содержит 5 таблиц и 39 рисунков.

Благодарности. Автор выражает благодарность своему научному руководителю кандидату биологических наук Дмитрию Львовичу Аминину. Автор выражает искреннюю признательность сотрудникам ТИБОХ ДВО РАН: кандидату химических наук Александре Сергеевне Сильченко и доктору химических наук Сергею Анатольевичу Авилову за любезное предоставление кукумариозида Аг-2, кандидату химических наук Виктории Николаевне Давыдовой за помощь при проведении исследований методом проточной цитофлуориметрии, кандидату химических наук Павлу Сергеевичу Дмитренку за неоценимую помощь в организации и проведении исследований методом МАЬБ1-ТОР МБ и МАЫЭЫМЗ, научному сотруднику Наталье Юрьевне Ким за помощь при проведении исследований методом флуоресцентной спектроскопии, кандидату физико-математических наук Елене Александровне Зелепуга за осуществление компьютерного моделирования, кандидату биологических наук Екатерине Александровне Юрченко и кандидату биологических наук Татьяне Юрьевне Горпенченко (лаборатория биотехнологии БПИ ДВО РАН) за помощь при проведении иммуноцитохимических исследований и конфокальной микроскопии, кандидату биологических наук Максиму Евгеньевичу Асташеву (лаборатории клеточной нейробиологии, Институт биофизики клетки РАН, г. Пущино) за помощь в электрофизиологических исследованиях и всем сотрудникам лаборатории биоиспытаний и механизма действия БАВ ТИБОХ ДВО РАН.

л

¡Г'

1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

1.1. Биологическая активность и механизм действия тритерпеновых

гликозидов

1.1.1. Структура тритерпеновых гликозидов

Тритерпеновые гликозиды - это низкомолекулярные соединения природного происхождения. Они состоят из углеводных остатков и агликона тритерпеновой природы. Изученные исследователями гликозиды в подавляющем большинстве содержат в качестве агликонов хедерагенин, гипсогенин, олеаноловую и эхиноцистовую кислоты. В зависимости от химического строения свободные тритерпеноиды могут быть отнесены к урсановому, олеановому, лупановому, гопановому, даммарановому, ланостановому рядам (Деканосидзе и др., 1982,1984; БЫЫиа, 1985; БШшк, 1986).

Моносахаридные остатки гликозидов образуют одну или две углеводные цепи линейной либо разветвленной структуры. В составе углеводных цепей найдено от 1 до 11 различных моносахаридных остатков (пентоз и гексоз). Углеводные цепи присоединяются к тритерпеновому агликону в таких гликозидах О-гликозидной или ацилозидной связями. В состав некоторых тритерпеновых гликозидов входят также остатки органических кислот (например, ангеликовой, тиглиновой, коричной, уксусной и др.), этерифицирующих преимущественно агликон. У некоторых гликозидов в углеводной части найдены остатки серной кислоты (Ваэи, 11аз1о£1, 1967; 8ЫЬа1а, 1985; 8№тк, 1986). Одним из источников получения тритерпеновых гликозидов являются морские беспозвоночные - морские огурцы или голотурии. Моносахаридный состав гликозидов голотурий обычно включает Б-ксилозу, Б-хиновозу, Б-глюкозу, З-О-метил-Б-глюкозу и З-О-метил-Б-ксилозу (Еляков, Стоник, 1986). Многие известные гликозиды голотурий имеют агликоны ланостановой природы с 18(20)-лактоном, в основе структуры которых лежит голостан, соответственно, они относятся к голостановому ряду (НаЬегшеЫ, Уо1к\ует, 1971). В конце 90-х годов были обнаружены и новые структурные типы агликонов (Калинин и др., 1989; Авилов и др., 1991а,б).

1.1.2. Распространение тритерпеновых гликозидов

Тритерпеноиды широко представлены в растительном и животном мире, характеризуются большим разнообразием структур и широким спектром биологического воздействия на организм животных и человека (МаЬаШ & а1., 1988; МаЪаШ, Иапёу, 1991). Такие

соединения являются действующим началом, определяющим физиологические эффекты экстрактов из многих лекарственных растений (Анисимов, Чирва, 1980; Anisimov, Cirva, 1980; Waller, Yamasaki, 1996 a, b). Наличие этих соединений описано у представителей более чем 500 семейств растений (Tschesche, Wulff, 1973; Деканосидзе и др., 1984; Shibata, 1985). К наиболее важным семействам, представители которых содержат тритерпеновые гликозиды, относятся лилейные, гвоздичные, лютиковые, бобовые, аралиевые, сложноцветные и некоторые другие (Деканосидзе и др., 1984; Shibata, 1985).

Тритерпеновые гликозиды обнаружены в различных частях многих высших растений. Особенно интересны в этом отношении уникальные представители дальневосточной флоры -растения из семейства аралиевых, издавна использующиеся в качестве лекарственных средств в странах Юго-Восточной Азии: женьшень Panax ginseng, аралия Aralia schmidtii, Acanthopanax sessiliflorium и элеутерокок Eleutherococcus senticosus. Кроме того, тритерпеновые гликозиды обнаружены и в некоторых реликтовых и эндемичных растениях Дальнего Востока, имеющих этномедицинское применение, например, ширококолокольчик крупноцветковый Platycodon grandiflorus и стеблелист мощный Caulophyllum robustum. (Анисимов и др., 2000).

Помимо источников растительного происхождения, интересными объектами для выделения и исследования тритерпеновых гликозидов являются беспозвоночные Мирового океана. Изучение морских объектов привело к созданию обширной коллекции тритерпеновых гликозидов из голотурий и к исследованию их медико-биологических свойств. Кроме этого, тритерпеновые гликозиды были относительно недавно обнаружены в губках (Kitagawa et al., 1987; Kobayashi et al., 1991; Стоник, 2001).

Гликозиды голотурий являются чрезвычайно удобной моделью для изучения биохимической эволюции и структурно-функциональных отношений природных соединений. Они имеют сложное строение, поскольку биосинтезируются как из углеводных, так и тритерпеновых предшественников и варьируют по многим относительно независимым признакам: числу, положению и природе моносахаридных остатков, числу и положению сульфатных групп в углеводных цепях, а также по числу и расположению двойных связей, гидроксильных, ацетатных и других функциональных групп в агликонах. Поэтому тритерпеновые гликозиды голотурий являются хемотаксономическими маркерами различных систематических групп голотурий и используются для уточнения систематического положения животных и их родственных связей в том или ином таксоне (Калинин и др. 19906; Калинин, Стоник, 1990а, 1991; Kalinin, 1991; Калинин, 1992; Kalinin et al, 1992).

У 11

1.1.3. Биологическая активность тритерпеновых гликозидов

Тритерпеновые гликозиды являются активным началом экстрактов и препаратов из растений, традиционно применяемых в народной медицине. Ранозаживляющие, кровоостанавливающие и восстанавливающие силы свойства экстрактов некоторых лечебных растений во многом обусловлены присутствием в них тритерпеновых гликозидов. Для различных растительных тритерпеновых гликозидов отмечены такие виды биологического действия, как цитотоксическое, противоопухолевое, противовирусное, антимикробное, хемопревентивное, иммуномодулирующее, иммуноадьювантное, противовоспалительное, гепатозащитное, кардиоваскулярное (Lacaille-Dubois, 2000).

Морские беспозвоночные, в том числе промысловые голотурии, также являются богатым источником новых биологически активных вторичных метаболитов, которые определяют целебные свойства их экстрактов, используемых в традиционной медицине азиатских стран. На организменном уровне они могут выступать как вещества эндогенного или экзогенного типа действия. Примером эндогенного влияния могут служить изменения количественного содержания тритерпеновых гликозидов в популяциях голотурий в зависимости от сезона и возраста животных, что позволило предположить участие гликозидов в регуляции размножения голотурий (Matsuno, Ishida, 1969; Matsuno et al., 1973; Аминин, Анисимов, 1987). Как вещества экзогенного типа действия они влияют на обмен веществ, функциональное состояние органов и организма животных и человека в целом (Waller, Yamasaki, 1996 а, Ъ; Beutler et al., 1997; Castro et al., 1997).

В лабораториях химии морских природных соединений и биоиспытаний Тихоокеанского института биоорганической химии им. Г.Б. Елякова ДВО РАН (г.Владивосток) более сорока лет ведется поиск новых биологически активных вторичных метаболитов морского происхождения. Голотурии являются характерными бентосными видами в прибрежных зонах дальневосточных морей и перспективными объектами для дальнейшего поиска новых лекарственных форм. К настоящему времени установлено, что тритерпеновые гликозиды голотурий проявляют разнообразную биологическую активность, включая цитостатическую, гемолитическую, ихтиотоксическую, антифунгальную, противоопухолевую,

иммуномодулирующую и другие (Анисимов, Чирва, 1980, Анисимов, 1987; Verbist, 1993; Kalinin, 1996 a, b, с).

Показано, что гликозиды голотурий играют важную роль в физиологии организма-продуцента. Они принимают участие в регуляции процессов размножения этих животных, синхронизируя созревание ооцитов. Содержание гликозидов в дальневосточном трепанге Apostichopus japonicus S. увеличивается в период, предшествующий нересту, приблизительно в

.. ' , ('.'да- wW - у; . /да,:Ф^*• w

»»ИГ!

40 раз, что указывает на участие этих веществ в гаметогенезе. Голотоксины препятствуют накапливанию ионов кальция в ооцитах и ингибируют спонтанное созревание (мейоз) этих клеток, проявляя функцию половых гормонов созревания (Matsuno et al., 1973; Анисимов и др., 1983; Аминин и др., 1986; 19906; Аминин, Анисимов 1990а; Aminin, Anisimov, 1992).

Другая биологическая роль связана с их высоким ихтиотоксическим эффектом. Эти вещества предохраняют животных-продуцентов от хищных рыб вследствие их высокой токсичности по отношению ко многим видам водных животных (Frey, 1951; Nigrelli, 1952; Yamanouchi, 1955).

Не так давно было установлено, что голотурия Holothuria forskali содержит 26 различных тритерпеновых гликозидов в юовьеровых органах и стенке тела. Было высказано предположение, что такое высокое структурное разнообразие гликозидов может быть связано с механизмом химической защиты голотурии от хищников. Методом MALDI-IMS было показано, что гликозиды локализованы в основном в эпидермисе и в мезотелии стенки тела голотурии и высвобождались в окружающую среду в тот момент, когда голотурии подвергались стрессу. Среди гликозидов, присутствующих в эпидермисе, один гликозид (голотуринозид G) был обнаружен в морской воде, окружающей голотурию в спокойном состоянии, а три других (голотуринозид С и F, и десголотурин А) секретировались в воду, когда животные были подвержены внешнему раздражению. Количество секретируемых сапонинов было очень незначительным по сравнению с их концентрациями в стенке тела и юовьеровых органах. В таких концентрациях гликозиды не представляли угрозы для здоровья хищных рыб. Было высказано предположение, что защитный эффект гликозидов скорее всего связан с отпугивающим сигналом, предупреждающим потенциальных хищников о непригодности тканей голотурии для пищи (van Dyck, 2010; 2011).

Сравнительно недавно в рыбах был найден рецептор, селективный по отношению к тритерпеновым гликозидам морских губок (RAMP-like triterpene glycoside receptor (RL-TGR)). Было установлено, что в присутствии гликозидов в окружающей среде RL-TGR рецептор ассоциирует с другим G-белком, управляемым рецептором (GPCR), и существенно модифицирует активность RL-TGR рецептора. Это в свою очередь служит сильным физиологическим сигналом для рыб, приводящим к отпугиванию их от употребления в пищу губок, содержащих тритерпеновые гликозиды (Cohen, 2010).

Тритерпеновые гликозиды голотурий со схожей структурой иногда демонстрируют противоположные биологические эффекты. Так, эхинозиды А и В и голотурины А и В стимулировали пассивный транспорт Са2+ из везикул сердечной сарколеммы (Yamasaki et al., 1987). С транспортом Са2+ связаны, по-видимому, некоторые важные биологические эффекты этих гликозидов. С другой стороны, голотоксины блокировали транспорт

Са и изменяли

микровязкость биомембран, выполняя функцию ингибиторов мейотического созревания ооцитов голотурий и тем самым регулируя и репродуктивные функции этих животных (Aminin, Anisimov, 1992).

Среди изученных мембранолитических гликозидов, гликозиды из голотурий привлекают внимание, прежде всего, своим антигрибковым и противоопухолевым действием. Предполагают, что тритерпеновые гликозиды могут выступать в роли биорегуляторов роста клеток и гаметогенеза, являться факторами устойчивости к патогенным заболеваниям. В ряде случаев эти соединения ингибировали рост экспериментальных опухолей и размножение возбудителей грибковых заболеваний человека и животных. Возможно, что, подобно витаминам и гормонам, тритерпеновые гликозиды или их метаболиты участвуют в важных биохимических реакциях и физиологических процессах, оказывают воздействие, как на отдельные стороны метаболизма, так и на функциональное состояние организма в целом (Waller, Yamasaki, 1996 a, b).

Цитотоксическая активность гликозидов голотурий против различных типов клеток и клеточных линий, в том числе линий опухолевых клеток человека, изучалась исследователями в течение многих лет. Эти исследования показали, что тритерпеновые гликозиды могут подавлять рост патогенных грибков, блокировать дробление яйцеклеток и развитие эмбрионов морского ежа, подавляют пролиферацию в различных типах опухолевых клеток человека in vitro, включая такие как: клетки лейкемии Р-388, KB, клетки лимфоидной лейкемии L 1210, Schabel, А-549, НТ-29, Mel-28, MICF-1, IA9, CAKI-1, U-87-MG, РС-3, SK-MEL, НСТ-8, MCF-7, MKN-28, НСТ-116, U87MG, HepG2, HeLa, ТНР-1, KB-VIN, НСТ-8, СЗЗА и ряд других (Wu et al, 2007; Zhang et al., 2007; Sun et al., 2007; Kalinin et al., 2008; Liu et al., 2008; Avilov et al.,2008; Althunibat et al., 2009; Han et al., 2010; Podolak et al., 2010; Osbourn et al., 2011; Kim et al., 2012;)

Кроме того, гликозиды голотурий оказывают антиангиогенный эффект и вызывают блокировку клеточного цикла различных типов клеток. Некоторые гликозиды могут индуцировать апоптоз опухолевых клеток in vitro. Установлено, что применение ряда гликозидов голотурий ведет к индукции апоптоза в опухолевых клетках, подавлению миграции, адгезии, формированию цитоскелета опухолевых клеток, супрессии ангиогенеза вокруг опухолей, ингибированию пролиферации и выраженному торможению роста опухолей in vitro и in vivo.

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Пислягин, Евгений Александрович, 2013 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Авдонин П.В., Ткачук В.А. Рецепторы и внутриклеточный кальций. М.: Наука. 1994. 288 с.

2. Авилов С.А., Стоник В.А., Калиновский А.И. Строение четырех новых тритерперовых гликозидов из морской голотурии Cucumaria japónica II Химия природ, соед. 1990. № 6. - С. 787-798.

3. Авилов С.А., Калинин В.И., Калиновский А.И., Стоник В.А. Кукумариозид G2 -минорный тритерпеновый гликозид из голотурии Eupentacta fraudatrix II Химия природ, соед. 1991а. №3._ С. 438-439.

4. Авилов С.А., Калиновский А.И., Стоник В.А. Два новых тритерпеновых гликозида из голотурии Duasmodactyla kurilensis II Химия природ, соед. 19916. № 2. - С. 221-226.

5. Адаме Р. Методы культуры клеток для биохимиков. М.: Мир. 1983. 264 с.

6. Аминин Д.Л., Анисимов М.М., Мокрецова Н.Д., Стригина Л.И., Левина Э.В. Влияние тритерпеновых и стероидных гликозидов на овоциты, яйца и эмбрионы голотурии Stichopus Japonicus и морского ежа Strongylocentrorus nudus II Биол. моря. 1986. № 3. - С. 49-52.

7. Аминин Д.Л., Анисимов М.М. Содержание голотоксинов в тканях голотурии Stichopus japonicus S. в разные сезоны года и их влияние на созревание ооцитов // Ж., эвол. биохим. физиол. 1987. Т. 23, № 4. - С. 545-547.

8. Аминин Д.Л., Анисимов М.М. Влияние голотоксина Ai на транспорт Ca и мейотическое созревание ооцитов голотурии Stichopus Japonicus // Ж. эволюц. биохим. физиол. 1990а. Т. 26, № 1.-С. 9-13.

9. Аминин Д.Л., Лебедев A.B., Левицкий Д.О. Влияние голотоксина Ai на перенос ионов кальция через липидные модели биологических мембран // Биохимия. 19906. Т. 55, № 2. - С. 270-275.

10. Аминин Д.Л., Шевченко В.П., Нагаев И.Ю., Гладких Р.В., Капустина И.И., Лихацкая Г.Н., Авилов С.А., Стоник В.А. Использование в фармакокинетических исследованиях меченных тритием тритерпеновых гликозидов из голотурии Cucumaria japónica!/ДАН. 2008. Т. 422,№5.-С. 710-713.

11. Анисимов М.М., Чирва В.Я. О биологической роли тритерпеновых гликозидов // Усп. соврем, биологии. 1980. № 6. - С. 351-364.

12. Анисимов М.М., Аминин Д.Л., Ровин Ю.Г., Лихацкая Т.Н., Попов A.M., Кузнецова Т.А., Калиновская Н.И., Еляков Г.Б. Об устойчивости клеток голотурии Stichopus japonicus к действию эндотоксина — стихопозида А // Докл. АН СССР. 1983. Т. 270, № 4. - С. 991-993.

i 1 )

13. Анисимов М.М. Тритерпеновые гликозиды и структурно-функциональные свойства мембран // Биол. науки. 1987. № 10. - С. 49-63.

14. Анисимов М.М., Стригина Л.И., Горовой П.Г., Аминин Д.Л., Агафонова И.Г. Химический состав и медико-биологические свойства тритерпеновых гликозидов Дальневосточного растения Caulophyllum robustum Maxim. (Сем. Berberidaceaé) II Растит, ресурсы. 2000. T. 1. - С. 107-129.

15. Бажурина И.М., Панов М.Л. Итоги науки и техники. Общие проблемы физико-химической биологии. М.: ВИНИТИ. 1986. Т. 3. 124 с.

16. Батраков С.Г., Гиршович Е.С., Дрожжина Н.С. Тритерпеновые гликозиды с антигрибковой активностью, выделенные из морской кубышки Cucumaria japónica II Антибиотики. 1980. № 6. - С. 408-411.

17. Болдырев A.A., Куин П.Дж., Лущак В.И. Механизм термоиндуцированного функционального разобщения Са2+-насоса саркоплазматического ретикулума скелетных мышц // Биохимия. 1986. Т. 51, № 1. - С. 150-159.

18. Варфоломеев С.Д., Гуревич К.Г. Биокинетика: Практический курс. М.: ФАИР-ПРЕСС, 1999. 720 с.

19. Владимиров Ю.А., Добрецов Г.Е. Флуоресцентные зонды в исследовании биологических мембран. М.: Наука. 1980. 320 с.

20. Гришин Ю.И., Агафонова И.Г., Авилов С.А. Сравнительная оценка действия гликозидов природного происхождения на звенья кроветворной и иммунной систем // IX молодежная конф. по синтетическим и природным физиологически активным соединениям. Тез. докл. Ереван. 1988а. - С. 70.

21. Гришин Ю.И., Авилов С.А. Влияние кукумариозида на пролиферацию и миграцию плюрипотентных стволовых клеток // Научн. конф. "Экспериментальная и клиническая иммунология на Востоке страны". Тез. докл. Красноярск. 19886. Т.1. - С. 30.

22. Гришин Ю.И., Беседнова H.H., Стоник В.А., Ковалевская A.M., Авилов С.А. Регуляция гемопоэза и иммуногенеза тритерпеновыми гликозидами из голотурий // Радиобиология. 1990. Т. 30, № 4. - С. 556.

23. Гришин Ю.И., Ковалевская A.M., Стоник В.А., Авилов С.А., Влазнев В.П., Слугин B.C. Новый эффективный препарат для ветеринарии КМ-2 (кукумариозид-2) // Новости звероводства. 1991а. № 2. - С. 4.

24. Гришин Ю.И., Ковалевская A.M., Стоник В.А., Авилов С.А., Влазнев В.П., Слугин

B.C. Иммуностимуляторы для звероводства КМ и КМ-2 // Новости звероводства. 19916. № 2. -

C. 19-23.

25. Гришин Ю.И., Ковалевская A.M., Стоник В.А., Авилов С.А., Влазнев В.П., Слугин B.C. Средство для профилактики и лечения алеутской болезни норок // Патент № 2036654 от 09.09.1995 г.

26. Деканосидзе Г.Е., Чирва В.Я., Сергиенко Т.В., Уварова Н.И. В кн.: Исследование тритерпеновых гликозидов (установление строения и синтез). (Кемертелидзе Э.П. Ред.) Тбилиси: Мецниереба. 1982. - С. 63-88.

27. Деканосидзе Г.Е., Чирва В.Я. Сергиенко Т.В. Биологическая роль, распространение и химическое строение тритерпеновых гликозидов. (Кемертелидзе Э.П. Ред.). Тбилиси: Мецниереба. 1984. 352 с.

28. Еляков Г.Б., Стоник В.А. Тритерпеноиды морских организмов. М.: Наука. 1986. 270 с.

29. Зиганшин А.У. Роль рецепторов АТФ (Р2-рецепторов) в нервной системе // Неврологический вестник. 2005. Т. XXXVII, № 1-2. - С. 45-53.

30. Калинин В.И., Калиновский В.И., Стоник В.А., Дмитренок П.А., Елькин Ю.Н. Структура псолюсозида В - неголостанового тритерпенового гликозида из голотурии рода Psolus II Химия природ, соед. 1989. № 3. - С. 361-368.

31. Калинин В.И., Стоник В.А. Эволюция вторичных метаболитов морских организмов: параллелизмы, конвергенция, биохимическая координация, химическое детерминирование // Вест. ДВО АН СССР. 1990а. № 2. - С. 120-129.

32. Калинин В.И., Стоник В.А., Авилов С.А. Гомологическая изменчивость и направленность в эволюции тритерпеновых гликозидов голотурий (Holothurioidea, Echinodermata) II Ж., общ. биол. 19906. Т. 5, № 2. - С. 247-260.

33. Калинин В.И., Стоник В.А. Химическая морфология - новый подход к изучению биохимической эволюции // Вест. ДВО АН СССР. 1991. № 1. - С. 54-65.

34. Калинин В.И. Морфологические закономерности в эволюции тритерпеновых гликозидов голотурий (Holothurioidea, Echinodermata) II Ж., общ. биол. 1992. Т. 53, № 5. - С. 672-688.

35. Клебанов Г.И., Владимиров Ю. А. Клеточные механизмы прайминга и активации фагоцитов // Успехи современной биологии. 1999. Т. 119, № 5. - С. 462^75

36. Костецкий Э.Я., Попов A.M., Санина Н.М., Ли И.А., Цыбульский A.B., Шныров В.Л. Носитель и адъювант для антигенов // Патент РФ 2311926, 2006104795/13 (005189). от 15.02.2006 г.

37. Кукес В.Г. Клиническая фармакокинетика: теоретические, прикладные и аналитические аспекты: руководство .М.: ГЭОТАР-Медиа. 2009. 432 с.

38. Ли И.А., Попов A.M., Цыбульский A.B., Санина Н.М., Костецкий Э.Я., Новикова О.Д., Портнягина О.Ю., Мазейка A.B. Иммуностимулируюие свойства нового носителя антигенов на

основе кукумариозида Аг-2 и моногалактозилдиацилглицерола // Прикладная биохимия и микробиология. 2008. Т. 44, № 6. - С. 694-700.

39. Лихацкая Г.Н., Яровая Т.П., Руднев B.C., Попов A.M., Анисимов М.М., Ровин Ю.Г. Образование комплекса тритерпенового гликозида голотурина А с холестерином в липосомальных мембранах // Биофизика. 1985. Т. 30, №. 2. - С. 358-359.

40. Лихацкая Г.Н., Анисимов М.М., Калинин В.И., Авилов С.А., Дроздова O.A., Кольцова Е.А., Калиновская Н.И., Фролова Г.М. Изучение взаимодействия с мембранами некоторых биологически активных соединений методом ДСК // В кн.: Исследования в области физико-химической биологии и биотехнологии. Владивосток: Дальнаука. 1998. - С. 38-39.

41. Лихацкая Т.Н. Механизмы взаимодействия тритерпеновых и стероидных гликозидов с липидными мембранами. Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата физико-математических наук. Владивосток: 2006. 23 с.

42. Лихацкая Г. Н. Тритерпеновые и стероидные гликозиды и мембраны. Молекулярные механизмы взаимодействия гликозидов с мембранами. Владивосток: LAP LAMBERT Academic Publishing GmbH & Co. KG. 2011. 115 с.

43. Любимова Н.Б., Леонова Г.Н., Мураткина С.М., Гришин Ю.Н. Действие иммуномодуляторов при экспериментальном энцефалите, вызванном высоко- и слабовирулентными штаммами вируса клещевого энцефалита // Рабочее совещание "Иммуномодуляторы природного происхождения". Тез. докл. Владивосток. 9-10 октября, 1990. - С. 62.

44. Мальцев И.И., Стехова С.И., Шенцова Е.Б., Анисимов М.М., Стоник В.А. Противомикробная активность гликозидов из голотурий семейства Stichopodidae // Хим.-фарм. журн. 1985. № 1. - С. 54-56.

45. Нуриева Р.И., Дедкова E.H., Леонтьева Г.А., Абдрасилов B.C., Пак Х.Д., Ким Ю.А., Зинченко В. П. Механизм активации клеток асцитной карциномы Эрлиха общей фракцией сапонинов из корейского женьшеня // Антибиотики и химиотерапия. 1995. Т. 40, № 11-12. - С. 25-28.

46. Озрина Р. Д., Ульянов А. М., Сарвачев К. Ф. Метод приготовления гомогенных образцов тканей и крови для жидкостного сцинтилляционного счета. // Биологические науки. 1979. №4.-С. 100-103.

47. Оноприенко Л.В. Молекулярные механизмы регуляции активности макрофагов. // Биоорганическая химия. 2011. Т. 37, №4. - С 437-451

48. Поверенный A.M. Вероятные причины высокой радиочувствительности системы кроветворения // Радиобиология. 1990. Т. 30, №. 4. - С. 538.

49. Попов A.M., Лоенко Ю.Н., Анисимов М.М. Изменение чувствительности опухолевых клеток к действию тритерпеновых гликозидов липосомами // Антибиотики. 1981. Т. 26, № 3. -С.127-129.

50. Попов A.M., Атопкина Л.Н., Самошина Н. Ф., Уварова Н.И. Изучение иммуномодулирующей активности тетрациклических тритерпеновых гликозидов даммаранового и голостанового ряда // Антибиотики и химиотерапия. 1994. Т. 39, № 9-10. - С. 19-25.

51. Попов A.M., Ли И.А., Костецкий Э.Я., Санина Н.М., Цыбульский A.B., Шныров В.Л., Мазейка А.Н. Носитель антигенов // Патент РФ 2322259, 2006123270/13 (025252) от 29.06.2006г.

52. Розанов Ю.М. Проточная цитометрия. В кн.: Методы культивирования клеток. Сборник научных трудов (Пинаев Г.П. Ред.) Л.: Наука. 1988. 320 с.

53. Рубцов Б.В., Ружницкий А.О., Клебанов Г.И., Седов A.M., Владимиров Ю.А. Влияние некоторых тритерпеновых гликозидов морских беспозвоночных на проницаемость биологических и искусственных мембран // Изв. АН СССР. Сер. Биол. 1980. № 3. - С. 436-445.

54. Санина Н.М., Попов A.M., ЛиИ.А., Костецкий Э.Я., Цыбульский A.B., Шныров В.Л. Способ получения носителя антигенов на основе липидов из морских макрофитов и тритерпенового гликозида кукумариозида // Патент РФ 2319506 2005131645/13 (035476) .от 12.10.2005 г.

55. Седов A.M. Характеристика иммуномодулирующих свойств тритерпеновых гликозидов голотурий. Автореф. канд. биол. наук. М.: 1984а. 26 с.

56. Седов A.M., Елкина С.И., Сергеев В.В., Калина Н.Г., Саканделидзе О.Г., Батраков С.Г., Гиршович Е.С. Способность тритерпеновых гликозидов из голотурий стимулировать антибактериальную устойчивость на модели экспериментального сальмонеллеза мышей // Ж. микробиол. эпидемиол. иммунобиол. 19846. № 5. - С. 55-58.

57. Седов A.M., Шепелева И.Б., Захарова Н.С., Саканделидзе О.Г., Сергеев В.В., Мошиашвили И.Я. Влияние кукумариозида (тритерпенового гликозида из голотурий Cucumaria japónica) на развитие иммунного ответа мышей на корпускулярную вакцину // Ж. микробиол. эпидемиол. иммунобиол. 1984в. № 9. - С. 100-104.

58. Седов A.M., Аполлонин A.B., Севастьянова Е.К., Козлова H.H., Стоник В.А., Авилов С.А., Купера Е.В. Кукумариозид - новый иммуномодулятор из дальневосточных голотурий // Всес. совещ. "Биологически активные вещества при комплексной утилизации гидробионтов." Тез. докл. Владивосток. 1988. - С. 70-72.

59. Седов A.M., Аполлонин A.B., Севастьянова Е.К., Алексеева И.А., Батраков С.Г., Саканделидзе О.Г., Лиходед В.Г., Стоник В.А., Авилов С.А., Купера Е.В. Стимуляция

тритерпеновыми гликозидами голотурий неспецифической антибактериальной резистентности мышей к условно-патогенным грамотрицательным микроорганизмам // Антибиотики и химиотерапия. 1990а. Т. 35, № 1. - С. 23-26.

60. Седов A.M., Виноградов И.В., Жоголева И.Б., Николаева E.H., Борисенко Е.В., Севастьянова Е.К., Соколова Т.В., Стоник В.А., Саканделидзе О.Г. Доклиническое изучение кукумариозида - нового иммуномодулятора, получаемого из дальневосточных голотурий. Исследование специфической иммунофармакологической активности // Всесоюзный симпозиум "Реабилитация иммунной системы". Тез. докл. Цхалтубо. 19906. - С. 354.

61. Слугин B.C. Алеутская болезнь норок и пути ее ликвидации. Автореф. докт. вет. наук. М.: 1982. 343 с.

62. Соботович C.JI., Богуславский В.М. Перспективы лечения онкологических больных при совместном использовании БРТ и иммуномодулятора КД (кукумариозид) // Матер. 7 межд. конф. "Теоретические и клинические аспекты применения биорезонансной и мультирезонансной терапии". М.: 20 - 22 апреля, 2001.

63. Стоник В.А. Морские полярные стероиды // Успехи химии. 2001. Т. 70, № 8. - С. 763807.

64. ТИНРО-центр. Новые технологии переработки морских гидробионтов ТИНРО-центра. 2001. URL http://www.tinro-center.ru/tinro-centr/struktura-tinro-centra (доступно 21.10.2013)

65. Ткачук В.А. Мембранные рецепторы и внутриклеточный кальций // Соросовский бразовательный журнал. 2001. Т. 7, № 1. - С. 10-15.

66. Хэй Р. Сохранение и оценка качества клеток. В кн.: Культура животных клеток. Методы. (Фрейшни Р. Ред.) М.: Мир. 1989. 335 с.

67. Шемарова И.В. Роль сдвигов мембранных потенциалов на начальных стадиях проведения сигнала в клетках низших эукариот // Цитология. 2007. Т.49, № 11. - С. 952-965.

68. Шульгина JI.B., Блинов Ю.Г., Загородная Г.И., Сухотская Л.Ю., Тимчишина Т.Н., Усов В.В., Дугина В.М. Новые продукты для хирургических больных на основе гидролизата из кукумарии. Новые биомедицинские технологии с использованием биологически активных добавок// Сб. матер. Российской научн. конф. Владивосток.: 24-25 июня. 1998.

69. Щеглов В.В., Анисимов М.М., Попов A.M., Себко И.Г. Влияние некоторых тритерпеновых гликозидов на проницаемость плазматических мембран для УФ-поглощающих веществ в дрожжевых клетках Saccharomyces carlsbergensis II Антибиотики. 1979a. № 1. - С. 49-55.

70. Щеглов В.В., Анисимов М.М., Шенцова Е.Б. Распределение аккумулированных из среды тритерпеновых гликозидов в дрожжевой клетке и влияние их на выход из клеток

ш

i 1 \ *

г1

ортофосфата и аминного азота // Прикл. биохимия и микробиология. 19796. Т. 15, №. 3. - С. 375-382.

71. Щеглов В.В., Баранова С.И., Анисимов М.М., Антонов А.С., Афиятуллов Ш.Ш., Левина Э.В., Шарыпов В.Ф., Стоник В.А., Еляков Г.Б. Изучение антимикробного спектра действия некоторых тритерпеновых и стероидных гликозидов // Антибиотики. 1979в. № 4. - С. 270-273.

72. Abbracchio М.Р., Burnstock G. Purinoceptors: are there families of P2X and P2Y purinoceptors? // Pharmacol Ther. 1994. V. 64, No 3. - P. 445^75.

73. Adinolfi E., Melchiorri L., Falzoni S., Chiozzi P., Morelli A., Tieghi A., Cuneo A., Castoldi G., Di Virgilio F., Baricordi O.R. P2X7 receptor expression in evolutive and indolent forms of chronic В lymphocytic leukemia // Blood. 2002. V. 99, No 2. - P. 706-708.

74. Agafonova I.G., Aminin D.L., Avilov S.A., Stonik V.A. Influence of cucumariosides upon Intracellular [Ca2+]i and lysosomal activity of macrophages // Journal of Agricultural and Food Chemistry. 2003. V. 51, No 24. - P. 6982-6986.

75. Akagi M., Fukuishi N., Kan Т., Sagesaka Y.M., Akagi R. Anti-allergic effect of tea-leaf saponin (TLS) from tea leaves (Camellia sinensis var. sinensis) II Biol. Pharm. Bull. 1997. V. 20, No 5.-P. 565-567.

76. Alonso-Torre S.R., Trautmann A. Calcium responses elicited by nucleotides in macrophages. Interaction between two receptor subtypes // Journal of Biological Chemistry. 1993. V. 268, No 25. -P. 18640-18647.

77. Althunibat O.Y., Hashim R.B., Taher M., Daud J.M., Ikeda M.A., Zali B.I. In vitro antioxidant and antiproliferative activities of three malaysian sea cucumber species // European Journal of Scientific Research. 2009. V. 37, No 3. - P. 376-387.

78. Aminin D.L., Anisimov M.M. Biological function of holotoxins in body of holothurian Stichopus Japonicus II In: Recent Advances in Toxinology Research / Eds. Gopalakrishnakone P., Tan C.K.: Venom and Toxin Research Group, National University of Singapore. 1992. V. 2. - P. 562 -575.

79. Aminin D.L., Agafonova I.G., Berdyshev E.V., Isachenko E.G., Avilov S.A., Stonik V.A. Immunomodulatory properties of cucumariosides from the edible Far-Eastern holothurian Cucumaria japónica II Journal of Medicinal Food. 2001. V. 4, No 3. - P. 127-135.

80. Aminin D.L., Pinegin B.V., Pichugina L.V., Zaporozhets T.S., Agafonova I.G., Boguslavski V.M., Silchenko A.S., Avilov S.A., Stonik V.A. Immunomodulatory properties of Cumaside // International Immunopharmacology. 2006. V. 6, No 7. - P. 1070-1082.

81. Aminin D.L., Agafonova I.G., Kalinin V.I., Silchenko A.S., Avilov S.A., Stonik V.A., Collin P.D., Woodward C. Immunomodulatory properties of frondoside A, a major triterpene glycoside from

the north atlantie commercially harvested sea cucumber Cucumaria frondosa II Journal of Medicinal Food. 2008a. V. 11, No 3. - P. 443^53.

82. Aminin D.L., Shevchenko V.P., Nagaev I.Y., Gladkikh R.V., Kapustina I.I., Likhatskaya G.N., Avilov S.A., Stonik V.A. The use of tritium-labeled triterpene glycosides from the holothurian Cucumaria japónica in pharmacokinetic studies // Doklady Biological Sciences. 2008b. V. 422, No 1. -P. 345-347.

83. Aminin D.L., Koy C., Dmitrenok P.S., Müller-Hilke B., Koczan D., Arbogast B., Silchenko A.A., Kalinin V.I., Avilov S.A., Stonik V.A., Collin P.D., Thiesen H.J., Deinzer M.L., Glocker M.O. Immunomodulatory effects of holothurian triterpene glycosides on mammalian splenocytes determined by mass spectrometric proteome analysis // Journal of Proteomics. 2009. V. 72, No 5. - P. 886-906.

84. Aminin D.L., Chaykina E.L., Agafonova I.G., Avilov S.A., Kalinin V.I., Stonik V.A. Antitumor activity of the immunomodulatory lead Cumaside // International Immunopharmacology. 2010a. V. 10, No 6. - P. 648-654.

85. Aminin D.L., Silchenko A.S., Avilov S.A., Stepanov V.G., Kalinin V.I. Immunomodulatory action of monosulfated triterpene glycosides from the sea cucumber Cucumaria okhotensis: Stimulation of activity of mouse peritoneal macrophages // Natural Product Communications. 2010b. V. 5,No 12.-P. 1877-1880.

86. Aminin D.L., Gorpenchenko T.Y., Bulgakov V.P., Andryjashchenko P.V., Avilov S.A., Kalinin V.I. Triterpene glycoside cucumarioside A2-2 from sea cucumber stimulates mouse immune cell adhesion, spreading, and motility // Journal of Medicinal Food.. 201 la. V. 14, No 6. - P. 594-600.

87. Aminin D.L., Zaporozhets T.S., Adryjashchenko P.V., Avilov S.A., Kalinin V.I., Stonik V.A. Radioprotective properties of cumaside, a complex of triterpene glycosides from the sea cucumber Cucumaria japónica and cholesterol // Natural Product Communications. 201 lb. V. 6, No 5. - P. 587592.

88. Anisimov M.M., Cirva V.J. Die biologische Bewertung von Triterpenglykosiden // Pharmazie. 1980. V. 35,No 12.-P. 731-738.

89. Annongu A.A., Termeulen U., Atteh J.O., Chinnah T. Biochemical and histological alterations in the liver of the broiler after ingestion of vegetable saponins and effects of dietary supplementation with adsorbents or methyl donor // Arch. Geflugelk. 1996. V. 60, No 6. - P. 267 -272.

90. Arai I., Komatsu Y., Hirai Y., Shingu K., Ida Y., Yamaura H., Yamamoto T., Kuroiwa Y., Sasaki K., Taguchi S. Stimulative effects of saponin from kikyo-to, a Japanese herbal medicine, on pancreatic exocrine secretion of conscious rats // Planta Med. 1997. V. 63, No 5. - P. 419-424.

s'1 * ' i t

91. Avilov S.A, Kalinin V.I, Silchenko A.S, Aminin D.L, Agafonova I.G, Stonik V.A. Process for isolating sea cucumber Frondoside A, and immunomodulatory methods of use; U.S. Patent. 2007. No 7,163,702.

92. Avilov S.A., Silchenko A.S., Antonov A.S., Kalinin V.I., Kalinovsky A.I., Smirnov A.V., Dmitrenok P.S., Evtushenko E.V., Fedorov S.N., Savina A.S., Shubina L.K., Stonik V.A. Synaptosides A and Al, triterpene glycosides from the sea cucumber Synapta maculata containing 3-0-methylglucuronic acid and their cytotoxic activity against tumor cells // Journal of Natural Products. 2008. V. 71, No 4. - P. 525-531.

93. Bardini M., Lee H.Y., Burnstock G. Distribution of P2X receptor subtypes in the rat female reproductive tract at late pro-oestrus/early oestrus // Cell and Tissue Research. 2000. V. 299, No 1. - P. 105-113.

94. Baroni M., Pizzirani C., Pinotti M., Ferrari D., Adinolfi E., Calzavarini S., Caruso P., Bernardi F., Di Virgilio F. Stimulation of P2 (P2X7) receptors in human dendritic cells induces the release of tissue factor-bearing microparticles // The FASEB Journal. 2007. V. 21, No 8. - P. 19261933.

95. Barrera N.P., Ormond S.J., Henderson R.M., Murrell-Lagnado R.D., Edwardson J.M. Atomic force microscopy imaging demonstrates that P2X2 receptors are trimers but that P2X6 receptor subunits do not oligomerize // Journal of Biological Chemistry. 2005. V. 280, No 11. - P. 1075910765.

96. Basu N., Rastogi R. P. Triterpenoid saponins and sapogenins // Phytochem. 1967. V. 6. - P. 1249-1270.

97. Beigi R.D., Dubyak G.R. Endotoxin activation of macrophages does not induce ATP release and autocrine stimulation of P2 nucleotide receptors // Journal of Immunology. 2000. V. 165, No 12. -P.7189-7198.

98. Berridge M.J. Elementary and global aspects of calcium signaling // J. Physiol. 1997. V. 499, No 2.-P. 291-306.

99. Beutler J.A., Kashman Y., Pannell L.K., Cardellina J.H., Alexander M.R.A., Balaschak M.S. Prather T.R., Shoemaker R.H., Boyd M.R. Isolation and characterisation of novel cytotoxic saponins from Archidendron ellipticum II Bioorg. Med. Chem. 1997. V. 5, No 8. - P. 1509-1517.

100. Bezdetko G.N., German A.V., Shevchenko V.P., Mitrokhin Y.I., Myasoedov N.F., Dardymov I.V., Todorov I.N., Barenboim G.M. Investigation of the pharmacokinetics and mechanism of action of glycosides of Eleuterococcus. I. Introduction of tritium into eleuteroside B. kinetics of its accumulation and elimination from the animal organism // Pharmaceutical Chemistry Journal. 1981. V. 15, No 1.-P. 9-13.

101. Bikadi Z., Hazai E. Application of the PM6 semi-empirical method to modeling proteins enhances docking accuracy of AutoDock // Journal of Cheminformatics. 2009. V. 1, No 1. - P. 1-15.

102. Bo X., Alavi A., Xiang Z., Oglesby I., Ford A., Burnstock G. Localization of ATP-gated P2X2 and P2X3 receptor immunoreactive nerves in rat taste buds // NeuroReport. 1999. V. 10, No 5. -P. 1107-1111.

103. Braun K., Rettinger J., Ganso M., Kassack M., Hildebrandt C., Ullmann H., Nickel P., Schmalzing G., Lambrecht G. Nf449: A subnanomolar potency antagonist at recombinant rat P2X1 receptors // Naunyn-Schmiedeberg's Archives of Pharmacology. 2001. V. 364, No 3. - P. 285-290.

104. Bulanova E., Budagian V., Orinska Z., Koch-Nolte F., Haag F., Bulfone-Paus S. ATP induces P2X7 receptor-independent cytokine and chemokine expression through P2X1 and P2X3 receptors in murine mast cells // Journal of Leukocyte Biology. 2009. V. 85, No 4. - P. 692-702.

105. Burnstock G. Purinergic nerves // Pharmacol. Rev. 1972. V 24. - 509-560

106. Burnstock G. Cell membrane receptors for drugs and hormones: a multidisciplinary approach // Eds. RW.Straub, L.Bolis.- N.-Y.: Raven Press. 1978. - P.107-118.

107. Burnstock G. P2X receptors in sensory neurones // British Journal of Anaesthesia. 2000a. V. 84,No 4.-P. 476-488.

108. Burnstock G., Williams M. P2 purinergic receptors: Modulation of cell function and therapeutic potential // Journal of Pharmacology and Experimental Therapeutics. 2000b. V. 295, No 3. -P. 862-869.

109. Burnstock G. Expanding field of purinergic signaling // Drug Development Research. 2001. V. 52,No 1-2.-P. 1-10.

110. Burnstock G. Introduction: P2 receptors // Current Topics in Medicinal Chemistry. 2004a. V. 4,No 8.-P. 793-803.

111. Burnstock G., Knight G.E. Cellular distribution and functions of P2 receptor subtypes in different systems. 2004b. - P. 31-304.

112. Burnstock G., Novak I. Purinergic signalling in the pancreas in health and disease // Journal of Endocrinology. 2012. V. 213, No 2. - P. 123-141.

113. Carmichael J., DeGraff W.G., Gazdar A.F., Minna J.D., Mitchell J.B. Evaluation of a tetrazolium-based semiautomated colorimetric assay: Assessment of chemosensitivity testing // Cancer Research. 1987. V. 47, No 4. - P. 936-942.

114. Castro V.H., Ramirez E., Mora G.A., Iwase Y., Nagao T., Okabe H., Matsunaga H., Katano M., Mori M. Structures and antiproliferative activity of saponins from Sechium pittieri and S-talamancense II Chem. Pharm. Bull. 1997. V. 45, No 2. - P. 349-358.

115. Chaumont S., Jiang L.H., Penna A., North R.A., Rassendren F. Identification of a trafficking motif involved in the stabilization and polarization of P2X receptors // Journal of Biological Chemistry. 2004. V. 279, No 28. - P. 29628-29638.

116. Coddou C., Yan Z., Obsil T., Pablo Huidobro-Toro J., Stojilkovic S.S. Activation and regulation of purinergic P2X receptor channels // Pharmacological Reviews. 2011. V. 63, No 3. - P. 641-683.

117. Cohen S.P., Haack K.K.V., Halstead-Nussloch G.E., Bernard K.F., Hatt H., Kubanek J., McCarty N.A. Identification of RL-TGR, a coreceptor involved in aversive chemical signaling // Proc Natl Acad Sci U S A. 2010. V. 107, No 27. - P. 12339-12344.

118. Collo G., North R.A., Kawashima E., Merlo-Pich E., Neidhart S., Surprenant A., Buell G. Cloning of P2X5 and P2X6 receptors and the distribution and properties of an extended family of ATP-gated ion channels // Journal of Neuroscience. 1996. V. 16, No 8. - P. 2495-2507.

119. Denlinger L.C., Fisette P.L., Sommer J.A., Waiters J.J., Prabhu U., Dubyak G.R., Proctor R.A., Bertics P.J. Cutting edge: The nucleotide receptor P2X7 contains multiple protein and lipid-interaction motifs including a potential binding site for bacterial lipopolysaccharide // Journal of Immunology. 2001. V. 167, No 4. - P. 1871-1876.

120. Ding S., Sachs F. Ion permeation and block of P2X2 purinoceptors: Single channel recordings // Journal of Membrane Biology. 1999. V. 172, No 3. - P. 215-223.

121. Di Virgilio F., Chiozzi P., Ferrari D., Falzoni S., Sanz J.M., Morelli A., Torboli M., Bolognesi G., Baricordi O.R. Nucleotide receptors: An emerging family of regulatory molecules in blood cells // Blood. 2001. V. 97, No 3. - P. 587-600.

122. Di Virgilio F. Liaisons dangereuses: P2X7 and the inflammasome // Trends in Pharmacological Sciences. 2007. V. 28, No 9. - P. 465-472.

123. Dolmetsch R.E., Xu K., Lewis R.S. Calcium oscillations increase the efficiency and specificity of gene expression // Nature. 1998. V. 392, No 6679. - P. 933-936.

124. Dubyak G.R. Charge of the mito brigade. Focus on "Changes in mitochondrial surface charge mediate recruitment of signaling molecules during apoptosis" // American Journal of Physiology - Cell Physiology. 2010. V. 300, No 1. - P. 11-13.

125. Dunn P.M., Zhong Y., Burnstock G. // Prog. Neurobiol. 2001. V. 65. - P. 107-134.

126. Dutton J.L., Poronnik P., Li G.H., Holding C.A., Worthington R.A., Vandenberg R.J., Cook D.I., Barden J.A., Bennett M.R. P2X1 receptor membrane redistribution and down-regulation visualized by using receptor-coupled green fluorescent protein chimeras // Neuropharmacology. 2000. V. 39,No 11.-P. 2054-2066.

127. Egan T.M., Khakh B.S. Contribution of calcium ions to P2X channel responses // Journal of Neuroscience. 2004. V. 24, No 13. - P. 3413-3420.

128. Eswar N., Webb B., Marti-Renom M.A., Madhusudhan M.S., Eramian D., Shen M., Pieper U., Sali A. Comparative protein structure modeling using modeller // Current Protocols in Bioinformatics: John Wiley & Sons, Inc., 2002. Supplement 15, 5.6.1-5.6.30.

129. Ferrari D., Pizzirani C., Adinolfi E., Lemoli R.M., Curti A., Idzko M., Panther E., Di Virgilio F. The P2X7 receptor: A key player in IL-1 processing and release // Journal of Immunology. 2006. V. 176,No 7.-P. 3877-3883.

130. Forehand J.R., Johnston Jr R.B., Bomalaski J.S. Phospholipase A2 activity in human neutrophils: Stimulation by lipopolysaccharide and possible involvement in priming for an enhanced respiratory burst // Journal of Immunology. 1993. V. 151, No 9. - P. 4918^1925.

131. Fields R.D., Burnstock G. Purinergic signalling in neuron-glia interactions // Nature Reviews Neuroscience. 2006. V. 7, No 6. - P. 423^136.

132. Fisher J.A., Girdler G., Khakh B.S. Time-resolved measurement of state-specific P2X2 ion channel cytosolic gating motions // Journal of Neuroscience. 2004. V. 24, No 46. - P. 10475-10487.

133. Frey D.G. The use of sea cucumber in poisoning fishes // Copeia. 1951. No 2. - P. 175-176.

134. Galla H.J., Sackmann E. Lateral diffusion in the hydrophobic region of membranes: use of pyrene excimers as optical probes // Biochimica et Biophysica Acta. 1974. V. 339, No 1. - P. 103-115.

135. Gayle S., Burnstock G. Immunolocalisation of P2X and P2Y nucleotide receptors in the rat nasal mucosa // Cell and Tissue Research. 2005. V. 319, No 1. - P. 27-36.

136. Gestetner B., Assa Y., Henis Y., Birk Y., Bondi A. Lucerne Saponins. IV. Relationship between their chemical constitution, and haemolytic and antifungal activities // J. Sci. Food and Agricult. 1971. V. 22, No 4. - P. 168-172.

137. Gestetner B., Assa Y., Henis Y., Tencer Y., Rotman M., Birk Y., Bondi A. Interaction of lucerne saponins with sterols // Biochim. Biophys. Acta. 1972. V. 270, No 1. - P. 181-187.

138. Gillis C.N. Panax ginseng pharmacology - a nitric oxide link // Biochem. Pharmacol. 1997. V. 54,No l.-P. 1-8.

139. Ghosn E.E., Cassado A.A., Govoni G.R., Fukuhara T., Yang Y., Monack D.M., Bortoluci K.R., Almeida S.R., Herzenberg L.A. Two physically, functionally, and developmentally distinct peritoneal macrophage subsets // Proc Natl Acad Sci U S A. 2010. V. 107, No 6. - P. 2568-2573.

140. Gorshkov B.A., Gorshkova I. A., Stonik V.A., Elyakov G.B. Effect of marine glycosides on adenosine triphospatase activity // Toxicon. 1982. V. 20, No 3. - P. 655-658.

141. Gorshkova I.A., Kalinovsky A.I., Ilyin S.G., Gorshkov B.A., Stonik V.A. Physicochemical characteristics of interaction of toxic triterpene glycosides from holothurians with rat brain Na+-K+-ATPase // Toxicon. 1989a.V. 27, No 8. - P. 937-945.

142. Gorshkova I.A., Gorshkov B.A., Stonik V.A. Inhibition of rat brain Na+-K+-ATPase by triterpene glycosides from holothurians // Toxicon. 1989b. V. 27, No 8. - P. 927-936.

!

143. Gorshkova I.A., Kalinin V.I., Gorshkov B.A., Stonik V.A. Two different modes of inhibition of the rat brain Na+-K+-ATPase by triterpene glycosides, psolusosides A and B, from the holothurian Psolusfabricii // Comp. Biochem. Physiol. 1999. V. 122, No 1. - P. 101-108.

144. Gorshkova I.A., Ilyin S.G., Stonik V.A. Physicochemical characteristics of interaction of saponins from holothurians (sea cucumber) with cell membranes // In: Saponin in food, feedstuffs and medicinal plants / Eds.Oleszek W., Marston A.: Kluwer Academic Publishers. 2000. - P. 219-225.

145. Greig A.V.H., Linge C., Terenghi G., McGrouther D.A., Burnstock G. Purinergic receptors are part of a functional signaling system for proliferation and differentiation of human epidermal keratinocytes // Journal of Investigative Dermatology. 2003. V. 120, No 6. - P. 1007-1015.

146. Grinvald A., Hildesheim R., Farber I.C., Anglister L. Improved fluorescent probes for the measurement of rapid changes in membrane potential // Biophys J. 1982. V. 39, No 3. - P. 301-308.

147. Grishin Y.I., Morozov E.A., Avilov S.A. Preliminary studies of antiviral activity of triterpene glycosides from holothurians // 8th conference young scientists on organic and bioorganic chemistry. Latvia. Riga. 1991.-P. 181.

148. Grol M.W., Panupinthu N., Korcok J., Sims S.M., Dixon S.J. Expression, signaling, and function of P2X7 receptors in bone // Purinergic Signalling. 2009. V. 5, No 2. - P. 205-221.

149. GrSschel-Stewart U., Bardini M., Robson T., Burnstock G. Localisation of P2X5 and P2X7 receptors by immunohistochemistry in rat stratified squamous epithelia // Cell and Tissue Research. 1999. V. 296, No 3. - P. 599-605.

150. Grynkiewicz G., Poenie M., Tsien R.Y. A new generation of Ca2+ indicators with greatly improved fluorescence properties // J. Biol. Chem. 1985. V. 260, No 6. - P. 3440-3450.

151. Habermehl G., Volkwein G. Aglycones of the toxins from the cuvierian organs of Holothuria forskali and a new nomenclature for the aglycones from Holothurioideae II Toxicon. 1971. V. 9, No 4. -P. 319-326.

152. Han H., Xu Q.Z., Tang H.F., Yi Y.H., Gong W. Cytotoxic holostane-type triterpene glycosides from the sea cucumber Pentacta quadrangularis II Planta Medica. 2010. V. 76, No 16. - P. 1900-1904.

153. Hanley P.J., Musset B., Renigunta V., Limberg S.H., Dalpke A.H., Sus R., Heeg K.M., Preisig-Miiller R., Daut J. Extracellular ATP induces oscillations of intracellular Ca2+ and membrane potential and promotes transcription of IL-6 in macrophages // Proc Natl Acad Sci USA. 2004. V. 101, No25.-P. 9479-9484.

154. Hattori M., Gouaux E. Molecular mechanism of ATP binding and ion channel activation in P2X receptors // Nature. 2012. V. 484, No 7397. - P. 207-212.

155. Housley G.D., Bringmann A., Reichenbach A. Purinergic signaling in special senses 11 Trends Neurosci. 2009. V. 32, No 3. - P. 128-141.

UY\V1 1 1 n « * t > > 'ig i , i , \ « >> u .

^ V i t I * , 'i » f / < ji 1 ' j 1 \ ft 1 > < t

156. Humphrey W., Dalke A., Schulten K. VMD: Visual molecular dynamics // Journal of Molecular Graphics. 1996. V. 14, No 1. - P. 33-38.

157. Hussain S., Stohlman S.A. Peritoneal macrophage from male and female SJL mice differ in IL-10 expression and macrophage maturation // Journal of Leukocyte Biology. 2012. V. 91, No 4. - P. 571-579.

158. Jankowski A., Grinstein S. A noninvasive fluorimetric procedure for measurement of membrane potential. Quantification of the NADPH oxidase-induced depolarization in activated neutrophils // Journal of Biological Chemistry. 1999. V. 274, No 37. - P. 26098-26104.

159. Jeong T.C., Kim H. J., Park J.I., Ha C.S., Park J.D., Kim S.L. Roh J.K. Protective effects of red ginseng saponins against carbon tetrachloride-induced hepatotoxicity in Sprague Dawley rats // Planta Med. 1997. V. 63, No 2. - P. 136-140.

160. Jiang L.H., Kim M., Spelta V., Bo X., Surprenant A., North R.A. Subunit arrangement in P2X receptors // Journal of Neuroscience. 2003. V. 23, No 26. - P. 8903-8910.

161. Kaczmarek-Hajek K., Lorinczi E., Hausmann R., Nicke A. Molecular and functional properties of P2X receptors-recent progress and persisting challenges // Purinergic Signalling. 2012. V. 8, No 3. - P. 375-417.

162. Kalinin V.I. Chemical morphology - new approach to analysis of structure-function relation of biomolecules and their evolution // 8-th conference of young scientists on organic and bioorganic chemistry, abstracts. Riga. Latvia: Latvian Academy of Sciences, Institute of Organic Synthesis. 1991. -P.197-198.

163. Kalinin V.I., Volkova O.V., Likhatskaya G.N., Prokofieva N.G., Agafonova I.G., Anisimov M.M., Kalinovsky A.I., Avilov S.A., Stonik V.A. Hemolytic activity of triterpene glucosides from the Cucumariidae family holothurians and evolution of this group of toxins // J. Nat. Toxins. 1992. V. 1, No 2.-P. 17-30.

164. Kalinin V.I., Prokofieva N.G., Likhatskaya G.N., Shentsova E.B., Agafonova I.G., Avilov S.A., Drozdova O.A, Stonik V.A. Hemolytic activity of triterpene glycosides from the Dendrochirotida order Holothurian II Abstr. 210th ACS. National Meet. Chikago. USA. Aug.20-24. 1995.-P. 151.

165. Kalinin V.I., Prokofieva N.G., Likhatskaya G.N., Schentsova E.B., Agafonova I.G., Avilov S.A., Drozdova O.A., Stonik V.A. Hemolytic activity of triterpene glycosides from the holothurian order Dendrochirotida: Some trends in the evolution of this group of toxins // Toxicon. 1996a. V. 34, No 4.-P. 475-483.

166. Kalinin V.I., Prokofieva N.G., Likhatskaya G.N., Schentsova E.B., Agafonova I.G., Avilov S.A., Drozdova O.A. Hemolytic activity of triterpene glycosides from the Dendrochirotida order

Holothyrian II Saponins Used in Traditional and Modern Medicine. / Eds. G.R. Waller and K. Yamasaki.: Plenum Press, New York. 1996b. - P. 557-564.

167. Kalinin V.I., Anisimov M.M., Prokofieva N.G., Avilov S.A., Afiyatullov Sh.Sh., Stonik V.A. Biological activities and biological role of triterpene glycosides from holothuroids (Echinodermata) II Echinoderm studies / Eds. Jangoux M., Laurense J.V.: Rotterdam Balckema A.A.: Brookfield. 1996c. V.5.-P. 139-181.

168. Kalinin V.I., Silchenko A.S., Avilov S.A., Stonik V.A., Smirnov A.V. Sea cucumbers triterpene glycosides, the recent progress in structural elucidation and chemotaxonomy // Phytochemistry Reviews. 2005. V. 4, No 2-3. - P. 221-236.

169. Kalinin V.I., Aminin D.L., Avilov S.A., Silchenko A.S., Stonik V.A. Triterpene glycosides from sea cucucmbers (holothurioidea, echinodermata). Biological activities and functions. // Studies in Natural Products Chemistry T / Ed. Atta-ur-Rahman.: Elsevier Science Publisher: The Netherlands. 2008. V. 35.-P. 135-196.

170. Kawate T., Michel J.C., Birdsong W.T., Gouaux E. Crystal structure of the ATP-gated P2X4 ion channel in the closed state // Nature. 2009. V. 460, No 7255. - P. 592-598.

171. Kalvegren H., Skoglund C., Helldahl C., Lerm M., Grenegard M., Bengtsson T. Toll-like receptor 2 stimulation of platelets is mediated by purinergic P2X1-dependent Ca2+ mobilisation, cyclooxygenase and purinergic P2Y1 and P2Y12 receptor activation // Thrombosis and Haemostasis. 2010. V. 103, No 2. - P. 398-407.

172. Khakh B.S., Bao X.R., Labarca C., Lester H.A. Neuronal P2X transmitter-gated cation channels change their ion selectivity in seconds // Nature Neuroscience. 1999. V. 2. No 4. - P. 322330.

173. Khakh B.S., Barnard E.A., Burnstock G. The IUPHAR Compendium of receptor characterization and classification. // London : IUPHAR Media. 2001. - P. 290-305.

174. Khakh B.S., Lester H.A. Control of P2X2 channel permeability by the cytosolic domain // Journal of General Physiology. 2002. V. 120, No 2. - P. 119-131.

175. Kim M., Jiang L.H., Wilson H.L., North R.A., Surprenant A. Proteomic and functional evidence for a P2X7 receptor signalling complex // EMBO Journal. 2001. V. 20, No 22. - P. 63476358.

176. Kim S.K., Himaya S.W.A. Triterpene glycosides from sea cucumbers and their biological activities // Advances in Food and Nutrition Research. 2012. V. 65. - P. 297-319.

177. King B.F., Liu M., Pintor J., Gualix J., Miras-Portugal M.T., Burnstock G. Diinosine pentaphosphate (IP5I) is a potent antagonist at recombinant rat P2X1 receptors // British Journal of Pharmacology. 1999. V. 128, No 5. - P. 981-988.

178. King B.F., Burnstock G., BoyerJ.L. The IUPHAR compendium of receptor characterization and classification. // London : IUPHAR Media. 2001. - P. 306-320.

179. Kitagawa I., Kobayashi M., Okamoto Y., Yoshikawa M., Hamamoto Y. Structures of sarasinosides Al, Bl, and CI - new norlanostane triterpenoid oligoglycosides from the Palanan marine sponge Sateropus sarasinosum II Chem. Pharm. Bull. 1987. V. 35, No 12. - P. 5036-5039.

180. Kobayashi M., Hori M., Kan K., Yasuzawa T., Matsui M., Suzuki Sh., Kitagawa I. Marine natural products. XXVII. Distribution of lanostane - type triterpene oligoglycosides in 10 kinds of okinawan sea cucumbers // Chem. Pharm. Bull. 1991. V. 39, No 9. - P. 2282-2287.

181. Kostetsky E.Y., Sanina N.M., Mazeika A.N., Tsybulsky A.V., Vorobyeva N.S., Shnyrov V.L. Tubular immunostimulating complex based on cucumarioside A2-2 and monogalactosyldiacylglycerol from marine macrophytes // Journal of Nanobiotechnology. 2011. V. 9. -P. 1-9

182. Kuznetsova T.A., Anisimov M.M., Popov A.M., Baranova S.I., Afiyatullov Sh.Sh., Kapustina I.I., Antonov A.S., Elyakov G.B. A comparative study in vitro of physiological activity of triterpene glycosides of marine invertebrates of Echinoderm type // Comp. Biochem. Physiol. 1982. V. 73, No 1. P. 41-43.

183. Lacaille-Dubois M.A. Biologically and pharmacologically active saponins from plants: recent advances // Saponins in food, feedstuffs and medicinal plants / Eds. Oleszek W., Marston A.: Springer Netherlands. 2000. V. 45. - P. 205-218.

184. Lammas D.A., Stober C., Harvey C.J., Kendrick N., Panchalingam S., Kumararatne D.S. ATP-Induced Killing of Mycobacteria by Human Macrophages Is Mediated by Purinergic P2Z(P2X7) Receptors // Immunity. 1997. V. 7, No 3. - P. 433-444.

185. Lasley B.J., Nigrelli R.F. The effect of crude holothurin on leucocyte phagocytosis // Toxicon. 1970. V. 8, No 4. - P. 301-306.

186. Launikonis B.S., Stephenson D.G. Effect of saponin treatment on the sarcoplasmic reticulum of rat, cane toad and crustacean (yabby) skeletal muscle // J. Physiol. London. 1997. V. 504. - P. 425437.

187. Lazarowski E.R., Boucher R.C., Harden T.K. Mechanisms of release of nucleotides and integration of their action as P2X- and P2Y-receptor activating molecules // Mol Pharmacol. 2003. V. 64,No4.-P. 785-795.

188. Lecut C., Frederix K., Johnson D.M., Deroanne C., Thiry M., Faccinetto C., Marée R., Evans R.J., Volders P.G.A., Bours V., Oury C. P2X1 ion channels promote neutrophil chemotaxis through Rho kinase activation // Journal of Immunology. 2009. V. 183, No 4. - P. 2801-2809.

189. Lee H.Y., Kim S.I., Lee S.K., Chung H.Y., Kim K.W. Differentiation mechanism of ginsenosides in cultured murine F9 teratocarcinoma stem cells // Proc. Intern. Ginseng Symp.-Seoul, Korea. 1993.-P. 127-131.

190. Lemaire I., Leduc N. Purinergic P2X7 receptor function in lung alveolar macrophages: Pharmacologic characterization and bidirectional regulation by Thl and Th2 cytokines // Drug Development Research. 2003. V. 59, No 1. - P. 118-127.

191. Leung Y.M., Ou Y.J., Kwan C.Y., Loh T.T. Specific interaction between tetrandrine and Quillaja saponins in promoting permeabilization of plasma membrane in human leukemic HL-60 cells // Biochim. Biophys. Acta - Biomembranes. 1997. V. 1325, No 2. - P. 318-328.

192. Levitzki A. Quantitative aspects of ligand binding to receptors in: cellular receptors for hormones and neurotransmitters // John Wiley and Sons Ltd. 1980. - P. 412.

193. Lewis C.J., Evans R.J. Comparison of P2X receptors in rat mesenteric, basilar and septal (coronary) arteries // Journal of the Autonomic Nervous System. 2000. V. 81, No 1-3. - P. 69-74.

194. Likhatskaya G.N., Kalinin V.I., Avilov S.A., Drozdova O.A., Anisimov M.M. Structure and membrane activity of the cucumber triterpenoids: the role of the sulfate and methyl groups in the glycoside carbohydrate part // Abstr. 1st Euroconference on marine natural products. Athens - Greece. 2-6, November. 1997. - P. 137.

195. Liu B.S., Yi Y.H., Li L., Sun P., Han H., Sun G.Q., Wang X.H., Wang Z.L. Argusides D and E, two new cytotoxic triterpene glycosides from the sea cucumber Bohadschia argus Jaeger // Chemistry and Biodiversity. 2008. V. 5, No 7. - P. 1425-1433.

196. Llewellyn-Smith I.J., Burnstock G. Ultrastructural localization of P2X3 receptors in rat sensory neurons // NeuroReport. 1998. V. 9, No 11. - P. 2545-2550.

197. Locovei S., Bao L., Dahl G. Pannexin 1 in erythrocytes: Function without a gap // Proc Natl Acad Sci USA. 2006. V. 103, No 20. - P. 7655-7659.

198. Loesch A., Burnstock G. Electron-immunocytochemical localization of P2X1 receptors in the rat cerebellum // Cell and Tissue Research. 1998. V. 294, No 2. - P. 253-260.

199. Loesch A., Burnstock G. Immunoreactivity to P2X6 receptors in the rat hypothalamo-neurohypophysial system: an ultrastructural study with extravidin and colloidal gold-silver labelling // Neuroscience. 2001. V. 106, No 3. - P. 621-631.

200. Ma L.Y., Xiao P.G., Liang F.Q., Chi M.G., Dong S.J. Effect of saponins of Panax notoginseng on synaptosomal Ca-45 uptake // Acta Pharmacol. Sin. 1997. V. 18. No 3. - P. 213-215.

201. Mahato S.B., Sarkar S.K., Poddar G. Triterpenoid saponins // Phytochemistry. 1988. V. 27, No 10.-P. 3037-3067.

202. Mahato S.B., Nandy A.K. Triterpenoid saponins discovered between 1987 and 1989 // Phytochemistry. 1991. V. 30, No 5. - P. 1357 - 1390.

* t / 1

203. Masin M., Kerschensteiner D., Dumke K., Rubio M.E., Soto F. Fe65 interacts with P2X2 subunits at excitatory synapses and modulates receptor function // Journal of Biological Chemistry. 2006. V. 281, No 7. - P. 4100-4108.

204. Matsuno T., Ishida T. Distribution and Seasonal Variation of Toxic Principles of Sea Cucumber (Holothuria leucospilota Brandt) // Experientia. 1969. V. 25, No 12. - P. 1261.

205. Matsuno T., Sakushima A., Ishida T. Seasonal variation of saponin and its distribution in the body of sea cucumber Stichopus Japonicus II Bull. Soc. Sci. Fish. Japan. 1973. V. 39, No 3. - P. 307310.

206. Meyer M.P., Groschel-Stewart U., Robson T., Burnstock G. Expression of two ATP-gated ion channels, P2X5 and P2X6, in developing chick skeletal muscle // Developmental Dynamics. 1999. V. 216, No 4-5. - P. 442-449.

207. Miyazawa A., Fujiyoshi Y., Stowell M., Unwin N. Nicotinic acetylcholine receptor at 4.6 A resolution: Transverse tunnels in the channel wall // Journal of Molecular Biology. 1999. V. 288, No 4. -P. 765-786.

208. Molleman A. Patch Clamping: An introductory guide to patch clamp electrophysiology // John Wiley and Sons Ltd. 2003. - P. 108-110.

209. Morel F., Doussiere J., Vignais P.V. The superoxide-generating oxidase of phagocytic cells. Physiological, molecular and pathological aspects // European Journal of Biochemistry. 1991. V. 201, No 3. - P. 523-546.

210. Nagaya N., Tittle R.K., Saar N., Dellal S.S., Hume R.I. An intersubunit zinc binding site in rat P2X2 receptors II Journal of Biological Chemistry. 2005. V. 280, No 28. - P. 25982-25993.

211. Nakashima H., Matsui T., Yoshida 0., Isowa Y., Kido Y., Motoki Y., Ito M., Shigeta S., Mori T.,Yamamoto N. A new anti - human immunodeficiency virus substance, glycyrrhizin sulfate endowment of glycyrrhizin with reverse transcriptase - inhybitory activity by chemical modification // Jpn. J. Cancer Res. 1987. V. 78, No 8. - P. 767-771.

212. Nicke A., Baumert H.G., Rettinger J., Eichele A., Lambrecht G., Mutschler E., Schmalzing G. P2X1 and P2X3 receptors form stable trimers: A novel structural motif of ligand-gated ion channels //EMBO Journal. 1998. V. 17, No 11.-P. 3016-3028.

213. Nigrelli R.F. The Effects of Holothurin on Fish and Mice with Sarcoma 180 // Zoologica (New York). 1952. V. 37. - P. 89-90.

214. Nigrelli R.F., Jakowska S. Effects of holothurin, a steroid saponin from the Bahamian sea cucumber {Actinopyga agassizi), on various biological systems // Annals of the New York Academy of Sciences. 1960. V. 90. - P. 884-892.

, \

215. Nori S., Fumagalli L., Во X., Bogdanov Y., Bumstock G. Coexpression of mRNAs for P2X1, P2X2 and P2X4 receptors in rat vascular smooth muscle: An in situ hybridization and RT-PCR study // Journal of Vascular Research. 1998. V. 35, No 3. - P. 179-185.

216. North R.A. Molecular physiology of P2X receptors // Physiological reviews. 2002. V. 82, No 4.-P. 1013-1067.

217. Nurden A.T. Does ATP act through P2X1 receptors to regulate platelet activation and thrombus formation // Journal of Thrombosis and Haemostasis. 2007. V. 5, No 5. - P. 907-909.

218. Odashima S., Ohta Т., Arichi S., Abe H., Kitagawa I., Kohno H., Matsuda T. Control of phenotypic expression of cultured B-16 Melanoma cells by plant glycosides // Cancer Res. 1985. V. 45, No 6.-P. 2781-2784.

219. Oh K.W., Kim H.S., Wagner G.C. Inhibitory effects of ginseng total saponin on methamphetamine-induced striatal dopamine increase in mice // Arch. Pharm. Res. 1997. V. 20, No 5. -P. 516-518.

220. Olsen R.A. Triterpeneglycosides as inhibitors of fungal growth and metabolism. Role of the sterol contents of some fungi // Physiol. Plant. 1973a. V. 28. - P. 507-515.

221. Olsen R.A. Triterpene glycosides as inhibitors of fungal growth and metabolism. The effect of aescin on fungi with reduced sterol contents // Physiol. Plant. 1973b. V. 29. - P. 145-149.

222. Osbourn A., Goss R.J.M., Field R.A. The saponins-polar isoprenoids with important and diverse biological activities // Natural Product Reports. 2011. V. 28, No 7. - P. 1261-1268.

223. P2 Receptors: P2X Ion Channel Family // Sigma-RBI eHandbook: URL http://www.sigmaaldrich.com/catalog/search?interface=All&term=P2X+Ion+Channel+Family&lang:= en&region=RU&focus=site&N=0+220003052+219853229+219853286&mode=partialmax (дата обращения 18.10.2013)

224. Podolak I., Galanty A., Sobolewska D. Saponins as cytotoxic agents: A review // Phytochemistry Reviews. 2010. V. 9, No 3. - P. 425^174.

225. Ralevic V., Burnstock G. Receptors for purines and pyrimidines // Pharmacological Reviews. 1998. V. 50, No 3. - P. 413-^92.

226. Roberts J.A., Evans R.J. ATP binding at human P2X1 receptors: Contribution of aromatic and basic amino acids revealed using mutagenesis and partial agonists // Journal of Biological Chemistry. 2004. V. 279, No 10. - P. 9043-9055.

227. Roberts J.A., Vial C., Digby H.R., Agboh K.C., Wen H., Atterbury-Thomas A., Evans R.J. Molecular properties of P2X receptors // Pflugers Archiv European Journal of Physiology. 2006. V. 452, No 5.-P. 486-500.

228. Rong W., Burnstock G., Spyer K.M. P2X purinoceptor-mediated excitation of trigeminal lingual nerve terminals in an in vitro intra-arterially perfused rat tongue preparation // Journal of Physiology. 2000. V. 524, No 3. - P. 891-902.

229. Royle S.J., Bobanovic L.K., Murrell-Lagnado R.D. Identification of a non-canonical tyrosine-based endocytic motif in an ionotropic receptor // Journal of Biological Chemistry. 2002. V. 277, No 38. - P. 35378-35385.

230. Sanina N.M., Kostetsky E.Y., Shnyrov V.L., Tsybulsky A.V., Novikova O.D., Portniagina O.Y., Vorobieva N.S., Mazeika A.N., Bogdanov M.V. The influence of monogalactosyldiacylglycerols from different marine macrophytes on immunogenicity and conformation of protein antigen of tubular immunostimulating complex // Biochimie. 2012. V. 94, No 4.-P. 1048-1056.

231. Schulman E.S., Glaum M.C., Post T., Wang Y., Raible D.G., Mohanty J., Butterfield J.H., Pelleg A. ATP modulates anti-IgE-induced release of histamine from human lungs mast cells // American Journal of Respiratory Cell and Molecular Biology. 1999. V. 20, No 3. - P. 530-537.

232. Seeley E.H., Caprioli R.M. Molecular imaging of proteins in tissues by mass spectrometry // Proc Natl Acad Sci U S A. 2008. V. 105, No 47. - P. 18126-18131.

233. Shany S., Bernheimer A.W., Grushoff P.S., Kim K.S. Evidence for membrane cholesterol as the common binding site for cereolysin, streptolysin O and saponin // Mol. Cell Biochem. 1974. V. 3, No 3. - P. 179-186.

234. Shibata S. Resent studies on biologically active constituents of medicinal plants-biologically active saponins and sapogenins and their chemical modifications // In: Third International Conference on Chemistry and Biotechnology of Biologically Active Natural Products. Sofia, Bulgaria. 1985. V. 1. -P. 148-167.

235. Shigemoto-Mogami Y., Koizumi S., Tsuda M., Ohsawa K., Kohsaka S., Inoue K. Mechanisms underlying extracellular ATP-evoked interleukin-6 release in mouse microglial cell line, MG-5 // Journal of Neurochemistry. 2001. V. 78, No 6. - P. 1339-1349.

236. Shimada S. Antifungal steroid glycoside from sea cucumber // Science. 1969. V. 163, No 874.-P. 1462.

237. Silchenko A.S., Kalinovsky A.I., Avilov S.A., Andryjaschenko P.V., Dmitrenok P.S., Menchinskaya E.S., Aminin D.L., Kalinin V.I. Structure of cucumarioside h from the sea cucumber Eupentacta fraudatrix (Djakonov et Baranova) and cytotoxic and immunostimulatory activities of this saponin and relative compounds // Natural Product Research. 2013. V. 27, No. 19. - P. 1776-1783.

238. Sim J.A., Park C.K., Oh S.B., Evans R.J., North R.A. P2X 1 and P2X 4 receptor currents in mouse macrophages // British Journal of Pharmacology. 2007. V. 152, No 8. - P. 1283-1290.

239. Sommer J.A., Fisette P.L., Hu Y., Denlinger L.C., Guerra A.N., Bertics P.J., Proctor R.A. Purinergic receptor modulation of LPS-stimulated signaling events and nitric oxide release in RAW 264.7 macrophages // Journal of Endotoxin Research. 1999. V. 5, No 1-2. - P. 70-74.

240. Stonik V.A. Some terpenoid and steroid derivatives from echinoderms and sponges // Pure and Appl. Chem. 1986. V. 58, No 3. - P. 423^36.

241. Stonik V.A., Kalinin V.I., Avilov S.A. Toxins from sea cucumbers (Holothuroids): chemical structures, properties, taxonomic distribution, biosynthesis and evolution // J. Nat. Toxins. 1999. V. 8, No 2.-P. 235-248.

242. Stonik V.A., Aminin D.L., Boguslavski V.M., Avilov S.A., Agafonova I.G., Silchenko A.S., Ponomarenko L.P., Prokofieva N.G., Chaikina, E.L. Immunostimulatory means Cumaside and pharmaceutical composition on its base. Patent of the Russian Federation 2004; No 2004120434/15

243. Sun P., Liu B.S., Yi Y.H., Li L., Gui M., Tang H.F., Zhang D.Z., Zhang S.L. A new cytotoxic lanostane-type triterpene glycoside from the sea cucumber Holothuria impatiens II Chemistry and Biodiversity. 2007. V. 4, No 3. - P. 450-457.

244. Surprenant A., Rassendren F., Kawashima E., North R.A., Buell G. The cytolytic P2Z receptor for extracellular ATP identified as a P2X receptor (P2X7) // Science. 1996. V. 272, No 5262. -P. 735-738.

245. Surprenant A., North R.A. Signaling at Purinergic P2X Receptors // Annual Review of Physiology V. 71. 2009. - P. 333-359.

246. Takahashi K. Development and Differentiation of Macrophages and Related Cells // Historical Review and Current Concepts Journal of Clinical and Experimental Hematopathology. 2000. V. 41.-P 1-33.

247. Thorn P. Ca2+ influx during agonist and Ins(2,4,5)P3-evoked Ca2+ oscillations in HeLa epithelial cells // Journal of Physiology. 1995. V. 482, No 2. - P. 275-281.

248. Tôrnquist K. Depolarization of the membrane potential decreases the ATP-induced influx of extracellular Ca2+ and the refilling of intracellular Ca2+ stores in rat thyroid FRTL-5 cells // Journal of Cellular Physiology. 1991. V. 149, No 3. - P. 485-491.

249. Tschesche U.R., Wulff G. Chemic und biologic der ssponine // In: Progress in the Chemistry of Organic Natural Products.: Wien, Springer Verlag. 1973. V. 30. - P. 461-606.

250. Van Dyck S., Flammang P., Meriaux C., Bonnel D., Salzet M., Fournier I., Wisztorski M. Localization of secondary metabolites in marine invertebrates: Contribution of MALDI MSI for the study of saponins in Cuvierian tubules of H.forskali II PLoS ONE. 2010. V. 5, No 11. el 3923

251. Van Dyck S., Caulier G., Todesco M., Gerbaux P., Fournier I., Wisztorski M., Flammang P. The triterpene glycosides of Holothuria forskalv. Usefulness and efficiency as a chemical defense

tw

I K

\ I

mechanism against predatory fish // Journal of Experimental Biology. 2011. V. 214, No 8. - P. 1347— 1356.

252. Verbist J.E. Pharmacological effect of compounds from echinoderms // In: Echinoderm Studies / Eds. M. Jangoux, J. Lawrence. Rotterdam: A. A. Balkema. 1993. V. 4. - P. 111-186.

253. Waller G.R., Yamasaki K. (eds.). Saponins used in traditional and modem medicine : Plenum Press. New York; London. 1996a. V. 404. 606 p.

254. Waller G.R., Yamasaki K. (eds.). Saponins used in food and agriculture : Plenum Press. New York; London. 1996b. V. 404. 441 p.

255. Wildman S.S., King B.F., Burnstock G. Modulation of ATP-responses at recombinant rP2X4 receptors by extracellular pH and zinc // British Journal of Pharmacology. 1999. V. 126, No 3. - P. 762-768.

256. Wu J., Yi Y.H., Tang H.F., Wu H.M., Zhou Z.R. Hillasides A and B, two new cytotoxic triterpene glycosides from the sea cucumber Holothuria hilla Lesson // Journal of Asian Natural Products Research. 2007. V. 9, No 7. - P. 609-615.

257. Xu Q.F., Fang X.L., Chen D.F. Pharmacokinetics and bioavailability of ginsenoside Rbl and Rgl from Panax notoginseng in rats // Journal of Ethnopharmacology. 2003. V. 84, No 2-3. - P. 187— 192.

258. Yamanouchi T. On the poisonous substance contained in holothurians // Publ Seto Marine Biol Lab. 1955. V. 4. - P. 183-203.

259. Yamasaki Y., Ito K., Enomoto Y., Sutko J.L. Alterations by saponins of passive Ca2+ permeability and Na+/Ca2+ exchange activity of canine cardiac sarcolemmal vesicles // Biochim Biophys Acta. 1987. V. 897, No 3. - P. 481-487.

260. Zhang S.Y., Tang H.F., Yi Y.H. Cytotoxic triterpene glycosides from the sea cucumber Pseudocolochirus violaceus II Fitoterapia. 2007. V. 78, No 4. - P. 283-287.

261. Zhang W., Zhang C., Liu R., Li H., Zhang J., Mao C., Chen C. Quantitative determination of Astragaloside IV, a natural product with cardioprotective activity, in plasma, urine and other biological samples by HPLC coupled with tandem mass spectrometry // Journal of Chromatography B: Analytical Technologies in the Biomedical and Life Sciences. 2005. V. 822, No 1-2. - P. 170-177.

262. Zimmermann H. Extracellular metabolism of ATP and other nucleotides // Naunyn-Schmiedeberg's Archives of Pharmacology. 2000. V. 362, No 4-5. - P. 299-309.