Цитокинсинтетическая активность лимфоцитов периферической крови при остром лимфобластном лейкозе у детей тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.09, кандидат медицинских наук Мазитова, Елена Наильевна

• Мазитова, Елена Наильевна
• кандидат медицинских наук
• 2004

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Мазитова, Елена Наильевна

Введение

Глава 1. Роль иммунной системы в поддержании ремиссии В-линейного острого лимфобластного лейкоза (обзор литературы).

Глава 2. Общая характеристика больных и методы исследования.

2.1. Общая характеристика больных.

2.2. Методы исследования.

2.3. Методика определения внутриклеточного синтеза цитокинов лимфоцитами периферической крови.

2.4. Состав субпопуляций лимфоцитов и цитокинсинтетической активности лимфоцитов в периферической крови детей группы сравнения.

Глава 3. Субпопуляции лимфоцитов и их цитокинсинтетическая активность у детей в дебюте В-ОЛЛ.

3.1. Клинико-гематологическая характеристика больных в остром периоде острого лимфобластного лейкоза.

3.2. Состав лимфоидных популяций периферической крови.

3.3. Цитокинсинтетическая активность лимфоцитов периферической крови.

Глава 4. Субпопуляции лимфоцитов и их цитокинсинтетическая активность у детей в периоды ремиссии В-ОЛЛ на фоне химиотерапии.

4.1. Группа больных, обследованных по окончании интенсивной полихимиотерапии.

4.1.1. Клинико-гематологическая характеристика больных острым лимфобластным лейкозом, обследованных по окончании интенсивной химиотерапии.

4.1.2. Мембранные маркеры лимфоцитов периферической крови в группе детей, обследованных после окончания интенсивной полихимиотерапии.

4.1.3. Цитокинсинтетическая активность лимфоцитов периферической крови у пациентов после окончания интенсивной химиотерапии.

4.2. Группа больных, обследованных на фоне поддерживающей химиотерапии.

4.2.3. Клинико-гематологическая характеристика больных острым лимфобластным лейкозом, обследованных на фоне поддерживающей химиотерапии.

4.2.4. Мембранные маркеры лимфоцитов периферической крови у пациентов на фоне поддерживающей химиотерапии.

4.2.5. Цитокинсинтетическая активность лимфоцитов периферической крови у пациентов на фоне поддерживающей терапии.

Глава 5. Субпопуляции лимфоцитов и их цитокинсинтетическая активность у детей в период ремиссии В-ОЛЛ после окончания программной химиотерапии.

5.1. Клинико-гематологическая характеристика больных острым лимфобластным лейкозом, обследованных после окончания программной химиотерапии.

5.2. Состав лимфоидных популяций периферической крови у детей после окончания программной химиотерапии.

5.3. Цитокинсинтетическая активность лимфоцитов периферической крови детей после окончания программной химиотерапии.

Глава 6. Сравнительная характеристика субпопуляций лимфоцитов периферической крови и их цитокинсинтетической активности у детей разные периоды В-ОЛЛ (обсуждение).

Выводы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Цитокинсинтетическая активность лимфоцитов периферической крови при остром лимфобластном лейкозе у детей»

Актуальность проблемы.

Острый лимфобластный лейкоз (OJIJI) является наиболее частым онкологическим заболеванием у детей. Использование современной программной химиотерапии в последние годы позволяет достичь выхода в ремиссию более чем у 90% больных, а пятилетней безрецидивной выживаемости у 77-80% детей [Harms DO at al.,2000; Schrappe M at al., 2000].

Несмотря на достигнутые успехи в лечении OJIJI у детей, сохраняется группа больных, у которых проведение современной комплексной химиотерапии неэффективно. Это «первично рефрактерные» к лечению больные (2-3% пациентов), а также дети, у которых развиваются рецидивы заболевания. Результаты лечения этих больных остаются неудовлетворительными. Все это стимулирует к поиску причин резистентности и возможных путей её преодоления.

Рефрактерность лейкемических клеток к высокодозной химиотерапии, а также развитие рецидивов может быть обусловлено особенностями биологии резидуальных клеток и/или нарушениями противоопухолевого иммунитета. В механизме нарушений противоопухолевого иммунитета важную роль может играть изменение функции лимфоцитов и, в частности, нарушение синтеза таких цитокинов, как IFN-y, TNF-a и IL-2, участвующих в клеточном противоопухолевом иммунитете.

В частности, имеются данные о прямой зависимости уровня TNF-a в плазме крови и абсолютного и относительного содержания лейкемических клеток в периферической крови [Потапнев М.П. и соавт., 2003]. Предполагается, что данный цитокин участвует в миграции из костного мозга в периферическую кровь лейкемических клеток.

Однако, особенности внутриклеточного синтеза цитокинов IFN-y, TNF-a и IL-2, лимфоцитов крови у детей в разные периоды OJIJI изучены мало.

При OJIJI у детей выявлено снижение IFN-y и IL-2 продуцирующих клеточных популяций Т-хелперов и Т-супрессоров, причем наиболее низким был уровень синтеза IL-2. Для восстановления нормального количества IL-2-синтезирующих клеток требовалось 2-3 года после прекращения химиотерапии (Xao-Li Z. et al., 2000). Однако в других исследованиях обнаружено повышение уровня синтеза IFN-y в течение периода терапии и снижение после прекращения лечения (Duan Y. at al., 2001). Описана нормализация IL-2 и IFN-y синтезирующих клеточных популяций Т-хелперов и Т-супрессоров через 6 месяцев после прекращения химиотерапии во всех случаях исследования (Zhang XL at al., 2000).

В связи с изложенным представляется актуальным проведение исследований особенностей клеточного иммунитета у детей в разные периоды острого лимфобластного лейкоза с применением имуноцитологических методов оценки фенотипа и функциональных свойств клеток, в частности цитокинсинтетической активности лимфоцитов периферической крови.

Цель исследования:

Целью исследования являлось изучение цитокинсинтетической активности лимфоцитов крови у детей в дебюте острого лимфобластного лейкоза и в различные периоды ремиссии заболевания.

Задачи исследования:

1. Изучить внутриклеточный синтез цитокинов: интерферона-гамма, фактора некроза опухоли-альфа и интерлейкина-2 лимфоцитами крови у практически здоровых детей.

2. Определить основные субпопуляции лимфоцитов крови и внутриклеточный уровень интерферона-гамма, фактора некроза опухоли-альфа и интерлейкина-2 в лимфоцитах крови у детей в дебюте острого лимфобластного лейкоза.

3. Изучить иммунофенотип лимфоцитов крови и их цитокинсинтетическую активность у детей в разные периоды ремиссии острого лимфобластного лейкоза на фоне химиотерапии.

4. Определить основные субпопуляции лимфоцитов крови и их цитокинсинтетическую активность в периоде ремиссии острого лимфобластного лейкоза у детей после прекращения программной химиотерапии.

Научная новизна:

Впервые определен внутриклеточный синтез цитокинов IFN-y, TNF-a и IL-2 лимфоцитами крови у детей в различные периоды острого лимфобластного лейкоза.

Впервые установлено, что уровень цитокинсинтезирующих лимфоцитов тесно связан с количеством бластов в крови. Процент лимфоцитов, синтезирующих IFN-y, TNF-a и IL-2, у больных с низким бластозом соответствовал показателям группы сравнения. При высоком бластозе в крови уровень цитокинсинтезирующих лимфоцитов был резко снижен.

Получены данные о чрезвычайно высокой интенсивности экспрессии изученных внутриклеточных цитокинов в остром периоде заболевания независимо от уровня бластоза в крови и процента цитокинсинтезирующих клеток, что отражает высокую функциональную активность лимфоцитов крови в дебюте острого лимфобластного лейкоза.

Показано, что процент цитокинсинтезирующих лимфоцитов крови сохраняется на уровне показателей группы сравнения в различные периоды ремиссии заболевания на фоне химиотерапии, а также после окончания программной химиотерапии.

Установлено, что у больных OJIJI с низким уровнем бластных клеток в крови в дебюте заболевания состав популяций лимфоцитов периферической крови s соответствовал показателям нормы. Изменения в составе субпопуляций лимфоцитов выявлялись лишь у детей при уровне бластных клеток более 49%. На фоне лейкоцитоза за счет лейкемических клеток наблюдалось снижение как относительных, так и абсолютных показателей содержания Т-лимфоцитов и их субпопуляций.

Установлено, что процентное содержание зрелых Т-лимфоцитов и их CD4+ и CD8+ субпопуляций, а также NK-клеток нормализуется к окончанию интенсивной химиотерапии.

Выявлено, что на фоне проведения программной химиотерапии отмечается резкое угнетение В-линейного звена иммунитета. Содержание В-лимфоцитов возвращается в пределы нормальных значений после окончания программной химиотерапии.

Практическая значимость работы:

Определена цитокинсинтетическая активность лимфоцитов периферической крови у практически здоровых детей, что может быть использовано в качестве нормативных показателей при оценке состояния иммунной системы.

Установлено, что в дебюте острого лимфобластного лейкоза интенсивность флюоресценции внутриклеточных цитокинов в лимфоцитах крови значительно превышает показатели группы сравнения, что косвенно указывает на напряженность противоопухолевого иммунитета в остром периоде заболевания.

В различные периоды ремиссии В-линейного острого лимфобластного лейкоза процентный состав Т-лимфоцитов и их субпопуляций, а также интенсивность экспрессии внутриклеточных цитокинов соответствует показателям практически здоровых детей (группа сравнения). Полученные данные свидетельствуют о достаточной стабильности Т-клеточного иммунитета, что, вероятно, способствует поддержанию ремиссии B-OJIJI после окончания программной химиотерапии.

Выявлено значительное угнетение В-кпеточного звена иммунитета, что необходимо учитывать при выработке терапевтической тактики ведения данных больных и при проведении вакцинации детей в период ремиссии OJIJI.

Полученные данные дают представление о функциональном состоянии иммунной системы при остром лимфобластном лейкозе.

Внедрение результатов работы в практику:

Результаты исследования, в частности определение функциональной активности лимфоцитов по их способности к внутриклеточному синтезу цитокинов IFN-y, TNF-a и IL-2, внедрены в работу клинико-диагностической лаборатории ГУ НИИ педиатрии НЦЗД РАМН и могут быть использованы в работе иммунологических и гематологических лабораторий.

Заключение диссертации по теме «Педиатрия», Мазитова, Елена Наильевна

ВЫВОДЫ:

1. У практически здоровых детей (группа сравнения) средний процент лимфоцитов, синтезирующих цитокины, составил: IFN-y - 29+3,9%, TNF-a -27+3,0%, IL-2 - 10,0+1,3%; абсолютное количество - IFN-y -0,879+0,113х109/л, TNF-a - 0,855+0,103x109/л, IL-2 - 0,345±0,068х109/л. Интенсивность экспрессии внутриклеточной метки для этой группы составила: IFN-y - 303+60,8, TNF-a - 93±7,5, IL-2 - 114+17,5.

2. В дебюте острого лимфобластного лейкоза у детей с невысоким уровнем бластов в крови процентное содержание цитокинсинтезирующих лимфоцитов достоверно не отличается от показателей группы сравнения. Абсолютное количество цитокинсинтезирующих лимфоцитов в данной группе больных достоверно выше показателей группы сравнения (р<0,001).

3. У детей с высоким уровнем бластов в крови отмечается резкое снижение как абсолютных, так и относительных показателей лимфоцитов, синтезирующих цитокины. Обнаружена отрицательная корреляция между уровнем бластных клеток в крови и количеством лимфоцитов, синтезирующих цитокины IFN-у, TNF-a и IL-2.

4. Лимфоциты периферической крови больных в дебюте ОЛЛ обладают высокой способностью к синтезу внутриклеточных цитокинов, оцениваемому по интенсивности флюоресценции внутриклеточной метки.

Средние каналы флюоресценции IFN-y, TNF-a и IL-2 в 2-4 раза превышают показатели группы сравнения, что отражает высокую функциональную активность лимфоцитов крови.

5. Относительное содержание зрелых Т-лимфоцитов, Т-хелперов/индукторов, Т-супрессоров/цитотоксических клеток, а также NK-клеток нормализуется к окончанию интенсивной химиотерапии. В связи с лейкопенией на фоне лечения абсолютное количество этих клеток нормализуется после окончания программной химиотерапии.

6. Содержание В-лимфоцитов значительно снижено на фоне химиотерапии и возвращается в пределы нормальных значений только после окончания программной химиотерапии.

7. Восстановление процента лимфоцитов, синтезирующих IFN-y и IL-2, происходит после окончания интенсивной химиотерапии, a TNF-a - только в период поддерживающей химиотерапии. Среднее абсолютное количество IFN-у-синтезирующих лимфоцитов остается низким во все периоды наблюдения, TNF-a- и IL-2-синтезирующих клеток восстанавливается после окончания программной химиотерапии.

8. Интенсивность флюоресценции внутриклеточных цитокинов IFN-y, TNF-a и EL-2 сохраняется на высоком уровне во все периоды ремиссии, что свидетельствует о сохранности функциональных свойств лимфоцитов периферической крови.

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ:

1. Полученные данные о цитокинсинтетической активности лимфоцитов крови у больных В-линейным острым лимфобластным лейкозом могут использоваться для оценки состояния их иммунной системы.

2. Значительное угнетение В-клеточного звена иммунитета необходимо учитывать при выработке терапевтической тактики ведения больных ОЛЛ и при проведении вакцинации детей в период ремиссии острого лимфобластного лейкоза.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Мазитова, Елена Наильевна, 2004 год

1. Вербняк ВА. Клинико-иммунологические показатели у детей с острым лейкозом и нейтропенией при иммунизации АДС-(АД)-М-анатоксином. Дисс. . канд. мед. наук, Москва, 1999

2. Возианов А.Ф., Бутенко А.К., Зак К.П. Цитокины. Биологические и противоопухолевые свойства. Киев. 1998, стр. 53

3. Гаврикова НВ. Клинико-иммунологическая характеристика стволово-клеточного подварианта острого лимфобластного лейкоза у детей. Автореферат дисс. канд. мед.наук, М., 2000, 24с.

4. Грачева ЛА. Цитокины в онкогематологии. Москва, 1996

5. Дроздова ТС, Махонова ЛА и др. Иммунокоррекция препаратом тимуса (Тактивином) в программном лечении детей, больных острым лимфобластным лейкозом. Гематология и трансфузиология 1990;1:14-16

6. Кадагидзе ЗП и др. Иммунологические подходы к использованию цитокинов в комплексном лечении злокачественных новообразований. Вопросы онкогематологии 1995;41(2):45

7. Кисляк НС, Ленская РВ, Шведов ЕЮ. Ретроспективная оценка иммунологических показателей крови у детей в разные сроки ремиссии острого лимфобластного лейкоза. Гематология и трансфузиология 1996;41(2):7-10

8. Коленкова ГВ, Ленская РВ, Кисляк НС. Результаты моноклонального иммунофенотипирования лейкозных клеток костного мозга у 169 детей с острым лейкозом. Гематология и трансфузиология 1997;42(5):25-28.

9. Мицкевич ПБ и др. Изучение цитостатической (колониеингибирующей) и цитолитической активности противолейкозных цитотоксических лимфоцитов и лимфокинактивированных киллерных клеток человека. Эксперим. Онкол. 1994;1(16):48

10. Ю.Полевиченко ЕВ. Клинико-иммунологический статус детей в программном лечении различных иммунофенотипических вариантов острого димфобластного лейкоза и его коррекция. Дисс. . канд. мед. наук, Ростов-на Дону, 1994

11. П.Потапнев М.П. Цитокины и противоопухолевый имунитет. Материалы международной научно-практической школы-конференции «Цитокины. Воспаление. Иммунитет.» Санкт-Петербург 23-26 июня 2002г. Том 1, №2, 2002:81-82

12. П.Потапнев М.П., Петевка Н.В., Белевцев М.В. и др. Патогенетическая роль фактора некроза опухолей альфа при остром лимфобластном лейкозе у детей. Цитокины и воспаление 2003; 2(1):36-40

13. Симбирцев А.С. Цитокины- новая система регуляции защитных реакций организма. Цитокины и воспаление 2002;1(1):9-16

14. Н.Тепаев Р.Ф. Эффективность и пути оптимизации лечения острого лимфобластного лейкоза у детей. Дисс. . доктора мед. наук, Москва, 2003

15. Behm FG, Raimondi SC, Frestedt Л. et al. Rearrangement of the MLL gene confers a poor prognosis in childhood acute lymphoblastic leukemia, regardless of presenting age. Blood 1996;87:2870-7

16. Bennet JM, Catovsky D, Daniel MT et al. The morphological classification of acute lymphoblastic leukemia: concordans among observers and clinical correlations. British Journal of Haematology 1981;47:553-61.

17. Birch JM Epidemiology of paediatric cancer. In: Duncan W. (ed) Paediatric oncology. Springer, Berlin Heidelberg, New York, Tokyo. 1983.-P.1-10

18. Borkhardt A, Cazzaniga G, Viehmann S et al. Incidence and clinical relevance of TEL/AML1 fusion genes in children with acute lymphoblastic leukemia enrolled in the German and Italian multicenter therapy trials. Blood 1997;90:571-7

19. Carter LL, Dutton RW. Type 1 and Type 2: a fundamental dichotomy for all T-cell subsets. Curr Opin Immunol 1996;8:336-42.

20. Chakraborty A et al. Age related NK aktivity of peripheral blood lymphocytes from healthy subjects and cancer patients. A comparative in vitro study with 11-2. Tumori 1994; 80(3):233

21. Chessells JM, Hall E, Prentice HG, Durrant J, Bailey CC, Richards SM. The impact of age on outcome in lymphoblastic leukemia : MRC UKALL X and XA compared: a report from the MRC Paediatric and Adult Working Parties. Leukemia 1998; 12:463-73

22. Christine J Harrison. The genetics of childhood acute lymphoblastic leukemia. Bailliere s Clinical Haematology 2000;13(3):427-39

23. Conter V, Arico M, Valsecchi MG et al. Long-term results of the Italian Association of Pediatric Hematology and Oncology (AIEOP) Acute Lymphoblastic Leukemia Studies, 1982-1995. Leukemia 2000; 14:21962204.

24. Dordelmann M, Reiter A, Borkhardt A et al. Prednisone response is the strongest predictor of treatment outcome in infant acute lymphoblastic leukemia. Blood 1999;94:1209-17.

25. Duan Y, Hu Y, Pan K. Study on the immunological reconstruction in children with acute lymphoblastic leukemia after intensive chemotherapy. Chinese Journal of microbiology and immunology -Beijing-, 2001 ;21 (3);272-274

26. Elaine Coustan-Smith, Sancho J, Michael L. Hancock et al. Clinical importance of minimal residual disease in childhood acute lymphoblastic leukemia. Blood 2000;96(8):2691-96

27. Fink FM, Koller U, Mayer H et al. Prognostic significance of myeloid-associated antigen expression on blast cells in children with acute lymphoblastic leukemia. Medical Pediatric Oncology 1993;21:340-46.

28. Gajjar A, Ribeiro R, Hancock ML et al. Persistence of circulating blasts after 1 week of multiagent chemotherapy confers a poor prognosis in childhood acute lymphoblastic leukemia. Blood 1995;86:1292-95.

29. Gaynon PS, Desai AA, Bostrom ВС et al. Early response to therapy and outcome in childhood acute lymphoblastic leukemia: a review. Cancer 1997;80:1717-26.

30. Gaynon PS, Trigg NA, Heerema et al. Childrens Cancer Group Trials in childhood acute lymphoblastic leukemia: 1983-1995. Leukemia 2000;14:2223-33

31. Han I, Vora A, Harrison G et al. Determinants of outcome after intensified therapy of childhood lymphoblastic leukemia: results from Medical Reserch United Kingdom acute lymphoblastic leukemia XI protocol. British Journal of Haematology 2001;113:103-14

32. Harms DO, Janka-SchaubGE. Cooperative study group for childhood acute lymphoblastic leukemia (COALL): long-term follow-up of trials 82,85,89 and 92. Leukemia 2000;14:2234-39

33. Heerema NA, Nachmann JB, Sather HN et al. Hypodiploidy with less than 45 chromosomes confers adverse risk in childhood acute lymphoblastic leukemia: a report from CCG. Blood 1999;84:4036-46.

34. Hillman GG, Puri RK, Kukuruga MA et al. Growth and major histocompatibility antigens expression regulation by IL-4, IFN-y and TNF-a on human renal cell carcinoma. Clin Exp Immunol 1994;96:476-83

35. Horst Ibelgaufts' COPE: Cytokines Online Pathfinder Encyclopaedia, 2003

36. Kamps WA, Veerman AJP, ER van Weerden et al. Long-term follow-up of Dutch Childhood Leukemia Study Group (DCLSG) protocols for children with acute lymphoblastic leukemia, 1984-1991. Leukemia 2000; 14:22402246.

37. Kemeny DM, Noble A, Holmes В J, Diaz-Sanchez D. Immune regulation: a new role for the CD8+ T cell. Immunol Tuday 1994;15:107-10.

38. Kobayashi D., Watanabe N. et al. Endogenous tumor necrosis factor as a predictor of doxorubicin sensitivity in leukemic patients. Blood 1997;89(7):2472-79

39. Kishimoto T, Goyert S, Kikutani H et al. CD antigens 1996. Blood 1997;89:3502

40. Larrick JW et al. Recombinant tumor necrosis factor causes activation of human granulocytes. Blood 1987;69(2):640-44

41. Look AT. Oncogenic transcription factors in the human acute leukemias. Science 1997;278:1059-64

42. Lorenzen J et al. Human tumor-associated NK-cells secrete increased amounts interferon у and IL-4. Br J Cancer 1991;64:457-62

43. Malkovsky M et al. Recombinant interleukin-2 directly augments the cytotoxicity of human monocytes. Nature 1987, Vol.325,№6101:265-6

44. Maloney KW, Shuster JJ, Murphy S et al. Long-term results of treatment studies for childhood acute lymphoblastic leukemia: Pediatric Oncology Group studies from 1986-1994. Leukemia 2000;14:2276-85

45. Miller DR, Krailo M, Bleyer WA et al. Prognostic implications of blast cell morphology in childhood acute lymphoblastic leukemia: a report from the Childrens Cancer Study Group . Cancer Treat Rep. 1985;69:1211-21

46. Miller DR, Leikin S, Albo V et al. Prognostic impotance of morphology (FAB classification) in childhood acute lymphoblastic leukemia (ALL). British Journal of Haematology 1981 ;48:199-206.

47. Perrin GQ, Johnson HM, Subramaniam PS. Mechanism of interleukin-10 inhibition of T-helper cell activation by superantigen at the level of the cell cycle. Blood 1999; 93:208

48. Podhorecka M, Dmoszynska A, Rolinski J, Wasik-Szczepanek E. Intracellular interleukin-2 expression by T-cell subsets in B-cell chronic lymphocytic leukemia. Haematologica 2001;86:549-550

49. Pui CH, Behm FG, Crist WM. Clinical and biologic relevance of immunologic marker studiesin childhood acute lymphoblastic leukemia. Blood 1993;82:343-62.

50. Pui CH, Evans WE. Acute Lymphoblastic Leukemia. The New England Journal of Medicine 1998;339(9):605-15

51. Pui CH, Frankel LS, Carroll J et al. Clinical characteristics and treatment outcome of childhood acute lymphoblastic leukemia with the t(4;l I)(q21;q23): a collaborative study of 40 cases. Blood 1991;77:440-47

52. Pui C-H, Kane JR, Crist WM. Biologi and treatment of infant leukemias. Leukemia 1995;9:762-9

53. Pui CH, Raimondi SC, Head DR et al. Characterization of childhood acute leukemia with multiple myeloid and lymphoid markers at diagnosis and at relapse. Blood 1991;78:1327-37

54. Pui CH, Raimondi SC. General Report on the European Union Concerted Action Workshop on llq23. Leukemia 1998;12:776-78.

55. Pui C-H. Acute lymphoblastic leukemia. Pediatr Clin North Am, 1997;44:831-46

56. Pui C-H. Childhood leukemias. N Engl J Med, 1995;332:1618-30

57. Pullen J, Shuster JJ, Link M et al. Significance of commonly used prognostic factors differs for children with T cell acute lymphoblastic leukemia (ALL), as compared to those with B-precursor ALL. Leukemia 1999;13:1696-1707.

58. Rubnitz JE, Downing JR, Pui C-H et al. TEL gene rearrangement in acute lymphoblastic leukemia: a new genetic marker with prognostic significance. J Clin Oncol 1997;15:1150-7

59. Rubnitz JE, Link MP, Shuster JJ et al. Frequency and prognostic significance of HRX rearrangements in infant acute lymphoblastic leukemia: a Pediatric Oncology Group study. Blood 1994;84:570-3

60. Schmidt-Wolf GD et al. Cytokines and gene therapy.Immunology Today 1995; 16(4): 173-75

61. Schrappe M, Reiter A, Zimmermann M et al. Long-term results of four consecutive trials in childhood ALL performed by the ALL-BFM group from 1981 to 1995. Leukemia 2000;14:2205-22.

62. Sica A, Saccani A, Bottazzi B, Polentarutti N, Vecchi A, Damme JV, Mantovani A. Autocrine production of IL-10 mediates defective IL-12 production and NF-kappaB activation in tumor-associated macrophages. J Immunol 2000;164:762

63. Silverman LB, Declerck L, Gelber RD et al. Results of Dana-Farber Cancer Institute Consortium protocols for children with newly diagnosed acute lymphoblastic leukemia (1981-1995). Leukemia 2000;14:2247-56

64. Smith M, Arthur D, Camitta В et al. Uniform approach to risk classification and treatment assignment for children with acute lymphoblastic leukemia. J Clin Oncol 1996; 14:18-24

65. Steinherz PG, Gaynon PS, Breneman JC et al. Cytoreduction and prognosis in acute lymphoblastic leukemia the importance of early marrow response: report from the Childrens Cancer Group. Journal of Clinical Oncology 1996;14:389-98.

66. Trubiari О et al. Interferon-y induces programmed cell death in differentiated human leukemic B-cell lines. Exp Cell Res 1994;210:23-27

67. Uckan FM, Sather HN, Gaynon PS et al. Clinical features and treatment outcome of children with myeloid antigen positive acute lymphoblastic leukemia : a report from the CCG. Blood 1997;90:28-35

68. Wierenga EA, Snoek M, Jansen HM, Bos JD, van Lier RA, Kapsenberg ML. Human atopen-specific types 1 and 2 T helper cell clones. J Jmmunol 1991;147:2942-9. Abstract

69. Wiersma SR, Ortega J, Sobel E, Weinberg KI. Clinical importance of myeloid antigen expression in acute lymphoblastic leukemia of childhood. New England Journal of Medicine 1991;96(8):2691-96.

70. Zhang XL, Komada Y, Chipeta J, Li QS, Inaba H, Azuma E, Yamamoto H, Sakurai M. Intracellular cytokine profile of T cells from children with acute lymphoblastic leukemia. Cancer Immunol Immunother 2000: 49(3): 165-72

71. Zhang XL, Komada Y, Zhou YW,Chen TX,Sakai H, Azuma E, Ido M, Sakurai M. Inhibition of interleukin-2 receptor (CD25) expression induced on T cells from children wich acute lymphoblastic leukemia. Cancer Immunol Immunother 1997; 44:41

72. Zheng L et al. Induction of apoptosis in mature T-cells by tumor necrosis factor. Nature 1995;377(6547):348

73. Zola H et al. Expression of membrane receptor for tumor necrosis factor on human blood lymphocytes. Immunol and Cell Biology 1993;71:281-88