Фармакологическое действие и применение препаратов диметил, дидециламмония бромида карбамида кларата для профилактики мастита у коров тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 16.00.04, кандидат биологических наук Бобкин, Виктор Викторович

• Бобкин, Виктор Викторович
• кандидат биологических наук
• 1999

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Бобкин, Виктор Викторович

ВВЕДЕНИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

2.1. Поверхностно-активные соли четвертичного аммония общая характеристика.

2.2. Механизм биологического действия поверхностно-активных солей четвертичного аммония.

2.3. Применение поверхностно-активных солей четвертичного аммония в качестве лечебно-профилактических препаратов.

2.4. Фармакологическое обеспечение профилактики мастита у коров и получения молока высокого санитарного качества.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Фармакологическое действие и применение препаратов диметил, дидециламмония бромида карбамида кларата для профилактики мастита у коров»

Актуальность темы. Повышение молочной продуктивности коров и улучшение качества молока сдерживают различные болезни молочной железы, среди которых наибольшее распространение имеет субклинический мастит (78, 88, 121, 138, 149, 157).

Проблема заболеваемости коров маститом носит особенно острый характер на специализированных молочных предприятиях (53, 75, 224, 297).

При этом лечение субклинического мастита с учетом его массовости, повторного возникновения и необходимости введения лекарственных средств в молочную цистерну, как правило имеет ряд отрицательных последствий и не всегда экономически эффективно и рационально (195, 246).

Учитывая, что в возникновении субклинического мастита у коров большую роль играет высокая санитарная культура содержания животных и, особенно, технологии доения, перспективным является профилактика заболевания путем предупреждения проникновения микрофлоры в сосковый канал, цистерну и железистую ткань ( 88, 159, 247, 281, 298).

Для достижения этого в комплексе санитарно-гигиенического обслуживания коров важное место принадлежит снижению концентрации микроорганизмов, которые могут вызвать восполительный процесс ( 109, 222, 226, 241, 252).

С этой целью во всех сранах мира используются антисептики, дезинфектанты и химиотерапевтические средства ( 79, 172, 195, 253, 289, 304, 305 ).

Среди них перспективными являются поверхностно-активные соли четвертичного аммония ( 78, 97, 232, 243, 284).

Данный класс соединений претендует на определенную уникальность своих свойств. С одной стороны их можно использовать в качестве средств повышения неспецифической резистентности организма (26, 155, 161, 165, 180). С другой стороны, это вещества, обладающие антибактериальными, вирулицидными и фунгицидными свойствами. При всем этом они остаются относительно малотоксичными соединениями (5, 127, 164, 174, 216, 286).

Цель и задачи исследований. Целью настоящей работы явилось фармакологическое обоснование и создание на основе дидецилдимети

- 6 ламмониябромида карбамида кларата комплекта "Молочный" для профилактики мастита у коров и получения молока высокого санитарного качества.

Для выполнения поставленной цели решали следующие задачи:

1. Оценить биоцидную активность диметил дидециламмония бромида карбамида кларата.

2. Изучить молекулярный механизм мембранотропного действия диметил дидециламмония бромида карбамида кларата.

3. Разработать крем массажный бактерицидный и гель защитный бактерицидный с целью их включения в комплект "Молочный" для профилакти мастита у коров и получения молока высокого санитарного качества.

4. Изучить клинико - фармакологическое действие комплекта "Молочный" на организм коров.

5. Установить производственную эффективность применения комплекта "Молочный" для профилактики мастита у коров и получения молока высокого санитарного качества.

Диссертационная работа выполнена в рамках задания 04.03.Д "Создать и предложить ветеринарной практике экологически безопасную систему ветеринарной защиты животных от болезней органов воспроизводства, молочной железы, желудочно-кишечных, респираторных болезней, нарушений обмена веществ и снижения общей неспецифической резистентности, включающую применение высокоэффективных лекарственных и биологически активных препаратов" Российской научно-технической программы фундаментальных и приоритетных прикладных исследований ( N Гос. регистрации - 01.9.90. 001257).

Научная новизна работы. Впервые проведена оценка взаимосвязи структуры молекулы диметил дидециламмония бромида карбамида кларата и его биоцидного действия. Показано, что оно обусловлено мембраноповреждающим и цитораздражающим эффектами, в которых участвуют четвертичный аммониевый азот, дециловые радикалы и карбамид.

Практическая значимость. Для комплекта "Молочный", предназ

- 7 наченого для профилактики мастита у коров и получения молока высокого санитарного качества на основе диметил дидециламмония бромида карбамида кларата разработаны крем массажный бактерицидный и гель защитный бактерицидный. Подготовлены технические условия на препараты. С положительным эффектом проведена апробация комплекта и его внедрение на отдельных молочных предприятиях.

Апробация работы. Материалы диссертации доложены и одобрены на: Международном координационном совещании "Экологические проблемы патологии, фармакологии и терапии" (Воронеж, 1997); научно-производственной конференции, посвященной 190-летию вышего ветеринарного образования в России и 100-летию ветеринарной науки (Санкт-Петербург, 1998); Международной научно-практической конференции "Проблемы патологии, санитарии и бесплодия в животноводстве" (Минск, 1998); Международной научно-производственной конференции "Экологические аспекты эпизоотологии и патологии животных", посвященной 100-летию со дня рождения члена-корреспондента ВАСХНИЛ В.Т.Котова (Воронеж, 1999).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 6 работ.

На защиту выносятся следующие основные положения:

1.0 зависимости биоцидной активности и мембранотропного механизма действия диметил дидециламмония бромида карбамида кларата

2. О разработке на основе ДДАБКК комплекта "Молочный" для профилактики мастита у коров и получения молока высокого санитарного качества.

3. О фармакологическом действии комплекта "Молочный".

4. О производственной эффективности применения комплекта на основе ДДАБКК для профилактики мастита у коров и получения молока высокого санитарного качества.

- 8

I.I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Заключение диссертации по теме «Ветеринарная фармакология с токсикологией», Бобкин, Виктор Викторович

- 115 -6. ВЫВОДЫ

1. Диметил, дидециламмония бромид карбамида кларат обладает высокой биоцидной активностью широкого спектра. Его минимальная бактерицидная концентрация в отношении палочковидной и кокковой микрофлоры колеблется в пределах 0,48-62,5 мкг/мл.

2. Диметил, дидециламмония бромид карбамида кларат относится к мембранотропным средствам. Его биоцидное действие обусловлено комплексом функциональных свойств молекулы.

2.1. Четвертичный аммонийный азот создает полярность заряда молекулы.

2.2. Липофильные децильные радикалы обеспечивают встраивание молекулы в липидный бислой мембраны и повышают его проницаемость для гидрофильных веществ.

2.3. Ион брома обеспечивает сохранение полярного заряда четвертичного аммонийного азота и его гидрофильность.

2.4. Карбамид, является высоко гидрофильным соединением, проникает через поврежденную дециловыми радикалами мембрану внутрь микробной клетки и способствует ее лизису.

3. На основе диметил, дидециламмония бромида карбамида кла-рата разработаны крем массажный бактерицидный и гель защитный бактерицидный, введенные в состав комплекта "Молочный", предназначенного для профилактики мастита у коров и получения молока высокого санитарного качества.

4. Крем массажный бактерицидный включающий 0,5% диметил, дидециламмония бромида карбамида кларата оказывает бактерицидное действие, в том числе на возбудителей мастита. Препарат не обладает раздражающим действием на кожу. При массаже кожи молочной железы кремом ДДАВКК не проникает в молоко.

5. Гель защитный бактерицидный включающий 0,5% диметил, дидециламмония бромида карбамида кларата обладает бактерицидной активностью, в том числе в отношении возбудителей мастита. Препарат не раздражает слизистую оболочку. Он удерживается в сосковом канале в промежутке между доениями. Гель легко удаляется во время массажа молочной железы перед доением. ДДАВКК из геля не проникает в молоко.

6. Длительное использование комплекта "Молочный" в технологии доения коров с целью профилактики мастита и получения молока

- 116 высокого санитарного качества не оказывает отрицательного влияния на клиническое состояние животных, не вызывает существенных изменений морфологических и биохимических показателей крови. Применение комплекта сопровождается повышением антиоксидантной защиты и иммунологической резистентности организма коров.

7. Использование комплекта "Молочный" в технологии доения коров обеспечивает профилактику возникновения субклинического мастита на 18,6%. Санитарное качество молока улучшается за счет уменьшения в нем содержания соматических клеток на 58,7% и снижения бактериальной обсемененности на 60%.

- 117 -7. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Использовать в составе комплекта "Молочный", предназначенного для профилактики мастита у коров и получения молока высокого санитарного качества крем массажный бактерицидный и гель защитный бактерицидный, включающие в качестве АДВ диметил, дидециламмония бромид карбамида кларат.

Производителям крема массажного бактерицидного и геля защитного бактерицидного предлагаются проекты технических условий.

4.3.6. Заключение.

После 50-дневной обработки молочной железы препаратами комплекта "Молочный" не отмечали изменений, как со стороны общего состояния организма животных, так и молочной железы.

В крови из яремной и подкожной брюшной вен коров, взятой в конце опыта от животных контрольных и опытных групп не установлено достоверных изменений в содержании количества гемоглобина, эритроцитов, лейкоцитов и лейкоцитарной формулы. Применение препаратов комплекта не оказывает заметного влияния на динамику биохимических показателей крови.

Полученные результаты об изменении процессов ПОЛ свидетельствуют о снижении антиоксидантного потенциала у коров, больных субклиническим маститом. Однако в опытной группе, где больные животные обрабатывались препаратами комплекта уровень эндогенных антиоксидантов возрос (витамин А увеличился на 31% (Р<0,05), каротин на 14%). Можно предположить, что у больных животных в опытной группе за счет высокой активности ферментативного звена системы АОЗ и эндогенных антиоксидантов уровень МДА снижен (на 15%), по сравнению с контролем.

Изменение уровня иммунологических показателей обусловлено, по видимому антимикробной активностью ДДАБКК и его влиянием на течение воспалительных процессов в молочной железы. Возможно с этим связано увеличение комплементарной активности в 1,2 раза (Р<0,05), бактерицидной активности в 1,3 раза (Р<0,05), по сравнению с контролем.

Можно предположить, что различия между животными опытной и

- 99 контрольной групп, больных субклиническим маститом можно связать с предотвращением ДДАБКК воспалительного процесса. Вероятнее всего, диметил дидециламмония бромид карбамид кларат проявляя антисептическое действие, позволяет купировать, "смягчить" возникшее воспаление в молочной железе, о чем свидетельствуют нормализация протекания биохимических процессов и снижение уровня в крови токсических продуктов ПОЛ.

4.4. Производственная оценка эффективности применения комплекта "Молочный" для профилактики мастита у коров и получения молока высокого санитарного качества.

Производственная оценка эффективности применения комплекта "Молочный" для профилактики мастита у коров проведена на 5 фермах АОЗТ "Красноармейское" Зртильского, АОЗТ "Донское" Рамонского районов Воронежской области. Всего по наблюдением в течение 3 месяцев находилось 114 коров. Из них 58-и применяли комплект "Молочный".

В таблице, 17 приведены результаты оценки эффективности применения комплекта "Молочный" для профилактики мастита у коров. Установлено, что на протяжении всего периода наблюдений комплект обладает высокой профилактической эффективностью.

Особенно это выражено при переходе со стойлового содержания на пастбищное. Здесь эффективность использования комплекта увеличилась в 1,6'раза.

Из данных таблицы 17 следует, что в опытной группе до начала обработки препаратами, входящими в комплект, болело субклиническим маститом 25% животных, а в контрольной группе 19,2%. Однако уже после 10-ти дневной обработки комплектом "Молочный" в опытной группе количество заболевших субклиническим маститом снизилось и составило 17,9% животных, что 1,4 раза меньше, чем до обработки препаратами. В тоже время количество больных субклиническим маститом коров в контрольной группе составило 23,2%. После 20-ти дневной обработки препаратами комплекта количество больных субклинических маститом коров в опытной группе не изменилось, а в контрольной группе продолжало увеличиваться и составило 30,8%,

- 101 что е 1,6 раза выше, чем до обработки препаратами. После 30-ти дневного применения препаратов животных всех групп перевели со стойлового содержания на пастбищное. На данном этапе исследований изменение условий содержания и кормления, сильный стрессовый фактор, изменение бактериального фона способствовало увеличению количества больных субклиническим маститом в обеих группах. Однако количество заболевших животных опытной и контрольной групп было разным и, соответственно, составило 21,4% и 34,6%, что 1,6 раза ниже в опытной, по сравнению с контролем. На завершающем этапе исследований было установлено, что благодаря применению препаратов комплекта "Молочный" заболеваемость животных в опытной группе составила 17,9%, в контрольной 30,8%. При этом пораженность долей молочной железы больных субклиническим маститом коров снижена в 1,7 раза (X2 - 11,27; Р < 0.05).

Таким образом, предлагаемый новый комплект "Молочный" обладает достаточно высокой профилактической эффективностью на протяжение всех этапов исследований.

Субклинический мастит, как всякое воспаление сопровождается усиленной миграцией лейкоцитов в очаг воспаления. Повышение содержания лейкоцитов в молоке является первым сигналом любого вредного воздействия на ткани молочной железы и начавшегося в ней воспалительного процесса. Поскольку соматические клетки секрета вымени на, 90% представлены фагоцитирующими клетками (нейтрофиль-ными лейкоцитами и макрофагами), этот показатель считается одним из решающих критериев оценки санитарного качества молока (79).

Влияние комплекта "Молочный" на санитарные качества молока здоровых и больных субклиническим маститом коров представлены в таблице 18. Из данных таблицы следует, что до обработки препаратами количество соматических клеток в молоке больных субклиническим маститом коров опытной группы составило 898,6 ± 62,5 тыс/мл, контрольной группы 1118,3 ± 219,8 тыс/мл. Уровень бактериальной обсемененности молока пораженных долей молочной железы больных животных опытной и контрольной групп, соответственно, составил 1140,2 ± 193,5 и 1094,6 ± 165,3 тыс.м.к./мл. Количество соматических клеток и общая бактериальная обсемененность молока клинически здоровых животных обеих групп находились в пределах установленных нормативных показателей.

После 50-дневной обработки препаратами комплекта было уста

- 103 ноЕлено достоверное уменьшение количества соматических клеток в молоке больных субклиническим маститом коров. Так, количество соматических клеток в опытной группе составило 784,1 + 52,3, что на 58,7% (Р < 0,05) ниже по сравнению с контролем (1897,4 + 238,2тыс/мл).

В опытной группе уровень содержания соматических клеток в молоке клинически здоровых коров составил 396,0 ± 64,5, больных субклиническим маститом - 784,1 ±52,3 тыс/мл, что в 1.9 раза выше, чем у клинически здоровых жиеотных. У животных контрольной группы, которых обработке препаратами не подвергали количество соматических клеток у клинически здоровых коров составило 408,3 + 63,1, у больных субклиническим маститом составило 1897,4 + 238,2, что в 4.6 раза выше, чем у клинически здоровых животных. В опытной и контрольной группах у клинически здоровых коров количество соматических клеток существенно не изменилось.

Данные представленные в таблице 18, позволяют сделать выео-ды, что применение новых препаратов комплекта обеспечивает значительное снижение уровня микробной обсемененности молока. Так, в молоке, взятом от животных контрольной группы больных субклиническим маститом бактериальная обсемененность молока составила 1120 + 234,6 тыс.м.к./мл, под влиянием препаратов комплекта бактериальная обсемененность молока в течении опыта больных субклиническим маститом значительно снизилось и составило 447,0 + 27,6 тыс.м.к./мл, что на 60% (Р < 0,01) ниже по сравнению с контролем.

В опытной группе уровень бакобсемененности молока больных субклиническим маститом коров после обработки препаратами снизился по отношению к исходному уровню на 69% (Р < 0.01). У животных контрольной группы, которых обработке препаратами не подвергали бактериальная обсемененность молока у клинически здоровых коров составила 496,0 + 199,1 тыс.м.к./мл, у больных субклиническим маститом этот показатель соответствовал 1120 + 234,6 тыс.м.к./мл, что 2,3 раза ниже, чем у клинически здоровых животных. В опытной и контрольной группах у клинически здоровых коров уровень бактериальной обсемененности молока существенно не изменился.

В результате проведенных исследований по индентификации вида микрофлоры молока было установлено, что один и тот же микроорганизм может быть выделен из молока как клинически здоровых коров (бактерионосительство), так и больных субклиническим маститом.

- 104

Однако при ■ ¡идентификации вида микрофлоры в опытной группе, у больных животных, которые обрабатывались комплектом "Молочный" выделен только Str. agalactia, других возможных возбудителей мастита у коров не обнаружено. В контрольной группе выделены коагу-лазопозитивные стафилококки (Staph, aureus) и стрептококки (Str. agalactiae; Str. dysgalactiae). Следовательно, вероятность поражения молочной железы маститом клинически здоровых животных в контрольной группе значительно выше, чем у клинически здоровых коров, которые обрабатывались комплектом.

Таким образом, применение комплекта "Молочный" обеспечивает получение молока высокого санитарного качества, за счет снижения бактериальной обсемененности и уменьшения количества соматических клеток в нем.

Содержание жира в молоке является основным показателем, характеризующим качество молока. Его питательность и вкусовые свойства зависят от соотношения классов липидов, входящих в его состав (48).

При заболевании коров маститом нарушается процесс секреции молока, изменяются его свойства и состав (24, 25, 228, 301). Н.Хилькевич (312) отмечает, что у коров, больных субклиническим маститом, секрет из пораженных четвертей имел более низкую жирность, чем из здоровых. Жирность секрета из здоровых четвертей вымени коров, больных скрытым маститом, также значительно ниже по сравнению с секретом от клинически здоровых животных.

Проведенные исследования, согласуются с данными Н.Хилькевича (312) и позволяют утверждать, что процент жира в секрете вымени пораженных субклиническим маститом животных, ниже чем у здоровых (рис. 15). В то же время у больных животных, которым применяли комплект, по сравнению с контрольными, выявлены изменения, в сторону увеличения жирности молока. По мнению Schultza L.H.(292) допускаются случаи, когда в результате инфицирования молочной железы удои уменьшаются быстрее, чем синтез молочных липидов. При этом жирность секрета может даже возрастать. Хотя дальнейшее развитие воспаления неизбежно ведет к сильным потерям жира молока при значительном снижении удоя (228, 301).

Динамика изменений молочной продуктивности коров при применении комплекта представлены на рис. 16. На протяжении всех этапов исследований в опытной группе, где животных обрабатывали пре

Контрольная группа Опытная группа

Рис. 15. Влияние применения комплекта "Молочный" на жирность молока р^Д Больные маститом §§§§§ Клинически здоровые

- 107 паратами комплекта, удои по сравнению с контрольной группой возрастают. После 50-ти дневной обработки комплектом, удои от одной коровы в опытной группе стали значительно выше, чем в контрольной и, соответственно, составили 10,5л и 8,8л.

Данные изменения в сторону уменьшения молочной продуктивности в контрольной группе возможно связаны с тем, что при субклиническом мастите, по данным Карташовой В.М. (80), ШИЬ в.Б. (303) потери молочной продуктивности составили 12-20%, а при длительном течении болезни (более 3 месяцев)-35%.

Таким образом, применение комплекта "Молочный" позволяет предотвратить поражение молочной железы субклиническим маститом, сохраняя высокий процент жира и молочную продуктивность р;оров. Существенно повышается санитарное качество молока.

Представило интерес, хотя бы в первом приближении провести расчет экономической эффективности применения комплекта "Молочный". Согласно методике определения экономической эффективности ветеринарных мероприятий (Ветеринария, 1998, N3. с. 10-13) проведенные расчеты дали следующие результаты.

Стоимость однократной обработки составляет 0,20 рублей; в день 0,60 рублей. С учетом количества животных, которых использовали при расчете, стоимость обработки равнялась 16,8 рублей (0,60 х 28). Длительность применения комплекта 50 дней. Следовательно затраты на проведение профилактических мероприятий составляет 840 рублей (16,8 х 50).

Учитывая, что больные маститом коровы не додают в среднем 15% молока от годового удоя, ущерб предотвращенный в результате профилактических мероприятий рассчитывали по формуле:

Пу = Мо х Кп х У, где

Мо - общее поголовье восприимчивых животных (гол.);

Кп - удельная величина потерь основной продукции в расчете на одно заболевшее животное (кг);

Ц - средняя цена единицы продукции (руб.);

Предотвращенный ущерб, в результате профилактических мероприятий равнялся:

- 109

5. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЙ

Несмотря на очевидные достижения ветеринарной науки в борьбе с маститом, заболеваемость животных остается высокой. Исследователи за рубежом и в нашей стране сообщают о самой различной степени распространения мастита у коров. Однако все без исключения устанавливают преобладающую роль субклинического воспаления вымени по сравнению с клинически выраженным (7, 43, 77, 83, 138, 149, 235, 258).

Высокая степень распространения заболевания объясняется тем, что субклиническую форму мастита сложно своевременно диагностировать, в связи с чем не осуществляются мероприятия по его профилактике и лечению. Поэтому для успешной борьбы с маститом использовали комплект "Молочный", который позволяет профилактировать мастит во время каждого доения.

В качестве антимикробного начала для препаратов, которые вошли в комплект взяли диметил, дидециламмония бромид карбамида кларат из группы четвертичных аммониевых соединений.

Данный класс соединений, с одной стороны, можно использовать в качестве средств повышения неспецифической резистентности организма (26, 93, 155, 161, 165, 180), а с другой стороны это вещества обладающие широким спектром антимикробного действия (4, 5, 45, 127, 156, 164, 174, 216).

В результате проведенных исследований на клеточном уровне (опыты на культуре парамеций и эритроцитах) было установлено, что диметил, дидециламмоний бромид карбамида кларат обладает высокой биологической активностью. Биоцидное действие препарата находится в прямой зависимости от структуры его молекулы. Объяснение био-цидного действия диметил, дидециламмония бромида карбамида клара-та следует искать в том, что высокополярная структура с положительно заряженным ядром - четвертичный аммоний, в состав которого входит 16 остатков мочевины, способен довольно легко встраиваться в мембраны. Это является основной причиной формирования в них деффектных зон, что обуславливает снижение величины энергетического барьера липидного бислоя для прохождения высокополярного и высокогидратированного комплекса мочевины.

В результате отмеченных конформационных перестроек происходит на первом этапе деградации мембранных структур, взаимодейс

- 110 твующих с липофильной частью ДДАБКК, а на втором - диффузия части ДДАВКК (мочевины) преимущественно внутрь клетки, вызывающая повышение онкотического и осмотического давления, инициирующая накопление воды, вызывающая сферуляцию и последующее разрушение клетки

Изучены антимикробные свойства препаратов, которые вошли в комплект "Молочный", с учетом того, что высокой профилактической эффективностью обладают антисептические препараты с широким спектром антимикробного действия, высокой бактерицидной активностью, и сохраняющие активность в промежутке между доениями (284, 293).

Установлено, что наиболее высокой чувствительностью к препаратам комплекта проявили культуры золотистого стафилококка и стрептококка (минимальная бактерицидная концентрация составила 15,1 мкг/мл). Активность препаратов в отношении кишечной папочки колебалась от 31,2 до 62,5 мкг/мл.

Полученные данные совпадают с результатами И.Ю.Мельника (127) и М.Ю.Плетнева (170), которые отмечают, что грамположитель-ные бактерии гораздо более чувствительны к солям четвертичного аммония, чем грамотрицательные. Минимальную концентрацию ингиби-рования соли четвертичных аммониевых оснований имели в отношении стафилококков и стрептококков. Несколько выше этот показатель был для кишечной палочки. Они менее эффективны в отношении Candida albicans и других патогенных грибов ( 164, 216).

Выявленная антимикробная активность препаратов сохраняется в промежутке между доением.' Так применение комплекта "Молочный" снижает количество микробов на поверхности кожи молочной железы в 4,6 раза и поверхности соскового канала в 6,5 раза, чем до обработки препаратами.

В результате проведенных исследований установлено, что активно действующее вещество препаратов, которые использовались при создании комплекта, не обладают раздражающим действием в опытах на лабораторных животных.

Полученные результаты экспериментальной проверки антимикробной активности комплекта "Молочный" явились основанием для изучения его профилактической эффективности при мастите у коров.

Установленные изменения некоторых показателей крови свидетельствуют о незначительных сдвигах в организме коров. Выявленные изменения согласуются с данными Н.М. Хилькевича (213), который утверждает, что в крови из молочной вены лактирующих коров, боль

- Ill ных скрыто протекающим маститом, отмечается незначительное повышение количества лейкоцитов и сдвиг ядра влево в лейкоцитарной формуле.

Изменение биохимических показателей крови происходило в пределах физиологического статуса. Так, содержание мочевины в крови контрольной и опытной групп практически было на одинаковом уровне. Не установлено изменений в содержании общего белка в сыворотке крови у больных маститом коров, что согласуется с исследованиями Г.Божковой (23). Одинаковый уровень содержания глюкозы в крови, незначительное увеличение лактата и пирувита свидетельствуют, о том, что препараты, которые вошли в комплект не оказывают заметного влияния на динамику компонентов крови, характеризующих тип энергообеспечения организма и его достаточности.' У животных контрольной группы в крови оттекающей от пораженных субклиническим маститом четвертей выявлено увеличение содержания общих липи-дов, что согласуется с данными А.Е.Волгова и др.(24).

Основанием для предположения об усилении ПОЛ в организме коров при заболевании их маститом послужили имеющиеся в литературе данные о защитных механизмах молочной железы, включающих в себе фагоцитарные и нефагоцитарные системы. По мнению В.А.Парикова и др. (158) фагоцитарные механизмы эффективнее предотвращают размножение бактерий, но обладают потенциальной опасностью развития обширного воспаления. Фагоцитирующие клетки под влиянием антигенного раздражения увеличивают потребление Ог- Поглощенный клетками кислород способен быстро переходить в активные формы: супероксид анион 02, гидроксильный радикал ОН, перекись водорода H2Û2, синг-летный кислород О2. Однако, по мнению Т.А.Аджимолаева (1),активные формы кислорода, генерируемые фагоцитами при уничтожении микроорганизмов, секретируются не только в фагосому, но и за пределы клетки. Происходящие при любом воспалении утечка этих агрессивных соединений приводит к развитию свободнорадикадьных патологий. В связи с этим можно предположить, что существование фагоцитарного механизма защиты молочной железы обуславливает и возможность усиления процессов ПОЛ при заболевании коров маститом.

В результате проведенных исследований установлено, что в крови из молочной вены у больных субклиническим маститом животных по сравнению с клинически здоровыми ниже уровень витамина Е в 1,1 раза, витамина А в 1,4 раза, каротина в 1,3 раза. Вероятно, из-за

- 112 низкой активности глутатионового звена, сильно завышен (на 55,7%) уровень малонового диадьдегида. Согласно литературным данным, появляющиеся в результате усиления ПОЛ начальные продукты окисления не оказывают прямого токсического влияния на организм, хотя они и способны вызвать обратимые изменения активности ферментов и проницаемости клеточных мембран. Но если в результате окислительной деструкции появляются вторичные продукты окисления, основной из которых ЩА - бифункциональный реагент, взаимодействующий со свободными аминогруппами с образованием Шиффовых оснований и соответственно внутри и межмолекулярных сшивок, то изучаемый процесс приобретать необратимый характер (259).

Анализ содержания продуктов ПОЛ в крови коров, подвергшихся обработке комплектом "Молочный", позволяет заключить, что уровень витамина А увеличился на 31%, каротин на 14%. Высокий уровень ферментативного звена системы АОЗ, позволил снизить содержание МДА на 15%.

Таким образом, данные динамики продуктов ПОЛ в крови здоровых и оставшихся больными коровами, после обработки препаратами комплекта позволяют говорить о нормализации процессов окисления. Подтверждением этого является также сопоставление данных по концентрации продуктов окисления и состоянием здоровья оставшихся больными животных.

Известно, что течение воспалительного процесса в молочной железе зависит прежде всего от состояния защитных механизмов организма (138, 158, 219, 274, 295, 300). В результате обработки комплектом "Молочный" установлено увеличение комплементарной и бактерицидной активности сыворотки крови, отражающие сумарное действие гуморальных факторов зашиты.

Полученные результаты согласуются с данными Н.Т.Климова (97), И.М.Павлюк (155), С.И.Першиной (164), С.Б.Пипинавы (165),Г.Т.Писько (166),А.И.Пьявкина (176), о стимулирующем действии препаратов из группы четвертичных аммониевых соединений на показатели специфической и неспецифической резистентности организма. По-видимому, диметил, дидециламмония бромид карбамида кла-рат, оказывая антисептическое действие, способствует некоторому повышению локальной резистентности молочной железы.

Скрыто протекающий мастит коров приводит к значительному снижению молочной продуктивности больных животных и способствует

- 113 сокращению сроков их использование. Применение комплекта "Молочный" повысило молочную продуктивность коров. Выявленная разница в удоях, согласуется с исследованиями В.В.Вурчика с авт.(28), В.Я.Никитина с соавт.(144), Н.М.Хилькевича (212),которыми было установлено, что изменение в удоях между смежными больными скрыто протекающим маститом и здоровыми долями вымени колеблется от 20% до 50% и более. В течение лактации удой больных животных снижается на 6-17,8% (40, 42, 245, 302).

Проведенные исследования позволяют утверждать, что процент жира в секрете вымени пораженных субклиническим маститом коров снижен. Согласно литературным данным, мембраны молочных глобул содержат значительное количество фосфолипида сфингомиэлина, а находящиеся в молочной железе больных маститом коров стафилококки бычьего типа вырабатывают сфингомиелиназу С (В-токсин), которая вызывает повреждение мембраны и обеспечивает доступ молочных липаз к содержимому жировых глобул (255, 295).

Согласно данных С.В.Слепенкова (194) миелопероксидаза нейт-рофилов образующаяся в результате защитной фагоцитарной реакции тормозит ритмическую активность секреторных клеток молочной железы, что проявляется в форме ограничения производства секрета, в том числе и молочного жира.

После окончания обработки препаратами комплекта содержание липидов в молоке выздоровевших животных увеличивается по сравнению с контролем , тогда как у оставшихся больными коров количество жира в секрете сохраняется на низком уровне. Это обстоятельство дает возможность говорить о нормализации процессов биосинтеза молока у выздоровевших животных.

Ежедневное применение комплекта "Молочный" позволило сохранить высокую санитарно-гигиеническую частоту поверхности кожи вымени, обеспечивая получения молока высокого санитарного качества.

Из показателей молока закономерным изменениям в зависимости от формы воспалительного процесса в молочной железе подвергается количество соматических клеток. Результаты определения количества соматических клеток в молоке могут указывать на подозрение скрыто протекающего мастита у лактирующих коров в том случае, когда их содержание в 1 мл превышает 500000 (23, 230, 272, 296).

Проведенные исследования подтвердили, что у больных маститом коров контрольной группы количество соматических клеток достигало

- 114

2000000 в 1 мл. Применение комплекта "Молочный" позволило снизить количество соматических клеток до нормального уровня.

Другим важным критерием^ оценки санитарного качества молока является общее количество бактерий. Бактерицидные свойства применяемых препаратов из комплекта снижают бактериальную обсеменен-ность молока на 60%. В секрете вымени больных субклиническим маститом коров, в контрольной и опытной группах выделен Str. agalactia. В разных хозяйствах доминирующими могут быть стафилококки или стрептококки. О преобладании в молоке коров, больных скрыто протекающим маститом, стафилококков сообщают М.Brown (234), A.Hunter (265), а стрептококки чаще обнаруживали И.И.Архангельский (6), И.И.Афанасьев (8), Х.А.Райд (178).

Установлено также, что в контрольной группе один и тот же микроорганизм выделяется как от больных коров, так и от клинически здоровых. Полученные данные согласуются с сообщениями В.Г.Зверевой (75) о том, что единого возбудителя той или иной формы воспаления не существует. Автор также отмечает, что один и тот же вид микробов, в зависимости от своей вирулентности и патогеннос-ти, а также состояния молочной железы и всего организма, может вызвать любую форму воспаления. По мнению Г.И.Сергеева (191), выделение из секрета вымени клинически здоровых коров патогенной и условно-патогенной микрофлоры свидетельствует о потенциальной опасности таких животных в возникновении заболевания при снижении локальной резистентности молочной железы и общей неспецифической резистентности организма животных.

Таким образом, полученные в результате проведенных исследований данные свидетельствуют о необходимости проведения профилактических мероприятий, направленных на предотвращение попадания возбудителей мастита в молочную железу и повышающих неспецифическую резистентность животных.

При изучении профилактической эффективности комплекта "Молочный" установлено, что'ежедневная обработка молочной железы препаратами, входящими в его состав, снижала заболеваемость коров субклиническим маститом на 41,9%.

Таким образом, полученные в результате исследований данные подтверждают перспективность комплекта "Молочный" для профилактики мастита у коров и получение молока высокого санитарного качества.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Бобкин, Виктор Викторович, 1999 год

1. Вопросы мед.химии.-1989.-N3.-с.2-9.

2. Алесенко A.B., Красильников В.А., Бойков П.Я.Фосфолипиды как структурные элементы ядерного матрикса // Докл. АН.СССР-1982.-Т.262.-N3.-с.730-733.

3. Аржаков В.Н., Мосунова Т.Ф.Токсичность нового бактерицидного препарата // Реф. журн. фармакологии и токсикологии. -1997.-Т.2.-N8.-с.456.

4. Архангельский И. И. Профилактика маститов у коров // Тр. Латвийской с.-х. акад. Елгава.-1970.-Вып.30.-с.66-73. Архангельский И.И., Гасаков Н.Г. Фаготапирование стафилококков, выделенных из молока // Ветеринария. -1973.-N4.-с.114.

5. Байдан Л.Б. Исследование действия некоторых ПАВ на нервно-мышечную передачу: Автореф. дисс. . канд. биолог, наук.-К.1976.-21с.

6. Бактерицидная активность и хемилюминесценция мононуклеар-ных фагоцитов животных / Гуткин B.C., Горбатов В.А., Востряков А.П. и другие // Сельскохозяйственная биология. -1986.-N6.-с.78-86.

7. Барабой В.Н., Писько Г.Т., Припцок Л.И. Влияние некоторых поверхностно-активных веществ на заживление местных лучевых повреждений кожи //. Медицинская радиология. -1977.-N7.-с.58-63.

8. Барановский М.В. Влияние разных способов обработки вымени коров на санитарно-гигиеническое качество молока // Научные основы развития животноводства в БССР: Межвед. сб., 1985.-Вып.15.-с.97-101.

9. Тез. докл. II Всесоюзной конф."Биоантиокси-дант".-М.,1986.-Т.I.-с.82 -83.

10. Болгов А.Е., Болгова О.М., Рипатти П.О. Состав жирных кислот молочного жира у коров в зависимости от генотипа и заболеваемости маститом // Сельскохозяйственная биология .-1984.-N11.-с.94-96.

11. Боровкова Г.И., Авраамова Т.В. Фосфолипидный состав эритроцитов, образованных в условиях нормального эритропоэза // Липиды биологических мембран.- Ташкент, 1980.-с.36-39.

12. Бухарин О.В., Васильев Н.В. Лизоцим и его роль в биологии и медицине.-Томск, 1974.-209с.

13. Веллесте Ю.И. Влияние маститов на продукцию молока и вызываемый ими экономический ущерб /7 Скотоводство: Сб.научи .тр.-Таллин, 1980.-М50.-с.92-97.

14. Видении В.Н. О механизме антимикробных свойств поверхностно-активного антисептика катапола // Хирургические болезни сельскохозяйственных животных: Научн. тр. Ленинградского вет. ин-та.- Ленинград, 1990. Вып. 105.оп оо-с.ои-о/с.

15. Гительзон И.И., Терсков И.А. Исследование функционального состояния эритрона методом эритрограмм // Вопросы биофизики, биохимии и патологии эритроцитов. Красноярск, 1960.-с.85-99.

16. Горбатова К.К. Биохимия молока и молочных продуктов.-М.: Легкая и пищевая промышленность, 1984.-344с. Грибанова И.А. Гематологическая норма.-М.: Медицина, 1979.-53с.

17. Гудзь О.В. Тенденции развития дезинфектологии в Украине // Провизор. -1998.-Мб.-с.1-10.

18. Гудзь О.В., Письмо Г.Т. Взаимодействие антибиотиков с поверхностно-активными веществами // Врачебное дело. -1983. -МП. с. 103-108.

19. Данилов А.Ф., Лаврентьева В.В. Влияние сродства на тип действия аммониевых соединений на холинорецепторы скелетной мышцы // Экспериментальная и клиническая фармакология.- 1996.-Т.59.- N6.-с.10-12.

20. Ефимов B.C., Чернова 0.В., Берестецкая Т.З., Некрасов A.B. Исследование антигепарановых аммониевых солей монодисперсных олигомеров конидина // Фармакология и токсикология .-1983.-N4.-с.57-60.

21. Жарова В. Я. Фармакологическое действие и лечебная эффективность метисазона (изатизона) и додецония при бронхоп-невмании жеребят.: Автореф. дисс. . канд. вет. наук. -Москва, 1986.-16с.

22. Жебентяев А.И., Алексеев H.A. Ион-парная тонкослойнаяхроматография лекарственных препаратов, производных четвертичных аммониевых соединений // Фармация . -1998.-Т.17.-N1.-с.21-27.

23. Жилвинский А.Д. Аспекты эпизоотологии и борьбы с энзоотической бронхопневмонией телят // Тез. -докл. науч. конф.-Талинн, 1984.-с.17-19.

24. Жолдакова З.И., Берлина П.Б., Кустова Е.В. Сравнительная гигиеническая оценка неионогенных поверхностно-активных веществ с учетом стабильности и трансформации // Гигиена и санитарная.- 1998.-МЗ.-с.7-10.

25. Жуланова Э.И., Коровина И.А., Романцев Е.Ф. Образование органических перекисей при облучении на рентгеновской установке с мощностью дозы 130 р/с // Роль перекисей и кислорода в начальных стадиях радиобиологического эффекта. -М., 1960.-с.43-55.

26. Журавлев А.И., Ганасса Е.Э. О цепных реакциях в липидах печени при лучевом поражении // Мед. радиология. -1959.-N8.-с.32-38.

27. Захарченко В.И., Ларионов С.М. Сравнительное изучение свойств растворов некоторых поверхностно-активных веществ // Структура и функция биологических мембран-М.: 1971.-с.167-176.

28. Заянчковский И.Ф. Профилактика маститов у коров // Животноводство. -1981. -Мб. -с. 11-12.

29. Зверева Г.В., Олескив В.И. Развитие учения А.П.Студенцова о маститах и его использование в практике скотоводства // Тез. докл. республ. научно-произв. конф. по профилактике бесплодия и болезней молочной железы с.-х. животных.-Казань, 1984.-с.6-7.

30. Ивановская Т.Е., Катасова Л.П. Структура тимуса, иммунныйстатус и патологический процесс // Архив, патологии. 1986.-T.48.-Ml.-c.3-9.

31. Ивченко В.М. Эпизоотология и этиология маститов у коров на крупных молочных фермах и система противоэпизоотичес-ких мероприятий: Дисс. . д-ра вет. наук.-Кишинев, 1991.-403 с.

32. Игумнова Н.Д., Климова Н.В., Самойлов Д.Н., Соловьев В.М., Сколдиков А.П., Харкевич Д.А. Ингибирование ацетил-холинэстеразы бисчетвертичными аммониевыми солями, содержащие гидрофобные радикалы // Химике фармацевтический журнал. -1983.-N9.-с.1070- 1073.

33. Инихов Г.С. Биохимия молока и молочных продуктов.-М.Росагропромиздат, 1970.-316 с.

34. Каарде И.А., Сепп В. 0 распространении, диагностике и лечении маститов у коров /./ Тр. Эстонской с.-х. акад.-1961.-Т.18.-е.127-137.

35. Кавкало Д.Н. Лечение гнойных ран этонием // Клиническая хирургия.-1984.-N1.-с.47-49.

36. Кагава Я. Биомембраны. М.: Высшая школа, 1985. - 583с. Капришанская Н.К. Применение препарата аскохин при мастите у коров в сухостойный период: Автореф. дисс. . канд. вет. наук.-М., 1989.-19 с.

37. Карташова В.М. Гигиена получения молока-М.: Росагропромиздат, 1980.-181 с.

38. Карташова В.М., Ивашура А.И. Маститы коров М.: Агропро1. Л ГIО О ПОЛ „миöдciT, 1 аоо. iCiC.4 и.

39. Карташова В.М. Индикация патогенных бактерий в молоке и молочных продуктах М.: Колос, 1973.-112 с. Карташова В.М., Гончаров П.И. Производить только высокосортное молоко // Ветеринария.-1977.-N6.-с.28-29.

40. Карташова В.М., Игнатьев B.C. Мастит у коров микоплазме-ной этиологии // Вопросы вет. фармации и фаркмакотерапии: Тез. докл. Всесоюзн. научн.-практ. конфер.-Рига, 1982.-с.48-49.

41. Ковалев В.Ф., Волков И.Б., Виолин Б.В. Антибиотики, сульфаниламиды и нитрофураны в ветеринарии.- М.: Агропромиз-дат, 1988.-223 с.

42. Ковтуняк. H.A., Бордяковская Л.Г. Влияние этония на содержание РНК и ДНК и активность РНК и ДНК-азы в печени белых крыс // Фармакология и токсикология .-1972.-Т.35.-N1.-с.44-46.

43. Кондрахин И.П., Курилов Н.В., Малахов А.Г. Клиническая лабораторная диагностика в ветеринарии.- М.: Агропромиз-дат, 1985.-287 с.

44. КоролюкМ.А., Иванова Л. И., Майорова И. Г., Токарев В. Е. Метод определения активности каталазы // Лабораторное дело. -1988.-N1. -с.16-19.

45. Конев С.В., Волотовский И.Д. Фотобиология.-Минск.: Мздательство БГУ, 1974.-350 с.

46. Кохановсказ P.C., Мишенда Н.П., Писько Г.Т. Дачные лечения местных лучевых повреждений этонием и метацилином // Врачебное дело.-1971.-N2.-с.106-107.

47. Крутецкая З.И., Лонский A.B. Биофизика мембран. СПб.-Изд-во СПб. Ун-та, 1994. - 283с.

48. Кугер В.И. Приобретение резистентности стафилококками к этонию и некоторым антибиотикам // Микробиологический журнал.-1970,- N4.-с.502-505.

49. Кундиев Ю.И. Методы изучения кожно-резорбтивного действия химических веществ // В сб.: Методы определения токсичности и опасности химических веществ. М., "Медицина", 1970. - с.108-109.

50. Ленинджер А. Биохимия-М.: Мир, 1974.-с.251-252.

51. Лесных В.И., Положенко Э.Г., Минаков В.В. Применение аэрозоля этония при респираторных болезнях телят // Болезни незаразной этиологии в промышленном животноводстве, их профилактика и лечение: Сб. научн. тр. ВНИИНБЖ.-Воронеж, 1987.-с.45-46.

52. Лившц Г.Д., Бондаренко А.И. Эффективность мазей с этонием на различных мазевых основах в эксперименте // Здравохра-нение Белоруссии.-1985.-Ml.-с.55-57.

53. Литвин В.П. Этоний в ветеринарной практике // Ветеринария. -1985. -N3. -с.59-60.

54. Литвин В.П. Неспецифическая профилактика и терапия коли-бактериза, сальмонеллеза и парагриппа-3 телят этонием и бактерином: Автореф. дисс. . д-ра. вет. наук.-К., 1987.-36 с.

55. Логвинов Д.Д., Солодовников С.Б., Сидоренко А.И. Болезни вымени у коров.-Киев., 1979.-112 с.

56. Мардарь А.И., Павлюк И.М. Влияние додецония на рост и морфологию внутренних органов свиней крупной породы: Тез. докл. YI Всесоюзн. конф. по ПАВ и сырью для их производства. -Волгодонск, 1984.-с.316-317.

57. Мардарь А.И. Сравнительное изучение влияния этония и ма-нинала на гистофизиологию инсулярного аппарата // Актуальные вопросы экспериментальной и клинической эндокринологии: Тез. докл. III съезда эндокринологов УССР.-Виница,1982.-с.5?.

58. Машковский М.Д. Лекарственные средства-Минск.:Беларусь, 198?.-Т.2.-52? с.

59. Мельник И.Ю. Антимикробные свойства некоторых: поверхностно-активных веществ и антисептическое действие настойки ломадена: Автореф. дисс. . канд. вет. наук.-Воронеж. 1992.-20 с.

60. Метсанурк К.О. Распространение, этиология, диагностика и профилактика субклинических маститов на крупных фермах Эстонской ССР: Автореф. дисс. . канд. вет. наук.-Тарту, 1984.-19 с.

61. Мещерякова М., Аленичкина Г. Соматические клетки молока коров в различные периоды лактации и секрета молочной железы во время сухостоя // Сб. науч. трудов МВА.-1980.-Т.112.-с.76-78.

62. Мотуз Т.А., Буяновская Н.В., Лысяная Т.А. Влияние этония на некоторые показатели реактивности при пневмониях у детей // Физиологическая роль поверхностно-активных веществ: Тез. докл. Всесоюз.симпоз.-ЧерновцЫ. -1У/О.-и. < 1-/о.

63. Мудрый И.В. Загрязнение окружающей среды некоторых регионов Украины анионными поверхностно-активными веществами // Гигиена и санитария.-1998.-N3.-с.10-12. Мурина М.А., Рощупкин Д.И. Ослабление антиоксидантами из1974.-254 с.

64. Мяльдзин А.Р. Интенсивность перекисного окисления липидов в крови в зависимости от типа рациона, по сезонам года и периодам стельности // Всесоюзн. конф. "Виоантиоксидант": Тез. докл.-М., 1989.-с.201-202.

65. Надтока В.Л. Определение чувствительности стафилококков к антибактериальному действию хлорофилипта // Методические рекомендации.-Харьков, 1981.-5 с.

66. Нисенбаум Г.Д., Окунь И.М., Аузерихо Г.Д. Структурные перестройки мембран, индуцируемые антисептиками // Биофизика. -1976.-Т.21.-Вып.2.-с.271-275.

67. Орлова Э.П. Характеристика микрофлоры молока, выделенной при маститах коров // Сб. науч. работ / ЛЕИ.-1981.-Вып.66.-с.72-75.

68. Орлов Л. В. К методике определения общих липидов в сыворотке крови и тканях животных // Изучение липидного обмена у сельскохозяйственных животных / Методические указания .-Боровск, 1980.-с.34-36.

69. Павлова И.Б., Самойленко И.И. Исследование механизмов инактивации бактерий при воздействии катионного поверхностно-активного вещества // Антибиотики и медицинская биотехнология.-1985.-N3.-с.182-184.

70. Павлюк И.М., Остапович М.В. Влияние ПАВ на физиологические процессы в организме животных: Тез. докл. XI Всесоюз. конф. по ПАВ и сырью для их производства. -Волгодонск. -1984.-с.302-303.

71. Павлюк И.М. Мембранный потенциал гладких мышц тонкого кишечника при инкубации с препаратами поверхностно-активных веществ /7 XI съезд Укр. физиол. об-ва: Тез. докл.-Днепропетровск. -1982.-с.314-315.

72. Павлюк И.М. Биологический статус организма поросят при профилактике гипотрофии препаратами четвертичных аммониевых соединений: Автореф. дисс. . д-ра биол. наук.-Воронеж, 1992.-36с.

73. Париков В.А. Основные направления борьбы с маститом коров // Науч. основы профилактики и лечение патологии воспро-извод. функции с/х животных: Тез. докл. Всесоюзн. научн. конф. Воронеж, -1988. - с. 225- 227.

74. Париков В.А., Слободяник В.И. Профилактика мастита у коров // Зоотехния.-1995.-М10.-с.22-24.

75. Париков В.А., Слободяник В.И. Биосан при мастите у коров // Ветеринария.-1994.-М12.-с.31-35.

76. Подберезный В.В. Превентивная терапия при послеродовых болезнях и мастите коров // Ветеринария. -1996. -N2. -с. 40-42.

77. Подильчак М.Д., Заболоцкий А.Г.,Гуляева P.A. Вопросы ост- 133 рой гнойной инфекции // Матер. Респ. науч. конф.-Львов, 1972.-с. 182-133.

78. Пхакадзе Т.Н., Богомолова Н. С., Виноградова А.H. Новые антисептики и дезинфектанты в хирургии // Хирур-п-г*,-, И ППС ктр ^ О A Q1"?1УШ . ibau. -!чи. - О-. 044-0/ .

79. Пхакадзе Т.Я., Богомолова Н.С., Большаков А.Н. Стратегия и тактика применения новых антисептиков и дезинфектантов в хирургии // Эпидемиология и инфекционные болезни. -1998. -Ml. -с. 26 -30.

80. Пьявкин А.И. Этиология и профилактика респираторных болезней телят в межхозяйственных предприятиях: Автореф. дисс. . канд. вет. научк.-Воронеж, 1990.-25 с.

81. Радзиховский Б.Л., Титенко К.С., Ловия Г.Д. Применение нового препарата-этония при некоторых заболеваниях переднего отрезка глаза // Офтальмол. журн.-1969.-N2.-с.85-89.

82. Райд X.А., Олконен А.Г. Соматические клетки в молоке // скотоводство: Сб. научн. тр.-Таллин, 1980.-N50.-с.115-121

83. Рекомендации по борьбе с маститом коров.-М., 1985.-28 с.

84. Редкий М.И. Система антиоксидантной защиты у животных при стрессе и его фармакология регуляции: Автореф. дисс. . докт. биол. наук.-Воронеж, 1997.-с.51.

85. Рудзит Э.А., Ермаченко В.А. Сравнение антимикробных свойств каталина АБ и роккала и их действие на мембранные системы бактерий // Антибиотики.-1981.-N11. -с.847-852.

86. Рыбальченко В.К., Лукошко С.А., Островская Г.В. Поверхностно-активные свойства диметилэтаноламина и его влияние на зкто-АТФ-азную активность плазматических мембран // Бюлл. зксперим. биол. и мед.-1991.-N2.-с.157-159.

87. Рыбальченко В.К., Коганов М.М. Структура и функции мембран. Киев: Высшая школа, 1988. - 312с.

88. Савостин А.Н. Применение фурахина для лечения и профилактики субклинического мастита у коров в сухостойном периоде: Автореф. дисс. . канд. вет. наук.-Воронеж, 1988.-с.22.

89. Савостин А.Н. Антимикробные препараты и мастит коров // Ветеринария.-1983.-N11.-с.52-53.

90. Савостин А.Н., Париков В. А. Диагностика субклинического мастита у коров при различном функциональном состояниимолочной железы // Вопросы ветеринарной фармации и фармо-котерапии: Тез. докл. научн.-прак. совещ.-Сигулда, 1991.-с.84-88.

91. Слободяник В.И. Иммунологические аспекты патогенеза, новые принципы и средства лечения и профилактики мастита у коров: Автореф. дисс. . докт. вет. наук.-Воронеж, 1994.-с.38.

92. Сумарока М.В., Антонюк Л.П., Игнатов В.В. Характеристика фосфолипидного состава мембран бактерий Azospirillum bra-siiense // Микробиология.-1998.-Т.67.-Ml.-с.61-64. Тарусов Б.Н. Первичные процессы лучевого поражения.-М.: Госатом издат, 1962.-96 с.

93. Тионий // Нормативно-техническая документация: Утверждена ГУВ Росагропрома СССР 7.02.1986 /ВНИИНБЖ, ИОХ. АН. УССР.-Воронеж. Киев, 1986.-183 с.

94. Тодоров И. Клинические лабораторные исследования в педиатрии. София, 1966.-336 с.

95. Уайт А., Хендлер Ф., Смит 3. Основы биохимии-М.: Мир,•1 по Л тidol.-I.e.- f f О С.

96. Филипов H.H., Видении В.Н., Антонова В.А. Этоний при лечении ран // Ветеринария.- 1986.-Ml.-с.65-66. Хайдрих Х.Д., Грунер И. Болезни крупного рогатого скота .-М., 1985.-296 с.

97. Харченко С.Н., Литвин В.П., Писько Г.Т. Антимикробные

98. Якубчак О.Н. Роль некоторых бактерий в снижении качества молока и разработка ускоренных методов его . ветеринарии- санитарной экспертизы: Автореф. дисс. . доктр. вет. наук. -Москва, 1997. с. 40.

99. Яремчук А.Т., Баллура А.Г. Изучение поверхностоно-активных свойств декаметоксина // Научные труды / ВНИИ фармации. -1990.-Т.159.-с.106-110.

100. Anderson J.С. The prospects of immunisation against mastitis // Kieler Milchurtsch. Forschung.-1985.-Bei. 37.-p.524-527.

101. Azhar S., Mohan R., Ribonuclease histolitica // Infections unci Hyg.ictivitv of Entamoela- Vol.23.-N2.p270.278.1. Dcü 1teat

102. Res.-1981.-Vol.48.N1.-p.167-188.

103. Bertozzi I. et al. Prevensione delle mastiti bovine mediante applicasione di un film plástico sui caperzoli // Razza. Brung.-1983.-Vol. 5.-p.67-73.

104. Beuche W.,Schulz J. Mastitis und Milchleistung // Mh. Vet.-Med.-1975.-H.II.-p.410-415.

105. Bewersdorff H.W., Ohlendorf D. Golloid g Polymer Science

106. University of Dortmand.-1998.-Vol.266.-p.93-96. Boddie R.L., Nickerson S.C. Efficacy of dodezylamiolkul glocine teat dip. against. Staphylococcus aureus and Streptococcus agalactia Mastitis // J. Dairy Sc.-1986.-p.258-259.

107. Bragadin M. Mitochondrial hionergetics as affected by ca-tionie detergents // Arch Environ Contain and Toxicol. -1993. -Vol. 30. p. 280-284.

108. Brown M., Comlinson E. Sensitivity of pseudomonas aeruginosa envelope mutants to alkylbenzylmethy-lammonium chlorides // J. Fharm. Sci.-1979.-Vol.68.N12.-p.146-149. Butler R. Subclinical mastitis //Dairy Rerd ma-nay. -1974. -Vol.ll.-N8.-p.12-14.

109. Canepa F. Mechanism of Ganglion Blocking activity by Met-honium chains // Nature.-1962.-Vol.195.N4841.-p.573-575. Corrett J.B., Shockman G.D. Cellular lysis of Streptococcus faecalis induced with triton 100.// J.Bast.-1978.-Vo1.56.-N1.-p. 153-160.

110. Daltrey D.C., Hugo W.B. The effect of some antibacteral agents on proton fuse across the membrane of Clostridium welchil // Pharm. and. Pharmacol.-1974.-Vol.26, N12.-p.99.

111. Eberhart R.O. New infections in the dry period // Proceedings- 1982. -p. 101-111 .

112. Farnsworth R. Role of teat dips in mastitis control // J.an Veter. Med. Assh.-1986.-p.1116-1118.

113. Fischer G. Newbould F.H. An evaluation of a teat dip withdodecyl benzene sulfonis acid (1,94%) in preventing newbovine mammary gland infections in a commercial herd //

114. Can. Vet.J.-1982.-Vol.20, N6.-p.210-215.

115. Florence A.T., Cillan G.N., Biological implication of theuse of surfactants in medicines and the biphasicx effect of surfactants in biological systems // Pestic. Sci.-1974.-Vol.6, N4.-p.429-439.

116. Fock J., Johansow V., Sonne S. Ekonomiska forlus terav mastitis acetonemi och puerperal pares // Sven. veteri-nartidn.-1975.-N3.-p.93-97.

117. Gal ton D.M., Peterson L-6., Merrill W.G. -Evaluation of udder preparations on intzamammary infections // Dairy. Sc. -1988. Vol. 71, N5. -p. 1417-1421.

118. Godinho K., Bramley A. The efficacy of teat dips of differing persistence on teat infection by Streptococcus uberis and Echerichia coli in dry cows // Brit. Veter. J. -1980. -p. 136.

119. Goudwoard J., Bakker-De Roff E.G., Rawens-waajj-Kraan H.P.M. Lysozyme and its presence in bovine milk and serum // J.Dier.-1978.-Vol.103.-p.445-450.

120. Gregan F., Novomesky P., Racanska E., Kettman V.Synthesis and local anesthetic activity of some derivatives of N,N-dimethy1-2-(2 alkoxypheny1 carbamoyloxy)-1,1-dimethy-1ethyl-ammonium cllorides // Farmaco.-1992.-Vol.47, N3.-p.327-334.

121. Guski A. Jodophor "incozan W" in the control of masitis of the cows // Proceeding's of Vinternational Simposium on mastitis control. Bydgozez, Poland.-1981.-p.215-224.

122. Gwozdzinski K., Bartosz G., Leiko W. Effect of gaumia ra-diotion on the transport, of electrolyte spinlabels across the human erythrocyte membrane // Studia Biop-hys.-1982.-Vol, N2.-p.141- 145.

123. Hamann J. Euterentzundung, nach wie vor Schadensfactor. Nr. I. in der Milchviehhaltung- Eine Bilanz bisheriger hygienischer Bemühungen // Der. Tiezzuch-t er.-1975.-N6.-p.237-241.

124. Heath R.L. The energy state and structure of isolated chloroplasts: The oxidative reaction involving ihe watersplitting step of photosynthesis // Jnterh. Rev. Cy-tol.-1973.-V.34.-p.49-101.

125. Helenius A., Simons K. Solubilization of membranes hy detergents // Biochim. biophys. acta.-1975.-Vol.415.-p.29-79

126. Higginson S. Breakthrough in control of environmental mastitis // Dairy Farmer.-1988.-V.35.-p.44-49.

127. Hoppel C.Carnitine and carnitine palmitogltransferase in fatty acid oxidation and Retosis // Fed. Proc.-1982.-Vol.41, N12.-p.2853-2857.

128. Hughes R., Millburn P., Williams R. Molecular weight as a Factor in the Exeretion of Monoguaternary Ammonium Cations in the Bile of the Rak, Rabbit, and Guinea pig // Bi-ochem.J.-1973.-Vol.136, N4.-p.967-978.

129. Hugo W.B., Daitrey D.C. Studies on the mode of Chlorhexidine on ail, its antibacterial activity and physical effects // Microbios.-Vol.44.-p.119-129.

130. Hunter A., Jeferey D. Subclinical mastitis in suckler cows // Veter. rec.-1976.-N20.-p.442-447.

131. Jackson E., Bramley A. Coliform mastitis in Practice. -1983. -Vol.5, N4.-p.135-137.

132. Jshikowa H., Shimizu T. Depression B-lymphocytes by mastitis and treatment with Levamisole // J. Dairy Sei.-1983.-Vol.66, N3.-p.556-561.

133. Kleszezynska H., Maty.jasik S., Przestabski S. et al. Jnfluense of n-alkyloxymethylene-ammonium cllorides on the erythrocyte membrane // Studia Biophys.-1982.-Vol.89, N2.-p.123-132.

134. Kraushaer A.E., Schunk R.W., Thym H.F. Farmacological properties of Diisopropylamin // Arsneimittel-Fors-chung.-1963.-Vol. 13, N2.-p.109.

135. Mol Cell Biol Hydrophobis Segment within the 81-Aminoacid Domain of TFIIIA from Saccharomyces cerevisiae is Essen

136. Nowak M., Urban M. The shear-induced structure.-A view ins i de.-1997.-Vo1.11, N4.-p.54-57.

137. Opdebeeck I.P. Mammary gland immunity // J. Am. Veter. Med. Assn.-V.181.-MIO.-p.1061-1065.

138. Scheldrake R., Noare R. Post-milking jodine teat skin de-sinfectans Neb intrammammary infection rats // J.Dairy Res.-1980.-Vol.47.-p.227-231.

139. Schilstra M., Veldink A., Viegenthart J. Effect of nonio-nis detergents on lipoxygenase catalysis // Lipids. -1994.-Vol.29.- p.225-231.

140. Somogyi J. et al. Activity and strueturae changesin Mg+ -dependent -and (Na+ + FT )-activated adenosine triphosphatase prepared from rat brain followind detergent treatment // Acta. biochim. biophys. Acad. seihung. -1969.-N4.-p.219-236.

141. Tolle A. Die subklinische Kokkchmast.itis des Rindes // Eine Ubersicht.- Zbl. Veter.-Meg. Reine B.- 1982.-Bd.29, N5.-p.329- 358.

142. Ungaream C., Mancinna V. Afectianile glandei mammarila vaci.-Bucuresti.-1983.-168 p.

143. Vanini G., Mares N., Giori P. et.al. Antifungal properties of cose pyrasolyl aikyl sufides. Electron microseopie evidence of two dermatophytes and Handida albicans // My-copathologia.-1981.-Vol.74, N1.-p.14.

144. Voigt. A., Bergmann A. Immunoglologische Grundlagen der Jnfektionsabwehr in Rindereuter // Tierhysiene information. -1980. -N12. -p. 249-258.

145. Watts J.L., Pankey J.W., Oliver W.M. Prevalence and effects of intramammary infection in beef cows // J. an.m. Sc.-1986.-Vol. 62, Ml.-p.16-20.

146. Weigt U. Mastitiserreger lieben Umweltmangel // Ag-rar-Ubersicht.-1976.-N9.-p.406-407.

147. Willt G.S. Control of mastitis in the dairy herd by hygiene and managment // J.Dairy Sei.-1982.-Vol.52, N4.-p.696-707.

148. Wilson E.S. Mastitis control in Great Britain /7 Bet. med nauki.-1975.-N3.-p.99-101.

149. Wilson E.S. Improvements in or relating to iodophops Patent Veiikobritania N 2 120 550. A01 N 59/12, 1983. Wilson E.S. Quaternary ammonium compound disinfectants for use in bovine mastitis Patent Veiikobritania N 2 121 279. A61 K 31/14, 1983.

150. Yoang L., Jernigan L., Covell D. Arole for surface hud-rophprotein recognition // Protein Sei.- 1994.- N3.- p.rj'l r~> '■iOf. < 1 ! < ,Cb .

151. Настоящие технические условия распространяются на крем массажный бактерицидный, предназначенный для профилактики мастита у коров посредством антисептической обработки вымени.

152. Крем массажный бактерицидный представляет собой смесь диме-тил, дидециламмония бромида карбамида кларата и диметилсульфокси-да на вазилиновой основе.1. ТЕХНИЧЕСКИЕ ТРЕБОВАНИЯ.

153. Крем массажный бактерицидный должен соответствовать требованиям настоящих технических условий.

154. Крем массажный бактерицидный изготавливается по опытно-промышленному технологическому регламенту, разработанному во Всероссийском научно-исследовательском ветеринарном институте патологии, фармакологии и терапии и утвержденному директором ВНИ-ВИПФиТ.

155. Полученную пробу разделяют на две части. Одна часть ис-пытывается на соответствие требований настоящих ТУ. Вторая часть остается на хранении в предприятии-изготовителе до окончания гарантийного срока хранения.

156. Цилиндр мерный стеклянный вместимостью 50 см3 по ГОСТ 1770-74Е, стакан химический 50 см3 по ГОСТ 10394-72, колба коническая вместимостью 200 см3 по ГОСТ 1770-74Е, оН-мето любой марки

157. Чувствительность метода с использованием 0,1 н раствора йо-да-наличие препарата в концентрации до 10 мкг/см3.

158. Определение массовой доли диметил, дидециламмония бромид карбамида кларата.46.1. Аппаратура, реактивы и растворы.

159. Весы лабораторные по ГОСТ 24104-80, 2-го класса точности или весы подобного типа с пределом взвешивания 200 г.

160. Мешалка магнитная типа ММ-ЗМ по ТУ 25-11-834-73.

161. Бюретка 6-2-5 ТХС по ГОСТ 20292-74.

162. Колба Кн 1-100-29/32 ТС по ГОСТ 25336-82.

163. Цилиндр исполнения 1 по ГОСТ 1770-74 вместимостью 10 см3.

164. Ангидрит уксусный по ГОСТ 5815-77, х.ч. или ч.д.а.

165. Кислота уксусная по ГОСТ 61-75, х.ч.

166. Кислота хлорная по ТУ 6-09-2878-84, раствор концентрации с (HCLO4)=0,1 моль/дм3 (0,1 н.) в ледяной уксусной кислоте.

167. Содержимое колбы перемешивают на магнитной мешалке, прибавляют одну каплю кристаллического фиолетового и титруют из бюретки раствором хлорной кислоты до перехода окраски раствора в чисто желтую. В конце титрования титрант прибавляют медленно.

168. Параллельно проводят контрольный опыт в тех же условиях.46.3. Обработка результатов.

169. Массовую долю диметил, дидециламмония бромида карбамида кла-рата (XI) в процентах, в пересчете на сухое вещество, вычисляют по формуле:

170. Контроль на стерильность слагается из следующих видов бактериологического исследования:а) выявление аэробных микроорганизмов;б) выявление анаэробных микроорганизмов;в) выявление спор плесневых грибов.

171. Анализы должны проводиться при строгом соблюдении максимальной асептики в боксах или специально приспособленных комнатах.

172. ТРАНСПОРТИРОВКА И ХРАНЕНИЕ.

173. Транспортирование препарата проводят всеми видами транспорта в соответствии с правилами перевозки грузов, действующими на данном виде транспорта, согласно ГОСТ Г/768-80.5. УКАЗАНИЕ ПО ПРИМЕНЕНИЮ.

174. Препарат- применяют в ветеринарной практике для повышения санитарного качества молока и профилактике мастита.7. ГАРАНТИИ ИЗГОТОВЛЕНИЯ.

175. Предприятие-изготовитель гарантирует соответствие препарата крем массажный бактерицидный требованиям настоящих технических условий при соблюдении потребителем условий транспортирования, хранения и применения.

176. Гарантийный срок хранения препарата 6 месяцев со дня изготовления. Днем изготовления считают день производства и расфасовки препарата.

177. Пояснительная записка к проекту технических условий на препарат "Крем массажный бактерицидный"

178. Основание для разработки технических условий.

179. Проект технических условий на препарат "Крем массажный бактерицидный'' разработана Всероссийским научно-исследовательским ветеринарным институтом патологии, фармакологии и терапии.

180. Основной задачей разработки проекта технических условий является установление норм, требований и методов контроля, обеспечивающих оптимальный уровень качества стандартизируемого препарата.

181. Введение в действие настоящих технических условий позволит установить качественную и количественную оценки препарата и внедрить препарат в массовое производство.

182. Проект технических условий разработан впервые на опытно-промышленную партию.

183. Характеристика объекта стандартизации.

184. Препарат крем массажный бактерицидный представляет собой мазеподобную смесь диметил, дидециламмония бромида карбамида кларата, диметилсульфоксида и вазелина.

185. Препарат крем массажный бактерицидный предназначена для профилактической обработки поверхности кожи молочной железы.

186. Для стандартизации препарата считаем обязательным проверить следующие показатели:а) внешний вид, цвет, запах;б) рН;в) подлинность;г) массовую долю диметил, дидециламмония бромида карбамида кларата, %.- 157

187. Настоящие технические условия распространяются на гель защит ный бактерицидный, предназначенный для профилактики мастита у коров посредством антисептической обработки сосков молочной железы.

188. Гель защитный бактерицидный представляет собой раствор диме-тил, дидециламмония бромида карбамида кларата и метилцеллюлозы в воде.1. ТЕХНИЧЕСКИЕ ТРЕБОВАНИЯ.

189. Гель защитный бактерицидный должен соответствовать требованиям настоящих технических условий.

190. Гель защитный бактерицидный изготавливается по опытно-промышленному технологическому регламенту, разработанному во Всероссийском научно-исследовательском ветеринарном институте патологии, фармакологии и терапии и утвержденному директором ВНИ-ВИПФиТ.

191. Для производства 100 л препарата применяется сырье:диметил, дидециламмония бромид карбамид кларатметилцеллюлоза, ГОСТвода дистиллированная, ГОСТ 6709-72

192. Совмещение транспортной маркировки и маркировки, характеризующей данные об упаковочной продукции, на одной стороне транспортной тары не допускается.2. ТРЕБОВАНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ.

193. При производстве геля защитного бактерицидного применяются малотоксичные вещества-диметил, дидециламмония бромида карбамида кларата, метилцеллюлоза и дистиллированная вода.

194. Диметил, дидециламмония бромида карбамида кларата представо*ляет собой микрокристаллический порошок белого цвета, без запаха и вкуса, негигроскопичный, сыпучий.

195. Полученную пробу разделяют на две части. Одна часть ис-пытывается на соответствие требований настоящих ТУ. Вторая часть остается на хранении в предприятии-изготовителе до окончания гарантийного срока хранения.

196. Контроль препарата по требованию потребителя проводит ОТК предприятия-изготовителя или Всероссийский государственный научно-исследовательский институт контроля, стандартизации и сертификации ветеринарных препаратов.4. МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ.

197. Для контрольной проверки качества препарата, его соответствия требованиям настоящих технических условий должны применяться методы анализов, указанные ниже.

198. Определение внешнего вида, цвета.

199. Внешний вид и цвет препарата определяют визуально, просматривая его в чалке типа ЧБН по ГОСТ 25336-82 на фоне белой бумаги.

200. Залах определяют органолептически.44. Определение значения рН.44.1. Посуда, оборудование.

201. В качестве контроля используют гель без препарата с тем же количеством, индикатора.

202. Чувствительность метода наличие препарата в концентрации до 3 мкг/см3.

203. Определение массовой доли диметил, дидециламмония бромида карбамида кларата.46.1. Аппаратура, реактивы и растворы.

204. Весы лабораторные по ГОСТ 24104-80, 2-го класса, точности или весы подобного типа с пределом взвешивания 200 г.

205. Мешалка магнитная типа ММ-ЗМ по ТУ 25-11-834-73.

206. Бюретка 6-2-5 ТХС по ГОСТ 20292-74.

207. Колба Кн 1-100-29/32 ТС по ГОСТ 25336-82.

208. Цилиндр исполнения 1 по ГОСТ 1770-74 вместимостью 10 см3. .

209. Ангидрит уксусный по ГОСТ 5815-77, х.ч. или ч.д.а.

210. Кислота уксусная по ГОСТ 61-75, х.ч.

211. Кислота хлорная по ТУ 6-09-2878-84, раствор концентрации с (НС104)=0Д моль/дм3 (0,1 н.) в ледяной уксусной кислоте.

212. Параллельно проводят контрольный опыт в тех же условиях.46.-3. Обработка результатов.

213. Массовую долю диметил, дидециламмония бромида карбамида кла-рата (Х1) в процентах, в пересчете на сухое вещество, вычисляют по формуле:

214. Контроль на стерильность слагается из следующих видов бактериологического исследования:а) выявление аэробных микроорганизмов;б) выявление анаэробных микроорганизмов;в) выявление спор плесневых грибов.

215. Анализы должны проводиться при строгом соблюдении максимальной асептики в боксах или специально приспособленных комнатах.

216. ТРАНСПОРТИРОВКА И ХРАНЕНИЕ.

217. Транспортирование препарата проводят всеми видами транспорта в соответствии с правилами перевозки грузов, действующими на данном виде транспорта, согласно ГОСТ 17768-80.6. УКАЗАНИЯ ПО ПРИМЕНЕНИЮ

218. Препарат применяют в ветеринарной практике для повышения санитарного качества молока и профилактики мастита.7. ГАРАНТИИ ИЗГОТОВИТЕЛЯ

219. Предприятие-изготовитель гарантирует соответствие геля защитного бактерицидного требованиям настоящих технических условий при соблюдении потребителем условий транспортирования, хранения и применения.

220. Гарантийный срок хранения препарата 6 месяцев со дня изготовления. Днем изготовления считает день производства и расфасовки.

221. ПЕРЕЧЕНЬ нормативно-технической документации, на которую имеется ссылка в технических условиях "Гель защитный бактерицидный"

222. Пояснительная записка к проекту технических условий на "Гель защитный бактерицидный"

223. Основание для разработки технических условий.

224. Проект технических условий на гель защитный бактерицидный, разработанный Всероссийским научно-исследовательским ветеринарным институтом патологии, фармакологии и терапии.

225. Основной задачей разработки проекта технических условий является установление норм, требований и методов контроля обеспечивающих оптимальный уровень качества стандартизируемого препарата.

226. Введение в действие настоящих технических условий позволяет установить качественную и количественную оценку препарата и внедрить препарат в массовое производство.

227. Проект технических условий разработан впервые на опытно- промышленную партию.

228. Характеристика объекта стандартизации.

229. Гель защитный бактерицидный представляет собой раствор диметил, дидециламмония бромида карбамида кларата и метилцеллюло-зы в воде.

230. Гель защитный бактерицидный предназначен для профилактики мастита у коров посредством антисептической обработки сосков вымени коров в период лактации.

231. Для стандартизации препарата считаем обязательным проверить следующие показатели:а) внешний вид, цвет, запах;б) рН;в) подлинность;г) массовую долю диметил, дидециламмония бромида карбамида кларата,

232. Методы определения вышеуказанных показателей качества является общеизвестными.

233. Основой для разработки методов анализа служила следую1671. УТВЕРЖДАЮ