Исследование роли рецепторной тирозинкиназы FLT-4 и ее лиганда VEGF-C в опухолевом росте тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.14, кандидат биологических наук Шушанов, Саин Сакенович

• Шушанов, Саин Сакенович
• кандидат биологических наук
• 2000

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Шушанов, Саин Сакенович

Список сокращений.

I. Введение.

II. Обзор литературы.

II. 1. Ангиогенез - общие представления.

11.2. Механизмы ангиогенеза. Роль VEGF-A.

I.2.1 .VEGF-A - регулятор формирования кровеносных сосудов у эмбриона.

II.2.2. Ключевая роль VEGF-A в механизмах ангиогенеза в опухолях.

11.3. Семейство VEGF.

11.3.1. VEGF-A.

11.3.2. PLGF.

11.3.3. VEGF-B.

11.3.4. VEGF-D.

11.3.5. VEGF-C - фактор, исследуемый в данной работе.

11.4. Рецепторы семейства VEGF.

11.4.1. Общая характеристика рецепторов VEGF.

11.4.2. VEGFR-1/FLT-l и VEGFR-2/KDR. Функциональное различие и роль в росте опухолей.

11.4.3. VEGFR-3/FLT-4 - рецептор, исследуемый в данной работе.

III. Материалы и методы.

III. 1 .Образцы ткани и выделение РНК.

III.2.Определение экспрессии мРНК с помощью полуколичественной полимеразной цепной реакции

ПЦ1) с предварительной реакцией обратной транскрипции.

III.3.Исследование роли эндогенного VEGF-C в пролиферации клеток А549.

III.4. Культура клеток для исследования зависимости экспрессии мРНК гена VEGF-C от активации онкогена N-ras^P12.

Ш.5.Иммуногистохимическое окрашивание ткани.

111.6. Western блот гибридизация.

111.6.1. Получение препаратов тотального белка.

111.6.2. Определение концентрации белка по методу Лоури.

111.6.3. Электрофорез белков в полиакриламидном геле.

111.6.4. Перенос белков на нитроцеллюлозную мембрану.

111.6.5. Иммуноблоттинг.

111.6.6. Использованные антитела.

111.6.7. Список использованных растворов.

111.7. Методы статистического анализа.

IV. Результаты.

IV. 1. Исследование экспрессии фактора роста эндотелия сосудов VEGF-C и двух изоформ его рецептора в ткани щитовидной железы человека при различных ее патологиях.

IV. 1.1. Характеристика исследованных вариантов патологии щитовидной железы человека.

IV. 1.2. Исследование экспрессии мРНК гена VEGF-C и двух изоформ его рецептора в ткани щитовидной железы человека при различных ее патологиях.

VI. 1.3. Иммуногистохимическое исследование экспрессии

FLT-4 в нормальной и опухолевой ткани щитовидной железы человека.

IV.2. Исследование экспрессии мРНК гена VEGF-C и двух изоформ его рецептора в нормальной и опухолевой ткани молочной железы человека.

IV.3. Исследование экспрессии мРНКгена VEGF-C, FLT-4 и FLT-4L в нормальной и опухолевой ткани шейки матки

Список сокращений: фактор роста эндотелия сосудов - С. рецептор УЕвР-С. короткая изоформа рецептора РЬТ-4. длинная изоформа рецептора РЬТ-4. р2-микроглобулин. фактор проницаемости сосудов, фактор роста эндотелия сосудов - А. рецептор УЕОР-А. рецептор УЕвР-А. кислый фактор роста фибробластов. основной фактор роста фибробластов. плацентарный ростовой фактор, фактор роста выделяемый гепатоцитами. фактор некроза опухоли-а. трансформирующий ростовой фактор-а. трансформирующий ростовой фактор-р. фактор роста выделяемый тромбоцитами, фактор роста эпидермиса, ангиопоэтин -1. рецептор Аг^-1.