Изолирование лекарственных средств из плазмы крови с применением протеолитических ферментов тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.04.02, кандидат фармацевтических наук Чувина, Наталия Александровна

• Чувина, Наталия Александровна
• кандидат фармацевтических наук
• 2013

Оглавление диссертации кандидат фармацевтических наук Чувина, Наталия Александровна

СОДЕРЖАНИЕ

ВВЕДЕНИЕ 6 ГЛАВА 1. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

1.1 Связывание лекарственных веществ с белками крови

1.1.1 Конкурентные взаимоотношения при взаимодействии ксенобиотиков с белками

1.1.2 Факторы, влияющие на связывание лекарственных средств

1.1.3 Участки..связывания_альбумина_плазмы_крови_______21__

1.1.4 Методы определения связанной и свободной фракции лекарственного средства с белком

1.2 Ферментативный гидролиз

1.2.1 Общие условия ферментативного гидролиза

1.2.2 Ферментативный гидролиз трипсином

1.2.3 Ферментативный гидролиз пепсином

1.2.4 Ферментативный гидролиз химотрипсином

1.2.5 Ферментативный гидролиз химопсином

1.3 Методы изолирования токсических веществ из крови

1.4 Твердофазная экстракция

1.4.1 Область применения и принцип действия ТФЭ

1.4.2 Основные стадии твердофазной экстракции

1.4.3 Оборудование для твердофазной экстракции

1.4.4 Сорбенты Waters Oasis для твердофазной экстракции

1.5 Внутрилабораторный контроль качества количественных методов лабораторных исследований с использованием контрольных веществ 40 ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ 1 43 ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ

ГЛАВА 2. МЕТОДЫ И ОБЪЕКТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 Объекты исследования

2.2 Методы исследования, приборы и реактивы

2.3 ИССЛЕДОВАНИЕ СУБСТАНЦИЙ

2.3.1 Выделение оснований дифенгидрамина, хлоропирамина, клемастина, папаверина и целекоксиба из лекарственной формы

2.3.2 Исследование веществ методом тонкослойной хроматографии

2.3.3 Исследование веществ методом инфракрасной спектроскопии

2.3.4 Исследование веществ методом спектроскопии

в ультрафиолетовой области

2.3.5 Исследование веществ методом газовой хроматографии

с масс-селективным детектором

2.3.6 Исследование фармацевтических субстанций, оснований и целококсиба выделенных из лекарственных форм методом высокоэффективной жидкостной хроматографии 59 ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ 2 67 ГЛАВА 3. ИЗОЛИРОВАНИЕ АНАЛИЗИРУЕМЫХ ВЕЩЕСТВ

ИЗ ПЛАЗМЫ КРОВИ

3.1 Моделирование комплекса «плазма крови - раствор анализируемого вещества»

3.2 Изолирование исследуемых веществ из плазмы крови

методом прямой жидкость-жидкостной экстракции

3.3 Изолирование анализируемых веществ из плазмы крови

с использованием осаждающих агентов

ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ 3

ГЛАВА 4. ПРИМЕНЕНИЕ ФЕРМЕНТАТИВНОГО ГИДРОЛИЗА ПРИ ИЗОЛИРОВАНИИ ИССЛЕДУЕМЫХ ВЕЩЕСТВ ИЗ ПЛАЗМЫ КРОВИ

4.1 Изолирование кофеина методом прямой жидкость-жидкостной экстракции из модельного комплекса с альбумином

4.2 Выбор оптимальных условий для проведения

ферментативного гидролиза при изолировании исследуемых веществ 86 4.2.1 Гидролиз трипсином модельного комплекса

«раствор альбумина - раствор кофеина»

4.2.2 Гидролиз химотрипсином модельного комплекса

«раствор альбумина - раствор кофеина»

4.2.3 Гидролиз пепсином модельного комплекса

«раствор альбумина - раствор кофеина»

4.2.4 Гидролиз химопсином модельного комплекса

«раствор альбумина - раствор кофеина»

4.3 Ферментативный гидролиз плазмы крови

4.3.1 Гидролиз трипсином модельного комплекса плазмы крови с анализируемыми веществами

4.3.2 Гидролиз химотрипсином модельного комплекса плазма крови с анализируемыми веществами

4.3.3 Гидролиз химопсином модельного комплекса плазма крови с анализируемыми веществами

4.3.4 Гидролиз пепсином модельного комплекса плазма крови с исследуемыми веществами

4.4 Апробация методики на экспертном материале 102 ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ 4 103 ГЛАВА 5. ИЗОЛИРОВАНИЕ АНАЛИЗИРУЕМЫХ ВЕЩЕСТВ

ИЗ ПЛАЗМЫ КРОВИ МЕТОДОМ ТВЕРДОФАЗНОЙ ЭКСТРАКЦИИ

5.1 Изолирование анализируемых веществ из плазмы крови

методом ТФЭ на патронах марки Oasis HLB

5.2 Изолирование анализируемых веществ из плазмы крови

методом ТФЭ на патронах марки Oasis МСХ

5.3 Изолирование анализируемых веществ из плазмы крови

методом ТФЭ на патронах марки Oasis WCX

5.4 Изолирование анализируемых веществ из плазмы крови

методом ТФЭ на патронах марки Oasis МАХ

5.5 Изолирование анализируемых веществ из плазмы крови

методом ТФЭ на патронах марки Oasis WAX

ВЫВОДЫ ПО ГЛАВЕ 5

РЕЗУЛЬТАТЫ И ВЫВОДЫ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ПРИЛОЖЕНИЕ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Изолирование лекарственных средств из плазмы крови с применением протеолитических ферментов»

ВВЕДЕНИЕ

Химико-токсикологический анализ в случае острых отравлений различными ядами, и в частности лекарственными средствами, является одним из наиболее важных этапов в комплексе диагностических и лечебных мероприятий. Проведение лабораторного исследования включает четыре основных этапа: изолирование токсических веществ из биологического объекта (биологических жидкостей, биологического материала), очистку и концентрирование полученного извлечения, идентификацию веществ и их количественное определение.

Для диагностики острых отравлений наиболее информативной жидкостью является кровь, так как после поступления в кровеносное русло любое химическое вещество, в том числе и лекарственное средство, в той или иной степени связывается с белками плазмы крови, преимущественно с альбумином. Исследование плазмы крови позволяет судить о наличии и фактическом содержании токсикантов в организме в определенный момент времени, при этом фармакокинетический показатель степени связывания с белками плазмы крови для некоторых лекарственных средств может достигать 90-98% (например, дифенгидрамин, фенотиазины и др.).

Основным и наиболее важным в анализе токсических веществ является этап изолирования ксенобиотиков из биологического объекта. На этом этапе можно частично или полностью потерять токсическое вещество и впоследствии не обнаружить его даже при использовании современного и высокочувствительного аналитического оборудования. Применяемые в настоящее время методы изолирования лекарственных средств не всегда отвечают требованиям современной аналитической токсикологии. Известно, что для изолирования лекарственных средств из крови (плазмы крови) используются методы: прямой жидкость-жидкостной экстракции органическим растворителем (ЖЖЭ) при определенном значении рН среды; экстракция после использования осаждающих агентов (трихлоруксусной кислоты раствора 50% (ТХУ) или натрия вольфрамата раствора 10% в

серной кислоты растворе 25%) или высаливающих агентов (аммония сульфата, натрия хлорида растворы насыщенные); также изолирование после гемолиза эритроцитов крови водой очищенной. В то же время, существующие методы изолирования токсических веществ из крови практически не позволяют выделить фракцию токсиканта, связанную с белками крови, и при ЖЖЭ в органический слой экстрагируется только его свободная фракция.

В связи с вышеизложенным, для целей химико-токсикологического анализа актуальным остается вопрос разработки новых или усовершенствование существующих методик изолирования токсических веществ, позволяющих максимально разрушить комплекс «белок -токсикант». Это позволит существенно увеличить процент выделенного токсического вещества, что, в свою очередь, повысит эффективность лабораторной диагностики острых отравлений. Весьма перспективным является применения с этой целью различных ферментативных препаратов. Методики ферментативного гидролиза биологических жидкостей (мочи) для разрушения водорастворимых метаболитов ксенобиотиков (глюкурониды, сульфаты) с применением ферментов [3-глюкуронидазы и (3-сульфотазы в литературе описаны, однако сведения о применении протеолитических ферментов для гидролиза крови, плазмы крови с целью выделения токсиканта в литературе отсутствуют.

Цель работы. Разработка метода изолирования лекарственных средств из плазмы крови после гидролиза ее белковых молекул протеолитическими ферментами для целей химико-токсикологического анализа.

Задачи исследования. Для достижения поставленной цели было необходимо решить следующие задачи:

1. Выбрать лекарственные средства, различающиеся по химическому строению, кислотно - основным свойствам, степени связывания с белками плазмы крови и наиболее часто встречающиеся в судебно — химической и химико — токсикологической экспертизе.

2. Установить оптимальные условия (время и температура инкубации, значение рН среды, соотношение субстрат : фермент) для проведения гидролиза протеолитическими ферментами (пепсин, трипсин, химотрипсин, химопсин) на примере модельного комплекса «раствор альбумина - раствор кофеина»

3. Применить разработанные методики ферментативного гидролиза для изолирования анализируемых веществ из модельного комплекса «плазма крови - раствор анализируемого вещества».

4. Сравнить эффективность известных методов изолирования изучаемых веществ из плазмы крови (жидкость — жидкостная экстракция с осаждением и без осаждения белков, твердофазная экстракция) с разработанным методом ферментативного гидролиза белков плазмы крови и определить для него некоторые валидационные характеристики (сходимость, внутрилабораторная воспроизводимость и робастность).

5. Апробировать разработанный метод на экспертном материале и внедрить его в практику работы бюро судебно-медицинской экспертизы и наркодиспансеров.

Научная новизна работы. Доказано, что при прямой ЖЖЭ органическим растворителем извлекается из плазмы крови лишь свободная, не связанная с белками крови фракция анализируемых веществ; предварительное использование осаждающих реагентов при изолировании токсических веществ не всегда приводит к увеличению степени экстракции.

Впервые изучена возможность изолирования исследуемых веществ из плазмы крови с применением гидролиза протеолитическими ферментами и выявлены ее особенности. Показано, что на процесс ферментативного гидролиза белков плазмы крови влияют свойства фермента, время инкубации, соотношение субстрат : фермент, значение рН среды и температура.

Установлено, что по сравнению с методом ЖЖЭ изолирование исследуемых веществ из плазмы крови после гидролиза химопсином для кофеина, целекоксиба, оснований дифенгидрамина, хлоропирамина,

клемастина, папаверина и ферментом трипсином для производных барбитуровой кислоты (фенобарбитал, барбамил) приводит к увеличению степени экстракции в 1.8-2 раза, как и при изолировании их методом твердофазной экстракции (ТФЭ) на патронах марки Oasis HLB. Использование при гидролизе ферментов: пепсин, химотрипсин приводит к незначительному увеличению степени экстракции изученных лекарственных средств по сравнению с методами ЖЖЭ и ТФЭ, ввиду их большой специфичности по отношению к гидролизу пептидных связей определенных пар аминокислот в белковой молекуле.

При целенаправленном исследовании оснований дифенгидрамина, хлоропирамина, клемастина, папаверина и целекоксиба следует использовать патроны марки Oasis МСХ, а для веществ кислотного характера (производные барбитуровой кислоты) - патроны марки Oasis МАХ, что также позволяет увеличить степень экстракции по сравнению с методом ЖЖЭ. Патроны марки Oasis WCX и WAX не могут быть использованы для изолирования изучаемых ксенобиотиков, так как они не осаждаются на сорбенте патрона.

Впервые показано, что при использовании метода ферментативного гидролиза плазмы крови с целью изолирования ксенобиотиков и метода ТФЭ результаты исследования сопоставимы. Метод ферментативного гидролиза можно рекомендовать для использования в практике работы судебно-химических и химико-токсикологических лабораторий.

Практическое значение работы. Разработаны методики гидролиза плазмы крови протеолитическими ферментами с целью последующего изолирования токсических веществ.

Проведена сравнительная оценка методов изолирования токсикантов из плазмы крови: ЖЖЭ органическим растворителем, изолирование после осаждения белков, изолирование после ферментативного гидролиза и изолирование методом ТФЭ.

Определены некоторые валидационные характеристики (прецизионность - сходимость и внутрилабораторная воспроизводимость, робастность) для разработанного метода ферментативного гидролиза плазмы крови ферментом химопсином для изолирования кофеина, целекоксиба, дифенгидрамина, хлоропирамина, клемастина, папаверина и трипсином для некоторых производных барбитуровой кислоты (барбамила, фенобарбитала).

Разработанные методики апробированы, утверждены и внедрены в практику работы судебно-химических отделений ГКУЗ БСМЭ ЛО и СПб ГБУЗ БСМЭ, химико-токсикологической лаборатории СПБ ГБУЗ МНД №1 и ГУ СПб НИИ СП им. И.И. Джанелидзе и используются в учебном процессе кафедр фармацевтической химии ГБОУ ВПО СПХФА Минздрава России и ГБОУ ВПО ПГФА Минздрава России.

Апробация работы. Основные материалы работы доложены на Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 90-летию СПб ГУЗ БСМЭ, «Актуальные вопросы судебно-медицинской экспертизы трупа» (Санкт-Петербург, 2008); Российской научно-практической конференции с международным участием «Актуальные вопросы судебно-химических, химико-токсикологических исследований и фармацевтического анализа» (Пермь, 2009); Всероссийской научной конференции студентов и аспирантов с международным участием «Молодая фармация - потенциал будущего» (Санкт-Петербург, 2011); Российской научной конференции с международным участием «Актуальные проблемы токсикологии и радиобиологии» (Санкт-Петербург, 2011); научной конференции «Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции» (Пятигорск, 2011 и 2012), научно-практической конференции, посвященной 95-летию СПб ГУЗ БСМЭ «Актуальные вопросы профилактики и лабораторной диагностики в судебно-медицинской экспертизе» (Санкт-Петербург, 2013).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 13 печатных работ, из них 6 в рецензируемых изданиях, рекомендованных ВАК.

Связь задач исследования с планом фармацевтических наук

Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом исследовательских работ ГБОУ ВПО СПХФА Минздрава России «Синтез, изучение строения, фармакологического действия новых биологических веществ или модифицированных субстанций, препаратов и разработка валидированных методик их стандартизации», номер государственной регистрации ЦИТиФ №01201252028.

Основные положения, выносимые на защиту:

1) Обоснование результатов экспериментальных исследований по изолированию заявленных ксенобиотиков из плазмы крови методом ЖЖЭ органическим растворителем, и производных барбитуровой кислоты после осаждения белков трихлоруксусной кислоты раствором 50% и натрия вольфрамата раствором 10% в серной кислоты растворе 25% .

2) Данные экспериментальных исследований по изолированию ксенобиотиков из плазмы крови после ферментативного гидролиза протеолитическими ферментами.

3) Результаты экспериментальных исследований по изолированию веществ методом ТФЭ на патронах марки Oasis (HLB, МСХ, WAX, МАХ).

4) Сравнительная оценка разработанного метода ферментативного гидролиза с методами прямой ЖЖЭ органическими растворителем, с осаждением и без осаждения белков плазмы крови и ТФЭ.

Объем и структура работы. Диссертационная работа изложена на 157 страницах машинописного текста, иллюстрирована 36 рисунками и 46 таблицами, состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части (4 главы), результатов и выводов, списка литературы, включающего 150 наименований (источников 35 зарубежной литературы) и приложения.

Заключение диссертации по теме «Фармацевтическая химия, фармакогнозия», Чувина, Наталия Александровна

РЕЗУЛЬТАТЫ И ВЫВОДЫ

1. Доказано, что прямая ЖЖЭ органическим растворителем приводит к извлечению из плазмы крови лишь свободной фракции изученных веществ, не связанной с белками крови. Степень извлечения веществ метод ЖЖЭ коррелирует с процентом связывания их с белками. Предварительное использование осаждающих реагентов при изолировании не увеличивает процент экстракции анализируемых веществ, вследствие соосаждения их на поверхности белка.

2. Изучена возможность и выявлены особенности изолирования веществ из плазмы крови с применением гидролиза протеолитическими ферментами. Установлено, что процесс ферментативного гидролиза плазмы крови зависит от свойств фермента, времени инкубации, значения рН среды и температуры.

3. Показано, что изолирование объектов исследования из плазмы крови после гидролиза химопсином, (для производных барбитуровой кислоты ферментом трипсином) увеличивает степень экстракции веществ по сравнению с методом ЖЖЭ, за счет гидролиза пептидных связей определенных пар аминокислот активных центров белковой молекулы с высвобождением связанной фракции ксенобиотика.

Использование ферментов пепсин, химотрипсин не приводит к значительному увеличению степени экстракции лекарственных средств по сравнению с методами ЖЖЭ и ТФЭ вследствие большей специфичности фермента к аминокислотной последовательности белка.

4. Установлено, что изолирование исследуемых ксенобиотиков методом ферментативного гидролиза химопсином и методом ТФЭ на патронах марки Oasis HLB дают сопоставимые результаты. Для методики изолирования анализируемых веществ, с применением ферментов химопсина и трипсина определены некоторые валидационные характеристики (сходимость, внутрилабораторная воспроизводимость, робастность). Показано, что метод ферментативного гидролиза имеет преимущества перед методом ЖЖЭ без осаждения и с осаждением белков и может быть использован в практической работе БСМЭ и наркодиспансеров.

5. Патроны марки Oasis МСХ следует использовать при целенаправленном исследовании дифенгидрамина, хлоропирамина, клемастина, целекоксиба, а патроны марки Oasis МАХ - для фенобарбитала и барбамила. Патроны марки Oasis WCX и WAX не могут быть применены для изолирования изучаемых веществ, так как они не сорбируются на поверхности сорбента патрона.

Список литературы диссертационного исследования кандидат фармацевтических наук Чувина, Наталия Александровна, 2013 год

СПИСОК ИСПОЛЬЗУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

1. Алексеева, Г.М. Жидкостная хроматография / Г.М. Алексеева, А.Б. Зеленцова. - СПб. Изд-во. - 2008. - 100 с.

2. Арзамасцев, А.П. Проект общей фармакопейной статьи «Валидация фармакопейных методов» / А.П. Арзамасцев, Н.П. Садчикова, Ю.Я. Харитонов // Нормативные документы фармакопейного комитета. - 2001. -№1. - вып.5. - С. 28.

3. Арзамасцев, А.П. ТСХ-скрининг токсикологически значимых соединений, изолируемых экстракцией и сорбцией: Учебное пособие / А.П. Арзамасцев. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2010. - 240 с.

4. Бегг, Э. Клиническая фармакология (перевод с анг. канд.хим.наук Т.П. Молосовой) // Э. Бегг. - М.:Бином, 2004. - 173 с.

5. Белоусов, Ю.Б. Клиническая фармакокинетика / Ю.Б. Белоусов, К.Г. Гуревич. - М.: «Литтерра», 2005. - 288 с.

6. Белоусов, Ю.Б. Клиническая фармакология / Ю.Б. Белоусов, В.Г. Кукес, В.К. Лепахин, В.И. Петров. - М.: «ГЭОТАР - Медиа», 2009. - 964 с.

7. Беляев, A.B. Исследование наркотических средств с предварительной пробоподготовкой методом твердофазной экстракции: методические рекомендации / A.B. Беляев, К.В. Понкратов, В.И. Сорокин, Е.П. Семкин -М.: экспертно-криминалистический центр МВД России, 1996. - 16 с.

8. Беляева, Е.А. Кинетическая демонстрация локальных конформационных изменений вблизи активногоцентра а-химотрипсина в смесях вода-диметилсульфоксид / Е.А. Беляева, Н.Л. Еремеев // Вестник Московского университете. - 2000. - Т. 41. - №6. - С.392-394.

9. Березов, Т.Т. Биологическая химия / Т.Т. Березов, Б.Ф. Коровкин. - М.: «Медицина», 2008. - 704 с.

10. Блинникова, A.A. Спектрофотометрия и фотоэлектроколориметрия в анализе лекарственных средств: Учебное пособие / A.A. Блинникова. -Томск, 2005.-96 с.

11. Василенко, Ю.К. Биологическая химия / Ю.К. Василенко. - М.: «МЕДпресс-информ», 2011. - 432 с.

12. Васильев, A.B. Инфракрасная спектроскопия органических и природных соединений / A.B. Васильев, Е.В. Гриненко, А.О. Щукин, Т.Г. Федулина. - СПбГЛТА, 2007. - 16 с.

13. Васияров, Г.Г. Концентрирующие патроны диапак / Г.Г. Васияров, Г.С. Алексеева, под ред. Староверова. - вып.2. - М.: ЗАО «БиоХимМакСТ», 2007. -56 с.

14. Веселовская, Н.В. Наркотики. Свойства, действие, фармакокинетика, метаболизм / Н.В. Веселовская, А.Е.Коваленко. - М.: Нарконет, 2008. - 272 с.

15. Вергейчик, Т.Х. Токсикологическая химия: учебник для студентов фармацевтических вузов и факультетов / Т.Х. Вергейчик; под.ред. E.H. Вергейчика. - М.: МЕДпресс-информ, 2009. - 400 с.

16. Гадомский, Т.Я. Физико-химические закономерности экстракционного и сорбционного концентрирования первичных алифатических аминов из водных сред. Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата химических наук. - Уфа, 2007. - 20 с.

17. Гадомский, Т.Я. Сорбционное концентрирование алкиламинов из водных растворов на сорбенте Oasis МСХ / Т.Я. Гадомский, В.Н. Майстренко, И.Е. Алехина // Вестник Башкирского университета. - 2007. -Т. 12. - №1. - С.27-31.

18. Галимова, М.Х. Ферментативная кинетика. Справочник по механизмам реакций / М.Х. Галимова. - М.: КомКнига, 2007. - 320 с.

19. Гладилович, В.Д. Идентификация пептидов сывороточного альбумина, модифицированных фосфорорганическими соединениями, с применением методов хроматографии и масс-спектрометрии / В.Д. Гладилович и др. // Научное приборостроение. - 2010. - Т. 20. - №4. - С. 84-92.

20. Головач, Т.Н. Закономерности гидролиза сывороточных белков экзо- и эндопротеазами / Т.Н. Головач и др. // Труды БГУ. - 2008. - Том 3. - С. 1-15.

21. Головач, Т.Н. Антигенные свойства нативных и термообработанных сывороточных белков и их ферментативных частичных гидролизатов / Т.Н. Головач, В.П. Курченко, Л.И. Сурвилло // Труды БГУ. - 2011. - Том 6. - С. 209-223.

22. Государственная фармакопея СССР XI изд. Вып.1- М.: Медицина, 1987.-344 с.

23. Государственная фармакопея СССР XII изд. Вып.1- М.: Медицина, 2007. - 695 с.

24. ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002 «Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений»

25. ГОСТ Р 52960-2008 «Аккредитация судебно-экспертных лабораторий. Руководство по применению ГОСТ Р ИСО/МЭК 17025»

26. Григорьев, A.M. Определение метаболитов димедрола методами ГХ-МС и ВЭЖХ в моче / A.M. Григорьев, И.В. Машкова, Л.В. Рудакова // Сорбционные и хроматографические процессы. - 2008. - Т.8. - вып.1. -С.134-140.

27. Грызунов, Ю.А. Свойства связывающих центров альбумина: метод исследования в биологических жидкостях и опыт его применения для оценки состояния организма: автореферат дис., канд.биол.наук. - Москва, 2003. - 24 с.

28. Дарбре, А. Практическая химия белка (пер. с англ. H.A. Алдановой, И.В. Назимова, П.Д. Решетова) / под ред. А. Дарбре. - М.: «Мир», 1989. - 623 с.

29. Дубровский, Я.А. Идентификация алкилированных аддуктов глобина крысы методами масс-спектрометрии / Я.А. Дубровский и др. // Научное приборостроение. - 2010. - Т. 20. - №4. - С. 77-83.

30. Ершов, Ю.А. Основы биохимии для инженеров: учеб. пособие / Ю.А. Ершов, Н.И. Зайцева; под ред. С.И. Щукина. - М.: Изд-во МГТУ им. Н.Э. Баумана, 2010.-359 с.

31. Жеребцов, H.A. Биохимия: учебник / H.A. Жеребцов, Т.Н. Попова, В.Г. Артюхов. - Воронеж: Изд-во Воронежского государственного университета, 2002. - 696 с.

32. Зуев Ю.Ф. Особенности иммобилизации субстрата и каталитическая активность трипсина в обращенной микроэмульсии / Ю.Ф. Зуев // Вестник Московского университета Серия 2. Химия. - 2003. - Т.44. - №1. - С. 13-15.

33. Инструкции к патронам Waters Oasis

34. Калетина, T.B. Токсикологическая химия / Т.В. Калетина. - М.: «Гэотар», 2007. - 1008 с.

35. Катаев, С.С. Применение твердофазной экстракции в исследовании крови на наркотические и лекарственные вещества / С.С. Катаев, О.Н. Дворская // Судебно-медицинская экспертиза. - 2012. - №4. - С. 38-42.

36. Катцунг, Бертрам Г. Базисная и клиническая фармакология / Бертрам Г. Катцунг. - М.: «Диалект, Бином», 2008. - 784 с.

37. Каркищенко, H.H. Фармакокинетика / H.H. Каркищенко, В.В. Хоронько, С.А. Сергеева, В.Н. Каркищенко. - М.: Феникс, 2001. - 384 с.

38. Колупаева, A.C. Изолирование производных барбитуровой кислоты из крови методом ферментативного гидролиза / A.C. Колупаева, H.A. Чувина, О.Ю. Стрелова, Т.В. Горбачева // Труды Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 90-летию СПб ГУЗ БСМЭ «Актуальные вопросы судебно-медицинской экспертизы трупа». - 2008. - С.377-378.

39. Кольман, Я. Наглядная биохимия / Я. Кольман, К.-Г. Рём. - М.: «Мир», 2000. - 469 с.

40. Кормишин, В.А. Денситометрическое определение барбитуратов в химико-токсикологическом анализе / В.А. Кормишин, A.B. Воронин, И.Ф. Шаталаев // Фармакологический фундамент современной медицины, проблемы и пути их решения. - 2012. - С.398-400.

41. Короткова, Е.И. Физико-химические методы исследования и анализа: учебное пособие / Е.И. Короткова, Т.М. Гиндуллина, Н.М. Дубова, O.A.

Воронова; Томский политехнический университет. - Томск: Изд-во Томского политехнического университета, 2011. - 168 с.

42. Краснов, И. А. Идентификация алкилированного аддукта сывороточного альбумина человека методами масс-спектрометрии / И.А. Краснов и др. // Научное приборостроение. - 2008. - Т. 18. - №4. - С. 46-53.

43. Красовский, Г.Н. Экстраполяция токсикологических данных с животных на человека / Г.Н. Красовский, Ю.А. Рахманин, H.A. Егорова. = М.: Медицина, 2009. - 208 с.

44. Кржечковская, В.В. Фармакодинамика, фармакокинетика с основами общей фармакологии / В.В. Кржечковская, Р.Ш. Вахтангишвили. - М.: Феникс, 2007.- 160 с.

45. Кукес, В.Г. Клиническая фармакология и фармакотерапия / В.Г. Кукес,

A.К. Стародубцев. - М.: «Гэотар-Медиа», 2009. - 640 с.

46. Куценко, С.А. Основы токсикологии / С.А. Куценко. - М., 2004. - 720 с.

47. Куценко, С.А. Белки плазмы крови/ С.А. Куценко // Российский биомедицинский журнал. - 2003. - Том 4. - 119 с.

48. Кухта, В.К. Биологическая химия / В.К. Кухта, Т.С. Морозкина, Э.И. Олецкий, А.Д. Таганович. - М.: «Асар, Бином», 2008. - 688 с.

49. Луйк, А.И. Сывороточный альбумин и биотранспорт ядов / А.И. Луйк,

B.Д. Лукьянчук. - М.: «Медицина». - 1984. - 224 с.

50. Малкова. Т.Л. Основные направления повышения качества судебно-химических исследований / Т.Л. Малкова, В.А. Клевко // Судебно-медицинская экспертиза. - 2009. - № 6.- С. 28-32.

51. Малкова, Т.Л. Методологическое обоснование обеспечения качества судебно-химических экспертных исследований лекарственных средств. Автореферат на соискание ученой степени доктора фармацевтических наук. -Пермь, 2012.-42 с.

52. Мелентьев, А.Б. Влияние рН среды водной фазы на экстракцию веществ с различными кислотно-основными свойствами / А.Б. Мелентьев // Судебно-медицинская экспертиза. - 2003. - №2. - С.40-43.

53. Мелентьев, А.Б. Скрининг лекарственных, наркотических веществ и их метаболитов газовой хроматографией с масс-селективным детектором /А.Б. Мелентьев // Проблемы экспертизы в медицинею - 2002. - №4. - С. 15-21.

54. Мелентьев, А.Б. Скрининг слабополярных наркотических и сильнодействующих лекарственных средств в крови методом газовой хроматографии - масс спектрометрии / А.Б. Мелентьев, Г.А. Латышева // Материалы VI Всероссийского съезда судебных медиков, посвященного 30-летию Всероссийского общества судебных медиков. - 2005. - С. 196-197.

55. Методика количественного определения морфина, кодеина и димедрола в крови методом газовой хроматографии с масс-селективным детектором // Челябинск, Челябинское областное бюро судебно-медицинской экспертизы. - 2002. - 15 с.

56. Меркулова, Ю.Д. Твердофазная экстракция дипразина ионообменниками и идентификация его ионных форм в водных растворах : автореферат дис., канд.химич.наук / Ю.Д. Меркулова. - Воронеж, 2011. - 106 с.

57. Мирошниченко, И.И. Основы фармакокинетики / И.И. Мирошниченко. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2002. - 192 с.

58. Мирошниченко, И.И. Биодоступность лекарственных средств / И.И. Мирошниченко, И.И. Тюляев, А.П. Зуев. - М.: Грамотей, 2003. - 101 с.

59. Михайлов, И.Б. Клиническая фармакология / И.Б. Михайлов. - СПб.: «Фолиант», 2002. - 520 с.

60. Михальчук, В.Н. Трипсиноподобные протеиназы в физиологии и биологии человека / В.Н. Михальчук // Актуальные проблемы транспортной медицины. - 2008. - №4. - С. 134-139.

61. НД 42-10148-04

62. НД 42-12966-03

63. Николаева, А.Я. Биологическая химия / А .Я. Николаева. - М.: «Медицинское информационное агенство», 2004. - 568 с.

64. Носырев, П.О. Валидация аналитических методик: теория и практика (часть 1. Практика) / П. Носырев, М. Носырева, Т. Рассказова // Ремедиум. -2003. -№12.-С.65-67.

65. Овсиенко, Т.А. Валидация аналитических и микробиологических методов контроля / Т.А. Овсиенко. - М.: «Новая волна», 2006. - 15 с.

66. ОСТ №220 от 26 мая 2003 г. «Правила проведения внутрилабораторного стандарта качества количественных методов клинических лабораторных исследований с использованием контрольных материалов».

67. ОФС 42-0111-09

68. ОФС 42-0113-09

69. Плетенева, Т.В. Токсикологическая химия / Т.В. Плетенева. - М.: «ГэотарМедиа», 2005. - 509 с.

70. «Производство лекарственных средств. Валидация». Основные положения: МУ 64-04-001-2002. - М., 2002.

71. Пшенкина, H.H. Прогнозирование связывания лекарственных веществ с альбумином на основе физико-химических свойств лигандов / H.H. Пшенкина // Фармакология. - 2011. - Т. 12. - С. 980-989.

72. Пшенкина, H.H. Сывороточный альбумин: структура и транспортная функция / H.H. Пшенкина // Фармакология. - 2011. - Т. 12. - С. 1067-1091.

73. Руденко, Б.А. Химико-аналитическое определение наркотических и допинговых средств / Б.А. Руденко и др. - М. «Нарконет», 2001. - 367 с.

74. Руководство для предприятий фармацевтической промышленности (методические рекомендации). - М.: «Спорт и Культура-2000», 2007. - 192 с.

75. Северин, Е.С. Биохимия: Учеб. для вузов / Е.С. Северин. - Изд-во «ГЭОТАР-Медиа», 2003. - 779 с.

76. Семак, И.В. Определение рокситромицина в сыворотке крови методом жидкостной хроматографии с масс-спектрометрическим детектированием /

И.В. Семак и др. // Журнал аналитической химии. - 2011. - Т. 66. - №2. - С. 199-205.

77. Семак, И.В. Биохимия белков: практикум для студентов биол. фак. спец. / И.В. Семак, Т.Н. Зырянова, О.И. Губич. - Минск: БГУ, 2007. - 49 с.

78. Смолина, Н.В. Свойства связывающих центров молекулы альбумина у больных тревожной депрессией: исследование методом тушения флюоресценции / Н.В. Смолина и др. // Бюллетень экспериментальной биологической медицины. - 2007.-Т. 144. - №11. - С.514-516.

79. Смолина, Н.В. Изменение связывающих центров альбумина при психических расстройствах и при стрессе: детектирование флуоресцентным методом с использованием наносекундной спектроскопии: автореферат дис., канд.биол .наук / Н.В. Смолина. - Москва, 2008. - 22 с.

80. Соколов, A.B. Терапевтический лекарственный мониторинг / A.B. Соколов // Качественная клиническая практика. - 2002. - №1. - С.78-88.

81. Стрелова, О.Ю. Оценка эффективности методов изолирования токсических веществ из крови / О.Ю. Стрелова, H.A. Чувина // Судебно-медицинская экспертиза. - 2008. - №3. - С. 22-24.

82. Стрелова, О.Ю. Изолирование кофеина из крови с применением ферментативного гидролиза на примере модельного вещества / О.Ю. Стрелова, H.A. Чувина // Судебно-медицинская экспертиза. - 2008. - №4.- С. 28-30.

83. Строев, Е.А. Практикум по биологической химии / Е.А. Строев, В.Г. Макарова, И.В. Матвеева. - Медицинское информационное агентство, 2012. -384 с.

84. Сумина, Е.Г. Тонкослойная хроматография. Теоретические основы и практическое применение: Учебное пособие (издание 3-е дополненное) / Е.Г. Сумина, С.Н. Штыков, В.З. Угланова, Н.В. Кулакова. - Саратов, 2012.-128 с.

85. Сычев, К.С. Материалы и методы пробоподготовки в хроматографии: твердофазное концентрирование и адсорбционная очистка / К.С. Сычев, В.А.

Даванков // Сорбционные и хроматографические процессы. - 2004. - Т.4. -№1. - С.5-28.

86. Томил ин, В.В. Фармако- и токсикокинетические параметры лекарственных, наркотических и других токсических веществ / В.В. Томилин, P.P. Краснова, В.П. Мельник, 1999. - 20 с.

87. Тыжигирова, В.В. Экспресс-анализ антигистаминных лекарственных средств - блокаторов HI-рецепторов / В.В. Тыжигирова, Г.Н.Булка // Естествознание и гуманизм: межвузовский сборник научных трудов. -Томск, 2007. - Т.4.- №3. - С. 26.

88. Тыжигирова, В.В. Сравнительное изучение электронных спектров поглощения некоторых антигистаминных лекарственных веществ / В.В. Тыжигирова, Т.Н. Булка // Проблемы и перспективы современной науки, 2008.-Т.1. -ВЫП.2.-С.

89. Уланова, Т.С. Изучение степени извлечения диметилтерефталата из мочи методом твердофазной экстракции / Т.С. Уланова, Т.Д. Карнажицкая, A.B. Кислицина A.B. // Сорбция и экстракция: проблемы и перспективы, 2010.-С. 230-233.

90. Федоровский, Н.М. Непрямая электрохимическая детоксикация / Н.М. Федоровский. - М.: Изд-во «Медицина». - 2004. - 144 с.

91. Филатова, Л.Ю. Изучение активности и стабильности папаина в различных мицеллярных системах / Л.Ю. Филатова и др. // Вестник Московского университета. -2010.-Т. 51. -№2. - С. 102-109.

92. Флорентьев, В.Л. Биохимия / В.Л. Флорентьев. - М., 2004. - 464 с.

93. ФС 42-0122-04

94. ФС 42-0232-07

95. ФС 42-0243-07

96. ФС 42-0248-07

97. ФС 42-0267-07

98. ФС 42-0289-07

99. ФС 42-4202-95

100. ФС 42-4373-99

101. Хабриева, У.Р. Токсикологическая химия / У.Р. Хабриева, Н.И. Калетина. - М.: «ГЭОТ АР-Медиа», 2010. - 752 с.

102. Чернов, H.H. Биохимия. Руководство к практическим занятиям / H.H. Чернов. - М.: «ГЭОТАР-Медиа», 2009. - 240 с.

103. Чёгёр, С.И. Транспортная функция сывороточного альбумина (пер. с рум.) / С.И. Чёгёр. - Бухарест. - 1975. - 185 с.

104. Чувина, H.A. Исследование капсул препарата «Целебрекс» с целью химико-токсикологического анализа / H.A. Чувина, Ю.Л. Кириллова, О.Ю. Стрелова // Материалы Российской научно-практической конференции с международным участием «Актуальные вопросы судебно-химических, химико-токсикологических исследований и фармацевтического анализа» / Пермская гос. фармац.академия - Пермь, 2009. - С.82-85.

105. Чувина, H.A. Использование метода ферментативного гидролиза для изолирования производных барбитуровой кислоты из крови (на примере фенобарбитала и барбамила) / H.A. Чувина, A.C. Колупаева, О.Ю. Стрелова, И.В. Заблоцкая // Судебно-медицинская экспертиза. - 2010. - №5. - С. 19-21.

106. Чувина, H.A. Химико-токсикологический анализ препарата «Целебрекс» / H.A. Чувина, Ю.Л. Кириллова, О.Ю. Стрелова // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сб. науч. тр. / Пятигорская гос. фармац.академия. - Вып.66. - Пятигорск, 2011. - С. 475477.

107. Чувина, H.A. Применение ферментативного гидролиза для изолирования токсических веществ различных химических групп из биологической жидкости (крови, плазмы) с целью химико-токсикологического анализа / H.A. Чувина, О.Ю. Стрелова, В.Н. Куклин // Вестник Российской Военной медицинской академии им. Кирова. - 2011. -№1(33). - С. 154-155.

108. Чувина, H.A. Химико-токсикологическое исследование антигистаминных препаратов (димедрол, супрастин, тавегил) / H.A. Чувина,

О.Ю. Стрелова, В.Н. Куклин // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции: сб. науч. тр. / Пятигорская гос. фармац.академия. - Вып.67. - Пятигорск, 2012. - С.291-293.

109. Чувина, H.A. Изучение возможности применения метода ферментативного гидролиза для изолирования производных барбитуровой кислоты из крови / H.A. Чувина, О.Ю. Стрелова // Сборник Российской научной конференции с международным участием «Актуальные проблемы токсикологии и радиобиологии». - 2011. - С.79.

110. Чувина, H.A. Изолирование лекарственных веществ из плазмы крови методом твердофазной экстракции / H.A. Чувина, О.Ю. Стрелова, В.Н. Куклин // Бутлеровские сообщения. - 2013. -Т.ЗЗ, №1. - С. 35-42.

111. Чувина, H.A. Ферментативный гидролиз плазмы крови как метод химико-токсикологического анализа, используемый для изолирования токсических веществ / H.A. Чувина, О.Ю. Стрелова, В.Н. Куклин // Токсикологический вестник. - 2013. - №1. - С.31-35.

112. Шаповалова, E.H. Хроматографические методы анализа. Методическое пособие для специального курса / E.H. Шаповалова, A.B. Пирогов. - М., 2007.- 109 с.

113. Шугалей, И.В. Химия белка / И.В. Шугалей, A.B. Гарабаджиу, И.В. Целинский. - СПб.: Проспект науки, 2010. - 200 с.

114. Эпштейн, H.A. Оценка пригодности (валидация) ВЭЖХ методик в фармацевтическом анализе / H.A. Эпштейн // Химико-фармацевтический журнал. - 2004. -Т.38. - №4. - С.40-56.

115. Яшин, Я.И. Высокоэффективная жидкостная хроматография. Состояние и перспективы / Я.И. Яшин, А.Я. Яшин // Российский химический журнал (Журнал Российского химического общества имени Д.И. Менделеева). - 2003. - T. XLVII. - №1. - С.64-79.

116. Ascenzi, P. Heme impairs allosterically drug binding to human serum albumin Sudlow's site I / P. Ascenzi, A. Bocedi, S. Notari // Biochem. Biophys. Res. Commun. - 2005. - Vol.334. - №2. - P.481-486.

117. Ascenzi, P. Allosteric modulation of drug binding to human serum albumin / P. Ascenzi, A. Bocedi, S. Notari // Mini-Rev. Med. Chem. - 2006. - Vol. 6. -P.483-489.

118. Ascenzi, P. Serum heme-albumin: an allosteric protein / P. Ascenzi, M. Fasano // IUBMB Life. - 2009. - Vol.61. - №12. - P. 1118-1122.

119. Bertucci, C. Reversible and covalent binding of drugs to human serum albumin: methodological approaches and physiological relevance / C. Bertucci, E. Domenici // Curr. Med. Chem. - 2002. - Vol. 9. - №15. - P. 1463-1481.

120. Buttar, D. A combined spectroscopic and crystallographic approach to probing drug-human serum albumin interactions / D. Buttar, N. Colclough, S. Gerhardt // Bioorg. Med. Chem. - 2010. - Vol.18. - №21. - P. 7486-7496.

121. Callesen, A.K. Serum protein profiling by solid phase extraction and mass spectrometry: A future diagnostics tool? / A.K. Callesen, J.S. Madser // Proteomics. - 2009. - №9(6). - P. 1428-1441.

122. Clarke's. Analysis of Drug and Poisons. - London: The Pharmaseutical press, 2004.-615 p.

123. Chandrani, G. Drug Metabolism and Pharmacokinetics in Drug Discovery: A Primer for Bioanalytical Chemists / G. Chandrani // Current Separation. - 2001. -Vol. 19. -№3. - P. 87-92.

124. Chi-Kong, Lai. Uniform solid-phase extraction procedure for toxicological drug screening in serum and urine by HPLC with photodiode-array detection / Chi-Kong Lai // Clinical Chemistry. - 1997. - P. 312-325.

125. David, B. Troy. The science and practice of pharmacy / David B. Troy. -USA, 2006.-2395 p.

126. David, E. Golan. Principles of pharmacology: the pathophysiologic basis of drug therapy / David E. Golan. - 2008. - 987 p.

127. Egger-Heigold, Barbara. The effect of excipients on pharmacokinetic parameters of parenteral drugs / Barbara Egger-Heigold. - Basel, 2005. - 82 p.

128. Jiunn H. Lin. Role of Pharmacokinetics and Metabolism in Drug Discovery and Development / H. Lin. Jiunn, Y.H.Lu Anthony.- USA, 1997. - 449 p.

129. Hennion, M.-C. Solid-phase extraction: method developmeht, sorbents, and coupling with liquid chromatography // J. Chrom. 1999. - V.856. - P. 3-54.

130. Hodgson, Ernest. A Textbook of Modern Toxicology / Hodgson Ernest. -USA, 2004.-557 p.

131. Huber, L. Validation of Analytical Methods / L. Huber. - USA, 2007. - 65 P-

132. Kratochwil, N.A. Predicting plasma protein binding of drug: A new approach / N.A. Kratochwil, W. Huber, M. Kansy, P.R. Gerber // Biochem. Pharmacol. - 2002. - Vol.64, №9. - P. 1355-1374.

133. Liu, X. Do we need to optimize plasma protein and tissue binding in drug discovery? / X. Liu, C. Chen, C.E. Hop // Curr. Top. Med. Chem. - 2011. - Vol.11. - №4. - P.450-466.

134. Liu, X. Use of physiologically based pharmacokinetic model to study the time to reach brain equilibrium: An experimental analysis of the role of blood-brain barrier permibility, plasma protein binding, and brain tissue binding / X. Liu, B.J. Smith, C. Chen // J. Pharmacol. Exp. Ther. - 2005. - Vol. 313. - №3. -P.1254-1262.

135. McPolin, Oona. Validation of analytical methods for pharmaceutical analysis / Oona McPolin. - UK, 2009. - 141 p.

136. Michael, E. Burton. Applied pharmacokinetics and pharmacodynamics: principles of therapeutic drug monitoring / Michael E. Burton, Leslie M. Shaw, Jerome J. Schentag, William E. Evans. - 2006. - 883 p.

137. Nobilis, M. High-performance liquid chromatographic determination of ursodeoxycholic acid after solid phase extraction of blood serum and detection-oriented derivatization / M. Nobilis, M. Pour // J. Pharm. Biomed.Anal. - 2001. -Vol.24. -P.937-946.

138. Ferrer, M.L. The conformation of serum albumin in solution: a combined phosphorescence depolarization - hydrodynamic modeling study / M.L. Ferrer, R. Duchowicz, B. Carrasco, de la Torre J.G., A.U. Acuna // Biophys. J. - 2001. -Vol.80. - №5. - P. 2422-2430.

139. Ghuman, J. Structural basis of the drug-binding specificity of human serum albumin / J. Ghuman, P.A. Zunszain, I. Petitpas // J. Mol. Biol. - 2005. - Vol.353. -№1. - P.38-52.

140. Gumustas, Mehmet. The Role of and the Place of Method Validation in Drug Analysis Using Electroanalytical Techniques / Mehmet Gumustas, Sibel A. Ozkan // The Open Analytical Chemistry Journal. - 2011. - №5. - P. 1-21.

141. Peters, Frank T. Validation of new methods / Frank T. Peters, Olaf H. Drummer, Frank Musshoff // Forensic Science International, 2007. - Vol. 165. - P. 216-224.

142. Peters, Frank T. Bioanalytical method validation and its implications for forensic and clinical toxicology / Frank T. Peters, Hans H. Maurer // Accreditation Quality Assurance. - 2002. - Vol. 7. - №11. - P. 441-449.

143. Reza, Mehvar. Role of Protein Binding in Pharmacokinetics / Mehvar Reza // American Journal of Pharmaceutical Education. - 2005. - 69 (5) Article 103. - P. 1-8.

144. Schmidt, S. Significance of protein binding in pharmacokinetics and pharmacodynamics / S. Schmidt, D. Gonzalez, H. Derendorf // J. Pharm. Sci. -2010.-Vol.99.-№3. - P.l 107-1122.

145. Stephen, C. Piscitelli. Drug interaction in infectious diseases / Stephen C. Piscitelli, Keith A. Rodvold. - 2005. - 534 p.

146. Soriano, T. Improved solid-phase extraction method for systematic toxicological analysis in biological fluids / T. Soriano et.al. // J.Anal.Toxicol. -2001. - T.25, №2. P. 137-143.

147. Sutkowska, A. Interaction of drugs with bovine and human serum albumin / A. Sutkowska // Journal of Molecular Structure. - 2002. - Vol.614. - №1. - P. 227232.

148. Tomlin, M. Pharmacology and pharmacokinetics: A basic reader / M. Tomlin. - UK, 2010. - 70 p.

149. Toxicology Procedures Manual, 2009. - 244 p.

150. Varshney, A. Ligand binding strategies of human serum albumin: how can the cargo be utilized? / A. Varshney, P. Sen, E. Ahmad // Chirality. - 2010. -Vol.22. -№l.-P.77-87.