Каталитическая терапия экспериментальных опухолей печени тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.27, кандидат медицинских наук Могирев, Станислав Вячеславович

• Могирев, Станислав Вячеславович
• кандидат медицинских наук
• 2005

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Могирев, Станислав Вячеславович

Список сокращений.

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1. Злокачественные опухоли печени — современные данные по распространенности и результатам лечения.

1.1. Эпидемиология.

1.2. Хирургическое лечение.

1.3. Системная химиотерапия.

1.4. Регионарная химиотерапия.

1.5. Местная деструкция и прочие методы.

1.6. Комбинированное лечение.

2. Терафтал и каталитическая терапия.

3. Экспериментальные модели опухолей печени.

ГЛАВА П. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ.

1. Моделирование внутриорганной опухоли печени.

1.1. Моделирование альвеолярного слизистого рака.

1.1.1. Моделирование единичного опухолевого узла в печени.

1.1.2. Моделирование множественного опухолевого поражения печени.

1.2. Моделирование гепатоцеллюлярного рака.

1.3. Изучение кинетики роста гепатомы-27 в печени.

2. Разработка оптимального способа введения препаратов и изучение распределения ТФ.

2.1. Разработка способа регионарного введения ТФ.

2.2. Изучение распределения ТФ.

2.2.1. Распределение ТФ при введении препарата в общий ствол воротной вены.

2.2.2. Распределение ТФ при введении препарата селективно-окклюзионным методом в долевую ветвь воротной вены.

3. Методика каталитической терапии (ТФ+АК).

3.1. Лечение крыс с опухолью РС-1 (селективно-окклюзионное и системное введение).41«

3.1.1. Лечение крыс с одиночными опухолевыми узлами (пункционная интрапаренхиматозная прививка опухоли в печень)

3.1.2. Лечение крыс с диффузным опухолевым поражением печени

3.2. Лечение крыс с опухолью Г-27.

3.2.1. Селективно-окклюзионное введение.

3.2.2. Пункционное введение препаратов.43'

4. Методика оценки результатов лечения.

5. Статистическая обработка материала.

ГЛАВА III. РЕЗУЛЬТАТЫ МОДЕЛИРОВАНИЯ ВНУТРИПЕЧЕНОЧНОЙ ОПУХОЛИ.

1. Моделирование единичного опухолевого узла путем пункционной прививки штамма РС-1.

2. Моделирование многоузлового опухолевого поражения путем внутрипортального введения штамма РС-1.

3. Моделирование единичного опухолевого узла путем пункционной прививки штамма Г-27.

ГЛАВА IV. РАЗРАБОТКА ОПТИМАЛЬНОГО СПОСОБА ВВЕДЕНИЯ

ПРЕПАРАТОВ И ИЗУЧЕНИЕ РАСПРЕДЕЛЕНИЯ ТЕРАФТАЛА.

1. Разработка способа регионарного введения ТФ.

1.1. Введение ТФ в печеночную артерию и воротную вену (общий ствол).

1.2. Селективно-окклюзионное введение ТФ.

1.2.1. Введение ТФ в ветвь воротной вены центральной доли печени

1.2.2. Введение ТФ в ветвь воротной вены левой верхней доли печени

2. Распределение терафтала в различных органах при однократном введении.

2.1. Введение в воротную вену (регионарный метод).

2.2. Введение в долевую ветвь воротной вены (селективно-окклюзионный метод).

ГЛАВА V. РЕЗУЛЬТАТЫ КАТАЛИТИЧЕСКОЙ ТЕРАПИИ ОПУХОЛЕЙ ПЕЧЕНИ.

1. Лечение крыс с опухолью РС-1.

1.1. Лечение крыс с одиночными опухолевыми узлами (пункционная внутрипеченочная прививка опухоли).

1.1.1. Результаты лечения однократным селективно-окклюзионным введением ТФ (0,3 мг, т.е. 0,6 мл 0,05% раствора) и АК.

1.1.2. Результаты лечения однократным селективно-окклюзионным введением ТФ (0,3 мг, т.е. 0,6 мл 0,05% раствора) и АК в сочетании с двухкратным системным введением ТФ+АК.

1.1.3. Результаты лечения однократным селективно-окклюзионным введением ТФ (0,06 мг, т.е. 0,6 мл 0,01% раствора) и АК.

1.2. Лечение крыс с диффузным опухолевым поражением печени.

2. Лечение крыс с опухолью Г-27.

2.1. Результаты лечения однократным введением ТФ (0,3 мг) + АК селективно-окклюзионным методом.

2.2. Лечение крыс с гепатомой-27 пункционным введением ТФ+АК.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Каталитическая терапия экспериментальных опухолей печени»

Актуальность проблемы

Лечение первичных и метастатических» опухолей печени является* одной из наиболее сложных проблем современной онкологии. Это связано со значительной распространенностью данных опухолей, ростом заболеваемости ими и малой эффективностью лечения. [Аксель Е.М, Давыдов М.И. 2001, Ocuda К. 2000, Bridbord К. 1989]

Методом лечения^ первичных и вторичных опухолей печени, дающим шансы на длительную ремиссию, является' резекция печени. Однако* резектабельность злокачественных опухолей печени не превышает 8-20%> [Badvie S. 2000, Yooir S. et al. 1999, Luna-Perez P. et al. 1998]. Согласно имеющимся данным, средняя продолжительность жизни больных после хирургического лечения метастатических опухолей печени составляет 3846 мес., а 5-летний срок переживают 30-50% пациентов. Пятилетняя выживаемость больных первичным раком печени после радикальных операций составляет 23-50%. [Патютко Ю.И. и соавт. 1998, 2003, Ercolani G. et al. 2002, Fong Y. et al. 1997, Makuuchi M. et al. 2002, Kawarada Y. et al. 2002]

Прочие использующиеся методы лечения малоэффективны- (за исключением трансплантации печени, которая сопоставима по результатам с резекцией) [Todo S. et al. 2002, Kawasaki S. 2002, Pilchmayr R. et al. 1997]. Системная химиотерапия сопровождается выраженными побочными реакциями и увеличивает продолжительность жизни неоперабельных больных незначительно [Saltz LB. et al. 2000, Douillard JY. et al. 2000, Badvie S. 2000]. Регионарное введение химиопрепаратов и химиоэмболизация позволяют увеличить частоту ответов на лечение (по сравнению с системным), однако не сопровождаются значительным 6 увеличением выживаемости (3-летняя выживаемость не превышает 2636%) [Lo СМ. et al. 2002, Гранов A.M. и соавт. 1996, Ohto М. et al. 1995]. Различные методы местной деструкции — пункционное введение этанола, криодеструкция, высокочастотная деструкция и прочие — сопровождаются определенным эффектом лишь при опухолях малого размера (5-летняя выживаемость при опухолях диаметром до • 5 см составляет 30-50%) [Shiina S. et al. 2002, Zhou XD et al. 1997, McCarty TM et al. 1998].

Таким образом, проблема лечения злокачественных опухолей печени остается далекой от разрешения, а разработка новых препаратов и способов их введения представляется весьма актуальной.

В последние годы в лечении злокачественных опухолей развивается новое направление, получившее название "бинарная терапия". Суть ее состоит в том, что два раздельно введенных нетоксичных агента при встрече в клетке-мишени генерируют активные цитотоксические вещества, в том числе свободные радикалы. Вариантом бинарной терапии является каталитическая терапия, при которой одно из введенных веществ является катализатором для окисления другого, что сопровождается выработкой цитотоксических агентов.

Академик РАН М.Е.Вольпин и чл.-корр. РАН Г.Н.Ворожцов предложили использовать для создания подобной каталитической системы фталоцианин кобальта, а в качестве восстановителя аскорбиновую кислоту (АК), которая не синтезируется в организме человека. Однако известно, что некоторые опухоли человека накапливают АК и содержание ее в опухолевой ткани в несколько раз может превышать содержание в соответствующей нормальной ткани. Как перспективный катализатор автоокисления АК был отобран комплекс CoPc(COONa)8, который обладает низкой собственной цитотоксичностью, а в сочетании с АК вызывает гибель до 95% опухолевых клеток в культуре in vitro 7

Герасимова Г.К. и соавт., 2000 г.]. На его основе разработано лекарственное средство "терафтал лиофилизированный" (ТФ) (совместное производство ГНЦ "НИОПИК" и ГУ РОНЦ им. Н.Н. Блохина РАМН).

Ранее возможность лечения каталитической системой "ТФ+АК" солидных опухолей печени не изучалась. Теоретическим обоснованием использования каталитической терапии для лечения опухолей печени являются данные о высоком уровне накопления ТФ в печени [Зимакова

H.И., 2002 г.].

Цель исследования

Разработать методику каталитической терапии экспериментальных опухолей печени и оценить ее эффективность.

Задачи исследования

I. Воспроизвести внутриорганную модель опухоли печени у крыс с использованием различных штаммов.

2. Разработать методику введения ТФ в эксперименте, обеспечивающую преимущественное накопление ТФ в доле-мишени печени и локальное прохождение реакции каталитического окисления АК.

3. Изучить специфическую активность комбинации ТФ+АК при селективно-окклюзионном, системном и пункционном введении препаратов у крыс с альвеолярным слизистым раком печени (РС-1) и гепатоцеллюлярным раком печени (Г-27).

4. Изучить специфическую активность комбинации ТФ+АК при сочетанном последовательном селективно-окклюзионном и системном введении препаратов.

Научная новизна

Впервые разработана методика каталитической терапии (ТФ+АК) экспериментальных внутриорганных опухолей печени с использованием селективно-окюпозионного метода, доказана ее эффективность.

Показана возможность создания внутриорганной опухоли печени путем пункционного введения 0,1 мл 20% взвеси клеток перевитой подкожно гепатокарциномы (Г-27) и изучена кинетика роста опухоли.

Впервые разработана модель мультицентрического опухолевого поражения печени с использованием внутрипортального введения взвеси клеток перевитого подкожно альвеолярного слизистого рака (РС-1).

Впервые использован селективно-окклюзионный метод введения ТФ и АК у крыс с опухолью печени. Доказано преимущество селективно-окклюзионного введения препаратов в ветвь воротной вены доли-опухоленосителя печени по сравнению с простым регионарным введением (в общий ствол воротной вены): возможность локального накопления ТФ в доле-опухоленосителе (по сравнению с интактной долей печени) и предупреждение поступления ТФ в системный кровоток и другие органы.

Проведен сравнительный анализ результатов каталитической терапии ТФ+АК экспериментальных опухолей печени (штаммы РС-1 и Г-27) при селективно-окклюзионном и системном введении препаратов. Показано преимущество селективно-окюпозионного введения препаратов: статистически достоверное замедление роста опухоли, увеличение площади некрозов, уменьшение частоты митозов и увеличение доли клеток в состоянии апоптоза.

Изучена возможность пункционного введения ТФ+АК непосредственно в опухоль (штамм Г-27), показана неэффективность метода.

Практическая значимость работы

Разработаны новые способы моделирования внутриорганной опухоли печени с использованием штаммов РС-1 и Г-27. Показано, что характер опухолевого роста зависит от способа введения опухолевой взвеси: пункционное интрапаренхиматозное введение приводит к образованию единичного опухолевого узла, а внутрипортальное введение к образованию множественных опухолевых узлов.

Определены сроки проведения терапии внутриорганной гепатомы-27: 7-9 сутки после прививки взвеси опухолевых клеток в печень, что соответствует фазе экспоненциального роста опухоли.

Определен оптимальный срок пережатия афферентных и эфферентных сосудов доли-мишени печени при введении ТФ селективно-окклюзионным способом. Данный срок составил 5 мин.

Показано, что увеличение длительности окклюзии (с 5 мин. до 15 мин. и 30 мин.) при селективно-окклюзионном введении ТФ не приводит к повышению его концентрации в печени.

Разработана методика последовательного введения ТФ и АК, позволяющая свести к минимуму временной интервал между препаратами и локализовать реакцию каталитического окисления: ТФ вводится в "замкнутое сосудистое пространство" доли-опухоленосителя печени, АК в начальный период реперфузии сразу после снятия окклюзии.

На основании экспериментальных данных об эффективности селективно-окклюзионного метода рекомендовано его предклиническое токсикологическое изучение с целью передачи на клинические испытания.

Апробация работы

Основные положения работы доложены на конференции хирургов

10 гепатологов стран СНГ в Ташкенте (2000 г.), Международной конференции с участием ученых Cancer Center (Филадельфия) в Москве (2001 г.), 5 Всемирном конгрессе IHPBA в Токио (2002 г.).

Публикации

По материалам диссертации опубликованы 3 печатные работы.

Объем и структура работы

Работа выполнена на 112 страницах машинописного текста, иллюстрирована 17 рисунками, содержит 27 таблиц. Состоит из введения, обзора литературы, четырех глав собственных исследований, заключения, выводов и списка литературы, включающего 125 источников, в т.ч. 99 зарубежных.

Работа является фрагментом научного плана отдела хирургии печени ГОУВПО ММА им. И.М.Сеченова (тема "Новые технологии гепатобилиарной хирургии"). Работа выполнена в рамках Научно-технической программы "Разработка и внедрение в медицинскую практику новых методов и средств диагностики и лечения онкологических заболеваний", утвержденной мэром Москвы Ю.М. Лужковым, министром науки и технологий РФ М.П. Кирпичниковым и президентом РАН Ю.С.Осиповым.

Заключение диссертации по теме «Хирургия», Могирев, Станислав Вячеславович

выводы

1. Разработаны модели внутрипеченочного роста двух штаммов перевиваемого рака печени крыс. Пункционная интрапаренхиматозная прививка в печень крыс 0,1 мл 20% взвеси опухолевых клеток штаммов альвеолярного слизистого рака (РС-1) и гепатоцеллюлярного рака (Г-27) приводит к развитию внутриорганной опухоли печени солидного типа (прививаемость РС-1 составляет 73,5%, прививаемость Г-27 — 65,3%). Внутрипортальное введение опухолевой взвеси сопровождается развитием множественных узлов в паренхиме печени у 85% крыс.

2. Определены сроки начала лечения ортотопически перевитых опухолей печени крыс, определяемые началом экспоненциальной фазы роста опухоли: для РС-1 — 10-15 сутки, для Г-27 — 7-9 сутки после перевивки опухоли.

3. Селективно-окклюзионный способ является оптимальным для проведения каталитической терапии опухолей печени у крыс. Он позволяет добиться более быстрого, чем при регионарном введении, накопления препарата в доле-мишени печени при снижении вводимой дозы, предотвратить его поступление в системный кровоток и сократить интервал до введения АК.

4. Разработанная методика каталитической терапии с использованием селективно-окклюзионного способа введения ТФ+АК является эффективным методом лечения альвеолярного слизистого и гепатоцеллюлярного рака печени крыс: торможение роста опухоли составляет от 81,9% (Г-27) до 91,7% (РС-1) по сравнению с нелечеными животными; отмечен патоморфоз опухолей (увеличение зоны некрозов до 50-80% от площади среза, увеличение клеток в состоянии апоптоза при снижении числа митозов).

5. Каталитическая терапия опухолей печени при системном введении препаратов малоэффективна: отсутствует достоверное различие в средних объемах опухоли по сравнению с нелечеными животными, гистологические изменения в опухоли выражены незначительно (площадь некрозов не более 35%, РС-1) или отсутствуют (Г-27). Пункционное введении препаратов неэффективно (нет достоверного различия в средних объемах опухоли по сравнению с нелечеными животными, не отмечен патоморфоз опухоли).

6. Сочетание селективно-окклюзионного и двух системных введений ТФ+АК сопровождается большим эффектом, чем трехкратное системное введение ТФ+АК: торможение роста опухоли при селективно-окклюзионном введении по сравнению с нелечеными крысами составляет 95,1% (при системном введении не было достоверного различия в средних объемах опухоли по сравнению с нелечеными животными, поэтому ТРО не определяли), патоморфоз опухоли более выражен в группе с селективно-окклюзионным введением.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Лечение первичных и метастатических опухолей печени является одной из наиболее сложных проблем современной онкологии, что связано с ростом заболеваемости и малой эффективностью существующих методов. Резектабельность злокачественных опухолей печени не превышает 20%. Химиотерапия и лучевая терапия малоэффективны.

В последние годы в лечении злокачественных опухолей развивается новое направление, получившее название "бинарная терапия". Вариантом бинарной терапии является каталитическая терапия, при которой одно из введенных нетоксичных веществ является катализатором для окисления другого. Следствием каталитической реакции является повреждение опухоли. Экспериментальные исследования показали, что каталитическая система, состоящая из фталоцианинового комплекса кобальта (терафтал) и аскорбиновой кислоты, разработанная в ФГУП и ГНЦ "НИОПИК" и Российском Онкологическом Научном Центре им. Н.Н. Блохина РАМН, вызывает гибель до 95% опухолевых клеток в культуре in vitro. Ранее исследований, посвященных каталитической терапии солидных опухолей печени, не проводилось. Теоретическим обоснованием использования каталитической терапии для лечения опухолей печени являются данные о высоком уровне накопления терафтала в печени.

Целью исследования была разработка методики каталитической терапии экспериментальных опухолей печени и оценка ее эффективности. Для реализации этой цели были решены следующие задачи.

1. Разработана внутриорганная модель опухоли печени у крыс с использованием различных штаммов перевиваемых опухолей.

2. Разработана методика введения терафтала в эксперименте, обеспечивающая преимущественное накопление терафтала в доле

99 опухоленосителе печени и локальное прохождение реакции каталитического окисления аскорбиновой кислоты.

3. Изучена специфическая активность комбинации "терафтал + аскорбиновая кислота" при селективно-окклюзионном, системном и пункционном введении препаратов у крыс с альвеолярным слизистым раком печени (РС-1) и гепатоцеллюлярным раком печени (Г-27).

4. Изучена специфическая активность комбинации "терафтал + аскорбиновая кислота" при сочетанном последовательном селективно-окклюзионном и системном введении препаратов.

Работа выполнена в отделе хирургии печени Московской медицинской академии имени Сеченова, экспериментальные исследования проводились на базе НИИ Экспериментальной диагностики и терапии опухолей ГУ РОНЦ им. Н.Н.Блохина РАМН.

Проведено 527 исследований на 427 беспородных крысах.

Оценку противоопухолевой активности каталитической пары при различных способах введения проводили по изменению среднего объема опухоли и торможению роста опухоли, которые рассчитывали по указанным формулам, а также по патоморфозу опухоли. Гистологические исследования проведены профессором Н. Т. Райхлиным (ГУ РОНЦ им.Н.Н.Блохина РАМН).

Для решения 1 задачи (создания модели внутриорганной опухоли печени) использовались штаммы альвеолярного слизистого рака (РС-1) и гепатоцеллюлярного рака (гепатома-27). Для моделирования единичного опухолевого узла выполняли интрапаренхиматозную прививку 0,1 мл 20%-ной взвеси опухолевых клеток. Прививаемость слизистого рака составила 73,5%, гепатомы — 65,3%. Для моделирования мультицентрического опухолевого поражения опухолевую взвесь (штамм РС-1) вводили

100 внутрипортально, что сопровождалось развитием множественных узлов в печени у 85% крыс.

Изучена кинетика роста гепатомы-27 в печени животных после интрапаренхиматозной прививки. Установлено, что лечение целесообразно проводить на 7-9 сутки, в начале фазы экспоненциального роста. У крыс с опухолью РС-1 лечение проводили на 10-15 сутки после прививки на основании данных кинетики роста опухоли.

Второй задачей являлась разработка оптимальной методики введения препаратов. Для каталитической терапии важно, чтобы реакция окисления аскорбиновой кислоты в присутствии терафтала проходила в пределах доли-мишени печени. На момент введения аскорбиновой кислоты содержание терафтала в доле-мишени печени должно быть максимальным, а в других органах и плазме крови — минимальным. Известно, что метод системного введения данным условиям не соответствует.

В Отделе хирургии печени Московской медицинской академии разработан селективно-окклюзионный метод введения препарата, который включает следующие этапы: пункцию долевой ветви воротной вены, пережатие долевых воротной вены и печеночной артерии, введение терафтала с одновременным пережатием долевой печеночной вены. Длительность окклюзии ■— 5 минут.

Проведена сравнительная оценка накопления терафтала в печени при селективно-окклюзионном и регионарном введении. Содержание терафтала определялось спектрофотометрическим методом в лаборатории фармакокинетики РОНЦ им. Н.Н.Блохина РАМН. Установлено, что при простом регионарном введении терафтала в долевую ветвь воротной вены препарат быстро уходит из печени и накапливается в ней в значительном количестве лишь через 30-60 мин (60 мкг/г). Селективно-окклюзионный способ позволяет создать более высокую концентрацию препарата в

101 печени уже через 5 минут после введения при значительном снижении его дозы.

При регионарном введении отмечено быстрое поступление терафтала в общий кровоток и значительное накопление препарата в легких. При селективно-окклюзионном введении этого не происходит.

При селективно-окклюзионном введении содержание терафтала в окклюзированной доле значительно выше, чем в интактной доле. Показано также, что уменьшение дозы до 0,06 мг на крысу не приводит к снижению содержания терафтала в печени.

Таким образом, селективно-окклюзионный способ введения терафтала имеет преимущество перед обычным регионарным введением, так как позволяет добиться значительной концентрации препарата в доле-мишени печени при снижении общей вводимой дозы, снизить концентрацию препарата в плазме крови и предотвратить повреждение органов и тканей, создать условия для локального прохождения реакции каталитического окисления аскорбиновой кислоты в доле-мишени печени в период высокого содержания в ней терафтала.

Третья и четвертая задачи. Для оценки эффективности (специфической активности) комбинации "терафтал плюс аскорбиновая кислота" изучены следующие схемы лечения:

- однократное селективно-окклюзионное введение 0,3 мг терафтала (0,6 мл 0,05% раствора) и аскорбиновой кислоты (в 2,2 раза больше по массе);

- однократное селективно-окклюзионное введение 0,06 мг терафтала (0,6 мл 0,01% раствора) и аскорбиновой кислоты в том же соотношении;

- сочетанное применение селективно-окклюзионного и системного введения: первый курс — селективно-окклюзионное введение 0,3 мг терафтала и аскорбиновой кислоты, второй и третий — системное введение (10 мг/кг терафтала и 22 мг/кг аскорбиновой кислоты) с недельными интервалами);

- пункционное введение 0,3 мг терафтала и аскорбиновой кислоты в том же соотношении.

Контролем служили нелеченые животные, а также крысы, которым проводили системное введение препаратов.

На 18-е сутки после однократного введения терафтала в дозе 0,3 мг и аскорбиновой кислоты селективно-окклюзионным способом средний объем опухоли (82,1±33,4 мм^) был достоверно меньше, чем в группе нелеченых животных (991,2±508,7 мм^) и в группе с системным введением препаратов. Торможение роста опухоли по сравнению с нелечеными животными составило 91,7%.

Важно, что и при пятикратном уменьшении дозы терафтала при селективно-окклюзионном введении отмечен хороший эффект: торможение роста опухоли составило 81%.

Результаты этих исследований были подтверждены при гистологическом исследовании образцов опухолевой ткани. Установлен выраженный патоморфоз опухоли: при селективно-окклюзионном введении площадь некрозов в опухолях составляла 50-80%, при системном введении площадь некрозов была не более 35%, у нелеченых животных площадь некрозов составляла не более 10-15%.

Эффективность каталитической терапии была изучена также у крыс с гепатоцеллюлярным раком печени.

На 14-е сутки после лечения селективно-окклюзионным методом средний объем опухоли (359,1±159,0 мм^) был достоверно меньше, чем в группе нелеченых животных (1984,3±909,4 мм^). Торможение роста опухоли составило 81,9%. При системном введении различие среднего объема опухоли (406,2± 144,8 мм^) с объемом опухоли в группе нелеченых животных также было достоверным, однако в этих группах достоверно различались и средние объемы опухоли до лечения, поэтому торможение роста опухоли не вычисляли. Гистологическое исследование образцов опухолевой ткани также подтвердило значительное повреждение опухоли при селективно-окюпозионном способе лечения.

При селективно-окюпозионном введении площадь некрозов составила 40-80%; при системном введении и у нелеченых крыс — 8-10%. Доля митозов при селективно-окклюзионном введении была в 2 раза меньше, чем у нелеченых животных (соответственно 3-5% и 6-8%).

Другой изученный способ применения ТФ+АК — пункционное введение препаратов. В этом эксперименте терафтал и аскорбиновую кислоту пункционно последовательно (отдельными инъекциями) вводили в опухоль и окружающую паренхиму печени. Контролем служили нелеченые животные. Сравнительный анализ средних объемов опухоли в опытной и контрольной группах показал, что различие между ними после лечения было недостоверным. При гистологическом исследовании патоморфоза опухоли не отмечено, что также говорит о неэффективности метода.

Изучена также эффективность каталитической терапии при сочетанном последовательном селективно-окклюзионном и системном введении препаратов. Сравнение проводилось с крысами, которым все три раза препараты вводили системно (в той же дозе), и с нелечеными крысами. Через 1,5 месяца после прививки средний объем опухоли в л группе с селективно-окклюзионным введением (239,7+63,51 мм ) был достоверно ниже, чем в группе с тремя системными введениями (3554,7+1835,1 ммЗ) и у нелеченых крыс (4849,3+3112,5 ммЗ). Торможение роста опухоли составило 95,1%.

Эти данные также подтверждены гистологическими исследованиями: наибольшие изменения опухолевой ткани выявлены у

104 крыс с сочетанным применением селективно-окклюзионного и системного введения препаратов (некроз занимал до 50% площади среза, по сравнению с 25% во второй группе и 13% в третьей группе [нелеченых животных]).

Таким образом, разработанная в экспериментах на крысах методика каталитической бинарной терапии ТФ+АК слизистого и гепатоцеллюлярного рака печени при селективно-окклюзионном введении препаратов эффективна и может быть предложена для клинического изучения.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Могирев, Станислав Вячеславович, 2005 год

1. Аксель Е. М., Давыдов М. И., Ушакова Т. И. Злокачественные новообразования желудочно-кишечного тракта: основные статистические показатели и тенденции. Современная онкология, 2001, N4, том 3, С. 141145.

2. Вебер Дж. Ферменты печени и их роль в процессе возникновения опухолей печени // Успехи в изучении рака. 1964, т. 4, с. 162-253.

3. Вишневский В. А., Чжао А. В., Назаренко Н. А. с соавт. Современные принципы техники оперативных вмешательств на печени. Анналы хирургической гепатологии, 1996, т. 1, с. 15-23.

4. Гальперин Э.И., Дюжева Т.Г., Фролова Т.А. Селективно-окклюзионный метод введения противоопухолевых препаратов в печень. // Диагностика и лечение опухолей печени (материалы научной конференции), СПб., 30.061.07.1999 г. (стр. 45)

5. Гарин А. М., Горбунова В. А., Гершанович М. Л. с соавт. Результаты I фазы клиническго изучения каталитической системы "терафтал + аскорбиновая кислота". Вопросы онкологии, 2001, том 47, № 6, с. 676-679.

6. Герасимова Г. К., Жукова О. С., Иванова Т. П. и др. Исследование цитотоксического потенциала каталитической системы, основанной на окислении аскорбиновой кислоты комплексами фталоцианинов с переходными металлами. Вестник РОНЦ, 2000, №4, с. 3-8.

7. Гранов A.M., Петровичев Н.Н. Первичный рак печени. Л.: Медицина, 1977.

8. Гранов A.M., Таразов П.Г., Гранов Д.А. Лечение первичного и метастатического рака печени. Анналы хирургической гепатологии, 1996, т. 1, с. 30-37.

9. Давыдова Т. В. Некоторые особенности распределения основных биооксидантов в нормальных тканях и злокачественных опухолях. Дис.108канд. биол. наук. 1998.

10. Дюжева Т.Г., Соколов В.В, Казачкина Н.И. и др. Ближайшие результаты ФДТ экспериментальных опухолей печени. // Диагностика и лечение опухолей печени (материалы научной конференции). СПб., 30.061.07.1999 г. (стр. 54)

11. Зимакова Н. И. Фармакокинетические исследования нового препарата Терафтала для бинарной каталитической терапии злокачественных опухолей. Всероссийская научно-практическая конференция, Москва, 1720 марта 2002г., стр 46-48.

12. Маджуга А. В., Ермакова Н. П., Членова Е. Л. с соавт. Влияние Терафтала-Лио на гемостаз животных. Вопросы онкологии, 2001, том 47, №6, с. 715-717.

13. Малюгина Л. Л. Перевиваемый альвеолярный слизистый рак печени крысы РС-1. Вопросы онкологии, 1958, т.4, № 5, с. 600-604.

14. Михайлова Л. М., Коняева О. И., Членова Е. Л. и соавт. Доклиническая токсикология Терафтала-Лио и бинарной каталитической системы "Терафтал-Лио + аскорбиновая кислота". Вопросы онкологии, 2001, том 47, №6, с. 695-700.

15. Назаренко Н. А., Вишневский В. А., Коков Л. С. и соавт. Дооперационная портальная венозная эмболизация как метод повышения безопасности обширных резекций печени. Анналы хирургической гепатологии, 2001, т. 6, №1, с. 52-58.

16. Патент RU 2106146 С1 // Официальный бюллетень изобретений. Полезные модели. 1998, №7, с. 12.

17. Патютко Ю.И., Сагайдак И.В., Котельников А.Г. и др. Современные подходы к хирургическому лечению опухолей печени. Вопросы онкологии, 1998, т. 44, №5, с. 580-583.

18. Патютко Ю.И., Сагайдак И.В., Котельников А.Г. Непосредственные и отдаленные результаты хирургического лечения метастазов колоректального рака. Анналы хирургической гепатологии, 1999, т. 4, №2, с. 7-9.

19. Патютко Ю.И., Сагайдак И.В. Показания и противопоказания к резекции печени по поводу метастазов колоректального рака. Анналы хирургической гепатологии, 2003, т. 8, №1, с. 10-18.

20. Сыркин А. Б., Жукова О. С., Кикоть Б. С. и др. Терафтал — новый препарат для бинарной каталитической терапии злокачественных опухолей. Российский химический журнал, 1998, т. XLII, № 5, с. 140-146.

21. Тимофеевский А.А. (ред.). Модели и методы экспериментальной онкологии. М., 1960.

22. Трапезников Н.Н., Аксель Е.М. Состояние онкологической помощи населению стран СНГ в 1999 году. М., 1999 г.

23. Трещалина Е.М., Жукова О.С., Герасимова Г.К. и др. Методические указания по изучению противоопухолевой активности фармакологических веществ. // Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. М., 2000 г.

24. Трещалина Е., Кобляков В., Дюжева Т. и др. Морфологическая и биохимическая характеристика холангиоцеллюлярного рака РС-1 при подкожной и внутрипеченочной трансплантации. Экспериментальная онкология, 2001, №23 (июнь), с. 126-130.

25. Юнкеров В.И., Григорьев С.Г. Математико-статистическая обработка данных медицинских исследований. СПб., 2002 г.

26. Abdalla ЕК, Barnett СС, Doherty D et al. Extended hepatectomy in patients with hepatobiliary malignancies with and without preoperative portal vein110embolization. Arch Surg 2002 Jun;137(6):675-80

27. Advanced Colorectal Cancer Meta-Analysis Project. Modulation of fluorouracil by leucovorin in patients with advanced colorectal cancer: evidence in terms of response rate. J. Clin. Oncol., 10: 896-903, 1992.

28. Aldrighetti L, Arru M, Ronzoni M et al. Extrahepatic biliary stenoses after hepatic arterial infusion (HAI) of floxuridine (FUdR) for liver metastases from colorectal cancer. Hepatogastroenterology 2001 Sep-Oct;48(41): 1302-7

29. Alexander HR, Barlett D, Libutti S. Current status of isolated hepatic perfusion with or without tumor necrosis factor for the treatment of unresectable cancers confined to liver. Oncologist, 2000; V.5, N.5, 416-424.

30. Badvie S. Hepatocellular carcinoma. Postgrad Med J 2000; 76: 4-11 (January).

31. Bain I, McMaster P. Benign and malignant liver tumours. Surgery 1997;15:169-174

32. Bartlett DL, Libutti SK, Figg WD et al. Isolated hepatic perfusion for unresectable hepatic metastases from colorectal cancer. Surgery 2001 Feb; 129(2): 176-87

33. Beasley R. Hepatitis В virus: the major etiology of hepatocellular carcinoma. Cancer 1988; 61: 1942- 1956.

34. Belghiti J, Regimbeau JM, Durand F et al. Resection of hepatocellular carcinoma: a European experience on 328 cases. Hepatogastroenterology 2002 Jan-Feb;49(43) :41 -6

35. Berney T, Mentha G, Roth AD, Morel P. Results of surgical resection of liver metastases from non-colorectal primaries. Br J Surg 1998 0ct;85(10):1423-7

36. Bobbio-Pallavicini E, Porta C, Moroni M et al. Epirubicin and etoposide combination chemotherapy to treat hepatocellular carcinoma patients: a phase II study. Eur J Cancer 1997 Oct;33(l 1): 1784-8

37. Breedis C., Young G. The Blood Supply of Neoplasms in the liver. Am. J. Pathol. 1954, v. 30, №5, p. 969-977.

38. Bridbord K. Pathogenesis and prevention of hepatocellular carcinoma. Cancer detect Prev 1989; 14: 191- 192.

39. Carr BI, Iwatsuki S, Baron R et al. Intrahepatic arterial cisplatinum and doxorubicin with or without lipiodol for advanced hepatocellular carcinoma (HCC): a prospective randomized study. Proc. Am. Soc. Clin. Oncol. Annu. Meet., 12: A668,1993.

40. Chen MF, Jeng LB, Lee WC. Surgical results in patients with hepatitis virus-related hepatocellular carcinoma in Taiwan. World J Surg 2002 Jun;26(6):742-7

41. Choti MA, Sitzmann JV, Tiburi MF et al. Trends in long-term survival following liver resection for hepatic colorectal metastases. Ann Surg 2002 Jun;235(6):759-66

42. Chui A, Rao A, McCaughan G et al. Liver transplantation for hepatocellular carcinoma in cirrotic patients. ANZ J Surg, 1999, V. 69, No. 11, 798-801.

43. Collins JM. Pharmacologic rationale for regional drug delivery. J Clin Oncol 1984;2:498-504

44. Curley SA. Radiofrequency Albation of Malignant Liver Tumors. Oncologist, 2001; 6: 14-23.

45. Di Bisceglie A, Rustgi V, Hoofnagle J, et al. NIH conference on hepatocellular carcinoma. Ann Intern Med 1988; 108: 390-401.

46. Di Bisceglie A. Hepatocellular carcinoma: molecular biology of its growth and relationship to hepatitis В virus infection. Med Clin North Am 1989; 73: 985-995.

47. Douillard JY, Cunningham D, Roth AD, et al. Irinotecan combined with112fluorouracil compared with fluorouracil alone as first-line treatment for metastatic colorectal cancer: a multicentre randomised trial. Lancet. 2000; 355: 1041-1047

48. Durand F, Belghiti J. Liver transplantation for hepatocellular carcinoma. Hepatogastroenterology 2002 Jan-Feb;49(43):47-52

49. Elias D, Ouellet JF, De Baere T et al. Preoperative selective portal vein embolization before hepatectomy for liver metastases: long-term results and impact on survival. Surgery 2002 Mar;131(3):294-9

50. Ercolani G, Grazi GL, Ravaioli M et al. Liver resection for multiple colorectal metastases: influence of parenchymal involvement and total tumor volume, vs number or location, on long-term survival. Arch Surg 2002 Oct; 137(10): 1187-92

51. Falkson G, Ryan LM, Johnson LA et al. A randomized phase II study of mitoxantrone and cisplatin in patients with hepatocellular carcinoma: an ECOG study. Cancer (Phil.), 60: 2141-2145, 1987.

52. Figueras J, Ibanez L, Ramos E et al. Selection criteria for liver transplantation in early-stage hepatocellular carcinoma with cirrhosis: results of a multicenter study. Liver Transpl 2001 Oct;7(10):877-83

53. Fong Y, Cohen AM, Fortner JG, et al. Liver resection for colorectal metastases. J Clin Oncol. 1997; 15: 938-946.

54. Fuchs CS, Clark JW, Ryan DP et al. A phase II trial of gemcitabine in patients with advanced hepatocellular carcinoma. Cancer 2002 Jun 15;94(12):3186-91

55. Gagne DJ, Roh MS. Cryosurgery for hepatic malignacies. In: Curley SA, ed. Liver Cancer. New York: Springer-Verlag Publishers, 1998: 173-200.

56. Green S, Weiss GR. Southwest Oncology Group standart response criteria, endpoint definitions and toxity criteria. Invest New Drug 1992; 10:239-253

57. Hasegawa S, Yamaski N, Hiwaki T et al. Factors that predict intrahepatic recurrence of hepatocellular carcinoma in 81 patients initially treated by percutaneous ethanol injection. Cancer 1999; 86: 1682-1690.

58. Hollbrook R. F., Koo K., Ryan J. A. Resection of malignant primary tumors. Am J Surg 1996; 171: 453-455.

59. Ikeda M, Okada S, Ueno H et al. Radiofrequency ablation and percutaneous ethanol injection in patients with small hepatocellular carcinoma: a comparative study. Japanese Journal of Clinical Oncology, 2001; 31: 322-326

60. Jaeck D, Bachellier PGM, Boudjema К et al. Long-term survival following resection of colorectal hepatic metastases. Br J Surg, 1997; 84: 977-980.

61. Jaeck D, Oussoultzoglou E, Bachellier P et al. Hepatic metastases of gastroenteropancreatic neuroendocrine tumors: safe hepatic surgery. World J Surg 2001 Jun;25(6):689-92

62. Jori G. H. Photo chemotherapy of tumors in basic research and clinical application // Medical lazer Report. 1985. 3. p. 23-27.

63. Kanematsu T, Furui J, Yanaga К et al. A 16-year experience in performing hepatic resection in 303 patients with hepatocellular carcinoma: 1985-2000. Surgery 2002 Jan;131(l Suppl):S153-8

64. Kawarada Y, Yamagiwa K, Das ВС. Analysis of the relationships between clinicopathologic factors and survival time in intrahepatic cholangiocarcinoma. Am J Surg 2002 Jun;183(6):679-85

65. Kawasaki S. Living-donor liver transplantation for hepatocellular carcinoma. Hepatogastroenterology 2002 Jan-Feb;49(43):53-5

66. Kerr DJ. Clinical efficacy of tomudex in advanced colorectal cancer. Anti-Cancer Drugs, 1997; Suppl. 2: 11-5.

67. Kobliakov V., Kulikova L., Kolyada A. Regulation of CYP1A induction in Hepatoma 27 depending on the site of transplantation. Xenobiotica, 1993, v. 23, N. 6, pp. 703-708.

68. Kohnoe S, Endo K, Yamamoto M et al. Protracted hepatic arterial infusion with low-dose cisplatin plus 5-fluorouracil for unresectable liver metastases from colorectal cancer. Surgery 2002 Jan; 131(1 Suppl):S 128-34

69. Kondo S, Katoh H, Omi M et al. Hepatectomy for metastases from breast cancer offers the survival benefit similar to that in hepatic metastases from colorectal cancer. Hepatogastroenterology 2000 Nov-Dec;47(36):1501-3

70. Ku Y, Tominaga M, Iwasaki T et al. Efficacy of repeated percutaneous isolated liver chemoperfusion in local control of unresectable hepatocellular carcinoma. Hepatogastroenterology 1998 Nov-Dec;45(24): 1961-5

71. Kubicka S, Rudolph KL, Tietze MK et al. Phase II study of systemic gemcitabine chemotherapy for advanced unresectable hepatobiliary carcinomas. Hepatogastroenterology 2001 May-Jun;48(39):783-9

72. Leichman C. G., Fleming T. R., Muggia F. M. et al. Phase II study of fluorouracil and its modulation in advanced colorectal cancer: A Southwest Oncology Group Study. J. Clin. Oncol., 13: 1303-1311, 1995.

73. Link KH, Sunelaitis E, Kornmann M et al. Regional chemotherapy of nonresectable colorectal liver metastases with mitoxantrone, 5-fluorouracil, folinic acid, and mitomycin С may prolong survival. Cancer 2001 Dec 1;92(11):2746-53

74. Livraghi T, Goldberg SN, Lazzaroni S et al. Small hepatocellular carcinoma: treatment with radio-frequency ablation versus ethanol injection. Radiology, 1999; 210: 655-661.

75. Lo CM, Ngan H, Tso WK et al. Randomized controlled trial of transarterial lipiodol chemoembolization for unresectable hepatocellular carcinoma.115

76. Hepatology 2002 May;35(5): 1164-71

77. Luna-Perez P, Rodriguez-Coria DF, Arroyo B, Gonzalez-Macouzet J. The natural history of liver metastases from colorectal cancer. Arch Med Res 1998 Winter;29(4):319-24

78. Lygidakis NJ, Sgourakis G, Dedemadi G et al. Regional chemoimmunotherapy for nonresectable metastatic liver disease of colorectal origin. A prospective randomized study. Hepatogastroenterology 2001 Jul-Aug;48(40): 1085-7

79. Makuuchi M, Imamura H, Sugawara Y, Takayama T. Progress in surgical treatment of hepatocellular carcinoma. Oncology 2002; 62 Suppl 1:74-81

80. McCarty TM, Kuhn JA. Cryotherapy for liver tumors. Oncology 1998. 12: 979-987.

81. MetaAnalysis Group in Cancer. Efficacy of intravenous continuous infusion of 5-fluorouracil compared with bolus administration in advanced colorectal cancer. J Clin Oncol, 16: 301-308, 1998.

82. Michael M, Zalcberg J. Palliative chemotherapy for advanced colorectal cancer: systematic review and meta-analysis. BMJ, 2000, 321: 531-535.

83. Minagawa M, Makuuchi M, Torzilli G et al. Extension of the frontiers of surgical indications in the treatment of liver metastases from colorectal cancer: long-term results. Ann Surg 2000 Apr;231(4):487-99

84. Montalto G, Cervello M, Giannitrapani L et al. Epidemiology, risk factors, and natural history of hepatocellular carcinoma. Ann N Y Acad Sci 2002 Jun; 963: 13-20.

85. Moroz P, Salama PR, Gray BN. Resecting large numbers of hepatic colorectal metastases. ANZ J Surg 2002 Jan;72(l):5-10

86. Nagashima I, Oka T, Hamada С et al. Histopathological prognostic factors influencing long-term prognosis after surgical resection for hepatic metastases from colorectal cancer. Am J Gastroenterol 1999 Mar;94(3):739-43

87. Nerenstone SR, Ihde DC, Friedman MA. Clinical trials in primary hepatocellular carcinoma: current status and future directions. Cancer Treat Rev, 15: 1-31,1988.

88. OcudaK. Hepatocellular carcinoma. J Hepatol 2000; 32(suppl): 225-237.

89. Ohlsson B, Stenram U, Tranberg KG. Resection of colorectal liver metastases: 25-year experience. World J Surg 1998 Mar;22(3):268-76

90. Ohto M., Yoshicawa M., Saicho H. et al. Nonsurgical Treatment of Hepatocellular Carcinoma in Cirrotic Patients // World J. Surg. 1995. V. 19. №. l.P. 42-46.

91. Pacella CM, Bizzarri G, Magnolfi F et al. Laser thermal ablation in the treatment of small hepatocellular carcinoma: results in 74 patients. Radiology 2001 Dec;221(3):712-20

92. Papadimitriou JD, Fotopoulos AC, Prahalias AA et al. The impact of new technology on hepatic resection for malignansy. Arch Surg 2001 Nov; 136 (11): 1307-13.

93. Patt YZ, Charnsangavej C, Yoffe B, et al. Hepatic arterial infusion of floxuridine, leucovorin, doxorubicin and cisplatin for HCC: effects of hepatitis В and С viral infection on drug toxicity and patient survival. J Clin Oncol 1994;12:1204-1211

94. Pilchmayr R, Weimann A et al. Indications and role of liver transplantation for malignant tumors. Oncologist, 1997, V.2, No. 3, 164-170.

95. Pohl J, Zuna I, Stremmel W et al. Systemic chemotherapy with epirubicin for treatment of advanced or multifocal hepatocellular carcinoma. Chemotherapy 2001 Sep-Oct;47(5):359-65

96. Quebbeman EJ, Wallace JR. Cryosurgery for hepatic metastases. In: Condon RE, ed. Current Techniques in general Surgery. New York: Mosby, 1997: 1-75.

97. Rose AT, Rose DM, Rinson CW et al. Hepatocellular carcinoma outcomes based on indicated treatment strategy. Am Surg 1998 Dec; 64 (12): 1128-34; discussion 1134-5.

98. Ruiz J, Mazzolini G, Sangro В et al. Gene therapy of hepatocellular carcinoma. DigDis 2001; 19:324-332.

99. Saltz LB, Сох V, Blanke C, et al. Irinotecan plus fluorouracil and leucovorin for metastatic colorectal cancer. N Engl J Med. 2000; 343: 905-914

100. Savage P. A., Malt A. R. Survival after hepatic resection for malignant tumors. Br J Surg. 1992; 79: 1095-1101.

101. Schemmer P, Friess H, Btichler MW. Recent advances in surgical therapy for primary and metastatic liver cancer. Анналы хирургической гепатологии, 2002, т. 7, №2, с. 114-124.

102. Schmidbauer S, Hallfeldt К, Sitzmann et al. Experience with ultrasound scissors and blades (UltraCision) in open and laparoscopic liver resection. Ann Surg 2002 Jan; 235 (1): 27-30.

103. Seifert Ж, Bottger TC, Weigel TF et al. Prognostic factors following liver resection for hepatic metastases from colorectal cancer. Hepatogastroenterology 2000 Jan-Feb;47(31):239-46

104. Shiina S, Teratani T, Obi S et al. Nonsurgical treatment of hepatocellular carcinoma: from percutaneous ethanol injection therapy and percutaneous microwave coagulation therapy to radiofrequency ablation. Oncology 2002;62 Suppl 1:64-8

105. Shimamura Y, Gunven P, Ishii M et al. Debulking surgery and arterial embolisation for unresectable liver cancer. Hepatogastroenterology 1993; 40 (1):11810.13.

106. Siperstein A., Garland A., Engle K. et al. Local reccurence after laparoscopic radiofrequency thermal albation of hepatic tumors. Annals of Surgical Oncology, 2000, 7(2): 106-113.

107. Solbiati L, Goldberg SN, Tiziana I et al. Hepatic metastases: percutaneous radio-frequency ablation with cooled-tip electrodes. Radiology 1997;205:367-373.

108. Stagg RJ, Venook AP, Chase JL et al. Alternating hepatic intra-arterial floxuridine and fluorouracil: a less toxic regimen for treatment of liver metastases from colorectal cancer. J Natl Cancer Inst 1991;83:423-428.

109. Takada Y, Otsuka M, Seino К et al. Hepatic resection for metastatic tumors from noncolorectal carcinoma. Hepatogastroenterology 2001 Jan-Feb;48(37):83-6

110. Tarazov PG, Polysalov VN, Prozorovskij KV et al. Ischemic complications of transcatheter arterial chemoembolization in liver malignancies. Acta Radiol 2000 Mar;41(2): 156-60

111. Todo S, Furukawa H, Matsushita M et al. Liver transplantation for patients with hepatitis B/C virus cirrhosis or hepato cellular carcinoma. Nippon Geka Gakkai Zasshi 2002 May;103(5):408-13

112. Wakabayashi H, Ishimura К, Okano К et al. Is preoperative portal vein embolization effective in improving prognosis after major hepatic resection in patients with advanced-stage hepatocellular carcinoma? Cancer 2001 Nov l;92(9):2384-90

113. Wingo PA., Tong T, Bordens et al. Cancer statistics. CA 1995; 45: 8-30.

114. Wulf J, Hadinger U, Oppitz U et al. Stereotactic radiotherapy of targets in the lung and liver. Strahlenther Onkol 2001 Dec;177(12):645-55

115. Yokoi Y, Suzuki S, Nakamura S. The impact of hepatic resection on metastatic colorectal cancer. Gan To Kagaku Ryoho 2002 Jun;29(6):848-55

116. Yoon S., Tanable K. Surgical Treatment and Other Regional Treatments for Colorectal Career Liver Metastases. The Oncologist, Vol. 4, No 3, 197-208, June 1999.

117. Zaniboni A, Simoncini E, Marpicati P, Marini G. Phase II study of 5-FU and high dose folinic acid in HCC. Br J Cancer 1988;57:319

118. Zhou XD, Tang ZY. Management of HCC: long term outcome in 2639 cases. Gan To Kagaku Ryoho 1997;24(suppl 1):9-16