Хлорфенолы в водных экосистемах бассейна реки Селенги и их деструкция микрофлорой пруда-аэратора Байкальского целлюлозно-бумажного комбината тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, кандидат биологических наук Дабалаева, Галина Степановна

• Дабалаева, Галина Степановна
• кандидат биологических наук
• 2004

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Дабалаева, Галина Степановна

ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ХЛОРФЕНОЛОВ.

1.1. Физико-химические свойства.

1.2. Токсичность.

1.3. Источники поступления в экосистемы.

2. МИКРОБИОЛОГИЧЕСКАЯ ДЕСТРУКЦИЯ ХЛОРФЕНОЛОВ

3. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

3.1. Объекты исследования.

3.2. Физико-химические методы анализа.

3.2.1. Спектрофотометрическое определение хлорфенолов.

3.2.2. Газохроматографическое определение хлорфенолов.

3.2.2.1. Определение хлорфенолов в природной воде.

3.2.2.2. Определение хлорфенолов в культуральной жидкости.

3.3. Микробиологические методы.

3.3.1.Построение калибровочных кривых накопления биомассы.

3.3.2.Выделение культур микроорганизмов-деструкторов if; хлорфенолов.

3.3.3.Изучение морфолого-культуральных и физиологических свойств микроорганизмов.

4. ЗАГРЯЗНЕННОСТЬ ХЛОРФЕНОЛАМИ БАССЕЙНА РЕКИ СЕЛЕНГИ И ИДЕНТИФИКАЦИЯ ИСТОЧНИКОВ ИХ ПОСТУПЛЕНИЯ.

5. ДЕСТРУКЦИЯ ХЛОРФЕНОЛОВ МИКРООРГАНИЗМАМИ ПРУДА-АЭРАТОРА БЦБК.

5.1. Хлорфенолы в воде пруда-аэратора БЦБК.

5.2. Деструкция хлорфенолов микроорганизмами пруда-аэратора БЦБК.

5.3. Морфолого-культуральные и физиологические свойства бактерий-деструкторов хлорфенолов.

5.4. Разработка биотехнологической схемы очистки сточных вод.

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Хлорфенолы в водных экосистемах бассейна реки Селенги и их деструкция микрофлорой пруда-аэратора Байкальского целлюлозно-бумажного комбината»

Актуальность работы.

В связи с актуальностью проблемы охраны озера Байкал, участка мирового природного наследия, большое значение имеют исследования загрязнения водных экосистем токсичными органическими соединениями, источников их поступления и методов утилизации. Хлорфенолы являются токсичными органическими загрязнителями, поступающими в водные экосистемы со сточными водами и отходами; целлюлозно-бумажной,, химической промышленности, хозяйственно-бытовыми стоками (Елин, 2001), а также в результате спонтанного хлорирования природного органического вещества (Naturally Produced Organohalogens, 1995). Согласно разработанному «Перечню вредных веществ, вредных для экосистемы озера Байкал», ХФ относятся к категории «особо опасных» веществ, содержание которых в воде озера Байкал, и его притоков недопустимо. Между тем, хлорфенолы поступают в озеро Байкал со сточными водами Байкальского целлюлозно-бумажного комбината (БЦБК), расположенного непосредственно на берегу озера. Эти хлорфенолы образуются из лигнина на стадии отбелки целлюлозы хлором (Бейм и др., 1997). После физико-химической и биологической очистки сточные воды БЦБК поступают в пруд-аэратор (конечная стадия очистки), через который они сбрасываются в озеро* Байкал. По данным Комитета природных ресурсов Иркутской области, в 2000 году в озеро Байкал со сточными водами БЦБК поступило 29.7 тонн хлорорганических соединений, в том числе хлорфенолов. Биотехнологические методы, основанные на применении активных микроорганизмов-деструкторов, в настоящее время являются одними из наиболее эффективных методов очистки сточных вод от экотоксикантов. Поэтому для интенсификации биологической очистки стоков БЦБК и уменьшения объемов поступления хлорфенолов в экосистему озера Байкал исследование контаминации бассейна озера Байкал хлорфенолами и закономерностей их деструкции аборигенными микробными консорциумами пруда-аэратора БЦБК, адаптировавшихся к высоким концентрациям хлорфенолов, является актуальным.

Работа выполнена в соответствии с тематическим планом научно-исследовательских работ Байкальского института природопользования СО РАН подпрограммы СО РАН 17.7. «Защита атмосферы, природных вод и почв».

Цель работы. Исследование современного уровня контаминации хлорфенолами водных экосистем бассейна реки Селенги, источников их поступления и разработка биотехнологического способа очистки сточных вод, содержащих хлорфенолы, с применением микроорганизмов пруда-аэратора БЦБК.

Основные задачи:

1. Определение уровня загрязнения хлорфенолами воды пруда-аэратора БЦБК, озера Байкал в зоне влияния БЦБК, реки Селенги и ее притоков.

2. Идентификация источников поступления хлорфенолов в исследованные водные экосистемы по соотношениям индивидуальных соединений.

3. Исследование динамики деструкции 2-хлорфенола, 4-хлорфенола и 2,4-дихлорфенола микроорганизмами ила пруда-аэратора БЦБК;

4. Разработка биотехнологического способа очистки сточных вод с использованием микроорганизмов-деструкторов хлорфенолов, выделенных из ила пруда-аэратора БЦБК.

5. Определение морфолого-культуральных и физиологических свойств выделенных микроорганизмов-деструкторов.

Научная новизна работы. В работе впервые получены данные по уровням загрязнения хлорфенолами водных экосистем бассейна реки Селенги с применением дериватизации и газохроматографического определения хлорфенолов в виде бромпроизводных на уровне предельно-допустимых и более низких концентраций. Показано, что присутствие хлорфенолов в природной воде обусловлено локальными антропогенными и природными источниками, для идентификации которых впервые предложено использовать соотношения суммарных концентраций трихлорфенолов и дихлорфенолов, трихлорфенолов и 2-хлорфенола. Выделены активные культуры микроорганизмов-деструкторов хлорфенолов из ила пруда-аэратора БЦБК и определены их морфолого-культуральные и физиологические свойства. Показано, что способность выделенных культур утилизировать хлорфенолы увеличивается в ряду 2-хлорфенол < 4-хлорфенол < 2,4-дихлорфенол. Выявлена перспективность применения активных И культур для эффективной биоремедиации стоков БЦБК при концентрациях хлорфенолов до 10 мг/л.

Практическая значимость. Из ила пруда-аэратора БЦБК выделены активные культуры микроорганизмов-деструкторов 2-хлорфенола, 4-хлорфенола и 2,4-дихлорфенола, отнесенные к роду Rhodococcus. Изучены их основные морфолого-культуральные и физиологические свойства. Консорциум микроорганизмов, выделенный из ила пруда-аэратора БЦБК рекомендован к применению для биологической очистки сточных вод БЦБК от высоких концентраций хлорфенолов. Результаты исследований вошли в отчеты Байкальского института природопользования СО РАН по госбюджетным темам, в отчеты по экспедиционным грантам СО РАН (20002003 гг.), по интеграционному проекту СО РАН «Комплексное исследование состояния и динамики развития экосистемы дельты р. Селенга как естественного биофильтра и индикатора современного состояния в условиях интенсификации антропогенного загрязнения озера Байкал» (по итогам 2001 г., утвержден 30.01.02), в отчет по гранту правительства Республики Бурятия для молодых ученых на выполнение НИР по теме «Деструкция хлорфенолов микрофлорой пруда-аэратора Байкальского целлюлозно-бумажного комбината».

Апробация работы. Результаты работы представлялись на международных и региональных конференциях и симпозиумах: «Экология Байкала и Прибайкалья» (г. Иркутск, 2000), «Молодежь и пути России к устойчивому развитию» (г. Красноярск, 2001), Всероссийские научные чтения (к 70-летию со дня рождения члена-корреспондента АН СССР М.В. Мохосоева) (г. Улан-Удэ, 2002), «Вода: экология и технология (ECWATEOH

2002)» (Москва, 2002), «Экология и проблемы охраны окружающей среды» (г. Красноярск, 2003), Научно-практическая конференция ВосточноСибирского государственного технологического университета (г. Улан-Удэ,

2003), «Окружающая среда и здоровье человека» (г. Санкт-Петербург, 2003), «Вторая интеграционная междисциплинарная конференция молодых ученых СО РАН и высшей школы» (Иркутск, 2003), «Микроорганизмы в экосистемах озер, рек и водоемов» (Иркутск, 2003), Молодежный Академический Форум «Молодежь и наука Сибири» (г. Чита, 2003 г.), Научно-практическая конференция Бурятского государственного университета (г. Улан-Удэ, 2004), «Биология - наука 21— века» (г. Пущино,

2004), 3-я школа-семинар молодых ученых России «Проблемы устойчивого развития региона» (г. Улан-Удэ, 2004).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 15 работ. Структура и объем диссертации.

Диссертационная работа состоит из введения, пяти глав, выводов и списка использованной литературы (88 наименований, в том числе 44

Заключение диссертации по теме «Биотехнология», Дабалаева, Галина Степановна

ВЫВОДЫ:

1. Уровень загрязненности хлорфенолами природных вод в бассейне реки Селенги относительно невелик, сумма концентраций исследованных ХФ находится в интервале 0,36-1,85 мкг/л. Установлено, что поступление хлорфенолов со сточными водами БЦБК имеет локальный характер и не вносит вклада в загрязнение ХФ бассейна озера Байкал.

2. Уровни содержания хлорфенолов в воде озера Байкал в зоне выпуска сточных вод БЦБК относительно невысоки, хотя по 2-хлорфенолу и 2,4-дихлорфенолу превышают ПДК для воды водных объектов, имеющих рыбохозяйственное значение;

3. Установлено, что способность выделенных культур из пруда-аэратора БЦБК утилизировать хлорфенолы увеличивается в ряду 2-хлорфенол < 4-хлорфенол < 2,4-дихлорфенол.

4. Разработан биотехнологический способ очистки стоков БЦБК при концентрациях хлорфенолов до 10 мг/л с применением выделенных культур.

5. Выявлены морфолого-культуральные и физиологические свойства выделенных культур. Выделенные культуры отнесены к роду Rhodococcus',

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Дабалаева, Галина Степановна, 2004 год

1. Батоев В.Б., Нимацыренова Г.Г. Деструкция фенола микрофлорой // Экология и промышленность России, 2002.- №8 С. 26-27.

2. Батоев В.Б., Цыренов В.Ж., Нимацыренова Г.Г., Инешина Е.Г., Дабалаева Г.С., Почерней И.М. Деструкция хлорфенолов микроорганизмами пруда-аэратора Байкальского ЦБК // Экология и промышленность России, 2004 №9 - С. 22-24.

3. Бейм A.M., Белявцева Г.В., Горохова В.Г., Горохов А.Г., Бабкин В.А. Хлорорганические соединения, поступающие в Байкал со сточными водами Байкальского целлюлозно-бумажного комбината // Химия в интересах устойчивого развития, 1997. Т.5, №4 - С. 383-392.

4. Белявцева Г.В., Дубовенко Ж.В. Хлорорганические вещества в донных отложениях Южного Байкала, География и природные ресурсы, 2 (1994) 61-64.

5. Биотехнология. Принципы и применение. М.: Мир, 1988. - 480 с.

6. Воронин A.M. Биотехнология защиты окружающей среды от загрязнения // Химия в интересах устойчивого развития, 2000 № 8 - с. 479-486.

7. Гигиенические нормативы ГН 2.1.5.689-98. Предельно допустимые концентрации (ПДК) химических веществ в воде водных объектов хозяйственно-питьевого и культурно-бытового водопользования,

8. Российский Регистр потенциально опасных химических и биологических веществ, Минздрав России, Москва, 1998.

9. Гигиенические нормативы содержания пестицидов в объектах окружающей среды (перечень). ГН 1.1.546-96 М.: Информационно-издательский центр Госсанэпиднадзора России, 1997.

10. Горлатов С.Н., Мальцева О.В., Шевченко В.И., Головлева J1.A. Деградация хлорфенолов культурой Rhodococcus erythropolis 1 ср // Микробиология, 1989. Т. 58 - С. 647-651.

11. ГОСТ 27384-87 Вода. Нормы погрешности измерений, показателей состава и свойств.

12. ГОСТ Р 51-592-2000 Вода. Общие требования к отбору проб.

13. Громов Б.В., Княгинина Е.А., Рахман М.И. Устойчивость различных ценозов пресноводного бактериопланктона к химическому шоку // Серия биологическая, 1987. № 2 - с. 245-252.

14. Груздев И.В: Дериватизация и экстракционно-хроматографическое определение хлорфенолов в водных объектах: Автореф. дис. .канд.хим.наук. Москва, 2001. - 22 с.

15. Дабалаева Г.С., Батоев В.Б., Нимацыренова Г.Г., Палицына С.С. Загрязнение хлорированными фенолами бассейна реки Селенги.// Химия в интересах устойчивого развития, 2004. Т.12, №5.

16. Дембицкий В.М., Толстиков Г. А. Природные галогенированные моноядерные фенолы и их производные // Химия в интересах устойчивого развития, 4 (2003) 579-587.

17. Димитриева Г.Ю., Христофорова Н.К. и др. Детоксикация фенола микроорганизмами прибрежной зоны моря // Микробиология, 1999 т. 68, № 1. - с.107-113.

18. Блинов Н.П. Основы биотехнологии. СПб.: Наука, 1995. - 600 с.

19. Извекова Т.В., Гриневич В.И., Костров В.В. Хлорорганические поллютанты вприродном источнике питьевой воды г. Иванова // Инженерная экология, 2003, 3, с. 49-54.

20. Карасевич Ю.Н. Основы селекции микроорганизмов, утилизирующих синтетические органические соединения. М.: Наука, 1982. - 144 с.

21. Копытов Ю.П., Дивавин И.А. Адаптация морской нефтеокисляющей микрофлоры к комбинированному загрязнению (экологические и физиолого-биохимические аспекты) // Сб. тр. Реакции гидробионтов на загрязнение. М. 1983. - с.64-67.

22. Коренман Я.И., Груздев И.В., Кондратенок Б.М Газохроматографическое определение хлорфенолов в питьевой воде с предварительной двухстадийной химической модификацией // Химия и технология воды, 2000. т. 22, № 3 - С. 290-297.

23. Коренман Я. И., Груздев И.В., Кондратенок Б.М. Идентификация хлорфенолов в водных средах методом капиллярной газожидкостной хроматографии // Журнал прикладной химии, 1999. т. 72, № 10 - с. 1641-1645.

24. Коренман Я.И., Груздев И.В., Кондратенок Б.М. Извлечение и газохроматографическое определение фенола и крезолов в почве // Журнал аналитической химии, 2001. т. 56, № 2. - с. 166-169.

25. Коренман Я.И., Груздев И.В., Кондратенок Б.М. Фокин В.Н. Условия бромирования и газохроматографическое определение фенолов в питьевой воде // Журнал аналитической химии, 1999. т. 54, № 12 - с. 1134-1138.

26. Коренман Я.И., Груздев И.В., Кондратенок Б.М. Химическая модификация хлорфенолов при газохроматографическом определении их в воде // Журнал прикладной химии, 2000. -Т.73, №9 С. 1451-1455.

27. Методы общей бактериологии. Т. 1. М.: Мир, 1983. - 377 с.

28. Моисеева О.В., Линько Е.В., Баскунов Б.П., Головлева Л.А. Деградация 2хлорфенола и 3-хлорбензоата Rhodococcus opacus lcp // Микробиология, 1999. Т.68, №4. - С.461-466.

29. Новак И. Количественный анализ методом газовой хроматографии. М., Мир, 1978.- 179 с.

30. Нормативы предельно допустимых вредных воздействий на уникальную экологическую систему озера Байкал, Москва, 2004

31. Определитель бактерий Берджи. Т.1, М., Мир, 1997. 432 с.

32. Панкратов Л.Я и др. Руководство к лабораторным занятиям по микробиологии. М., Пищевая промышленность, 1975. 216 с.

33. Перечень веществ, вредных для экосистемы озера Байкал. Проект. М., МПР РФ, 2004.

34. Перечень рыбохозяйственных нормативов: предельно допустимых концентраций (ПДК) и ориентировочно безопасных уровней воздействия (ОБУВ) вредных веществ для воды водных объектов,уимеющих рыбохозяйственное значение, Изд-во ВНИРО, Москва, 1999.

35. ПертС. Дж. Основы культивирования микроорганизмов и клеток. М.: Мир, 1978.-331 с.

36. Практикум по микробиологии. М.: Высшая школа, 1983. - 280 с.

37. Реакция гидробионтов на загрязнение: Сб. ст., М.: Наука, 1983. 246 с.

38. Скурлатов Ю.И., Дука Г.Г., Мизити А. Введение в экологическую химию. -М.: Высшая школа, 1994. 400 с.

39. V, СОЗ: в опасности наше будущее / Под ред. О.Сперанской, А.Киселева, С.

40. Юфита. М.: "Эко-согласие", 2003. - 144 с.

41. Соляникова И.П., Головлева Л.А. Фенол гидроксилазы: современноесостояние вопроса (Обзор) // Биохимия, 1999 т. 64, № 4 - с. 437-446.

42. Тимофеева С.С. Экологическая биотехнология. Иркутск: Изд-во ИрГТУ, 1999.-210 с.

43. Тинсли И. Поведение химических загрязнителей в окружающей среде. М.: Мир, 1982.- 380 с.

44. Федоров JI.A., Диоксины как экологическая опасность: ретроспектива и перспективы, Наука, Москва, 1993.

45. Финкелыитейн З.И., Баскунов Б.П., Головлев E.JL, Моисеева О.В., Вервурт Ж., Ритьенс И., Головлева J1.A. Зависимость превращения хлорфенолов родококками от положения и числа атомов хлора в ароматическом кольце // Микробиология, 2000. Т.69, №1. - С.49-57.

46. Ando К., Kato A. and Suzuki S., Biochem. Biophys. Res. Commun., 39 (1970) 1104.

47. Annachhatre A.P., Gheewala S.H. Biodegradation of chlorinated phenolic compounds // Biotechnology Advances, 1996. Vol. 14, №1 - P. 35-56.

48. Armenante P.M., Kafkewitz D., Lewandowski G. Anaerobic-aerobic treatment of halogenated phenolic compounds // Ghemosphere. 1999. - Vol. 33, No. 3. -p.681-692.

49. ATSDR. Agency for Toxic Substances and Disease Registry, Division of Toxicology. Toxicological profile for chlorophenols: potential for human exposure, GA, Atlanta, 1999.

50. Atuanya E.I., Purohit H.J., Chakrabarti T. Anaerobic and aerobic biodegradation of chlorophenols using UASB and ASG bioreactors // World Journal of Microbiology and Biotechnology, 2000. №16 - P. 95-98.

51. Bae H.-S., Lee J.M., Kim Y.B., Lee S.-T. Biodegradation of the mixtures of 4-chlorophenol and phenol by Comamonas testosteroni CPW301 // Biodegradation, 1996 № 7 - p. 463-469.

52. Berger R.S, J. Med. Entomol., 20 (1983) 103.

53. Bondar V.S., Boersma M.G., van Berkel WJ.H et al. Preferential oxidative dehalogenation upon conversion of 2-halophenols by Rhodococcus opacus 1G // FEMS Microbiology Letters, 1999. №181 - P. 73-82.

54. Cardellicchio N., Cavalli S., Piangerelli V., Giandomenico S., Ragone P. Determination of phenols in environmental samples by liquid chromatography-electrochemistry// Fresenius J Anal. Chem., 1997, 358, pp. 749-754.

55. Deng-Yu L., Eberspacher J., Wagner B. Degradation of 2,4,6-trichlorophenol by Azotobacter sp. Strain GP1 // Applied and Environmental Microbiology. -1991. Vol.57, No.7. - p. 2465-2475.

56. Environmental Handbook. Volume III: Compendium of environmental standards, Vieweg, Leverkusen, 1995.

57. Farrell A.,Quilty B. The enhancement of 2-chlorophenol degradation by a mixed microbial community when augmented with Pseudomonas putida CP1 // Water Research. 2002: - Vol.36. - p.2443-2450.

58. Flodin C., Ekelund M., Boren H., Grimvall A. Pyrolysis-GC/AED and pyrolysis-GC/MS analysis of chlorinated structures in aquatic fulvic acids and chlorolignins // Chemosphere, 1997, 34, 11, pp. 2319-2328.

59. Franssen M.C.R., Posthumus M.A. and van der Plas H.C., Phytochemistry, 27 (1988)1093.

60. Genthner B.R.S., Price II W.A., Pritchard P.H. Anaerobic degradation of chloroaromatic compounds in aquatic sediments under a variety of enrichment condition // Applied and environmental microbiology 1989.1. No. 55. -p.1466-1471.

61. Gifford J.S., Buckland S.J., Judd M.C., McFarlane P.N., Anderson Sh. M. Pentachlorophenol (PCP), PCDD, PCDF and pesticide concentrations in a freshwater lake catchment // Chemoshere, 1996. Vol. 32, No. 11, pp. 2097-2113.

62. Gokcen J. E. Investigating the potential impacts of chlorophenols on the Lake Baikal (Siberia, Russia) food web by employing Daphnia grazing bioassays and a Chlorella growth bioassay // Arch. Environ. Contam. Toxicol., 1998 -№34-P. 241-247.

63. Goswami M., Shivaraman N., Singh R.P. Kinetics of chlorophenol degradation by benzoate-induced culture of Rhodococcus erythropolis Ml // World Journal of Microbiology and Biotechnology, 2002. №18 - P. 779-783.

64. Grady JR. C.P.L., Filipe C.D.M. Ecological engineering of bioreactors for wastewater treatment // Water, Air and Soil Pollution, 2000 № 123 - p. 117-132.

65. Grobler D.F., Badenhorst J.E., Kempster P.L. PCBs, Chlorinated Hydrocarbon Pesticides and Chlorophenols in the Isipingo Estuary, Natal, Republic of South Africa // Marine Pollution Bulletin, Vol. 32, No. 7, pp. 572-575, 1996.

66. Grynkiewicz M., Polkowska Z., Kot-Wasik A., Determination of phenols in runoff // Polish Journal of Environmental Studies, 2002, Vol. 11, No. 1, pp. 85-89

67. Guidelines for Canadian Water Quality: Supporting Documentation, Water Quality and Health Bureau, Ottawa-Ontario, 2003.

68. Guiraud P., Steiman R., Ait-Layde L., Seigle-Murandi F. Degradation of phenolic and chloroaromatic compounds by Coprinus spp.il Chemosphere, 1999 v. 38, № 12 -p. 2775-2789.

69. Hao O.J., Kim M.H., Seagren E.A., Kim H. Kinetics of phenol and chlorophenol utilization by Acinetobacter species // Chemosphere, 2002 № 46 - p. 797807.

70. Heider J., Fuchs G. Microbial Anaerobic Aromatic Metabolism (Review) // Anaerobe, 1997 № 3 - p. 1-22.

71. Hodin F., Boren H., Grimvall A. Formation of chlorophenols and related compounds in natural and technical chlorination processes // Water Science Technology, 1991,24(3/4), pp. 403-410.

72. House W.A., Leach D., Long J.L.A., Cranwell P., Smith C., Bharwaj L., Meharg A., Ryland G., Orr D.O., Wright J. Micro-organic compounds in the Humber rivers // The Science of the Total Environment, 1997, 194-195, pp. 357-371.

73. Machera K., Miliadis G., Anagnostopolis E., Anastassiadou P. Determination of pentachlorophenol in environmental samples of the S. Eubolic Gulf, Greece // Bull. Environ. Contam. Toxicol. 1997, 59, pp. 909-916.

74. McNaught D.C., Beim A.M. Ecotoxicological assessment of treated effluents on phytoplankton and zooplankton of Lake Baikal // Siberian J. Ecol., 1997. -№2 P. 199-203.

75. Monochlorophenols Marine Risk Assessment with special reference to the OSPARCOM region North-Sea, EuroChlor, Brussels, 2003.

76. Nakamura S., Takino M., Daishima Sh. Trace level determination of phenols as pentafluorobenzyl derivatives by gas chromatography-negative-ion chemical ionization mass spectrometry // The Analyst, 2001, 126, pp. 835-839.

77. Stepanova L.I., Glaser V.M., Savinova T.I., Kotelevtsev S.V., Sawa D. Accumulation of mutagenic xenobiotics in fresh water (Lake Baikal) and marine (Hornoya Island) ecosystems // Ecotoxicology, 1999. №8 - P. 8396.

78. Takeuchi R., Suwa Y., Yonezawa Y. Anaerobic transformation of chlorophenols in methanogenic sludge unexposed to chlorophenols // Chemosphere 2000. -No.41. - p.1457-1462.

79. The Natural Chemistry of Chlorine in the Environment, World Chlorine Council; Brussels, 1999.

80. Wang S.J., Loh K.C. Modeling the role of metabolic intermediates in kinetics of phenol biodegradation // Enzyme and Microbial Technology, 1999 № 25 -p. 177-184.

81. Wang Si-Jing, Loh Kai-Chee. Biotransformation kinetics of Pseudomonas putida for cometabolism of phenol and 4-chlorophenol in the presence of sodium glutamate I I Biodegradation, 2001. №12 - P. 189-199.

82. Wang Si-Jing, Loh Kai-Chee. Facilitation of cometabolic degradation of 4-chlorophenol using glucose as an added growth substrate // Biodegradation, 1999. №10 - P. 261-269.

83. Ye Fen-xia, Shen Dong-sheng. Acclimation of anaerobic sludge degrading chlorophenols and the biodegradation kinetics during acclimation period // Chemoshere, 2004. №54 - P. 1573-1580.

84. Zaitsev G.M., Uotila J.S., Tsitko I.V., Lobanok A.G., Salkinoja-Salonen M.S. Utilization of halogenated benzenes, phenols and benzoates by Rhodococcus opacus GM-14 // Appl. Environ. Microbiol., 1995. Vol. 61, №12 - P. 41914201.