Комплексный препарат "Авилакт форте" на основе пробиотика для птицеводства: Разработка и доклинические исследования тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, кандидат биологических наук Калугин, Сергей Владимирович

• Калугин, Сергей Владимирович
• кандидат биологических наук
• 2005

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Калугин, Сергей Владимирович

1. ВВЕДЕНИЕ

1.1. Актуальность темы

1.2. Цель и задачи исследований

1.3. Научная новизна

1.4. Практическое значение работы

1.5. Основные положения, которые выносятся на защиту

2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

2.1. Факторы, индуцирующие изменение кишечной микрофлоры

2.2. Пробиотики

2.2.1. Определение и свойства пробиотиков

2.2.2. Критерии отбора штаммов пробиотиков

2.2.3. Механизмы действия пробиотиков

2.2.4. Технологические аспекты изготовления пробиотических препаратов

2.3. Пребиотики

2.4. Доклинические исследования новых лекарственных средств

3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

3.1. Материалы

3.2. Методы

4. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ

4.1. Изготовление опытных серий препаратов

4.2. Испытание безвредности препаратов

4.3. Определение специфической активности

4.4. Исследование эффективности препарата для бройлеров

4.5. Разработка способа применения препарата «Авилакт форте»

4.6. Исследование возможного механизма действия пребиотика «Авистим»

5. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЛЕДОВАНИЯ

6. ВЫВОДЫ 93 • 7. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Комплексный препарат "Авилакт форте" на основе пробиотика для птицеводства: Разработка и доклинические исследования»

1.1.Актуальность темы.

Одной из первых отраслей сельского хозяйства, перешедших на промышленную основу производства, является птицеводство. Доля препаратов для птиц составляет 95% мирового рынка лечебных препаратов для животных (более 7 млрд. долларов в стоимостном выражении). Как показывают научные исследования, постоянные стрессовые воздействия на поголовье, несбалансированное питание и нарушения санитарных норм содержания птицы вызывают значительные изменения в экологической нише штаммов микроорганизмов желудочно-кишечного тракта, изменения популяционного уровня кишечных бактерий. Стало очевидно, что интенсивные методы содержания птицы приводят к ослаблению здоровья, появлению новых заболеваний не выявленной этиологии, распространению кишечных инфекций, слабо поддающихся медикаментозному лечению (18,32).

В связи с этим все более актуальной становится проблема профилактики, лечения и нормализации микробного баланса в пищеварительном тракте, минимизации последствий антибиотикотерапии, повышения эффективности выращивания и сохранности птицы, улучшения качества конечного продукта. Один из способов ее решения — разработка и применение лекарственных средств нового поколения, которые характеризуются высокой биодоступностью и положительно влияют на микробиоценоз желудочно-кишечного тракта птицы, что приводит к оздоровлению всего организма в целом и снижению микробизма окружающей среды. К их числу относятся эубиотики - пробиотики и пребиотики (2,21,74,82).

В последние годы накоплен значительный материал, отражающий действие различных пре- и пробиотических препаратов на сельскохозяйственных животных, птицу, человека. Наиболее перспективным является создание симбиотиков - комплексов про- и пребиотиков, которые могут быть использованы для создания лечебно-профилактических препаратов, обладающих способностью положительно воздействовать на здоровье организма хозяина, повышать его естественную сопротивляемость, не оказывая; при этом какого-либо отрицательного влияния на организм (19,32,58,90). Многие из симбиотиков влияют на гуморальный и клеточный иммунитет, зоотехнические: показатели, могут служить естественными стимуляторами роста и обладать токсико- и радиопротективным действием, снижающим влияние неблагоприятных экологических факторов.

При разработке нового препарата необходимо учитывать перспективы его конкурентоспособности на рынке,. одним из основных составляющих которой является: качество. Под качеством лекарственного средства (JIC) понимается, прежде всего, его пригодность к применению, т.е. эффективность и безопасность (52).

В связи с принятием Закона РФ «О Техническом Регулировании», подготовкой России к вступлению в ВТО, установлению партнерских отношений с зарубежными фирмами и требованиями стандартов ИСО 9000: 2000 появились новые подходы к разработке, производству и применению JIC. Эти подходы реализованы в международных правилах лабораторной, клинической и производственной практики (Good Laboratory Practice - GLP, Good Clinical Practice - GCP, Good Manufacturing Practice - GMP), которые ужесточают контроль безопасности и эффективности ЛС на всех этапах его разработки, производства и применения(ЗО).

Правила GLP делают обязательными доклинические исследования эффективности и безопасности лекарственных средств. В целях гармонизации с международными правилами национальной нормативно-законодательной базы разработан проект Технического Регламента «О требованиях к безопасности JIC для животных, процессов разработки, испытания, производства, изготовления, хранения, перевозки, реализации, применения и: утилизации», содержащий в Приложении 6 требования к доклиническим испытаниям, по результатам которых формируется Досье на продукт. Таким образом,, реализация изложенных в;Техническом; Регламенте требований к разработке новых препаратов* является актуальной, перспективной* и представляет научный и практический интерес.

Заключение диссертации по теме «Биотехнология», Калугин, Сергей Владимирович

Результаты работы включены в «Положение о лаборатории доклинических испытаний потенциальных лекарственных средств и биологически активных добавок к кормам для животных», утвержденное Отделением Ветеринарной медицины РАСХН 28.12.01 г.

Модифицированная методика ХЕТ-КАМ теста включена в «Методические рекомендации по определению потенциальной токсичности биологически активных добавок к кормам», утвержденные директором ВНИТИБП 25.04.01 г.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Калугин, Сергей Владимирович, 2005 год

1. Авакян А.Д. Изменение картины белой крови при применении культуральной жидкости желтого гриба. Материалы первого Всероссийского конгресса по медицинской миологии «Успехи медицинской микологии».

2. Антипов В.А. Использование пробиотиков в животноводстве. //Ветеринария, 1991, №4, с. 55-58.

3. Антипов В.А., Ермакова Т.И. Новые отечественные пробиотики (Пропиацид и энтерацид). Тезисный доклад международной научно-практической конференции «Актуальные проблемы ветеринарно-санитарного контроля с.-х. продукции». М., 1995, с.71-72.

4. Антипов В.А., Кременпикова В.И. Фармако-токсикологические свойства ацидофилина. //Ветеринария, 1987, №6, с.57-59.

5. Ашмарин И.П., Воробьев А.А. Статистические методы в микробиологических исследованиях. Ленинград, 1962, с.127-130.

6. Бабкина М. П. Коррекция иммунного статуса и повышение продуктивности цыплят бройлеров пробиотиками. «Актуальн. пробл. интенсивн. развития животноводства». Горки, 1998, с.201-207.

7. Башкиров O.K. «Биоплюс 2Б» натуральный пробиотик с широким спектром профилакторной активности. //Зооиндустрия, 2002, №2, с.24-27.

8. Белова Н.В., Природа биологической активности высших грибов. Материалы первого Всероссийского конгресса по медицинской миологии «Успехи медицинской микологии». М., 2003, том. 1 с.230-233.

9. Брагинцева Л.М., «Грибы — источник биологически активных веществ» Материалы Всероссийского конгресса по медицинской микологии «Успехи медицинской микологии», М;, 2003, том 1,, с.242-244.

10. Бовкун Г.Ф. Имманов А.Н., Семенченко В.Ф., Рожкова И.В., Борсенкова А.Н. Профилактическое действие бификорма при желудочно-кишечных болезнях цыплят.//Ветеринария, 1998, №12, с.51-53;

11. Н.Болотина Е. Н. Продуценты токоферолов — микроорганизмы пищеварительного тракта птицы. Научн. конф. профес.-препод. состава ,сотрудн. и аспирантов/ Самарская; гос. с.- х. академия, Самара, 1997, 4.1, с.45-47.

12. Бузлама B.C. Экологические требования к ветеринарным фармакологическим препаратам. //Вестник РАСХН. Состояние, проблемы и перспективы развития ветеринарной науки России. 1999, с.83-85.

13. Василисин С. В., Капленко Н. Н., Новаков П. Б. и др. Регенерация отработанных питательных сред. Сборник материалов конференции «Пробиотические микроорганизмысовременное состояние вопроса и перспективы использования». М., 2002, с. 105-106.

14. Васильева С., Берзиня Н. Тест-система для оценки иммунного статуса цыплят при воздействии тяжелых металлов. Материалы 3 Украинской конференции по птицеводству с международным участием, Вып. 51, Борки, 2001, с.31.

15. Грязнева Т. Н. Технология производства пробиотика Биод-5 и его лечебно-профилактическая эффективность для разных видов животных. Автореферат диссертации на соискание доктора биологических наук. М. 2005, 32с.

16. Грязнева Т. Н., Ставцева Л .Я. Антагонистическая активность бифидо- и лактобактерий в отношении энтеробактерий. //Ветеринария, 1991, №6, с.21-22.

17. Данилевская Н. В., Субботин А. В., Методика фармаэкономического анализа результатов; применения ветеринарного препарата при? откорме бройлеров на примере пробиотика ЛАКТОБИФАДОЛ. //Ветеринария и кормление, №2, 2005, с.24-25.

18. Данилян Л.Т., Биологические свойства культуральной жидкости иг активного вещества чайного гриба. Материалы первого Всероссийского конгресса по медицинской миологии «Успехи медицинской микологии». М;, 2003, т. 1, с. 249-250.

19. Джавадов Э.Д. Иммунодефицита вирусной? этиологии» в промышленном; птицеводстве: состояние и перспективы. //Медицина, Ветеринария, Фармация; 1998, №2, с.3-6.

20. Джанова З.Ф. Сочетанное применение пробиотика бифидумбактерина и иммуномодулятора тималина для профилактики колибактериоза у цыплят. Автореферат дис. канд. вет. наук, г. Санкт-Петербург, 2001, 25с.

21. Егоров И;, Куренева В., Паньков П., Егорова Т. Пробиотики в кормлении цыплят-бройлеров. //Передовой; научно-производственный опыт в; птицеводстве. Экспресс-информ., 1995 №1-2, с.35-37.

22. Зуев Е. Т. Новые биотехнологии, методы контроля и менеджмент качества в производстве напитков. Автореферат диссерт. на соискание ученой степени доктора биологических наук. М., 2004, 58с.

23. Информационная брошюра. Биологически активная добавка к пище «Микро-вет», применение для восстановления нарушенных функций организма. М., 1998 , с.35-41.

24. Капустин А.В. Этиологическая структура эшерихиоза кур. Автореферат диссертации на соискание ученой степени кандидата ветеринарных наук. М., 2001, 24с.

25. Карпуть И.М., Бабина М.П. Микрофлора в местной защите и повышении продуктивности птиц. //Наука производству. Гродно, 1996, стр. 233-234.

26. Ковальская JI.A. и др. Препараты для птиц «Авилакт-1 К» и «Авинорм-3» биофармкомплексы на основе пробиотиков и биологически активных добавок. Тезисы докладов Всероссийской научно-практической конференции, 8-9.06.2000 г., Щелково-2000, с.346.

27. Комаров А. А. Способ получения, физико-химическая характеристика и иммунобиологическое действие аминокислотно-пептидного препарата для птиц. Автореферат на соискание ученой степени кандидата биологических наук. М., 1995, 26с.

28. Комоков Е.Е., Лысенко М.А., Столяр Т.А., Лукашенко B.C. Мясные качества бройлеров с повышенной живой массой. //Мясная индустрия, 1997, №10 с. 31-32.

29. Краткие сообщения о деятельности ВОЗ. Бюллетень ВОЗ. 1991, т.69, №2, с.31-33.

30. Кузнецова М.Н. и др. Влияние комплексного использования бифидумбактерина и опои на гематологические показатели у цыплят. Тезисы докладов Всероссийской конференции «Пробиотики и пробиотические продукты». М., 1999, с.63.

31. Малик Н.И., Панин А.Н. Ветеринарные пробиотические препараты.// Ветеринария, 2001, №1, с.24-26.

32. Между народная научно-практическая конференция памяти Г.И. Гончаровой. Сборник материалов конференции. М., 2002, 267с.

33. Методические рекомендации по контролю и сохранению естественной резистентности птиц в промышленном птицеводстве. MB А им. Скрябина, М., 1987, 31с.

34. Методические рекомендации по проведению анатомической разделки тушек и органолептической оценки качества мяса и яиц сельскохозяйственной птицы, и морфологии яиц. ВНИТИП, г. Сергиев Посад, 2001, 26с.

35. Мешковский А. П. Надлежащая лабораторная практика (GLP): сравнительный анализ международных и российских требований. //Фарматека, 2001, №7, с. 11-17.

36. Минжаков М. Стрептоцид в профилактике эхинококкоза. Тезисы докладов Всероссийской конференции «Пробиотики и пробиотические продукты», М., 1999, с.67.

37. Молохова Е. И. Биофармацевтические аспекты пробиотиков. Сборник материалов конференции «Пробиотические микроорганизмы современное состояние вопроса и перспективы использования». М., 2002, с.61-62.

38. Панин А. Н., Малик Н. И., Чупахина Н. А. Влияние пребиотической добавки на микробиоценоз кишечника цыплят. Сборник материалов конференции «Пробиотические микроорганизмы современное состояние вопроса и перспективы использования». М., 2002, с.31-34.

39. Панин А.Н. и др. Биотехнологические аспекты изготовления сухих пробиотических препаратов. Тезисы докладов Всероссийской научно-практической конференции, 8-9.06.2000, Щелково-2000, с.344.

40. Парций JI.E. Ненадлежащее качество продукции. Новая правовая литература. М., 2001, с.254.

41. Петренчук Э.П., Фукс П.П. Усовершенствование технологии получения сухих пробиотиков. Материалы науч. конф. «Общ. эпизоотология: иммунол., экология и методол. пробл.», Харьков, 1995, с.91-92.

42. Пивняк И.Г., Шайдулина Р.Г., Заболотский В.А. Каротинобактерин новый пробиотик для птицы. //Зоотехния, М., 1998, №3 , с.11-14.

43. Пировано Ф. Пробиотики: производственно-технологические аспекты. Тезисы докладов Всероссийской конференции «Пробиотики и пробиотические продукты», М., 1999, с. 38.

44. Подберезный В.В., Полянцев Н.И. Влияние эндобактерина на иммунный статус организма и паренхиматозные органы коров при мастите. //С.-х. биология. Сер. Биология животных, 1994, №6, с.26-30.

45. Положение о Совете по ветеринарным препаратам Департамента ветеринарии Российской Федерации. М., 1995.

46. Родин В.В. Изучение влияния комплексного пробиотического препарата на сохранность бройлеров. Сб. «Современные достижения биотехнологии», Ставрополь, 1995, с. 126-129.

47. Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ под редакцией В.Н. Фисенко, М., 2000, 380 с.

48. Сафонов Г.А. и др. Пробиотики как фактор, стабилизирующий здоровье животных,//Ветеринария, 1992, №7-8, с.3.

49. Сидоров М.А., Субботин В.В., Данилевская Н.В. Нормальная микрофлора животных и ее коррекция пробиотиками. //Ветеринария, 2000, №11, с.23-27.

50. Силкина В.А., Проворов E.JL, Солдатова В.В., Лаптев Г.Ю. Использование пробиотика «Целлобактерин» при кормлении кур-несушек. Материалы 3 Украинской конф. по птицеводству. Борки, 2001, выпуск 51, с.48-51.

51. Система стандартизации в здравоохранении Российской Федерации. Министерство здравоохранения РФ, нормативные документы. Москва, 2000. с.259.

52. Скворцова М.М., Горшина Е.С., Качепай Д.П. Биологически активные добавки на основе биомассы высшего гриба. Материалы первого Всероссийского конгресса по медицинской миологии «Успехи медицинской микологии». М., 2003, т.1, с.305-307.

53. Смоленский В.И. Средства и методы специфической профилактики болезней птиц вирусной этиологии. Диссертация в виде научного доклада на соискание ученой степени доктора биологических наук. М., 1999, 44 с.

54. Степаненко И.П. Влияние пробиотического препарата стрептобифида-форте на иммуногенез и формирование кишечного микробиоценоза цыплят. Автореферат на соискание ученой степени кандидата биологических наук. М., 2001, 24с.

55. Субботин В. В., Данилевская Н. В. Применение пробиотического препарата ЛАКТОБИФАДОЛ при промышленном откорме бройлеров. // Ветеринария и кормление, 2004, сигнальный номер, с. 11-13.

56. Субботин В.В., Сидоров М.А. Биотехнология пробиотиков ветеринарного назначения. //Аграрная наука ,1998, №3 , с.70-72.

57. Субботин В.В., Сидоров М.А. Профилактика желудочно-кишечных болезней новорожденных животных с симптомокомплексом диареи. //Ветеринария,2001, №4, с.30-33.

58. Субботин В.В. Биотехнология пробиотика лактобифидола, бифацидобактера и его лечебно-профилактический эффект. Автореферат диссертации на соискание ученой степени доктора биологических наук, М., 1999.

59. Тараканов Б. В., Николичева Т. А. Пробиотический потенциал Lactobacillus casei subsp. pseudoplantarum при выращивании телят. //Ветеринария, 2001, №3, с.23-27.

60. Терешина В.М., Меморская А.С., Феофилова E.JI., Немцев Д.В., Козлов В.М. Получение из мицелиальных грибов полисахаридных комплексов и определение степени их деацетилирования. //Микробиология, 1997, том 66, №1, с.84-86.

61. Тихонов И. В., Воронин Е. С., Грязнева Т. Н. и др. Концентрирование и высушивание биопрепаратов. Учебно-методическое пособие. Москва, МГАВМиБ, 2002, 50 с.

62. Тихонов И. В., Воронин Е. С., Ковалев С. В., Грязнева Т. Н. и др. Промышленное культивирование микроорганизмов. Учебно-методическое пособие по биотехнологии. Москва, МГАВМиБ, 2000, 60 с.

63. Топурия Л.Ю. Пробиотикотерапия сальмонеллезов сельскохозяйственной птицы. Актуальные вопросы ветеринарии. Оренбург, 1997, с.79-83.

64. Требования к доклиническому изучению обще-токсического действия новых фармакологических веществ. М., 1985, 19 с.

65. Факторы, способствующие распространению заболеваний. //Международное животноводство. 1998, №3.5/3.6, с. 21-24.

66. Фарматека, 1999, №3, с.38.

67. Хаитов P.M., Гущин И.С., Пинелин Б.В., Зебров А.И. Экспериментальное изучение иммунотропной активности фармакологических препаратов. //Ведомости Фармакологического комитета. 1999, №1, с. 31-32.

68. Шевелева С.А. Пробиотики, пребиотики и пробиотические продукты. Современное состояние вопроса. //Вопросы питания. 1999, №2, стр.32-39.

69. Adams M.R., Hall C.J. Growth inhibition of food-born patogens by lactic and acetic acids and their mixtures// Int. J. Food Scin. Technol. 1988. V. P. 287-292.

70. Affitives, antibiotics and probioties: Choices for the future. Poultry intern vol 35 №4 1996, P. 34-39

71. Barrow P.A. and со. The attashment of bacteria to the gastric epitelium of the pig and its importance in the microecology of the intestine//J. Appl. Bacteriol. 1980. V. 96.P. 161-169.

72. Barry R. Goldin. Healt benefits of probioties. British Jornal of Nutrition, 1998.80, Suppl. 2 S 203-207.

73. Bohnhoff M., Drake B.L. and Miller C.P. Effect of streptomycin on susceptibility of the intestinal tract to salmonella infection// Proc. Soc. Exp. Biol. Med. 1954. V.86. P. 132-137

74. Chatov L., Trenev N., Probiotics Publishing Group, North-amptonshive, England, 1990, P 141-142.

75. Colins E.V., Aramaki K. Production og hydrogen peroxide by Lactobacillus acidofillus//J. Daily Sci. 1980. V. 63. P. 353-357.

76. Condons S. Responses of lactic acid bacteria to oxygen // FEMS; Microbiol. Rev. 1987. V.46. p. 269-280.

77. Crary R.S., Taylor, Christine M. Williams. Effects of probiotics and prebioties on blood lipids British Jornal' of Nutrition (1998, S. 225230)

78. Firon N., Oftek Г., Sharon N. Carbogydrate-bindings of mannose-spesific fimbrial lectins of enterobacterial Infect. Immun. 1984. V. 43. p. 1088-1090

79. Freter R. The fatal enteric cholera infection in the guinea pig achived by inhibition of normal: enteric flora// J. Infectious Diseasis. 1955. V. 97. P. 57-65

80. Fuller R. and со. Microbial competition in the mouth and gastrointestinal tract. /Gould G.W., Rhodes-Roberts M.E. Charnley A.K. et al. Natur. Antimicrobial System. Bath University Press. Bath. 1986. P. 11-28.

81. Fuller R. Probioties// J. Appl. Bacteriol. Symposium Supplment. 1986/ IS-7S

82. Fuller R., Turvey A. Bacteria associated with the intestinal wall of the flow (Gallus domesticus)//J. Appl. Bacteriol. 1971. V.34. P. 617-621

83. Fuller W.B. Probiotics. Fact or ficsion// Large Animal Veterinarian. November-December , 1987. p.28-30.

84. Fuller. Probiotics in man and animals. A review // J.Appl. Bacteriol. 1989. V.66. N 5. P. 365-378.

85. Guillot S.-F. Role tes probiotiques utilises on alimentation animale. C.R. Acad. Agr. Fr., 1997, vol. 83, №p. 87-96.

86. Jay J.M. Antimicrobial properties of diacetil// Appl. Environ. Microbiol. 1982. V. 44. P. 525-532.

87. Kumprecht I., Zobac P. Continuons applications of probioties based on Saccharomyces cevevisae var.elipsoidens and Bacillus CIP 5832 in the nutritions of chicken broiler. Zivocina vyroba, 1996, vol.41, №7. P 48-51.

88. Lilly D.M., Stillwell R.H. Probioties: growth promoting factors produced by microorganisms // Science. 1965. V. 147. P. 747748.

89. Mary E. Sanders Development of consumer for the US market. British J. of nutrition 1998 . 80 №2. P 201-205.

90. Nagaraga K.V., Mulder R.V., Ruff M.D. XX World Poultry Congress. September, 1996.

91. Parker R.B. Probioties the other half of the antibiotics story // Anim. Nutrition and Health. 1974. V.29. P. 4-8.

92. Parova J., Kumprecht I., Robosova E. The effect of probioties based on Bacllus CIP 5832 on utility and economical pavameters in duck fattening. Zivocisna Vyroba. 199, R 39, p. 11.

93. Patterson J.A., Orban S.I., Sutton A.L., Richards G.N. Selektive enrichment of bifidobacteria in the intestinal tract of broilers by termally produced Kestoses and effect on broiler perfomance. Poultry Sc., 1997, vol. 76, №3, p. 497-500

94. Pedron O., Giardini A., DelP'orto V., Durand H. Perfomans di broilers in seguito alia somministrazione di Pediociccus acidi lactici, ceppo MA 18-5M, a due diversi livelli. Seler veter. 1997, №8/9, p. 843-853

95. Savage D.C. The ecological digestive system and its colonization.//Rev. Sci. Tech. Off. Int. Epiz. 1989. V. 8. P.259-273

96. Shoib H.K.,Sayed A.N.,Sofony S.A. Response of broiler chicks to probiotic (pronifer) supplementation. Assinf. vet. med. 7,v/36,№71 1996 p.104-114.

97. Sofos J.N., Fagerberg D.J.,Quarles C.L. Effects of sorbic acid feed fungistat on the intestinal microflora of floor-reared broiler chickens.Poultry Sc. 1985 T.64 ,№5. p. 43-52.

98. Takahahi K., Akiba Y., Matsuda A. Effect of a probiotika on immune responses in boiler chick unter different sanitary conditions or immune activations. Anim. Sc. Technikol. 1997. Vol.68 №6 p. 537-544.

99. Tannok G.V. Effect of dietary and environmental stress on the gastrointestinal microflora // Human Intestinal Microflora and Disease. London: Acad. Press, 1983. p. 517-539.