Модулирующее действие алиментарных факторов на метаболизм дезоксиниваленола (вомитоксина) у крыс тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, кандидат биологических наук Обольский, Олег Львович

• Обольский, Олег Львович
• кандидат биологических наук
• 2001

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Обольский, Олег Львович

ВВЕДЕНИЕ.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Дезоксиниваленол и другие трихотеценовые микотоксины

1.1.1. физико-химические свойства трихотеценовых микотоксинов.

1.1.2. Распространенность ДОН и других фузариотоксинов в природе.

1.1.3. Токсическое действие трихотеценовых микотоксинов.

1.2. Основные пути биотрансформации и детоксикации ксенобиотиков.

1.2.1. Общие сведения.

1.2.2. Основные пути биотрансформации и детоксикации трихотеценовых микотоксинов.

1.2.2.1. Биотрансформация дезоксиниваленола.

1.3. Влияние алиментарных факторов на метаболизм и токсичность ксенобиотиков.

1.3.1. Селен.

1.3.2. Пищевые волокна.

1.3.3. Пробиотики.

1.3.4. Биотрансформация и детоксикация чужеродных соединений при их комбинированном поступлении.

2. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.

2.1. Материалы и методы исследования.

2.1.1. Животные и их содержание.

2.1.1.1. Экспериментальные рационы.

2.1.1.2 Условия эксперимента по изучению метаболизма ДОН.

2.1.2. Реактивы и материалы, используемые в работе.

2.1.3. Физико-химические методы исследования.

2.1.3.1 Высокоэффективная жидкостная хроматография.

2.1.3.2. Масс- и хроматомасс-спектрометрия.

2.1.4. Метод определения ДОН и его метаболитов в моче крыс.

2.1.5. Статистическая обработка результатов.

2.2. Результаты исследования.

2.2.1. Модификация метода количественного определения ДОН и его метаболитов в моче и кале крыс.

2.2.1.1. Подбор системы для элюирования ДОН и ДОМс адсорбционной колонки.

2.2.1.2. Определение формы нанесения экстракта образца на колонку.

2.2.1.3. Определение сульфатных конъюгатов ДОН и ДОМ-1.

2.2.1.4. Модифицированный метод анализа ДОН и его метаболитов в экскретах крыс.

2.2.2. Изучение распределения экскретируемых метаболитов ДОН в моче и кале крыс Вистар.

2.2.3. Влияние индукторов ферментов метаболизма ксенобиотиков на метаболизм ДОН у крыс.

2.2.4. Влияние уровня селена в рационе на метаболизм ДОН у крыс.

2.2.4.1. Влияние обогащения рациона селеном на метаболизм ДОН у крыс.

2.2.4.2. Влияние дефицита селена в рационе на метаболизм ДОН у крыс.

2.2.5. Влияние обогащения рациона пектином на метаболизм ДОН у крыс.

2.2.6. Влияние пробиотиков на метаболизм ДОН у крыс.

2.2.7. Изучение комбинированного действия ДОН и зеараленона на метаболизм ДОН у крыс.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Модулирующее действие алиментарных факторов на метаболизм дезоксиниваленола (вомитоксина) у крыс»

Актуальность проблемы

К природным контаминантам продовольственного сырья и пищевых продуктов, представляющих реальную опасность для здоровья человека, относятся микотоксины, что связано с их высокой токсичностью, наличием у большинства из них иммуноде-прессивных свойств и у многих — мутагенных, канцерогенных или коканцерогенных свойств [Тутельян В.А., Кравченко Л.В., 1985; IARC, 1993; Miller J.D., 1998]. Микотоксины являются продуктами жизнедеятельности повсеместно распространенных микроскопических (плесневых) грибов, способных поражать продовольствие на всех этапах его производства, переработки и хранения. Полагают, что не менее 25% всех продовольственных ресурсов подвержены загрязнению микотоксинами или повреждающему действию плесневых грибов [Pohland А.Е., 1998].

Исследования, проведенные как за рубежом, так и в нашей стране, показали, что наиболее часто обнаруживаемыми микотоксинами являются микотоксины, продуцируемые грибами рода Fusarium — трихотеценовые микотоксины (ТТМТ), зеарале-нон и фумонизины [Саркисов А.Х., 1954; Scott P.M., 1990; Miller J.D., 1995 a; Bhat R., 1999]. В отличие от других микотоксинов, накопление которых в пищевых продуктах является, главным образом, результатом нарушений условий хранения или технологических условий производства продукта, фузариотоксины накапливаются в зерне в процессе его созревания, и интенсивность их синтеза в клетках мицелия зависит в значительной степени от климатических и погодных условий. Необходимо отметить, что проблема загрязнения продовольствия фузариотоксинами имеет выраженную тенденцию к нарастанию по степени риска для здоровья человека. Это определяется отсутствием устойчивости зерновых культур к поражению грибами рода Fusarium, отсутствием перспектив создания сортов, устойчивых к этим видам грибов и отсутствием в настоящее время достаточно эффективных в отношении грибов Fusarium фунгицидов [Львова Л.С. и др., 1992, 1994; Riley R.T., Norred W.R., 1999; Edwards S.G. et al., 2001].

Среди фузариотоксинов широкой распространенностью выделяются дезокси-ниваленол (вомитоксин) и зеараленон, а своими выраженными токсическими свойствами — Т-2 токсин [Тутельян В.А., Кравченко Л.В., 1985; IARC, 1993]. Дезоксинива-ленол (ДОН) в настоящее время, несомненно, является наиболее часто обнаруживаемым в мире микотоксином. ДОН выявляют в качестве контаминанта зерновых культур и, в первую очередь, пшеницы в большинстве регионов мира. Частота обнаружения ДОН в пшенице в разные годы в Канаде, США, в большинстве стран Европы и ряде стран Азии, Африки и Южной Америки достигает 50 100% [Ueno Y., Tanaka Т., 1987; Scott P.M., 1989, 1990, 1997; TutelyanV.A. et al., 1990]. Результаты наших предыдущих исследований [Соболев B.C. и др., 1990; Захарова Л.П. и др., 1994, 1995; Кравченко JI.B. и др., 1998; Tutelyan V.A., 1998] показали, что в период 1986-1999 гг. в некоторых регионах России, относящихся к основным производителям зерна, ежегодная частота контаминации ДОН заготавливаемого зерна пшеницы варьирует от 60 до 100%. Имеются сообщения о высокой частоте (до 41-50 случаев) обнаружения Т-2 токсина в отдельные годы в зерне пшеницы, ячменя и овса в европейских странах — Польше, Германии, Финляндии [Hietaniemi V., Kumpulainen J., 1991; Muller H.M., Schwadore К., 1993; Muller H.M. et al., 1998; Grabarkiewicz-Szczesna J. et al., 2001].

Результаты эпидемиологических наблюдений свидетельствуют, что алиментарные микотоксикозы и, в первую очередь, фузариотоксикозы как у людей, так и у сельскохозяйственных животных, являются обычно следствием поступления с пищей (кормом) нескольких микотоксинов, среди которых один или два являются доминирующими. Так, в описанных в последние годы случаях массовых отравлений в Индии [BhatR.V. et al., 1989] в пшеничной муке были обнаружены наряду с ДОН еще три трихотеценовых микотоксина — Т-2 токсин, ниваленол и ацетил-ДОН. В Китае, в 35 случаях массовых отравлений, связанных с контаминацией зерна пшеницы и кукурузы микотоксинами, в качестве загрязнителей были обнаружены ДОН и зеараленон [Luo X.Y., 1988]. Практически во всех странах Европы, в Северной и Южной Америке, в ряде стран Азии неоднократно выявляли ДОН вместе с зеараленоном в пшенице, ячмене, овсе [Hietaniemi V., Kumpulainen J., 1991; YoshizawaT., Jin Y.Z., 1995; Muller H.M. et al., 1998]. Результаты исследований, проведенных в НИИ питания РАМН, показали возможность накопления двух фузариотоксинов — ДОН и зеарале-нона — в зерне из ареала фузариоза (Краснодарский край) [Львова Л.С. и др., 1994; Кравченко Л.В. и др., 1998].

В связи с тем, что практически невозможно полностью предотвратить заражение сельскохозяйственной продукции микроскопическими грибами и загрязнение их микотоксинами, основной мерой защиты организма от неблагоприятного воздействия этих токсинов является гигиеническое регламентирование их содержания в продовольственном сырье и пищевых продуктах. Как показали результаты наших предыдущих исследований, даже при наличии в достаточной степени налаженной системы контроля за безопасностью продовольственного зерна и пищевых продуктов, сохраняется вероятность постоянного поступления с пищей микотоксинов (главным образом ДОН) в количествах, которые в настоящее время нельзя считать абсолютно безопасными для здоровья человека [Захарова JI.П., 1994, 1995; Кравченко JI.B. и др., 1998]. В связи с этим, наряду с мероприятиями, направленными на предотвращение попадания микотоксинов в организм, важное значение приобретает изыскание путей снижения токсичности поступивших в организм токсинов. К числу наиболее перспективных направлений относится использование пищи и ее компонентов как мощного фактора регуляции процессов токсикокинетики чужеродных соединений, включая этапы всасывания, печеночно-кишечной циркуляции, биотрансформации и детоксикации [Ту-тельян В.А. и др., 1987; Galvano F. et al., 2001]. Особое внимание привлекают биологически активные компоненты пищи, которые находят широкое применение не только для коррекции структуры питания населения, но и в профилактических целях, для повышения резистентности организма к воздействию неблагоприятных факторов окружающей среды. Большинство ферментов, занимающих ключевое место в процессах биотрансформации и детоксикации ксенобиотиков и в том числе ТТМТ, являются компонентами мембран, и их активность определяется в значительной степени функциональным состоянием мембран. Кроме того, в единичных исследованиях in vitro показана возможность восстановления эпоксидного кольца трихотеценовых микотоксинов ферментами микрофлоры желудочно-кишечного тракта. В связи с этим особый интерес представляют компоненты пищи, способные оказывать стабилизирующее влияние на мембраны (антиоксиданты) и улучшающие микробиологический баланс кишечника (пробиотики, пищевые волокна).

Цель работы состояла в изучении влияния на основные пути биотрансформации и детоксикации ДОН у крыс алиментарных факторов — биологически активных компонентов пищи.

Были поставлены следующие задачи:

- изучить распределение свободных и конъюгированных форм экскретируемых метаболитов ДОН;

- изучить роль микросомальных UDP-глюкуронозилтрансфераз в детоксикации ДОН;

- изучить влияние различных уровней селена в рационе на метаболизм ДОН;

- изучить влияние обогащения рациона пектином на метаболизм ДОН;

- изучить влияние пробиотиков на метаболизм ДОН;

- изучить метаболизм ДОН при одновременном поступлении с кормом двух фуза-риотоксинов — ДОН и зеараленона.

Научная новизна

- Получены новые данные, подтверждающие, что основными путями детоксикации ДОН у крыс является образование его деэпоксида — ДОМ-1 и конъюгатов ДОН и ДОМ-1.

- Впервые показана возможность образования у крыс наряду с глюкуроновыми конъюгатами сульфоконъюгатов ДОН и ДОМ-1.

- Впервые получены данные об участии в образовании глюкуроновых конъюгатов ДОН и ДОМ-1 изоформ UDP-глюкуронозилтрансферазы, относящихся к семействам 1А и 2В.

- Показано, что как дефицит селена в рационе, так и обогащение рациона селеном приводит к усилению образования и выведения глюкуроновых конъюгатов ДОН, которое сопровождается возрастанием активности микросомальной UDP-глюкуронозилтрансферазы в печени крыс.

- Показано, что обогащение рациона крыс пектином усиливает не только экскрецию ДОН, но и образование и выведение его глюкуроновых конъюгатов, что коррелирует с возрастанием в печени крыс активности UDP-глюкуронозилтрансферазы.

- Впервые показано, что in vivo пробиотики могут влиять на токсикокинетику ксенобиотиков.

- Установлено, что длительное поступление с кормом двух фузариотоксинов — ДОН и зеараленона — в дозах, близких к недействующим для крыс, не оказывает какого-л ибо влияния на метаболизм ДОН.

Практическая значимость

Данные об отсутствии изменения метаболизма ДОН у крыс при длительном поступлении с кормом двух фузариотоксинов — зеараленона и ДОН — в дозах, близких к недействующим для крыс, свидетельствуют, что одновременное присутствие в пище двух фузариотоксинов в пределах установленных регламентов не представляет дополнительную опасность для здоровья человека и не требует изменения гигиенических регламентов.

Получены новые данные по научному обоснованию использования биологически активных добавок к пище (БАД), содержащих микронутриенты, пробиотики и пищевые волокна, для повышения неспецифической резистентности организма к воздействию неблагоприятных факторов окружающей среды, в частности таких приоритетных загрязнителей пищевых продуктов как микотоксины.

Апробация работы

Основные результаты диссертационной работы были представлены на Первом международном научном конгрессе «Традиционная медицина и питание: Теоретические и практические аспекты» (Москва, 1994), 1-м съезде токсикологов России (Москва, 1998), Международной конференции «Региональные проблемы профилактической медицины» (Великий Новгород, 1999).

Публикации

По результатам выполненных исследований опубликовано 6 печатных работ в научных журналах и сборниках научных трудов.

Объем и структура диссертации

Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, двух глав экспериментальной части, выводов и списка литературы. Работа изложена на 122 страницах машинописного текста, содержит 31 таблицу и 14 рисунков. Список литературы включает 294 источника, из которых 239 — иностранных авторов.

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Обольский, Олег Львович

4. ВЫВОДЫ

1. Получены новые экспериментальные данные, подтверждающие, что основными путями детоксикации дезоксиниваленола у крыс является образование его де-эпоксида — ДОМ-1 и конъюгатов дезоксиниваленола и ДОМ-1. Впервые показана возможность образования у крыс наряду с глюкуроновыми конъюгатами сульфо-конъюгатов дезоксиниваленола и ДОМ-1.

2. Впервые получены доказательства участия в образовании глюкуроновых конъюгатов дезоксиниваленола и ДОМ-1 изоформ UDP-глюкуронозилтрансферазы, относящихся к семействам 1А и 2В.

3. Установлено, что как избыток, так и дефицит селена в рационе крыс приводит к значительному усилению образования и выведения глюкуроновых конъюгатов ДОН и ДОМ-1 и сопровождается возрастанием активности микросомальных UDP-глюкуронозилтрансфераз.

4. Обогащение рациона крыс пищевыми волокнами (пектином) оказывает существенное влияние на различные этапы токсикокинетики дезоксиниваленола, что проявляется как в повышении скорости экскреции свободных форм дезоксиниваленола и ДОМ-1, так и в усилении образования и выведения глюкуроновых конъюгатов дезоксиниваленола.

5. Впервые показана способность пробиотиков (Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus и Streptococcus thermophilus в количестве 5 x 10 клеток) in vivo влиять на токсикокинетику ксенобиотиков: введение per os культур молочнокислых бактерий достоверно усиливало выведение у крыс неизмененного дезоксиниваленола как с калом, так и с мочой.

6. Длительное совместное поступление с кормом двух фузариотоксинов — зеараленона и дезоксиниваленола — в дозах, близких к недействующим для крыс, не оказывает существенного влияния на метаболизм дезоксиниваленола, что подтверждает отсутствие необходимости изменения установленных регламентов содержания дезоксиниваленола и зеараленона в пищевых продуктах при их совместном обнаружении.

7. Полученные данные являются дополнительным научным обоснованием целесообразности использования биологически активных добавок к пище (БАД), содержащих микронутриенты, пробиотики и пищевые волокна, для повышения неспецифической резистентности организма к воздействию неблагоприятных факторов окружающей среды, в частности таких приоритетных загрязнителей пищевых продуктов как микотоксины. 1

2, 3 4

5, 6

7, 8 9

10

11

12

13

14

15

16

17,

18

19

3. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Поиск путей снижения неблагоприятного воздействия на организм загрязнителей окружающей среды является особо актуальным для таких природных контаминан-тов продовольственного сырья как микотоксины.

Микотоксины — вторичные метаболиты микроскопических (плесневых) грибов — являются одними из приоритетных загрязнителей продовольственного сырья и пищевых продуктов [Тутельян В. А., Кравченко Л.В., 1985; IARC, 1993; Miller J.D., 1998]. В виду повсеместной распространенности грибов-продуцентов и высокой частоты контаминации микотоксинами продовольственного сырья основной мерой по защите организма от неблагоприятного действия микотоксинов является гигиеническое регламентирование их содержания в продовольственном сырье и пищевых продуктах. Однако такая мера не может полностью предотвратить попадание в организм малых количеств микотоксинов, которые нельзя считать абсолютно безопасными для здоровья [Захарова Л.П., 1994, 1995; Кравченко Л.В. и др., 1998, 2000]. В связи с этим, наряду с мероприятиями, направленными на предотвращение попадания микотоксинов в организм, важное значение приобретает изыскание путей снижения токсичности поступивших в организм токсинов. К числу наиболее перспективных направлений относится использование пищи и ее компонентов как мощного фактора регуляции процессов токсикокинетики чужеродных соединений, включая этапы всасывания, пече-ночно-кишечной рециркуляции, биотрансформации и детоксикации [Тутельян В.А. и др., 1987; Galvano F. et al., 2001]. Особое внимание привлекают биологически активные компоненты пищи, такие как витамины, микроэлементы, пищевые волокна и пробиотики, которые находят широкое применение не только для коррекции структуры питания населения, но и в профилактических целях для повышения резистентности организма к воздействию неблагоприятных факторов окружающей среды.

Настоящее исследование посвящено изучению влияния некоторых биологически активных компонентов пищи на метаболизм у крыс одного из наиболее распространенных в мире и обладающего достаточно высокой токсичностью трихотеценово-го микотоксина — дезоксиниваленола (ДОН, вомитоксина). ДОН продуцируется некоторыми видами микроскопических грибов Fusarium и является основным загрязнителем зерновых культур, главным образом пшеницы, во многих странах мира, в том числе и в России [Ueno Y., TanakaT., 1987; Scott P.M., 1989, 1990, 1997; Tutelyan V.A. et al., 1990, 1998].

Для ДОН в настоящее время известно 2 пути детоксикации в организме: де-эпоксидирование и образование конъюгированных форм как исходного токсина, так и его деэпоксида (ДОМ-1). Выдвигаются предположения, что реакция деэпоксидирова-ния протекает под действием ферментных систем микрофлоры желудочно-кишечного тракта [King R.R., et al., 1984; Hedman R., Pettersson H., 1997]. Необходимо иметь в виду, что эпоксигруппа является основным фактором токсичности трихотеценовых микотоксинов, и ее разрушение приводит к практически полной утрате токсических свойств [Grove M.D. et al., 1984; Swanson S.P. et al., 1988]. Глюкуроновая конъюгация катализируется ферментом UDP-глюкуронозилтрансферазой, представляющим собой группу изоформ, локализованным главным образом в печени [Radominska-Pandya A. et al., 1999; Strassburg С.Р. etal., 1999].

Важным аспектом в изучении количества и соотношения метаболитов ДОН у крыс является эффективность методов определения ДОН и его метаболитов в моче и кале. В настоящем исследовании мы использовали метод, разработанный в Институте питания РАМН [Тутельян В.А. и др., 1991], однако с целью увеличения степени извлечения анализируемых соединений представилось необходимым провести модификацию метода. В результате внесенных изменений в некоторые стадии очистки образцов общий выход метаболитов ДОН повысился на 20%. Исходный метод предполагал определение только глюкуроновых конъюгатов ДОН как преобладающего вида образующихся в организме конъюгатов. Однако конъюгация ДОН с другим субстратом в организме также может происходить в существенной степени, в частности сульфатная конъюгация. Мы сделали попытку изучить возможность образования наряду с глюку-роновыми конъюгатами сульфоконьюгатов. Полученные результаты показывают, что около 2% всех метаболитов ДОН выводятся из организма в виде сульфоконъюгатов.

Проведенный эксперимент по изучению распределения экскретируемых метаболитов ДОН у крыс Вистар показал, что ДОН выводится как в неизмененном виде, так и в виде деэпоксида — ДОМ-1; кроме того, в кале и моче крыс определяли конъю-гированные формы ДОН и ДОМ-1, причем с мочой преимущественно выделялся ДОН, а с калом — ДОМ-1. Было обнаружено, что более половины всех экскретируемых метаболитов ДОН составляют конъюгаты. Таким образом, проведенные исследования подтверждают данные, что основными путями детоксикации ДОН у крыс является образование его конъюгатов и деэпоксида.

С целью более детального выяснения роли UDP-глюкуронозилтрансферазы в образовании глюкуроновых конъюгатов ДОН и ДОМ-1 было изучено влияние не которых индукторов ферментов метаболизма ксенобиотиков — фенобарбитала, 3-метилхолантрена и транс-стильбеноксида — на метаболизм ДОН. Проведенные исследования подтвердили, что образование глюкуроновых конъюгатов является одним из главных путей детоксикации ДОН в организме. Установлена прямая зависимость между усилением образования и выведения глюкуроновых конъюгатов ДОН и возрастанием активности микросомальной UDP-глюкуронозилтрансферазы. Впервые получены данные об участии в образовании глюкуроновых конъюгатов ДОН и ДОМ-1 изоформ UDP-глюкуронозилтрансферазы, относящихся к семействам 1А и 2В.

Одной из главных задач настоящей работы явилось изучение влияния биологически активных компонентов пищи на оба известных пути метаболизма ДОН: образование конъюгатов и деэпоксидирование. В качестве изучаемых алиментарных факторов были выбраны селен, пектин, а также пробиотики (молочнокислые бактерии).

Выбор селена был обусловлен его доказанным протекторным действием против повреждающего влияния на организм ряда токсических агентов — загрязнителей окружающей среды [Гореликова Г. А. и др., 1997], в том числе трихотеценовых микотоксинов [Борисов В. А., 1988 а, 1988 б; Rizzo A.F. et al., 1994; Yazdanpanah H. et al., 1997; Atroshi F. et al., 2000], а также его способностью влиять на активность ферментов метаболизма ксенобиотиков, в том числе UDP-глюкуронозилтрансферазы [Reiter R., Wendel А., 1983; Кравченко Л.В. и др., 1990; 1991; 1р С., LiskD.J., 1997]. Наши предположения основывались на том, что селен, благодаря способности модулировать активность UDP-глюкуронозилтрансферазы, может влиять на метаболизм ДОН, в первую очередь на образование его конъюгированных метаболитов.

Было проведено изучение влияния на метаболизм ДОН как обогащения рациона крыс селеном, так и дефицита его в рационе. В обоих случаях наблюдали одинаковый эффект: возрастание суммарного количества экскретируемых метаболитов ДОН за счет усиления образования и выведения с мочой конъюгированных форм ДОН и ДОМ-1, что коррелировало со значительным возрастанием активности UDP-глюкуро-нозилтрансферазы в печени крыс.

Принимая во внимание предположение, что за реакцию деэпоксидирования ДОН в организме ответственны ферментные системы микрофлоры желудочно-кишечного тракта, мы предположили, что введение в рацион биологически активных веществ, способных влиять на состав и тем самым на функциональную активность микрофлоры кишечника, может повлиять на деэпоксидирование ДОН. Одним из таких алиментарных факторов являются пищевые волокна, в частности пектин. Результаты эксперимента по изучению влияния обогащения рациона крыс пектином на метаболизм ДОН показал, что против наших ожиданий пектин не оказывал существенного влияния на образование и выведение ДОМ-1 у крыс. В то же время наблюдался достоверный почти двукратный рост выведения нативного ДОН как с мочой, так и с калом, главным образом за счет образования и экскреции конъюгированных форм. Увеличение количества выводимых конъюгатов коррелировало с возрастанием активности микросомальных UDP-глюкуронозилтрансфераз в печени крыс. Пектин, таким образом, выступал как модулятор пути детоксикации ДОН, связанный с образованием его конъюгатов. Кроме того, усиление выведения свободной формы ДОН может указывать на адсорбционные свойства пектина.

Другим фактором, влияющим на состав кишечной микрофлоры и активность микробных ферментов являются пробиотики. В настоящем исследовании введение молочнокислых бактерий крысам per os не оказывало существенного влияния на образование и выведение ДОМ-1, но усиливали выведение, главным образом, свободной формы неизмененного токсина, как с мочой, так и с калом. Обнаруженное усиление экскреции свободного ДОН позволяет предположить, что молочнокислые бактерии могут проявлять свойства адсорбента и влиять тем самым на токсикокинетику ДОН.

Одной из актуальных задач современной концепции безопасного питания является изучение комбинированного влияния различных контаминантов продуктов питания при их совместном поступлении в организм. В виду того, что грибы-продуценты микотоксинов способны одновременно продуцировать несколько токсичных метаболитов, для прояснения вопроса о возможном синергическом токсическом эффекте этих соединений было проведено исследование комбинированного действия зеараленона и ДОН на метаболизм ДОН в дозах, близких к недействующим для крыс и лежащих в основе установленных ПДК для ДОН и зеараленона. Не было обнаружено существенного влияния на метаболизм ДОН введения в рацион крыс как ДОН, так и ДОН совместно с зеараленоном. Таким образом, полученные результаты подтверждают, что одновременное присутствие в пище двух фузариотоксинов в пределах установленных регламентов не представляет дополнительную опасность для здоровья человека и не требует изменения гигиенических регламентов.

Таким образом, обсуждая результаты проведенных исследований, необходимо еще раз подчеркнуть, что с позиций современной науки о питании роль пищи не ограничивается обеспечением организма нутриентами и энергией в соответствии с физиологическими потребностями. Несомненно, пищу следует рассматривать и как важнейший фактор, регулирующий и модулирующий различные функции организма и, тем самым, участвующий в обеспечении оптимального состояния здоровья и снижения риска многих заболеваний. Такой подход стимулирует интенсивное изучение физиологических эффектов и влияния на здоровье различных, в том числе и минорных биологически активных компонентов пищи, к которым относятся и изученные в настоящей работе селен, пищевые волокна, пробиотики. Позитивное влияние этих соединений на здоровье обусловлено в первую очередь возрастанием защитно-адаптационного потенциала организма.

Несмотря на то, что многие биологически активные соединения находят в настоящее время широкое применение в составе биологически активных добавок к пище или в качестве ингредиентов функциональной пищи, научное обоснование и доказательства их применения в большинстве случаев остаются недостаточными.

В связи с этим результаты настоящей работы, раскрывающие некоторые из механизмов влияния изученных алиментарных факторов на процессы детоксикации ксенобиотиков (на примере микотоксина дезоксиниваленола), представляют определенный вклад в научное обоснование их использования для повышения резистентности организма к неблагоприятному воздействию факторов окружающей среды.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Обольский, Олег Львович, 2001 год

1. Арчаков А.И. Микросомальное окисление. М.: Наука, 1975 - 327 с.

2. Билай В.И., Пидопличко Н.М. Токсинообразующие микроскопические грибы. К.: Наук, думка, 1970. 287 с.

3. Билай В.И. Фузарии. К.: Наук, думка, 1977. 442 с.

4. Билай В.И., Тутельян В. А., Эланская И. А., Эллер К.И., Соболев B.C. Компонентный состав трихотеценов, продуцируемых Fusarium sporotrichiella Bilai // Микробиол. ж. 1983. - Т.45. - № 5 - С.45^19.

5. Борисов В. А. Влияние селена на течение фузарио- и Т-2 токсикоза у свиней / Факторы повышения продуктивности сельскохозяйственных животных. Сб. науч. тр. Омск, 1988 а. С.60 67.

6. Борисов В. А. Формирование противосальмонеллезного иммунитета у больных фузарио- и Т-2 токсикозом свиней и возможность его повышения при помощи селена / Профилактика инфекционных болезней сельскохозяйственных животных. Сб. науч. тр. Омск, 1988 б.

7. Гигиенические критерии состояния окружающей среды. Вып. 6. Принципы и методы оценки токсичности химических веществ. ВОЗ, Женева, 1981. - 312 с.

8. Гигиенические критерии состояния окружающей среды. Вып. 58. Селен. ВОЗ, Женева, 1989. 270 с.

9. Гмошинский И.В., Мазо В.К., Тутельян В.А., Хотимченко С.А. Микроэлемент селен: роль в процессах жизнедеятельности. Экология моря. 2000. Вып. 54. С.5-19.

10. Голиков С.Н., Саноцкий И.В., Тиунов J1.A. Общие механизмы токсического действия. — JI.: Медицина, 1986 280 с.

11. Головенко Н.Я., Карасева Т.Д. Сравнительная биохимия чужеродных соединений. К.: Наук, думка, 1983. - 200 с.

12. Голубев В.Н., Шелухина Н.П. Пектин: химия, технология, применение. -М.: Изд. АТН РФ. 1995. 388 с.

13. Гореликова Г.А., Маюрникова J1.A., Позняковский В.М. Нутрицевтик селен: недостаточность в питании, меры профилактики // Вопр. питания. 1997. - № 5. -С. 18-21.

14. Дудкин М.С., Щелкунов Л.Ф. Пищевые волокна и новые продукты питания // Вопр. питания. 1998 а. № 5. С.35^11.

15. Дудкин М.С., Щелкунов Л.Ф. Пищевые волокна — новый раздел химии и технологии пищи // Вопр. питания. 1998 б. - № 3. - С.36-38.

16. Дудкин М.С., Щелкунов Л.Ф. Новые продукты питания. М.: МАИК Наука, 1998 в.-304с.

17. Захарова Л.П., Обольский О.Л., Львова Л.С., Кравченко Л.В. Проблема контаминации зерновых культур дезоксиниваленолом в России // Вопр. питания. -1994. -№ 3. -С.40^14.

18. Захарова Л.П., Обольский О.Л., Львова Л.С., Быстрякова З.К., Кравченко Л.В., Тутельян В. А. Фузариотоксины в зерновых культурах в России. Ситуация в 1993 и 1994 годах // Вопр. питания. 1995. № 2. - С.26-29.

19. Збаровская И.А., Банникова М.В. Антиоксидантная система организма, ее значение в метаболизме. Клинические аспекты // Вести. РАМН. 1995. -№ 6. - С.53-60.

20. Златкина А.Р. Лечение хронических болезней органов пищеварения. М.: Медицина, 1994. 336 с.

21. Коршунова В.М., Киссина Е.В., Иконникова Т.Е. Влияние препаратов из лактобацилл и бифидобактерий на микрофлору кишечника мышей, облученных гамма-квантами // Ж. микробиол. 1980. - № 6. - С.47-54.

22. Кравченко Л.В., Кузьмина Е.Э., Авреньева Л.И., Тутельян В. А. Защитное действие селена при остром Т-2 микотоксикозе // Вопр. мед. химии. 1990. - № 5. - С.36-38.

23. Кравченко Л.В., Кузьмина Е.Э., Авреньева Л.И., Поздняков АЛ. Влияние селена на ферменты метаболизма ксенобиотиков печени крыс //Вопр. питания. 1991. № 5. С.73-75.

24. Кравченко Л.В., Авреньева Л.И., Обольский О.Л. Пищевые волокна и токсикология ксенобиотиков / Материалы Первого международного научного конгресса «Традиционная медицина и питание: теоретические и практические аспекты». М., 1994. - С.467.

25. Кравченко Л.В., Захарова Л.П., Обольский О.Л. Фузариотоксины в зерне: результаты мониторинга // Гигиена и санитария. 1998. - № 1. — С.3-5.

26. Кравченко Л.В., Авреньева Л.И., Тутельян В. А. Оценка комбинированного действия микотоксинов дезоксиниваленола (вомитоксина) и Т-2 токсина на крыс // Токсикологический вестник. 2000. - № 1. — С.2-8.

27. Кулакова С.Н., Карагодина З.В., Левачев М.М., Волгарев М.Н. Влияние обогащения рациона крыс селеном на эффективность метаболизма эссенциальной линолевой кислоты // Бюлл. эксп. биол. мед. 1994. - № 10. - С. 136-138.

28. Лакин К.М., Крылов Ю.Ф. Биотрансформация лекарственных веществ. М.: Медицина, 1981. 344 с.

29. Левитин М.М. Микотоксины // Защита растений. 1994. - № 2. - С. 12-13.

30. Львова Л.С. Влияние технологических приемов переработки пищевых продуктов на содержание в них микотоксинов / Оценка загрязнения пищевых продуктов микотоксинами. Т. 2. -М., 1985. С. 186 206.

31. Львова Л.С., Быстрякова З.К., Ремеле В.В., Орлова Н.Ю., Шатилова Т.И., Шульгина А.П. Распространение микотоксинов и токсигенных грибов в зерне разных культур / Защита от вредителей и санитарная охрана зернопродуктов. М., 1992.-С.74-87.

32. Мальцев В.Н., Коршунова В.М., Стрельников В.А. Бактериотерапия острой лучевой болезни // Радиобиология. 1978. - № 5. - С.757-760.

33. Мухина Ю.Г. Диагностика и коррекция дисбактериоза у детей // Русский медицинский журнал. 1999. - Т. 7. - № 11. - С. 487-494.36.