Оценка спектра мутаций гена ATP7B и клинического полиморфизма болезни Вильсона-Коновалова тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.02.07, кандидат наук Балашова, Мария Сергеевна

• Балашова, Мария Сергеевна
• кандидат наук
• 2018

Оглавление диссертации кандидат наук Балашова, Мария Сергеевна

ВВЕДЕНИЕ............................................................................................................................................................4

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ....................................................................................................12

1.1. Исторические аспекты изучения БВК............................................................15

1.2. Классификация БВК..........................................................................................................16

1.3. Распространенность БВК..............................................................................................16

1.4. Этиология и патогенез БВК......................................................................................18

1.4.1. Этиология БВК........................................................................................................18

1.4.2. Патогенез БВК..........................................................................................................24

1.4.3. Факторы, модифицирующие течение БВК....................................33

1.5. Клиническая характеристика БВК..........................................................................35

1.5.1. Поражение печени................................................................................................35

1.5.2. Поражение нервной системы......................................................................37

1.5.3. Поражение других систем и органов при БВК..........................38

1.5.4. Течение, прогноз и лечение БВК............................................................39

1.6. Диагностика БВК....................................................................................................................41

1.6.1. Биохимические и инструментальные методы диагностики..............................................................................................................................41

1.6.2. Молекулярно-генетические методы диагностики..................46

1.6.2.1. Генотип-фенотип корреляция..............................................................49

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ........................................................................................52

2.1. Материалы исследования..................................................................................................52

2.2. Методы исследования..........................................................................................................53

2.2.1 Методы статистической оценки................................................................58

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ....................................................................59

3.1. Общая характеристика больных основной группы................................59

3.2. Общая характеристика контрольной группы................................................61

3.3. Спектр и частота мутаций в гене АТР7В у пациентов с БВК и

их родственников..............................................................................................................................61

3.4. Оценка гетерозиготного носительства мутаций в гене АТР7В в группе контроля..................................................................................................................................70

3.5. Частота непатогенных вариантов в гене АТР7В у пациентов с БВК и их родственников и в группе контроля........................................................70

3.6. Клиническая характеристика основной группы....................................72

3.7. Трудности установления диагноза БВК в основной группе пациентов..................................................................................................................................................76

3.8. Оценка течения БВК на медьэлиминирующей терапии..................80

3.9. Наблюдения коморбидности....................................................................................81

3.10. Оценка связи эффекта мутаций и тяжести течения БВК................89

ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ......................................................................................................................96

ЗАКЛЮЧЕНИЕ..................................................................................................................................................104

ПЕРСПЕКТИВЫ ДАЛЬНЕЙШЕЙ РАЗРАБОТКИ

ТЕМЫ ИССЛЕДОВАНИЯ......................................................................................................................105

ВЫВОДЫ................................................................................................................................................................106

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ........................................................................................108

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ СОКРАЩЕНИЙ..........................................................109

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ..........................................................................................................................111

ПРИЛОЖЕНИЕ 1............................................................................................................................................134

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы исследования

Болезнь Вильсона-Коновалова (БВК, гепатоцеребральная дегенерация) - это наследственное прогрессирующее заболевание обмена веществ, возникающее вследствие мутаций гена АТР7В. При БВК происходит накопление меди в головном мозге, печени, глазах и других органах. В настоящее время известно около 7000 наследственных заболеваний, и для большинства из них имеется лишь симптоматическое лечение. БВК же принадлежит к тем немногим генетическим патологиям, для которых разработана эффективная патогенетическая терапия. Внедрение медьэлиминирующей терапии Д-пеницилламином в клиническую практику в 50-х гг. XX века позволило существенно увеличить продолжительность и качество жизни пациентов с гепатоцеребральной дегенерацией.

Постановлением Правительства Российской Федерации от 26 апреля 2012 г. № 403 «О порядке ведения Федерального регистра лиц, страдающих жизнеугрожающими и хроническими прогрессирующими редкими (орфанными) заболеваниями, приводящими к сокращению продолжительности жизни граждан или их инвалидности, и его регионального сегмента» БВК включена в перечень орфанных заболеваний (код Е83.0).

БВК встречается повсеместно, ее распространенность в среднем оценивается в 1 на 30 тысяч населения, однако в последние годы появились сообщения о существенно более высокой частоте БВК.

БВК возникает вследствие мутаций гена АТР7В, кодирующего белок-транспортер меди АТФазу-7В. При БВК нарушается способность дефектной АТФазы-7В к транспортировке меди в лизосомы и включению ее в церулоплазмин, в связи с чем снижается уровень церулоплазмина в крови и нарушается экскреция меди с желчью.

Для БВК характерно прогредиентное течение, широкая вариабельность времени манифестации и выраженная гетерогенность клинических проявлений (от

гепатита и цирроза печени до неврологических расстройств и других внепеченочных симптомов). Широкий спектр и неспецифичность наблюдаемых симптомов, а также низкая настороженность в отношении наследственной патологии среди специалистов амбулаторного звена ведут к тому, что диагностика БВК зачастую запаздывает.

Одним из методов, позволяющим установить диагноз БВК, является молекулярно-генетическое тестирование. К настоящему времени (2018 год) у пациентов с болезнью Вильсона-Коновалова из большого числа популяций мира идентифицировано более 800 различных мутаций в гене АТР7В. В разных этнических группах спектр мутаций указанного гена у больных имеет свои особенности. Для Европы и европейской части населения России мажорной мутацией является H1069Q (p.His1069Gln) в 14 экзоне [13, 76, 116]. Показано, что распространенность данной мутации связана с эффектом основателя [112]. Наиболее часто российские исследователи проводят поиск частых мутаций у пациентов с БВК. Объем стандартного генетического исследования имеет тенденцию к расширению. Подбор частых мутаций сформирован на основании исследования «горячих» экзонов гена АТР7В (14, 15, 16 и 18-й) у пациентов, происходящих в основном из европейской части России. Прямое секвенирование гена АТР7В до недавнего времени проводилось в крайне редких случаях, так как было сопряжено с большими финансовыми затратами. Современные возможности генетического консультирования значительно расширились с появлением методов NGS (Next Generation Sequensing), которые обладают высокой информативностью и существенно более низкой стоимостью. Проведение генетического тестирования до того, как у пациента проявилась развернутая клиническая картина (в том числе в рамках семейного скрининга), радикально упрощает диагностику БВК и позволяет своевременно начать патогенетическую терапию.

В мире неоднократно предпринимались попытки выявить корреляцию между мутациями гена АТР7В и клиническими проявлениями БВК. В большинстве случаев таковую установить не удалось. В некоторых случаях авторы сумели

выявить некоторые особенности течения БВК (более позднее начало, высокая частота неврологических симптомов) у лиц, гомозиготных по наиболее частой среди европейцев мутации H1069Q. Для других мутаций обнаружение такой корреляции выглядит затруднительным в связи с тем, что большинство пациентов являются компаунд-гетерозиготами, и проблематично набрать достаточно крупную выборку больных с одинаковым генотипом по АТР7В. Некоторые авторы для частичного решения этих проблем обращаются к изучению пациентов из семей с близкородственными браками. Такой подход позволяет изучить пациентов, гомозиготных по редким мутациям, и оценить их фенотип. Кроме того, в случае сравнения пациентов из одной семьи можно предполагать влияние на них сходных внешних воздействий. В Российской Федерации исследования генотип-фенотип корреляции при БВК проводились в отдельных регионах на небольших выборках пациентов. Магжанова А.Р. отмечает в своем исследовании БВК в Республике Башкортостан ассоциацию мутации H1069Q с более мягким течением и поздним началом БВК [15]. Другим же исследователям при изучении этого вопроса не удалось установить искомой закономерности [7].

Таким образом, спектр мутаций гена АТР7В в России требует дальнейшего изучения с целью определения частоты известных мутаций и выявления новых, характерных для различных популяций. Метод таргетного N08 перспективен для ранней диагностики БВК, но необходимо оценить его эффективность в клинических условиях. Актуально также изучение полиморфизма клинической картины БВК и потенциального влияния генотипа на клинические проявления заболевания. В комплексе это обеспечит научную базу для формирования персонализированного подхода в ведении больного БВК.

Научная новизна

Впервые проведено комплексное обследование российских пациентов с БВК, включающее поиск мутаций гена АТР7В методом N08 и всестороннее изучение клинической картины; изучен клинический полиморфизм БВК, в том числе внутрисемейный.

Впервые в России проведено секвенирование гена ATP7B методом таргетного NGS у 81 пациента с БВК. Секвенирование гена ATP7B позволило выявить большое число уникальных редких мутаций, всего обнаружена 31 различная мутация. Наиболее частыми мутациями явились c.3207C>A (48% аллелей) и c.3190G>A (7% аллелей). Обнаружены 3 ранее не описанные потенциально патогенные мутации - c.1870-8A>G, c.1971dupC, c.3036dupC. Информативность исследования составила 96%.

Впервые проведено сравнение спектра патогенных и непатогенных вариантов в гене ATP7B среди пациентов с БВК и в группе контроля (здоровые люди).

Впервые проведено исследование связи тяжести течения БВК с типом мутации с использованием группировки пациентов по принципу влияния мутации на белковый продукт.

Цель исследования

Оценить спектр мутаций гена ATP7B и проанализировать его возможную связь с развитием клинического полиморфизма при БВК.

Задачи исследования

1) На основании молекулярно-генетического исследования (таргетное NGS (Next generation sequencing)) определить частоту и спектр мутаций в гене ATP7B у пациентов с БВК и их родственников.

2) Оценить частоту гетерозиготного носительства мутаций в гене ATP7B в группе контроля с помощью полноэкзомного секвенирования методом NGS.

3) Изучить особенности клинических проявлений у пациентов с БВК.

4) Провести анализ связи тяжести течения с типом мутации и ее патогенетического эффекта.

Практическая значимость исследования

Работа обосновывает значимость и перспективу внедрения современного молекулярно-генетического метода исследования (таргетное NGS) для ранней диагностики БВК. Оценена эффективность метода для ранней диагностики БВК и

для медико-генетического консультирования семей больных с различными формами БВК. Данный подход позволяет выявить до 98% мутантных аллелей, что позволяет своевременно диагностировать заболевание и назначить патогенетическую терапию. Это, в свою очередь, способствует улучшению прогноза для пациентов с БВК.

Положения, выносимые на защиту:

1. Большинство пациентов БВК компаунд-гетерозиготны. Наиболее частой мутацией в Российской популяции больных явилась мутация с.3207С>А (р.И1в106901п) - на 51,85% аллелей и у 72,9% обследованных. Второй и третьей по частоте оказались мутации c.3190G>A (p.Glu1064Lys) и c.3402delC (р.А1а1135Г8) - на них пришлось по 8,64% и 6,17%, аллелей соответственно.

2. Частота гетерозиготного носительства мутаций в гене АТР7В в группе здоровых лиц составила 1:89; выявлена мутация с.3207С>А (p.His1069Gln), носительство других мутаций не было обнаружено.

3. Клиническая картина БВК характеризуется значительным полиморфизмом: от бессимптомного течения до развития фульминантного гепатита, декомпенсированного цирроза печени или тяжелого поражении ЦНС с манифестацией в возрасте от 5 до 45 лет. Отмечается позднее распознавание БВК - в среднем через 34 месяца (максимально - 180 месяцев) после появления первых симптомов, нередко на стадии декомпенсированного цирроза печени (34,5% больных), что ухудшает прогноз.

4. Современное молекулярно-генетического исследование, применяемое как при подозрении на заболевание, так и при медико-генетическом консультировании в семьях больных БВК, упрощает раннюю диагностику заболевания и позволяет своевременно назначить патогенетическую терапию. Внедрение в практику метода NGS в будущем позволит значительно увеличить информативность исследования и улучшить диагностику и прогноз БВК.

5. При исследовании связи генотипов и тяжести болезни Вильсона-Коновалова прослеживается общая, оцененная по результатам различных подходов и

исследованным параметрам, тенденция, указывающая на более тяжелое течение БВК при мутациях, потенциально приводящих к значительным нарушениям процессинга белка - nonsense, frameshift, splicing мутации. Обоснованность и достоверность научных результатов Основные положения диссертационной работы получены при анализе данных, содержащихся в материалах первичной документации и полностью им соответствуют. Результаты, полученные автором вследствие анализа клинических и молекулярно-генетических данных, свидетельствуют о решении поставленных задач. Достаточно большой объем материала (81 пациентов с БВК, 10 их ближайших родственников и 178 здоровых человек из группы контроля) обуславливает высокую степень достоверности и обоснованности основных научных положений диссертации и выводов. Проанализировано значительное количество данных из отечественной и зарубежной научной литературы (более 200 источников). Выводы объективно и полноценно отражают результаты проведенных исследований.

Соответствие диссертации паспорту научной специальности В соответствии с формулами специальности: «03.02.07 - Генетика (медицинские науки)», охватывающей проблемы изменчивости и наследственности, закономерности процессов хранения, передачи и реализации генетической информации на молекулярном, клеточном, организменном и популяционном уровнях в области «Генетика человека. Медицинская генетика. Наследственные болезни».

14.01.04 - Внутренние болезни (медицинские науки), изучающей этиологию, патогенез, семиотику, диагностику, прогноз и профилактику заболеваний внутренних органов в области «Совершенствование лабораторных, инструментальных и других методов обследования терапевтических больных, совершенствование диагностической и дифференциальной диагностики болезней внутренних органов».

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Оценка спектра мутаций гена ATP7B и клинического полиморфизма болезни Вильсона-Коновалова»

Апробация работы

Материалы диссертации доложены: на внутренней межкафедральной конференции в Клинике ревматологии, нефрологии и профпатологии им. Е.М. Тареева (г. Москва) «Формальная генетика и молекулярно-генетические основы болезни Вильсона-Коновалова» 11 марта 2015 г.; на конгрессе «Гепатология сегодня» 17-19 марта 2017 (г. Москва); в стендовом докладе European Human Genetics Conference 2017 (Copenhagen, Denmark) May 27-30 2017; на конференции «Клиническая протеомика. Постгеномная медицина» 30 октября - 1 ноября 2017(г. Москва); XI Научной конференции «Генетика человека и патология» 27-30 ноября

2017 года (г. Томск); на конгрессе «Гепатология сегодня 23-25 марта 2018 (г. Москва); в стендовом докладе European Human Genetics Conference 2018 (Milan, Italy) June 18-20 2018. Работа апробирована и рекомендована к защите на совместном заседании сотрудников кафедры медицинской генетики ФГАОУ ВО Первый МГМУ им. И.М. Сеченова Минздрава России (Сеченовский Университет) и кафедры терапии Института последипломного профессионального образования ФГБУ ГНЦ ФМБЦ им. А.И. Бурназяна ФМБА России, протокол .№12 от «02» июля

2018 г.

Личный вклад автора в проведение исследования

Автор непосредственно участвовала в разработке самой идеи, при формулировании цели и задач, выборе методов исследования, обработке медицинского и статистического материала, организации и проведении клинического этапа исследования, и анализе и интерпретации полученных данных, а также в подготовке публикаций по диссертационной теме.

Автором лично проведен осмотр пациентов с БВК и членов их семей, заполнение медицинских карт. Автором детально изучена и проработана отечественная и зарубежная литература по теме диссертации, проведен статистический анализ данных, сформулированы результаты и выводы. Результаты исследования опубликованы в рецензируемых журналах и доложены на научных конференциях.

Публикации

По результатам диссертации опубликовано 12 печатных работ соискателя, в том числе 4 статьи (3 статьи - в журналах, рекомендованных ВАК МОН РФ для соискателей ученой степени кандидата медицинских наук, из которых 2 - в журналах, индексируемых PubMed и Scopus, а также 1 статья - в зарубежном журнале, индексируемом Web of Science).

Структура и объём диссертации

Диссертация имеет следующую структуру: введение, обзор литературы, материалы и методы исследования, результаты, обсуждение, перспективы дальнейшей разработки темы исследования, заключение, выводы, практические рекомендации, список литературы и приложение. Работа представлена на 135 страницах машинописного текста, содержит 21 таблицу и 17 рисунков. Библиографический указатель включает 212 наименований, из них 28 отечественных и 184 иностранных источников.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Введение

Болезнь Вильсона-Коновалова (БВК, гепатолентикулярная дегенерация) -наследственное прогрессирующее заболевание, при котором происходит накопление меди в головном мозге, печени, глазах, суставах и других органах. Избыток меди запускает процессы оксидативного окисления, что влечет за собой гибель клеток. Для БВК характерна исключительная гетерогенность клинических проявлений: от бессимптомного течения до тяжелого поражения печени и выраженных неврологических и психиатрических симптомов. В редких случаях заболевание манифестирует гемолитическим кризом, поражением почек и другими симптомами. Существуют значимые фенотипические различия между пациентами с одинаковыми мутациями даже в рамках одной семьи, в том числе у монозиготных близнецов [57, 111].

СИаЫк О. е1 а1. провели исследование конкордантности клинических симптомов в группе пациентов с различными формами БВК и их сибсов. Конкордантность при печеночной форме составила 86 %, а при неврологической -66 %. Таким образом, возраст манифестации и течение БВК у сибсов были весьма похожи, что объясняется схожестью сибсов по генетическим особенностям и тем, что члены одной семьи подвергаются примерно одним и тем же средовым воздействиям. Тот факт, что конкордантность не достигала 100%, отражает значимость индивидуальных различий сибсов по генетическому профилю и повлиявшим на них факторам среды [50].

БВК сопровождается снижением качества и продолжительности жизни, и протекает прогредиентно, что свойственно для наследственных болезней накопления. Первые признаки начала болезни могут появиться практически в любом возрасте, но чаще это происходит в возрасте до 25 лет. Однако, описаны наблюдения манифестации в раннем детском возрасте, а также у лиц старше 60 лет [161]. Недавно был описан случай, когда БВК была диагностирована у

восьмимесячного ребенка после случайного выявления повышенных сывороточных трансаминаз в крови [33]. Ala A. е! al. описали позднюю манифестацию БВК у двух сибсов старше 70 лет [36].

Если диагноз БВК устанавливается на ранних и бессимптомных стадиях заболевания и своевременно назначается пожизненная патогенетическая терапия (в виде хелатора меди Д-пеницилламина и др.), то обычно наблюдается стойкое улучшение состояния пациента. Однако, клинические проявления БВК могут быть неспецифичны и недостаточны для полной уверенности в диагнозе, а такие основные клинические критерии диагностики БВК как кольцо Кайзера-Флейшера, снижение уровня церулоплазмина в сыворотке крови, могут отсутствовать [183]. Это делает генетическое тестирование крайне важной составляющей обследования.

БВК вызывается мутациями обеих копий гена ATP7B, который кодирует медь-транспортирующую АТФазу 7В. Однако некоторые исследователи описывают случаи БВК, когда мутаций в гене ATP7B обнаружено не было [111, 158]. В связи с этим, обсуждается возможность наличия иных причинных генов для гепатолентикулярной дегенерации.

В связи с тем, что с точки зрения системной биологии изучение активности причинного белка, протеома и интерактома требуют исследования на пораженных тканях, а получение тканей человеческого происхождения не всегда легкодоступно и этически приемлемо, становится весьма актуальным поиск животной модели заболевания.

Для изучения БВК в качестве моделей используют лабораторных животных с дефектом гена ATP7B. К ним относятся мыши (породы toxic milk mice, tx) и крысы (породы Long Evans Cinnamon rats, LEC) [81, 159]. Следует отметить, что у крыс белок ATP7B несколько отличается от человеческого, а наиболее частой мутацией является протяженная делеция гена (у человека, напротив, более распространены миссенс-мутации). Клиническая картина у крыс сопровождается тяжелым поражением печени, повышенной частотой развития холангиокарциномы,

нарушением морфологии ядра в гепатоцитах и дисфункцией метаболизма холестерина. Для tx мышей характерны миссенс-мутации, поражение печени протекает более мягко, а в гистологической картине отмечаются такие же изменения митохондрий, как и у человека: плейотропизм, повышенная плотность матрикса, аномальное строение крист [171].

У собак также встречается аналогичное БВК заболевание, сопровождающееся патологическим накоплением меди, однако оно возникает вследствие дефекта другого гена - СОЫЫВ1 [56, 77].

Помимо животной модели, в изучении БВК также используются клеточные культуры. Для моделирования заболевания используются клоны клеток нокаутной по АТР7В гепатомы человека [51].

Литературные источники, посвященные БВК, зачастую имеют общий недостаток - малое количество пациентов. В связи с редкостью заболевания исследователям затруднительно сформировать достаточно крупную выборку больных гепатолентикулярной дегенерацией. Помимо этого, имеется и другая проблема - высокая стоимость секвенирования АТР7В, заставляющая ученых выбирать альтернативные, менее информативные методы молекулярно-генетического обследования.

В подавляющем числе случаев в литературе приводятся описания клинических случаев БВК либо исследование небольших групп пациентов, которым проведен молекулярно-генетический анализ. Реже встречаются работы, посвященные изучению активности белка АТР7В в тканях, так как биопсия печени проводится не всегда, а взятие биоптата мозга у живого пациента невозможно по биоэтическим причинам. В связи с этим исследователи вынуждены направить свое внимание на изучение нокаутных по АТР7В лабораторных животных.

В последние годы множество исследований направлено на выяснение причин вариабельности клинических проявлений БВК. Делаются попытки установить генотип-фенотип корреляцию, выявить наиболее значимые модифицирующие факторы - генные, средовые, гендерные и др.

1.1. Исторические аспекты изучения БВК

Историю изучения этого заболевания можно условно подразделить на 4 этапа

На 1 этапе БВК была выделена как самостоятельная нозология. В 1883 году K. Westphal и в 1889 году A. Strümpell описали заболевание, которое назвали псевдосклерозом за его сходство с рассеянным склерозом. В 1902 году Kayser В. и в 1903 году Fleischer R. описали у больных с подобными неврологическими симптомами отложение медьсодержащего пигмента по окружности роговицы в виде зеленовато-коричневого кольца шириной 1-3 мм. 2 этап заключается в установлении причинно-следственной связи между избыточным накоплением меди в тканях организма и симптоматикой заболевания. В 1912 году невролог S. Wilson описал патологию, характеризующуюся специфичными отложениями в чечевицеобразных ядрах головного мозга и циррозом печени и сопровождающуюся гиперкинезами без поражения пирамидальных путей. S. Wilson дал ей название «лентикулярная дегенерация».

3 этап знаменуется открытием эффективной патогенетической терапии БВК с помощью хелатных соединений. Первой находкой был димеркапрол, также называемый анти-люизит (British anti-Lewisite, BAL), впервые разработанный в Великобритании для борьбы с последствиями отравления ипритом [194]. В 1956 году J. Walsh синтезировал препарат Д-пеницилламин(Д-ПАМ), способный связывать медь и выводить ее из организма. Позднее Уолш принимал участие в разработке альтернативных медьвыводящих препаратов - триентина и тетрамолибдата [17].

4 этап - это открытие генетической природы заболевания. Впервые причину развития БВК установили Friedman L.S. et al. в 1985 г., обнаружив, что заболевание обусловлено мутациями гена ATP7B.

В нашей стране огромный вклад в изучение БВК внес Николай Васильевич Коновалов. Он скрупулезно описал клиническую картину заболевания, расширил представления о патофизиологии и патоморфологии [16]. Подробная

классификация форм БВК, созданная Н.В. Коноваловым, до сих пор актуальна и активно используется в клинической практике.

Несмотря на долгую историю изучения БВК, практика показывает, что в нашем понимании тонкостей этиологии и патогенеза этого заболевания остается множество пробелов. Их заполнение требует разнонаправленных усилий ученых различных профилей.

1.2. Классификация БВК

В классификации Н.В. Коновалова выделены 5 форм болезни:

1) Брюшная (абдоминальная).

2) Ригидно-аритмогиперкинетическая

3) Дрожательно-ригидная.

4) Дрожательная форма.

5) Экстрапирамидно-корковая

Некоторые авторы также выделяют несколько типов течения заболевания:

1) славянский, который начинается в 20-35 лет, характеризуется неврологическими симптомами и маловыраженным поражением печени;

2) западный, манифестирует в 10-16 лет поражением печени с последующим присоединением неврологической симптоматики;

3) атипичный, характеризующийся только снижением уровня церулоплазмина без клинического проявления заболевания [20].

1.3. Распространенность БВК

БВК распространена по всему земному шару. Частота гетерозиготного носительства мутаций, приводящих к развитию БВК, оценивается примерно в 1 на 90 человек. Частота заболевания разными авторами также оценивается различно: 1-5 на 30-300 тысяч населения. В последние годы представления о частоте этого заболевания заметно меняются. Даже при первых исследованиях было показало,

что распространенность БВК в различных странах существенно разнится (таблица 1).

Таблица 1. Распространенность БВК в различных странах мира

Страна Год исследования Распространенность БВК Литература

Шотландия 1989 0,4/100 000 [158]

Восточная Германия 1974 0,46/100 000 [39]

Ирландия 1971 0,67/100 000 [153]

2011 0,9/100 000

Великобритания 2013 14,2/100 000 [54]

Франция 2013 1,5/100 000 [166]

Сардиния 1983 2,9/100 000 [83]

2014 36,6/100 000 [84]

Бразилия 2016 4,1/100 000 [156]

США 2001 2/100 000 [155]

Корея 2017 13/100 000 [106]

Китай 2010 5,87/100 000 [53, 103]

Современные эпидемиологические исследования в различных странах Европы позволяют предполагать частоту БВК 1:7000-10 000, что существенно выше, чем та, о которой говорилось ранее. В недавнем популяционном исследовании с помощью NGS в Великобритании было показано, что расчетная частота наличия патогенных мутаций в гене АТР7В, и, соответственно, заболевания, должна быть 1:7026. Такая разница в частоте заболевания может объясняться как гиподиагностикой БВК и наличием стертых и бессимптомных форм (в том числе за счет сниженной пенетрантности мутаций), так и методологическими проблемами [42]. Большинство исследований проводится узкими специалистами (гастроэнтерологами, педиатрами, неврологами), из-за чего сложно оценить полный континуум пациентов с БВК. Кроме того, с развитием эффективности диагностики и лечения БВК, распространённость заболевания будет неуклонно увеличиваться, поэтому данные о распространенности БВК в разные года могут отличаться даже внутри одной страны. В некоторых регионах распространенность БВК очень высока [87]. Причины этого могут быть связаны с

рядом факторов. Например, в Иране, Йемене, Иордании, Японии, Северной Индии практикуются близкородственные браки. В южных регионах Италии (в особенности, на Сардинии) и среди евреев восточно-европейского происхождения существует этническая ассортативность. Для Исландии имеет место эффект основателя в связи с географической изоляцией острова.

Несмотря на небольшую частоту заболевания, абсолютное число пациентов с БВК достаточно велико. Так, например, в странах Евросоюза ежегодная заболеваемость составляет около 12000 случаев. Во всем мире количество случаев оценивается от 10 до 30 миллионов человек [212].

Таким образом, несмотря на то, что БВК считается редким заболеванием, ее вклад в потерю трудоспособности молодого населения достаточно велик. Прогноз при БВК зависит от того, насколько своевременно поставлен диагноз и начато лечение, от вероятности развития жизнеугрожающих осложнений и от приверженности пациента терапии.

1.4. Этиология и патогенез БВК

1.4.1 Этиология БВК

БВК обусловлена мутациями гена АТР7В, который картирован на хромосоме 13q14.3 и состоит из 21 экзона и 20 интронов. Белок АТР7В, принадлежащий к семейству генов АТФ-аз Р-типа, является ключевым ферментом в транспортировке ионов меди [210].

АТФаза-7В - трансмембранный белок, принадлежащий к семейству медных АТФ-аз, связывающий шесть атомов меди и переносящий их к лизосомам, которые транспортируют медь в желчный капилляр через канальцевую мембрану. АТФаза-7В, локализующаяся в комплексе Гольджи, осуществляет также встраивание меди в церулоплазмин, который транспортирует медь в кровь. АТФ-аза-7В, вовлечённая в патогенез БВК, синтезируется в двух формах с молекулярной массой 160 и 140 кДа, причём последняя форма (продукт протеолитического расщепления первой) не только превалирует, но и имеет внутримитохондриальную локализацию. Есть

данные, что более крупная форма белка может выполнять депонирующую роль у млекопитающих, что оказывает защитный эффект при дефиците поступающей меди [201].

К настоящему времени у больных с БВК из большого числа популяций мира идентифицировано более 800 различных мутаций в гене АТР7В, в основном представляющих собой нуклеотидные замены, короткие делеции или вставки. Существует обширнейшая открытая компьютерная база мутаций, созданная группой ученых университета Альберты (Канада) [111, 211]. В этой базе отражены типы мутаций, эффект, оказываемый на белок, последовательность нуклеотидов в мутантном участке, а также страна, где данная мутация была обнаружена. К сожалению, характерные именно для России мутации представлены там крайне скудно.

Большинство больных компаунд-гетерозиготны по мутациям гена АТР7В [12]. Это, в совокупности с огромным количеством мутаций, обусловливает недостаточную информативность молекулярно-генетических методов исследования. Примерно в 17% не удается установить причинную мутацию [115].

В различных этнических группах спектр мутаций указанного гена у больных БВК уникален. Установление характерного набора частых мутаций для конкретной популяции существенно упрощает диагностику БВК, так как позволяет избежать дорогостоящего секвенирования гена. Так, например, в Сардинии частота БВК составляет 1:2732, а самой распространенной мутацией является del441-427(66,5%) [84].

В Китае же мажорными мутациями являются Аг§778Ьеи и ТИг935Ме1 [203]. В разных регионах Индии наблюдаются заметные различия спектра мутаций АТР7В. Для южной части характерны те же мутации, что и для Китая [175]. В северной же Индии преобладают мутации Р125Я, А1003Т, и 11102Т [118].

При обследовании небольшой группы пациентов в Пакистане не было выявлено ни европейской, ни азиатской мажорных мутаций [32]. Аналогичная

ситуация наблюдается и в Саудовской Аравии, где наиболее частыми являются 8ег744Рго, 01у341Бег, и а1и1399А^ [35].

Для Европы мажорной мутацией является Н1069Р (p.His1069Gln) в 14 экзоне [76]. Имеются данные, что для восточной части Европы также значительно распространены мутации 3402ёе1С, 1^779Х, Я7780 и 1340ёе14 [8, 195].

Следует отметить, что во всех российских исследованиях использовался однотипный подход: сначала проводился поиск частых мутаций, а при отсутствии результата или выявлении мутации в гетерозиготном состоянии осуществляли прямое автоматическое секвенирование.

В России, по данным отечественных исследователей, наиболее частой также считается мутация H1069Q, которая выявляется у 35-70% больных [13, 142]. Анализ гаплотипов (оценивались полиморфизмы D13S316, D13S133 и D13S228) показал, что имеется прямая ассоциация гаплотипа 6-18-3 с мутацией H1069Q, что подтверждает наличие эффекта основателя [112]. Изучение частоты остальных мутаций в гене АТР7В при БВК проводилось ранее лишь на малых выборках в отдельных регионах России. Выявленный при этом спектр мутаций значительно варьировал в зависимости от национального состава населения. Так, в Хабаровском крае было проведено молекулярно-генетическое обследование 15 пациентов с БВК, мутация H1069Q выявлена у 10 пациентов в гомозиготном и у 3 - в гетерозиготном состоянии [4]. Во Владивостоке были обследованы 57 пациентов с неврологической формой БВК на наличие трех частых мутаций (Э1267К, И1069Р, ёе1С3402). В данной выборке преобладала мутация Б1267К, которая обнаружилась у всех обследованных больных, в то время как мутация H1069Q присутствовала лишь у 18,1% пациентов [19]. При исследовании в республике Башкортостан выявлено 8 различных мутаций в гене АТР7В. Как и в других работах, с наибольшей частотой обнаруживалась мутация И1б106901п (55,5% аллелей русского, 38,9% татарского, 44,4% башкирского и на 83,3% чувашского происхождения). Впервые, у пациентов чувашского происхождения, обнаружены две ранее не описанные мутации: А1а718Рго и Lysl315Argl316delinsGlu, последняя

выявлена с высокой частотой (10,7%). Проводился анализ ассоциаций мутаций в гене АТР7В с гаплотипами по полиморфным ДНК-локусам (D13S316, D13S133, БШ228) [15].

Подробное распределение мутаций в различных регионах показано в таблице 2.

Таблица 2. Мажорные мутации в различных странах мира

Регион Частые мутации Частота Источник

Россия р.Н1в1069а1п (с.3207С<А) 35-50% [13, 15, 142]

Восточная Европа в целом р.Н1в1069а1п (с.3207С<А) 15-72%, в среднем ~ 40% [87]

Дания р.Н1в106901п (с.3207С<А) р.Тгр779* (с.23360<А) 16-18% [144]

Австрия р.Н1в106901п (с.3207С<А) р.01у710Бег (с.21280<А ) p.Met769fs (с.2298 2299^С) 3,6-34,1% [76]

Болгария р.Н1в106901п (с.3207С<А) 55,8% [190]

Канарские острова р.Ьеи708Рго (с.2123Т<С) 64% [82]

Континентальн ая Италия p.His1069G1п (с.3207С<А) p.Va1845fs (с.2530ёе1А 9) p.Met769fs (с.2298 2299iпsC) 6-17,5% [129]

Сардиния с.-441 -427ёе1 p.Met822fs (с. 2463ёе1С) 8,5-66% [84, 128]

Испания p.Met645Aгg (c.1934T<G) 27% [138]

Нидерланды p.His1069G1п (с.3207С<А) 33% [182]

Польша p.His1069G1п (с.3207С<А) p.A1a1135fs (с.3400ёе1С) p.G1п1351* (с.4051С<Т) 3,7-72% [89]

Китай p.Aгg778Leu (c.2333G<T) р.Рго992Ьеи (с.2975С<Т) p.Thr935Met (с.2804С<Т) 3.3%-55% [53, 122, 203]

Корея p.Aгg778Leu (c.2333G<T) p.Asn1270Ser (c.3809A<G) p.A1a874Va1 (с.2621С<Т) 9,4-37,9% [205]

Япония p.Asп958fs (с.2871ёе1С) p.Aгg778Leu (c.2333G<T) c.1708-5T<G 10,5-18% [154, 188]

Северная Индия p.Aгg778Tгp (с.2333С<Т) p.I1e1102Thr (с.3305Т<С) p.Pгo992His (с.2975С<А) 9-19% [92, 117]

Южная Индия p.Ala1003Val (c.3008C<T) p.Cys271* (c.813C<A) p.Pro768Leu (c.2303C<T) p.Arg969Gln (c.2906G<A) 11% 11% 9% 9% [175]

Восточная Индия p.Gly1061Glu (c.3182G<A ) c.1708-1G<C 11% 8,5% [91]

Западная Индия p.Cys271*(c.813C<A) p.Glu122fs (c.365 366delinsTTCGAAGC) p.Thr977Met (c.2930C<T) p.Leu795Phe (c.2383C<t) 20% [92]

Саудовская Аравия p.Gln1399Arg (c.4196A<G) p.Ser774Arg (c.2230T<C) 32% 16% [134]

Иран p.His1069Gln (c.3207C<A) 19% [207]

c.3904-2A> G

Египет 18-2A<G p.His1126fs (c.3373 3377delinsTCT) p.His1069Gln (c.3207C<A) 5,6-7% [30, 31]

США p.His1069Gln (c.3207C<A) p.Asn1270Ser (c.3809A<G) p.Gly1266Arg (c.3796G<A) 35-40% [87, 119]

Бразилия p.Ala1135fs (c.3402delC) p.Leu708Pro (c.2123T<C) 25-31% [63, 87]

В зависимости от расположения и типа мутации может варьироваться ее влияние на функциональность итогового белка и, соответственно, на итоговую клиническую картину. Li Х.Н. е1 а1. в своей работе приводят схематичное распределение мутаций по длине гена (рисунок 1) [122].

I

Си" binding 1

Cu"channel

transmembrane

domains 1-6 _L_

ATP ATP-binding

Transmembrane

1

N-domain 1

domains 7-8

Т-Ч

2 t

рНШ

5 6 7

P.

p (VS4-ST • G

pC490X pMliShMO

8 9

t

P.G710S P.076SN p M/69V p И/7М

p V 769MflX26

p M«22NtlX)2 «.Ш7№Ш

10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21

■ЁШВ' t t f f f ■

p Q190SP I l .plil) P.C1104R p VI1061

1' t ■ p AS74P

P.AB74V

p T888P

■tP

0 S97SV 9.C980V В P9921 10141

1Ш

рД1Ю1И|>|(

p R919G p 1929 V p T93SM

PQ1142H PH148T p.Cl>49( P misiH PT1178H

PVI216W

рОНШ p D1267N

p N1270S PV1297I P.V12I2CHK2

p.lVS20«SG

Рисунок 1. Распределение по гену АТР7В мутаций, выявленных при обследовании китайских больных с БВК.

Большинство из мутаций, включая мажорную His1069Q, приводят как к нарушению выведения меди в желчь, так и к нарушению связывания ее с церулоплазмином. Однако, при мутации G943S страдает лишь выведение меди в желчь, а связывание ее с церулоплазмином остается нормальным [78, 179].

Исследования Huster Э. et а1. показали, что около 25-30% мутаций приводят лишь к частичной инактивации АТР7В. Белковый продукт при этом способен к связыванию и гидролизу АТФ и сохраняет частичную способность к выведению меди. Это может объяснить легкое течение с более поздним началом заболевания БВК у ряда больных [104].

Мутации, являющиеся причиной БВК, также могут приводить к нарушению локализации или перемещения белка в клетке. В норме АТР7В локализуется в комплексе Гольджи, и при повышении уровня меди выходит оттуда в составе пузырьков. Мутации могут вызвать задержку белка в эндоплазматической сети (ЭПС) и сбой его транспортировки к комплексу Гольджи [131]. Тем не менее, в некоторых случаях эта задержка может быть обратимой [94].

Вгайегтап L.T. et а1. наблюдали пациента с мутацией S653Y, которая не приводит к нарушению транспорта меди, но не позволяет белку выйти из комплекса Гольджи. С помощью молекулярного динамического моделирования они предположили, что эта мутация вызывает локальное изменение конформации в трансмембранном домене 1 и изменяет его взаимодействие с трансмембранным доменом [44, 45, 104].

Для АТФ-азы 7В характерен тканеспецифичный альтернативный сплайсинг, причем в клетках головного мозга встречается значительно больше вариантов белка, чем в гепатоцитах. Большинство транскриптов в печени содержат полный набор экзонов, соответствующий геномному. В вариантах белка, синтезирующихся в головном мозге, могут отсутствовать экзоны 6, 7, 8, 12 и 13 [198]. Очевидно, что эффект мутаций, находящихся в вырезанных в процессе сплайсинга экзонах, не проявится. Однако, возможна и обратная ситуация. Интересную молекулярно-генетическую картину при мутациях сайта сплайсинга описали Mameli Е. et а1.

[136]. Ее суть состоит в том, что делеция 3039 пар оснований, затрагивающая часть 1 интрона и 2 экзона, привела к потере основного сайта сплайсинга. При этом произошла активация вторичного, спящего сайта сплайсинга. Результатом стало включение в первичный транскрипт интронной области с ранее молчащей нонсенс-мутацией (стоп-кодон TAG). Это привело к обрыву считывания и отсутствию функционального протеина (рисунок 2).

Рисунок 2. Схема формирования дефектного белка при отдельной мутации сайта

сплайсинга.

Для БВК описано явление однородительской изодисомии (состояние, когда обе хромосомы из пары хромосом у индивида с нормальным числом хромосом унаследованы только от одного родителя). В исследовании Coffey A.J. et al. был протестирован 181 пациент с БВК и выявлено два случая однородительской дисомии [54].

1.4.2. Патогенез БВК

БВК связана с нарушением метаболизма меди, которая выполняет широкий диапазон важнейших функций. Способность атома меди служить и донором, и акцептором электронов, меняя степени окисления между и Cu+, делает медь

оптимальным кофактором для ферментов [187]. Примеры медьзависимых белков приведены в таблице 3 [133, 192].

Таблица 3. Медьзависимые ферменты

Белок Ген Функции

Церулоплазмин CP Основная ферроксидаза крови

Цитохром C оксигеназа 13 различных генов Состоит из 13 субъединиц, составляющих митохондриальный оксидативный комплекс фосфорилирования IV

Допамин-Р-гидроксилаза (допамин-Р- монооксигеназа) DBH Синтезе катехоламинов

Гефестин HEPH Транспорт железа из тонкого кишечника в кровь

Лизил-оксидаза LOX Катализирует оксидативное деаминирование аминогрупп лизина и гидроксилизина в белках-предшественниках коллагена и эластина.

Метионин-синтаза MTR Катализирует превращение гомоцистеина в метионин

Супероксид дисмутаза SOD1 Основной антиоксидант цитоплазмы

Средний взрослый человек употребляет с пищей 0,6-1,6 мг меди в сутки [124]. Значительное количество меди содержат орехи, зерновые, бобовые, морепродукты, субпродукты, шоколад, грибы. 40-60% потребляемой меди всасывается из пищи, в основном, в двенадцатиперстной кишке, а также, в меньшей степени, в желудке и в дистальной части тонкой кишки. Медь из организма выводится через желудочно-кишечный тракт, либо с помощью желчи, либо как не всосавшаяся медь. Только 10-15% меди в желчи реабсорбируется. Избыток меди выводится с калом, как в виде абсорбированных и неабсорбированных ионов металлов, так и с желчью, в среднем 0.5-1.3 мг в день, и в небольших количествах с мочой, слюной и потом [101]. При смещении равновесия между поступлением и выведением меди запускаются патологические процессы, лежащие в основе БВК [160]. Происходит блокирование свободной медью SH-группы глутатиона и многих ферментов, участвующих в окислительно-восстановительных реакциях, что приводит к энергетическому голоданию [52].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Балашова, Мария Сергеевна, 2018 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Асанов, А.Ю. Федеральные клинические рекомендации по диагностике и лечению болезни Вильсона-Коновалова (гепатолентикулярная дегенерация) / А.Ю. Асанов, А.А. Соколов, С.Я. Волгина и др. - М., 2013. - 71 с.

2. Багаева, М.Э. Клиническая картина и течение болезни Вильсона у детей / М.Э. Багаева и др. // Вопросы современной педиатрии. - 2004. - Т. 3. - № 5. - С. 13 - 18.

3. Валикова, Т.А. Болезнь Вильсона-Коновалова / Т.А. Валикова, М.Н. Филимонова, О.Ю. Корягина и др. // Бюллетень сибирской медицины. - 2008. - Приложение 1. - С. 191 - 195.

4. Вялова, Н.В. Молекулярно-генетический анализ у больных гепатолентикулярной дегенерацией в Хабаровском крае / Н.В. Вялова, Т.Н. Проскокова, Г.М. Баязутдинова, Н.Н. Тен, С.И. Нам, А.М. Хелимский // Дальневосточный медицинский журнал. - 2016. - № 2. - С. 72 - 73.

5. Ганнушкина, И.В. Количественное изучение Т- и В-систем иммунитета при различных наследственных заболеваний нервной системы / И.В. Ганнушкина, И.Г. Жирнова, Н.Г. Торопова и др. // Журнал невропатологии и психиатрии им. С.С. Корсакова : Ежемес. науч.-практ. журн. - 1981. - Т. 81. - № 7. - С. 1009 - 1013.

6. Гржибовский, А.М. Анализ номинальных и ранговых переменных данных с использованием программного обеспечения Statistica и SPSS / А.М. Гржибовский, С.В. Иванов, М.А. Горбатова // Наука и здравоохранение. -2016. - № 6. - С. 5 - 39.

7. Гуляева, С.Е. Молекулярный дефект гепатолентикулярной дегенерации и его клиническое отражение / С.Е. Гуляева, А.В. Овчинников // Тихоокеанский медицинский журнал. - 2013. - № 4. - С. 98 - 102.

8. Дубовик, С.В. Популяционная частота болезни Вильсона в Беларуси / С.В. Дубовик, Н.Б. Гусина // Медицинская генетика. - 2010. - № 11. - С. 27 - 33.

9. Егорова, А.Т. Болезнь Вильсона-Коновалова и беременность / А.Т. Егорова, М.И. Базина, Д.А. Маисеенко, Е.Ю. Киселева, Е.П. Царюк // Сибирское медицинское обозрение. - 2014. - № 1 (85). - С. 89 - 92.

10. Игнатова, Т.М. Ранняя диагностика болезни Вильсона-Коновалова: радикальное улучшение прогноза / Т.М. Игнатова // Врач. - 2004. - № 12. - С. 36 - 39.

11. Игнатова, Т.М. Заболевания печени у беременных / Т.М. Игнатова // Медицинский вестник Северного Кавказа. - 2009. - № 2. - С. 88 - 93.

12. Иллариошкин, С.Н. ДНК-диагностика и медико-генетическое консультирование в неврологии: монография / С.Н. Иллариошкин, И.А. Иванова-Смоленская, Е.Д. Маркова. - М.: Мед. информ. агентство (МИА), 2002 - 590 с.

13. Иллариошкин, С.Н. Молекулярно-генетический анализ наследственных нейродегенеративных заболеваний / С.Н. Иллариошкин, И.В. Овчинников, И.А. Иванова-Смоленская // Генетика. - 2004. - Т. 40. - № 6. - С. 816 - 826.

14. Калинина, Е.В. Роль глутатиона, глутатионтрансферазы и глутаредоксина в регуляции редокс-зависимых процессов / Е.В. Калинина, Н.Н. Чернов, М.Д. Новичкова // Успехи биологической химии. - 2014. - Т. 54. - С. 299 -348.

15. Карнаус, А.С. Молекулярно-генетическое исследование болезни Вильсона в Республике Башкортостан / А.С. Карнаус, А.Р. Магжанова, Р.В. Магжанов, Е.В. Гайсина, С.Ш. Мурзабаева, Э.К. Хуснутдинова // Медицинская генетика. - 2009. - № 8. - С. 41 - 48.

16. Коновалов, Н.В. Гепатоцеребральная дистрофия / Н.В. Коновалов. - М.: Медгиз, 1960. - 556 с.

17. Корягина, О.Ю. Гепатолентикулярная дегенерация / О.Ю. Корягина, Л.П. Назаренко, М.Н. Филимонова // Бюллетень сибирской медицины. - 2005. -Приложение 2. - С. 61 - 65.

18. Литвинова, М.М. Генетическая гетерогенность и фенотипическое разнообразие гемохроматоза у лиц молодого возраста : автореф. дис. ... канд. мед. наук: 03.00.15 / Литвинова Мария Михайловна. - М., 2009. - 24 с.

19. Овчинников, А.В. Гепатолентикулярная дегенерация генетический полиморфизм / А.В. Овчинников, В.В. Шпрах, А.А. Овчинникова // Здоровье и образование в XXI веке. - 2017. - № 1. - С. 31 - 36.

20. Пономарев, В.В. Редкие неврологические синдромы и болезни: руководство для врачей / В.В. Пономарев. - СПб.: Фолиант, 2005. - 214 с. - С. 115 - 121.

21. Рахимова, О.Ю. Варианты поражения почек при болезни Вильсона-Коновалова / О.Ю. Рахимова // Тер. архив. - 2004. - № 9. - С. 88 - 91.

22. Рахимова, О.Ю. Поражения почек при болезни Вильсона-Коновалова, обусловленные заболеванием и медьэлиминирующей терапией / О.Ю. Рахимова, Т.Н. Краснова, Т.П. Розина и др. // Врач. - 2004. - № 10. - С. 29 -32.

23. Рахимова, О.Ю. Нефролитиаз, как первое клиническое проявление болезни Вильсона-Коновалова / О.Ю. Рахимова, Т.П. Розина, Т.М. Игнатова // Тер. архив. - 2003. - № 10. - С. 80 - 83.

24. Розина, Т.П. Клиническая характеристика, течение и прогноз абдоминальной формы болезни Вильсона — Коновалова / Т.П. Розина, О.Ю. Рахимова, Т.Н. Лопаткина // Российский журнал гастроэнтерологии, гепатологии, колопроктологии. - 2005. - Т. 15. - № 6. - С. 68 - 74.

25. Рыжкова, О.П. Руководство по интерпретации данных, полученных методами массового параллельного секвенирования (MPS) / О.П. Рыжкова, О.Л. Кардымон, Е.Б. Прохорчук, Ф.А. Коновалов, А.Б. Масленников, В.А. Степанов, А.А. Афанасьев, Е.В. Заклязьминская, А.А. Костарева, А.Е. Павлов, М.В. Голубенко, А.В. Поляков, С.И. Куцев // Медицинская генетика. - 2017. -Т. 16. - № 7. - С. 4 - 1.

26. Усанова, М.П. Аутоантитела к белкам нервной ткани при болезни Вильсона-Коновалова: автореф. дис. ... канд. биол. наук: 03.00.04 / Усанова Мария Павловна. - М., 2001. - 20 с.

27. Учакина, О.Н. Цитокиновый баланс при болезнях Паркинсона и Вильсона-Коновалова / О.Н. Учакина, П.Н. Учакин, М.В. Мезенцева и др. // Цитокины и воспаление. - 2007. - Т. 6. - № 3. - С. 63 - 68.

28. Хайменова, Т.Ю. Болезнь Вильсона-Коновалова: современные методы диагностики и лечения / Т.Ю. Хайменова, Е.В. Винницкая, И.Г. Бакулин, Т.В. Шкурко, А.В. Никитина // Фарматека. - 2016. - № S5. - С. 81 - 85.

29. 8th International Conference on Wilson Disease and Menkes Disease. Leipzig, Germany, April 16-18, 2001 :Abstracts //ZGastroenterol. - 2001. - Vol. 39(3). - P. 245 - 260.

30. Phenotypic and genetic characterization of a cohort of pediatric Wilson disease patients / A.TY. Ghaffar, SM. Elsayed [et al.] // BMC Pediatr. - 2011. - Vol. 17. -P. 11 - 56.

31. Mutational analysis of ATP7B gene in Egyptian children with Wilson disease: 12 novel mutations / A.TY. Ghaffar, SM. Elsayed [et al.] // J Hum Genet. - 2008. - Vol. 53(8). - P. 681 - 687.

32. Naveed, A.K., Majeed, A., Mansoor, S. Spectrum of ATP7B gene mutations in Pakistani Wilson Disease patients: A Novel Mutation Is Associated with Severe Hepatic and Neurological Complication /A.K. Naveed, A. Majeed, S. Mansoor // International Journal of Biology. - 2010. - Vol. 2. - № 1. - P. 117 - 122.

33. Wilson disease with hepatic presentation in an eight-month-old boy / K. Abuduxikuer, L.T. Li, Y.L. Qiu, N.L. Wang, J.S. Wang // World Journal of Gastroenterology : WJG. - 2015. - Vol. 21(29). - P. 8981 - 8984.

34. A Novel Global Assessment Scale for Wilson's Disease (GAS for WD) / A. Aggarwa, N. Aggarwal, A. Nagral, G. Jankharia, M. Bhatt // Movement Disorders. - 2009. - Vol. 24. - № 4. - P. 509 - 518.

35. A clinical and genetic study of 56 Saudi Wilson disease patients: identification of Saudi-specific mutations / Al.M. Jumah, R. Majumdar [et al.] // Eur J Neurol. -2004. Vol. 11(2). - P. 121 - 124.

36. Wilson's disease / A. Ala, AP. Walker, K. Ashkan, JS. Dooley, ML. Schilsky // Lancet. - 2007. - Vol. 369. - P. 397 - 408.

37. Presentation of Epilepsy in a Patient with Wilson's Disease and Developmental Venous Anomaly (Venous Angioma) in the Brain / A. Alobaidy, F. Alazri, P.C. Jacob, J.H. Al-Kalbani // Sultan Qaboos University Medical Journal. - 2012. - Vol. 12(4). - P. 503 - 507.

38. Clinically diagnosed late-onset fulminant Wilson's disease without cirrhosis: A case report / T. Amano, T. Matsubara [et al.] // World Journal of Gastroenterology. -2018. - Vol. 24(2). - P. 290 - 296.

39. Bachmann, H., Lossner, J., Biesold, D. Wilson's disease in the German Democratic Republic. I. Genetics and epidemiology / H. Bachmann, J. Lossner, D.Z. Biesold // Gesamte Inn Med. - 1979. - Vol. 34. - P. 744 - 748.

40. Cardiac arrhythmia in Wilson's disease: An oversighted and overlooked entity / B.K. Bajaj, A. Wadhwa, R.Singh [et al.] // S.Journal of Neurosciences in Rural Practice.

- 2016. - Vol. 7(4). - P. 587 - 589.

41. An NMR study of the interaction of the n-terminal cytoplasmic tail of the Wilson Disease protein with Copper(I)-HAH1 / L. Banci, I. Bertini, F. Cantini [et al.] // The Journal of Biological Chemistry. - 2009. Vol. 284(14). - P. 9354 - 9360.

42. Bandmann, O., Weiss, K.H., Kaler, S.G. Wilson's disease and other neurological copper disorders / O. Bandmann, K.H. Weiss, S.G. Kaler // The Lancet. Neurology.

- 2015. - Vol. 14(1). - P. 103 - 113.

43. Boyle, M.P. Strategies for identifying modifier genes in cystic fibrosis / M.P. Boyle // Proceedings of the American Thoracic Society. - 2007. - Vol. 4(1). - P. 52 - 57.

44. Critical roles for the COOH terminus of the Cu-ATPase ATP7B in protein stability, trans-Golgi network retention, copper sensing, and retrograde trafficking / L.

Braiterman, L. Nyasae, F. Leves, AL. Hubbard // J Physiol Gastrointest Liver Physiol. - 2011. - Vol. 301(1). - P. G69 - G81.

45. Distinct phenotype of a Wilson disease mutation reveals a novel trafficking determinant in the copper transporter ATP7B / L.T. Braiterman, A. Murthy [et al.] // Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America.

- 2014. - Vol. 111(14). - P. E1364 - E1373.

46. Burkhead, J.L., Gray, L.W., Lutsenko, S. Systems biology approach to Wilson's disease / J.L. Burkhead, L.W. Gray, S. Lutsenko // Biometals : An International Journal on the Role of Metal Ions in Biology, Biochemistry, and Medicine. - 2011.

- Vol. 24(3). - P. 455 - 466.

47. High prevalence of the H1069Q mutation in East German patients with Wilson disease: rapid detection of mutations by limited sequencing and phenotype-genotype analysis / K. Caca, P. Ferenci [et al.] // J Hepatol. - 2001. - Vol. 35(5). -P. 575 - 581.

48. Quality of Life and Psychiatric Symptoms in Wilson's Disease: the Relevance of Bipolar Disorders / M. Carta, G. Mura [et al.] // Clinical Practice and Epidemiology in Mental Health : CP & EMH - 2012. - Vol. 8. - P. 102 - 109.

49. Catana, AM., Medici, V. Liver transplantation for Wilson disease / AM. Catana, V. Medici // World Journal of Hepatology. - 2012. - Vol. 4(1). - P. 5 - 10.

50. Chabik, G., Litwin, T., Czlonkowska, A. Concordance rates of Wilson's disease phenotype among siblings / G. Chabik, T. Litwin, A. Czlonkowska // Journal of Inherited Metabolic Disease. - 2014. - Vol. 37(1). - P. 131 - 135.

51. Functional analysis and drug response to zinc and D-penicillamine in stable ATP7B mutant hepatic cell lines / G. Chandhok, J. Horvath [et al.] // World Journal of Gastroenterology. - 2016. - Vol. 22(16). - P. 4109 - 4119.

52. Currently Clinical Views on Genetics of Wilson's Disease / C. Chen, B. Shen [et al.] // Chinese Medical Journal. - 2015. - Vol. 128(13). - P. 1826 - 1830.

53. Spectrum of mutations and genotype-phenotype correlation in large scale Chinese patients with Wilson Disease / N. Cheng, H. Wang [et al.] // Clinical Genetics. -2017. - Vol. 92 (1). - P. 69 - 79.

54. A genetic study of Wilson's disease in the United Kingdom [Electronic resource] / A.J. Coffey, M. Durkie [et al.] // Brain. - 2013. - Vol. 136(5). - P. 1476 - 1487. -Mode of access: http://doi.org/10.1093/brain/awt035.

55. Wilson disease: Histopathological correlations with treatment on follow-up liver biopsies / S. Cope-Yokoyama, M.J. Finegold [et al.] // World Journal of Gastroenterology : WJG. - 2010. - Vol. 16(12). - P. 1487 - 1494.

56. Coronado, V.A. New haplotypes in the Bedlington terrier indicate complexity in copper toxicosis / V.A. Coronado [et al.] // Mammalian Genome. - 2003. - Vol. 14(7). - P. 483 - 491.

57. Czlonkowska, A., Gromadzka, G., Chabik, G. Monozygotic female twins discordant for phenotype of Wilson's disease / A. Czlonkowska, G. Gromadzka, G. Chabik // Mov Disord. - 2009. - Vol. 24. - P. 1066 - 1069.

58. Wilson's disease-cause of mortality in 164 patients during 1992-2003 observation period / A. Czlonkowska, B. Tarnacka [et al.] // J Neurol. - 2005. - Vol. 252(6). -P. 698 - 703.

59. Czlonkowska, A., Schilsky, M.L. Wilson Disease / A. Czlonkowska, M.L. Schilsky // Handbook of Clinical Neurology. - 2017. - Vol. 142 (3rd series). - P. 101 - 119.

60. Wilson's disease in southern Brazil: a 40-year follow-up study / R.S. De Bem, D.A. Muzzillo [et al.] // Clinics. - 2011. - Vol. 66(3). - P. 411 - 416.

61. Distinct Wilson's disease mutations in ATP7B are associated with enhanced binding to COMMD1 and reduced stability of ATP7B / P. De Bie, B. van de Sluis [et al.] // Gastroenterol. - 2007. - Vol. 133(4). - P. 1316 - 1326.

62. Molecular pathogenesis of Wilson and Menkes disease: correlation of mutations with molecular defects and disease phenotypes / P. De Bie, P. Muller [et al.] // Journal of Medical Genetics. - 2007. - Vol. 44(11). - P. 673 - 688.

63. Wilson disease: novel mutations in the ATP7B gene and clinical correlation in Brazilian patients / MM. Deguti, J. Genschel [et al.] // Hum Mutat. - 2004. - Vol. 23(4). - P. 398.

64. Solution structure of the N-domain of Wilson disease protein: Distinct nucleotide-binding environment and effects of disease mutations / O. Dmitriev, R. Tsivkovskii [et al.] // Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. - 2006. - Vol. 103(14). - P. 5302 - 5307.

65. Dong, Q.-Y., Wu, Z.-Y. Advance in the pathogenesis and treatment of Wilson disease / Q.-Y. Dong, Z.-Y. Wu // Translational Neurodegeneration. - 2012. - Vol. 1. - P. 23.

66. Influence of short-chain fructo-oligosaccharides (sc-FOS) on absorption of Cu, Zn, and Se in healthy postmenopausal women / V. Ducros, J. Arnaud [et al.] // J Am Coll Nutr. - 2005. - Vol. 24(1). - P. 30 - 37.

67. Frequencies of initial gait disturbances and falls in 100 Wilson's disease patients / K. Dziezyc, T. Litwin [et al.] // Gait Posture. - 2015. - Vol. 42(4). - P. 601 - 603.

68. Diagnostic criteria for acute liver failure due to Wilson disease / C. Eisenbach, O. Sieg [et al.] // World J Gastroenterol. - 2007. - Vol. 13(11). - P. 1711 - 1714.

69. Iron, copper, and zinc transport: inhibition of divalent metal transporter 1 (DMT1) and human copper transporter 1 (hCTR1) by shRNA / A. Espinoza, S. Le Blanc [et al.] // Biological Trace Elem Research. - 2012. - Vol. 146(2). - P. 281 - 286.

70. European Association for Study of Liver. EASL Clinical Practice Guidelines: Wilson's disease /P.Ferenci, A. Czlonkowska [et al.] // J Hepatol. - 2012. - Vol. 56(3). - P. 671 - 685.

71. The cardiomyopathy of Wilson's disease. Myocardial alterations in nine cases / SM. Factor, S. Cho [et al.] // Virchows Arch A Pathol Anat Histol. - 1982. - Vol. 397(3). - P. 301 - 311.

72. Fatemi, N., Sarkar, B. Molecular mechanism of copper transport in Wilson disease Environ / N. Fatemi, B. Sarkar // Health Perspect. - 2002. - Vol. 110. - P. 695 - 698.

73. Fatima, J., Karoli, R., Jain, V. Hypoparathyroidism in a case of Wilson's disease: Rare association of a rare disorder / J. Fatima, R. Karoli, V. Jain // Indian Journal of Endocrinology and Metabolism. - 2013. - Vol. 17(2). - P. 361 - 362.

74. Wilson's Disease: A comprehensive review of the molecular mechanisms / F. Wu, J. Wang [et al.] // Int. J. Mol. Sci. - 2015. - Vol. 16. - P. 6419 - 6431.

75. Ferenci, P. Diagnosis of Wilson disease / P. Ferenci // Handb Clin Neurol. - 2017.

- Vol. 142. - P. 171 - 180.

76. Ferenci, P. Regional distribution of mutations of the ATP7B gene in patients with Wilson disease: impact on genetic testing / P. Ferenci // Hum Genet. - 2006. - Vol. 120(2). - P. 151 - 159.

77. Canine models of copper toxicosis for understanding mammalian copper metabolism / H. Fieten, P.A.J. Leegwater [et al.] // Mamm Genome. - 2012. - Vol. 23. - P. 62 - 75.

78. Forbes, JR., Cox, DW. Copper-dependent trafficking of Wilson disease mutant ATP7B proteins / JR. Forbes, DW. Cox // Hum. Mol. Genet. - 2000. - Vol. 9(13).

- P. 1927 - 1935.

79. Hemolytic anemia in Wilson disease: clinical findings and biochemical mechanisms / SJ. Forman, KS. Kumar [et al.]// Am J Hematol. - 1980. - Vol. 9(3). - P. 269 -275.

80. Frota, N.A.F., Caramelli, P., Barbosa, E.R. Cognitive impairment in Wilson's disease / N.A.F. Frota, P. Caramelli, E.R. Barbosa // Dementia & Neuropsychologia.

- 2009. - Vol. 3(1). - P. 16 - 21.

81. Fuentealba, I.C., Aburto, E.M. Animal models of copper-associated liver disease / I.C. Fuentealba, E.M. Aburto // Comparative Hepatology. - 2003. - Vol. 2. - P. 5.

82. High prevalence of the very rare Wilson disease gene mutation Leu708Pro in the Island of Gran Canaria (Canary Islands, Spain): a genetic and clinical study / L. Garcia-Villarreal, S. Daniels [et al.]// Hepatology. - 2000. - Vol. 32(6). - P. 1329 -1336.

83. Giagheddu, A., Demelia, L., Puggioni, G. Epidemiologic study of hepatolenticular degeneration (Wilson's disease) in Sardinia (1902—1983) / A. Giagheddu, L. Demelia, G. Puggioni [et al.]// Acta Neurol Scand. - 1985. - Vol. 72. - P. 43 - 55.

84. The homozygosity index (HI) approach reveals high allele frequency for Wilson disease in the Sardinian population / A. Gialluisi, S. Incollu [et al.]// European Journal of Human Genetics. - 2013. - Vol. 21(11). - P. 1308 - 1311.

85. Golding, DN., Walshe, JM. Arthropathy of Wilson's disease. Study of clinical and radiological features in 32 patients / DN. Golding, JM. Walshe // Annals of the Rheumatic Diseases. - 1977. - Vol. 36(2). - P. 99 - 111.

86. Gollan, YL., Gollan, TJ. Wilson disease in 1998: genetic, diagnostic and therapeutic aspects / YL. Gollan, TJ. Gollan // J Hepatol. - 1998. - Vol. 28. - P. 28 - 36.

87. Gomes, A., Dedoussis, VG. Geographic distribution of ATP7B mutations in Wilson disease / A. Gomes, VG. Dedoussis // Annals of Human Biology. - 2016. - Vol. 43(1). - P. 1 - 8.

88. Diagnosis of Wilson's disease: an experience over three / P. Gow, R. Smallwood [et al.]// Gut. - 2000. - Vol. 46(3). - P. 415 - 419.

89. Frameshift and nonsense mutations in the gene for ATPase7B are associated with severe impairment of copper metabolism and with an early clinical manifestation of Wilson's disease / G. Gromadzka, HH.-J.Schmidt [et al.]// Clin Genet. - 2005. -Vol. 68(6). - P. 542 - 532.

90. Psychosis in an adolescent with Wilson's disease: A case report and review of the literature / S. Grover, S. Sarkar [et al.]// Indian Journal of Psychiatry. - 2014. - Vol. 56(4). - P. 395 - 398.

91. Molecular pathogenesis of Wilson disease: haplotype analysis, detection of prevalent mutations and genotype-phenotype correlation in Indian patients / A. Gupta, D. Aikath [et al.]// Hum Genet. - 2005. - Vol. 118(1). - P. 49 - 57.

92. Molecular pathogenesis of Wilson disease among Indians: a perspective on mutation spectrum in ATP7B gene, prevalent defects, clinical heterogeneity and implication

towards diagnosis / A. Gupta, I. Chattopadhyay [et al.]// Cell Mol Neurobiol. - 2007.

- Vol. 27(8). - P. 1023 - 1033.

93. Gupta, A., Lutsenko, S. Human copper transporters: mechanism, role in human diseases and therapeutic potential / A. Gupta, S. Lutsenko // Future Medicinal Chemistry. - 2009. - Vol. 1(6). - P. 1125 - 1142.

94. Cellular copper levels determine the phenotype of the Arg875 variant of ATP7B/Wilson disease protein / A. Gupta, A. Bhattacharjee [et al.]// Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America. - 2011. - Vol. 108(13). - P. 5390 - 5395.

95. Han, Y., Zhang, F., Tian, Y., Hu, P., Li, B., & Wang, K. (2014). Selective impairment of attentional networks of alerting in Wilson's Disease [Electronic resource] / Y. Han, F. Zhang [et al.]// PLoS ONE. - 2014. - Vol. 9(6). - P. e100454.

- Mode of access: https://doi.org/10.1371/journal.pone.0100454.

96. Compound overload of copper and iron in patients with Wilson's disease / H. Hayashi, M. Yano [et al.]// Med Mol Morphol. - 2006. - Vol. 39(3). - P. 121 - 126.

97. Heather, J. M., Chain, B. The sequence of sequencers: The history of sequencing DNA / J.M. Heather, B. Chain // Genomics. - 2016. - Vol. 107(1). - P. 1 - 8.

98. Hedera, P. Update on the clinical management of Wilson's disease / P. Hedera // The Application of Clinical Genetics. - 2017. - Vol. 10. - P. 9 - 19.

99. Cognitive profile and structural findings in Wilson's disease: A neuropsychological and MRI-based study / S. Hegde, S. Sinha [et al.]// Neurol India. - 2010. - Vol. 58.

- P. 708 - 713.

100. Hoogenraad, T. Wilson's Disease / T. Hoogenraad. - London, Philadelphia, Toronto, Sydney, Tokyo: W.B. Saunders Company Ltd., 1997. - P. 14 - 24, 72 -73.

101. Hordyjewska, A., Popiolek, L., Kocot, J. The many "faces" of copper in medicine and treatment / A. Hordyjewska, L. Popiolek, J. Kocot // Biometals. - 2014. - Vol. 27(4). - P. 611 - 621.

102. Functional assessment of the carboxy-terminus of the Wilson disease copper-transporting ATPase, ATP7B / G. Hsi, LM. Cullen[et al.]// Genomics. - 2004. - Vol. 83(3). - P. 473 - 481.

103. Epidemiological investigation of Wilson disease in Hanshan county, Anhui Province / WB. Hu, YZ. Han [et al.]// Chin Med J. - 2010. - Vol. 91. - P. 894 - 897.

104. Diverse functional properties of Wilson Disease ATP7B Variants / D. Huster, A. Kühne [et al.]// Gastroenterology. - 2012. - Vol. 142(4). - P. 947 - 956.e5.

105. High copper selectively alters lipid metabolism and cell cycle machinery in the mouse model of Wilson disease / D. Huster, TD. Purnat [et al.]// J Biol Chem. -2007. - Vol. 282. - P. 8343 - 8355.

106. Carrier frequency of Wilson's disease in the Korean population: a DNA-based approach / J-H. Jang, T. Lee [et al.]// Journal of Human Genetics. - 2017. - Vol. 62(9). - P. 815.

107. Kaplan, JH., Lutsenko, S. Copper Transport in Mammalian Cells: Special Care for a Metal with Special Needs / JH. Kaplan, S. Lutsenko // J. Biol. Chem. - 2009. -Vol. 284. - P. 25461 - 25465.

108. Wilson's disease: An endocrine revelation / N. Kapoor, S. Shetty [et al.]// Indian Journal of Endocrinology and Metabolism. - 2014. - Vol. 18(6). - P. 855 - 857.

109. Endocrine studies of the ovulatory disturbances in Wilson's disease (hepatolenticular degeneration) / A. Kaushansky, M. Frydman [et al.]// Fertil Steril. - 1987. - Vol. 47(2). - P. 270 - 273.

110. Fulminant Wilson's disease requiring liver transplantation in one monozygotic twin despite identical genetic mutation / KM. Kegley, MA. Sellers [et al.] // Am J Transplant. - 2010. - Vol. 10. - P. 1325 - 1329.

111. Kenney, SM., Cox, DW. Sequence variation database for the Wilson disease copper transporter, ATP7B / SM. Kenney, DW. Cox // Hum Mutat. - 2007. - Vol. 28(12). - P. 1171 - 1177.

112. The mutation spectrum of hereditary diseases genes in populations of Russia / I. Khidiyatova, V. Akhmetova [et al.] // Proceedings of the World Medical Conference. - 2011. - P. 143 - 148.

113. Kodama, H., Fujisawa, C., Bhadhprasit, W. Inherited Copper Transport Disorders: Biochemical Mechanisms, Diagnosis, and Treatment / H. Kodama, C. Fujisawa, W. Bhadhprasit // Current Drug Metabolism. - 2012. - Vol. 13(3). - P. 237 - 250.

114. Krstic, D., Antonijevic, J., Spiric, Z. Atypical case of Wilson's disease with psychotic onset, low 24 hour urine copper and the absence of Kayser-Fleischer rings / D. Krstic, J. Antonijevic, Z. Spiric // Vojnosanit Pregl. - 2014. - Vol. 71(12). - P. 1155 - 1158.

115. Rodriguez-Castro, K.I., Hevia-Urrutia, F.J., Sturniolo, G.C. Wilson's disease: A review of what we have learned / K.I. Rodriguez-Castro, F.G. Hevia-Urrutia, G.C. Sturniolo // World J Hepatol. - 2015. - Vol. 18.7(29). - P. 2859 - 2870.

116. High frequency of the c.3207C>A (p.H1069Q) mutation in ATP7B gene of Lithuanian patients with hepatic presentation of Wilson's disease [Electronic resource] / L. Kucinskas, J. Jeroch [et al.] // World Journal of Gastroenterology: WJG. - 2008. - Vol. 14(38). - P. 5876 - 5879. - Mode of access: http://doi.org/10.3748/wjg.14.5876.

117. Analysis of most common mutations R778G, R778L, R778W, I1102T and H1069Q in Indian Wilson disease patients: correlation between genotype/ phenotype/ copper ATPase activity / S. Kumar, B. Thapa [et al.] // Mol Cell Biochem. - 2007. - Vol. 294(1-2). - P. 1 - 10.

118. Familial gene analysis for Wilson disease from north-west Indian patients / S. Kumar, BR. Thapa [et al.] // Ann Hum Biol. - 2006. - Vol. 33(2). - P. 177 - 186.

119. Wilson Disease Mutations in the American Population: Identification of Five Novel Mutations in ATP7B / D. Kuppala, J. Deng [et al.] //The Open Hepatology Journal. - 2009. - Vol. 1. - P. 1 - 4.

120. Analysis of the T1288R mutation of the Wilson disease ATP7B gene in four generations of a family: possible genotype-phenotype correlation with hepatic onset

/ L. Leggio, N. Malandrino [et al.] // Dig Dis Sci. - 2007. - Vol. 52. - P. 2570 -2575.

121. Evaluation of the Unified Wilson's Disease Rating Scale (UWDRS) in German Patients with Treated Wilson's Disease / B. Leinweber, J.C. Moller [et al.] // Movement Disorders. - 2008. - Vol. 23(1). - P. 54 - 62.

122. Clinical and molecular characterization of Wilson's disease in China: identification of 14 novel mutations / X.-H. Li, Y. Lu [et al.] // BMC Medical Genetics. - 2011. -Vol. 12(6). - P. 1 - 13.

123. Psychological presentations without hepatic involvement in Wilson disease / JJ. Lin, KL. Lin [et al.] // Pediatr Neurol. - 2006. - Vol. 35. - P. 284 - 286.

124. Linder, MC., Hazegh-Azam, M. Copper biochemistry and molecular biology / MC. Linder, M. Hazegh-Azam // Am J Clin Nutr. - 1996. - Vol. 63(5). - P. 797S - 811S.

125. Psychiatric disturbances as a first clinical symptom of Wilson's disease - case report / T. Litwin, K. Dziezyc [et al.] // Psychiatr. Pol. - 2016. - Vol. 50(2). - P. 337 - 344.

126. Litwin, T., Gromadzka, G., Cz1onkowska, A. Apolipoprotein E gene (APOE) genotype in Wilson's disease: Impact on clinical presentation / T. Litwin, G. Gromadzka, A. Cz1onkowska // Parkinsonism and Related Disorders. - 2012. - Vol. 18. - P. 367 - 369.

127. Correlation of ATP7B genotype with phenotype in Chinese patients with Wilson disease / X.-Q. Liu, Y.-F. Zhang [et al.] // World Journal of Gastroenterology. -2004. - Vol. 10(4). - P. 590 - 593.

128. Molecular characterization of Wilson disease in the Sardinian population - evidence of a founder effect / G. Loudianos, V. Dessi [et al.] // Hum Mutat. - 1999. - Vol. 14(4). - P. 294 - 303.

129. Mutation analysis in patients of Mediterranean descent with Wilson disease: identification of 19 novel mutations / G. Loudianos, V. Dessi [et al.] // J Med Genet. - 1999. Vol. 36. - P. 833 - 836.

130. Cellular multitasking: The dual role of human Cu-ATPases in cofactor deliveryand intracellular copper balance / S. Lutsenko, A. Gupta [et al.] // Archives of Biochemistry and Biophysics. - 2008. - Vol. 476. - P. 22 - 32.

131. Lutsenko, S. Modifying factors and phenotypic diversity in Wilson's disease / S. Lutsenko // Annals of the New York Academy of Sciences. - 2014. - Vol. 1315. -P. 56 - 63.

132. Recent advance in the molecular genetics of Wilson disease and hereditary hemochromatosis / T. Lv, X. Li [et al.] // European Journal of Medical Genetics. -2016. - Vol. 59(16). - P. 532 - 539.

133. MacPherson, I.S., Murphy, M.E.P. Type-2 copper-containing enzymes / I.S. MacPherson, M.E.P. Murphy // Cellular and Molecular Life Sciences. - 2007. - Vol. 64(22). - P. 2887 - 2899.

134. Majumdar, R., Al-Jumah, M., Zaidan, R. A rare homozygous missensee mutation in ATP7B exon 19 in a case of Wilson disease / R. Majumdar, M. Al-Jumah, R. Zaidan // Eur Neurol. - 2004. - Vol. 51(1). - P. 52 - 54.

135. Malik, A., Khawaja, A., Sheikh, L. Wilson's disease in pregnancy: case series and review of literature / A. Malik, A. Khawaja, L. Sheikh // BMC Research Notes. -2013. - Vol. 6. - P. 421.

136. Wilson's disease caused by alternative splicing and Alu exonization due to a homozygous 3039-bp deletion spanning from intron 1 to exon 2 of the ATP7B gene / E. Mameli, MB. Lepori [et al.] // Gene. - 2015. - Vol. 569(2). - P. 276 - 279.

137. Mardis, ER. Next-generation DNA sequencing methods / ER. Mardis // Annu Rev Genomics Hum Genet. - 2008. - Vol. 9. - P. 387 - 402.

138. Mutation analysis of Wilson disease in the Spanish population - identification of a prevalent substitution and eight novel mutations in the ATP7B gene / E. Margarit, V. Bach [et al.] // Clin Genet. - 2005. - Vol. 68(1). - P. 61 - 68.

139. A Delicate Balance: Homeostatic Control of Copper Uptake and Distribution / M.M.O. Pena, J. Lee [et al.] // J. Nutr. - 1999. - Vol. 129(7). - P. 1251 - 1260.

140. Liver transplantation for fulminant Wilson's disease in children / M. Markiewicz-Kijewska, M. Szymczak [et al.] // Ann Transplant. - 2008. - Vol. 13(2). - P. 28 -31.

141. La Fontaine S: Clusterin and COMMD1 independently regulate degradation of the mammalian copper ATPases Atp7A and Atp7B / S. Materia, MA.Cater [et al.] // J Biol Chem. - 2012. - Vol. 287(4). - P. 2485 - 2499.

142. Matveeva, T., Zaklyazminskaya, E., Polyakov, A. The molecular-genetic analysis of ATP7B gene at the Russian patients with Wilson disease / T. Matveeva, E. Zaklyazminskaya, A. Polyakov // European journal of human genetics. Ann Hum Biol. - 2016. - Vol. 43(1). - P. 1 - 8.

143. Wilson Disease: epigenetic effects of choline supplementation on phenotype and clinical course in a mouse model / V. Medici, D.A. Kieffer [et al.] // Epigenetics. -2016. - Vol. 11(11). - P. 804 - 818.

144. Clinical presentation and mutations in Danish patients with Wilson disease / L.B. M0ller, N. Horn [et al.] // European Journal of Human Genetics. - 2011. - Vol. 19(9). - P. 935 - 941.

145. Wilson's Disease and the Fanconi Syndrome, QJM / H.G. Morgan, W.K. Stewart [et al.] // An International Journal of Medicine. - 1962. - Vol. 31(3). - P. 361 - 384.

146. XIAP Is a copper binding protein deregulated in Wilson's disease and other copper toxicosis disorders / AR. Mufti, E. Burstein [et al.] // Mol Cell. - 2006. - Vol. 21(6). - P. 775 - 785.

147. Endemic Tyrolean infantile cirrhosis: an ecogenetic disorder / T. Muller, H. Feichtinger [et al.] // Lancet. - 1996. - Vol. 347(9005). - P. 877 - 880.

148. Nakada, SY., Brown, MR., Rabinowitz, R. Wilson's disease presenting as symptomatic urolithiasis: A case report and review of the literature / SY. Nakada, MR. Brown, R. Rabinowitz // J Urol. - 1994. - Vol. 152. - P. 978 - 979.

149. Copper in Drinking Water [Electronic resource] / National Research Council (US) Committee on Copper in Drinking Water. - Washington (DC): National Academies

Press (US), 2000. - 147 p. - Mode of access: https://www.nap.edu/read/9782/chapterZ1.

150. Nayak, N. C., Chitale, A. R. Indian childhood cirrhosis (ICC) & ICC-like diseases: The changing scenario of facts versus notions / N. C. Nayak, A. R. Chitale // The Indian Journal of Medical Research. - 2013. - Vol. 137(6). - P. 1029-1042.

151. Wilson's disease presenting in a family with an apparent dominant history of tremor / D. Nicholl, P. Ferenci, C. Polli, M. Burdon, H. Pall // Journal of Neurology, Neurosurgery, and Psychiatry. - 2001. - Vol. 70(4). - P. 514-516.

152. Diagnostic challenges of Wilson's disease presenting as acute pancreatitis, cholangitis, and jaundice / E. Nussinson, A. Shahbari, F. Shibli, E. Chervinsky, P. Trougouboff, A. Markel // World Journal of Hepatology. - 2013. - Vol. 5(11). - P. 649-653.

153. Wilson's disease in Ireland: increasing prevalence over 40 years / M. O'Brien, K. Kinsella, M. Reilly [et al.] // J Neurol Neurosurg Psychiatry. - 2012. - Vol. 83. - P. A13.

154. Mutational analysis of ATP7B and genotype-phenotype correlation in Japanese with Wilson's disease / T. Okada, Y. Shiono, H. Hayashi, H. Satoh, T. Sawada, A. Suzuki, Y. Takeda, M. Yano, K. Michitaka, M. Onji, H. Mabuchi // Hum Mutat. - 2000. -Vol. 15(5). - P. 454-462.

155. Estimate of the frequency of Wilson's disease in the US Caucasian population: a mutation analysis approach / L. Olivarez, M. Caggana, K.A. Pass, P. Ferguson, G.J. Brewer // Ann Hum Genet. - 2001. - Vol. 65. - P. 459-463.

156. Estimation of Allele Frequencies and Population Incidence of Wilson Disease in Brazil / P.A. Otto, M.M. Deguti, T.F. Araujo, E.R. Barbosa, R.S.D. Bem [et al.] // Prensa Med Argent. - 2016. - Vol. 102. - P. 5.

157. Parekh, J. R., Agrawal, P. R. Wilson's disease: "face of giant panda" and "trident" signs together / J. R. Parekh, P. R. Agrawal // Oxford Medical Case Reports. - 2014. - Vol. 1. - P. 16-17.

158. Wilson's disease in Scotland / R. H. Park, P. McCabe, G. S. Fell, R. I. Russell // Gut.

- 1991. - Vol. 32(12). - Vol. 1541-1545.

159. Biometals in rare neurodegenerative disorders of childhoodn / S. J. Parker, J. Koistinaho, A. R. White, K. M. Kanninen // Frontiers in Aging Neuroscience. -2013. - Vol. 5. - P. 14.

160. Pena, M.M.O., Lee, J. Thiele, D.J. A Delicate Balance: Homeostatic Control of Copper Uptake and Distribution / M.M.O. Pena, J. Lee, D.J. Thiele // J. Nutr. - 1999.

- Vol. 129(7). - P. 1251-1260.

161. Wilson disease—keeping the bar for diagnosis raised / R.E. Perri, S.H. Hahn, M.J. Ferber, P.S. Kamath // Hepatology. - 2005. - Vol. 42(4). - P. 974.

162. Pfeiffer, R.F. Wilson's Disease / R.F. Pfeiffer // Semin Neurol. - 2007. - Vol. 27(2).

- P. 123-132.

163. Phillips, M.C. Apolipoprotein E isoforms and lipoprotein metabolism / M.C. Phillips // IUBMB Life. - 2014. - Vol. 66(9). - P. 616-623.

164. Poon, K.S., Tan, K.M. Targeted next-generation sequencing of the ATP7B gene for molecular diagnosis of Wilson disease / K.S. Poon, K.M. Tan, E.S. Koay // Clinical Biochemistry. - 2016. - Vol. 49(1-2). - P. 166-171.

165. Unique genetic profile of hereditary hemochromatosis in Russians: high frequency of C282Y mutation in population, but not in patients / E.S. Potekhina, A.V. Lavrov, L.M. Samokhodskaya, A.Y. Efimenko [et al.] // Blood Cells Mol Dis. - 2005. - Vol. 35(2). - P. 182-188.

166. Characteristics and prevalence of Wilson's disease: A 2013 observational population-based study in France / A. Poujois, F. Woimant, S. Samson [et al.] // Clin Res Hepatol Gastroenterol. - 2017. - Vol. 42(1). - P. 57-63.

167. Haemolytic onset of Wilson disease in a patient with homozygous truncation of ATP7B at Arg1319 / M. Prella, R. Baccala, J.D. Horisberger [et al.] // Br J Haematol.

- 2001. - Vol. 114(1). - P. 230-232.

168. Rahul, K., Anandh, K., Sonal, G. Wilson's disease masquerading as rheumatoid arthritis / K. Rahul, K.Anandh, G. Sonal // Indian Journal of Medical Specialities. -2015. - Vol. 6. - Issue 1. - P. 33-35.

169. Wilson's disease in India: clinical and laboratory manifestations in thirty patients / K. Raiamani, R.N. Sharma, G. John, J.M. Raju [et al.] // J Assoc Physicians India. -1987. - Vol35(6). - P. 438-441.

170. An Early Sign of Wilson's Disease: Dysarthria / J.L. Ratan, C. Urmi, G. Surender, P. Biplab, L. Mangala // Journal of Clinical and Diagnostic Research. - 2014. - Vol. 8(3). - P. 188.

171. Roberts, E.A. Using metalloproteomics to investigate the cellular physiology of copper in hepatocytes / E.A. Roberts // Metallomics. - 2012. - Vol. 4(7). - P. 633640.

172. Roberts, E.A., Robinson, B.H. Mitochondrial structure and function in the untreated Jackson toxic milk (tx-j) mouse, a model for Wilson disease / E.A. Roberts, B.H. Robinson, S. Yang // Mol Genet Metab. - 2008. - Vol. 93. - P. 54-65.

173. Roberts, E. A., Schilsky, M. L. Diagnosis and treatment of Wilson disease: An update / E. A. Roberts, M. L. Schilsky // Hepatology. - 2008. - Vol. 47. - P. 20892111.

174. Dietary copper restriction in Wilson's disease / K. Russell, L.K. Gillanders, D.W. Orr, L.D. Plank // Eur J Clin Nutr. - 2018. - Vol. 72(3). - P. 326-331.

175. ATP7B mutations in families in a predominantly Southern Indian cohort of Wilson's disease patients / S. Santhosh, R.V. Shaji, C.E. Eapen [et al.] // Indian J Gastroenterol. - 2006. - Vol. 25(6). - P. 277-282.

176. Variations in genotype-phenotype correlations in phenylketonuria patients / L.L. Santos, C.G. Fonseca, A.L. Starling [et al.] // Genet Mol Res. - 2010. - Vol. 9(1). -P. 1-8.

177. Scheiber, I.F., Bruha, R. Pathogenesis of Wilson disease / I.F. Scheiber, R. Bruha, P. Dusek // Handb Clin Neurol. - 2017. - Vol. 142. - P. 43-55.

178. The impact of apolipoprotein E genotypes on age at onset of symptoms and phenotypic expression in Wilson's disease / M. Schiefermeier, H. Kollegger, C. Madl [et al.] // Brain. - 2000. - Vol. 123. - P. 585-590.

179. Seo, J. K. Diagnosis of Wilson Disease in Young Children: Molecular Genetic Testing and a Paradigm Shift from the Laboratory Diagnosis / J. K. Seo // Pediatric Gastroenterology, Hepatology & Nutrition. - 2012. - Vol. 15(4). - P. 197-209.

180. Identification and analysis of mutations in the Wilson disease gene (ATP7B): population frequencies, genotype-phenotype correlation, and functional analyses / A. B. Shah, I. Chernov, H. T. Zhang [et al.] // American Journal of Human Genetics. - 1997. - Vol. 61(2). - P. 317-328.

181. Wilson's disease in children and adolescents: diagnosis and treatment / S.A. Socio, A.R. Ferreira, E.D.T. Fagundes [et al.] // Revista Paulista de Pediatria. - 2010. -Vol. 28(2). - P. 134-140.

182. The H1069Q mutation in ATP7B is associated with late and neurologic presentation in Wilson disease: results of a meta-analysis / J.M. Stapelbroek, C.W. Bollen, J.K. van Amstel [et al.] // J Hepatol. - 2004. - Vol. 41. - P. 758-763.

183. Wilson's disease in patients presenting with liver disease: a diagnostic challenge / P. Steindl, P. Ferenci, H.P. Dienes [et al.] // Gastroenterology. - 1997. - Vol. 113. -P. 212-218.

184. Sternlieb, I. Wilson's disease / I. Sternlieb // Clin Liver Dis. - 2000. - Vol. 4(1). -P. 229-239.

185. Analysis of the human homologue of the canine copper toxicosis gene MURR1 in Wilson disease patients / B. Stuehler, J. Reichert, W. Stremmel, M. Schaefer // J Mol Med. - 2004. - Vol. 82(9). - P. 629-634.

186. Wilson's disease - A rare cause of renal tubular acidosis with metabolic bone disease / D.K.S. Subrahmanyam, M. Vadivelan, S. Giridharan, N. Balamurugan // Indian Journal of Nephrology. - 2014. - Vol. 24(3). - P. 171-174.

187. Tapiero, H., Townsend, D.M. Trace elements in human physiology and pathology / H. Tapiero, D.M. Townsend, K.D. Tew // Copper. Biomed Pharmacother. - 2003. -Vol. 57(9). - P. 386-398.

188. Current state of Wilson disease patients in Central Japan / Y Tatsumi., A. Hattori, H. Hayashi [et al.] // Intern Med. - 2010. - Vol. 49. - P. 809-815.

189. Prevalence of metabolic bone disease in Wilson's disease (WD) patients Centro Hospitalar do Porto, Porto, Portugal / S. Teixeira, J. Domingos, R. Carvalho, H.P. Miranda, M. Magalhaes // Endocrine Abstracts. - 2011. - Vol. 26. - P. 535.

190. Spectrum of mutations in the Wilson disease gene (ATP7B) in the Bulgarian population / T Todorov., A. Savov, H. Jelev [et al.] // Clin Genet. - 2005. - Vol. 68(5). - P. 474-476.

191. Phenotype-Genotype Correlation in Wilson Disease in a Large Lebanese Family: Association of c.2299insC with Hepatic and of p. Ala1003Thr with Neurologic Phenotype / J. Usta, A. Wehbeh, K. Rida [et al.] // PLoS One. - 2014. - Vol. 9(11).

- P. e109727.

192. Valentine, J. S., Gralla, E. B. Copper-Containing Molecules / J. S. Valentine, E. B. Gralla // Advances in Protein Chemistry. - Academic Press, 2002.

193. Identification of a new copper metabolism gene by positional cloning in a purebred dog population / B. van de Sluis, J. Rothuizen, P.L. Pearson [et al.] // Hum Mol Genet 2002. - Vol. 11(2). - P. 165-173.

194. Vilensky, J. A., Robertson, W. M. Denny-Brown, Wilson's disease, and BAL (British antilewisite [2,3-dimercaptopropanol]) / J. A. Vilensky, W. M. Robertson, Sid Gilman // Neurology. - 2002. - Vol. 59(6). - P. 914-016.

195. Mutation analysis of the ATP7B gene and genotype/phenotype correlation in 227 patients with Wilson disease / S. Vrabelova, O. Letocha, M. Borsky, L. Kozak // Mol Genet Metab. - 2005. - Vol. 86(1-2). - P. 277-285.

196. Walshe, J.M. Cause of death in Wilson disease / J.M. Walshe // Mov Disord. - 2007.

- Vol. 22(15). - P. 2216-2220.

197. Walshe, J.M. History of Wilson's disease: 1912 to 2000 / J.M. Walshe // Mov Disord.

- 2006. - Vol. 21(2). - P. 142-147.

198. Mutation analysis and characterization of alternative splice variants of the Wilson disease gene ATP7B / L. Wan, C.H. Tsai, C.M. Hsu [et al.] // Hepatology. - 2010.

- Vol. 52(5). - P. 1662-1670

199. Wapnir, R.A. Copper absorption and bioavailability / R.A. Wapnir // Am J Clin Nutr.

- 1998. - Vol. 67(5 Suppl). - P. 1054S-1060S.

200. Superficial siderosis of the central nervous system in a patient with hemochromatosis and Wilson's disease / C. Warnke, K. Andersen, H.P. Hartung, H. Hefter // Dtsch Med Wochenschr. - 2011. - Vol. 136(14). - P. 721-724.

201. Localization of the Wilson disease protein in murine intestine / K.H. Weiss, J. Wurz, D. Gotthardt, U. Merle, W. Stremmel, J. Füllekrug // J Anat. - 2008. - Vol. 213(3).

- P. 232-240.

202. Renal stones in Wilson's disease / D.O. Wiebers, D.M. Wilson, R.A. McLeod, N.P. Goldstein // Am J Med. - 1979. - Vol. 67(2). - P. 249-254.

203. Mutation analysis and the correlation between genotype and phenotype of Arg778Leu mutation in chinese patients with Wilson disease / Z.Y. Wu, N. Wang [et al.] // Arch Neurol. - 2001. - Vol. 58(6). - P. 971-976.

204. Yohe, S., Thyagarajan, B. Review of Clinical Next-Generation Sequencing / S. Yohe, B.Thyagarajan // Arch Pathol Lab Med. - 2017. - Vol. 141(11). - P. 15441557.

205. Yoo, H.W. Identification of novel mutations and the three most common mutations in the human ATP7B gene of Korean patients with Wilson disease / H.W. Yoo //Genet Med. - 2002. - Vol. 4(6 Suppl). - P. 43S-48S.

206. Clinical features and outcome in patients with osseomuscular type of Wilson's disease / H. Yu, J.-J. Xie [et al.] // BMC Neurology. - 2017. - Vol. 17. - P. 34.

207. Prevalence of ATP7B Gene Mutations in Iranian Patients With Wilson Disease / N. Zali, S. R. Mohebbi, S. Esteghamat [et al.] // HepatitisMonthly. - 2011. - Vol. 11(11). - P. 890-894.

208. 1000 GenomesProject - база данных вариантов, найденных при геномном секвенировании индивидуумов из 26 популяций [Электронный ресурс]. -Режим доступа: http://browser.1000genomes.org/index.html.

209. Exome Aggregation Consortium - база данных вариантов, найденных при полноэкзомном секвенировании образцов ДНК 61 486 неродственных индивидуумов [Электронный ресурс]. - Режим доступа: http : //exac.broadinstitute.org.

210. База данных: Менделевское наследование у человека [Электронный ресурс]. -Режим доступа: https://www.omim.org/entry/277900.

211. База данных Университета Альберты (Канада) по мутациям в гене ATP7B [Электронный ресурс]. - Режим доступа: http : //www.wilsondisease.med.ualberta.ca.

212. База данных, содержащая статистику заболеваемости по различным нозологиям [Электронный ресурс]. - Режим доступа: http://www.rightdiagnosis.eom/w/wilsons_disease/stats-country.htm.

ПРИЛОЖЕНИЕ 1.

Перечень клинических показателей, учитываемых в формализованном виде.

Клинические проявления при первичном обследовании

• Жалобы при манифестации заболевания

• Дебютный симптом

• Форма БВК (абдоминальная, поражение ЦНС, смешанная)

• Тип дебюта заболевания(декомпенсация цирроза печени, фульминантный гепатит, выявление повышения АЛТ/ АСТ, внепеченочная патология

• Возраст манифестации (когда проявились первые признаки БВК)

• Возраст установления диагноза БВК

• Опоздание диагноза

• Поражение печени на момент установления диагноза БВК (хронический гепатит, цирроз печени)

• Наличие цирроза печени

• Класс цирроза печени по ЦП по Child-Pugh (А, В, С)

• Наличие портальной гипертензии

• Наличиеварикозного расширения вен пищевода

• Наличие кольца Кайзера-Флейшера

• Наличие отечно-асцитического синдрома

• Наличие катаракты

• Наличие поражение почек

• Наличие гемолиза

• Наличие анемии

• Наличие тромбоцитопения

• Наличие артралгии

• Наличие геморрагического синдрома

• Наличие психических расстройств

• Наличие неврологических расстройств

• Наличие гормональных нарушений

Данные лабораторныхи инструментальныхисследований при первичном обследовании в Клинике

• Общий анализ крови (Нв, RBC, WBC, PLT, СОЭ)

• Общий анализ мочи (относительная плотность, наличие белка, эритроцитов, лейкоцитов, глюкозы, солей)

• Биохимический анализ крови (АСТ, АЛТ , ЩФ, ГГТ, ХЭ, общий билирубин, общий белок, альбумин)

• Ультразвуковое исследование (наличие гепатомегалии, спленомегалии, асцита, признаков портальной гипертензии, диффузных изменений

_печени)_

• Анализ показателей обмена меди (церулоплазмин, суточная экскреция

_меди в моче)_

Клинические проявления на момент осмотра через 2 и более года после начала лечения_

• Жалобы на момент осмотра_

• Наличие цирроза печени_

• Наличиеварикозного расширения вен пищевода_

• Хирургическое лечение по поводу варикозного расширения вен _пищевода_

• Наличие отечно-асцитического синдрома_

• Наличие кольца Кайзера-Флейшера_

• Наличие психических расстройств_

• Наличие неврологических расстройств_

• Наличие поражение почек_

• Наличие гормональных нарушений_

• Наличие сопутствующих заболеваний_

Данные лабораторных и инструментальных исследований при повторном обследовании через 2 и более года после начала лечения_

• Общий анализ крови (Нв, RBC, WBC, PLT, СОЭ)_

• Общий анализ мочи (относительная плотность, наличие белка,

_эритроцитов, лейкоцитов, глюкозы, солей)_

• Биохимический анализ крови (АСТ, АЛТ, ЩФ, ГГТ, ХЭ, общий _билирубин, общий белок, альбумин)_

• Ультразвуковое исследование (наличие гепатомегалии, спленомегалии, асцита, признаков портальной гипертензии, диффузных изменений

_печени)_

• Анализ показателей обмена меди (церулоплазмин, суточная экскреция

_меди в моче)_

Гинекологический анамнез на момент осмотра через 2 и более года после начала лечения_

• Наличие нарушений менструального цикла_

• Количество беременностей_

• Количество детей_

• Спонтанные прерывания беременности в анамнезе_