Роль коллаген-специфических интегринов в апоптозе и инвазии опухолевых клеток тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, кандидат биологических наук Козлова, Надежда Ивановна

• Козлова, Надежда Ивановна
• кандидат биологических наук
• 2002

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Козлова, Надежда Ивановна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.5

I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.8

Глава 1. Структура интегринов.8

1.1. Структура а-субъединиц.8

1.2. Структура (3-субъединиц.1.10

1.3. Надмолекулярная структура интегриновых димеров в плазматической мембране.11

Глава 2. Функции интегринов.13

2.1. Лигандная специфичность.13

2.2. Роль интегринов в организации фокального контакта.15

2.3. Роль интегринов в эмбриогенезе, дифференцировке и пролиферации клеток.16

2.4. Механизмы внутриклеточной сигнализации с участием интегринов. 18

2.4.1 Роль фосфокиназы клеточного контакта.,.19

2.4.2. Роль других фосфокиназ.21

Глава 3. Роль интегринов в апоптотической гибели клеток.22

3.1. Субстрат-зависимый апоптоз - аноикис.23

3.2. Механизмы внутриклеточной сигнализации при аноикисе .25

3.3. Роль индивидуальных интегринов в аноикисе.27

3.4. Роль интегрина avP3 в аноикисе.28

Глава 4. Роль интегринов в механизмах злокачественного роста.29

4.1. Изменения матрикс-клеточных взаимодействий и интегринов при онкогенезе.30

4.2. Изменения матрикс-клеточных взаимодействий и интегринов при инвазии и метастазировании опухолей.34

4.3. Роль интегрина avP3 в инвазии и метастазировании опухолей.37

II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.40

II. 1 Буферные растворы и реагенты.40

11.2 Клеточные модели.1.41

11.3 Методы исследования.42

III. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.48

Часть I. Исследование интегринов опухолевых клеток, различающихся по субстратной зависимости апоптоза.48

Глава 1. Получение клеточных популяций, различающихся по чувствительности к аноикису, и определение их сродства к белкам матрикса.48

1.1. Определение чувствительности клеток Сасо-2 к аноикису.48

1.2. Получение аноикис-резистентных клеток.51

1.3. Адгезия аноикис-чувствительных и аноикис-резистентных клеток на белках матрикса.52

Глава 2. Экспрессия интегринов в аноикис-чувствительных и аноикис-резистентных клетках.53

2.1. Исследование экспрессии интегринов в клеточной мембране аноикис-чувствительных и аноикис-резистентных клетках.53

2.2. Количественный анализ поверхностной экспрессии интегринов.54

2.3. Анализ экспрессии генов av- и (33-субъединиц в аноикис-чувствительных и аноикис-резистентных клетках.56

Глава 3. Влияние усиления или торможения активности интегрина av[}3 на аноикис клеток Сасо-2.58

3.1. Влияние активации avp3.58

3.2. Влияние торможения трансляции мРНК av-субъединицы.62

Часть II. Исследование интегринов онкотрансформированных фибробластов, различающихся по инвазии и метастазированию.64

Глава 1. Сродство к белкам матрикса и экспрессия интегринов ВСР-трансформированными фибробластами с различной метастатической активностью .65

1.1.Адгезия на субстратах из белков матрикса.65

1.2. Поверхностная экспрессия интегринов в линиях ВСР-трансформированных фибробластов, различающихся по метастатической активности.68

Глава 2. Исследование инвазивной активности и продукции матрикс-специфических коллагеназ в линиях ВСР-трансформированных фибробластов с различной метастатической активностью.70

2.1. Исследование инвазии в гель из белков внеклеточного матрикса.71

2.2. Исследование коллагенолитических ферментов.72

Глава 3. Роль интегринов в инвазии ВСР-трансформированных фибробластов и продукции ММП-2.75

3.1. Эффект ингибирования тирозиновых фосфокиназ.75

3.2. Эффект стимулирования интегринов субстратом и ингибирования антагонистами.77

IV. ОБСУЖДЕНИЕ.82

ВЫВОДЫ.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Роль коллаген-специфических интегринов в апоптозе и инвазии опухолевых клеток»

Многочисленные литературные данные свидетельствуют о том, что механизмы апоптоза — программированной гибели клеток (клеточного "самоубийства") и онкогенеза взаимосвязаны. Основные функции апоптоза состоят в поддержании сбалансированного уровня клеточных популяций в тканях и в удалении из организма патологических, потенциально опасных клеток.

Эта "профилактическая" роль апоптоза имеет первостепенное значение для самозащиты организма от злокачественных заболеваний. Система апоптоза отслеживает и "выбраковывает" клетки, несущие те или иные модификации в генетическом аппарате, которые, в случае поломки этой системы, наследуются в клеточном потомстве. При накоплении этих мутаций и их локализации в определенных I генах клетки приобретают способность к автономной, неконтролируемой пролиферации и образованию опухолей.

Апоптоз и онкогенез объединяет общность многих сигнальных путей, контролирующих поведение клеток. В этих сигнальных системах участвуют внутриклеточные и внеклеточные "генераторы" и проводники сигналов. Среди внеклеточных факторов, регулирующих рассматриваемые процессы, ключевая роль принадлежит внеклеточному матриксу и сигналам, генерируемым при матрикс-клеточных взаимодействиях [Ruoslahti, Reed,1994; Bates et.al., 1995; Sheppard, 1996; Frisch, Ruoslahti, 1997].

Молекулярные основы, определяющие роль матрикса в апоптозе и онкогенезе, стали проясняться с открытием и выявлением свойств интегринов - рецепторов клеточной мембраны, которые являются основными посредниками между матриксом и клеткой в адгезионных взаимодействиях и в проведении сигналов от макромолекул матрикса.

Специфическая роль интегринов в клеточной гибели состоит в их участии в т.н. субстрат-зависимом апоптозе. Некоторые типы клеток при разрыве связи с природным субстратом — белками матрикса - подвергаются апоптозу. Оказалось, что этот тип гибели, получивший название аноикиса (по-гречески "бездомность"), обусловлен нарушением интегрин-опосредованных сигналов, которые спасают клетки от апоптоза [Frisch, Ruoslahti, 1997; Cardone et.al., 1997; Khwaja, Downward, 1997]. Развитие этого направления привело к представлению, что интегрины выполняют в клетке исключительно защитную, спасающую от апоптоза функцию.

Другое направление в исследовании интегринов показало, что эти рецепторы осуществляют очень важную роль в онкогенной трансформации клеток, опухолевом росте и злокачественной прогрессии опухолевых клеток. Одним из проявлений злокачественного роста являются нарушения адгезионного сродства клеток к внешней среде, формируемой матриксом. Установлено, что эти изменения обусловлены модификациями в биосинтезе и-экспрессии на клеточной поверхности определенных интегринов [Hynes, Yamada, 1982; Danen et.al, 1993; Komada, 1993; Fields et.al., 1993; Giancotti, Mainiero, 1994]. Например, туморогенная активность некоторых линий клеток меланомы находится в прямой зависимости от их сродства к белку матрикса витронектину и от экспрессии витронектин-специфического интегрина. Антитела к этому рецептору тормозят развитие опухоли у животных.

Существенными являются также достижения в изучении участия интегринов в механизмах злокачественной прогрессии опухолей - приобретении опухолевыми клетками способности к инвазии и метастазированию. Успех в этой области привел к разработке антиметастатических препаратов, действие которых основано на подавлении адгезивных и сигнальных функций некоторых интегринов.

В то же время данные о роли интегриновых рецепторов в апоптозе и онкогенезе во многом не полны и часто противоречивы. Большая часть обширного семейства интегринов (свыше 20 рецепторов) практически не исследована. Сведения, касающиеся более детально охарактеризованных интегринов, показывают, что отдельный рецептор может обладать различными свойствами в клетках разных типов. Например, экспрессия каждого из интегринов изменяется в сторону усиления или ослабления при развитии метастатического фенотипа. Однако ни один рецептор не является абсолютным маркером опухолевой прогрессии, поскольку не обнаружено ни одной модификации любого из них, которая проявлялась бы во всех исследованных линиях. Для одних и тех же интегринов показано увеличение экспрессии в одних метастазирующих клетках (по сравнению с не метастазирующими) и уменьшение в других. Подобная неоднозначность результатов выявляется при изучении роли интегринов в апоптозе.

Эти противоречия обусловлены особенностью экспрессии и лигандными характеристиками интегринов. Все типы клеток экспрессируют в поверхностной мембране не один, а, как правило, набор (спектр) этих рецепторов. С другой стороны, каждый белок матрикса является лигандом для нескольких интегринов. Это приводит к тому, что многие рецепторы часто "взаимозаменяемы" как при взаимодействии клетки 7 i с матриксом, так и в проведении сигналов, регулирующих поведение клеток. В то же время установлено, что одни и те же рецепторы обладают неодинаковыми функциями в клетках разных типов [Hall et.al., 1990; Lallier et.al.,1992; Pfaff et.al.,1994; Colognato-PykeetaL, 1995].

Какие механизмы определяют уникальность и сходство индивидуальных представителей интегринового семейства, каков вклад отдельных интегринов и всего спектра рецепторов, экспрессируемых клеткой, в физиологических реакциях и их патологических отклонениях, какова роль матрикса в этих процессах - эти проблемы во многом не выяснены и их решение является важной и актуальной задачей.

Целью настоящей работы явилось исследование коллаген-специфических интегринов как посредников в регулировании реакций, лежащих в основе субстрат-зависимого апоптоза и метастатической активности опухолевых клеток. Задачи работы сводились к следующему:

1. Получение популяций опухолевых клеток, резистентных к субстрат-зависимому апоптозу.

2. Исследование экспрессии коллаген-специфических интегринов в аноикис-чувствительных и резистентных популяциях.

3. Определение роли сигнальной функции коллаген-специфических интегринов в аноикисе.

4. Исследование экспрессии интегринов в линиях онкотрансформированных фибробластов, различающихся по спонтанному метастазированию.

5. Исследование роли коллаген-специфических интегринов в • механизмах инвазии онкотрансформированных фибробластов.

I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ Глава 1. Структура интегринов

Все интегрины характеризуются определенными общими структурными свойствами [Hynes, 1992; ЕЫе, 1997]. Каждый рецептор является гетеродимером, состоящим из а- и (3-субъединиц, которые связаны между собой нековалентными связями. Каждая субъединица представляет собой интегральный трансмембранный (пересекающий плазматическую мембрану) полипептид 1-го типа (т.е. N-конец пептида расположен вне клетки, а С-конец обращен в цитоплазму). Соответственно, каждая субъединица состоит из трех доменов - гликозилированного внеклеточного экзодомена, составляющего более 90% молекулы; -гидрофобного трансмембранного домена, фиксирущего рецептор в мембране; эндо- (или цито) домена, локализованного I в цитоплазме (рис.1).

12 -15 нм

8 нм

12 -15 нм мембрана

Рис.1. Схема молекулярной структуры интегринов

Темная область - участок связывания лиганда, формируемый обеими субъединицами. Взаимодействие с лигандом зависит от двухвалентных катионов, участки связывания которых (М++) расположены в а-субъединице

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Козлова, Надежда Ивановна

ВЫВОДЫ

1. Разработан метод получения клеточных популяций, характеризующихся высоким уровнем резистентности к субстрат-зависимому апоптозу и представляющих удобную модель для изучения механизмов этого типа апоптоза.

2. Коллаген- и витронектин-специфический интегрин шфЗ обладает способностью опосредовать сигналы, стимулирующие субстрат-зависимый апоптоз.

3. Экспрессия коллаген-специфических рецепторов al(31, a2(31 и avp3 в мембране онкотрансформированных фибробластов, образующих первичные опухоли в окружении интерстициальных типов коллагена, резко возрастает при приобретении этими клетками высокой активности в спонтанном метастазировании.

4. Инвазивная активность онкотрансформированных фибробластов, и их активность в продукции коллагеназы ММП-2 контролируются сигналами, опосредуемыми интегрином софЗ и тирозиновыми фосфокиназами.

5. На основании полученных данных выдвинуто предположение о том, что в развитии инвазивного фенотипа существенную роль играет не отдельный рецептор, а соответствие между типом окружающего клетки матрикса, спектром специфических для данного матрикса интегринов, их адгезивными и сигнальными свойствами.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Козлова, Надежда Ивановна, 2002 год

1. Берман А.Е. Особенности биосинтеза белков экстрацеллюлярного матрикса при опухолевом росте. Биохимия. 1985, 50, 1763-1781.

2. Васильев Ю.М., Гельфанд И.М. Взаимодействие нормальных и неопластических клеток со средой. М.: Наука. 1981.

3. Тинт И.С., Нейфах А.А., Бершадский А.Д. Фокальные контакты и цитоскелет. Цитология. 1987, 29,739-748.

4. Уманский С.Р. Мол. биология. Апоптоз: молекулярные и клеточные механизмы. 1996, 30,487-502.

5. Akiyama S.K., Yamada К.М. Fibronectin. Adv. Enzymol. Relat. Areas Mol. Biol. 1987, 59, 1-57.

6. Akiyama S.K., Yamada S.S., Yamada K.M., LaFlamme S.E. Transmembrane signaltransduction by integrin cytoplasmic domains expressed in single-subunit chimeras. J. Biol. Chem. 1994,269,15961-15964.

7. Altruda F, Cervella P, Tarone G et.al. A human integrin (1 subunit with a unique domain generated by alternative mRNA processing. Gene, 1990, 95,261-266.

8. Arnaout MA. Structure and function of the leukocyte adhesion molecules CD11/CD18. Blood, 1990, 75,1037-1050.

9. Argraves W.S., Suzuki S., Arai H., Thompson K., Pierschbacher M.D., Ruoslahti E. Amino acid sequence of the human fibronectin receptor. J. Cell Biol., 1987, 105, 1183-1190.

10. Arihiro K., Inai K., Kurihara K., Takeda S., Khatun N., Kuroi K., Toge T.

11. A role of VLA-6 laminin receptor in invasion of breast jcarcinoma. Acta Pathol. Jap., 1993, 43, 662-669.

12. Arihiro K., Inai K., Kurihara K., Takeda S., Kaneko M., Kuroi K., Toge T. Loss of VLA-2 collagen receptor in breast carcinoma, facilitating invasionand metastasis. Jap. J. Cancer Res. 1993, 84, 726-733.

13. Attwell S, Roskelley C, Dedhar S. The integrin-linked kinase (ILK) suppresses anoikis. Oncogene. 2000,19(33), 3811-3815. '

14. Avraham S., London R., Fu Y., Ota S., Hiregowdara D., Li J., Jiang S.,

15. Pasztor L.M., White R.A., Groopman J.E. Identification and characterization of a novel related adhesion focal tyrosine kinase (RAFTK) from megakaryocytes and brain. J. Biol. Chem. 1995, 270, 27742-27751.

16. Aznavoorian S., Murphy A.N., Stetler-Stevenson W.G., Liotta L.A. Molecular aspects of tumor cell invasion and metastasis. Cancer. 1993, 71, 1368-1383.

17. Bachelder R.E., Marchetti A., Falcioni R., Soddu S., Mercurio A.M. Activation of p53 function in carcinoma cells by the a6(34 integrin. (1999a) J. Biol. Chem., 274, 20733-20737.

18. Bachelder R.E., Ribick M.J., Marchetti A., Falcioni R., Soddu S., Davis K. R., Mercurio A.M. p53 inhibins a6(34 integrin survival signaling by promoting the caspase-3-dependent cleavage of AKT/PKB. (1999b) J. Cell Biol., 147, 1063-1072.

19. Bagutti C., Wobus A.M., Fassler R., Watt F.M. Differentiation of embryonal stem cells into keratinocytes: comparison of wild-type and beta 1 integrin-deficient cells. Devel. Biol., 1996,179, 184-196.

20. Bajt ML, Goodman T, McGuire SL. (2 (CD18) mutations abolish ligand recognition by I domain integrins LFA-1 ((L(2, CDlla/CD18) and Mac-1 ((M(2, CDllb/CD18). J.Biol.Chem., 1995, 270, 94-98.

21. Bajt ML, Loftus JC. Mutation of a ligand binding domain of (3 integrin/ Integral role of oxygenated residues in (IIb(3 (GPIIb-IIIa) receptor function. J.Biol.Chem., 1994, 269, 2091320919.

22. Bates R.C., Lincz L.F., Burns G.F. Involvement of integrins in cell survival. Cancer and Metastasis Rev. 1995. V. 14. P. 191-203.

23. Bauer J.S., Varner J., Schreiner C., Kornberg L., Nicholas R., Juliano R.L. Functional role of the cytoplasmic domain of the integrin alpha 5 subunit.J. Cell Biol. 1993, 122, 209221.

24. Belkin AM, Zhidkova N1, Balzac F et.al. (ID integrin displaces the (1A isoform in striated muscles: Localization at junctional structures and signaling potential in nonmuscle cells. J.Cell.Biol., 1996, 132, 211-226.

25. Belsches A.P., Haskell M.D., Parsons S.J. Role of c-Src tyrosine kinase in EGF-induced mitogenesis. Front. Biosci. 1997,2, D501-D518.

26. Berditchevski F, Zutter MM, Hemler ME.Characterization of novel complexes on the cell surface between integrins and proteins with 4 ■ transmembrane domains (TM4 proteins)., Mol.Biol.Cell., 1996, 7, 193-207.

27. Berman A.E., Kozlova N.I. Integrin: Structure and Functions. (2000) Membr. Cell Biol., 13,207-244.

28. Birkedal-Hansen H. Proteolytic remodeling of extracellular matrix. Curr. Opin. Cell Biol. 1995, 7, 728-735.

29. Blenis J. Signal transduction via the MAP kinases: proceed at your own RSK Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1993, 90, 5889-5892.

30. Briesewitz R., Kern A., Marcantonio E.E. Ligand-dependent and -independent integrin focal contact localization: the role of the alpha chain cytoplasmic domain. Mol. Biol. Cell. 1993, 4,593-604.

31. Bockholt S.M., Burridge K. Cell spreading on extracellular matrix proteins induces tyrosine phosphorylation of tensin. J. Biol. Chem. 1993. V. 268. P. 14565-14567.

32. Boudreau N., Jones P.L. Extracellular matrix and integrin signalling: the shape of things to come. Biochem.J. 1999, 339, 481-488.

33. Boudreau N., Sympson C.J., Werb Z., Bissel M.J.Suppression of ICE and apoptosis in mammary epithelial cells by extracellular matrix. Science. 1995, 267. 891-893.

34. Brassard D.I., Maxwell E., Malkowski M., Nagabhushan T.L., Kumar C.C., Armstrong L. Integrin av(33-mediated activation of apoptosis. Exp.Cell Res., 1999, 251, 33-45

35. O'Brien V., Frisch S.M., Juliano R.L. Expression of the integrin alpha5 subunit in HT29 colon carcinoma cells suppresses apoptosis triggered by serum deprivation. Exp. Cell Res. 1996, 224,208-213.

36. Brooks P.C., Montgomery A.M.P., Rosenfeld M., Reisfeld R.A., Ни Т., Klier G., Cheresh D.A. Integrin avb3 Antagonists Promote Tumor Regression by Inducing Apoptosis of Angiogenic Blood Vessels. Cell. 1994, 79,1157-1164.

37. Brown E., Hooper L, Ho T et.al., Integrin-associated protein: a 50-kDa plasma membrane antigen phisically and functionally associated with integrins. J.Cell. Biol., 1990, 111, 27852794

38. Buck C.A., Horwitz A.F. Cell surface receptors for extracellular matrix molecules. Ann. Rev. Cell Biol. 1987, 3, 179-205. .

39. Burridge K., Chrzanowska-Wodnicka M. Focal adhesions, contractility, and signaling. Ann. Rev. Cell Dev. Biol. 1996,12, 463-518.

40. Burridge K., Fath K., Kelly Т., Nuckolls G.; Turner C. Focal adhesions: transmembrane junctions between the extracellular matrix and the cytoskeleton. Ann. Rev. Cell Biol. 1988, 4, 487-525

41. Burridge K., Turner C.E., Romer L.H. Tyrosine phosphorylation of paxillin and ppl25FAK accompanies cell adhesion to extracellular matrix: a role in cytoskeletal assembly. J. Cell Biol. 1992,119, 893-903.'

42. Cardone M.H., Salvesen G.S., Widmann C., Johnson G., Frisch S.M. The regulation of anoikis: MEKK-1 activation requires cleavage by caspases. Cell. 1997, 90, 315-323.

43. Carraway K.L., Carraway C.A. Signaling, mitogendsis and the cytoskeleton: where the action is. Bioessays. 1994,17,171-175.

44. Carrell NA, Fitzgerald LA, Steiner et.al. Structure of human platelet membrane glycoprotein lib and Ilia as determined by electron microscopy. J.Biol.Chem. 1985, 260, 1743-1749.

45. Charo IF, Fitzgerald LA, Steiner B. et.al. Platelet glycoproteins lib and Ilia: evidence Proc. Natl. Acad. Sci USA, 1986, 83, 8351-8355.

46. Cheresh DA, Pytela R, Pierschbacher MD et.al., An arg-gly-asp-directed receptor on the surface jf human melanoma cell exists in a divalent cation-dependent functional complex with the disialoganglioside GD2. J.Cell.Biol., 1987,105,1163-1173.

47. Chiarugi V., Magnelli L., Cinelli M. Complex interplay among apoptosis factors: RB, p53, E2F, TGF-beta, cell cycle inhibitors and the bcl2 gene family. Pharmacol. Res. 1997, 35, 257-261.

48. Ciambrone G.J., McKeown-Longo P.J. Plasminogen activator inhibitor type I stabilizes vitronectin-dependent adhesions in HT-1080 cells. J. Cell Biol. 1990, 111, 2183-2195.

49. Clark E.A., Brugge J.S. Integrins and signal transduction pathways: the road taken. Science. 1995,268,233-238.

50. Clarke A., Lotz M., Chao C., Mercurio A. Activation of the p21 pathway of growth arrest and apoptosis by the beta 4 integrin cytoplasmic domain. (1995) J. Biol. Chem., 270,I

51. Clark E.A., Shattil S.J., Ginsberg M.H., Bolen J., Brugge J.S. regulation of the protein tyrosine kinase pp72syk by platelet agonists and the integrin alpha lib beta 3. J. Biol. Chem. 1994,269,28859-28864.

52. Colognato-Pyke H, O'Rear JJ, Yamada Y et.al. Mapping of network-forming, heparin-binding, and (1(1 integrin-recognition sites within the (-chain short arm of laminin-1. J.Biol.Chem., 1995, 270, 9398-9406

53. Colombatti A., Bonaldo P. et.al. The superfamily of proteins with von Willebrand factor type A-like domain: one theme common to components of extracellular matrix, hemostasis, cellular adhesion, and defense mechanisms. Blood, 1991,77,2305-2315

54. Corbi AL, Garcia-Aguilar J., Springer ТА. Genomic structure of an integrin ( subunit, the leukocyte pi50,95 molecule. J.Biol.Chem., 1990, 265,2782-2788

55. Corbi AL, Miller LJ, O'Connor К et.al. cDNA cloning and complete primary structure of the (subunit of a leukocyte adhesion glycoprotein p 150,95. EMBO, 1987, 6, 4023-4028

56. Dedhar S. Integrins and tumor invasion. BioEssays. 1990, 12, 583-590.

57. Dedhar S. Integrin mediated signal transduction in oncogenesis: an overview. Cancer and Metastasis Rev. 1995,14,165-172.

58. Dedhar S., Hannigan G.E. . Integrin cytoplasmic interactions and bidirectional transmembrane signalling. Curr. Opin. Cell Biol. 1996, 8, 657-669.

59. Dedhar S., Rennie P.S., Shago M., Hagesteijn C.Y., Yang H., Filmus J., Hawley R.G., Bruchovsky N., Cheng H., Matusik R.J., Gigere V. Inhibition of nuclear hormone receptor activity by calreticulin. Nature. 1994, 367,480-483.

60. Defilippi P., Bozzo C., Volpe G., Romano G., Venturiano M., Silengo L., Tarone G. Integrin-mediated signal transduction in human endothelial cell: analisis of tyrosine phosphorylation events. Cell Adhes. Commun. 1994, 2, 75-86. •

61. Derijard В., Hibi M., Wu 1.Н.,-Barrett Т., Su В., Deng Т., Karin M., Davis

62. R.J. JNK1: a protein kinase stimulated by UV light and Ha-R'as that binds and phosphorylates the c-Jun activation domain. Cell. 1994. V. 76. P. 1025-1037.

63. Dhawan J., Farmer S.R. Regulation of alpha l(I)-coUagen gene expression in response to cell adhesion in Swiss 3T3 fibroblasts. J. Biol. Chem. 1990, 265, 9015-9021.

64. Dhawan J., Lichtler A.C., Rowe D.W., Farmer S.R. Cell adhesion regulates pro-alpha 1(1) collagen mRNA stability and transcription in mouse fibroblast. J.'Biol. Chem. 1991, 266, 8470-8475.

65. Dowling J., Yu Q., Fuchs E. Beta4 integrin is required for hemidesmosome formation, cell adhesion and cell survival. J. Cell Biol. 1996,134, 559-572.

66. Downward J. The GRB2/Sem-5 adaptor protein.FEBS Lett. 1994, 338, 113-117.

67. Downward J. Control of ras activation. Cancer Surv. 1996, 27, 87-100.

68. Eble J.A. Molecular biology intelligence unit. Integrin-ligand interaction. Ed. Eble J.A., KunnK. N.Y.: Chapman and Hall. 1997, 1-40.

69. Egeblad M. And Werb Z. New functions for the matrix metalloproteinases in cancer progression. Nature rev. Cancer. 2002,2,161-174.i

70. Eierman D.F., Johnson C.E., Haskill J. S. Human monocyte inflammatory mediator gene expression is selectively regulated by adherence substrates. J. Immunol., 1989, 142, 19701976.

71. Eliceiri B.P., Klemke R., Stromblad S., Cheresh D.A. Integrin alphavbeta3 requirement for sustained mitogen-activated protein kinase activity during angiogenesis. J. Cell Biol. 1998, 140, 1255-1263.

72. Elices M.J., Hemler M.E. The human integrin VLA-2 is a collagen receptor on some cells and a collagen/laminin receptor on others. ProC. Nat. Acad. Sci. USA. 1989, 86, 9906-9910.

73. Filardo E.J., Brooks P.C., Deming S.L., Damsky C., Cheresh D.A. Requirement of the NPXY motif in the integrin beta 3 subunit cytoplasmic tail for melanoma cell migration in vitro and in vivo. J. Cell Biol. 1995,130, 441-450 .

74. Fields C.G., Mickelson D.J., Drake S.L., McCarthy J.B., Fields G.B. Melanoma cell adhesion and spreading activities of a synthetic 124-residue triple-helical mini-collagen. J. Biol. Chem. 1993, 268, 14153-14160.

75. Folkman J., Moscona A. Role of cell shape in growth control. Nature. 1978, 273, 345-349.

76. Frisch S.M., Francis H. J. Disruption of epithelial cell-matrix interactions induces apoptosis. Cell Biol. 1994, 124, 619-626.

77. Frisch S.M., Ruoslahti E. Integrins and anoikis. Curr. Opin. Cell Biol. 1997, 9, 701-706.

78. Frisch S.M., Vuori K., Kelaita D., Sicks S. A role for Jun-N-terminal kinase in anoikis; suppression by bcl-2 and crmA. J. Cell Biol. 1996,135,1377-1382

79. Frisch S.M., Vuori K., Ruoslahti E., Chan:Hui P-Y. Control of adhesion-dependent cell survival by focal adhesion kinase. J. Cell Biol. 1996, 134, 793-799.

80. Fuchs S.Y., Dolan L., Davis R.J., Ronai Z. Phosphorylation-dependent targeting of c-Juniubiquitination by Jun N-kinase. Oncogene. 1996,- 13,1531-1535.

81. Fujiwara K., Jinguji Y., Masuda M. Cell adhesion and the cytoskeleton. Hum.Cell. 1991, 4, 109-115.

82. Galjaard H. Genetic metabolic diseases. Early diagnosis and prenatal analysis. Amsterdam; New York; Oxford:Elsevier/North-Holland Biomedical Press. 1980, 812-830.

83. Gehlsen K.R., Davis G.E., Sriramarao P. Integrin expression in human melanoma cells with differing invasive and metastatic properties. Clin. Exp. Metastasis. 1992, 10, 111-120.

84. Geiger В., Salomon D., Takeichi M., Hynes R.O. A chimeric N-cadherin/beta 1-integrin receptor which localizes to both cell-cell and cell-matrix adhesions. J. Cell Sci. 1992, 103, 943-951.

85. George E.L., Georges-Labouesse E.N., Patel-King R.'S., Rayburn H., Hynes R.O. Defects in mesoderm, neural tube ad vascular development in mouse embryos lacking fibronectin. Development. 1993, 119,1079-1091.

86. Giancotti F.G., Mainiero F. Integrin-mediated adhesion and signaling in tumorigenesis. Biochim. et Biophys. Acta. 1994, 1198,47-64.

87. Giancotti FG, Ruoslahti E. Elevated levels of the (5(1 fibronectin receptor supress the transformed phenotype of Chinese hamster ovary cells. Cell, 1990, 60, 849-859

88. Ginsberg MH, Loftus JC, Plow. EF. Cytoadhesins, integrins and platelets. Thromb.Haemos., 1988, 59, 1-6

89. Gosden R., Spears N. Programmed cell death in the reproductive system. Br. Med. Bull. 1997,53,644-661.

90. Gouon V., Tucker G.C., Kraus-Berthier L., Atassi G., Kieffer N. Up-regulated expression of the P3 integrin and the 92-kDa gelatinase in human HT-144 melanoma cell tumors grown in nude mice. Int.J.Cancer, 1996, 68, 650-662. '

91. Grenz H., Carbonetto S., Goodman S.L. Alpha 3 beta 1 integrin is moved into focal contacts in kidney mesangial cells. J. Cell Sci. 1993, 105, 739-751.

92. Grinnell F. Fibroblasts, myofibroblasts, and wound contraction. J. Cell Biol. 1994, 124, 401-404.

93. Guadagno T.M., Ohtsubo M., Roberts J.M., Assoian R.K. A link between cyclin A expression and adhesion-dependent cell cycle progression. Science. 1993, 262,1572-1575.

94. Guan J.L., Chen H.C. Signal transduction in cell-matrix interactions. Int. Rev. Cytol., 1996, 168,81-121.

95. Guan J.L., Shalloway D. Regulation of ppl25FAK by cellular adhesion and transformation. Nature. 1992,358, 690-692.i

96. Hall DE, Reichardt LF, Growley E et.al. The (1/(1 and (6/(1 integrin heterodimers mediate cell attachment to distinct sites on laminin.J.Cell.Biol., 1990, 110, 2175-2184

97. Hanks S.K., Calalb M.B., Harper M.C., Patel S.K. Focal adhesion protein-tyrosine kinase phosphorylation in response to cell attachment to fibronectin. Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1992, 89, 8487-8491

98. Hannigan G.E., Leung-Hagesteijn C., Fitz-Gibbon L., Coppolino M.G., Radeva G.,

99. Filmus J., Bell J., Dedhar S. Regulation of cell adhesion and anchorage-dependent growth byta new beta 1 -integrin-linked protein kinase. Nature. 1996,379, 91-96.

100. Harrington E.A., Fanidi A., Evan G.I. ). Oncogenes and cell death; Curr Opin Genet., 1994. Dev 4,120-129.

101. Harris C.C. Structure and Function of the p53 Tumor Suppressor Gene: Clues for Rational Cancer Therapeutic Strategies. J. Nat. Cancer Inst.' 1996, 88, 1442-1455.

102. Heino J. Biology of tumor cell invasion: interplay of cell adhesion and matrix degradation. Int. J. Cancer. 1996, 65, 717-722.

103. Hemler M.E., Huang C., Schwarz L. The VLA protein family. Characterization of five distinct cell surface heterodimers each with a common 130,000 molecular weigth (subunit. J.Biol.Chem., 1987,262, 3300-3309.

104. Hynes R.O., Yamada K.M. Multifactorial modular glycoproteins. J. Cell Biol. 1982,95, 369-377.

105. Hogervorst F., Admiraal LG, Niessen C. et.al. Biochemical characterization and tissue distribution of the A and В variants of the integrin (6 subunit. J.Cell.Biol., 1993, 121, 179191.

106. Hotchin N.A., Gandarillas A., Watt F.M. Regulation'of cell surface beta 1 integrin levels during keratinocyte terminal differentiation. J. Cell Biol., 1995,128, 1209-1219.

107. Howe A., Aplin A.E., Alahari S.K., Juliano R.L. Integrin signaling and cell growth control.

108. Curr. Opin. Cell Biol. 1998, 10,220-231.

109. Hughes PE, Diaz-Gonzalez F, Leong L et.al. Breaking the integrin hinge. A define structural constraint regulates integrin signaling.J Biol Chem. 1996,271(12), 6571-4.

110. Humphries M.J., Yamada K.M., Olden K. Investigation of the biological effects of anti-cell adhesive synthetic peptides that inhibit experimental metastasis of B16-F10 murine melanoma cells. J. Clin. Invest. 1988, 81, 782-790. •

111. Hungerford J.E., Compton M.T., Matter M.L., Hoffstrom B.G., Otey C.A. Inhibition ofippl25FAK in cultured fibroblasts results in apoptosis. J. Cell Biol. 1996, 135, 1383-1390.

112. Humphries M.J., Olden K., Yamada K.M. A synthetic peptide from fibronectin inhibits experimental metastasis of murine melanoma cells. Science. 1986, 233,467-470.

113. Hynes R.O. Integrins, versatility, modulation, and signalling in cell adhesion. Cell. 1992,69,11-25.

114. Ignatius MJ, Large TH,Houde M. et.al. Molecular cloning of the rat integrin (1-subunit: a receptor for laminin and collagen. J.Cell.Biol., 1990, 111, 709-720.

115. Juliano R.L., Varner J.A. Adhesion molecules in cancer: the role of integrins. Curr. Opin. Cell Biol., 1993, 5, 812-818.i

116. Kamata Т., Puzon W., Takada Y. Identification of putative ligand binding sites within I domain of integrin (2(1 (VLA-2, CD49b/CD29). J.Biol.Chem., 1994, 269, 9659-9663

117. Karin M. Signal transduction from cell surface to nucleus in development and disease. FASEBJ. 1992,6, 2581-2590.

118. Kassner PD, Alon R., Springer ТА et.al. Specialized functional properties of the integrin a4 cytoplasmic domain. Mol.Biol.Cell., 1995, 6, 661-674

119. Kawaguchi S., Hemler ME. Role of the a subunit cytoplasmic domain in regulation of adhesive activity mediated by the integrin VLA-2. J. Biol.Chem., 1993, 268,16279-16285

120. Kelly Т., Molony L., Burridge K. Purification of two smooth muscle glycoproteins related to integrins. Distribution in cultured chiken embryo fibroblast. J.Biol.Chem., 1987, 262, 17189-17199. '

121. Keely P., Parise L. and Juliano R. Integrins and GTPases in tumor cell growth mobility and invasion. Trendsin Cell Biol., 1998, 8,101-106.

122. Kern A., Briesewitz R., Bank I. Et.al. The role of the. I-domain in ligand binding of the human J.Biol.Chem., 1994,269,22811-22816.

123. Khwaja A., Downward J. Lack of correlation between activation of Jun-NH2-terminal kinase and induction of apoptpsis after detachment of epithelial cells. J. Cell Biol. 1997, 139, 1017-1023.

124. Khwaja A., Rodriguez-Viciana P., Wennstrom S., Warne P.H.,Downward J. Matrix adhesion and Ras transformation both activate a phosphoinositide 3-OH kinase and protein kinase B/Akt cellular survival pathway. EMBO J. 1997, 16, 2783-2793.

125. King W.G., Mattaliano M.D., Chan Т.О., Tsichlis P.N., Brugge J.S. Phosphatidylinositol 3-kinase is required for integrin-stimulated АКТ and Raf-l/mitogen-activated protein kinase pathway activation. Mol. Cell Biol. 1997,17,4406-4418.0103

126. Klier G., Cheresh D.A. . Integrin avb3 Antagonists Promote Tumor Regression by Inducing Apoptosis of Angiogenic Blood Vessels. Cell. 1'994, 79, 1157-1164.

127. Kogawa K., Mogi Y., Takayama Т., Koike K., Yoshizaki N., Muramatsu H., Niitsu Y. Augmented expression of a type IV collagen-binding protein in a highly metastatic murine fibrosarcoma clone.Jap. J. Cancer Res. 1993, 84, 549-557.

128. Koike N., Todoroki Т., Komano H., Shimokama Т., Ban S., Ohno Т., Fukao K., Watanabe T. Invasive potentials of gastric carcinoma cell lines: role of a2 and аб integrins in invasion. J.CancerRes. Clin.Oncol., 1997, 123, 310-316.

129. Kolanus W., Seed B. Integrins and inside-out signal transduction: converging signals from PKC and PIP3. Curr. Opin. Cell Biol. 1997, 9, 725-731.

130. Komada N., Nabeshima K., Koita H., Kataoka H., Muraoka К., Koono M.

131. Characteristics of a metastatic variant to the liver of human rectal adenocarcinoma cell linei

132. RCM-1. Invasion and Metastasis. 1993,13, 38-49.

133. Koretzky G.A. The role of Grb2-associated proteins in T-cell activation. Immunol Today. 1997, 18,401-406.

134. KozlovaN.I., Morozevich G.E., Soloveyva N.I. Vinokurova S.V., Berman A.E. Integrin expression and collagenase activity of RSV-transformed Syrian hamster fibroblasts, differing in sponteneous metastasizing. Biochem. Mol. Biol. Int. 1997, 43, 529-539.

135. Kunicki TJ, Nugent DJ, Staats SJ et.al., The human fibroblast class II extracellular matrix receptor mediates platelet adhesion to collagen and is identical to the platet glycoprotein Ia-IIa complex. J.Biol.Chem., 1988, 263,4516-4519.

136. Kuzuya M., Satake S., Ramos M.A., Kanda S., Koike Т., Yoshino K., Ikeda S., Iguchi A. Induction of apoptotic cell death in vascular endothelial' cells cultured in three-dimensional collagen lattice. (1999) Exp. Cell Res., 248,498-508.

137. Kieffer N, Fitzgerald LA, Wolf D et.al., Adhesive properties of the (3 integrins: comparison of GP Ilb-IIIa and the vitronectin receptor individually expressed in human melanoma cell lines/J.Cell.Biol., 1991,113,451-461.

138. Kieffer N., Phillips D.R. Platelet membrane • glycoproteins: functions in cellular interactions. Ann. Rev. Cell Biol. 1990, 6, 329-357.

139. Kishimoto Т.К., O'Connor K., Lee A. et.al. Cloning of (-subunit of the leukocyte adhesion proteins: homology to the extracellular matrix receptor defines a novel supergene famely. Cell, 1987, 48, 681-690,131518.

140. LaFlamme S.E., Akiyama S.K., Yamada K.M. : Regulation of fibronectin receptoridistribution. J. Cell Biol. 1992,117,437-447.

141. Lafrenie R.M., Yamada K.M. Integrin-dependent signal transduction.!. Cell Biochem.1996, 61, 543-553.

142. Lallier T, Bronner-Fraser M: (1(1 integrin on neural crest cells recognizes some laminin substrata in a Ca2+- independent manner. J.Cell.Biol.,1992, 119, 1335-1345.

143. Landis RC, Bennett RI, Hogg N. A novel LFA-1 activation epitope maps to the I-domain. J.Cell.Biol., 1993, 120, 1519-1527.

144. Landis RC, McDowall A., Holness CLL et.al. Involvement of the «I domain of LFA-1 in selective binding to ligands ICAM-1 and ICAM-3. J.Cell Biol., 1994, 126, 529-537.

145. Languino LR, Ruoslahti E.,An alternative form of the integrin (1 subunit with a variant cytoplasmic domain. J.Biol.Chem., 1992,267,7116-7120.

146. Larjava H., Lyons J.G., Salo Т., Makela M., Koivisto L., Birkedal-Hansen

147. H., Akiyama S.K., Yamada K.M., Heino J. Anti-integrin antibodies induce type IV collagenase expression in keratinocytes. J. Cell Physiol. 1993,157,190-200.

148. Larson RS, Corbi AL, Berman L. et.al. Primary, structure of the leukocyte functionassociated molecule-1 ( subunit: an integrin with embedded domain defining a proyeinisuperfamily. L.Ceel.Biol., 1989,108, 703-712.

149. Larson RS, Springer ТА. Structure and function of leukocyte integrins. Immunol. Reviews, 1990, 114,181-217. • •

150. Lasky L.A. Selectin-carbohydrate interactions and the initiation of the inflammatory response. Ann. Rev. Biochem. 1995, 64,113-139.

151. Lasz E. McLane MA, Trybulec M et.al. (3 integrin derived peptide 217-230 inhibits fibrinogen binding and platelet aggregation: significance of RGD seguences and fibrinogen A(-chain. Biochem.Biophys.Res.Comm., 1993, 190,118-124.

152. Law SKA, Gagnon J., Hildreth JEK et.al. The primary structure of the (-subunit of the cell surface adhesions glycoproteins LFA-1, CR-3 and pi 50,95 and its relationship to the fibronectin receptor. EMBO J., 1987,4,915-919. /

153. Lewis J.M., Cheresh D.A., Schwartz M.A. Protein Kinase С Regulatesavb3-Dependent Cytoskeletal Associations and FAK Phosphorylation. J. Cell Biol. 1996,134,1323-1332.

154. Liebermann D.A., Hoffman В., Steinman R.A. Molecular control of growth arrest and apoptosis: -53-dependent and independent pathways. Oncogene. 1995, 11, 199-210.

155. Liebert M., Washington R., Stein J., Wedemeyer G., Grossman H.B. Expression of the VLA beta 1 integrin family in bladder cancer. Amer. J. Pathol. 1994, 144,1016-1022.

156. Lindberg FP, Gresham HD, Schwarz E et.al., Molecular cloning of integrin associated protein: an immunoglobulin family member with multiple membrane-spanning domains implicated in (v(3-dependent ligand binding. J.Cell.Biol.,}993,123,485-496.

157. Lochter A., Navre M., Werb Z., Bissell M.J. al and a2 integrins mediate invasive activity of mouse mammary carcinoma cells through regulation of stromelysin-1 expression. Mol.Biol.Cell, 1999, 10, 271-282.

158. Loftus JC, O'Toole ТЕ, Plow EF et.al. A (3 integrin mutation abolishes ligand binding and alters divalent cation-dependent conformation Science, 1990, 249,915-918

159. Lowe S.W., Lin A.W. Apoptos in cancer. Carcinogenesis. 2000,21 (3), 485-495.

160. Lupulescu A.P. Hormones, vitamins, and growth factors in cancer treatment and prevention. A critical appraisal. Cancer. 1996, 78, 2264-2280.

161. Lyons S.K., Clarke A.R. Apoptosis and carcinogenesis. Br. Med. Bull. 1997, 53, 554569.

162. Malik R.K., Parsons J.T. Integrin-dependent activation of the p70 ribosomal S6 kinase signaling pathway. J. Biol. Chem. 1996, 271,29785-29791.

163. Manning F.C., Patierno S.R. Apoptosis: inhibitor or Instigator of cancirogenesis? Cancer Invest. 1996, 14, 455-465.

164. Martin M., Ahlen K., Dimanche-Boitrel M.T., Mendrick D.L., Turner D.C.,

165. Rubin K., Martin F. Colon-cancer cell variants producing regressive tumors in syngeneic rats, unlike variants yielding progressive tumors, attach to interstitial collagens through integrin alpha2betal. Int. J. Cancer. 1996, 65, 796-804.

166. Marshall J.F., Nesbitt S.A., Helfrich M.H., Horton M.A., Polakova K.,

167. Hart I.R. Integrin expression in human melanoma cell lines: heterogeneity of vitronectin receptor composition and function. Int. J. Cancer. 1991, 49, 924-931.

168. McGill G., Shimamura A., Bates R.C., Savage R.E., Fisher D.E. Loss of matrix adhesion triggers rapid transformation-selectuve apoptosis in fibroblasts. J. Cell Biol. 1997, 138, 901911.

169. Meyer T. and Hart I.R. Mechanisms of Tumor Metastasis. Eur. J. Cancer, 1998, 34, 2, 214-221.

170. Meredith J.E., Fazeli В., Schwartz M.A. The extracellular matrix as a cell survival factor. Mol. Biol Cell. 1993, 4, 953- 961.

171. Miao J., Araki S., Kaji K., Hayashi H. Integrin beta4 is involved in apoptotic signal transduction in endothelial cells. Biochem. Biophys. Res. Comm. 1997, 233, 182-186.

172. Montgomery A.M.P., Reisfeld R.A., Cheresh D. Integrin alpha v beta 3 rescues melanoma cells from apoptosis in three-dimensional dermal collagen. Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1994, 91,8856-8860.

173. Morino N., Mimura Т., Hamasaki K., Tobe K., Ueki K., Kikuchi K., Takehara K., Kadowaki Т., Yazaki Y., Nojima Y. Matrix integrin interaction activates the mitogen-activated protein kinase, J. Biol. Chem. 1995, 270, 269-273. '

174. Morla A., Zhang Z., Ruoslahti E. Superfibronectin is a functionally distinct form of fibronectin. Nature. 1994, 367, 193-196.

175. Mortarini R., Gismondi A., Santoni A., Parmiani G., Anichini A. Role of the alpha 5 beta 1 integrin receptor in the proliferative response of quiescent human melanoma cells to fibronectin. Cancer Res. 1992, 52, 4499-4506.

176. Mosher D.F., Sottile J., Wu C., McDonald J.A. Assembly of extracellular matrix. Curr. Opin. Cell Biol. 1992, 4, 810-818.

177. Moulder G.L. Huang M.M., Waterston R.H., Barstead R.J. Talin requires beta-integrin, but not vinculin, for its assemble into focal adhesion-like structures in the nematode Gaenorhabditis elegants. Mol. Biol. Cell. 1996, 7,1181-1193.

178. Mueller S.C., Kelly Т., Dai M.Z., Dai H.N., Chen W.T. Dynamic cytoskeleton-integrin associations induced by cell binding to immobilized fibronectin. J. Cell Biol. 1989, 109, 3455-3464.

179. Mufson R.A. The role of serine/threonine phosphorylation in hematopoietic cytokine receptor signal transduction. FASEB J. 1997,11, 37-44. '

180. Nermut MV, Green NM, Eason P. et.al. Electron microscory anduy structural model of human fibronectin receptor. EMBO J., 1988, 7, 4093-4099

181. Nikiforov M.A.,Hagen K., Ossovskaya V.S., Connor T.M., Lowe S.W., Deichman G.I., Gudkov A.V. p53 modulation of anchorage independent growth and exsperimental metastasis. Oncogene. 1996, 13, 1709-1719

182. Nip J., Brodt P. The role of the integrin vitronectin receptor, alpha v beta 3 in melanoma metastasis. Cancer and Metastasis Rev. 1995. V. 14, P. 241-252.

183. Nip J., Rabbani S.A., Shibata H.R., Brodt P. Coordinated expression of the vitronectin receptor and the urokinase-type plasminogen activator receptor in metastatic melanoma cells. J. Clin. Invest. 1995, 95,2096-2103.

184. Nista A., Leonetti C., Bernardini G., Mattioni- M., Santoni A. Functional role of alpha4betal and alpha5betal integrin fibronectin receptors expressed on adrimycin-resistant MCF-7 human mammary carcinoma cells.Int. J. Cancer. 1997, 72, 133-141.

185. Obara M., Kang M.S., Yamada K.M. Site-directed mutagenesis of the cell-binding domain of human fibronectin: separable, synergistic sites mediate adhesive function.Cell. 1988, 53, 649-657.

186. Osborn L. Leukocyte adhesion to endothelium in inflamation. Cell. 1990, 62, 3-6.

187. Ossowski L., Aguirre-Ghiso • A. Urokinase receptor and integrin partnership: coordination of signaling for cell adhesion, migration and growth. Curr. Opin. Cell Biol., 2000, 12,5 613-620.

188. Otey C.A., Pavalko F.M., Burridge K. An interaction-between a-actinin and the b 1 integrin subunit in vitro. J. Cell Biol. 1990, 111, 721-729.

189. Otey C.A., Vasquez G.B., Burridge K., Erickson B.W. Mapping of the alpha-actinin binding site within the beta 1 integrin cytoplasmic domain. J. Biol. Chem. 1993, 268, 2119321197.

190. Parise LV, Phillips DR. Platelet membrane glycoprotein Ilb-IIIa complex incorporated into phospholipid vesicles; preparation and morphology. J.Biol.Chem., 1985,260,1750-1756.

191. Parsons J.T. Integrin-mediated signalling: regulation by protein tyrosine kinase and small GTP-binding proteins. Curr. Opin. Cell Biol., 1996, 8, 146-152

192. Parsons J.T., Parsons S.J. Src family protein tyrosine kinase: cooperating with growth factor and adhesion signaling pathway. Curr. Opin. Cell Biol. 1997, 9,187-192.

193. Pfaff M, Gohring W, brown JC et.al. Binding of purified collagen receptors (al(31 and a2pi) and RGD-dependent integrins to laminins and laminin fragments. Eur.J.Biochem., 1994,225,975-984.

194. Phillips D.R., Charo I.F., Scarborough R.M. GPIIb-IIIa: the responsive integrin. Cell. 1991, 65, 359-362.

195. Pierschbacher M.D., Ruoslahti E. Cell attachment activity of fibronectin can be duplicated by small synthetic fragments of the molecule. Nature. 1984, 309, 30-33.

196. Pierschbacher M.D., Ruoslahti E.Variants of the cell recognition site of fibronectin that retain attachment-promoting activity. Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1984, 81, 5985-5988.

197. Plantefaber LC, Hynes RO. Changes in integrin receptors on oncogenically transformed cells. Cell., 1989, 56,281-290.

198. Polte T.R., Hanks S.K. Interaction between Focal Adhesion Kinase and Crk-associated tyrosine kinase substrate pl30Cas. Proc. Nat. Acad, Sci. USA. 1995, 92, 10678-10682.

199. Porter J.C., Hogg N. Integrins take partners: cross-talk between integrins and other membrane receptors. Cell Biology. 1998,8, 390-396.

200. Pulkki K.J. Cytokines and cardiomyocyte death. Ann. Med. 1997, 29, 339-343.

201. Pullan S., Wilson J., Metcalfe A., Edwards G.M., Goberdhan N., Tilly J.,Hickman J.A.,

202. Dive C., Streuli C.H. Requirement of basement membrane for the suppression of programmedicell death in mammary epithelium. J Cell Sci. 1996, 109, 631-642.

203. Radeva G., Petrocelli Т., Behrend E., Leung-Hagesteijn C., Filmus J., Slingerland J., Dedhar S. . Overexpression of the integrin-linked kinase promotes anchorage-independent cell cycle progression. J. Biol. Chem. 1997, 272,13937-13944.

204. Rao L., Debbas M., Sabbatini P., Hockenbery D., Korsmeyer S., White E. The adenovirus El A protein induce apoptosis, which is inhibited by the El В 19-kDa and Bcl-2 proteins. Proc. Nat. Acad. Sci USA. 1992, 89, 7742-7746.

205. Re F., Zanetti A., Sironi M., Polentarutti N., Lanfrancone L., Dejana E.,Colotta F. Inhibition of anchorage-dependent cell spreading triggers apoptosis in cultured human endothelial cells. J. Cell Biol. 1994,127,537-546.

206. Riikonen Т., Westermarck J., Koivisto L., Broberg/A., Kahari V.M., Heino J. Integrin a2bl is a positive regulator of collagenase (MMP-1) and collagen al(I) gene expression. J. Biol. Chem. 1995,270, 13548-13552.

207. Rocco M., Spotorno В., Hantgan RR. Modelling the (IIb(3 integrin solution conformation. Protein Sci., 1993, 2, 2154-2166.

208. Rosfjord E.C., Maemura M., Johnson M.D., Tori J.A., Akiyama S.K., Woods V.L., Dickson R.B. Activation of protein kinase С by phorbol esters modulates a2pi integrin on MCF-7 breast cancer cells. Exper.Cell Res., 1999,248, 260-271.

209. Ruoslahti E. Fibronectin and its alpha 5 beta 1 integrin receptor in malignancy. Invasion and Metastasis. 1994-95, 14, 87-97.'

210. Ruoslahti E., Reed J.C. Anchorage dependence, integrins, and apoptos. Cell. 1994, 77, 477-478.

211. Salgia R., Avraham S., Pisick E., Li J.L., Raja S., Greenfield E.A., Sattler M., Avraham H., Griffin J.D. The related adhesion focal tyrosine kinase formsa complex with paxillin in hematopoietic cells. J. Biol Chem. 1996, 271, 31222-31226.

212. Santoro SA, Walsh JJ, Staats WD et.al. Fistinct determinants on collagen support (2(1 integrin-mediated platelet adhesion and platelet activation. Cell.Reg., 1991, 2, 905-913.

213. Sastry SK, Horwitz AF. Integrin cytoplasmic domains: mediators of cytoskeletal linkages and extra- and intracellular initiated transmembrane signalling. Curr.Opin.Cell. Biol., 1993,5,819-831. '

214. Sastry S.K., Lakonishok M., Thomas D.A., Muschler J., Horwitz A. Integrin alpha subunit ratios, cytoplasmic domains, and growth factor synergy regulate muscle proliferation and differentiation. J. Cell Biol., 1996, 133, 169-184.

215. Sato H., Seiki M. Membrane-type matrix metalloproteinases (MT-MMPs) in tumor metastasis. J. Biochem. 1996,119,209-215.

216. Scatena M., Almeida M., Chaisson M.L., Fausto N., Nicosia R.F., Giachelli C.M. NF-kappaB mediates alphavbeta3 integrin-induced endothelial cell survival. (1998) J. Cell Biol., 141,1083-1093.

217. Schaller M.D., Hildebrand J.D., Shannon J.D., Fox J.W., Vines R.R.,

218. Parsons J.T. Autophosphorylation of the focal adhesion kinase, ppl25FAK, directs SH2-dependent binding ofpp60src. Mol. Cell. Biol. 1994,14, 1680-1688.

219. Schaller M.D., Otey C.A., Hildebrand J.D., Parsons J.T. Focal adhesion kinase and paxillin bind to peptides mimicking integrin cytoplasmic domains. J. Cell. Biol. 1995, 130, 1181-1187.

220. Schlaepfer D.D., Hanks S.K., Hunter Т., Geer P. Integrin-mediated signal transduction linked to Ras pathway by GRB2 binding to focal adhesion kinase. Nature. 1994, 372, 786791.

221. Schlaepfer D.D., Hunter T. Focal adhesion kinase overexpression enhances ras-dependent integrin signaling to ERK2/mitogen-activated protein kinase through interactions with and activation of c-Src. J. Biol. Chem. 1997,272,13189-13195.

222. Schreiner C, Fisher M, Hussein S et.al. Increased tumorogenicity of fibronectin receptor deficient Chinese hamster ovary cell variants. Cancer Res., 1991, 51, 1738-1740.

223. Schulte-Hermann R., Bursch W., Grasl-Kraupp В., Mullauer L., Ruttkay-Nedecky B. Apoptosis and multistage carcinogenesis in rat liver. Mutat. Res. 1995, 333, 81-87.

224. Si Z., Hersey P. Immunohistological examination ot the relationship between metastatic potential and expression of adhesion molecules and 'selectins' on melanoma cells. Pathology. 1994, 26, 6-15.

225. Schwartz M.A., Lechene C., Ingber D.E. Insoluble fibronectin activates the Na/H antiporter by clustering and immobilizing integrin alpha 5 beta 1, independent of cell shape. Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1991, 88,7849-7853.

226. Shaw LM, Turner CE, Mercurio AM. The (6A(1 and (6B(1 integrin variants signal differences in the tyrosine phosphorylation of paxillin and other proteins. J.Biol.Chem., 1995, 270, 23648-23652.

227. Seftor R.E.B., Seftor E.A., Gehlsen K.R., Stetler-Stevenson W.G., Brown P.D., Ruoslahti E., Hendrix M.J.C. Role the (v(3 integrin in hitman melanoma cell invasion. Proc. Nat. Acad. Sci USA. 1992, 89,1557-1561.

228. SheppardD. Epithelial integrins. Bioessays. 1996,18, 655-660.

229. Shtil A., Shushanov A.,Moynova E. And Stavrovskaya A. Frequency of metastasis in Syrian hamster tumor cells selected for low lever of "typical" multidrug resistance. Exp.Toxic Phatol. 1994,46,257-262.

230. Sluss H.K., Barrett Т., Derijard В., Davis R.J. Signal transduction by tumor necrosis factor mediated by JNK protein kinases. Mol. Cell Biol. 1994,14, 8376-8384.

231. D'Souza SE, Ginsberg MH, Burke ТА et.al. Localization of an arg-gly-asp recognition site within an integrin adhesion receptor. Science, 1988,242, 91-93.

232. Sporn S.A., Eierman D.F., Johnson C.E., Morris J., Martin G., Ladner M., Haskill S. Monocyte adherence results in selective induction of novel genes sharing homology with mediators of inflammation and tissue repair. J. Immunol., 1990, 144, 4434-4441.

233. Springer T.A. Traffic signals on endothelium for lymphocyte recirculation and leucocyte emigation. Ann. Rev. Physiol. 1995. V. 57. P. 827-872.

234. Springer ТА, Teplow DB, Drezer WJ,. Seguence homology of the LFA-1 and Mac-1 leukocyte adhesion glycoprotein and unexpected relation to leukocyte interferon. Nature, 1985,314, 540-542.

235. Staatz W.D., Rajpara S.M., Wayner E.A., Carter W.G., Santoro S.A. The membrane glycoprotein Ia-Iia (VLA-2) complex mediates the Mg++-dependent adhesion of platelets to collagen. J. Cell Biol. 1989, 108,1917-1924.

236. Stetler-Stevenson W.G., Aznavoorian S., Liotta A. Tumor cell interactions with the extracellular matrix during invasion and metastasis. Annu. Rev. Cell Biol. 1993, 9, 541-573.

237. Stromblad S., Becker J.C., Yerba M., Brooks P.C.i, Cheresh D.A. Suppression of p53 activity and p21WAFl/CIPl expression by vascular cell integrin alphaVbeta3 during angiogenesis. J. Clin. Invest. 1996, 98, 426-433.

238. Strongin A.Y., Collier I., Bannikov G., mer B.L., Grant G.A., Goldberg G.I. Mechanism of cell surface activation of 72 kDa type IV collagenase. Isolation of the activation form of the membrane metalloprotease. J. Biol. Chem. 1995,270, 5331-5338.

239. Stupak D.G., Puente X.S., Boutsaboualoy S., Storgard C.M., Cheresh D.A. Apoptosis of adherent cells by requitment of caspase-8 to unligated integrin. J. Cell Biol. 2001,155, 3,459470.

240. Tahiliani P.D., Singh L., Auer K.L., LaFlamme S.E. The role of conserved amino acid motifs within the integrin {beta}3 cytoplasmic domain in triggering focal adhesion kinase phosphorylation. J. Biol.Chem. 1997,272, 7892-7898.

241. Takada Y., Elices M.J., Crouse C., Hemler M.E. The primary structure of the alpha 4 subunit of VLA-4: homology to other integrins and a possible cell-cell adhesion function.EMBO J., 1989, 8,1361-1368.

242. Takada Y., Ylanne J, Mandelman D et.al. A point mutation of the integrin al subunit blocks binding of a5pi to fibronectin and invasin but not recruitment to adhesion plaques. J.Biol.Chem., 1992, 119,913-921. '

243. Tamkun J.W., DeSimone D.W., FondaD„ Patel R.S., Buck C.,Horwitz A.F., Hynes R.O. Structure of integrin, a glycoprotein involved in the transmembrane linkage between fibronectin and actin. Cell. 1986,46,271-282.

244. Tamura RN, Cooper HM, Collo G. et.al. Cell type specific integrin variants with alternative a chain cytoplasmic domains. Proc.Natl.Acad.Sci USA, 1991, 88,10183-10197.

245. Thomas G. MAP kinase by any other name smells just as sweet. Cell. 1992, 68, 3-6.

246. Tokiwa G., Dikic I., Lev S., Schlessinger J. Activation of PYK2 by stress signals and coupling with JNK signaling pathway. Science. 1996, 273,792-794.

247. Tuckwell DS, Brass A., Humphries MJ. Homology modelling of integrin EF-hands. Evidence for widespread use of a conserved cation-binding site. Biochem. J., 1992, 285, 325331.i

248. Tuckwell DS, Humphries MJ, Brass A., A secondary structure model of the integrin (N-terminal domain based on analysis of multiple alignments. Cell Adhes. Commun. 1994, 2, 385-402.

249. Varner J.A., Emerson D.A., Juliano R.L. Integrin alpha5betal expression negatively regulates cell growth: Reversal by attachment to fibronectin. Mol. Biol. Cell. 1995, 6, 725740.

250. Vihinen P., Riikonen Т., Laine A., Heino J. Integrin alpha 2 beta 1 in tumorigenic human osteosarcoma cell lines regulates cell adhesion, migration, and invasion by interaction with type I collagen. Cell Growth and Differentiation. 1996, 7,439-447.

251. Vuori К. Integrin signaling: tyrosine phosphorylation events in focal adhesions. J. Membrane Biol. 1998,165.,191-199.

252. Wang DH, Zhou G-H, Birkenmeier TM et.al. Autocrine transforming growth factor al modulates the expression of integrin a5pl in human colon carcinoma FET cells.

253. Wary K.K., Mainiero F., Isakoff S.J., Marcantonio E.E., Giancotti F.G. The adaptor protein She couples a class of integrins to the control of cell cycle progression. Cell. 1996, 87, 733-743.

254. Werb Z., Tremble P.M., Behrendtsen 0., Crowley E., Damsky C.H. Signal transduction through the fibronectin receptor induces collagenase and stromelysin gene expression. J. Cell Biol. 1989, 109,877-889.

255. Wright MD, Tomlinson MG. The ins and: outs of the transmembrane 4 superfamily.Immunology Today, 1994, 15, 588-594.

256. Woods A., Couchman J.R. Protein kinase С involvement in focal adhesion formation. J.Cell Sci. 1992, 101,277-290.

257. Wood K.W., Sarnecki C., Roberts T.M., Blenis J. ras mediates nerve growth factor receptor modulation of three signal-transducing protein kinases: MAP kinase, Raf-1, and RSK. Cell. 1992, 68, 1041-1050.

258. Wu C., Bauer J.S., Juliano R.L., McDonald J.A. The alpha 5 beta 1 integrin fibronectin receptor, but not the alpha 5 cytoplasmic domain, functions in an early and essential step in fibronectin matrix assembly. J. Biol. Chem. 1993,268,21883-21888.

259. Zhang Z., Vuori K., Reed J.C., Ruoslahti E. The alpha 5 beta 1 integrin supports survival of cells on fibronectin and upregulates Bcl-2 expression. Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1995, 92, 6161-6165.

260. Zutter MM, Santoro SA, Staatz WD, Tsung YL. ke-expression of the alpha 2 beta 1 integrin abrogates the malignant phenotype of breast carcinoma cells. Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A., 1995, 92, 7411-7415.

261. Xiong W., Parsons J.T. Induction of apoptosis after expression of PYK2, a tyrosine kinase structurally related to focal adhesion kinase. J. Cell. Biol. . 1997,139, 529-539.

262. Yamada K.M. Cell surface interactions with extracellular materials. Annu. Rev. Biochem., 1983, 52, 761-799

263. Yang J.T., Rayburn H., Hynes R.O. Embryonic mesodermal defects in alpha 5 integrin-deficient mice. Development. 1993,119, 1093-1105.

264. Yun Z., Menter D.G., Nicolson G.L. Involvement of integrin avp3 in cell adhesion, motility, and liver metastasis of murine RAW117 large cell lymphoma. Cancer Res., 1996, 56,3103-3111.

265. Yurochko A.D., Liu D.Y:, Eierman D., Haskill' S. Integrins as a primary signal transduction molecule regulating monocyte immediate-early gene induction. Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 1992, 89, 9034-9038.115

266. Хочу выразить признательность за руководство, огромную помощь, внимание и постоянную поддержку в работе доктору биологических наук, заведующему лабораторией биосинтеза белков Альберту Ефимовичу Берману.

267. Выражаю искреннюю благодарность старшему научному сотруднику Галине Евгеньевне Морозевич за участие и постоянную помощь в экспериментальной работе и ценные советы при оформлении диссертации. ,