Влияние эндогенных и экзогенных модификаторов на активность Na+, K+-атфазы тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.04, кандидат биологических наук Батоцыренова, Екатерина Геннадьевна

• Батоцыренова, Екатерина Геннадьевна
• кандидат биологических наук
• 2005

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Батоцыренова, Екатерина Геннадьевна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

ГЛАВА I. Выделение и изучение структуры Ыа+,К+-АТФазы

1.1. История открытия фермента и его функции

1.2. Строение №+,К+-АТФазы

1.3. Молекулярная гетерогенность Na+,K+-ATOa3bi

1.4. Каталитический цикл Ыа+,К+-АТФазы 15 (ф 1.5. Четвертичная структура Ш+,К+-АТФазы

ГЛАВА И. Модификаторы активности Na+,K+-ATOa3bi

2.1. Эндогенные модификаторы активности №+,К+-АТФазы

2.1.1. Катионы кальция

2.1.2. Фосфорилирование Ыа+,К+-АТФазы протеинкиназами

2.1.3. Ванадат-анион

2.1.4. Нейромедиаторы

2.1.5. Сердечные гликозиды

2.1.6. Влияние АФК на активность Иа+,К+-АТФазы

2.1.7. Влияние N0 на активность Ыа+,К+-АТФазы

2.2. Экзогенные модификаторы активности Ыа+,К+-АТФазы

2.2.1. Палитоксин

2.2.2. Сангинарин

ГЛАВА III. Материалы и методы исследований

3.1. Определение активности Ыа+,К+-АТФазы

3.2. Определение активности Ыа+,К+-АТФазы эритроцитов крысы

3.3. Получение микросом и диализата микросомно-цитоплазматической фракции из мозга крупного рогатого скота

3.4. Обнаружение веществ после разделения смесей методом ТСХ на силуфоле и на пластинках с закрепленным слоем силикагеля

3.5. Кислотный гидролиз ингибитора Ыа ,К -АТФазы из мозга крупного рогатого скота

3.6. Определение молекулярной массы ингибитора, выделенного из мозга крупного рогатого скота

3.7. Физико-химические методы исследования структуры ингибитора Ыа+,К+-АТФазы, выделенного из мозга крупного рогатого скота

3.8. Синтез Ы-оксидов пиридина и хинолина и их производных

3.9. Статистическая обработка результатов

ГЛАВА IV. Экспериментальные результаты

4.1. Выделение эндогенного ингибитора

4.2. Влияние Ы-оксидов пиридина и хинолина на активность №+,К+-АТФазы

ГЛАВА V. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

ВЫВОДЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Влияние эндогенных и экзогенных модификаторов на активность Na+, K+-атфазы»

Актуальность проблемы. Ыа+,К+-АТФаза — фермент с олигомерной структурной организацией, встроенный в плазматическую мембрану животных клеток. Функции, выполняемые данным ферментом разнообразны: перенос ионов Na+ и К+ против их концентрационного градиента, участие в создании мембранного потенциала клетки, в регуляции водно-солевого обмена. В ряде тканей роль Ыа+,К+-АТФазы связана с транспортом субстратов для клеточного метаболизма. Выявлено участие Ыа+,К+-АТФазы в реализации межклеточных контактов и её связь с цитоскелетом. Последние годы активно изучается рецепторная функция фермента и его влияние на работу ядерного аппарата клетки (Лопина О.Д., 2001).

Учитывая выше сказанное, естественно предположить наличие сложной, гибкой, разноуровневой системы регуляции активности №+,К+-АТФазы. В связи с этим усилия многих исследователей были направлены на поиски регуляторов активности фермента.

Решение этой проблемы имеет не только научное, но и практическое значение. В частности, изменение концентрации модификаторов активности фермента в организме, как полагают, связано с развитием и течением гипертонии, патогенеза хронической сердечной, почечной недостаточности, ишемии (de Wardener Н.Е., 1985; Haddy F.J. 1990; Schwinger R.H., 2003;). Проводились исследования, выявляющие корреляцию между поведенческими реакциями и высокой активностью №+,К+-АТФазы, что может непосредственно влиять на способность к обучению. Снижение активности Ыа+,К+-АТФазы, по-видимому, является одним из патогенетических факторов развития аллергического энцефаломиелита. Эти изменения наблюдаются еще до появления клинических признаков данного заболевания (Кучмеровская Т.М. и соавт., 2001). Существует также мнение, что злокачественное перерождение некоторых тканей начинается с того, что клетка не в состоянии восстановить нормальное соотношение Na+/K+. Это происходит вследствие повреждения мембраны и ее повышенной проницаемости для этих ионов или в результате взаимодействия сердечных гликозидов различного происхождения с Ма+,К+-АТФазой. Следствием этого может быть запуск метаболических реакций, приводящих к индукции онкогенов (Nakagawa Y. et al., 1992; Numazawa S. et al., 1996; Szabo E. et al., 1998).

Поэтому неудивительно, что большое внимание уделяется поиску как эндогенных, так и экзогенных модификаторов активности Ыа+,К+-АТФазы.

К настоящему времени из коры надпочечников и гипоталамуса млекопитающих получен в очищенном состоянии эндогенный оуабаин -высоко специфичный ингибитор Ыа+,К+-АТФазы, химическая структура которого идентична структуре сердечных гликозидов растительного происхождения (Schoner W., 2001)

Важность выполняемых функций Ыа+,К+-АТФазой, существование нескольких изоформ фермента, их различная устойчивость к сердечным гликозидам (существует оуабаинрезистентная форма Ыа+,К+-АТФазы) (Болдырев A.A., 2001) дают основания предполагать о существовании в организме позвоночных других модификаторов данного фермента, отличающихся по структуре от выделенного эндогенного оуабаина. И действительно, в результате многочисленных экспериментов были получены вещества, воздействующие на активность Na+,K+-ATOa3bi, по структуре не являющиеся гликозидами (Елаев Н.Р., 1994).

Целью настоящей работы явилось выделение эндогенного ингибитора Ыа+,К+-АТФазы нервных клеток из ткани головного мозга крупного рогатого скота, характеристика его структуры, а также синтез новых биологически активных соединений, способных изменять активность изучаемого фермента.

Исходя из поставленной цели были сформулированы следующие задачи:

1.Выделение и очистка из мозга крупного рогатого скота ингибитора Ыа+,К+-АТФазы. Характеристика его структуры.

2. Изучение влияния выделенного ингибитора на скорость АТФазной реакции.

3.Синтез И-оксидов пиридина и хинолина, оценка возможности их использования в качестве экзогенных веществ-модификаторов активности Ш+,К+-АТФазы.

4. Сопоставление специфичности эндогенных и экзогенных ингибиторов №+,К+-АТФазы.

Научная значимость работы состоит в том, что выделен и очищен до гомогенного состояния из мозга крупного рогатого скота новый ингибитор №+,К+-АТФазы нервных клеток. Идентифицирована химическая структура и изучены его свойства. Выделенное соединение, тройное к Ыа+,К+-АТФазе, является представителем нового класса ингибиторов этого фермента. Данный ингибитор, отличающийся по строению от эндогенного оуабаина, характеризуется аналогичной специфичностью, ингибирующей активностью, действующей при концентрации до 10"8 М, что сопоставимо с действием оуабаина. Впервые показано, что синтезированные И-оксиды пиридина и хинолина и их производные, ингибирующие Ка+,К+-АТФазу нервных клеток, также проявляют высокое сродство к данному ферменту. Полученные данные расширяют представления о возможностях влияния модификаторов активности изучаемого фермента на физиологические процессы.

Научно-практическая значимость исследования заключается в том, что выделенный ингибитор, его характеристики могут быть использованы для патогенетически обоснованного подхода к терапии ряда заболеваний, связанных с нарушением функций №+,К+-АТФазы. Получение гетероароматических Ы-оксидов пиридина и хинолина и их производных может послужить основой для разработки новых фармакологических препаратов, используемых для экзогенной регуляции активности фермента.

На защиту выносятся следующие положения:

1. В ткани головного мозга крупного рогатого скота обнаружен неизвестный ранее ингибитор №+,К+-АТФазы.

2. Этот ингибитор оказался ациклическим аминоспиртом с молекулярной массой 200 Да.

3. Предложена примерная формула и возможный механизм действия выделенного ингибитора Na+,K+-ATOa3bi.

4. Разработан синтез N-оксидов пиридина и хинолина и их производных, специфически ингибирующих активность Na+,K+-ATOa3bi.

5. Сопоставлены степени аффиности эндогенных и экзогенных ингибиторов Ка+,К+-АТФазы.

Апробация работы. Материалы работы были представлены на 11 международном симпозиуме по органическому синтезу в Амстердаме (Амстердам, 1996); на международной конференции студентов и молодых ученых Санкт-Петербургского медицинского университета им. И.П. Павлова (Санкт-Петербург, 2004).

Публикации. По теме диссертации опубликовано 8 научных работ.

Заключение диссертации по теме «Биохимия», Батоцыренова, Екатерина Геннадьевна

ВЫВОДЫ

1. Из ткани головного мозга крупного рогатого скота выделен и очищен до гомогенного состояния неизвестный ранее ингибитор Ыа+,К+-АТФазы.

2. Индивидуальность выделенного ингибитора показана методами ТСХ и ВЭЖХ. Молекулярная масса ингибитора составляет 200 Да.

3. Выделенный ингибитор является аминоспиртом, на что указывают данные ИК-, УФ-, ПМР-, 13С-ЯМР-, масс-спектров.

4. Предложены примерная формула выделенного ингибитора, а также возможный механизм его действия.

5. Разработана новая методика синтеза гидрогалогенидов КГ-оксидов 4-галогенхинолинов.

6. Синтезированые И-оксиды пиридина и хинолина и их производные являются высоко специфичными ингибиторами мембранной Ма+,К+-АТФазы и могут быть рекомендованы для разработки на их основе фармакологически активных препаратов.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Батоцыренова, Екатерина Геннадьевна, 2005 год

1. Акопова О. В., Харламова О.Н., Вавилова Г.Л. Влияние L-аргинина наактивность Ыа+,К+-АТФазы эндотелия аорты крысы // Биохимия. 2002. -Т.67,№9.-С. 1277-1281.

2. Андреев В.П., Елаев Н.Р., Унжаков А.Р. Регуляция норадреналином биосинтеза №,К-АТФазы и ее низкомолекулярного ингибитора // Нейрохимия. 1984. - Т.З, № 4. с. 443-448.

3. Андреев В.П., Рыжаков A.B., Теканова C.B. Стирильные производные N-оксида хинолина // ХГС. 1995. - № 4. - С. 518-521.

4. Андреев В.П., Батоцыренова Е.Г., Рыжаков A.B., Родина Л.Л. Процессы внутримолекулярного переноса заряда в ряду стирильных производных N-оксидовпиридина и хинолина // ХГС. 1998. - №8. - С. 1093-1102.

5. Болдырев A.A., Лопина О.Д., Свинухова И.А. Роль структуры субстрата в функционировании Иа+,К+-АТФазы // Биохимия. 1989. - Т.54, № 6. - С. 895-907.

6. Болдырев A.A., Рубцов A.M., Лопина О. Д. и др. Влияние лигандов на вращательную подвижность Ыа+,К+-АТФазы // Биохимия. — 1995. Т. 60. - С. 1032-1039.

7. Болдырев A.A. Функциональные взаимодействия между глутаматными рецепторами разных классов // Бюлл. эксперим. биол. и медицины. 2000. -Т. 130, №9.-С. 244-251.

8. Болдырев A.A. Ыа+,К+-АТФаза как олигомерный ансамбль // Биохимия. -2001.-Т. 66, №8 .-С. 1013-1025.

9. Болдырев A.A., Булыгина Е.Р., Герасимова O.B. и др. Функциональная взаимосвязь между На+,К+-АТФазой и NMDA-рецепторами в гранулярных клетках мозжечка крыс // Биохимия. 2004. - Т.69, № 4. - С. 530-536.

10. Булыгина Е.Р., Ляпина Л.Ю., Болдырев A.A. Активация глутаматных рецепторов ингибирует Ыа+,К+-АТФазу гранулярных клеток мозжечка // Биохимия. 2002. - Т. 67, № 9. - С. 1209-1214.

11. Бурдь В.Н., К-Х ван Пе. Галогенирующие ферменты в биосинтезе антибиотиков // Биохимия. 2001. - Т. 66, № 10. - С. 1407-1411.

12. Глебов Р.Н., Дмитриева Н.М. Свойства Ыа+,К+-АТФазы из коры головного мозга крыс // Биохимия. 1974. - Т. 34, вып.4. - С.822-824.

13. Елаев Н.Р. Корреляция Ка,К-АТФазной активности и синтеза белков в мембранах нервных клеток при воздействии АЦХ // Цитология. 1978. - Т. 20, № 8. - С. 970-972.

14. Елаев Н.Р., Андреев В.П., Шаврина Н.В. Эндогенные активаторы и ингибиторы №+,К+-АТФазы, индуцируемые АЦХ // Бюлл. Экспер. Биологии и медиц. 1983. - Т. 95, № 2. - С. 40-42.

15. Елаев Н.Р., Байгильдина A.A. Ингибитор №+,К+-АТФазы мембран нервных клеток. Выделение и общая характеристика // Биохимия. 1994. - Т. 59, №3.-С. 389-394.

16. Зубер В.Л. Метод тонкослойной хроматографии // Методы биохимических исследований. Ленинград: Изд. Ленинградского университета, 1982.-С. 19-24.

17. Капля A.A. Структурно-функциональные свойства изоформ каталитической субъединицы №+,К+-АТФазы при мембранотропныхвоздействиях // Тез. докл. 2-го съезда биофизиков. Россия: М., 1999. - Т. 2.-С. 513-514.

18. Колямшин O.A., Кормачев В.В., Митрасов Ю.Н., Братилов Б.И. N-окиси пиридинов // Деп.ОНИНТЭ. Чебоксары. 1987. - 95с.

19. Кривой И.И., Лопатина Е.В., Кравцова В.В. Роль К+-каналов и Na+,K+-АТФазы в гиперполяризации мембраны скелетных мышечных волокон, вызываемых ацетилхолином // Биол. Мембраны. 2001. - Т. 18, № 1. - С. 1015.

20. Кучмеровская Т.М., Чичковская Г.В., Шиманский И.А. и др. Изучение • активности Na+,K+-ATOa3bi и НАД+-гликогидролазы в тканях морскихсвинок при экспериментальном аллергическом энцефаломиелите // Доп. Нац. Ан. Укршни. 2001. - Т. 3. - С. 185-188.

21. Лопина О. Д. Na+,K+-ATOa3a: структура, механизм и регуляция активности // Биол. Мембраны. 1999. - Т. 16, № 6. - С. 584-600.

22. Лопина О.Д. Взаимодействие каталитической субъединицы Na+,K+-АТФазы с клеточными белками и другими эндогенными регуляторами // Биохимия.-2001.-Т. 66, №10.-С. 1389-1400.

23. Муртазина Д.А., Петухов С.П., Рубцов A.M. и др. Фосфорилирование а-субъединицы Ыа+,К+-АТФазы из солевых желез уток под действием сАМР-зависимой протеинкиназы ингибирует активность фермента // Биохимия.m2001. Т. 66, № 8. - С. 1066-1077.

24. Орехов С.Н. О возможном механизме действия мембранносвязанного кальция на активность аденозинтрифосфатазы и проницаемость эритроцитов для одновалентных катионов // Биохимия. 1978. - Т.43, № 2. - С. 208-215.

25. Павлов К.В., Соколов B.C. Электрогенный транспорт ионов Na+,K+-АТФазой // Биол. мембраны. 1999. - Т. 16, № 6. - С. 604-637.

26. Петруняка В.В., Панющкина Е.А., Северина Е.П. Активация и ингибирование №+,К+-АТФазы мембран эритроцитов эндогенными Са+2зависимыми регуляторами. Са+2 зависимое действие уабаина на Са+2 -АТФазу // Биол. мембраны. - 1990. - Т. 7, № 4. - С. 352-358.

27. Рубцов A.M., Личунь Я., Лопина О.Д. и др. Исследование вращательной подвижности мембранносвязанной №+,К+-АТФазы // Биохимия. 1994. - Т. 59.-С. 1909-1916.

28. Тицкий Г.Д., Туровская М.К. Кинетика образования ацилоксипиридиниевой соли и ее реакции в анилином в ацетонитриле // Журн. орган, химии. 1992. - Т. 28, № 9. - С. 1911 -1916.

29. Толстиков Г.А., Джемилев У.М., Юрьев В.П., Гайсина М.Г. Новый способ получения N-окисей ароматических азотистых гетероциклов // ХГС. — 1971. — №7.-С. 1005.

30. Толстухина Т.И. Определение Na+,K+- активируемой, М§+2-зависимой АТФазной активности в субклеточных фракциях // Методы биохимических исследований. Ленинград: Изд. Ленинградского университета, 1982. - С. 258-260.

31. Федосова Н.У., Бердашкевич Е.А., Федосов С.Н., Болдырев A.A. Влияние температуры и pH на гидролиз АТР Иа+,К+-АТРазой солевых желез утки // Биохимия. 1993. -Т.58, № 7. - С. 1082-1089.

32. Чекмасова A.A., Анисимов А.Г., Немова H.H. Обработка тимидином клеток сублинии К562, резистентной к 2-(4'-диметиламиностирил)- хинолин -N- оксиду, приводит к резкому усилению синтеза в клетках гемоглобина // Цитология. 2001. - Т. 43, № 4. - С. 409-410.

33. Чибалин A.B., Лопина О.Д., Петухов С.П., Василец Л.А. Фосфорилирование Ма+,К+-АТФазы протеинкиназой С и сАМР-зависимой протеинкиназой//Биол. Мембраны. 1991. —Т. 8.-С. 1140-1141.

34. Яковенко Л.В., Твердислов В.А., Твердислова И.Я. Молекулярная модель параметрического Na+- насоса клеточных мембран // Тез. докл. 2-го съезда биофизиков. Россия: М., 1999. - Т. 2. - С. 5 81.•

35. Aizman O., Uhlen P., Lai M. et al. Ouabain is a steroid hormone that signals with slow calcium oscillations // Proc. Natl. Acad. Sci. 2001. - Vol. 98. - P. 13420-13424.

36. Akagawa K., Hara N., Tsukada Y. Partial purification and properties of the inhibitors of Na+,K+-ATPase and ouabain-binding in bovine central nervous system //J. Neurochem. 1984. - Vol. 42. - P. 775-780.

37. Akera T., Brody T.M. Inotropic action of digitalis and ion transport // Life Sci. 1976.-Vol. 18.-P. 135-142.

38. Antolovic R., Bruller H.J., Bunk S. et al. Epitope mapping by aminoacids-* sequence-specific antibodies reveals that both ends of the a-subunit of Na+,K+

39. ATPase are located on the cytoplasmic side of the membrane // Eur. J. Biochem. -1991.-Vol. 199.-P. 195-202.

40. Antolovic R., Kost H., Mohadjerani M. et al. A specific binding protein for cardiac glycosides exists in bovine serum // J. Biol. Chem. 1998. - Vol. 273. - P. 16259-16264.

41. Askari A., Huang W. Na+,K+-ATPase: evidence for the binding of ATP to the phosphoenzyme // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1982. - Vol. 104. - P. 1447-1453.

42. Bagrov A.Y., Fedorova O.V., Maslova M.N. et al. Endogenous plasma Na+,K+-ATPase inhibitory activity and digixin-like immunoreactivity after acutemyocardial infarction // Cardiovasc. Res. 1991. - Vol. 25. - P. 371-377.

43. Bagrov A.Y., Fedorova O.V., Dmitrieva R.I. et al. Characterization of a urinary bufodienolide Na+,K+-ATPase inhibitor in patients after acute myocardial infarction // Hypertension. 1998. - Vol. 3. - P. 1097-1103.

44. Bauer N., Neu H., Kirch U. et al. Release of endogenous ouabain to blood exercise of circulation in under the control of epinephrine and angiotensin-II // Biol. Chem. -2001.- Vol. 3 82. P. 109-111.

45. Beguin P., Nang X., Firsov D. et al. The y-subunit is a specific component of the Na+,K+-ATPase and modulates it's transport function // EMBO J. 1997. -Vol. 16.-P. 4250-4260.

46. Beltowski J., Marciniak A., Wojcicka G., Gorny D. Nitric oxide decreases renal medullary Na+,K+-ATPase activity through cyclic GMP-protein kinase C dependent mechanism // J. Physiol. Pharmacol. 2003. - Vol. 54(2). - P. 191-210.

47. Blaustein M.P. Phisiological effects of endogenous ouabain: control of intacellular Ca stores and cell responsiveness // Am. J. Physiol. 1993.- Vol. 264.-P. 1367-1387.

48. Blaustein M.P., Juhaszowa M., Golovina V.A. The cellular mechanism ofaction of cardiotonic steroids. A new hypothesis // Clin. Exp. Hypertens. 1998. -Vol. 20.-P. 691-703.

49. Bogdanova A.Y., Ogunshola O.O., Bauer C., Gassmann M. Pivotal role of reduced glutathione in oxygen-induced regulation of the Na+,K+-pump in mouse erythrocyte // J. Membrane Biol. 2003. - Vol. 195. - P. 33-42.

50. Boldyrev A.A., Bulygina E.R. Na+,K+-ATPase and oxidative stress // Ann. N.Y. Acad.Sci. Vol. 834. - P. 666-668.

51. Boulanger B.R., Lilly M.P., Hamlyn J.M. et al. Ouabain is secreted by the adrenal gland of the awake dogs // Am. J. Physiol. 1993. - Vol. 264. - P. E413-E419.

52. Brink C., de Jager P.J. N-oksiede van die metielpiridiene. I. Die Daarstellung van stirielpiridiene wet behulp van N-oksialkielpiridinium derivate // Tydskr.Natuurwet. 1963. - Vol. 3, № 2. - P. 74-80.

53. Brody M.J., Fink G.D., Buggy J. et al. The role of the anteroventral third ventricle region in the experimental hypertension // Circ. Res. 1978. - Vol. 43 (suppl.I). - P. 2-1.

54. Bulygina E. Activation of glutamate receptors inhibits Na+,K+-ATPase of cerebellum granule cells // Biochemistry. 2002. - Vol. 67. - P. 1209-1214.

55. Butt A.N., Semra Y.K., Lane S.J. et al. Endogenous ouabain secretion in man is not regulated by ACTH // J. Steroid Biochem Mol. Biol. 1998. - Vol. 66. - P. 151-157.

56. Cayanis E., Russo J.J., Wu Y.-S., Edelman I.S. Serum independence of low K+ induction of Na+,K+-ATPase. Possible role of c-fos // J. Membr. Biol. Vol. 125. -P. 163-170.

57. Cloix J.F., Crabos M., Wainer I.W. et al. //Biochem. Biophys. Res. Commun. -1985.-Vol. 131.-P. 1234-1240.

58. Colonna T.E., Huynh L., Fambrough D.M. Subunit interactions in the Na+,K+-ATPase explored with the yeast two-hybrid system // J. Biol. Chem. 1997. - Vol. 272.-P. 12366-12372.

59. Dean R.B. Theories of electrolyte equilibrium in muscle // Biol. Symp. 1941. -Vol.3.-P. 331-348.

60. Dluhy R.G., Willians G.H. Endocrine hypertension. In Willams textbook of Endocrinology, 9th edn. 1998. - P. 729-749.

61. Dobrota D., Matejovicova M., Kurella E.C., Boldyrev A.A. Na+,K+-ATPase under oxidative stress: molecular mechanisms of injury // Cell Moll. Neurobiol. -1999.-Vol. 19.-P. 141-149.

62. Donnet C., Arystarkhova E., Sweadner K.J. Thermal denaturation of the Na+,K+-ATPase provides evidence for a-a oligomeric interaction and y-subunit association with the c-terminal domain // J. Biol. Chem. 2001. - Vol. 276. - P. 7357-7365.

63. Eisner D.A., Smith T.W. The Na+,K+-pump and its effectors in cardiac muscle. N.Y. - Raven press. - P. 863-902.

64. Ferrari R., Ceconi C., Curello S. et al. Oxygen free radicals and myocardial damage: protective role of thiol-containing agents // Am. J. Med. — 1991. Vol. 19.-P. 95S-105S.

65. Fedorova O.V., Kolodkin N.I., Agalakova N.I. et al. Marinobufogenin an endogenous a-1-sodium pump ligand in hypertensive Dahl salt-sensitive rats // Hypertension. 2001. - Vol. 37. - P. 462-466.

66. Geering K., Meyer D.I., Paccolat M.P. et al. Membrane insertion of a- and ß-subunits of Na+,K+-ATPase // J.Biol.Chem. 1985. - Vol. 260. - P. 5154-5160.

67. Glynn I.M. Annual review prize lecture. "All hands to the sodium pump" // J. Physiol. 1993. - Vol. 462. - P. 1-30.

68. Gottlieb S.S., Rogowski A.C., Weinberg M. et al. Elevated concentrations of endogenous ouabain in patients with congestive heart failure // Curculation.• 1992. Vol. 86. - P. 420-425.

69. Göbel B.O., Duhm J. Effect of furosemide on ouabain resistant Na+ and K+ ion fluxes and volume of human erythrocytes // Pfluegers. Arch. 1982. - Vol. 394. -P. R28-R40.

70. Gruber K.A., Whitaker J.M., Buskalew V.M. Endogenous digitalis-like substance in plasma of volume-expanded dogs // Nature. 1980. - Vol. 287. - P. 743-745.

71. Guennoun S., Horisberger J-D. Cysteine-scanning mutagenesis study of the sizth transmembrane segment of the Na+,K+-ATPase a-subunit // FEBS Letters. -2002.-Vol. 513.-P. 277-281.

72. Haas M., Askari A., Xie Z. Involvement of Src and epidermal growth factorreceptor in the signal transducing function of Na+,K+-ATPase // J.Biol. Chem. -2000. Vol. 275. - P. 27832-27837.

73. Haber E., Haupert G. The search for a hypothalamic Na+,K+-ATPase inhibitor // Hypertension. 1987. - Vol. 9, No 4. - P. 315-324.

74. Habermann E. Palytoxin acts through Na+,K+-ATPase // Toxicon. 1989. -Vol. 27.-P. 1171-1187.

75. Haddy F.J. Digitalis-like circulation factor in hypertension: potential messenger between salt balance and intracellular sodium // Cardovasc.Drug ther. -1990.-Vol. 4. -P.343-349.•

76. Hamlyn J.M., Ringel R., Schaeffer J. et al. A circulation inhibitor of Na+,K+-ATPase associated with essential hypertension // Nature. 1982. - Vol. - 30. P. 650-652.

77. Hamlyn J.M., Blaustein M.P., Bova S. et al. Identification and characterization of a ouabain-like compound from human plasma // Proc. Natl. Acad. Sci. USA. -1991. Vol. 88. - P. 6259-6263.

78. Hamlyn J.M., Lu Z., Manunta P. et al. Observations on the nature, biosynthesis, secretion and significance of endogenous ouabain // Clin. Exp. Hypertens. 1998. - Vol. 20. - P. 523-533.

79. Harris E. J. Linkage of sodium and potassium active transport in humanerythrocytes. Active transport and secretion // Symp. Soc. Exptl. Biol. — 1954. -Vol. 8.-P. 228-230.

80. Haupert G.J., Carili C.T., Cantley l.C. Hypothalamic sodium-transport inhibitor is a high-affinity reversible inhibitor of Na+,K+-ATPase // Am. J. Physiol. 1984. -Vol. 247.-P. F919-F924.

81. Herrera V., Cova T., Sasson D., Ruiz-Oparo N. Development cell-specific regulation of a\, a2, a3 Na+,K+-ATPase gene expression // Am. J. Physiol. Cell Physiol. 1994. - Vol. 266. - P. C1301 -C1312.

82. Huang W. Different sensitivities of the Na+,K+-ATPase isoforms to oxidants // Biochim. Biophys. Acta. 1994. - Vol. 1190. - P. 108-114.

83. Ito K., Isao T., Higashiyama M. et al. Channel induction by palytoxin in yeast cells expressing Na+,K+-ATPase or its chimera with sarco/endoplasmic reticulum Ca+2-ATPase // FEBs letters. 2003. - Vol. 543. - P. 108-112.

84. Ivashevskaja S.N., Aleshina L.A., Andreev V.P. 4- (4'-dimethyIamino)N-oxide from powder data // Acta Cryst. 2003. - E. 59. - P. 1006-1008.

85. Jarishvili Т. Some aspects of regulation of Na+,K+-ATPase by neurotransmitters // Bull. Georg. Acad. Sci. 2001. - Vol. 163, № 2. - P. 343-345.

86. Jody K., Hirsh and Chau H. Wu. Palytoxin-induced single-channel currents from the sodium pump synthesized by in vitro expression // Toxicon. 1997. -Vol. 35, №2.-P. 169-176.

87. Karlish S.J., Beauge L.A., Glynn I.M. Vanadate inhibits Na+,K+-ATPase by blocking a conformational change of the unphosphorylated form // nature. 1979. -Vol. 282.-P. 333-335.

88. Katritzky A.R., Simmons P. Interacting at a distance in conjugated systems. Part I. The basicites of (amino- and nitro-phenyl) — pyridine and -pyridine 1-oxides // J.Chem. 1960, № 4. - P. 1511 -1516.

89. Kelly R.A., O'Hara D.S., Mitch W.E., Smith T.W. Identification of Na+,K+-ATPase inhibitors in human plasma as nonesterified fatty acids and lysophospholipids //J. Biol. Chem. 1986. - Vol. 261. - P. 11704-11711.

90. Kitano S., Morimoto S., Nishibe A. et al. Exogenous ouabain is accumulated in the adrenals and mimics the kinetics of endogenous digitalys-like factor in rats // Hypertens. 1998. - Vol. 21. - P. 47-56.

91. Kometiani P. Multipli signal transduction pathways link Na+,K+-ATPase to growth-related genes in cardiac myocites. The roles of Ras and mitogen-activated protein kinases //J.Biol. Chem. 1998.-Vol. 273.-P. 15249-15256.

92. Komiyama Y., Nishimura N., Nishino N. et al. Purification and characterization of ouabain-binding protein in human plasma // Clin. Exp. Hypertens. 1998. - Vol. 20. - P. 683-690.

93. Komiyama Y., Nishimura N., Munakata M. et al. Identification of endogenous ouabain in culture supernatant of PC 12 cells //J. Hypertens. 2001. - Vol. 19. - P. 229-236.

94. Kramer H. J., Heppe M., Weiler E. et al. Further characterization of the endogenous natriuretic and digoxin-like immunoreacting activities in human urine: effects of chages in sodium intake // Renal Physiol. 1985. - Vol. 8. - P. 80-99.m

95. Kuntzweiler T.A., Arguello J.M., Lingrel J.B. Asp.804 and asp 808 in the transmembrane domain of the Na+,K+-ATPase alpha subunit are cation coordinating residues // J. Biol. Chem. 1996. - Vol. 271. - P. 29682-29687.

96. Kurella E., Kukley M., Tyulina O. et al. Kinetic parameters of Na+,K+-ATPase modified by free radicals in vitro and in vivo // Ann. N.Y. Acad. Sci. 1997. -Vol. 834.-P. 661-665.

97. Laredo J., Hamilton B.P., Hamlyn J.M. Ouabain is secreted by bovine adrenocortical cells // Endocrinology. 1994. - Vol. 135. - P. 794-797.l.-P. 1-18.

98. Laredo J., Hamilton J. P., Hamlyn J.M. Secretion of endogenous ouabainfrom bovine adrenal cells. Role of zona glomerulosa and zona fasciculate // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1995. - Vol. 212. - P. 487-493.

99. Lemas M.V., Hamrick M., Takeyasu K., Fambrough D.M. 26 Amino acids of an extracellular domain of the Na+,K+-ATPase a-subunit are sufficient for assembly with the Na+,K+-ATPase J3-subunit // J. Biol. Chem. 1994. - Vol. 269. -P. 8255-8259.

100. Lichstein D., Samuelov S. Endogenous "ouabain-like" activity in rat brain // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1980. - Vol. 96. - P. 1518-1523.

101. Lichstein D., Mine D., Bourrit A. Evidence for the presence of "ouabain-like" compound in human cerebrospinal fluid // Brain. Res. 1985. — Vol. 325. - P. 1319.

102. Lichstein D., Gati I., Samuelov S. et al. Identification of digitalis-like compounds in human cataractous lenses // Eur. J. Biochem. 1993. - Vol. 216. -P. 261-268.

103. Lichstein D., McGowan M.N., Russel P., Carber D.A. Digitalis and digitalislike compounds down-regulate gene expression of intracellular signaling protein 14-3-3 in rat lenses//Hypertension.-2000.-Vol. 23.-P. S51-S53.

104. Lowry O.H., Rosenbrough N.J., Farr A.L., Randall R.J. Protein measurement with the folinphenol reagent // J. Biol. Chem. 1951. - Vol. 193. - P. 265-275.

105. Manunta P., Stella P., Rivera R. et al. Left venteicular mass, stroke volume and oubain-like factor in essential hypertension // Hypertension. 1999. - Vol. 34. - P. 450-456.

106. The MERCK INDEX // An encyclopedia of chemicals, drugs and biologicals. 13-ed. 2001. -№ 7068; № 8433.

107. Mohammadi K., Kometiani P., Xie Z., Askari A. Role of protein kinase C in the signal pathways that link Na+,K+-ATPase to ERK // J. Biol. Chem. 2001. -Vol. 276.-P. 42050-42056.

108. Morgan K., Lewis M.D., Spurlock G., et al. Characterization and partial purification of the sodium-potassium-ATPase inhibitor released from cultured rat hypothalamic cells // J. Biol. Chem. 1985. - Vol. 260. - P. 13595-13600.

109. Nakagawa Y., Rivera V., Larner A.C. A role for the Na+,K+-ATPase in the control of human c-fos and c-jun transcription // J.Biol.Chem. 1992. - Vol. 267. P. 8785-8788.

110. Numazawa S., Inone N., Nakura H. et al. A cardiotonic steroid bufalin-induced differentation of THP-1 cells. Involment of Na+,K+-ATPase inhibition in the early changes in proto-oncogene expression // Biochem. Pharmacol. 1996. -Vol. 52.-P. 321-329.

111. Overbeck H.W., Pamnani M.B., Akera T. et al. Depressed functional of a ouabain-sensitive sodium-potassium pump in blood vessels from renal hypertensive dogs // Circ. Res. 1976. - Vol. 38 (suppl. II). - P. 48-52.

112. Perrin A., Brasmes B., Chambaz E.M., Defayer G. Bovine adrenocortical cells in culture synthesize an ouabain-like compound // Mol. Cell. Endocrinol. -1997.-Vol. 126.-P. 7-15.

113. Plesner I.W., Plesner L., Norby J.G., Klodos I. The steady-state kinetic mechanism of ATP hydrolysis catalysed by membrane-bound Na+,K+-ATPase from ox brain. A minimal model // Biochim. Biophys. Acta. 1981. - Vol. 643.• P. 483-494.

114. Post R.L., Merrit C.R., Kinsolving C.D., Albright C.D. Membrane adenosine triphosphate as a participant in the active transport of sodium and potassium in the human erythrocyte//J.Biol. Chem.- 1960.-Vol. 235.-P. 1796-1798.

115. Repke K., Portius H.J. Über den einfluss verschiedener kardiotonischer verbindugen auf die transport -ATPase in der zellmembrane des hezzmuskels // Arch, exptl. Pathol. Pharmakol. 1963. - Vol. 245. - P. 59-60.

116. Repke K.R., Schoen R. Flip-flop model of Na+,K+-ATPase function // Acta Biol. Med. Ger. 1973. - Vol. 31. - P. K19-K30.

117. Ringer S. Regarding the influence of the organic constituents of the blood on the contractility of the ventricle // J. Physiol. 1885.- Vol. 6. - P. 361-381.

118. Ryzhakov A.V. Molecular complexes of heteroaromatic N-oxides and their reactions with nucleophiles // Heterocycles. 2003. - Vol. 60, № 2. - P.419-435.

119. Scheiner-Bobis G., Farley F.A. Subunit requirements for the expression of functional sodium pumps in yeast cells // Biochim. Biophys.Acta. 1994. - Vol. 1193.-P. 226-234.

120. Scheiner-Bobis G., Meyer D., Christ M., Habermann E. Palytoxin induces K+ efflux from yeast cells expressing the mammalian sodium pump // Mol. Pharmacol. 1994.-Vol. 45.-P. 1132-1166.

121. Scheiner-Bobis G. Sanguinarine induces K+ outflow from yeast cells expressing mammalian sodium pumps // Naunyn-Schmiedeberg's Arch. Pharmacol. 2000. - Vol. 363. - P. 203-208.

122. Scheiner-Bobis G., Schoner W. A fresh faset for ouabain action // Nat. Med. -2001.-Vol. 7.-P. 1288-1289.

123. Scheiner-Bobis G. The sodium pump // Eur. J. of Biochem. 2002. - Vol. 269, Is. 10.-P. 2424-2433.

124. Scheiner-Bobis G., Htibschle T., Diener M. Action of palytoxin on apical H+X-ATPase in rat colon // Eur. J. of Biochem. 2002. - Vol. 269, Is. 16. - P. 3905-3911.

125. Schoner W. Endogenous digitalis-like factors // Clin. Exp. Hypertens. 1992. -Vol. A14.-P. 767-856.

126. Schoner W. Endogenous cardiotonic steroids // Cell Mol. Biol. -2001. Vol. 47.-P. 273-280.

127. Schoner W. Endogenous cardiac glycosides a new class of steroid hormones // Eur. J. Biochem. -2002. Vol. 269. - P. 2440-2448.

128. Schatzmann HJ. Herzglykozide als hemmstoffe fur den aktiven kalium und natriumtrasport durch die eiythrocytenmembran // Helv.Physiol. Pharmacol. Acta. - 1953.-Vol. 11.-P. 346-354.

129. Schwinger R.H., Bundgaard H., Muller-Ehmsen J., Kjeldsen K. The Na+,K+-ATPase in the failing human heart // Cardiovasc. Res. 2003. - Vol. 57.

130. Seifen E., Adams R.J., Riemer R.K. Sanquinarine: A positive inotropic alkaloid actions which inhibits cardiac Na+,K+-ATPase // Eur. J. Pharm. 1979. -Vol. 60, Is. 4.-P. 373-377.

131. Shainskaya A., Karlish S.J. Evidence that the cation occlusion domain of Na+,K+-ATPase consists of a complex of membrane-spanning segments. Analysis of limit membrane-embedded tryptyc fragments // J. Biol. Chem. 1994. - Vol. 269.-P. 10780-10789.

132. Shao Y., Pressley T., Ismail-Beigi F. Na+,K+-ATPase mRNA Pi expression in rat myocardium effect of thyroid status // eur. J. Biochem. - 1999. - Vol. 260,

133. Skou J.C. The influence of some cations on an adenosinetriphosphatase from peripheral nerves // Biochim. Biophys. Acta. 1957. - Vol. 23. - P. 394-401.

134. Skou J.C. The influence of some cations on an adenosinetriphosphatase from peripheral nerves // Biochim. Biophys. Acta. 1957. - Vol. 23. - P. 394-401.

135. Skou J.C. Overview the Na+,K+-pump // Methods Enzymol. 1988. - Vol. 156. -P. 1-25.

136. Skriver E., Maunsbach A.B., Hebert H. et al. Two dimensional crystalline arrays of Na+,K+-ATPase with new subunit interactions induced by cobalt-tetraammineATP //j. Ultrastruct. Mol. Struct. Res. 1989. - Vol. 102. - P. 189195.

137. Songu-Mize E., Bealer S.L., Caldwell R.W. Effect of AV3V lesions on development of DOCA-salt hypertension and vascular Na+-pump activity // Hypertension. 1982. - Vol. 4. - P. 575-580.

138. Sweadner K.J. Isosymes of the Na+,K+-ATPase // Biochim. Biophys. Acta. -1989.-Vol. 988.-P. 185-220.

139. Szabo E., Francis J., Birrer M.J. Alterations in differentiation and apoptosis induced by bufalin in c-jun over expressing U-937 cells // Int.J.Oncol. 1998. -Vol. 12.-P. 403-409.

140. Takeda K., Kawamura M. The functional unit of Na+,K+-ATPase is a monomeric a(3 protomer //Biochem. and Biophts. Res. Commun. 2001. - Vol. 280,No. 5.-P. 1364-1366.

141. Tal D.M., Katchalsky S., Lichstein D., Karlish J.D. Endogenous "ouabain-like" activity in bovine plasma // Biochem. Biophys. Res. Comm. 1986. - Vol. 135.-P. 1-8.

142. Tamura I. Identification of linoleic and oleic acids as endogenous Na+,K+-ATPase inhibitors from acute volume-expanded hog plasma // J. Biol. Chem. -1985. Vol. 260. - P. 9672-9677.

143. Taniguchi K., Kaya S., Abe K., Mardh S. The oligomeric nature of Na+,K+-transport ATPase//J. Biochem.-2001.-Vol. 129.-P. 335-342.

144. Tran C.M., Scheiner-Bobis G., Schoner W., Farley R.A. Identification of an aminoacid in the ATP binding site of Na+,K+-ATPase after photochemical labeling with 8-azido-ATP // Biochemistry. 1994. - Vol. 33. - P. 4140-4147.

145. Tripodi G., Valtorta F., Torielli L. et al. Hypertension-associted point mutation in the adducing a and ß subunits affect action cytoskeleton and ion transport//J. Clin. Invest. 1996.-Vol. 97.-P. 2815-2822.22 +

146. Vilsen B., Andersen J.P., Petersen J., Jorgensen P.L. Occlusion of Na and 86Rb+ in membrane bound and soluble protomeric aß subunits of Na+,K+-ATPase // J. Biol. Chem. 1987. - Vol. 262. - P. 10511 -10517.

147. Wiley S., Hutchinson J.S., Medelsohn F.A. O., Doyle A.E. Increased sodium permeability of erythocytes in spontaneously hypertensive rats // Clin. Exp. Pharmacol. Physiol. 1980. - Vol. 7. - P. 527-535.

148. Xie Z., Kometiani P., Liu J. et al. Intracellular reactive oxygen species mediate the linkage of Na+,K+-ATPase to hypertrophy and its marker genes in cardiac myocytes //J. Biol. Chem. 1999. - Vol. 274. - P. 19323-19328.

149. Xie Z., Askari A. Na+,K+-ATPase as a signal transducer // Eur. J. Biochem. -2002. Vol. 269. - P. 2434-2439.

150. Yamada К., Goto A., Omata M. Adrenocorticotropin-induced hypertension rats:role of ouabain-like compound // Am. J. Hypertens. 1997. - Vol. 10. -403-408.