Влияние хорионического гонадотропина на пролиферацию и апоптоз клеток у крыс-носителей лимфосаркомы Плисса тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.03.01, кандидат биологических наук Филатова, Елена Николаевна

• Филатова, Елена Николаевна
• кандидат биологических наук
• 2010

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Филатова, Елена Николаевна

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. Обзор литературы

1.1. Общие представления о хорионическом гонадотропине

1.1.1. Физиологическая роль хорионического гонадотропина

1.1.2. Химическая природа и молекулярная структура хорионического гонадотропина

1.2. Опухолевый процесс

1.2.1. Теории канцерогенеза

1.2.2. Активация онкогенов при канцерогенезе

1.2.3. Молекулярные механизмы опухолевого процесса

1.2.4. Характеристика лимфосаркомы Плисса

1.3. Общие представления об апоптозе

1.3.1. Развитие представлений об апоптозе

1.3.2. Апоптоз и некроз: различия и морфологические особенности

1.3.3. Молекулярные механизмы апоптотических процессов

1.3.4. Апоптоз как мишень противоопухолевой терапии

1.4. Противоопухолевый иммунитет

1.4.1. Опухолевые антигены

1.4.2. Инициация противоопухолевого ответа

1.4.3. Противоопухолевые механизмы клеточного звена иммунной системы

1.4.4. Противоопухолевые механизмы гуморального звена иммунной системы

1.4.5. Пути ухода опухоли от иммунологического надзора

СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

Глава 2. Материалы и методы исследований

2.1'. Объект исследований

2.1.1. Изучение хорионического гонадотропина как индуктора апоптотических процессов в опухолевых клетках и мононуклеарных клетках периферической крови при лимфосаркоме Плисса

2.1.2. Изучение влияния хорионического гонадотропина на морфологические характеристики опухолевых клеток лимфосаркомы Плисса

2.1.3. Изучение влияния хорионического гонадотропина на на уровень митотической активности опухолевых клеток лимфосаркомы Плисса

2.1.4. Изучение влияния хорионического гонадотропина на темпы роста и размер лимфосаркомы Плисса

2.1.5. Изучение влияния хорионического гонадотропина на изменение состояния иммунной системы крыс при лимфосаркоме Плисса

2.2. Выделение мононуклеарных клеток из периферической крови

2.3. Выделение тотальной нуклеиновой кислоты из клеток

2.4. Электрофоретический метод исследования тотальной нуклеиновой кислоты клеток

2.5. Метод приготовления и окрашивания гистологических препаратов

2.6. Метод непрямой поверхностной иммунофлюоресценции

Глава 3. Результаты и обсуждение

3.1. Изучение хорионического гонадотропина как индуктора апоптотических процессов в клетках лимфосарокмы Плисса

3.2. Изучениехорионического гонадотропина как индуктора апоптотических процессов в мононуклеарных клетках периферической крови при лимфосаркоме Плисса

3.3. Влияние хорионического гонадотропина на морфологическую структуру лимфосаркомы Плисса

3.4. Влияние хорионического гонадотропина на митотическую Активность клеток лимфосаркомы Плисса

3.5. Влияние хорионического гонадотропина на темпы роста лимфосаркомы Плисса

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Влияние хорионического гонадотропина на пролиферацию и апоптоз клеток у крыс-носителей лимфосаркомы Плисса»

Актуальность проблемы

Хорионический гонадотропин (ХГ) - гетеродимерный гликопротеид массой 46 кД, который принадлежит к семейству гонадотропных гормонов, включающему помимо него соматомаммотропин, фолликуло-стимулирующий гормон, лютеинизирующий гормон (ЛГ). Гликопротеидные гормоны состоят из консервативной, общей для всех а-субъеденицы и уникальной /?-субъединицы, которая определяет биологическую специфичность гормона, а- и (3-субчастицы в гетеродимере связаны нековалентно (Кольман, Рём, 2000; Miller-Lindholm et al., 1999).

Аминокислотный состав р-субъединиц ХГ и ЛГ сходен на 83%, они проявляют большую степень гомологии. Структурное подобие (3-субъединиц этих гормонов отражает их функциональную схожесть: они связываются с одним рецептором (ЛГ/ХГ-рецептор) и проявляют похожие свойства (Lapthorn et al., 1994; Themmen, Huhtaniemi, 2000). В-субъединица ХГ высококонсервативна в эволюционном плане, что проявляется в высоком сходстве ее структур у разных видов млекопитающих и отсутчтвии видоспецифического действия гормона (Adam et al., 2007; Funaro et al., 2003).

Хорионический гонадотропин синтезируется и функционирует в хорионе трофобласта, плаценте, в тканях плода (Huhtaniemi et al., 1975), многих тканях детей и взрослых обоих полов (Borkowski, Muguardt, 1979; Braunstein et al.,

1979; Yochimoto et al., 1979). Гормон в очень больших количествах, на несколько порядков больше, чем в норме, появляется во время беременности в организме матери не только в крови и моче, но и во всех других тканях и жидкостях. Этому гормону отводят особую роль в поддержании беременности и развитии тканей зародыша. Он предотвращает регрессию желтого тела, обеспечивает достаточно высокий уровень прогестерона во время беременности и обладает депрессивным эффектом на продукцию антител организмом матери (Younger et. al., 1969). При этом гормон способен также 5 оказывать влияние и на процессы жизнедеятельности зрелого организма, например, на процессы регенерации тканей и органов, состояние иммунной системы (Валуйских и др., 1997; Солопаева, 2007; Khil et al., 2007; Russo, Russo , 2007; Wan et al., 2008).

На состояние популяции клеток оказывают влияние два процесса: пролиферация и апоптоз. Пролиферация приводит к увеличению общего количества клеток организма, а апоптотические процессы регулируют численность клеток, приводя к их элиминации. При этом оба процесса характерны как для нормальных клеток организма, так и для злокачественно трансформированных, однако регуляция пролиферации и апоптоза в данных клетках различается.

Показано, что ХГ усиливает регенерацию нормальных органов и тканей, стимулируя в них пролиферацию клеток (Солопаева, 2007). Обнаружено влияние ХГ на пролиферацию и апотоз злокачественно трансформированных клеток. В исследованиях разных авторов гормон угнетал размножение опухолевых клеток при саркоме Капоши, плоскоклеточном раке легкого, раке простаты, острой миелоидной лейкемии (Говалло, Дубровский, 1981; Мкртчян и др.,1990; Feldman et al., 1998; Gill et al., 1996; Hamed et al., 2008; Pfeffer et al., 2002; Samaniego et al., 1999;), но стимулировал рост опухолевых клеток при эпителиальных карциномах, таких как цервикальной карциноме и хориокарциноме (Hamada et al., 2005; lies, 2007; Li et al., 2008;).

В связи с неоднозначностью данных о действии ХГ на опухолевый рост и организм-опухоленоситель, мы провели экспериментальное изучение этого вопроса с использованием модельной системы, представляющей собой крыс-носителей лимфосаркомы Плисса. При этом проводилось изучение действия хорионического гонадотропина на апоптоз и пролиферацию не только в злокачественно трансформированных клетках лимфосаркомы Плисса, но и сравнение его с воздействием, оказываемым гормоном на нормальные клетки организма, в качестве которых выступали, в частности, мононуклеарные клетки крови животных-опухоленосителей.

Цель исследования

Целью данной работы являлось изучение влияния ХГ на апоптотическую активность и показатели роста злокачественно трансформированных опухолевых клеток и нормальных мононуклеарных клеток периферической крови на модели крыс-носителей лимфосаркомы Плисса.

Задачи исследования

1. Исследовать наличие низкомолекулярной фрагментации ДНК мононуклеарных клеток периферической крови и опухолевых клеток лимфосаркомы Плисса у крыс при воздействии различных доз ХГ в зависимости от схемы его введения и срока развития новообразования.

2. Определить характер влияния различных доз и способов введения ХГ на морфологические характеристики опухолевых клеток, а также морфологическое строение опухоли лимфосаркома Плисса.

3. Выявить характер влияния ХГ на митотическую активность опухолевых клеток лимфосаркомы Плисса в зависимости от дозы гормона, сроков его введения и количества перевиваемых опухолевых клеток.

4. Определить характер влияния различных доз и сроков введения ХГ на размер опухоли лимфосаркома Плисса на различные сутки развития новообразования.

5. Исследовать влияние ХГ на относительное содержание RT-Ia+ и CD4+ клеток в периферической крови крыс-опухоленосителей в зависимости от дозы гормона, схемы его введения и сроков наблюдения.

Научная новизна

Впервые показано дозозависимое действие ХГ на показатели роста злокачественно трансформированных клеток лимфосаркомы Плисса и нормальных мононуклеарных клеток крыс-опухоленосителей.

Установлено разнонаправленное действие, оказываемое гормоном на параметры роста здоровых и злокачественно трансформированных клеток. Показано, что ХГ способствует активации апоптотических процессов в опухолевых клетках лимфосаркомы Плисса, снижению их пролиферативной активности, замедлению темпов роста опухоли, а также нарушению ангиогенеза в опухоли. В то же время показано, что ХГ не является индутором апоптотических процессов в мононуклеарных клетках периферической крови и при этом нормализует измененное вследствие развития лимфосаркомы Плисса относительное содержание RT-Ia+ и. CD4+ клеток. вг периферической крови крыс-опухоленосителей.

Впервые было установлено, что наиболее эффективно действие гормона проявляется на ранних сроках развития новообразования.

Научно-практнческая значимость

Полученные в данной работе данные дополняют современные представления о влиянии ХГ на показатели роста злокачественно трансформированных опухолевых клеток лимфосаркомы Плисса и нормальных мононуклеарных клеток периферической крови крыс при опухоленосительстве.

Обнаруженные в ходе выполнения работы свойства ХГ оказывать комплексное воздействие на опухоль лимфосаркому Плисса, а также корректировать нарушения иммунной системы, возникшие вследствие онкоиммунодефицита, позволяют рассматривать этот гормон как потенциальный препарат для использования в комплексной противоопухолевой терапии.

На защиту выносятся следующие положения

1. ХГ оказывает влияние на апоптотические процессы, деление и морфологическое строение опухолевых клеток лимфосаркомы Плисса, а также на относительное содержание RT-Ia+ и CD4+ мононуклеарных клеток периферической крови крыс при лимфосаркоме Плисса.

2. ХГ оказывает разнонаправленный эффект на апоптотические процессы и процессы деления злокачественно трансформированных опухолевых клеток лимфосаркомы Плисса и здоровых CD4+ клеток периферической крови крыс.

3. Действие ХГ является дозозависимым и в наибольшей степени проявляется на ранних стадиях развития лимфосаркомы Плисса, однако не зависит от способа введения гормона.

Благодарности

Автор выражает искреннюю и глубокую признательность своим учителям и научным руководителям доктору биологических наук, профессору В. В. Новикову и доктору медицинских наук, профессору И. М. Солопаевой, без тесного взаимодействия с которыми данная работа вряд ли имела бы место. Автор искренне благодарит преподавателей и сотрудников кафедры молекулярной биологии и иммунологии биологического факультета ННГУ, сотрудников лаборатории молекулярной иммунологии бактериальных и вирусных инфекций ННИИЭМ, а также сотрудников НИИМБРЭ за помощь в проведении исследования и постоянную дружескую поддержку.

Заключение диссертации по теме «Физиология», Филатова, Елена Николаевна

выводы

1. Установлено, что ХГ в дозах 75 и 150 ЕД является индуктором апоптотических процессов в опухолевых клетках лимфосаркомы Плисса на ранних сроках ее развития вне зависимости от способа введения гормона.

2. Показано, что ХГ не вызывает фрагментации хромосомной ДНК в мононуклеарных клетках периферической крови крыс-носителей лимфосаркомы Плисса вне зависимости от схемы его введения и сроков наблюдения.

3. Установлено, что ХГ в дозах 75 и 150 ЕД тормозит митотическое деление опухолевых клеток лимфосаркомы Плисса, а также тормозит пролиферацию кровеносных сосудов и повреждает сосудистые стенки в опухоли лимфосаркома Плисса на десятые сутки ее развития.

4. Показана способность ХГ в дозе 150 ЕД на ранних сроках развития ч опухоли, а доз 25 и 50 ЕД — на ранних и поздних сроках развития опухоли тормозить рост лимфосаркомы Плисса.

5. Показана способность ХГ в дозах 1000, 150 и 75 ЕД нормализовать сниженное под воздействием онкоиммунодефицита относительное содержание CD4+ клеток периферической крови крыс, а также способность ХГ в дозах 150 и 1000 ЕД нормализовать повышенное в результате развития новообразования относительное содержание RT-Ia+ клеток в периферической крови крыс с лимфосаркомой Плисса на различных сроках развития новообразования.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Таким образом, нами было продемонстрировано, что ХГ оказывает разнонаправленное, иногда качественное, иногда количественное действие на некоторые процессы в нормальных и злокачественно трансформированных клетках организма. В опухолевых клетках лимфосаркомы Плисса ХГ тормозит митотическую активность, оказывает на систему ангиогенеза повреждающее действие, стимулирует апоптотические процессы. В мононуклеарных клетках периферической крови гормон вызывает нормализацию пониженного содержания CD4+ клеток крови и не стимулирует апоптоз. Наиболее выраженное действие ХГ наблюдалось на ранних стадиях развития лимфосаркомы Плисса, когда новообразование состояло преимущественно из опухолевых клеток.

Наши результаты отражают многофункциональное действие гормона: его способность регулировать разнонаправленные процессы в различных органах и тканях, которые в целом оказываются направленными на нормализацию состояния животного-опухоленосителя. Это явление имеет большое теоретическое значение в отношении изучения механизма разнонаправленного биологического действия гормона на нормальные и злокачественно трансформированные клетки.

При этом было выявлено дозозависимое действие гормона. Среди всех изученных нами доз, нами была определена доза ХГ в 75 ЕД, как оптимальная с точки зрения комплексного воздействия на ряд показателей при развитии лимфосаркомы Плисса у крыс. При введении 75 ЕД гормона у животных наблюдалось усиление апоптотической активности в опухолевых клетках и тенденция к нарушению ангиогенеза опухоли. На наш взглад, данная доза наиболее эффективно, по сравнению с другими изученными нами дозами, снижала уровень митотической активности опухолевых клеток лимфосаркомы Плисса, нормализовала уровень CD4+ клеток мононуклеарных кеток периферической крови крыс. Также под влиянием данной дозы наблюдалась тенденция к замедлению темпов роста опухоли.

Результаты наших экспериментов и исследования других авторов позволяют нам заключить, что ХГ является перспективным препаратом для использования в комплексной терапии при лечении онкологических заболеваний. Однако его применению должны предшествовать исследования механизма действия гормона, доз и курса введения, а также типов опухолей, при которых его применение будет оправданным.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Филатова, Елена Николаевна, 2010 год

1. Аптоз активированных лимфоцитов и подавление их пролиферативного ответа на митоген при контакте с эпителиальными клетками, происходящими из тимуса человека / М.Ф. Никонова, Е.В. Чегаева, М.М. Литвина и др. // Иммунология. - 1997. - №3. - С. 9 - 12.

2. Баграмян, Э.Р. Диагностическое значение исследования гормонов в акушерстве / Э.Р. Баграмян // Акушерство и гинекология. 1972. - № 10. - С. 3-9.

3. Белки. Часть 2. Мембранные белки адгезии: Учебное пособие / А.А. Бабаев, В.В. Новиков, Г.П. Ежова, Н.А. Добротина. Нижний Новгород: Изд-во ННГУ, 2004. - 59 с.

4. Берзин, Т. Биохимия гормонов / Т. Берзин. М.: Мир, 1964. - 400 с.

5. Валуйских, А.Н. Биологическая активность синтетического пептида-фрагмента бета-субъединицы хорионического гонадотропина человека: Автореф.Дисс. . канд.биол.наук / А.Н. Валуйских М., 1996. - 22 с.

6. Введение в молекулярную онкологию: Учебное пособие / Г.П. Ежова, Н.А. Добротина, А.А. Бабаев, В.В. Новиков.- Нижний Новгород: Изд-во ИНГУ, 2004. 124 с.

7. Гельфонд, Н.Е., Элементарный состав опухолевой ткани и сыворотки крови в условиях экспериментального канцерогенеза и его коррекции / Н.Е. Гельфонд, Е.В. Старкова, О.В.Шуваева, И.Е. Мичурин // Бюл. СО РАМН. 2005. - Т. 115, №1. - С. 28-32.

8. Георгиев, Г.П. Молекулярно-генетические механизмы прогрессии опухолей/ Г.П. Георгиев // Соросовский образовательный журнал. — 2000. — Т. 6,№ 11.-С. 2 -7.

9. Говалло, В.И. , Длительное наблюдение больных раком легкого с метастазами после операции и иммунологического лечения / В.И. Говалло, А.В. Дубровский // Вопр. онкологии. 1981. - №6. - С.69 - 73.

10. Говалло, В.И. Иммунология против рака / В.И. Говалло. М.: Знание, 1987. - 64 с. '

11. Говорка, Э. Плацента человека / Э. Говорка Варшава: Польское мед. изд-во, 1970. - 417 с.

12. Гормональная регуляция размножения у млекопитающих / Ред. К. Остина и Р. Шорта. М.: Наука, 1987. - 305 с.

13. Гуревич, В.Э. Вирус Эпштейна-Барр / В.Э. Гуревич // Клинич. онкогематология. Под ред. М. А. Волковой. М., Медицина, 2007. - С. 177 -189.

14. Димитров, Д.Я. Хориальный гонадотропин человека / Д.Я. Димитров. Пер. с болгарского И.П. Папазова. М.: Медицина, 1979. - 143 с.

15. Жимулев, И.Ф. Общая и молекулярная генетика / И.Ф. Жимулев. -Новосибирск, Изд-во Новосиб. ун-та: Сиб. унив. изд-во, 2002. 459 с.

16. Иванова, H.J1. Действие хорионического гонадотропина человека на печень крыс с хроническим токсическим гепатитом: Автореф. дисс. . канд.биол.наук / H.JI. Иванова. М., 1983. - 16 с.

17. Иммунологические методы / Ред. Г. Фримель. М.: Мир, 1987. - С. 244 -246.

18. Имянитов, Е.И. Фундаментальная онкология: наиболее примечательные события 2004 года / Е.И. Имянитов, К.П. Хансон // Практ. онкология. -2005. Т. 6, № 1. - С. 1 - 5.

19. Кадагидзе, З.Г. Иммунорегуляторные CD25+ CD4+ Т-клетки / З.Г. Кадагидзе, А.И. Черткова, Е.Г. Славина // Рос. биотер. журнал. — 2006. №2, Т. 5.-С. 13-21.

20. Кирпатовский, И.Д. Исследование иммунодепрессивных свойств хориогонина в эксперименте / И.Д. Кирпатовский, И.С. Поляков, Г.А. Рахманова // Пробл. гематологии и перелив, крови. 1981. - Т. 26, № 5. - С. 35 -38.

21. Кнорре, А.Г. Эмбриональный гистогенез / А.Г. Кнорре. JL: Медицина, 1971.-432 с.

22. Колпащикова, И.Ф. Общие и местные изменения в организме при экспериментальном повреждении печени и её регенерации: Автореф. дисс. . докт.мед.наук / И.Ф. Колпащикова. — Казань, 1983. 26 с.

23. Кольман, Я. Наглядная биохимия / Я. Кольман, К.-Г. Рем. М.: Мир, 2000. - 469 с.

24. Копнин, Б.П. Современные представления о механизмах злокачественного роста / Б.П. Копнин // Матер. X Российского онкологического конгресса. 2006. - С. 99 - 102.

25. Куклина, Е.М. Влияние хорионического гонадотропина на дифференцировку тимоцитов в присутствии эпителиальных клеток тимуса / Е.М. Куклина, С.В. Ширшев, Н.И. Шарова, А.А. Ярилин // Онтогенез. 2003. -Т. 34, № 1.-С. 36-42.

26. Куклина, Е.М. Роль хорионического гонадотропина в дифференцировке тимоцитов / Е.М. Куклина, С.В. Ширшев, Н.И. Шарова, А.А. Ярилин // Онтогенез. 1999. - Т. 30, № 5. - С. 341 - 345.

27. Лихтенштейн, А.В. Опухолевый рост: ткани, клетки, молекулы / А.В. Лихтенштейн, B.C. Шапот // Патол. физиология и экспер. терапия. 1998. -№3. - С. 25 -44.

28. Лушников, Е.Ф. Апоптоз клеток: морфология, биологическая роль, механизмы развития / Е.Ф. Лушников, В.М. Загребин // Архив патологии. -1987.- Т.49. С. 84- 89.

29. Машковский, Д.М. Лекарственные средства / Д.М. Машковский. М.: Медицина, 1994. - 482 с.

30. Мерабишвили, В.М. Выживаемость онкологических больных/ В.М. мерабишвили. СПб, 2006. - 440 с.

31. Мкртчян, Л.Н. Противоопухолевое действие экстракта пуповины человеческого плода / Л.Н. Мкртчян, Э.Р. Тер-Погосян, А.К. Нерсесян // Вопр. онкологии. 1990. - Т.36, № 8. - С.956 - 960.

32. Новиков, В.В. Иммунология / В.В. Новиков, Н.А. Добротина, А.А. Бабаев. Н.Новгород: Изд-во ННГУ. - 2005. - 212 С.

33. Новиков, В.В. Растворимые формы мембранных антигенов клеток иммунной системы / В.В. Новиков, А.Ю. Барышников, А.В. Караулов // Иммунология. 2007. - № 4. - С. 249 - 253.

34. Новиков. B.C. Программируемая клеточная гибель / B.C. Новиков. -СПб.: Наука, 1996. 276 с.

35. Огнерубов, Н.А. Маркеры злокачественных опухолей / Н.А. Огнерубов.- Воронеж: Инфа, 1996. — 51 с.

36. Пальцев, М.А. Патологическая анатомия / М.А. Пальцев, Н.М. Аничков.- М.:Медицина, 2000. -Т.1. -528 с.

37. Плисс, Г.Б. Онкологическая характеристика нового штамма Лимфосаркома крыс / Г.Б. Плисс // Бюл. экспер. биол. и мед. 1961. - Т.2. -С. 95 - 99.

38. Попова, Н.А. Иммунитет против опухолей. Миф или реальность? / Н.А. Попова // Соросовский образовательный журнал. 2001. - Т. 7, № 3. - С. 20 -25.

39. Попова, Н.А. Модели экспериментальной онкологии / Н.А. Попова // Соросовский образовательный журнал. 2000. - Т. 8, № 6. - С. 33 — 38.

40. Радионов, С.Ю. Исследование влияния гомогената куриных эмбрионов на рост и метастазирование саркомы Плисса у крыс / С.Ю. Радионов, ТС.И. атьков, Н.А. Пак // Вопр. онкологии. 1996. - Т. 42, № 1. - С. 74 - 76.

41. Ройт, А. Иммунология / А. Ройт, Д. Бростофф, Д. Мейл. М.: Мир, 2000. -581 с.

42. Рыжов, С.В. Молекулярные механизмы апоптотических процессов / С.В. Рыжов, В.В. Новиков // Онкология. 2002 а. - №3. - С. 27 -33.

43. Рыжов, С.В. Современные представления о механизмах апоптоза / С.В. Рыжов, В.В. Новиков // Рос. биотер. журнал. 2002 Ь. - № 3. - С. 5 - 11.

44. СА-19-9, раково-эмбриональный антиген и а-фетопротеин в сыворотке крови не онкологических больных и их клиническое значение / С.В. Скворцов, Н.Е. Кушлинский, З.Г. Кадагидзе и др. // Бюл. экспер. биол. и мед. 1997. - Т.123, №.5. - с. 566 - 569.

45. Сандова, О.М. Моноклональные антитела серии ИКО в иммунофенотипировании клеток животных: Автореф.дисс. канд.биол.наук / О.М. Сандова. М., 1994. - 28 с.

46. Сингер, М. Гены и геномы / М. Сингер, П. Берг. М.: Мир, 1998. - Т. 1. -373 с.

47. Скулачев, В.П. Феноптоз: запрограммированная смерть организма / В.П. Скулачев // Биохимия. 1999. - № 64. - С. 1679 - 1788.

48. Слинчак, С.М. Онкология / С.М. Слинчак, А.И. Миляновский, И.А. Клименко. Киев: Выща школа, 1989. - 400 с.

49. Солопаева И.М. Влияние хорионического гонадотропина на содержание иммунных комплексов в сыворотке крови у крыс с циррозом печени / И.М. Соопаева // Регенерация, адаптация, гомеостаз. Сб. науч. тр. — Горький: ГМИ, 1990. С. 52 - 57.

50. Солопаева, И.М. Стимуляция регенерации патологически изменённой печени и хорионический гонадотропин / И.М. Солпаева, Б.П. Солопаев. Н. Новгород: Изд-во ННГУ, 1991. - 124 с.

51. Солопаева, И.М. Хорионический гонадотропин в биологии и медицине / И.М. Солопаева. Нижний Новгород: ННГУ, 2000. - 192 с.

52. Солопаева, И.М. Хорионический гонадотропин в онтогенезе и онкогенезе (по материалам двух научных открытий и одной научной гипотезы): монография / И.М. Солопаева. Нижний Новгород: РАСТР-НН, 2007. -284 с.

53. Сперанский, В.В. Влияние хорионического гонадотропина на иммунологическую реактивность животных: Автореф. дисс. . докт. мед. наук / В.В. Сперанский. Уфа, 1973. - 21 с.

54. Сравнение хронической патологии в эксперименте и клинике / И.М. Солопаева, А.А. Косых, Т.Ф. Жданова и др. // Всес. конф. по биологической характеристике лабораторных животных и экстраполяция на человека экспериментальных данных. — М, 1980. С. 114-115.

55. Уманский, С.Р. Апоптоз: молекулярные и клеточные механизмы / С.Р. Уманский // Мол. биология. 1996. - Т.30, Вып.З. - С. 487 - 502.

56. Хаитов, P.M. Иммунология / P.M. Хаитов, Г.А. Игнатьева, И.Г. Сидорович. -М.-Медицина, 2000. 432 С.

57. Хаитов, P.M. Физиологическая роль главного комплекса гистосовместимости человека / P.M. Хаитов, Л.П. Алексеев // Иммунология. 2001. - № 3. - С. 4 - 11.

58. Чумаков, П.М. Функция гена р53: выбор между жизнью и смертью /

59. П.М. Чумаков // Биохимия. 2000. - Т.65, №1. - С. 34 - 47.136

60. Ширшёв, С.В. Влияние хорионического гонадотропина на кооперативные взаимоотношения спленоцитов, реализующих первичный иммунный ответ / С.В. Ширшев, Н.Н. Кеварков, Н.И. Шарый // Бюл. экспер. биол. и мед. 1987. - № 9. - С. 337 - 340.

61. Эренпрейс, Я.Г. Современные концепции опухолевого роста / Я.Г. Эренпрейс. Рига: Зинатне, 1987. - 98 с.

62. Ярилин, А.А. Введение в современную иммунологию: Учебное пособие / А.А. Ярилин, Н.А. Добротина. Н. Новгород: ННГУ, 1997. - 238 с.

63. Ярилин, А.А. Апоптоз и его место в иммунных процессах /А.А. Ярилин // Иммунология. 1996. - №4. - С. 10-23.

64. Ярилин, А.А. Апоптоз. Природа феномена и его роль в целостном организме / А.А. Ярилин // Патол. физиология и экспер. терапия. 1998. - № 2.-С. 38 -48.

65. Ярилин, А.А. Основы иммунологии / А.А. Ярилин. М.:Медицина, 1999.-607 с.

66. A cell-killing monoclonal antibody (anti-Fas) to a cell surface antigen codownregulated with the receptor of tumor necrosis factor / S. Yonehara, A. Ishii, M. Yonehara et al. // J. Exp. Med. 1989. - Vol.169. - P. 1747 - 1756.

67. A naturally occuring genetic variant in the human chorionic gonadotropin-P gene 5 is assembly inefficient / A.K. Miller-Lindholm, E. Bedows, C.F. Bartels et al. // Endocrinology. 1999. - Vol.140, №8. - P. 3496 - 3506.

68. Abastado, J.-P. Apoptosis: function and regulation of the cell death / J.-P. Abastado // Res. Immunol. 1996. - Vol.147. - P. 443 - 456.

69. Alternatively folded choriogonadotropin analogs / J. Xing, W. Lin, M. Jiang et al. //J. of Biol. Chemistry. 2001. - Vol.276. - P. 46953-46960.

70. An anti-transforming growth factor p antibody suppresses metastasis via cooperative effects on multiple cell compartments / J.-S. Nam, M. Terabe, M. Mamura et al. // Cancer Res. 2008. - Vol.68. - P. 3835 - 3843.

71. Arends, M.J. Apoptosis. Mechanism and role in pathology / M.J. Arends,

72. A.H. Wyllie // Intern. Rev. Exp. Pathol. 1999. - Vol.32. - P. 223 - 254.137

73. Bcl-2 prolongs cell survival after Bax-induced release of cytochrome С / T. Rosse, R. Olivier, L. Monney et al. // Nature. 1998. - Vol.391. - P. 496 - 499.

74. Blobe, G.C. Role of transforming growth factor beta in human disease / G.C. Blobe, W.P. Schiemann, H.F. Lodish // N. Engl. J. Med. 2000. -Vol.342, №18. - P.1350-1358.

75. Borkowski, A. Human chorionic gonadotropin in the plasma of normal nonpregnant subjects / A/ Borkowski, C. Muguardt // N. Engl. J. Med. 1979. -Vol.301, №6.-P. 298-302.

76. Carson, D.A. Cancer progression and p53 / D.A. Carson // Lancet. 1995. -Vol.346. - P. 1009- 1111.

77. Carter WB. Purified human chorionic gonadotropin induces apoptosis in breast cancer / D. Lopez, M. Sekharam, D. Coppola et al. // Mol. Cancer Ther. — 2008. Vol.7, №9. - P. 2837 - 2844.

78. Characterization of human chorionic gonadotropin as a novel angiogenic factor / M. Zygmun, F. Herr, S. Keller-Schoenwetter et al.// J. Clin. Endocrin. and Metab. 2002. - Vol.87, № 11. - P. 5290 - 5296.

79. Chorionic gonadotropin can enhance innate immunity by stimulating macrophage function / H. Wan, M.A. Versnel, W. Cheung et al. // J. of Leukocyte Biology. 2007. - Vol.82. - P. 926 - 933.

80. Chorionic gonadotropin induces dendritic cells to express a tolerogenic phenotype / H. Wan, M.A.Versel, L.M. Leijten et al. // J. of Leukocyte Biology. -2008b. Vol.83, №4. - P. 894 - 901.

81. Chorionic gonadotropin up-regulates long pentraxin 3 expression in myeloid cells / H. Wan, C.G. van Helden-Meeuwsen, C. Garlanda et al. // J. of Leukocyte Biology. 2008a. - Vol.84, №5. - P. 1346 - 1352.

82. Ciechanover, A. The ubiquitin proteasome pathway: on protein death and cell life / A. Ciechanover // EMBO Journal. - 1998. - Vol.17, №24. - P. 7151 -7160.

83. Conversion of peripheral CD4+CD25- naive T cells to CD4+CD25+ regulatory T cells by TGF-3 induction of transcription factor FoxP3 / W. Chen, W. Jin, N. Hardegen et al. // J. Exp. Med. 2003. - Vol.198. -P. 1875 - 1886.

84. Crystal structure of human chorionic gonadotropin / A.J. Lapthorn, D.C. Harris, J. Littlejohn et al. // Nature. 1994. - Vol.369. - P. 455 - 461.

85. Down regulation of Fas ligand by shedding / M. Tanaka, T. Itai, M. Adachi et al. // Nat. Med. 1998. - Vol.4. - P. 31 - 36.

86. Eastman, A. Cancer Cells I A. Eastman// A Monthly Review. 1990. - Vol.2. -P. 275 -281.

87. Epstein, M. Virus particles in cultured lymphoblasts from Burkitt's lymphoma / M. Epstein, B. Achong, Y. Barr // Lancet. 1964. - Vol.1. - P. 702 -703.

88. Expression of P human chorionic gonadotropin by nontrophoblastic nonendocrine "normal" and malignant epithelial cells / R.K. lies, P.E. Purkis, P.C. Whitehead et al. // Br. J. Cancer. 1990. - Vol.61. - P. 663 - 666.

89. Extragonadal LH/hCG action Not yet time to rewrite tekstbooks / T. Pakarainen, P. Ahtiainen, F.-P. Zhang et. al. // Mol. and Cellular Endocrin.2007. Vol.269.-P. 9-16.

90. Functional, structural and distribution analysis of the chorionic gonadotropin receptor using murine monoclonal antibodies / A. Funaro, A. Sapino, B. Ferranti et al. // J. Clin. Endocrin. and Metab. 2003. - Vol.88. - P. 5537 - 5546.

91. Gonadotropin heterogeneity and biopotency: implifications for assisted reproduction / A. Lambert, J.A. Talbot, С.J. Anobile, W.R. Robertson // Molec. Human Reprod. 1998. - Vol.4, №7. - P. 619 - 629.

92. Hanahan, D. The Hallmarks of Cancer / D. Hanahan, R.A. Weinberg // Cell. -2000.-Vol.100.-P. 57-70.

93. Horvitz, H.R. Genetic control of programmed cell death in the nematode Caenorhabditis elegans / H.R. Horvitz // Cancer Res. 1999. - Vol.59. - P. 1701 - 1706.

94. Huhtaniemi, I.T. Content of chorionic gonadotropin in human fetal tissues / I.T. Huhtaniemi, C.C. Korenbrot, R.B. Jaffe // J. Clin. Endocrinol, and Metab. -1975. Vol.46, №6. - P. 994 - 997.

95. Huhtaniemi, I.T. Mutations of gonadotropin and gonadotropin receptor genes: what do they teach us about reproductive physiology? / I.T. Huhtaniemi // J. of Reprod. and Fertil. 2000. - Vol.119. - P. 173 - 186.

96. Human chorionic gonadotropin (hCG) interacts with lovastatin and ionizing radiation to modulate prostate cancer cell viability in vivo / H. Hamed, C. Mitchell, M.A. Park et al. // Cancer Biol. Ther. 2008. - Vol.7, №4. - P. 587 -593.

97. Human chorionic gonadotropin inhibits Kaposi's sarcoma angiogenesis, matrix metalloprotease activity and tumor growth / U. Pfeffer, D.Bissacchi, M. Morini et al. // Endocrinology. 2002. - Vol.143. - P. 3114 - 3121.

98. Human chorionic gonadotropin is an immune modulator and can prevent autoimmune diabetes in NOD mice / L.Y. Khil, H.S. Jun, H. Kwon et al. // Diabetologia. 2007. - Vol.50, №10. - P. 2147 - 2155.

99. Human chorionic gonadotropin-like material present in normal human tissues / J. Yochimoto, A.R. Wolfen, F. Hirose et al. // Amer. J. Obstet. Gynec. 1979. -Vol.134, №7. -P. 729-733.

100. Immunity to cancer through immune recognition of altered self: studies with melanoma / J.A. Guevara-Patino, M.J. Turk, J.D. Wolchok, A.N. Houghton // Adv. in Cancer Res. 2003. - Vol.90. - P. 157 - 177.

101. In vitro effects and clinical evaluation of a human chorionic gonadotropin preparation in acute leukemia / T.S. Feldman, R. Seiler, S.W. Chio S. W. et al. // Leukemia. 1998. - Vol.12. - P. 49 - 55.

102. Induction of programmed cell death in Kaposi's sarcoma cells by preparations of human chorionic gonadotropin / F. Samaniego, J.L. Bryant, N. Liu et al. // J. National Cancer Inst. 1999. - Vol.91, № 2. - P. 135 - 143.

103. Jaffe, R.B. Serum gonadotropins before, at the inception of, following human pregnancy / R.B. Jaffe, P.A. Lee, A.R.J. Midgley // J. Clin. Endocrin. and Metab. -1969.- Vol.29.-P. 1281 1283.

104. Jameson, J.L. Regulation of chorionic gonadotropin gene expression / J.L. Jameson, A.N. Hollenberg // Endocrine Reviews. 1993. - Vol.14, №2. - P. 203 -221.

105. Joazeiro, C. RING finger proteins : mediators of ubiquitin ligase activity / C. Joasiero, M. Weissman // Cell. 2000. - Vol.102. - P. 549 - 552.

106. Kinzler, K.W. Lessons from hereditary colorectal cancer:/ K.W. Kinzler, В1 Vogelstein//Cell: 1996: - УоГ.87, №2. - P: 159 - 170.

107. Landbcrg, G. Multiparameter analyses of cell cycle regulatory proteins; in human breast cancer: A key to definition of separate parthways in tumorogenesis,/ G. Lambert // Adv. in Cancer Res. 2002. - Vol.84. - P. 35 - 36.

108. Lane, D. P. P53, guardian of the genome / D. Lane // Nature. 1992. - Vol; 358.-P. 15 - 16.

109. McDonald, N.Q. A structural, super family of growth factors containing a cystine knot motif / N.Q. McDonald, W.A. Hendrickson // Cell. 1993.- Vol.73. -P. 421 -424. . .'. -''.'■" ;

110. Mckerns, K.W. Structure and function of gonadotropins / K.W. Mckerns. -New York: Plenum press, 1978. 628 p.

111. Measurement of carcinoembryonic antigen in colonic; effluent as a high-risk marker for colorectal carcinoma / N. Uedo, HI Ishikawa, H. Narahara et al: // Cancer Detect. Prev. 2000. - Vol.24, №3. - P. 290 - 294;

112. Meyden, N.N. Formation of HCG in the human Fetaplacentation Unit / N.N. Meyden, R:P. Menlendii> H.A J. Leusden // Europ. J. Obstet. Gynec. 1979. - Vol: 9; №5.- P. 313-316.

113. Molecular cloning and expression of the Fas ligand, a novel member of the tumor necrosis factor family / T. Suda, T. Takahashi, M. Tanaka et al. // Cell. -1993.-Vol.75.-P. 1169- 1178.

114. Nagata, S. Apoptosis by death factor / S. Nagata // Cell. 1997. - Vol.88. - P. 355 - 365.

115. Nam, J.-S. Transforming Growth Factor (3 Subverts the Immune System into Directly Promoting Tumor Growth through Interleukin-17 / J.-S. Nam, M. Terabe, M.-J. Kang // Cancer Res. 2008. - Vol. 68. - P. 3915.

116. Narayan, P. Yoked complexes of human choriogonadotropin and the lutropin receptor: evidence that monomeric individual subunits are inactive / P. Narayan, J. Gray, D. Puett // Mol. Endocrin. 2002. - Vol.16. - P. 2733 - 2745.

117. Novel biological and possible applicable roles of LH/hCG receptor / J. Adam, A. Ziecik, M. Monika et al. // Mol. and Cellular Endocrin. 2007. Vol.269. - P. 51-60.

118. Obrien, V. Viruses and apoptosis / V. Obrien // General Virology. 1998. -Vol.79. - P. 1833 - 1845.

119. Physiology of apoptosis / E. Gulbins, A. Jekle, K. Ferlinz et al. // Am. J. Physiol. Renal. Physiol. 2000. r Vol.279. - P. 73 - 80.

120. Polypyrimidine tract-binding proteins are cleaved by caspase-3 during apoptosis / S.H. Back, S. Sejeong, H.O. Byung, K.I. Sung // Biochem. and Mol. Biol. 2002. - Vol.138. - P. 56 - 58.

121. Role of cytochrome С and dATP/ATP hydrolysis in Apaf-1 -mediated caspase-9 activation and apoptosis / Y. Ни, M.A. Benedict, L. Ding et al. // EMBO Journal. 1999. - Vol.18. - P. 3585 - 3595.

122. Rosenberg, S.A. Adoptive immunotherapy of cancer using lymphokines activated killer cells and recombinant interleukin-2/ S.A. Rosenberg // Important aduanced in oncology. Philadelphia: J.B. Lippincatt, 1986. - P. 55-91.

123. Russo, I.H. Primary prevention of breast cancer by hormone-induced differentiation / I.H. Russo, J. Russo // Recent Results Cancer Res. 2007. - Vol. 174. - P. Ill - 130.

124. Sakaguchi, S. Regulatory T cells in immunologic self-tolerance and autoimmune diseases / S. Sakaguti, N. Sakaguchi // Immunology. 2005. — Vol. 24.-P. 211 -226.

125. Sambrook, J. Molecular Cloning: a laboratory manual / J. Sambrook, E.F. Fritsch, T. maniatis. 2nd edition. - N.Y.: Cold Spring Harbor Laboratory Press, 1989.- 1659 p.

126. Sato A., Cystine knot of the gonadotropin a subunit is critical for intracellular behavior but not for in vitro biological activity / A. Sato, E. Perlas, D. Ben-Menahem et al. // J. of Boil. Chemistry. 1997. - Vol.272. - P. 18098 - 18103.

127. Signal Transduction Pathways Activated by Chorionic Gonadotropin in the Primate Endometrial Epithelial Cells 1 / S. Srisuparpa, Z. Strakovaa, A. Brudneya et. al. // Biology of Reprod. 2003. - Vol.68, №2. - P. 457 - 464.

128. Srivastava, P. Chorionic gonadotropin inhibits rat mammary carcinogenesis through activation of programmed cell death / P. Strivastava, J. Russo, I.H. Russo // Carcinogenesis. 1997. - Vol.18, №.9. - P. 1799 - 1808.

129. Sun, P.D. The cystine-knot growth-factor superfamily / P.D. Sun, D.R. Davies // An. Rev. Biophys. Biomol. Struct. 1995. - Vol.24. - P. 269 - 291.

130. Tang, Q. The Foxp3+ regulatory T cell: a jack of all trades, master of regulation / Q. Tang, J.A. Bluestone // Nat. Immunol. 2008. - Vol.9, №3. - P. 239 - 244.

131. The biological action of gonadotropin is not dependent on the complete.- ' native quaternary interactions between the subunits / A.M. Jackson, P. Berger, M. Pixley et al. // Mol. Endocrin. 1999. - Vol.13. - P. 2175 - 2188.

132. The Consensus Coding Sequences of Human Breast and Colorectal Cancers // T. Sjoblom, S. Jones, L.D. Wood et al. // Science. 2006. - Vol.314, №5797. -P. 268-274.

133. The effects of preparations of human chorionic gonadotropin on AIDS-related Kaposi's sarcoma / P.S. Gill, Y. Lunardi-Iskandar, S. Louie et al. // N. Engl. J. Med. 1996. - Vol.335, №17. - P. 1261 - 1269.

134. Themmen, A.P.N. Mutations of gonadotropins and gonadotropin receptors: elucidating the physiology and pathophysiology of pituitary-gonadal function / A.P.N. Themmen, l.T. Huhtaniemi // Endocrine Reviews. 2000. - Vol.21, №5. -P. 551 - 583.

135. Widespread distribtion gonadotropin like substance in normal tissues / C.D. Braunstein, V. Camadar, N. Snaminathan, M.E. Nade // J. Clin. Endocrin. and Metab. - 1979. - Vol.49, №6. - P. 917 - 925.

136. Younger, J.B. Effect of human chorionic gonadotropin on antibody production / J.B. Youger, R.L. St. Pierre, C.M. Zmijewski // Amer. J. Obstet. Gynec. 1969. - Vol.105, №1. - P. 9 - 13.