Влияние стрессовых факторов среды на байкальских эндемичных и палеарктических амфипод на клеточном уровне тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 00.00.00, кандидат наук Назарова Анна Александровна

• Назарова Анна Александровна
• кандидат наук
• 2025

Оглавление диссертации кандидат наук Назарова Анна Александровна

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Отношение к температуре байкальских амфипод в сравнении с палеарктическими видами

1.2 Токсичность ксенобиотиков органической и неорганической природы для амфипод

1.3 Симбионты байкальских и палеарктических амфипод

1.4 Иммунный ответ ракообразных

1.4.1 Гемоциты ракообразных

1.4.2 Гемоциты амфипод

1.4.3 Фагоцитоз у ракообразных

1.4.4 Инкапсуляция и образование узелковых утолщений у ракообразных

1.5 Иммунный ответ ракообразных при температурном стрессе

1.6 Строение и функции гепатопанкреаса у ракообразных

1.7 Первичные культуры клеток как модельная система

1.7.1 Методы получения, содержания и оценки состояния первичных культур клеток

1.7.2 Примеры первичных культур разных типов клеток ракообразных

1.7.3 Первичная культура гемоцитов как модельная система для изучения иммунитета беспозвоночных

ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 Объекты исследования

2.2 Методы сбора и содержания амфипод

2.3 Методы получения, содержания и оценки состояния первичных культур клеток амфипод

2.3.1 Методы отбора гемолимфы, вырезания внутренних органов и мышечных тканей амфипод

2.3.2 Тестирование методов выделения клеток из разных тканей взрослых амфипод и эмбрионов разных стадий развития

2.3.3 Тестирование методов содержания гемоцитов, клеток гепатопанкреаса и яичников амфипод

2.3.4 Оценка выживаемости и концентрации клеток

2.3.5 Метод проточной цитофлуориметрии

2.3.6 Подготовка гистологических срезов

2.3.7 Микроскопия

2.4 Оценка цитотоксичности ксенобиотиков органической и неорганической природы

2.4.1 Оценка цитотоксичности сульфата меди (CuSO4) и акриламида

2.4.2 Подготовка полиакриламидных гелей с иммобилизованными

микрочастицами на основе редкоземельных металлов

2.4.3Модель эксперимента по оценке цитотоксичности микрочастиц на основе редкоземельных металлов

2.5. Оценка влияния повышенных температур на выживаемость амфипод и их иммунных клеток in vitro

2.5.1 Модель эксперимента для оценки теплового шокового воздействия на гемоциты байкальских и палеарктических амфипод

2.5.2 Модель эксперимента для оценки влияния длительного содержания при повышенных температурах на клеточном и организменном уровнях

2.6 Моделирование повышенной бактериальной нагрузки симбионтным штаммом Pseudomonas sp. H5-2

2.7 Оценка влияния пиявок на клеточный иммунный ответ амфипод

2.7.1 Определение вида пиявок

2.7.2 Инъекция флуоресцентных латексных шариков в центральный сосуд амфипод и их дальнейшая визуализация

2.7.3 Оценка инкапсуляции агарозных гранул гемоцитами амфипод в первичной культуре

2.8 Моделирование заражения пиявками амфипод при повышенной бактериальной нагрузке Pseudomonas sp. H5-2

2.9 Статистическая обработка данных

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ

3.1 Выделение и содержание различных типов клеток амфипод и оценка их жизнеспособности в первичной культуре

3.1.1 Характеристика клеточных элементов гемолимфы амфипод на примере E. verrucosus

3.1.2 Выделение первичной культуры гемоцитов

3.1.3 Выделение первичных культур клеток разных тканей амфипод E. verrucosus методом эксплантов

3.1.4 Выделение первичных культур клеток разных тканей амфипод E. verrucosus методом ферментативной дезагрегации

3.1.5 Тестирование методов содержания первичных культур гемоцитов, клеток гепатопанкреаса и яичников амфипод

3.1.6 Анализ клеточного цикла клеток эмбрионов и молоди амфипод рода Eulimnogammarus

3.2. Цитотоксичность ксенобиотиков органической и неорганической природы для гемоцитов амфипод

3.3 Изучение тканевой специфичности в реакции амфипод на повышение температуры

3.3.1 Влияние теплового шокового воздействия на гемоциты амфипод E. verrucosus и G. lacustris

3.3.2 Выживаемость амфипод E. verrucosus и их иммунных клеток при длительном содержании при разных температурах в раннелетний период

3.3.3 Выживаемость амфипод E. verrucosus и G. lacustris и их иммунных клеток после длительного содержания при разных температурах в среднеосенний период

3.4 Влияние бактерий Pseudomonas sp. H5-2 на параметры иммунитета амфипод E. verrucosus

3.5 Влияние паразитических пиявок Baicalobdella torquata на параметры иммунитета амфипод E. verrucosus

3.5.1 Определение вида пиявок

3.5.2 Анализ питания пиявок B. torquata гемолимфой амфипод E. verrucosus

3.5.3 Влияние пиявок на общее число гемоцитов амфипод

3.5.4 Клеточная иммунная реакция гемоцитов заражённых и не зараженных пиявками амфипод на микрошарики агарозы

3.6. Совместное влияние пиявок и симбиотических бактерий на показатели

клеточного иммунного ответа амфипод

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Влияние стрессовых факторов среды на байкальских эндемичных и палеарктических амфипод на клеточном уровне»

ОБЩАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА РАБОТЫ

Актуальность работы. Изучение механизмов, определяющих различия в чувствительности животных к тем или иным изменениям факторов среды — это одна из основных фундаментальных задач гидробиологии. Органы и составляющие их ткани могут обладать неодинаковой чувствительностью к биотическим и абиотическим факторам, а способность конкретной ткани адаптироваться к изменениям условий среды может являться узким местом, определяющим выживание особи [Zhang et. al., 2023; Xu et al., 2018; Wu et al., 2018]. Понимание механизмов, обеспечивающих различия в реакциях разных тканей на воздействие конкретных факторов, являются наиболее актуальной темой.

Механизм гибели пойкилотермных видов, в том числе беспозвоночных животных, от воздействия столь важного абиотического фактора как повышенная температура всё ещё недостаточно изучен. При этом многие имеющиеся данные указывают на ведущую роль в этом процессе именно клеточной дисфункции [Bowler, 2018; J0rgensen et al., 2017]. Биотические факторы, такие как различные симбионты, оказывают дополнительную нагрузку на иммунную систему животного, и могут приводить к синергическим эффектам при взаимодействии с другими факторами [Franke et al., 2024].

Иммунитет беспозвоночных разделяют на гуморальный и клеточный [Vazquez et al. 2009]. Одним из важных типов клеток, ответственных за клеточный иммунный ответ ракообразных являются клетки гемолимфы — гемоциты [Xin and Zhang, 2023; Cho and Cho, 2019], которые участвуют в фагоцитозе и инкапсуляции [Liu et al., 2020, Tong et al., 2022].

Представители древних узкоспециализированных сообществ могут обладать определённой спецификой в формировании механизмов иммунитета из -за географической изоляции или особенностей их эволюции. Одной из наиболее известных и богатых экосистем по степени эндемизма и разнообразию сообществ является озеро Байкал. Среди байкальских видов особое место по таксономическому разнообразию и трофической роли занимают байкальские

амфиподы (Amphipoda, Crustacea), насчитывающие более 350 морфологических видов и подвидов [Takhteev et al., 2015].

Ранее была показана высокая степень специализации байкальских амфипод к условиям озера, что приводит к большей чувствительности эндемичных видов (по сравнению с палеарктическими) к таким абиотическим факторам как повышенная температура [Тимофеев, 2010; Axenov-Gribanov et al., 2016] и ультрафиолетовое излучение [Kondrateva et al., 2024]. Недавние работы также показывают влияние паразитов на иммунную систему как один из важных факторов в обеспечении адаптивности байкальских амфипод к комплексу условий среды [Щапова, 2023; Тэльнес, 2024].

Несмотря на большое трофическое значение амфипод в пресноводных экосистемах по всему миру [Vainola et al., 2008], вопрос о возможном специфическом воздействии тех или иных факторов среды на различные ткани их организма по-прежнему остаётся слабо изученным. Важно отметить, что вопрос о влиянии факторов среды абиотической и биотической природы на иммунитет и отдельные ткани, обеспечивающие иммунные функции, остаётся недостаточно изученным не только у байкальских эндемиков, но и у других пресноводных и морских видов амфипод.

Исходя из сказанного, целью работы являлось изучение влияния факторов среды абиотической и биотической природы на ткани, обеспечивающие иммунные функции палеарктических и байкальских эндемичных амфипод.

В соответствии с данной целью были поставлены следующие задачи:

1. Оценить возможность выделения и содержания различных типов клеток из тканей, обеспечивающих иммунные функции амфипод в жизнеспособной первичной культуре.

2. Сравнить цитотоксичность разных групп ксенобиотиков для иммунных клеток амфипод.

3. Провести сравнение реакции разных тканей амфипод на повышение температуры среды.

4. Провести оценку влияния повышенной бактериальной нагрузки на показатели клеточного иммунного ответа амфипод.

5. Провести оценку влияния паразитических пиявок на показатели иммунного ответа амфипод.

6. Оценить совместное влияние пиявок и симбиотических бактерий на показатели клеточного иммунного ответа амфипод.

Соответствие диссертационной работы направлению подготовки научных работников по специальности 1.5.16. «Гидробиология». Данная работа соответствует специальности «Гидробиология» по следующим пунктам паспорта специальности: «Влияние факторов водной среды на гидробионтов и на их биологические характеристики разного уровня (генетические, биохимические, морфологические, физиологические, онтогенетические)»; «Экологические основы жизнедеятельности гидробионтов, включая процессы водно-солевого и энергетического обмена, питания, размножения, роста и развития»; «Методы оценки состояния водной среды, биоиндикация, биотестирование и биомониторинг водных экосистем».

Научная новизна. В рамках проведённого исследования на примере байкальского эндемичного вида E. verrucosus с применением метода проточной цитофлуориметрии впервые были получены данные о разнообразии клеток гемолимфы амфипод. Также с использованием гистологических подходов и метода первичных клеточных культур было сделано первое морфологическое описание различных типов клеток гепатопанкреаса байкальских амфипод. В данной работе впервые для амфипод была отработана методика выделения и содержания первичных культур гемоцитов, клеток гепатопанкреаса, яичников и мышечных тканей. Впервые для амфипод показано различие чувствительности гемоцитов и клеток гепатопанкреаса в ответе на температурные изменения. Экспериментально подтверждено, что пиявки Baicalobdella torquata являются истинными паразитами и питаются гемолимфой амфипод E. verrucosus. Было показано изменение реакции иммунных параметров в ответ на повышение

бактериальной нагрузки и совместного влияния пиявок и симбиотических бактерий в гемолимфе амфипод.

Теоретическая и практическая значимость работы. В ходе выполнения исследования были отработаны протоколы получения и содержания первичных культур клеток амфипод, которые в последующем могут быть использованы для изучения влияния стрессовых состояний организма на клеточном уровне. Полученный подход позволит оценивать цитотоксический эффект потенциально загрязняющих веществ на разные типы клеток амфипод для задач экотоксикологии. Полученные результаты позволяют углубить понимание механизмов воздействия факторов среды на иммунный ответ гидробионтов на клеточном уровне. Подходы, применённые в ходе выполнения данной работы, расширяют имеющийся методологический инструментарий для оценки состояния различных видов гидробионтов и могут найти непосредственное применение в текущей практике экофизиологических и токсикологических исследований, а также в биомедицинских разработках и в области промышленной экологии.

Основные положения, выносимые на защиту:

1. Гемоциты и клетки гепатопанкреаса амфипод сохраняют жизнеспособность и физиологические функции в первичной культуре.

2. Гемоциты и клетки гепатопанкреаса амфипод дифференцированно реагируют на изменение температуры среды.

3. Бактериальная нагрузка снижает общее число гемоцитов в гемолимфе амфипод за счёт уменьшения среди них доли плазмоцитов.

4. Пиявки Baicalobdella torquata являются истинными паразитами, способными питаться гемолимфой, при этом, не оказывая выраженного влияния на иммунный ответ амфипод.

Личный вклад автора. Автор лично принимал участие во всех этапах работы. Вся экспериментальная часть, статистическая обработка и интерпретация экспериментальных данных была проведена непосредственно соискателем работы. Выводы диссертации и основные положения, выносимые на защиту,

сформулированы автором. Личное участие соискателя в получении представленных результатов отражено в серии публикаций.

Апробация результатов. Основные результаты данной диссертационной работы были представлены на 10 конференциях международного и всероссийского уровня. Часть отработанных в ходе данного исследования методик были использованы в 5 научных публикациях в изданиях, индексируемых WoS и Scopus, а также включенных в перечень ВАК. Работа выполнена при поддержке грантов РНФ (№20-64-47011, №23-14-00165). Отработка части методик была проведена на базе Центра экологических исследований им. Гельмгольца (Helmholtz Centre for Environmental Research. UFZ, г. Лейпциг, Германия) в при грантовой поддержке по программе Минобрнауки РФ и германской службы академических обменов (DAAD).

Объём и структура работы. Диссертация состоит из введения и трёх глав. Полный объем диссертационной работы составляет 122 страницы с 35 рисунками и 4 таблицами. Список литературы содержит 169 наименований.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Отношение к температуре байкальских амфипод в сравнении с палеарктическими видами

Температура — это один из ключевых абиотических факторов, влияющих на процессы жизнедеятельности пойкилотермных гидробионтов. Данный фактор среды влияет как на метаболические показатели организма, так и на процессы роста и развития, а также имеет значение в процессе размножения организмов. В зависимости от наиболее предпочитаемых диапазонов температуры обитания вида выделяют теплолюбивые и холодолюбивые организмы. Терморезистентность — это физиологическая устойчивость к повышению температуры, которая является видовым признаком [Одум, 1986].

Изучение влияния температуры, как лимитирующего фактора среды, на байкальских амфипод началось c экспериментов, направленных на установление пределов терморезистентности и термопреферендума таких литоральных видов, как Eulimnogammarus verrucosus (Gerstfeldt, 1858), E. vittatus (Dybowsky, 1874), E. cyaneus (Dybowsky, 1874), Gmelinoides fasciatus (Stebbing, 1899) и Brandtia parasitica (Gerstfeldt, 1858), а также глубоководных амфипод Ommatogammarus flavus (Dybowsky, 1874) в сравнении с палеарктическими видами Gammarus lacustris и G. pulex (Linnaeus, 1758) [Timofeyev et al., 2001; Тимофеев, 2010].

Наибольшей устойчивостью по результатам работ по определению терморезистентности обладали два байкальских вида E. cyaneus и G. fasciatus, а также палеарктические G. lacustris и G. pulex. Представители видов E. verrucosus, E. vittatus, B. parasitica и O. flavus оказались наиболее чувствительными к изменениям температуры. Из данной группы животных E. vittatus оказался наиболее устойчивым. Было показано, что усиление аэрации при проведении экспериментов с использованием острого теплового шокового воздействия повышает выживаемость всех видов амфипод. Полученные данные позволили разделить исследованные виды амфипод по группам в зависимости от чувствительности к повышению температуры [Тимофеев, 2010].

В исследовании Д. С. Бедулиной с соавторами [Bedulina et al., 2017] было проведено сравнение влияния острого теплового воздействия на самок и самцов E. cyaneus и E. verrucosus, выловленных в сезоны спаривания, летний и осенний периоды, соответственно. Было показано, что самки обоих видов более чувствительны к тепловому шоку, чем самцы. Показано, что при инкубации особей E. cyaneus в воде с температурой 25°С, 50% самок погибало через 13,6 часов, тогда как 50% самцов погибло через 35 часов. В случае E. verrucosus особей помещали в воду с температурой 26°С, в которой 50% самок погибло через 7,9 часов, в то время как самцы жили значительно дольше - 26,5 ч.

В исследовании П. Б. Дроздовой с соавторами [Drozdova et al., 2019] был проведён эксперимент, в котором определяли температуру, при которой погибало 10% и 50% особей. Животных инкубировали при температуре от 20°С до 29°С с шагом в 1°С с регистрацией выживших животных через 24 часа. Так, температура гибели 10% особей оказалась очень близкой для всех видов и составила 24,9, 24,6 и 24,6°C для E. verrucosus, E. cyaneus и G. lacustris соответственно. В то время как температуры гибели 50% особей наблюдались в диапазоне от 25,2 до 27,2°С, отражая различия в температурных предпочтениях видов, определенные ранее.

Сравнительное изучение чувствительности литорального вида амфипод E. verrucosus, глубоководного O. flavus и палеарктического G. lacustris к постепенному повышению температуры было выполнено на особях, отобранных в весеннее и зимнее время [Axenov-Gribanov et al., 2016]. Амфиподы были подвергнуты воздействию повышения температуры среды на 1°С в час, начиная с температуры преакклимации (6°С для E. verrucosus и G. lacustris, 4°C для O. flavus) до достижения температуры, при которой кумулятивная смертность составляла 50%. Так, температура при которой смертность E. verrucosus составляла 50%, была около 30°С, у G. lacustris — около 32°С, тогда как у глубоководного O. flavus она оказалась ниже и составляла около 25°С. Было показано, что зона стабильности (отсутствие значимых изменений) изученных молекулярных и биохимических маркеров коррелирует с предпочитаемыми температурами исследуемых видов, установленными в поведенческих экспериментах.

В исследовании Л. Якоб с соавторами [Jakob et al., 2016] было проведено сравнение реакции E. verrucosus, E. cyaneus и G. lacustris также на постепенное, но существенно более медленное повышение температуры на 0,8°С в сутки. E. verrucosus в таких условиях оказался значительно более чувствителен к тепловому стрессу, чем E. cyaneus и G. lacustris, что может быть частично связано с нехваткой кислорода и относительно большим размером тела. G. lacustris оказался наиболее устойчив к описанному повышению температуры. Температура пейюса (Tp), которая является теоретически определяемым пределом оптимальной оксигенации гемолимфы, для E. verrucosus составляет 10,6°С, что как раз может объяснять миграцию амфипод на более глубокие участки литорали. Кроме того, в данной работе описана миграция взрослых особей E. verrucosus на большие глубины в период летнего прогрева литорали до 13°С, которую наблюдали в период отлова амфипод для лабораторного эксперимента.

Видоспецифические реакции в ответ на холодовой стресс у амфипод E. verrucosus, E. cyaneus и G. lacustris изучали в работе К. П. Верещагиной с соавторами [Vereshchagina et al., 2021]. В работе использовали особей, отобранных в летний период; их акклимацию проводили при ранее определённых предпочитаемых температурах исследуемых видов [Axenov-Gribanov et al., 2016]. Далее проводили изменение температуры на 1°С в сутки при снижении температуры до 1,5°С и на 1,5°С в сутки при повышении температуры до 12°C и 15°C. После преакклимации животных каждого вида экспонировали при предпочитаемых температурах каждого из видов и при 1,5°С параллельно в течение месяца. Так, при температуре экспозиции 1,5°C были обнаружены видоспецифические изменения в метаболизме, указывающие на ограничение уровня двигательной активности у палеарктического G. lacustris. Выявлено, что при 12°C и 15°C у E. verrucosus подключается анаэробный метаболизм, в то время как E. cyaneus может поддерживать аэробный метаболизм и активный образ жизни при любых температурах.

Помимо воздействия температуры на весь организм амфипод представляет интерес оценка реакции разных тканей, поскольку ранее этот вопрос не был

изучен. В случае других ракообразных, рыб и млекопитающих были проведены работы по изучению влияния температуры на разные ткани организма. Например, у креветок Oratosquilla oratoria (De Haan, 1844) были обнаружены различия в уровне дифференциальной экспрессии генов в разных тканях организма в ответ на острый температурный стресс [Zhang et. al., 2023]. Обнаружено, что клетки гепатопанкреас креветок Litopenaeus vannamei (Boone, 1931) более чувствительны к понижению температуры, чем гемоциты [Xu et al., 201S].

Активность глутатионпероксидазы в гемолимфе и гепатопанкреасе пресноводных раков Cherax quadricarinatus (von Martens, 1868) имеет разнонаправленную реакцию в ответ на снижение температуры. Данный факт указывает на то, что эти ткани могут иметь разные ответные механизмы при изменениях температуры [Wu et al., 2018]. У C. quadricarinatus при понижении температуры наблюдается повреждение тканей гепатопанкреаса и повышение количества апоптотических клеток [Wu et al., 2019]. Подобный эффект для тканей гепатопанкреаса был обнаружен и у креветок Marsupenaeus japonicus (Spence Bate, 1888) в ответ на снижение температуры [Ren et al., 2020]. Отмечается повышение активности натрий-калиевой аденозинтрифосфатазы в клетках гепатопанкреаса Macrobrachium nipponense (De Haan, 1849) при содержании в низких температурах [Wang et al., 200б].

1.2 Токсичность ксенобиотиков органической и неорганической природы для амфипод

Водные беспозвоночные, в частности амфиподы, являются высокочувствительными организмами, поэтому их используют в качестве биоиндикаторов при оценке загрязнений окружающей среды [Navarro-Barranco et al., 2020; Березина и др., 2021; Березина и др., 2024а]. Ранее было показано, что среди байкальских амфипод наибольшей токсикорезистентностью обладает G. fasciatus. Напротив, наиболее чувствительным видом байкальских амфипод в отношении ионов кадмия (CdCl2) является O. flavus. При этом токсикорезистентность палеарктического G. lacustris ниже, чем у некоторых

байкальских эндемиков, например при сравнении с G. fasciatus или E. vittatus [Тимофеев, 2010].

В работах по токсикологии гидробионтов помимо солей кадмия используют и соли других металлов, загрязняющих сточные воды, например, соли меди [Березина и др., 2024б]. Ранее было показано, что концентрация CuSO4, при которой погибает 50% особей байкальских литоральных видов амфипод при 24 часовой экспозиции, составляет в пределах от 0,25 до 6 мкмоль/л-1 для G. lacustris -1,5 мкмоль/л-1 [Тимофеев, 2000], для глубоководных байкальских амфипод, выявлена наибольшая чувствитлеьность, показатель ЬБ50 равен 0,25 мкмоль/л-1. Поскольку медь является одним из часто встречающихся загрязнителей содержание в воде данного элемента входит в перечень санитарного надзора. По данным мониторинга качества поверхностных вод на территории деятельности Бурятского центра гидрометеорологии выявлено повышение предельных допустимых концентраций меди в реках прибайкальского региона (увеличение более 10 %) [Государственный доклад «О состоянии озера Байкал и мерах по его охране в 2021 году», 2022].

Новым и слабо исследованным потенциальным источником токсических соединений на данный момент остаются различные имплантируемые устройства, разрабатываемые для многократного повышения производительности биомониторинга [Оигкоу е! а1., 2016]. Всё чаще в данных устройствах используются микрочастицы на основе редкоземельных металлов благодаря их нестандартным оптическим характеристикам. Данные микрочастицы содержат ионы лантаноидов, для которых показана способность ингибировать ряд ферментов [Yang et а1., 2000; Palasz et а1., 2000] и вызывать апоптоз [Апё1аррап et а1., 2018], что требует проверки возможной цитотоксичности данного материала для различных таксономических групп, в том числе и ракообразных. Для имплантирования подобных сенсоров используют полиакриламидные гели, мономерами, которых являются потенциально токсичные молекулы акриламида [Бгкшеи е! а1., 2022].

1.3 Симбионты байкальских и палеарктических амфипод

Отряд амфипод насчитывает более чем 10 000 видов, населяющих разнообразные экологические ниши морских и пресных вод, а также наземных сообществ [Horton et al., 2017]. Несмотря на это высокое разнообразие, симбиотические отношения амфипод изучены лишь на относительно небольшом количестве видов. Симбионтов амфипод можно подразделить на микросимбионтов и макросимбионтов, входящих в паразитические, мутуалистические, комменсалистические и альтруистические отношения. Среди них встречаются как эндобионты (обитающие внутри организма), так и эпибионты (закрепляющиеся на покровах животных) [Bojko and Ovcharenko, 2019].

Показано, что гемолимфа байкальских амфипод Eulimnogammarus verrucosus не является стерильной и населена не менее чем тремя родами симбиотических бактерий (Pseudomonas, Rhodococcus и Kocuria) с уровнем заражённости не менее 80% [Щапова, 2023]. Ещё одним примером микросимбиоза у амфипод являются микроспоридии (тип Microsporidia). Методом молекулярно-генетических исследований в гемолимфе шести эндемичных видов амфипод были найдены последовательности ДНК представителей трёх родов микроспоридий [Dimova et al., 2018].

Известными и хорошо изученными многоклеточными паразитами в Байкале являются скребни. Скребни (тип Acanthocephala) — это билатеральные раздельнополые животные с первичной полостью. Все представители данного таксона являются облигатными паразитами водных и наземных позвоночных, а в качестве промежуточных хозяев выступают ракообразные и насекомые. В Байкале отмечено 10 видов и подвидов скребней, относящихся к 2 классам [ Amin et al., 2015]. Разные виды этих паразитов имеют разную экологическую характеристику, что выражается в специфичности промежуточных и окончательных хозяев. Ранее было показано, что промежуточными хозяевами скребней в Байкальском регионе являются многие амфиподы, причём как байкальские эндемичные виды, так и палеарктический G. lacustris [Балданова и

др., 2001]. Известно, что цистокант скребней способен находиться во взрослых особях амфипод в течение длительного времени, он локализуется в гемоцеле ракообразных и может быть подвержен воздействию иммунной системы хозяина.

Скребни являются примером эндопаразитизма, тогда как к многоклеточным эпибионтам байкальских амфипод можно отнести пиявок. Известно, что на теле амфипод E. verrucosus обитают эндемичные пиявки рода Baicalobdella. Данный род включает два вида Baicalobdella cottidarum (Dogiel, 1957) и Baicalobdella torquata (Grube, 1871) [Лукин, 1976; Бауэр, 1987]. Отмечается, что вид B. torquata может быть комплексом криптических видов [Matveenko and Kaygorodova, 2020]. Также имеются свидетельства паразитизма на глубоководных байкальских амфиподах пиявок рода Codonobdella [Kaygorodova, 2015].

Пиявки и ракообразные могут существовать в разных формах взаимоотношений. Так, пиявки вида Myzobdella lugubris Leidy, 1851 являются паразитами крабов Callinectes bocourti A. Milne-Edwards, 1879, питаясь их гемолимфой и откладывая яйца на поверхности тела крабов [Zara et al., 2009]. Южноафриканская пиявка Marsupiobdella africana имеет форетические (транспортные) отношения с пресноводным крабом Potamonautes perlatus H. Milne-Edwards, 1837, тогда как питается (паразитирует) на теле амфибии Xenopus laevis Wagler 1827. Обычно считается, что форетические отношения способствуют распространению симбионта, который прикрепляется к другому виду с целью расселения. Было показано, что пол краба-хозяина имеет важное значение в заражении пиявками. Кроме того, обнаружено, что период обитания пиявок на крабах соответствует развитию яиц, что может указывать на дополнительные преимущества данных отношений для пиявок [Badets and Preez, 2014]. Другим примером форетических отношений пиявок является Erpobdella punctata (Leidy, 1870) с пятнистыми саламандрами Ambystoma maculatum (Shaw, 1802) [Khan and Frick, 1997].

Байкальские пиявки рода Baicalobdella являются паразитами разных групп рыб — широколобок и других [Kaygorodova and Natyaganova, 2012; Kaygorodova et al., 2022; Kaygorodova, 2015, Матвеенко и Кайгородова, 2022]. Важно отметить,

что пиявки на байкальских амфиподах — единственный зафиксированный случай симбиоза пиявок и амфипод. При этом экспериментальных работ по изучению питания пиявками гемолимфой амфипод ранее не проводили, хотя на основе косвенных признаков предполагается, что они носят паразитический характер [Лукин, 1976; Бауэр, 1987].

Поскольку в природе зафиксированы случаи форетических (транспортных) взаимоотношений пиявок с другими ракообразными, байкальские виды пиявок тоже потенциально могут использовать амфипод лишь в качестве «средства перемещения», а питаться кровью основных хозяев — рыб. Поэтому вопрос о том, являются ли пиявки истинными паразитами байкальских амфипод к моменту начала данной экспериментальной работы оставался открытым.

1.4 Иммунный ответ ракообразных

На сегодняшний день изучение иммунитета беспозвоночных сосредоточено на исследовании защитных механизмов, которые запускаются в ответ на контакт внутренних сред животного с разнообразными чужеродными организмами, включая инфекционные агенты. Симбиотические отношения ракообразных, включающие паразитизм и мутуализм, вовлекают как биохимические, так и клеточные пути иммунного ответа. К основным процессам клеточного иммунитета относят фагоцитоз и инкапсуляцию чужеродного объекта, осуществляемые с участием гемоцитов, которые также могут являться и переносчиками гуморальных факторов [Little et al., 2005; Kloc M. et al., 2024].

Гуморальная составляющая включает в себя такие процессы, как специфическое распознавание белковыми рецепторами углеводных компонентов клеточных стенок бактерий, грибов и других чужеродных объектов, а также процесс меланизации, связанный с активацией каскада фенолоксидазы [Vazquez et al., 2009]. Было высказано предположение, что не менее важным органом, чем гемоциты, участвующим в иммунитете ракообразных, является гепатопанкреас [So"derha"ll, 2010], в котором, по-видимому, происходит синтез основной части молекул иммунного распознавания и антимикробных пептидов [Gross et al., 2001].

Так как в данной работе рассматриваются механизмы ответа изолированных популяций клеток организмов, более подробный анализ литературы проводили в сторону клеточного иммунного ответа.

1.4.1 Гемоциты ракообразных

Основная часть гемоцитов ракообразных находиться в гемолимфе, где циркулируют с её током, а также в фиксированной форме на внутренней поверхности жабр и гепатопанкреаса. Эти клетки выполняют различные функции, как в заживлении ран и свертывании гемолимфы, так и в иммунном ответе организма на внедрение чужеродных объектов [Vazquez et al., 2009]. Показатель количества гемоцитов варьирует у разных видов ракообразных. Изменение общего и дифференциального (процентное соотношение каждого типа гемоцитов относительно общего) количества гемоцитов могут быть связаны с циклом линьки, питанием, бактериальным или вирусным заражением [Matozzo and Marin, 2010]. Данные о типах гемоцитов ракообразных зачастую оказываются противоречивыми. Обычно (но не универсально) у ракообразных выделяют три типа циркулирующих гемоцитов: плазмоциты (гиалиноциты) часто имеют веретенообразную форму, гранулоциты и семигранулоциты (полугранулоциты, малые гранулоциты). Считается, что разная морфология этих типов гемоцитов отражает различные функции (таблица 1) [Rowley, 2016].

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Назарова Анна Александровна, 2025 год

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ

1. Базикалова А. Я. Амфиподы оз. Байкал // Байк. Лимн. Ст. АН СССР. -1945. - Т. 11. - 440 с.

2. Базикалова А. Я. Материалы по изучению амфипод Байкала. Поглощение кислорода // Изв. АН СССР. Серия биология. -1941. - № 1. - С. 151158.

3. Балданова Д. Р., Пронин Н. М. Скребни (тип Acanthocephala) Байкала: морфология и экология // Новосибирск: Наука. - 2001.

4. Бауэр О. Н. Определитель паразитов пресноводных рыб фауны СССР - Л.: Наука, 1987. - Т. 3. - 583 с.

5. Бекман М. Ю. Биология Gammarus lacustris прибайкальских водоемов // Труды Байкальской лимнологичекой станции - 1954. - Т. 14. - С. 263-311.

6. Бекман М. Ю., Базикалова А. Я. Биология и продукционные возможности некоторых байкальских и сибирских бокоплавов // Труды проблемных и тематических совещаний ЗИН. - 1951. - №. 1. - С. 61-67.

7. Березина Н. А. и др. Биооценка качества донных отложений в Финском заливе с использованием показателей бентосных животных // День Балтийского моря. - 2021. - С. 33-35.

8. Березина Н. А. и др. Влияние загрязнения воды медью и трибутилоловом на физиологические показатели двух дрейссен (Dreissena polymorpha и D. bugensis) // Российский журнал биологических инвазий. - 2024б -№3 - С. 27-38.

9. Березина Н. А. и др. Физиологические и репродуктивные нарушения у балтийских амфипод Gmelinoides fasciatus при экспериментальном воздействии 4-трет-октилфенола // Сибирский экологический журнал. - 2024а. - №. 2. - С. 208219.

10. Вейнберг И. В. Сообщества макрозообентоса каменистого пляжа озера Байкал // Зоол. журн. - 1998. - Т. 77, № 3. - С. 259-265.

11. Говорухина Е. Б. Биология размножения, сезонная и суточная динамика населения литоральных и сублиторальных видов амфипод озера Байкал:

диссертация ... канд. био. наук: 03.00.16 / Екатерина Борисовна Говорухина. -Иркутск: Иркутский государственный университет, 2005. - 163 с.

12. ГОСТ Р ИСО 10993.5-99 Государственный стандарт Российской Федерации. Изделия медицинские. Оценка биологического действия медицинских изделий. Часть 5. Исследование на цитотоксичность: методы in vutro. - Москва: Стандартинформ, 2014. - 10с.

13. Государственный доклад «О состоянии озера Байкал и мерах по его охране в 2021 году». - Иркутск: ФГБУН Институт географии им. В.Б. Сочавы СО РАН, 2022. - 370 с.: илл.

14. Дедю И. И. Амфиподы пресных и солоноватых вод юго-запада СССР. - Штиинца. - 1980. - 221 с.

15. Лукин Е. И. Пиявки пресных и солоноватых водоемов. - Л. : Наука, 1976. - 484 с.

16. Матвеенко Е. Ю. и Кайгородова И. А. Молекулярная делимитация эндемичных рыбьих пиявок в пределах вида Baicalobdella cottidarum (Hirudinea, Piscicolidae) из озера Байкал. // I Всероссийская научная конференция (с международным участием) «Чтения памяти В. И. Жадина».: тезисы докладов. -Санкт-Петербург: СПбФ ИИЕТ РАН; Ярославль: Филигрань, 2022. - 106 с.

17. Микодина Е. В. и др. Гистология для ихтиологов: опыт и советы / Е. В. Микодина, М.А. Седова, Д.А. Чмилевский, А.Е. Микулин, С.В. Пьянова, О.Г. Полуэктова // Москва : ВНИРО, 2009. - 112 c.

18. Одум Ю. Экология. Том 1. - Москва «Мир». - 1986. - 325 с.

19. Присный А. А. и Гребцова Е. А. Сравнительный анализ морфофункционального статуса гемоцитов представителей отряда Dyctyoptera / А. А. Присный, Е. А. Гребцова // Современные проблемы науки и образования. -2016. - № 3. - С. 385-393.

20. Сайфутдинова З. Н. и Васильев В. А. О коллекции постоянных линий клеток беспозвоночных / З. Н. Сайфутдинова, В. А. Васильев // клеточные клультуры. - 2014. - Т. 557. - С. 595.

21. Тахтеев В. В. Очерки о бокоплавах озера Байкал (систематика, сравнительная экология, эволюция). - Иркутск: Изд-во Иркут. Ун-та, 2000. - 355 с.

22. Тимофеев М. А. Сравнительная оценка отношения байкальских гаммарид и голактического Gammarus lacustris к абиотическим факторам. Автореферат диссертации ... кандидата биологических наук. - 03.00.16 -экология - Иркутск - 2000. - 20 с.

23. Тимофеев М. А. Экологические и физиологические аспекты адаптации к абиотическим факторам среды эндемичных байкальских и палеарктических амфипод. Диссертация ... доктора биологических наук. -03.02.08 - экология - Иркутск - 2010. - 310 с.

24. Тимошкин О. А. Озеро Байкал: разнообразие фауны, проблемы ее несмешиваемости и происхождения, экология и «экзотические» сообщества // Аннотированный список фауны озера Байкал и его водосборного бассейна. - 2001.

- Т. 1. - №. 1. - С. 16.

25. Тэльнес (Мадьярова) Е. В. Стресс-ответ амфипод байкальского раегиона на уровне транскриптов белков теплового шока (бтш70) на действие гидростатического давления, температуры и зараженности микроспоридиями: диссертация ... канд. биол. наук. Иркутск - ИГУ. - 2024. - 159c.

26. Щапова Е. П. Исследование эндосимбионтной микрофлоры гемолимфы и реакции на неё иммунной системы байкальского эндемичного вида амфипод Eulimnogammarus verrucosus: диссертация ... канд. биол. наук. - Иркутск

- ИГУ - 2023. - 132 c.

27. Янина И. Ю. и Кочубей В. И. Токсичность апконверсионных наночастиц. Обзор. // Известия Саратовского университета. Новая серия. Серия: Физика. - 2020. - Т. 20. - № 4. - С. 268-277.

28. Amin O. M. et al. The description of Centrorhynchus globirostris n. sp. (Acanthocephala: Centrorhynchidae) from the pheasant crow, Centropus sinensis (Stephens) in Pakistan, with gene sequence analysis and emendation of the family

diagnosis / O. M. Amin, R. A. Heckmann, E. Wilson, B. Keele, A. Khan // Parasitology Research. - 2015. - V. 114. - P. 2291-2299.

29. Amoozgar Z. and Yeo Y. Recent advances in stealth coating of nanoparticle drug delivery systems / Z. Amoozgar and Y. Yeo // Wiley Interdisciplinary Reviews: Nanomedicine and Nanobiotechnology. - 2012. - T. 4. - №. 2. - C. 219-233.

30. Andiappan K. et al. In vitro cytotoxicity activity of novel Schiff base ligand-lanthanide complexes / K. Andiappan, A. Sanmugam, E. Deivanayagam, K. Karuppasamy, H. S. Kim, D. Vikraman // Scientific reports. - 2018. - V. 8. - №. 1. - P. 3054.

31. Anoop B. S. et al. Immortalization of shrimp lymphoid cells by hybridizing with the continuous cell line Sf9 leading to the development of 'PmLyO-Sf9' / B. S. Anoop, J. Puthumana, C. G. Vazhappilly, S. Kombiyil, R. Philip, A. Abdulaziz, I. S. B. Singh // Fish & Shellfish Immunology. - 2021. - V. 113. - P. 196-207.

32. Arellano S. and Terwilliger N. Hemocyanin, cryptocyanin and phenoloxidase in deep sea (Bathynomus giganteus) and intertidal (Cirolana harfordi) isopods / S. Arellano, N. Terwilliger // American Zoologist. - 2004. - V. 43, - № 961A.

33. Axenov-Gribanov D. et al. Thermal preference ranges correlate with stable signals of universal stress markers in Lake Baikal endemic and Holarctic amphipods / D. Axenov-Gribanov, D. Bedulina, Z. Shatilina, L. Jakob, K. Vereshchagina, Y. Lubyaga, A. Gurkov, E. Shchapova, T. Luckenbach, M. Lucassen,F.J. Sartoris // PloS one. - 2016. - V. 11. - №. 10. - P. e0164226.

34. Badets M. and Du Preez L. Phoretic interaction between the kangaroo leech Marsupiobdella africana (Hirudinea: Glossiphoniidae) and the cape river crab Potamonautes perlatus (Decapoda: Potamonautidae) / M. Badets, L. Du Preez // International Journal for Parasitology: Parasites and Wildlife. - 2014. - V. 3. - №. 1. -P. 6-11.

35. Bedulina D. et al. Intersexual differences of heat shock response between two amphipods (Eulimnogammarus verrucosus and Eulimnogammarus cyaneus) in Lake Baikal / D. Bedulina, M. F. Meyer, A. Gurkov, E. Kondratjeva, B. Baduev, R. Gusdorf, M. A. Timofeyev // PeerJ. - 2017. - V. 5. - P. e2864.

36. Bojko J. and Ovcharenko M. Pathogens and other symbionts of the Amphipoda: taxonomic diversity and pathological significance / J. Bojko, M. Ovcharenko // Diseases of aquatic organisms. - 2019. - V. 136. - №. 1. - P. 3-36.

37. Bowler K. Heat death in poikilotherms: Is there a common cause? / K. Bowler // Journal of thermal biology. - 2018. - V. 76. - P. 77-79.

38. Browne W. E. et al. Stages of embryonic development in the amphipod crustacean, Parhyale hawaiensis / W. E. Browne, A. L. Price, M. Gerberding, N. H. Patel // genesis. - 2005. - V. 42. - №. 3. - P. 124-149.

39. Cerenius L. and So'derha'U K. The prophenoloxidase-activating system in invertebrates / L. Cerenius, K. So'derhall // Immunol Rev. - 2004. - V. 198. - P. 116126.

40. Chang C. C., Yeh M. S., Cheng W. Cold shock-induced norepinephrine triggers apoptosis of hemocytes via caspase-3 in the white shrimp, Litopenaeus vannamei / C. C. Chang, M. S. Yeh, W. Cheng // Fish Shellfish Immunol. - 2009. - V. 27. - P. 695-700.

41. Chaves da Silva P. G. et al. Adult neurogenesis in the crayfish brain: the hematopoietic anterior proliferation center has direct access to the brain and stem cell niche / P. G. Chaves da Silva, J.L. Benton, D.C. Sandeman, B.S Beltz // Stem cells and development. - 2013. - V. 22. - №. 7. - P. 1027-1041.

42. Chen T. et al. Mechanisms for type-II vitellogenesis-inhibiting hormone suppression of vitellogenin transcription in shrimp hepatopancreas: Crosstalk of GC/cGMP pathway with different MAPK-dependent cascades / T. Chen, , C. Ren, X. Jiang, L. Zhang, H. Li, W. Huang, C. Hu // PloS one. - 2018. - V. 13. - №. 3. - P. e0194459.

43. Cho Y. and Cho S. Hemocyte-hemocyte adhesion by granulocytes is associated with cellular immunity in the cricket, Gryllus bimaculatus / Y. Cho, S. Cho // Scientific Reports. - 2019. - V. 9. - №. 1. - P. 18066.

44. Charles J. et al. Unexpected toxic interactions in the freshwater amphipod Gammarus pulex (L.) exposed to binary copper and nickel mixtures / J. Charles, G.

Crini, F. Degiorgi, B. Sancey, N. Morin-Crini, P. M. Badot / Environmental Science and Pollution Research. - 2014. - V. 21. - №. 2. - P. 1099-1111.

45. Claydon K. and Owens L. Attempts at immortalization of crustacean primary cell cultures using human cancer genes / K. Claydon, L. Owens // In Vitro Cellular & Developmental Biology-Animal. - 2008. - V. 44. - P. 451-457.

46. Copps K. et al. Complex formation by the Drosophila MSL proteins: role of the MSL2 RING finger in protein complex assembly / K. Copps, R. Richman, L.M. Lyman, K.A. Chang, J. Rampersad-Ammons, M.I. Kuroda, // The EMBO journal. -1998. - V. 17. - №. 18. - P. 5409-5417.

47. Crowley L. C. et al. Measuring cell death by propidium iodide uptake and flow cytometry / L.C. Crowley, A.P. Scott, B.J. Marfell, J.A. Boughaba, G. Chojnowski, N.J. Waterhouse, // Cold Spring Harbor Protocols. - 2016. - V. 2016. - №. 7. - pdb. prot087163.

48. Dimova M. et al. Genetic diversity of Microsporidia in the circulatory system of endemic amphipods from different locations and depths of ancient Lake Baikal / M. Dimova, E. Madyarova, A. Gurkov, P. Drozdova, Y. Lubyaga, E. Kondrateva, R. Adelshin, M. Timofeyev / PeerJ. - 2018. - V. 6. - P. e5329.

49. Donath E. et al. Novel hollow polymer shells by colloid-templated assembly of polyelectrolytes / E. Donath, G.B. Sukhorukov, F. Caruso, S.A. Davis, and H. Möhwald // Angewandte Chemie International Edition. - 1998. - V. 37. - №. 16. - P. 2201-2205.

50. Dove A. D. M. et al. A prolonged thermal stress experiment on the American lobster, Homarus americanus / A.D. Dove, B. Allam, J.J. Powers, M.S. Sokolowski, / Journal of Shellfish Research. - 2005. - V. 24. - №. 3. - P. 761-765.

51. Drozdova P. et al. Description of strongly heat-inducible heat shock protein 70 transcripts from Baikal endemic amphipods / P. Drozdova, D. Bedulina, E. Madyarova, L. Rivarola-Duarte, S. Schreiber, P.F. Stadler, T. Luckenbach M. Timofeyev // Scientific Reports. - 2019. - V. 9. - №. 1. - P. 8907.

52. Drozdova P. et al. Experimental Crossing Confirms Reproductive Isolation between Cryptic Species within Eulimnogammarus verrucosus (Crustacea: Amphipoda)

from Lake Baikal / P. Drozdova, A. Saranchina, E. Madyarova, A. Gurkov, M. Timofeyev // International Journal of Molecular Sciences. - 2022. - V. 23. - №. 18. - P. 10858.

53. Ellender R. D. Najafabadi A. K., Middlebrooks B. L. Observations on the primary culture of hemocytes of peaneus / R. D. Ellender, A. K. Najafabadi, B. L. Middlebrooks // Jornal of crustacean biology. - 1992. - V. 12. - № 2. - P 198-185.

54. Erkmen B. et al. Sublethal effects of acrylamide on thyroid hormones, complete blood count and micronucleus frequency of vertebrate model organism (Cyprinus carpio) / B. Erkmen, A.C. Günal, H. Polat, K. Erdogan, H. Civelek, F. Erko? // Turkish Journal of Biochemistry. - 2022. - V. 47. - №. 6. - P. 811-818.

55. Fang Q. et al. Expression of immune-response genes in lepidopteran host is suppressed by venom from an endoparasitoid, Pteromalus puparum / Q. Fang, L. Wang, J. Zhu, Y. Li, Q. Song, D.W. Stanley, Z.R. Akhtar, G. Ye, // BMC Genomics. - 2010. -T. 11. - C. 1-17.

56. Folmer O. DNA primers for amplification of mitochondrial cytochrome c oxidase subunit I from diverse metazoan invertebrates / O. Folmer // Molecular Marine Biology and Biotechnology. - 1994 - V. 3 - P. 294-299.

57. Franke A., Beemelmanns A., Miest J. J. Are fish immunocompetent enough to face climate change? / A. Franke, A. Beemelmanns, J. J. Miest // Biology Letters. - 2024. - V. 20. - №. 2. - P. 20230346.

58. George S. K. and Dhar A. K. An improved method of cell culture system from eye stalk, hepatopancreas, muscle, ovary, and hemocytes of Penaeus vannamei / S. K. George, A. K. Dhar // In Vitro Cellular & Developmental Biology-Animal. - 2010. -V. 46. - P. 801-810.

59. Giulianini P. G. et al. Ultrastructural and functional characterization of circulating hemocytes from the freshwater crayfish Astacus leptodactylus: cell types and their role after in vivo artificial non-self challenge / P.G. Giulianini, M. Bierti, S. Lorenzon, S. Battistella, E.A. Ferrero, // Micron. - 2007. - V. 38. - №. 1. - P. 49-57.

60. Gross P. S. et.al. Immune gene discovery by expressed sequence tag analysis of hemocytes and hepatopancreas in the Pacific White Shrimp, Litopenaeus

vannamei, and the Atlantic White Shrimp, L. setiferus / P.S. Gross, T.C. Bartlett, C.L. Browdy, R.W. Chapman, G.W. Warr / Developmental and Comparative Immunology. -2001. - V. 25. - P. 565-577.

61. Gstraunthaler G., Lindl T., van der Valk J. A plea to reduce or replace fetal bovine serum in cell culture media / G. Gstraunthaler T. Lindl, J. van der Valk // Cytotechnology. - 2013. - V. 65. - P. 791-793.

62. Gurkov A. et. al. Remote in vivo stress assessment of aquatic animals with microencapsulated biomarkers for environmental monitoring / A. Gurkov, E. Shchapova, D. Bedulina, B. Baduev, E. Borvinskaya, I. Meglinski M. Timofeyev // Scientific Reports. - 2016. - V. 6. - № 36427. - P. 1-8.

63. Han Q. et al. Improved primary cell culture and subculture of lymphoid organs of the greasyback shrimp Metapenaeus ensis / H.Q. Han, L.P Li PengTao, L.X. Lu XiongBin, G.Z. Guo ZiJuan, G.H. Guo HuaRong // Aquaculture. - 2013. - V. 410. -P. 101-113.

64. Hauton C. and Smith V. J. In vitro cytotoxicity of crustacean immunostimulants for lobster (Homarus gammarus) granulocytes demonstrated using the neutral red uptake assay / C. Hauton, V. J. Smith // Fish & Shellfish Immunology. -2004. - V. 17. - P. 65 - 73.

65. Hemmer E. et al. Cytotoxic aspects of gadolinium oxide nanostructures for up-conversion and NIR bioimaging / E. Hemmer, T. Yamano, H. Kishimoto, N.

Venkatachalam, H. Hyodo, K. Soga, //Acta Biomaterialia. - 2013. - V. 9. - №. 1. - P. 4734-4743.

66. Hernández-Pérez A. et al. Vibrio areninigrae as a pathogenic bacterium in a crustacean / A. Hernández-Pérez, K. Söderhäll, R. Sirikharin, P. Jiravanichpaisal, I. Söderhäll / Journal of Invertebrate Pathology. - 2021. - V. 178. - P. 107517.

67. Hoang D. T. et al. UFBoot2: improving the ultrafast bootstrap approximation / D.T. Hoang, O. Chernomor, A. Von Haeseler, B.Q. Minh, L.S. Vinh // Molecular biology and evolution. - 2018. - V. 35. - №. 2. -P. 518-522.

68. Hong Y. et al. Cytotoxicity induced by abamectin in hepatopancreas cells of Chinese mitten crab Eriocheir sinensis: an in vitro assay / Y. Hong, Y. Huang, Y.

Dong, D. Xu, Q. Huang, Z. Huang, // Ecotoxicology and Environmental Safety - 2023.

- V. 262. - P. 115198.

69. Horton T. The World Amphipoda Database: history and progress / T. Horton, C. De Broyer, D. Bellan-Santini, C.O. Coleman, D. Copilas-Ciocianu, L. Corbari, M.E. Daneliya, J.C. Dauvin, W. Decock, L. Fanini C. Fiser // Records of the Australian Museum. - 2023. - Vol. 75. - The World Amphipoda Database. - № 4. -P. 329-342.

70. Hou Z. et al. Past climate cooling promoted global dispersal of amphipods from Tian Shan montane lakes to circumboreal lakes / Z. Hou, P. Jin, H. Liu, H. Qiao, B. Sket, A.G. Cannizzaro, D.J. Berg, S. Li // Global Change Biology. - 2022. - V. 28. - №. 12. - P. 3830-3845.

71. Hu J. et al. A Thermally Stable Protein EPP1 of Corn Borer Ostrinia furnacalis Regulates Hemocytic Encapsulation / J. Hu, X. Feng, L. Yao, M. Meng, Y. Du, Y. Dong, Z. Song, M. Tian, Y. Chen //Journal of Innate Immunity. - 2021. - V. 13.

- №. 5. - P. 280-294.

72. Ismail T. G. Coexistence of two species of haplosporidian parasites in a population of the marine amphipod Parhyale hawaiensis with evidence for parasite phagocytosis and transmission mode / T. G. Ismail // J. Egypt Soc. Parasitol. - 2011. -V. 41. - №1. - P. 223 - 237.

73. Itami T. et al. Primary culture of lymphoid organ cells and haemocytes of kuruma shrimp, Penaeus japonicus / T. Itami, M. Maeda, M. Kondo, Y. Takahashi // Methods in cell science. - 1999. - V. 21. - P. 237-244.

74. Jakob L. et al. Lake Baikal amphipods under climate change: thermal constraints and ecological consequences / L. Jakob, D. V. Axenov-Gribanov, A. N. Gurkov, M. Ginzburg, D. S. Bedulina, M. A. Timofeyev, T. Luckenbach, M. Lucassen, F. J. Sartoris, H. O. Pörtner // Ecosphere. - 2016. - V. 7. - №. 3. - P. e01308.

75. Jakob L. et al. Thermal reaction norms of key metabolic enzymes reflect divergent physiological and behavioral adaptations of closely related amphipod species / L. Jakob, K. P. Vereshchagina, A. Tillmann, L. Rivarola-Duarte, D. V. Axenov-

Gribanov, D. S. Bedulina, A. N. Gurkov, P. Drozdova, M. A. Timofeyev, P. F. Stadler, T. Luckenbach // Scientific Reports. - 2021. - V. 11. - №. 1. - P. 1-15.

76. Jayesh P., Seena J., Singh I. S. B. Establishment of shrimp cell lines: perception and orientation / P. Jayesh, J. Seena, I. S. B. Singh // Indian Journal of Virology. - 2012. - V. 23. - P. 244-251.

77. Ji P. F., Yao C. L., Wang Z. Y. Reactive oxygen system plays an important role in shrimp Litopenaeus vannamei defense against Vibrio parahaemolyticus and WSSV infection / P. F. Ji, C. L. Yao, Z. Y. Wang // Diseases of aquatic organisms. -2011. - V. 96. - №. 1. - P. 9-20.

78. Johnson P. T. Histology of the blue crab, Callinectes sapidus: a model for the Decapoda / P. T. Johnson // (No Title). - 1980.

79. J0rgensen L. B., Overgaard J., MacMillan H. A. Paralysis and heart failure precede ion balance disruption in heat-stressed European green crabs // Journal of thermal biology. - 2017. - V. 68. - P. 186-194.

80. Junkunlo K. et al. Reactive oxygen species affect transglutaminase activity and regulate hematopoiesis in a crustacean / K. Junkunlo, K. Söderhäll, I. Söderhäll, C. Noonin // Journal of Biological Chemistry. - 2016. - V. 291. - №. 34. - P. 1759317601.

81. Kalyaanamoorthy S. et al. ModelFinder: fast model selection for accurate phylogenetic estimates / S. Kalyaanamoorthy, B. Q. Minh, T. K. Wong, A. Von Haeseler, L. S. Jermiin // Nature methods. - 2017. - V. 14. - №. 6. - P. 587-589.

82. Kamiloglu S. et al. Guidelines for cell viability assays / S. Kamiloglu, G. Sari, T. Ozdal, E. Capanoglu // Food Frontiers. - 2020. - V. 1. - №. 3. - P. 332-349.

83. Kaygorodova I. A. Annotated checklist of the leech species diversity in the Maloe More Strait of Lake Baikal, Russia / I. A. Kaygorodova // ZooKeys. - 2015. - №. 545. - P. 37.

84. Kaygorodova I. A. and Natyaganova A. V. The first cytogenetic report of the endemic fish leech Baicalobdella torquata (Hirudinida, Piscicolidae) from Lake Baikal / I. A. Kaygorodova, A. V. Natyaganova // Lauterbornia. - 2012. - V. 75. - P. 63-70.

85. Kaygorodova I., Matveenko E., Dzyuba E. Unexpected discovery of an ectoparasitic invasion first detected in the Baikal coregonid fish population / I. Kaygorodova, E. Matveenko, E. Dzyuba // Fishes. - 2022. - V. 7. - №. 5. - P. 298.

86. Kellermann V., van Heerwaarden B., Sgro C. M. How important is thermal history? Evidence for lasting effects of developmental temperature on upper thermal limits in Drosophila melanogaster / V. Kellermann, B. van Heerwaarden, C. M. Sgro // Proceedings of the Royal Society B: Biological Sciences. - 2017. - V. 284. - №. 1855.

- P. 20170447.

87. Khan R. N. and Frick M. G. Erpobdella punctata (Hirudinea: Erpobdellidae) as phoronts on Ambystoma maculatum (Amphibia: Ambystomatidae) / R. N. Khan, M. G. Frick // Journal of Natural History. - 1997. - V. 31. - №. 2. - P. 157161.

88. Kloc M. et al. Invertebrate Immunity, Natural Transplantation Immunity, Somatic and Germ Cell Parasitism, and Transposon Defense / M. Kloc, M, Halasa, J. Z. Kubiak, R. M. Ghobrial // International Journal of Molecular Sciences. - 2024. - V. 25.

- №. 2. - P. 1072.

89. Kondrateva E. et al. UV Sensitivities of Two Littoral and Two Deep-Freshwater Amphipods (Amphipoda, Crustacea) Reflect Their Preferred Depths in the Ancient Lake Baikal / E. Kondrateva, A. Gurkov, Y. Rzhechitskiy, A. Saranchina, A. Diagileva, P. Drozdova, K. Vereshchagina, Z. Shatilina, I. Sokolova, M. Timofeyev // Biology. - 2024. - V. 13. - №. 12. - P. 1004.

90. Korkut G. G. et al. The effect of temperature on bacteria-host interactions in the freshwater crayfish, Pacifastacus leniusculus / G.G. Korkut, I. Söderhäll K. Söderhäll, C. Noonin // Journal of invertebrate pathology. - 2018. - V. 157. - P. 67-73.

91. Kosmalska A. J. et al. Physical principles of membrane remodelling during cell mechanoadaptation / A.J. Kosmalska, L. Casares, A. Elosegui-Artola, J. J. Thottacherry, R. Moreno-Vicente, V. Gonzalez-Tarrago, M. A. Del Pozo, S. Mayor, M. Arroyo, D. Navajas, X. Trepat // Nature communications. - 2015. - Т. 6. - №. 1. - С. 7292.

92. Krysko D. V. et al. Macrophages use different internalization mechanisms to clear apoptotic and necrotic cells / D.V. Krysko, G. Denecker, N. Festjens, S.O.F.I.E. Gabriels, E. Parthoens, K. D'Herde, P. Vandenabeele // Cell Death & Differentiation. -2006. - V. 13. - №. 12. - P. 2011-2022.

93. Kryukova N. A. et al. The influence of Plagiorchis mutationis larval infection on the cellular immune response of the snail host Lymnaea stagnalis / N. A. Kryukova, N. I. Yurlova, N. M. Rastyagenko, E. V. Antonova, V. V. Glupov / The Journal of Parasitology. - 2014. - V. 100. - №. 3. - P. 284-287.

94. Labaude S. et al. Variation in the immune state of Gammarus pulex (Crustacea, Amphipoda) according to temperature: Are extreme temperatures a stress? / S. Labaude, Y. Moret, F. Cezilly, C. Reuland, T. Rigaud // Developmental & Comparative Immunology. - 2017. - V. 76. - P. 25-33.

95. Lapointe J. F., Dunphy G. B., Mandato C. A. Hemocyte-hemocyte adhesion and nodulation reactions of the greater wax moth, Galleria mellonella are influenced by cholera toxin and its B-subunit / J. F. Lapointe, G. B. Dunphy, C. A. Mandato // Results in immunology. - 2012. - V. 2. - P. 54-65.

96. Lavarias S. M. L. et al. Deleterious effects of two pesticide formulations with different toxicological mechanisms in the hepatopancreas of a freshwater prawn / S.M.L. Lavarias, K.D. Colpo, S.M. Landro, E.S. Ambrosio, A.R. Capitulo, F. Arrighetti // Chemosphere. - 2022. - T. 286. - C. 131920.

97. Le Moullac G. et al. Effect of hypoxic stress on the immune response and the resistance to vibriosis of the Shrimp Penaeus stylirostris / G. Le Moullac, C. Soyez, D. Saulnier, D. Ansquer, J.C. Avarre, P. Levy / Fish Shellfish Immunol. - 1998 - V. 8 -P. 621-629.

98. Letunic I. and Bork P. Interactive Tree Of Life (iTOL) v5: an online tool for phylogenetic tree display and annotation / I. Letunic, P. Bork // Nucleic acids research. - 2021. - V. 49. - №. W1. - P. W293-W296.

99. Li C. and Shields J. D. Primary culture of hemocytes from the Caribbean spiny lobster, Panulirus argus, and their susceptibility to Panulirus argus Virus 1

(PaV1) / C. Li, J. D. Shields / Journal of Invertebrate Pathology. - 2007. - V. 94. - P. 48-55.

100. Li W., Zhou J., Xu Y. Study of the in vitro cytotoxicity testing of medical devices / W. Li, J. Zhou, Y. Xu // Biomedical reports. - 2015. - V. 3. - №. 5. - P. 617620.

101. Lin X. and So"derha"ll I. Crustacean hematopoiesis and the astakine cytokines / X. Lin, I. So"derha"ll // Blood, The Journal of the American Society of Hematology. - 2011. - V. 117. - №. 24. - P. 6417-6424.

102. Lipaeva P. et al. Different ways to play it cool: Transcriptomic analysis sheds light on different activity patterns of three amphipod species under long-term cold exposure / P. Lipaeva, K. Vereshchagina, P. Drozdova, L. Jakob, E. Kondrateva, M. Lucassen, D. Bedulina, M. Timofeyev, P. Stadler, T. Luckenbach // Molecular ecology. - 2021. - V. 30. - №. 22. - P. 5735-5751.

103. Little T. J., Hultmark D., Read A. F. Invertebrate immunity and the limits of mechanistic immunology / T. J. Little, D. Hultmark, A. F. Read // Nature immunology. - 2005. - V. 6. - №. 7. - P. 651-654.

104. Liu S. et al. Hemocyte-mediated phagocytosis in crustaceans / S. Liu, S. C. Zheng, Y. L. Li, J. Li, H. P. Liu // Frontiers in Immunology. - 2020. - V. 11. - P. 268.

105. Louten J. Detection and diagnosis of viral infections / J. Louten // Essential Human Virology. - 2016. - P. 111.

106. Ma J., Zeng L., Lu Y. Penaeid shrimp cell culture and its applications / J. Ma, L. Zeng, Y. Lu // Reviews in Aquaculture. - 2017. - V. 9. - P. 88-98.

107. Malev O. et al. Genotoxic, physiological and immunological effects caused by temperature increase, air exposure or food deprivation in freshwater crayfish Astacus leptodactylus / O. Malev, M. Srut, I. Maguire, A. Stambuk, E.A. Ferrero, S. Lorenzon, G.I. Klobucar // Comparative Biochemistry and Physiology Part C: Toxicology & Pharmacology. - 2010. - V. 152. - №. 4. - P. 433-443.

108. Mastore M. et al. Modulation of immune responses of Rhynchophorus ferrugineus (Insecta: Coleoptera) induced by the entomopathogenic nematode

Steinernema carpocapsae (Nematoda: Rhabditida) / M. Mastore, V. Arizza, B. Manachini, M.F. Brivio // Insect science. - 2015. - V. 22. - №. 6. - P. 748-760.

109. Matozzo V. and Marin M.G. The role of haemocytes from the crab Carcinus aestuarii (Crustacea, Decapoda) in immune responses: a first survey / V. Matozzo, M. G. Marin // Fish Shellfish Immunology. - 2010. - V. 28. - P. 534-541.

110. Matveenko E. Y. amd Kaygorodova I. A. Ecological zonation of the Baikal endemic piscine leeches of the genus Baicalobdella (Hirudinea, Piscicolidae) / E. Y. Matveenko, I. A. Kaygorodova // Limnology and Freshwater Biology. - 2020. - P. 801802.

111. Mayen-Estrada R. and Clamp J. C. An annotated checklist of species in the family Lagenophryidae (Ciliophora, Oligohymenophorea, Peritrichia), with a brief review of their taxonomy, morphology, and biogeography / R.Mayen-Estrada, J. C. Clamp // Zootaxa. - 2016. - V. 4132. - №. 4. - P. 451-492.

112. Moo E. K. and Herzog W. Unfolding of membrane ruffles of in situ chondrocytes under compressive loads / E. K. Moo, W. Herzog // J. of ortodaedic research februar. - 2016. - V. 35 - I. 2. - P. 304-310.

113. Murali A., Bhargava A., Wright E. S. IDTAXA: a novel approach for accurate taxonomic classification of microbiome sequences / A. Murali, A. Bhargava, E. S. Wright // Microbiome. - 2018. - V. 6. - P. 1-14.

114. Navarro-Barranco C. et al. Marine crustaceans as bioindicators: Amphipods as case study / C. Navarro-Barranco, M. Ros, J.M.T. Figueroa, J.M.Guerra-García // Fisheries and aquaculture. - 2020. - V. 9. - P. 435-463.

115. Noonin C. et al. Invertebrate hematopoiesis: an anterior proliferation center as a link between the hematopoietic tissue and the brain / C. Noonin, X. Lin, P. Jiravanichpaisal, K. Sóderhall, I. Sóderhall // Stem cells and development. - 2012. - V. 21. - №. 17. - P. 3173-3186.

116. Palasz A. and Czekaj P. Toxicological and cytophysiological aspects of lanthanides action / A. Palasz, P. Czekaj // Acta Biochimica Polonica. - 2000. - V. 47. -№. 4. - P. 1107-1114.

117. Persson M., Vey A., So'derha'll K. Encapsulation of foreign particles in vitro by separated blood cells from crayfish, Astacus leptodactylus / M. Persson, A. Vey, K. So' derha ll // Cell Tissue Res. - 1987. - V. 247. - P. 409-415.

118. Pörtner H. O., Bock C., Mark F. C. Oxygen-and capacity-limited thermal tolerance: bridging ecology and physiology / H. O. Pörtner, C. Bock, F. C. Mark // Journal of Experimental Biology. - 2017. - V. 220. - №. 15. - P. 2685-2696.

119. Rather S. and Vinson B. Phagocytosis and encapsulation: cellular immunity in arthropoda / S. Rather, B. Vinson // Am Zool. - 1983. - V. 23. - P.185-194.

120. Ren X. et al. Integrated transcriptomic and metabolomic responses in the hepatopancreas of kuruma shrimp (Marsupenaeus japonicus) under cold stress / X. Ren, Z. Yu, Y. Xu, Y. Zhang, C. Mu, P. Liu, J. Li // Ecotoxicology and Environmental Safety.

- 2020. - V. 206. - P. 111360.

121. Ren X., Liu P., Li J. Comparative transcriptomic analysis of Marsupenaeus japonicus hepatopancreas in response to Vibrio parahaemolyticus and white spot syndrome virus / X. Ren, P. Liu, J. Li // Fish & Shellfish Immunology. - 2019. - V. 87.

- P. 755-764.

122. Resh V. H. and Cardé R. T. (ed.). Encyclopedia of insects. - Academic press, 2009. - 1295 p.

123. Rinkevich B. Marine invertebrate cell cultures: new millennium trends / B. Rinkevich /Marine biotechnology. - 2005. - V. 7. - P. 429-439.;

124. Riss T. et al. Cytotoxicity assays: in vitro methods to measure dead cells / T. Riss, A. Niles, R. Moravec, N. Karassina, J. Vidugiriene // Assay guidance manual [internet]. - 2019.

125. Rose R. et al. Chromatin compaction precedes apoptosis in developing neurons / R. Rose, N. Peschke, E. Nigi, M. Gelléri, S. Ritz, C. Cremer, H.J. Luhmann, A. Sinning, // Communications Biology. - 2022. - V. 5. - №. 1. - P. 797.

126. Roszer T. The invertebrate midintestinal gland ("hepatopancreas") is an evolutionary forerunner in the integration of immunity and metabolism / T. Roszer // Cell and Tissue Research. - 2014. - V. 358. - P. 685-695.

127. Rowley A. F. The immune system of crustaceans / A. F. Rowley // Elsevier - 2016. - P. 437-453.

128. Santos A. et al. Characterization of hemocytes from the marine amphipod Parhyale hawaiensis (Dana 1853): Setting the basis for immunotoxicological studies / A. dos Santos, M.T. Botelho, W.R. Joviano, V. Gomes, J.R.M.C. da Silva, G. de Aragao Umbuzeiro // Invertebrate Biology. - 2023. - P. e12394.

129. Sarathi M. et al. Comparative study on immune response of Fenneropenaeus indicus to Vibrio alginolyticus and white spot syndrome virus / M. Sarathi, V.I. Ahmed, C. Venkatesan, G. Balasubramanian, J. Prabavathy, and A.S. Hameed, // Aquaculture. - 2007. - V. 271. - №. 1-4. - P. 8-20.

130. Sashikumar A. and Desai P. V. Development of primary cell culture from Scylla serrata: primary cell cultures from Scylla serrata / A. Sashikumar, P. V. Desai // Cytotechnology. - 2008. - V. 56. - P. 161-169.

131. Schroder V., Doicescu D., Arcus M. The cytomorphology of the haemocytes at Gammarus pulex balcanicus (Amphipoda, Crustacea) and their changes after colchicine exposure / V. Schroder, D. Doicescu, M. Arcus // Annals of RSCB. -2017. - V. 22. - №. 1. - P. 10-16.

132. Shimizu Y. et al. Cell-free translation reconstituted with purified components / Y. Shimizu, A. Inoue, Y. Tomari, T. Suzuki, T. Yokogawa, K. Nishikawa, T. Ueda // Nature biotechnology. - 2001. - V. 19. - №. 8. - P. 751-755.

133. Skafar D. N. and Shumeiko D. V. Hemocytes of the Australian Red Claw Crayfish (Cherax quadricarinatus): morphology and hemogram / D. N. Skafar, D. V. Shumeiko // Journal of Evolutionary Biochemistry and Physiology. - 2022. - V. 58. -№. 6. - P. 1730-1743.

134. Smith V.J. and Ratcliffe N.A. Cellular defense reactions of the shore crab, Carcinus maenas: in vivo hemocytic and histopathological responses to injected bacteria / V. J. Smith, N. A. Ratcliffe / J. Invertebr. Pathol. - 1980. - V. 35. - P. 65-74.

135. So'derha'll I. Crustacean hematopoiesis / I. So'derha'll // Developmental & Comparative Immunology. - 2016. - V. 58. - P. 129-141.

136. So'derha'll K. Invertebrate Immunity / K. So'derha'll // Advances in Experimental Medicine and Biology. - 2010. - V. 708. - 244 pp.

137. So'derha ll K., Vey A., Rented M. Haemocytes lysate enhancement of fungal spore encapsulation by crayfish hemocytes / K. So'derha'll, A. Vey A., M. Rented // Dev Comp Immunol. - 1984. - V. 8. - P. 23-29.

138. Soonthornchai W. et al. Expression of immune-related genes in the digestive organ of shrimp, Penaeus monodon, after an oral infection by Vibrio harveyi / W. Soonthornchai, W. Rungrassamee, N. Karoonuthaisiri, P. Jarayabhand, S. Klinbunga, K. Söderhäll, P. Jiravanichpaisal / Developmental & Comparative Immunology. - 2010. - T. 34. - №. 1. - C. 19-28.

139. Steeles V. J. and MacPherson B. R. Morphological features of sessile and circulating hemocytes in the cephalon of Gammarus setosus Dementieva (Crustacea: Amphipoda) by light and electron microscopy / V. J. Steeles, B. R. MacPherson // Journal of morphology. - 1981. - V. 170. - P. 253-269.

140. Sung H. H. and Sun R. Use of monoclonal antibodies to classify hemocyte subpopulations of tiger shrimp (Penaeus monodon) / H. H. Sung, R. Sun // Journal of Crustacean Biology. - 2002. - V. 22. - №. 2. - P. 337-344.

141. Sung H. H. et al. Phenoloxidase Activity of Hemocytes Derived from Penaeus monodon and Macrobrachium rosenbergii / S.H. Sung HungHung, C.H. Chang HungJun, H.C. Her ChengHao, C.J. Chang JenChang, S.Y. Song YenLing / Journal of invertebrate pathology. - 1998. - V. 71. - №. 1. - P. 26-33.

142. Sung H. H., Hwang S. F., Tasi F. M. Responses of giant freshwater prawn (Macrobrachium rosenbergii) to challenge by two strains of Aeromonas spp / H. H. Sung, S. F. Hwang, F. M. Tasi // Journal of invertebrate pathology. - 2000. - V. 76. -№. 4. - P. 278-284.

143. Takhteev V.V., Berezina N.A., Sidorov D.A. Checklist of the Amphipoda (Crustacea) from continental waters of Russia, with data on alien species / V. V. Takhteev, N. A. Berezina, D. A. Sidorov // Arthropoda Sel. - 2015 - V. 3. - P. 335-70.

144. Thammasorn T. et al. Investigation of essential cell cycle regulator genes as candidates for immortalized shrimp cell line establishment based on the effect of in

vitro culturing on gene expression of shrimp primary cells / T. Thammasorn, R. Nozaki, H. Kondo, I. Hirono // Aquaculture. - 2020. - V. 529. - P. 735733.

145. Thayappan K. et al. Hemocytes and hemocytic responses in the mole crab Emerita emeritus (Linnaeus 1767) / K. Thayappan, M. Denis, S.M. Ramasamy, A. Munusamy //Journal of invertebrate pathology. - 2017. - V. 148. - P. 129-137.

146. Timofeyev M. A. et al. Attitude of baikal and palearctic amphipods to oxygen as a factor of environment and mechanism of adaptation to its lowered level / M.A. Timofeyev, K.A. Kirichenko, Z.M. Shatilina, A.V. Rokhin, T.P. Pobezhimova // Contemporary Problems of Ecology. - 2010. - V. 3. - P. 522-527.

147. Timofeyev M. A., Shatilina J. M., Stom D. I. Attitude to temperature factor of some endemic amphipods from Lake Baikal and Holarctic Gammarus lacustris Sars, 1863: A comparative experimental study / M. A. Timofeyev, J. M. Shatilina, D. I. Stom // Arthropoda selecta. - 2001. - V. 10. - №. 2. - P. 93-101.

148. Tone S. et al. Three distinct stages of apoptotic nuclear condensation revealed by time-lapse imaging, biochemical and electron microscopy analysis of cellfree apoptosis / S. Tone, K. Sugimoto, K. Tanda, T. Suda, K. Uehira, H. Kanouchi, K. Samejima, Y. Minatogawa, W.C. Earnshaw // Experimental cell research. - 2007. - T. 313. - №. 16. - C. 3635-3644.

149. Tong, R. X. et al. Neuroendocrine-immune regulation mechanism in crustaceans: a review / R. Tong, L. Pan, X. Zhang, Y., Li // Rev. Aquac. 2022. - V. 14. - P. 378-398.

150. Vainola R. et al. Global diversity of amphipods (Amphipoda; Crustacea) in freshwater / R. Vainola, J.D.S. Witt, M. Grabowski, J.H. Bradbury, K. Jazdzewski, B. Sket // Hydrobiologia. - 2008. - V. 595. - P. 241-255.

151. Vazquez L. et al. Immunity mechanisms in crustaceans / L. Vazquez, J. Alpuche, G. Maldonado, C. Agundis, A. Pereyra-Morales, E. Zenteno // Innate immunity. - 2009. - V.15. - № 3. - P. 179-188.

152. Vereshchagina K. et al. Low annual temperature likely prevents the Holarctic amphipod Gammarus lacustris from invading Lake Baikal / K. Vereshchagina, E. Kondrateva, A. Mutin, L. Jakob, D. Bedulina, E. Shchapova, E. Madyarova, D.

Axenov-Gribanov, T. Luckenbach, H.O. Pörtner, M. Lucassen // Scientific Reports. -2021. - V. 11. - №. 1. - P. 10532.

153. Vereshchagina K. P. et al. Salinity modulates thermotolerance, energy metabolism and stress response in amphipods Gammarus lacustris / K.P. Vereshchagina, Y.A. Lubyaga, Z. Shatilina, D. Bedulina, A. Gurkov, D.V. Axenov-Gribanov, B. Baduev, E.S. Kondrateva, M. Gubanov, E. Zadereev, I. Sokolova // PeerJ. - 2016. - V.

4. - P. - e2657.

154. Vogt G. Functional cytology of the hepatopancreas of decapod crustaceans / G. Vogt // Journal of morphology. - 2019. - V. 280. - №. 9. - P. 1405-1444.

155. Vogt G. Life-cycle and functional cytology of the hepatopancreatic cells of Astacus astacus (Crustacea, Decapoda) / G. Vogt // Zoomorphology. - 1994. - V. 114. - P. 83-101.

156. Wang F. I. and Chen J.C. The immune response of tiger shrimp Penaeus monodon and its susceptibility to Photobacterium damselae subsp damselae under temperature stress / F. I. Wang, J.C. Chen // Aquaculture. - 2006. - V. 258. - P. 34-41.

157. Wang W. N. et al. Effects of temperature on growth, adenosine phosphates, ATPase and cellular defense response of juvenile shrimp Macrobrachium nipponense / W.W. Wang WeiNa, W.A. Wang AnLi, L.Y. Liu Yuan, X.J. Xiu Jun, L.Z. Liu ZhenBo,

5.R. Sun RuYong 2006. // Aquaculture. - 2006. - V. 256. - №. 1-4. - P. 624-630.

158. White K. N. and Ratcliffe N. A. The segregation and elimination of radio and fluorescent-labelled marine bacteria from the haemolymph of the shore crab, Carcinus maenas / K. N. White, N. A. Ratcliffe / J. Mar. Biol. Ass. - 1982. - V. 62. - P. 819-833.

159. White K.N., Ratcliffe N.A., Rossa M. The antibacterial activity of haemocyte clumps in the gills of the shore crab, Carcinus maenas / K. N. White, N. A. Ratcliffe, M. Rossa // J. Mar. Biol. Ass. U.K. - 1985. - V. 65. - P. 857-870.

160. Wu D. et al. Effects and transcriptional responses in the hepatopancreas of red claw crayfish Cherax quadricarinatus under cold stress / D. Wu, Y. Huang, Q. Chen, Q. Jiang, Y. Li, Y. Zhao // Journal of thermal biology. - 2019. - V. 85. - P. 102404.

161. Wu D. L. et al. Effects of cold acclimation on the survival, feeding rate, and non-specific immune responses of the freshwater red claw crayfish (Cherax quadricarinatus) / D.L. Wu, Z.Q. Liu, Y.H. Huang, W.W. Lv, M.H. Chen, Y.M. Li, and Y.L. Zhao // Aquaculture International. - 2018. - V. 26. - P. 557-567.

162. Xin F. and Zhang X. Hallmarks of crustacean immune hemocytes at single-cell resolution / F. Xin, X. Zhang / Frontiers in Immunology. - 2023. - V. 14. - P. 1121528.

163. Xu Z. et al. The oxidative stress and antioxidant responses of Litopenaeus vannamei to low temperature and air exposure / Z. Xu, J.M. Regenstein, D. Xie, W. Lu, X. Ren, J. Yuan, L. Mao // Fish & Shellfish Immunology. - 2018. - V. 72. - P. 564-571.

164. Yan L. et al. Biocompatible and flexible graphene oxide/upconversion nanoparticle hybrid film for optical pH sensing / L. Yan, Y.N. Chang, W. Yin, X. Liu, D. Xiao, G. Xing, L. Zhao, Z. Gu, Y. Zhao, // Physical Chemistry Chemical Physics. -2014. - V. 16. - №. 4. - P. 1576-1582.

165. Yang Z. et al. Potent and competitive inhibition of malic enzymes by lanthanide ions / Z. Yang, R. Batra, D.L. Floyd, H.C. Hung, G.G. Chang, L. Tong // Biochemical and biophysical research communications. - 2000. - V. 274. - №. 2. - P. 440-444.

166. Yao C. L. and Somero G. N. The impact of acute temperature stress on hemocytes of invasive and native mussels (Mytilus galloprovincialis and Mytilus californianus): DNA damage, membrane integrity, apoptosis and signaling pathways / C. L. Yao, G. N. Somero / Journal of Experimental Biology. - 2012. - V. 215. - №. 24. - P. 4267-4277.

167. Zara F. J. et al. Myzobdella platensis (Hirundinida: Piscicolidae) is true parasite of blue crabs (Crustacea: Portunidae) / F.J. Zara, A.L. Diogo Reigada, L.F. Domingues Passero, M.H. Toyama // Journal of Parasitology. - 2009. - V. 95. - №. 1. -P. 124-128.

168. Zhang L., Sha Z., Cheng J. Time-course and tissue-specific molecular responses to acute thermal stress in Japanese mantis shrimp oratosquilla oratoria / L.

Zhang, Z. Sha, J. Cheng // International Journal of Molecular Sciences. - 2023. - V. 24. - №. 15. - P. 11936.

169. Zhu Y. et. al. A novel Eriocheir sinensis primary hemocyte culture technique and its immunoreactivity after pathogen stimulation / Z.Y. Zhu YouTing, J.X. Jin XingKun, F.Z. Fang ZiYan, Z.X. Zhang Xing, L.D. Li Dan, L.W. Li WeiWei, W.Q. Wang Qun // Aquaculture. - 2015. - V. 446. - P. 140-147.