Выделение и характеристика примордиальных половых зародышевых клеток свиньи тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.23, кандидат биологических наук Приданцева, Татьяна Александровна

• Приданцева, Татьяна Александровна
• кандидат биологических наук
• 2001

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Приданцева, Татьяна Александровна

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Возникновение половых клеток у млекопитающих

1.2. Локализация, идентификация, миграция и пролиферация

ППЗК у млекопитающих

1.3. Механизмы миграции ППЗК к зачаткам гонад

1.4. Половые клетки в индифферентной закладке гонады

1.5. Смещенные зародышевые клетки (половые клетки, развивающиеся вне гонад) ^ *

1.6. Морфологические особенности ППЗК

1.7. Гены, экспрессируемые ППЗК

1.8. Выделение ППЗК млекопитающих и культивирование in vitro

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Выделение и характеристика примордиальных половых зародышевых клеток свиньи»

Быстрое развитие биологии и сельскохозяйственной биотехнологии за последние годы явилось результатом разработки новых современных подходов получения животных со стабильной интеграцией и экспрессией ре комб и пани юй ДНК в геноме (трансгенные животные). Трансгенные животные могут использоваться как модели для изучения болезней человека и животных, в генной терапии, для улучшения физиологических свойств и признаков продуктивности домашних животных (животные, обладающие информационным иммунитетом к возбудителям основных эпизоотии, общей генетической устойчивостью к различным заболеваниям и неблагоприятным факторам внешней среды, стресс - устойчивостью и т.д.), а также в качестве источников необходимых человеку фармакологических (альбумин, факторы свертывания крови, эритропоэтин, инсулин, интерферон и др.) и технических (химозин и др.) белков [8,10,19,59].

Перенос генов в геном животных возможен на различных стадиях эмбрионального и поетнатального роста организма [24,25]. Для создания трансгенных животных широкое применение нашли несколько методических приемов: ретровирусная трансфекция эмбрионов, микроинъекция ДНК в пронуклеус, использование трансгенной спермы в качестве вектора и получение эмбриональных химер с помощью эмбриональных стволовых клеток (ЭСК) [13,47,54,56,66,139]. Особую актуальность в настоящее время приобрели методы клеточной инженерии, которые позволяют получать культуры стволовых клеток, обладающих уникальной характеристикой, -тотипотентностью [142,151]. Такие клетки имеют неограниченные потенции к дифференцировке и способны реализовать генетическую информацию ядер клеток, обеспечивая их дифференцировку, а также развитие до целого организма [12,49]. Данным свойством обладают ЭСК. Одним из типов ЭСК считаются примордиальные или первичные половые клетки зародышей млекопитающих (ППЗК, гоноциты), которые являются предшественниками высоко дифференцировашвдх половых клеток (гамет) [56].

Согласно принятому определению, стволовые клетки, которые дают начало двум видам специализированных клеток в пределах одного тканевого типа, называют бипотентными [7,70]. Следует заметить, что конечным итогом дифференцировки ППЗК в гонаде является наличие спермия или ооцита II-порядка с гаплоидным набором хромосом. Слившись при оплодотворении, они образуют зиготу, которая имеет диплоидный набор хромосом, и обладает неограниченными потенциями к дифференцировке. Таким образом, можно заключить, что ППЗК, как и клетки, выделенные из эмбриобласта предымплантационных зародышей, обладают тотипотентностью [56].

Половые клетки обеспечивают непрерывность поколений, т.к. они обладают способностью передавать информацию от родителя потомку, что представляет большой интерес дня биологов всего мира в течение многих лет. ППЗК интересны не только из-за их роли в наследственности и воспроизводстве, но и потому, что их собственная история развития сама по себе является уникальной и увлекательной. Поразительное принципиальное сходство в поведении первичных половых клеток, которое существует между разными видами млекопитающих при небольшом разнообразии частных особенностей, подчеркивает ценность проведения сравнительных исследований с самыми различными видами животных и дает возможность оценивать те или иные факты, касающиеся изучения ППЗК, в свете эволюционной теории [9].

В настоящее время в ведущих научно-исследовательских институтах различных стран мира изучается множество аспектов проблемы, связанной с исследованием ППЗК млекопитающих, в том числе и человека [92]. Актуальность этой проблемы отражается не только в теоретических дискуссиях, но и в постановке таких важных практических задач, как необходимость увеличения продуктивности животных, лечение бесплодия, регулирование рождаемости у людей и др. [52,53].

Выделение ППЗК из зачатков гонад млекопитающих с целью получения из них культур стволовых зародышевых клеток представляет собой одно из перспективных направлений в клеточной биологии, поскольку позволяет создать экспериментальные модели для изучения механизмов гаметогенеза у млекопитающих. Так как ШТЗК являются тотипотентными клетками, то они также могут быть использованы как удобная модель in vitro для изучения процессов цитодифференцировки в развитии млекопитающих [38].

Достижения мировой и отечественной клеточной инженерии показали, что открывается возможность массового получения генетически идентичных особей сельскохозяйственных животных с выдающимися продуктивными качествами путем клонирования. Это даст возможность на порядок увеличить темпы генетического совершенствования племенных и товарных стад, создать товарные стада, животные в которых характеризуются меньшей изменчивостью продуктивных признаков, что дает возможность при нцип и ал ьно по-новому решать сложнейшие взаимодействия организмов и механизмов, создать эффективные автоматизированные технологии производства [72]. В связи с этим, альтернативным к перспективным подходом является использование ППЗК млекопитающих в качестве неиссякаемого источника тотклотектных ядер при создании новых клеточных типов в процессе клонирования.

В конце 80-х годов целому ряду исследовательских институтов удалось выполнить клонирование животных путем пересадки ядер. При этом исходным материалом всегда служил 4-64-х клеточный эмбрион. Возможность клонирования млекопитающих путем трансплантации ядер бластомеров в энуклеированные ооциты была показана у крупного рогатого скота, овец и кроликов [41]. Следует отметить, что степень успеха при клонировании всегда оставалась довольно низкой, и, кроме того, реюгонирование (повторное клонирование эмбриона, полученного посредством пересадки ядер) представляло собой большую трудность [72]. Ядра бластомеров эмбрионов были до недавнего времени единственным источником доноров в процессе клонирования. В настоящее время ведутся успешные попытки использования ШОК в качестве доноров ядер [73].

В 1997 году в лаборатории фирмы «Американская служба разведения» (ABS, США) под руководством Bishop впервые удалось получить клонированного теленка по кличке «Ген» [143]. Исходным материалом для клонирования послужили ядра ГШЗК крупного рогатого скота, полученные из закладок женских гонад плода теленка в возрасте 30 суток. По сравнению с опубликованным ранее сообщением Яна Вильмута и Кейта Кемпбелла [148] из Иститута Рослин в Шотландии о рождении овцы Долли, полученной из клеток эпителия молочной железы уже взрослой овцы, эффективность клонирования ППЗК по всей вероятности значительно выше. В данном случае авторы сообщают о высокой эффективности нового методического подхода. Из 15-ти пересадок ядер в энуклеированные яйцеклетки крупного рогатого скота была получена одна стельность, которая закончилась благополучно.

Стволовые зародышевые клетки млекопитающих также могут использоваться как вектор для переноса рекомбинантной ДНК в организм животных. После введения ППЗК в гонады зародыша они способны принимать участие в формировании всех органов и тканей химерного организма, и поэтому являются удобным материалом для проведения геномных манипуляций у млекопитающих [123,128]. Преимущество ППЗК перед клетками, выделенными из эмбриобласта зародышей млекопитающих, состоит в том, что они представляют собой единственные клетки, у которых стерты родительские отпечатки (геномный импринтинг). Считается, что геномный импринтинг оказывает влияние на потенции ЭСК в формировании эмбриональных и внеэмбриональных структур зародышей млекопитающих [91].

Решение поставленных вопросов зависит от дальнейшего усовершенствования методов выделения и культивирования in vitro ППЗК млекопитающих и от результатов опытов, в которых при помощи различных подходов будут непосредственно исследоваться свойства ППЗК и изменения их i Д V У * V I И /bVÍ/AV V/H-J1 «1 I i Я А ГI S Vi JA<4 ij-X .

Таким образом, ППЗК млекопитающих представляют собой новый инструмент для решения задач биотехнологии, их изучение является актуальным и многообещающим для клеточной и генетической инженерии, на которых базируется сельскохозяйственная биотехнология, а также биология развития млекопитающих.

Цель и задачи исследований. В соответствии с выше изложенным, цель нашей работы заключалась в выделении ППЗК из зародышей свиньи и их характеристике. Для достижения намеченной цели необходимым условием явилось решение следующих задач!

- разработать на лабораторных животных (мышь) методические приемы, позволяющие изолировать ППЗК из зачатков гонад зародышей свиньи;

- выделить ППЗК свиньи;

- изучить факторы, влияющие на выделение ППЗК свиньи;

- подобрать оптимальные условия, влияющие на получение культуры ППЗК;

- охарактеризовать ППЗК свиньи в культуре.

Научная новизна. Впервые разработан простой, недорогой и эффективный метод выделения ППЗК из дорсального мезентерия и зачатков гонад плодов мыши и свиньи и их очистки от других клеточных типов, основанный на разных адгезивных способностях клеток. Обнаружено, что первичные половые клетки млекопитающих (мышь и свинья) характеризуются ить-лн апгронвнпп ^ПЛГЛКНПРТЬТА

I ■ I ".ÍÍVV t < I Lili V Л1 vilVVK/UllVVlUlV.

Предпринята попытка подобрать оптимальные условия для культивирования ППЗК свиньи. Получены колонии стволовых зародышевых клеток из ППЗК. Охарактеризованы морфологические, биохимические и ростовые особенности данных клеток in vitro.

Впервые показано влияние пола и возраста плода на выделение ГН 13 К свиньи и получение из них колоний стволовых зародышевых клеток с фенотипом ЭСК.

Изучена роль и проведен сравнительный анализ использования различных монослоев соматических клеток для культивирования 11113К свиньи и получения колоний стволовых зародышевых клеток с морфологией, подобной

ОьГ-ТУ

Практическая ценность работы. Экспериментальные данные по получению чистой популяции ППЗК свиньи могут представлять практический коммерческий интерес в современных условиях, что обусловлено низкой стоимостью разработанного методического подхода в сочетании с высокой эффективностью.

Показано, что использование, в качестве подложки, монослоев соматических клеток способствует увеличению продолжительности жизни п ЮТУ л^тТЯт„

111 и!\ СПШВИ 1/1 VII/и.

Полученные данные о влиянии таких факторов, как возраст и пол плода, на выделение ППЗК свиньи и получение колоний стволовых зародышевых клеток, позволяют более эффективно использовать данные клетки в прикладном аспекте, в качестве доноров при трансплантации ядер и получении животных с выдающимися хозяйственно-полезными признаками.

Основные положения, выносимые на защиту:

- метод выделения и очистки примордмальных половых клеток мыши и свиньи;

- влияние возраста и пола плодов свиньи на выделение ППЗК и получение колоний стволовых половых клеток;

- влияние монослоев фидерных клеток на поддержание ППЗК свиньи в культуре и получение колоний стволовых половых клеток;

- характеристика ППЗК свиньи и колоний стволовых зародышевых клеток. лп

Апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсуждены: на научно-практической конференции по проблеме «Повышение конкурентоспособности животноводства и задачи кадрового обеспечения», РАМЖ, п.Быково, июнь 2000г.; на 49-ой научно-методической конференции «Достижения молодых ученых в области животноводства», ВНЙИЖ, п.Дубровицы, июль 2000г.; на научной конференции «Селекционно-генетические методы повышения продуктивности сельскохозяйственных животных», ВНИИРГЖ, ¡.Санкт-Петербург, октябрь 2000г.; на Л-ой Международной конференции «Биотехнология в растениеводстве, животноводстве и ветеринарии», ВНИИСХБ, г.Москва, октябрь 2000г; на VII-ом Международном конгрессе андрологов, г.Монреаль, Канада, июнь 2001г.

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 5 научных работ.

Структура и объем работы. Диссертация изложена на ПО стр., содержит 12 табл., 24 рис. (в т.ч. 14 фотографий, 3 диаграммы), состоит из следующих разделов: введение, обзор литературы, материалы и методы исследований, результаты, обсуждение, выводы, список литературы. Список литературы включает 155 библиографических источников, в т.ч. 83 на иностранном языке.

Заключение диссертации по теме «Биотехнология», Приданцева, Татьяна Александровна

5. ВЫВОДЫ:

1) Впервые разработан и предложен эффективный метод очистки ПГОК, основанный на разных адгезивных способностях клеток, который показал, что инкубация клеток, выделенных из зачатков гонад и прилегающего дорсального мезентерия, в ростовой среде в течение 2-х часов с последующим разделением, позволяет сформировать популяцию клеток, на 80-85% и 52% представленную ППЗК, у мыши и свиньи, соответственно.

2) Установлено, что у свиней, в качестве источника ППЗК, могут служить зачатки гонад 23, 26 и 31-суточных плодов. У 33-суточных плодов свиньи наблюдается соматическая дифференцировка гонад, которая дает возможность получить ППЗК только из плодов мужского пола.

3) Впервые выявлено влияние возраста плода на выделение ППЗК свиньи и получение колоний стволовых зародышевых клеток с фенотипом ЭСК. Показано, что потенциал ППЗК, изолированных из ранних плодов (23 сутки), давать начало росту колоний клеток с ЭСК-подобным фенотипом, почти в 12 раз превосходит таковой у ППЗК плодов старшего возраста (33 сутки).

4) ППЗК свиньи характеризуются определенными морфологическими признаками и представляют собой небольшие (<1=13 мкм), шарообразные клетки с большим сферическим ядром и узким ободком цитоплазмы, имеющей гомогенную структуру и высокую активность щелочной фосфатазы. Показано, что ППЗК, мигрирующие в зачатки гонад, имеют псевдоподии.

5) Наличие фидерных слоев является одним из основных и необходимых факторов при культивировании ППЗК свиньи более 24-х часов и получении колоний стволовых половых клеток с ЭСК-подобным фенотипом. В качестве питательного слоя можно использовать как перевиваемые эмбриональные фибробласты мыши (БТО-клетки), так и первичные клетки Сертоли свиней.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Приданцева, Татьяна Александровна, 2001 год

1. Адаме Р. Методы культуры клеток для биохимиков. М.: Мир. -1983. - 263 с.

2. Айзенштадт Т.Б. Цитология оогенеза. М.: Наука. -1984. - 247 с.

3. Албертс Б., Брей Д., Льюис Дж. Молекулярная биология клетки: В 5-ти т. М.:1. Мир. -1987.

4. Александровская О.В., Радостна Т.А., Козлов Н.А. Цитология, гистология,эмбриология. М.: Агропромиздат. -1987. - 448 с.

5. Бакулина Э.Д., Баранов B.C., Белоусов Л.В. Объекты биологии развития. М.:1. Наука. 1975. -579 с.

6. Белинцев Б. Н. Самоорганизация в развитии зародыша // Природа. 1989.- №2882..-С. 81-89.

7. Белоусов Л.В. Биологический морфогенез. М.: Изд-во МГУ. -1987. -190 с.

8. Биотехнология клеток животных: В 2-х т. / Под ред. Спиера Р.Е., Гриффитса

9. Дж. Б. М.: Агропромиздат. - 1989. - С. 480-503.

10. Бочаров Ю.С. Эволюционная эмбриология позвоночных. М.: Изд-во МГУ.1988. 232 с.

11. Брем Г., Зиновьева Н.А., Эрнст Л.К. "Генные фермы"- новый путьпроизводства биологически активных протеинов трансгенными животными // Сельскохозяйственная биология. 1993. - №6. - С. 3-27.

12. Бриндак О.Н. Пренатальный морфогенез мужских половых клеток человека.

13. Автореф. дис. канд. мед. наук. М.,1979. -18 с.

14. Бродский В.Я., Урываева И.В. Клеточная полиплоидия, пролиферация идифференцировка. М. -1981. - 257 с.

15. Газарян К.Г. Микроиньекция генов в зиготы и эмбрионы // Успехисовременной генетики. 1985. - Т 13. - С. 75-88.

16. Газарян К.Г., Белоусов Л.В. Биология индивидуального развития животных.

17. М.: Высшая школа. 1983. - 287 с.

18. Гайар Ж.А. Линия половых клеток и половые эмбрионы у человека //

19. Происхождение и развитие половых клеток в онтогенезе позвоночных и некоторых беспозвоночных / Ред. Э. Вольф. М. - 1961. - С. 272-296.

20. Гапиенко Е.Ф. Развитие в органной культуре гонад 7-11-недельных плодовчеловека // Бкш. экспер. биол. и мед, 1975. - Т. 79. - №5. - С. 103-106.

21. Гапиенко Е.Ф. Развитие герминативных клеток в яичниках плодов человекаранних сроков // Арх. анатомии, гистологии и эмбриологии. 1975. - Т. 68. -№6.-С. 85-91.

22. Гилберт С. Биология развития: В 3-х т. М.: Мир. - 1995.

23. Гоголевский П. А. Совершенствование биотехнологических приемовполучения трансгенных сельскохозяйственных животных. Автореф. дис. канд. биол. наук. - М., 1992. -20 с.

24. Грунц X. Роль индуцирующих факторов в раннем эмбриональном развитии //

25. Онтогенез. -1990. Т. 21. - № 3. - С. 229-241.

26. Дыбан А.П. Раннее развитие млекопитающих. Л.: Наука., Лен. отд. - 1988.228 с.

27. Дыбан А.П. Цитогенетические аспекты нормального и патологическогоэмбриогенеза млекопитающих // Проблемы генетики развития. М. - 1972. -С. 62-85.

28. Дыбан А.П., Баранов В.С. Цитогенетика развития млекопитающих. М.1978.-215 с.

29. Дыбан А.П., Городецкий С.И. Генетическая трансформация млекопитающих //

30. Молекулярные механизмы генетических процессов. М. - 1985. - С. 84-93.

31. Дыбан А.П., Городецкий С.И. Молекулярные и клеточные аспектыбиотехнологии. Л.: Наука. - 1985. - С. 84-93.

32. Животная клетка в культуре (Методы и применение в биотехнологии) / Подред. проф. Дьяконова Л.П., проф. Ситькова В.й. М.: Компания Срутник+. -2000. - 400 с.

33. Игнатьева E.JI. Критерии оценки развития женских половых клетокмлекопитающих (экспериментальное исследование) // Дис. канд. биол. наук. -NL-1986. -116 с.

34. Карлсон Б. Основы эмбриологии по Пэтгену: В 2-х т. М: Мир. -1983.

35. Клишов A.A. О взаимодействии закономерностей гистогенеза и органогенеза /

36. Функциональная морфология эмбрионального развития человека и млекопитающих: Труды IIМОЛМИ. Вып. 2. - 1984. - Т. 164. - С. 108-113.

37. Кнорре А.Г. Краткий очерк эмбриологии человека с элементамисравнительной, экспериментальной и патологической эмбриологии. Л.: Медицина, Лен. отд. -1967. - 268 с.

38. Кожухарь В.Г. Дифференцировка целомического эпителия гонад зародышейчеловека. Автореф. дис. канд. биол. наук. - Л., 1980. - 20 с.

39. Корженевская М.А. Молекулярно-генетические основы развития зародышаживотных. СП-б. - 1997. - 61 с,

40. Корочкнн Л.И. Взаимодействие генов в развитии. М. -1977. - 290 с.

41. Культура животных клеток. Методы / Конки Д., Эрба Э., Фремни Р. и др. М.:1. Мир. 1989. - С. 81-90.

42. Культура клеток и тканей животных / Дьяконов Л.П., Глухов В.Ф., Поздняков

43. A.A. и др. // Методические рекомендации. Ставрополь. - 1980.

44. Курило Л.Ф. Морфофункциональная характеристика оогенезамлекопитающих и человека. Автореф. дис. канд. биол. наук. - М., 1985. -35 с.

45. Лабораторные млекопитающие / Дыбан А.Г., Пучков В.Ф., Баранов B.C. и др.

46. Объекты биологии развития. М.: Наука. - 1975. - С. 505-523.

47. Лукина H.A. Клеточное размножение и процессы дифференциации. Л.:1. Наука, Лен отд. -1983.

48. Мак Ларен А. Детерминация пола у млекопитающих // Онтогенез. 1993. - Т.24.-№ 3. С.5-30.

49. Миталипов IH M. Сравнительный анализ плюрипотентных свойствэмбриональных стволовых клеточных линий мыши in vitro и in vivo. Дис. канд. биол. наук. - М., 1994. -114 с.

50. Миталипова М.М. Факторы, влияющие на развитие эмбриональных стволовьжклеток крупного рогатого скота и мыши в системе in vitro и in vivo. Дис. канд. биол. наук. - Дубровицы., 1995. - 127с.

51. Невзгодина М.В. Формирование половых желез в эмбриогенезе свиней //

52. Сельскохозяйственная биология. 1971. - Т. 6. - № 6. - С. 887-894.

53. Нейфах A.A., Тимофеева М.Я. Проблемы регуляции в молекулярной биологииразвития. М. -1978. - 336 с.

54. Ньют Д. Рост и развитие животных. М.: Мир. - 1973. - 88 с.

55. Пиняев В.И. Влияние низкотемпературного консервирования на первичныеполовые клетки ранних зародышей человека // Дис. канд. мед. наук. -Харьков, 1989. -117 с.

56. Пожидаев Е.А. Оогенез млекопитающих. JL: Медицина, Лен. отд. - 1967.-170с.

57. Полежаева НА. Получение, генетическая трансформация и использованиеэмбриональных стволовых клеточных линий. Автореф. дис. канд. биол. наук. - М., 1993.-25 с.

58. Происхождение и развитие половых клеток в онтогенезе позвоночных инекоторых групп беспозвоночных / Под ред. Э. Вольф. Л. -1968. - 348 с.

59. Райцина С.С. Идентификация стволовых клеток в некоторых системахклеточных дифференцировок у млекопитающих // Успехи современной биологии. 1980. - Т. 90. - № 1(4). - С. 123-137.

60. Райцина С.С. Происхождение и развитие половых клеток // Современныепроблемы сперматогенеза. М.: Наука. -1982. - С. 5-25.

61. Райцина С.С. Сперматогенез и структурные основы его регуляции. М.:1. Наука. 1985. - 207 с.

62. Репин B.C., Сухих Г.Т. Медицинская клеточная биология. М.: БЭБиМ.1998. 200 с.

63. Роит А., Бростофф Дж., Мейл Д. Иммунология. М.: Мир. - 2000. - 592 с.

64. Савченкова И., Фляйшманн М., Булла Й., Брэм Г. Использованиеэмбриональных стволовых клеток (ЭСК) мыши для получения химерных животных // Цитология. 1996. - №> 38. - С 1118-1123.

65. Савченкова И.П. Создание модельных систем культур клеток млекопитающихдля решения проблем биологии и биотехнологии. Дис. д-ра. биол. наук. -Дубровицы, 1997. - 279 с.

66. Савченкова И.П. Эмбриональные стволовые клетки в биологии: настоящее ибудущее. Дубровицы. - 1999. - 95с.

67. Савченкова И.П., Сергеев Н.И. Получение плюрипотентных эмбриональныхклеточных линий из бластоцист кролика // Тезисы докладов. Новые направления биотехнологии. Пущино. - 1994. - С. 143.

68. Савченкова И.П., Сергеев Н.И., Айтбаев Н.Е. Сравнительный анализ развитияпредимплантационных эмбрионов кролика на различных монослоях соматических клеток // Цитология. 1994. - № 9/10. - С. 156-161.

69. Сассон А. Биотехнология: свершения и надежды. М.: Мир. - 1987. - 412 с.

70. Семенова-Тянь-Шанская А.Г. Изменение ядер гоноцитов на ранних этапах ихдифференцировки у ранних зародышей человека // Архив анатомии, гистологии и эмбриологии. 1978. - Т. 74. - № 1. - С. 91-97.

71. Семенова-Тянь-Шанская А.Г. Первичные половые клетки зародышей высшихпозвоночных и человека ранних стадий развития // Архив анатомии, гистологии и эмбриологии. 1971. - Т. 60. - №6. - С. 106-116.

72. Семенова-Тянь-Шанская А.Г. Первичные половые клетки зародышей человекав период миграции к зачаткам гонад // Архив анатомии, гистологии и эмбриологии. 1969. - Т. 56. - №6. - С. 3-8.

73. Семенова-Тянь-Шанская А.Г. Происхождение, дифференцировка и миграциягоноцитов у ранних зародышей человека. Дис. канд. биол. наук. - Л., 1972. -146 с.

74. Семенова-Тянь-Шанская А.Г. Цитологические особенности гоноцитов в ходеих миграции у ранних эмбрионов крыс // Архив анатомии, гистологии и эмбриологии. 1976. - Т. 71. - №2. - С. 52-58.

75. Семенова-Тянь-Шанская А.Г., Кнорре А.Г. Половой зачаток (гонобласт), егопроисхождение и эволюция // Архив анатомии, гистологии и эмбриологии. -1972. -Т. 8, -№1. -С. 29-40.

76. Серов O.JI. Перенос генов в соматические и половые клетки. Новосибирск.1985.- 120 с.

77. Соколов П.А. Развитие половых органов у плодов свиней / Доклады ТСХА.

78. Вып. 178. -1972. С. 171-178.

79. Терци М. Генетика и животная клетка. М.: Мир. - 1977. - 291 с.

80. Фалин Л.И. Развитие половых желез и происхождение половых клеток вэмбриогенезе человека // Архив анатомии, гистологии и эмбриологии. 1968. -Т. 54.-№2.-С. 3-29.

81. Чертков И.Л., Гуревич O.A. Стволовая клетка и ее микроокружение. М.:1. Медицина. -1984. 237 с.

82. Эмбриональные стволовые клетки, их генетическое изменение путемгомологичной рекомбинации и использование в получении трансгенных животных / Савченкова И.П., Зиновьева H.A., Булла Й., Брэм Г. // Успехи современной биологии. 1996. - № 116. - С. 78-92.

83. Эрнст Л.К. Животноводство XXI век / Информационный бюллетень. Новое в животноводстве. -1998. - № 1. - С. 6-7.

84. Advances in the generation of transgenic pigs via embryo-derived and primordialgerm cell-derived cells / Piedrahita J.-A., Moor K., Lee C. et al. // J. Reprod. Fértil. Suppl. -1997. V. 180. - P.245-254.

85. Baker T.G. Primordial germ cells // In reproduction in mammals. 1970. - V.l.

86. Germ cells and Fertilization Cambridge University Press, Cambridg. P. 1-13.

87. Baxter R. Alkaline phosphatase in the primordial germ cells of a 10 mm humanembiyo // Int. Anat. Cong. Oxford. 1952. - P. 17-18.

88. Black G.L., Erickson B.H. Oogenesis and ovarian development in the prenatal pig //

89. Anat. Rec. -1963. V.5. - P. 45-56.

90. Blandau R.J., White B.J., Rumery R.E. Observation on the movements of the livingprimordial germ cells in the mouse // Fértil. Steril. 1963. - V.14. - P. 482-489.

91. Buehr M. The primordial germ cells of mammals: some current perspectives // Exp.

92. Cell Res. -1997. V. 232. - P. 194-207.

93. Buehr M., McLaren A. Isolation and culture of primordial germ cells // Methods

94. Enzymol. -1993. V. 225. - P. 58-77.

95. Byskov A.G. Primordial germ cells in regulation of meiosis // Reproduction ofmammals. V. I. Germ cells and fertilization / Eds C. Austin, R. Short. Cambridge. -1982. - P. 1-17.

96. Byskov A.G. Regulation of meiosis in mammals // Ann. Biol. Anim. Biochim.

97. Biophys. 1970. - V. 19. - P. 1251-1262.

98. Cooke JE. Culture and manipulation of primordial germ cells // Methods Enzymol.- 1993. -V. 225.-P. 37-58.

99. De Felici M., Dolci S. Leukemia inhibitory factor sustains the survival of mouseprimordial germ cells cultured on TM4 feeder layers // Dev. Biol. 1991. - V. 147. -P. 281-284.

100. De Felici M., Dolci S., Pesce M. Cellular and molecular aspects of mouseprimordial germ cell migration and proliferation in culture // Int. J. Dev. Biol. -1992.-V. 36.-P. 205-213.

101. De Felici M., Dolci S., Pesce M. Proliferation of mouse primordial germ cell invitro: a key role for cAMP // Dev. Biol -1993. V. 157. - P. 277-280.

102. De Felici M., McLaren A. In vitro culture of mouse primordial germ cells // Exp.

103. Cell Res. 1983. - V. 142. - P. 417427.

104. De Felici M., McLaren A. Isolation of mouse primordial germ cells I I Exp. Cell Res.- 1982. V. 142. - P. 476-482.

105. De Felici M., Pesce M. Growth factors in mouse primordial germ cell migration andproliferation // Prog. Growth Factor Res. 1994. - V. 5. - P 135-143.

106. De Felici M., Pesce M. Immunoaffinity purification of migratory mouse primordialgerm cells // Exp. Cell Res. 1995. - V. 216. - P. 277-279.

107. De Felici M., Siracusa G. Adhesiveness of mouse primordial germ cells to follicularand Sertoli cell monolayers // J. Embiyol. exp. Morphol. 1985. - V. 87. - P. 8797.

108. Derivation of embryonic stem (ES) cell like cells from rabbit blastocyses /

109. Savchenkova I., Sergeev N., Bulla J., Brem G. / The 1995 Annual Meeting of Europen Embryo Transfer Association ( A.E.T.E.). 1995. - P. 238.

110. Derivation of pluripotent stem cells from cultured human primordial germ cells /

111. Shamblott M. J., Axelman J., Wang S., et al. // Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A -1998. V. 95. -P. 13726-13731.

112. Developmental potential of mouse primordial germ cells / Kato Y., William M. Rideout HI, Hilton K. et al. // Development. 1999. - V. 126(9). - P. 1823-1832.

113. Dolci S., Pesce M., De Felici M. Combined action of stem cell factor, leukemiainhibitory factor and cAMP on in vitro proliferation of mouse primordial germ cells // Mol. Reprod. Dev. 1993. - V. 35. - P. 134-139.

114. Eddy E.M. Germ plasm and the differentiation of the germ cell line // Lutern. Rev.

115. Cytol. 1975. - V. 43. - P. 229-280.

116. Eddy E.M., Clark J.M., Gong D. Origin and migration of primordial germ cells inmammals // Gamete Res. -1981. V. 4. - P. 333-362.

117. Effects of the steel gene product on mouse primordial germ cells in culture / Godin1., Deed R, Cooke J. et al. // Nature. -1991. V. 352. - P. 807-809.

118. Evidence for substrate guidance of primordial germ cells / Wylie C., Heasman S.,

119. Swan A.P. et al. // Exp. Cell. Res. -1979. V. 121. - P. 315-324.

120. Generation of transgenic porcine chimeras using primordial germ cell-derived colonies / Piedrahita J. -A., Moor K., Oetama B. et al. // Biol, of reprod. 1998. -V. 58.-P. 1321-1329.

121. Germline regulatory element of Oct-4 specific for the totipotent cycle of embryonal cells / Young II Yeom, Fuhrmann G., Catherine E. Ovitt et al. // J. of Cell Science. 1996. - V. 122 (3). - P. 881-894.

122. Godin I., Wylie C. TGF|3i inhibits proliferation and has a chemotropic effect on mouse primordial germ cells in culture // Development 1991. - V.113. - P. 1451-1457.

123. Godin I., Wylie C., Heasman J. Genital ridges exert long-range effects on mouse primordial germ cell numbers and direction of migration in culture // Development. 1990. - V. 108. - P. 357-363.

124. Hardisty M.W. The numbers of vertebrate primordial germ cells // Biol. Rev. -1977.-V. 42.-P. 265-287.

125. Heasman J. Primordial germ cells of Xenopus embryos: The role of fibronectin in their adhesion during migration // Cell. -1981. V. 27. - P. 437-447.

126. Heasman J., Muhun T., Wylie C.C. Studies on the locomotion of primordial germ cells from Xenopus laevis in vitro // J. Embryol. exp. Morphol. 1977. - V. 42. - P. 149-161.

127. Hogg H., McLaren A. Absence of a sex vesicle in meiotic foetal germ cells is consistent with an XY chromosome constitution // J. Embryol. exp. Morphol. 1985. V. 88.-P. 327-332.

128. Holtz W., Mahabir E. Migration of primordial germ cells during embiyonic development in pigs // Reprod. Domest. Anim. 1999. - V. 34. - P. 35.

129. Interactions between primordial germ cells playa role in their migration in mouse embryos / Gomperts M., Garcia-Castro M,, Wylie C., Heasman J. // Development. 1994. - V. 120(1).-P. 135-141.

130. Isolation of pluripotent stem cells from cultured porcine primordial germ cells / Shim H., Gutierrez-Adan A., Chen L.-R. et al. // Biol, of reprod. 1997. - V. 57. -P. 1089-1095.

131. Jianchi Ding, Hahnel A.C., Keith J.B. Isolation of germ cells from rabbit fetal gonads // Theriogenology. 1995. - V. 25. - P. 196.

132. Kawase E. Tumor necrosis factor-a (TNF- a) stimulates proliferation of mouse primordial germ cells in culture // Dev. Biol. 1994. - V. 161. - P. 91-95.

133. Koshimizu U. Retinoic acid is a potent growth activator of mouse primordial germ cells in vitro // Dev. Biol. 1995. - V. 168. - P. 683-685.

134. Lavoir M. -C., Basrur P.K., Betteridge K.J. Isolation and identification of bovine fetal germ cells // Mol. Reprod. Dev. 1994. - V. 37. - P. 413-424.

135. Leichthammer F, Brem G. In vitro culture and cry ©preservation of farm animal's primordial germ cells // Theriogenology. 1990. - V. 33 (1). - P. 272.

136. Leichthammer F., Baunack E., Brem G. Behavoir of living primordial germ cells of livestock in vitro // Theriogenology. 1990. - V. 33. - P. 1221-1230.

137. Matsubara N., Takahashi Y., Nishina Y. A receptor tyrosine kinase, Sky, and its ligand Gas 6 are expressed in gonads and support primordial germ cell growth or survival in culture // Dev. Biol. -1996. V. 180. - P. 499-510.

138. McCarrey J.R., Hsu K.C., Eddy E.M. Isolation of viable mouse primordial germ cells by antibody-directed flow sorting // J. Exp. Zool. 1987. - V. 242. - P. 107111.

139. McLaren A. Development of primordial germ cells in the mouse It Andrologia.1992.-V. 24.-P. 243-247.

140. McLaren A. Germ cells and soma. A new look at an old problem. -New Haven, L. 1981.- 140 p.

141. McLaren A. Germ line and soma: interactions during early mouse development // Sem. Dev. Biol. -1994. V. 5. - P. 43-49.

142. McLaren A. Mammalian Chimaeras. Cambridge. - 1976. - 180 p.

143. McLaren A. Primordial germ cells in mice // Biblioteca Anatómica. Basel. -1983a.-V. 24.-P. 56-66.

144. McLaren A. The embiyo // Reproduction in mammals/ Eds C. Austin, R. Short. -Cambridge. 1982. - P. 1-25.

145. Migratory and postmigratory mouse primordial germ cells behave differently in culture / Donovan P. J., Stott D., Caims L.A. et al. // Cell. 1986. - V. 44. - P. 831838.

146. Mossman H. W., Duke K.L. Comparative morphology of the mammalian ovary. -Wisconsin.-1973.-300 p.

147. Ohno S, Gropp A. Embryological bases for germ cell chimerism in mammals // Cytogenetics. 1965. - V. 4. - P. 251-261.

148. Papaioaimou V.E. Ontogeny, pathology, oncology // Int. J. Dev. Biol. 1993. - V. 37. - P. 33-37.

149. Pesce M. Stem cell factor and leukemia inhibitory factor promote primordial germ cells survival by suppressing programmed cell death (apoptosis) // Development.1993.-V. 118.-P. 989-1094.

150. Pesce M., De Felici M. Purification of mouse primordial germ cells by MiniMACS magnetic separation system // Dev. Biol. -1995. V. 170. - P. 722-725.

151. Pesce M., Di Cario A., De Felici M. The c-kit receptor is involved in the adhesion of mouse primordial germ cells to somatic cells in culture // Mech. Dev. 1997. -V. 180.-P. 37-44.

152. Piedrahita J.-A., Anderson G.B., BonDurant R.H. Influence of feeder layer type on the efficiency of isolation of porcine embryo-derived cell lines // Theriogenology. 1990. -V. 34. - P. 856-877.

153. Pituitary adenylate cyclase polypeptide (PACAP) stimulates adenylate cyclase and promotes / Pesce M., Campari R., Ferri G-L. et al. // Development 1996. - V.122 (l).-P. 215-221.

154. Requirement for mast cell growth factor for primordial germ cell survival in culture / Doici S., Williams D., Ernst M.K. et al. // Nature. 1991. - V. 352. - P. 809-811.

155. Resnick J. Long-term proliferation of mouse primordial germ cells in culture // Nature. 1992. - V. 359. - P. 550-551.

156. Robertson E.J. Derivation and maintenance of embryonic stem cell cultures // Methods. Mol. Biol. -1997. V. 75. - P. 173-184.

157. Robertson E.J. Pluripotent stem cells lines as a route into the mouse germ line // Trends. Genet. 1986. - V. 2. - P. 9-13.

158. Robertson E.J. Using embryonic stem cell to introduce mutations into the mouse germ line // Biol. Reprod. -1991. V. 44. - P. 238-245.

159. Role of leukemia inhibitory factor and its receptor in mouse primordial germ cell growth / Cheng L., Gearing D. P., White L.S. et al. // Development. 1994. - V. 120.-P. 3145-3153.

160. Snow M.H.L., Monk M. Emergence and migration of mouse primordial germ cells // In: McLaren A. and Wylie C.C. Current Problems in Germ Cell Differentiation. Cambrige University Press. Cambrige. 1983. - P. 115-135.

161. Stewart CL. Stem cells from primordial germ cells can reenter the germ line // Dev. Biol. 1994. - V. 161. - P. 626-628.

162. Strelchenko N.S. Die Osnabrucker Schwaizbuntzucht. -1997. -V. 3. P. 42.

163. Talbot NC. Alkaline phosphatase staining of pig and sheep epiblast cells in culture // Mol. Reprod. Dev. -1993. V. 40. - P. 344-352.

164. Tam P., Show M. Proliferation and migration of primordial germ cells during compensatory growth in mouse embryos // J. Embryol. Exp. Morphol. 1981. - V. 64. - P. 133-147.

165. The role of interleucin-4 in the regulation of mouse primordial germ cell numbers / Matsubara N„ Takahashi Y., Nishina Y. et al. // Dev. Biol. 1996. - V. 180. - P. 14-21.

166. The role of the mesonephros in the development of mammalian ovary / Zamboni L., Upadhyay S., Bezard J. et al. // Endocrine Physiopathology of the ovary (Eds P. Torrini, G. Reeves, R. Pineda). Amsterdam. 1980. - P. 3-42.

167. Viable offspring derived from fetal and adult mammalian cells / Wilmut I., Schnieke A.E., McWhir J. et al. // Nature. -1997. V. 385. - P. 810-813.

168. Wabik-Sliz B., McLaren A. Culture of mouse primordial germ cells isolated from fetal gonads // Exp. Cell. Res. -1984. V. 154. - P. 530-536.

169. Wakahara M. Primordial germ cell development: is the urodele pattern closer to mammals than anurans? // Int. J. Dev. Biol. 1996. - V. 40. - P. 653-659.

170. Wheeler M.B. Development and validation of swine embryonic stem cells: a review // Reprod. Fertil. Dev. -1994. V. 6. - P. 563-568.

171. Wrobel K.H., Seuss F. Identification and temporospatial distribution of bovin primordial germ cells prior to gonadal sexual differentiation // Anat. Embryol (Berl). 1998. - V. 180. - P. 451-467.

172. Wyle C.C., Stott D., Donovan P.J. Primordial germ cell migration // In: Broder L, (ed.). Developmental Biology: A Comprehensive Synthesis. V. 2. The Cellullar Basis of Morphogenesis. Plenum Press. New York. 1985. - P. 433-448.

173. Wylie C. The biology of primordial germ cells // Eur. Urol. 1993. - V. 23. - P. 62-67.

174. Wylie C., Heasman J. Miration, proliferation and potency of primordial germ cells // Sem. Dev. Biol. 1993. - V. 4. - P. 161-170.