Закономерности образования аберраций хромосом в лимфоцитах человека при нейтронном облучении в различных стадиях митотического цикла тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.01, кандидат биологических наук Богатых, Борис Александрович

• Богатых, Борис Александрович
• кандидат биологических наук
• 1984

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Богатых, Борис Александрович

ВВЕДЕНИЕ.*.

Глава I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Общие представления о митотическом цикле

1.2. Влияние ионизирующего излучения на продвижение клеток в митотическом цикле.

1.3. Качественные и количественные закономерности образования аберраций хромосом в различные периоды митотического цикла.

1.4. Причины изменения радиочувствительности хромосом на протяжении митотического цикла

1.5. Особенности вариации радиочувствительности клеток по циклу при действии плотноионизиругащих излучений

Глава II. МАТЕРИМ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

11.1. Объект исследования и методика культивирования лимфоцитов.

11.2. Приготовление препаратов хромосом

11.3. Анализ аберраций хромосом.

11.4. Радиоавтографический метод.

11.5. Условия облучения и дозиметрия

11.6. Статистическая обработка полученных данных

Глава III. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

111.1. Закономерности изменения процента меченых ме-тафаз и выхода аберраций хромосом в культуре лимфоцитов человека при гамма-облучении Со в дозе 2 Гр в различные периоды митотического цикла при фиксации клеток через 52 ч

111.2. Закономерности изменения процента меченых ме-тафаз и аберраций хромосом в культуре лимфоцитов человека при гамма-облучении 60Со в дозе

2 Гр в различные периоды митотического цикла при фиксации клеток через 60 ч.

111.3. Закономерности возникновения аберраций хромосом в митотическом цикле культуры лимфоцитов человека при воздействии промежуточными (0,35 МэВ) и быстрыми (0,85 МэВ) нейтронами

-3стр

111.3.1. Количественные закономерности выхода аберраций хромосом при воздействии промежуточными и быстрыми нейтронами в различные периоды митотическо-f го цикла при фиксации клеток через 52 ч.

111.3.2. Количественные закономерности выхода аберраций хромосом при воздействии промежуточными и быстрыми нейтронами в различные периоды митотического цикла при фиксации клеток через 60 ч.

111.3.3. Качественные закономерности возникновения аберраций хромосом в митотическом цикле под влиянием промежуточных и быстрых нейтронов при двух сроках фиксации клеток: 52 и 60 ч.

Глава 1У. ОБСУВДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

ШВ0ДЕ1.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Закономерности образования аберраций хромосом в лимфоцитах человека при нейтронном облучении в различных стадиях митотического цикла»

Актуальность проблемы.

Изучение природы радиационного поражения хромосом клеток человека имеет не только важное теоретическое, но и большое практическое значение, поскольку структурным повреждениям хромосом принадлежит ведущая роль в развитии лучевых повреждений и постлучевой гибели клеток. Выяснение механизмов возникновения аберраций хромосом невозможно без их исследования в различные периоды митотичес-кого цикла, использования разных видов излучения и др.

В последнее время проявляется повышенный интерес к биологическому действию нейтронов, что обусловлено, с одной стороны, необходимостью научного обоснования нормативов радиационной безопасности, оценки риска облучения персонала и населения, разработки методов защиты от нейтронных источников, а с другой - перспективой их использования в медицине, где лечение от злокачественных новообразований нейтронами в ряде случаев показало существенно лучший терапевтический эффект по сравнению с обычной гамма-терапией. Это требует более детального изучения их биологической эффективности, расшифровки процессов поражения и механизмов репарации при их действии, исследования биологических эффектов нейтронов в зависимости от величины и мощности дозы, их энергии, стадии митотического цикла и других факторов.

Если зависимость выхода структурных повреждений хромосом лимфоцитов человека от дозы нейтронного излучения изучена относительно подробно, то закономерности образования аберраций хромосом в зависимости от энергии нейтронов, стадии митотического цикла остаются ещё слабо изученными.

Цель и основные задачи исследования.

В настоящее время известны лишь единичные работы, выполненные на культуре лимфоцитов человека, в которых изучалось воздействие нейтронов на выход аберраций хромосом в зависимости от стадии митоти-ческого цикла /Саггапо , 1975; Н.В.Летов и соавт., 1981; Э.А.Сере-денко, 1983; А.В.Севанькаев и соавт., 1979а/. Основным недостатком первых трех работ являлось малое количество исследуемых точек (34) на протяжении цикла. В последней же работе /А.В.Севанькаев и соавт., 1979а/, в которой хотя и исследовалось большое количество временных точек (II) на протяжении цикла, в качестве источника пер нейтронов использовался Cf , включающий в себя большую (до 40%) примесь гамма-излучения.

Учитывая недостаток экспериментальных данных по вышеуказанной проблеме, целью настоящего исследования являлось подробное изучение количественных и качественных закономерностей образования аберраций хромосом в лимфоцитах человека при облучении промежуточными (0,35 МэВ) и быстрыми (0,85 МэВ) нейтронами в различных стадиях митотического цикла. Для сравнения проведены аналогичные опыты с гамма-излучением ^Со в близкой по эффективности дозе. Поставленыаяцель £П£еделяласледутациезадачи:

1. Сопоставить выход аберраций хромосом в различные периоды митотического цикла при облучении культуры лимфоцитов человека гамма-излучением ^Со, промежуточными (0,35 МэВ) и быстрыми (0,85 МэВ) нейтронами.

2. Исследовать влияние энергии нейтронов на количественный выход и спектр аберраций хромосом.

3. Для оценки возможной задержки деления клеток и гетерогенности популяции лимфоцитов по их радиочувствительности изучить кинетику структурных повреждений хромосом в течение цикла при воздействии обоими видами излучения при двух сроках фиксации клеток: через 52 и 60 ч от начала культивирования.

Научная новизна.

Впервые получены данные о лучевом повреждении хромосом клеток человека в различные периоды митотического цикла при облучении промежуточными и быстрыми нейтронами. Биологическая эффективность нейтронов зависит от стадии митотического цикла и как и в случае с редкоионизирующим излучением, наиболее радиорезистентным периодом при их действии является стадия При фиксации клеток через 60 ч, по сравнению с фиксацией через 52 ч, наибольший выход аберраций при действии нейтронов обеих энергий наблюдался на границе стадий, причем спектр аберраций хромосом зависел от энергии нейтронов. В отличие от гамма-излучения Со, при воздействии нейтронов обеих энергий, независимо от срока фиксации клеток, наблюдалось отклонение распределения аберраций по клеткам от распределения Пуассона.

Научно-практическая ценность работы.

Полученные данные представляют как теоретический интерес - для понимания первичных механизмов биологического действия различных видов радиации, так и практический - для радиобиологического обоснования применения плотноионизирующих излучений в лучевой терапии злокачественных опухолей, научного обоснования предельно допустимых уровней облучения излучениями с различной ЛПЭ, разработки защитных мероприятий от данных видов излучения.

Результаты исследований используются в работе, проводимой в лаборатории экспериментальной лучевой терапии Киевского научно-исследовательского рентгено-радиологического института МЗ УССР.

Заключение диссертации по теме «Радиобиология», Богатых, Борис Александрович

ВЫВОДЫ

1. Аналогично гамма-облучению ^Со (доза 2,0 Гр), при облучении быстрыми (0,85 МэВ) и промежуточными (0,35 МэВ) нейтронами (в изоэффективных дозах 1,0 и 0,5 Гр, соответственно) выход аберраций хромосом в культуре лимфоцитов человека зависит от стадии митотического цикла: наибольшая радиорезистентность клеток к обоим типам излучения проявляется при облучении в стадии S.

2. Частота аберраций хромосом в течение митотического цикла при гамма- и нейтронном облучении зависит от срока фиксации клеток: в период вступления клеток в стадиюS и на всем ее протяжении частота аберраций в 2-3 раза ниже при фиксации через 52 ч, чем через 60 ч.

3. Частота аберраций хромосом в течение митотического цикла зависит также от плотности ионизации излучения: при облучении гамма-квантами ^Со, быстрыми и промежуточными нейтронами на границе Gj/ s -стадий цикла частота аберраций хромосом по сравнению со стадией Gj при фиксации через 60 ч соответственно была выше в 1,3; 1,5 и 2,2 раза.

4. В отличие от гамма-облучения Со, при нейтронном облучении спектр аберраций хромосом зависит как от срока фиксации клеток, так и от энергии нейтронов: при фиксации через 52 ч он был идентичен на протяжении всего митотического цикла при воздействии нейтронов обеих энергий, а при фиксации через 60 ч наблюдаются существенные различия в их спектре на границе Gj/S -стадий цикла: быстрые нейтроны индуцируют, преимущественно, аберрации необменного типа, а промежуточные - обменного типа.

5. При гамма-облучении ^^Со распределение аберраций хромосом по клеткам соответствовало распределению Пуассона, при воздействии же нейтронов на протяжении всего митотического цикла наблюдается отклонение в распределении аберраций по клеткам от распределения Пуассона.

-III

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Богатых, Борис Александрович, 1984 год

1. Айрапетян Л.Г., Севанькаев А.В. Влияние кофеина на частоту аберраций хромосом, индуцированных радиацией в различных стадиях клеточного цикла. Цитология и генетика, 1977, т.II, №5, с.468-472.

2. Акифьев А.П., Макаров В.Б., Полуновский В.А., Юрченко В.В. -Исследование химического мутагенеза в перевиваемой культуре L -клеток. Генетика, 1965, т.1, № 3, с.19-26.

3. Аксенович Т.И. Радиочувствительность хромосом в S -периоде (на примере регенерирующей печени крыс). Автореф. Дис. канд. би-ол. наук. - Новосибирск, 1976. - 16 с.

4. Аксенович Т.И., Полищук A.M. Изменение радиочувствительности хромосом в ходе s -периода в клетках регенерирующей печени крыс. Генетика, 1977, т.13, № 7, с.1194-1201.

5. Арсеньева М.А., Троицкий Н.А., Головкина А.В., Елисова Т.В., Соколов Н.Н. Специфика генетического эффекта нейтронов промежуточных энергий при облучении лимфоцитов периферической крови человека ( in vitro ). д0Кл. АН СССР, 1972, т.204, № 5,с.I243-1245.

6. Балдычев А.С., Малиновский О.В., Постников Л.Н., Шейнина Т.А. Чувствительность клеток HeLa к нейтронному и рентгеновскому облучению в зависимости от положения клеток в генерационном цикле. Радиобиология, 1973, т.13, вып.2, с.206-210.

7. Беляева Е.С., Губенко И.С. Интенсивность включения Н-тимидина на различных этапах синтетического периода митотического цикла. Цитология, 1970, т.12, № 4, с.473-482.

8. Бочков Н.П., Демин Ю.С., Лучник Н.В. Классификация и методы учета хромосомных аберраций в соматических клетках. Генетика, 1972, т.8, № 5, с.133-141.

9. Бродский В.Я., Урываева И.В. Клеточная полиплоидия. Пролиферация и дифференцировка. М.: Наука, 1981,- 259 с.

10. Гильяно Н.Я., Малиновский О.В. Радиочувствительность хромосом клеток регенерирующей печени крыс в различных стадиях митотического цикла. Радиоцитология, ЛИЯФ, Ленинград, 1976, т.75, с.18.

11. Гольдман И.Л., Левина Л.Я. Анализ хромосом человека в лейкоцитах периферической крови. Бюлл. экспер. биол. и медицины, 1964, т.II, с.103-106.

12. Джемилев З.А. Радиочувствительность хромосом лейкоцитов периферической крови человека в разных фазах митотического цикла. Генетика, 1967, т.З, № 5, с.67-78.

13. Дубинин Н.П. О некоторых узловых вопросах современной теории мутаций. Генетика, 1966, т.2, № 7, с.3-20.

14. Дубинин Н.П., Мокеева Н.П. Эффект действия быстрых нейтронов на ядро в разных фазах цикла клеток человека в культуре ткани. Радиобиология, 1964, т.4, вып.4, с.554-562.

15. Дубинин Н.П., Тарасов В.А. Молекулярные механизмы образования хромосомных аберраций. В сб.: Успехи совр. генетики, М.: Наука, 1979, вып.2, с.113-146.

16. Дубинина Л.Г. Лейкоциты крови человека тест-система для оценки мутагенов среды. - М.: Наука, 1977,- 152 с.

17. Епифанова О.И. Критические периоды митотического цикла и экспериментальные подходы к их изучению. Цитология, 1965, т.7, № I, с.5-23.

18. Епифанова О.И. 0 периодах митотического цикла и этапах повышенной чувствительности к воздействиям. Цитология, 1967, т.9. J? 9, с.1033-1056.

19. Епифанова О.И. Метаболизм пролиферирующих и покоящихся клеток.- Цитология, 1979, т.21, № 12, с.1379-1396.

20. Епифанова О.И., Терских В.В. Периоды покоя и активной пролиферации в жизненном цикле клетки. Общая биология, 1968, т.29, № 4, с.392-402.

21. Иванов И.И. 0 возможной причине высокой радиочувствительности клеток (высокой радиочувствительности синтеза ДНК) в периоде S -фазы. Докл. АН СССР, 1968, т.182, № 4, с.963-964.

22. Казнадзе В.В., Протопопова Е.М. Зависимость частоты образования хроматидных перестроек от дозы при рентгеновском облучении клеток проростков Crepis capillaris в S и б^-стадиях митотического цикла. Генетика, 1974, т.10, № 10, с.58-70.

23. Калашников Н.П., Лысцов В.Н., Рязанов М.И. Относительная вероятность двойных и одиночных разрывов в молекуле ДНК в зависимости от качества излучения. В сб.: Вопросы микродоз. М.: Атомиздат, 1974, вып.2, с.48-50.

24. Капчигашев С.П., Обатуров Г.М., Тятте Э.Г., Аристархов Н.Н., Ефимов И.А., Зейналов Э.И., Шалин В.А. Исследование поглощенных доз гамма-нейтронного излучения из каналов реактора БР-10.- Мед. радиология, 1977, т.22, № 10, с.64-67.

25. Кетлинский С.А. Кейлоны как факторы тканевого гомеостаза.- Архив анат., гистол. и эмбриологии, 1980, т.78, № I, с.29-49.

26. Корогодин В.И. Некоторый закономерности пострадиационных изменений покоящихся дрожжевых клеток. Биофизика, 1958, т.З, вып.6, с.703-710.

27. Корогодин В.И., Малиновский О.В., Порядкова Н.А., Изможеров Н.А. К вопросу об обратимости различных форм радиационного поражения у диплоидных дрожжевых клеток. Цитология, 1959, т.1, № 3, с.306-315.

28. Ле Суан Ту, Смирнова И.Б., Янушевская М.И. Изучение радиорезистентности клеток асцитной карциномы Эрлиха. на стадиях 6j и S.- Радиобиология, 1976, т.16, № 3, с.373-375.

29. Летов В.Н., Середенко Э.А., Чевлев С.М., Ставшая С.В. Цитогенетические аспекты применения нейтронов в лучевой терапии. Сообщ.2. Биологический эффект быстрых нейтронов. Радиобиология, 1981, т.21, № 5, с.752-755.

30. Лучник А.Н. Обоснование бинемной модели эукариотической хромосомы. Молекул, биология, 1982, т.16, № 2, с.258-270.

31. Лучник Н.В. Природа первичных цитогенетических лучевых повреждений и каталитическая активность хромосом. Докл. АН СССР, 1959, т.129, № 5, с.1168-1171.

32. Лучник Н.В. Об одном из возможных применений теории вероятностей в радиационной цитогенетике. В кн.: Применение математических методов в биологии, ЛГУ, 1963, с.177-182.

33. Лучник Н.В. 0 некоторых дискуссионных вопросах в проблеме пострадиационного восстановления хромосом. Радиобиология, 1968, т.8, вып. 3, с.408-411.

34. Лучник Н.В. Образование аберраций хромосом при облучении клеток на разных стадиях митотического цикла. Радиобиология,1973, т.13, № 2, с.163-177.

35. Лучник Н.В., Севанькаев А.В., Насонова В.А. Влияние гамма-облучения на хромосомы человека. У1. Зависимость эффекта- фракционирования дозы от стадии клеточного цикла. Генетика, 1973, т.9, № 8, с.134-141.

36. Лучник Н.В., Фесенко Э.В., Овчинникова В.Г., Морозов К.Н. Аберрации хромосом, вызываемые облучением разных периодов интерфазы клеток проростков Crepis Capillaris L . Генетика,1974, т.10, № 8, с.47-57.

37. Лучник Н.В., Царапкин Л.С. Об обратимости цитогенетических лучевых повреждений. Докл. АН СССР, 1959, т.124, № I, с.213-215.

38. Митрофанов Ю.А. Радиочувствительность и особенности мутабиль-ности фибробластов эмбриональных тканей мышей, облученных вразных фазах митотического цикла. Генетика., 1966, т.2, № 4, с.31-37.

39. Митрофанов Ю.А. Радиочувствительность клеток в различных фазах митотического цикла. В сб.: Успехи совр. генетики, 1969, вып. 2, с.125-160.

40. Митрофанов Ю.А., Олимпиенко Г.С. Индуцированный мутационный процесс эукариот. М.: Наука, 1980, - 246 с.

41. Насонова В.А. Реакция хромосом лимфоцитов человека на фракционированное облучение в различных стадиях митотического цикла. Автореф. канд. биол. наук, - Обнинск, 1979, - 22 с.

42. Насонова В.А., Севанькаев А.В. Эффект фракционирования дозыв культуре лимфоцитов человека при облучении в предсинтетичес-кой стадии. Тез. докл. научн. конф. молодых ученых и специалистов, Обнинск, 1974, с.119.

43. Насонова В.А., Севанькаев А.В., Лучник Н.В. Эффект фракционирования дозы на разных стадиях митотического цикла клеток человека. В кн.: Радиочувствительность и лучевая терапия опухолей: Тез. докл. Всесоюз. конф. ч. 2, Ленинград, 1976, с.7-8.

44. Панкова. Н.В., Соколов Н.Н. Выявление полухроматид в структурной организации хромосом в лимфоцитах лягушки, обработанных раствором мочевины. Генетика, 1974, т.10, № 3, с.35-39.

45. Попов А.С., Михайлова А.А., Соболева Г.Б. Задержка митоза в культуре клеток млекопитающих при действии d и у -лучей. Радиобиология, 1970, т.10, № 4, с.512-517.

46. Порядкова Н.А. Динамика прохождения лимфоцитами человека двух первых митотических циклов при облучении их на разных стадиях.- Радиобиология, 1981, т.21, № 5, с.712-715.

47. Прокофьева-Бельговская А.А. Репликационная организация хромосом. Цитология, 1971, т.13, № 6, с.679-692.

48. Свердлов А.Г. Биологическое действие нейтронов и химическая защита. Л.: Наука, 1974, 221 с.

49. Севанькаев А.В. Влияние гамма-облучения на хромосомы человека. Сообщ.У. Радиочувствительность хромосом лейкоцитов периферической крови в течение первого клеточного цикла. Генетика, 1971, т.7, № 4, с.129-137.

50. Севанькаев А.В. Закономерности возникновения аберраций хромосом в митотическом цикле клеток человека при гамма- и нейтронном облучении. Автореф. докт. биол. наук, Обнинск, 1982,- 36 с.

51. Севанькаев А.В., Айрапетян Л.Г. Пострадиационное действие кофеина и актиномицина Д на частоту хромосомных аберраций в культуре лимфоцитов человека при облучении в различных стадиях клеточного цикла. Мед. радиология, 1977, т.22, № 2, с.31-32.

52. Севанькаев А.В., Козлов В.М. Митотическая активность лимфоцитов при облучении в различных стадиях митотического цикла.- Радиобиология, 1974, т.14, вып.1, с.117-119.

53. Севанькаев А.В., Козлов В.М., Дубровина В.М., Кузьмина Е.Г.,рср

54. Иванов В.Н. Хромосомные аберрации, вызываемые излучением ^ ^Cf в различных стадиях митотического цикла культуры лимфоцитов человека. Мед. радиология, 1979, т.24, № 4, с.53-58.

55. Севанькаев А.В., Лучник Н.В. Влияние гамма-облучения на хромосомы человека. Сообщ. УН. Связь между образованием аберраций хроматидного типа и клеточным циклом. Генетика, 1973, т.9,1. И, с.165-171.

56. Севанькаев А.В., Обатуров Г.М., Тятте Э.Г., Козлов В.М., Кузьмина Е.Г. Хромосомные аберрации в лимфоцитах периферической крови человека индуцированнные моноэнергетическими нейтронами разных энергий. Радиобиология, 1980, т.20, вып.2, с.200-204.

57. Середенко Э.А. Действие гамма-лучей и быстрых нейтронов на хромосомы человека в зависимости от стадии митотического цикла и пострадиационной гипертермии. Автореф. Дис. канд. биол. наук. - Киев, 1983, - 24 с.

58. Сидоров Б.Н., Соколов Н.Н., Андреев B.C. Мутагенный эффект этиленимина в ряде клеточных поколений. Генетика, 1965, ft Л, № I, с.112-122.

59. Стржижевский А.Д., Мастрюкова В.М. Количественный анализ действия нейтронов деления на клетки эпителиальных тканей млекопитающих. Информ. бюлл. Научн. совета по пробл. радиобиол. АН СССР, 1973, вып.15, с.39-42.

60. Тарасов В.А., Сафонова Г.М., Сидоров В.П., Мясова З.Н. Сенсибилизирующий эффект 5-фтордезоксиуридина при гамма-облучении в предсинтетическом периоде клеточного цикла семян Crepis capillaris L . Генетика, 1976, т.12, № 3, с.44-49.

61. Тимофеев-Ресовский Н.В., Иванов В.И., Корогодин В.И. Применение принципа попадания в радиобиологии. М.: Атомиздат, 1968, - 228 с.

62. Терских В.В. Продолжительность митоза и митотического цикла в культуре амниотических клеток. Цитология, 1963, т.6, вып.З, с.352.

63. Бейли Н. Статистические методы в биологии. М., 1962, 260 с.

64. Вольф Ш. Некоторые пострадиационные явления, влияющие на возникновение хромосомных аберраций. В кн.: Восстановление клеток от повреждений. М.: Атомиздат, 1963, с.228-246.

65. Кимбол Р.Ф. Пострадиационные процессы при индукции рецессивных леталей ионизирующим излучением. В кн.: Восстановление клеток от повреждений. - М.: Атомиздат, 1963, с.247-258.

66. Ли Д.Э. Действие радиации на живые клетки. М.: Атомиздат, 1963, - 288 с.

67. Окада Ш. Радиационная биохимия клетки. М.: Мир, 1974,- 407 с.

68. Тейлор Д.Г. Молекулярная генетика. М.: Мир, 1964, - 78 с.

69. Циммер К.Г. Проблемы количественной радиобиологии. М.: Атомиздат, 1962, 100 с.

70. Урбах В.Ю. Математическая статистика. М.: Наука, 1963,86. Akaboshi М. Effect of thermal neutrons on living cells andbiological molecules. Radiat. Res., 1980, v.21, No 1, p.4-11.

71. Al-Bader A.A., Orengo A., Rao P.N. Gg-phase-specific proteins of HeLa cells. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1978, v.75, p.6064-6068.

72. Bauer H. R8ntgenauslosung von Chromosomenmutation bei Drosophi-la melanogaster. '2. Die Haufigkeit des primaren Bruchereig-misses nach Untersuchumgen am Ring-X-Chromosom. Chromosoma, 1942, v.2, p.402-458.

73. Beek B. X-ray-induced cell cycle delay in human leukocytes; differential respons within the first post-stimulation G^-phase. Int. J. Radiat. Biol., 1982, v.41, No 2, p.227-230.

74. Beek В., Obe G. The human leykocyte test sistem. 10. Higher sensitivity to X-irradiation in the GQ-stage of the cell cycle of early as compared to late replicating cells. Human Genet., 1976, v.35, No 1, p.57-70.

75. Bender M.A., Brewen J.G. Factors influencing chromosome aberration yields in the human peripheral leukocyte system. Mutation Res., 1969, v.8, Wo 2, p.383.

76. Bender M.A., Gooch P.G. Types and rates of X-ray-induced chromosome aberrations in human blood irradiated in vitro. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1962, v.48, Ho 4, p.522-532.

77. Bender M.A., Griggs H.G., Bedford J.S. Mechanisms of chromosomal aberration production chemical and ionizing radiation.- Mutation Res., 1974, v.23, No 2, p.197-212.

78. Bender M.A., Prescott D.M. ША synthesis and mitosis in cultures of human peripheral leukocytes. Exp. Cell Res., 1962,v.27, p.221-229.

79. Berry R.J. Modification of neutron effects upon cells by repair, and by physical and chemical means. In; Biol. Eff. Neutron Irradiat. Proc. Sympl. Neuherberg (Munich), 1973.-Vienna, 1974, p.257-269.

80. Berry R.J., Bance D.A., Barnes D.W.H., Cox R., Goodhead D.T., Sansom J.M., Thacker J. High energy fast neutrons from the Harwell energy cuclotron. 2. Biologic studies in mammalian sustems. Amer. J. Roentgenol., 1977, v.129, No 4, p.717-724.

81. Bichop C.J. Differential X-rau Sensitivity of Tradescantia chromosomes during the Nitotic Cycle. Genetics, 1950, v.35, p.175-177.

82. Bond V.P., Cronkite E.P., Fliender T.M., Schork P.K. Deoxyribonucleic acid synthesizing cells in peripheral blood of normal human beings. Science, 1958, v.128, No 3317, p.202-203.

83. Bootsma D. Changes induced in the first post-irradiation generation cycle of human cells studied by double labeling. Exp. Cell Res., 1965, v.38, p.429-431.

84. Borun T.W., Stein G.S. The synthesis of acidic chromosomal proteins during the cell cycle of HeLa S 3 cells. 2. The kinetics of residual protein synthesis and transport. J. Cell Biol., 1972, v.52, Ho 2, p.308-315.

85. Brewen J.G. Studies on the freguencies of chromatid aberrations induced by X-rays at different times of the cell cycle of Vicia faba. Genetics, 1964, v.50, p.101-107.

86. Brewen J.G. Cell-cycle and radiosensitivity of the chromosomes of human leukocytes. Int. J. Radiat. Biol., 1965, v.9, No 4, p.391-397.

87. Brewen J.G., Peacock W.J. Restricted rejoining of chromosomal subunits in aberration formations a test for subunit dissimilarity. Proc. Natl. Acad. Sci., 1969, v.62, No 2, p.389-394.

88. Broerse J.J., Barendsen G.W., Yan Kersen G.R. Survival of cultured human cells after irradiation with fast neutrons of different energies in hypoxic and oxygenated conditions.- Int. J. Radiat. Biol., 1967, v.13, No 4, p.559-572.

89. Bucton K.E., Pike M.C. Time in culture. An important variable in studying in vivo radiation-induced chromosome damage in man. Int. J. Radiat. Biol., 1964, v.8, No 4, p.439-445.

90. Buul P.P.W., Natarajan A.T. Chromosomal radiosensitivity of human leukocytes in relation to sampling time. Mutat. Res., 1980, v.70, No 1, p.61-69.

91. Carlson J.G. X-ray-induced Prophase Reverion of Chick Fibroblasts in vitro. Radiat. Res., 1967, v.31, No 3, p.573-574.

92. Carrano A.V. Induction of chromosomal aberration in human lymphocytes by X-rays and fission neutrons: dependence of cell cycle ctage. Radiat. Res., 1975, v.63, No 3, p.403-421.

93. Constantin M.J., Conger B.V. Comparative mutagenicity of beta, fission neutron and gamma-radiation in barley. Radiat.

94. Res., 1974, v.59, Ho 1 p.154.

95. Crouse H.V. X-ray Breakage of Lily Chromosomes at First Meiotic Metaphase. Science, 1954, v.119, Ho 3094, p.485-487.

96. Davies D.R. Patterns and rates of recovery in synchronous populations at Algai cells exposed to gamma-radiation. Ra-diat. Res., 1966, v.29. No 2, p.222-235.

97. Dennis J.A., Boot S.J. Dependence of the Oxygen Enhancement Ratio on Neutron Energy. Nature, 1967, v.215, Ho 5098,p.310-311.

98. Dewey W.C., Humphrey R.M. Relative radiosensitivity of different phases in the life cycle of L-P 59 mouse fibroblasts and ascite tumor cells. Radiat. Res., 1962, v.16, Ho 4,p.503-530.

99. Dudin G., Веек В., Obe G. The human leukocyte test-sistem. 8. DNA synthesis and mitoses in 3-day cultures stimulated with pokeweed mitogen. Human Genet., 1976, v.32, No 3, p.323-327.

100. Edvards A.A., Lloyd D.C., Purrott R.J. Radiation induced chromosome aberrations and the Poisson distribution. Rad. and Environm. Biophys., 1979, v.16. No 2, p.89-100.

101. Evans H.J., Scott D. Influence of DM synthesis on the production of chromatid aberrations by X-rays and maleic hydro-side in Vicia faba. Genetics, 1964, v.49, No 1, p.17-38.

102. Ferle-Vidovic A., Petrovic D., Vidic Z., Osmak M., Slaus I., Kadija K. Biological properties of the neutrons produced by the JKB cyclotronej chemical protection. Radiat. and Environ. Biophys., 1980, v.17, No 4, p.294.

103. Garsia-Benites C., Wolff S. On the increase of sites for chromosome exchange formation after chromosome duplication.- Science, 1962, v.135, No 3502, p.438-439.

104. Geard C.R. Initial Changes in Cell Cycle Progression of Chinese Hamster V-79 Cells Induced by High-LET Charged Particles. -Radiat. Res., 1980, v.83, No 6, p.696-709.

105. Giulotto E., Mottura A., Giorgi R.L., de Carli, Nuzzo P. Frequencies of SCE in relation to cell kinetics in lymphocytes cultures. Mutation Res., 1980, v.70, No 3, p.343-350.

106. Goldstein L.S., Phyllips T.L., Ross G.Y. Biological effects of accelerated heavy ions. 2. Fractionated irradiation of intestinal crypt cells. Radiat. Res., 1981, v.86, No 3, p.542-558.

107. Gooch P.C., Bender M.A., Randolph M.L. Chromosome aberrations induced in human somatic cells by neutron. In: Biological effects of neutron and proton irradiations. Vienna, IAEA, 1964, p.325-341.

108. Gragg R.L., Humphrey R,M., Meyn R.E. The response of Chinese hamster ovary cells to fast neutron radiotherapy beams.

109. Relative biological effectiveness and oxygen enhancementratio. Radiat. Res., 1976, v.65, No 1, p.71-82.

110. Griffiths T.D., Tolmach L.J. Correlation between deficient ША synthesis and cell killing in X-irradiated HeLa S3 cells. J. Biophys., 1975, v.15, No 2, Part 2, p.197.

111. Hall E.J. The dependence of RBE and OER on neutron energy for damage to mammalian cells and plant systems. Radiat. Res., 1974, v.59, No 1, p.5-6.

112. Hall E.J., Novak J.K., Kellerer A.M., Rossi H.H., Marino L.J., Goodman L.J. RBE as a function of neutron energy. 1. Experimental observations. Radiat. Res., 1975, v.64, No 2, p.245-255.

113. Hall E.J., Rossi H.H. Cellular studies with cyclotron produced neutrons. Radiat. Res., 1975, v.62, No 3, p.554-556.

114. Hall E.J., Rossi H.H., Kellerer A.M., Goodman L.J., Marino S. Radiobiological studies with monoenergetic neutrons. -Radiat. Res., 1973, v.54, No 3, p.431-443.

115. Hamkalo B.A., Rattner J.B. The Structure of a Mesokaryote Chromosome. Chromosoma, 1977, v.60, p.39-47.

116. Harrington H. Effect of irradiation on cell division and nucleic acid synthesis in strain U-12 fibroblasts. Biochim. biophys. acta, 1960, v.41, No 3, p.461-469.

117. Harrington H. The effect of X-irradiation on the progress of strain U-12 fibroblasts through the mitotic cycle. -Ann. N. Y. Acad. Sci., 1961, v.95, art. 2, p.901-910.

118. Hatcher N.H., Hook E.B. Early in vitro of -PNA stimulatedcord blood lymphocytes: implications for study of chromosome breakage. Amer. J. Human Genet., 1976, v.28, No 3, p.290-293.

119. Heddle J.A., Evans H.J., Scott D. Sampling time and the complexity of the human leukocyte culture system. In: Human Radiation Cytogenetics. Evans H.J., Court Borwn W.M., McLean A.S., (Eds). Amsterdam, Horth-Hollalnd, 1967, p.6-20.

120. Heddle J.A., Trosco J.E. Is the transition from chromosome chromatid aberrations the result of the formation of single-strendid ША? Exp. Cell Res., 1966, v.42, No 1, p.171-175.

121. Herreros В., liannelli F. Spatial distribution of old and new chromatid sub-units and frequence of chromatid exchanges in induced human lymphocyte endoreduplications. Nature, 1967, v.216, p.650.

122. Higgins P.D., De Luca P.M., Pearson D.W., Gould M.N. Measurement of OER and RBE for mono-energetic 2,5 and 14,3 MeV neutrons. Int. J. Radiat. Biol., 1981, v.40, No 3, p.313-319.32

123. Howard A., Pelc S.R. Nuclear incorporation of ^ P as demonstrated by autoradiographs. Exp. Cell Res., 1951, v.2, No 1, p.178-181.

124. Howard A., Pelc S.R. Synthesis of DNA in normal and irradiated cells and its relation to chromosome breakage. Heredity, 1953, v.6, Suppl., p.261-273.

125. Howard-Flanders P., Boyce R.P. DNA repair and genetic recombinations: studies on mutants of Escherichia coli devective in these processes. Radiat. Res., 1966, v.6, Suppl., p.156-184.

126. Kal H.B., Barendsen G.W., Broerse J.J. RBE values of 15 MeV neutrons applied at low dose rates. Eur. J. Cancer, 1974, v.10, No 5, p.293-296.

127. Kampf G., Tolkendorf E., Regel K., Abel H. Cell inactivation and ША strand break rates after irradiation with X-rays and fast neutrons. Stud, biophys., 1977, v.62, No 1, p.17-24.

128. Kampf G., Tolkendorf E. Relations between DNA double-strand breaks chromosome breaks, and cell survival after the influence of radiations of different LET. Stud, biophys., 1979, v.76, No 1, p.53-54.

129. Kolin-Gerresheim J., Bauchinger M. Dependence of the frequency of harlejuin-stained cells on BrdU concentration in human lymphocyte. Mutation Res., 1981, v.91, No 2, p.251-254.

130. La Cour L.F., Pelc S.R. Effect of colchicine on the utilization of labelled thymidine during chromosomal reproduction. Nature, 1958, v.182, p.506-5o8.32

131. Lajtha L.G., Oliver R., Ellis P. Incorporation ^ P and ade14nine С into DNA by human bone marrow cells in vitro. -Brit. J. Cancer, 1954, v.8, No 2, p.367-379.

132. Lajtha L.G., Oliver R., Kumatori Т., Ellis F. On the mechanism of rsdiation effect on DNA synthesis. Radiat. Res., 1958, v.8, No 1, p.1-16.

133. Leenhouts H.P., Chadwick K.H. Relation induced DNA double-strand breaks and chromosome aberration. Theoret. and Appl. Genetics, 1974, v.44, No 4, p.167-172.

134. Lehuert S.M., Okada S. Effect of irradiation on DNA-synthe-sis in the regeneration livers of rats. Int. J. Radiat. Biol., 1966, v.10, No 6, p.601-608.

135. Leonard A., Decat G. Relation between cell cycle and yield of aberrations observed in irradiated human lymphocytes. -Canad. J. Genet, and Cytol., 1979, v.21, No 4, p.473-478.

136. Lesher S., Pry R.J., Kohn J. Age and generation time of the mouse duodenal epithelial cell. Exp. Cell Res., 1961, v.24, No 2, p.334.

137. Liskay R.E., Leonard K.E., Prescott D.M. Different Chinese hamster cell lines express a G^-period for different reasons. Somat. Cell Genet., 1979, v.5, No 5, p.615-623.

138. Livolant P., Bouligand Y. Double Helical Arrangement of Spread Dinoflagellate Chromosomes. Chromosoma, 1980, v.80,p.97-118.

139. Lloyd D.C., Purrott R.J., Dolphin G.W., Edvards A.A. Chromosome aberrations induced in human lymphocytes by neutron irradiation. Int. J. Radiat. Biol., 1976, v.29, No 2, p.169-182.

140. Luchnik N.V. The chromosome cycle of DNA. Stud, biophysics, 1972, v.27, No 2, p.157-164.

141. Luchnik N.V., Porjadkova N.A. Isolabelling is a Radiation-Induced Phenomenon. Chromosoma, 1977, v.63, p.11-20.

142. Ma Т.Н., Wolff S. Par-rad-induced mitotic delay and the apparent increase of X-ray induced chromatid aberrations in Tradescantia microapores. -Radiat. Botan., 1965, v.5, p.293-298.

143. Мак S., Till J.E. The effects of X-rays on the progress of L-cells through the cell cycle. Radiat. Res., 1963, v.20,1. No 4, p.600-618.

144. Malaise E,P., Guichard M., Guehlette I., Octave-Prignot M., Wambersie A. Intercomparison of the biological properties of d(50)-Be and P(75)-Be neutrons. Int. J. Radiat. Biol., 1980, v.38, No 1, p.110-114.

145. Marchak A. Effect of fast neutrons on chromosomes in mitosis. Proc. Sec. Exper. Biol. Med., 1939, v.41, p.176-180.

146. Mather K., Stone L.H.A. Effects of X rays on chromosomes. -Genetics, 1933, v.28, No 1, p.1-24.

147. Merkle K., Sohmidt W. Bestimmung der relativen biologischen Wirksamkeit schneller Neutronen anf der Grundlage der Mito-shemmunig von Ehrlich-Aszites-Tumorzellen. Rept. Staatl Amtes Atomsicheit und Strahlenschutz DDR, 1977, No 222, p.3-10.

148. Miljutina N.A., Kogan E.M., Nekhljudova M.A. Pulsed pattern of proliferation in liver parenchyma of young mice. Natural synchronization of DNA-synthesizing hepatocytes. Virchow,s Arch. Abt. В., 1978, v.29, p.179-190.

149. Moorhead P.S., Nowell P.O., Nellman ¥/. J., Battips D.M., Hungerford D.A. Chromosome Preparations of Leukocytes Culturec from Human Peripheral Blood. Exp. Cell Res., 1960, v.20,

150. Obe G., Веек В., Dudin G. Human Leukocyte test system. 5. DNA synthesis and mitoses in PHA-stimulated 3-day cultures. -Humangenetik, 1975, v.28, p.295-302.

151. Painter R.B., Robertson J.S. Effect of irradiation and theory of role of mitotic delay on the time course of labeling of HeLa S3 cells with tritiated thymidine. Radiat. Res., 1959, v.11, No 2, p.206-217.

152. Peacock W.J., Wolff S., Lindskey D.L. Continuity of chromosome subunits. Chromosome Today, 1973, v.4, No 1, p.85-100.

153. Prempree Т., Merz T. Radiosensitivity and repair times the repair time of chromosome breaks produced during the different ctage of the cell cycle. Mutation Res., 1969, v.7, No 3, p.441-451.

154. Prescott D.M. Reproduction of eucaryotic cells. N. Y. L.: Acad. Press, 1976.

155. Puck T.T., Steffen J. Life cycle analysis of mammalian cells. 1. A method for localizing metabolic events the life cycle,and its application to the action of colcemide and sublethal doses of X-irradiation. J. Biophys., 1963, v.3, No 5, p.379-397.

156. Quastler H. The analysis of cell population kinetics. In: Cell proliferation. Oxford, Blackwell Scientific Public., 1963, p.18-34.

157. Radharkrishna R.C., Chakravarti J.M. Some small tests of significance for a poisson distribution. Biometrics, 1956,v.12, p.264-266.

158. Riley H.P. Effects of X-rays on chromosomes in meiosis and mitosis. Cytology, Tokyo, 1936, v.7, p.131.

159. Rini F.J., Hall E.J., Marino S.A. The oxygen enhancement ratio as a function of neutron energy with mammalian cells in culture. Radiat. Res., 1979, v.78, No 1, p.25-37.

160. RajuM.R., Johanson T.S., Tokita N., Carpenter S., Jett J.H. Differences in cell-cycle progression delays after exposure to 2-*8Pu J-particles compared to X-rays. Radiat. Res., 1980, v.84, No 1, p.16-24.

161. Rao P.N., Wilson B.A., Sunkara P. Induceres of DNA synthesis present during mitosis of mammalian cells lacking G^ and G^-phase. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1978, v.75, p.5043-5047.

162. Rubini J.R., Bond V.P., Keller S., Pliedner T.M., Cronkite E.P. DNA synthesis in circulating blood leukocytes labeled in vitro with thymidine. J. Lab. and Clin. Med., 1961, v.58,p.751.

163. Rustad R.C., Burchill B.R. Radiation-Induced Mitotic Delay in Sea Urchin Eggs Treated with Puromycin and Actinomycin D. Radiat. Res., 1966, v.29, No 2, p.203-210.

164. Schneider R., Pfitzer P. Die Zahl der kerne in isolierten des menschlichen Myokards. VirchowTs Arch. Abt. В., 1973, Bd.12, s.238-258.

165. Scott D., Evans H.J. X-ray-induced chromosomal aberrations in Vicia faba: change in response during the cell cycle.- Mutation Res., 1967, v.4, No 5, p.579-599.

166. Scott D., Lyons C.Y. Homogeneous sensitivity of human peripheral blood lymphocetes to radiation-induced chromosome damage. Nature, 1979, v.278, No 5706, p.756-758.

167. Scott D., Sharpe H., Batchelor A.L., Evans H.J., Papworth D. G. Radiation-induced chromosome damage in human peripheral blood lymphocytes in vitro. 1. RBE and dose-rate studies with fast neutrons. Mutation Res., 1969, v.8, No 2, p.367-381.

168. Setlow R.B., Carrier W.L. The disappearance of thymine di-mers from DNA; an error-correcting mechanism. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1964, v.51, No 2, p.226-231.

169. Soren L. Variability of the time at which PHA-stimulated lymphocytes initiate DM synthesis. Exp. Cell Res., 1973, v.78, No 1, p.201-208.

170. Taylor J.H. Sister chromatid exchanges in tritium-labeled chromosomes. Genetics, 1958, v.43, No 5, p.515.

171. Taylor J.H., Woods P.S., Hugnes W.L. The organization and duplication of chromosomes as revealed by autoradiographic studies using tritium-labeled thymidine. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1957, v.43, No 2, p.122-128.

172. Thoday J.M. Sister-union isolocus breaks in irradiated Vicia faba. The target theory and physiological variation. Heredity, 1953, v.6, Suppl 1, p.299-309.

173. Thoday J.M., Read J. Effect of oxygen on the frequency of chromosome aberrations produced by X-rays. Nature (London), 1947, v.160, No 4070, p.608-610.

174. Tobler H. Occurrence and developmental significance of gene amplification. Ins The biochemistry of animal development Ed. R. Weber N.Y. Acad. Press, 1975, v.3, p.91-143.

175. Valentin K. Chromosomal rearrangements induced in mouse spermatogonia by 14,5 MeV neutrons. Mutation Res., 1975, v.27, No 2, p.261-270.

176. Virsik R.P., Harder D. Numerical Relationship between Cell with Radiation-Induced Chromosome Aberrations and Cells Le-thally Injured by Radiation. Radiat. Environ. Biophys., 1980, V.18, p.73-77.

177. Walters R.A., Peterson D.P. Radiosensitivity of mammalian cells. 1. Timing and Dose-Dependence of Radiation-Induced Division Delay. J. Biophys., 1968§i,v.8, No 12, p.1475-1486.

178. Walters R.A., Peterson D.P. Radiosensitivity of mammalian cellj 2. Radiation Effects on Macromolecular Synthesis. J. Biophys., 1968b, v.8, No 12, p.1487-1504.

179. Wambersie A., Gueulette J., Laublin G., Van Dam J., Meulders J.P., Octave-prigton M., Winant M. Pre-therapentic radiological experiments performe at cyclotrone with d(50)-Be neutrons. Radiobiol. Res. and Radiother., Vienna, 1977, v.2, p.151-165.

180. Willson G.B., Sparrow A.H., Pond V. Sub-chromatid rearrangements in Trilium erectium. 1. Origin and nature of configurations induced by ionizing radiation. Amer. J. Botan., 1959, v.46, p.309-316.

181. Wolff S. Chromosome aberrations and the cell cycle. Radiat.

182. Res., 1968, v.33, No 3, p.609-619.I

183. Wolff S. The splitting of human chromosomes introchromatids in the absence of either DNA or protein synthesis. Mutation Res., 1969, v.8, No 1, p.207-214.

184. Wolff S. Experimental modification of the "tertiary structure" of chromosomes in human lymphocytes: the effects of polyanio-nic substances and hypertonic salt solutions. Mutation Res., 1973, v.17, No 2, p.231-237.

185. Wolff S., Atwoоd K.C., Randolph M.L., Luippold Ы.Е. Factors Limiting the number of radiation induced chromosome exchanges. 1. Distance: evidence from interaction of X-ray and neutron induced breaks. J. Biochem. Cytol., 1958, v.4, No 4, p.365-372.

186. Wolff S., Lindsley D.L., Peacock W.J. Cytological evidence for switches in polarity of chromosomal DNA. Proc. Nat. Acad. Sci. USA, 1976, v.73, No 3, p.877-881.

187. Wolff S., Luippold Ы.Е. Chromosome eplitting as revealed by combined X-ray and labelling experiments. Exp. Cell Res., 1964, v.34, No 3, p.548-556.

188. Yu C.K., Sinclair W.K. Mitotic delay and chromosomal abrrati-ons, induced by X-rays in synchronized Chinese hamster cellsin vitro. J. Nat. Cancer Inst., 1967, v.39, No 4, p.619-626.