Значение электрохимического метода в диагностике колоректальной карциномы тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 00.00.00, кандидат наук Белкин Антон Николаевич

• Белкин Антон Николаевич
• кандидат наук
• 2026

Оглавление диссертации кандидат наук Белкин Антон Николаевич

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Эпидемиология колоректального рака

1.2 Клиническая диагностика колоректального рака - от факторов риска к высокоточной инструментальной и лабораторной диагностике

1.3 Морфологическая диагностика колоректального рака

1.4 Биосенсоры, их роль в диагностике неонкологической и онкологической патологии человека. Значение биосенсоров в диагностике колоректального рака

1.5 Щелочная фосфатаза

ГЛАВА 2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1 Материалы исследования

2.2 Подготовка к исследованию

2.2.1 Получение и подготовка биоптатов

2.2.2 Проверка рабочего буфера на предмет возможного наличия электрохимически активных веществ

2.2.3 Циклическая вольтметрия

2.3 Электрохимическое исследование биоптатов опухолей и слизистой оболочки толстой кишки вне опухоли. Морфологическое исследование биоптатов

2.4 Электрохимическое исследование прививаемых опухолей и фрагментов неизмененного кишечника лабораторных животных (мышей). Морфологическое исследование биоптатов

2.5 Биохимическое (фотометрическое) исследование биоптатов

2.6 Прикладные исследования, проведенные для улучшения технологии электрохимического исследования

2.6.1 Методика оценки влияния 10% забуференного формалина на активность нативной щелочной фосфатазы

2.6.2 Методика оценки влияния перемешивания на ход электрохимического исследования

2.6.3 Методика оценки влияния детергента Тритона-Х100 на ход эксперимента

2.7 Статические методы исследования

ГЛАВА 3 РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

3.1 Результаты циклической вольтметрии и проверки фосфатного буфера на предмет ложноположительной электрохимической активности

3.2 Сопоставление результатов электрохимического и морфологического исследований биоптатов опухолей и неизмененной слизистой оболочки толстой кишки

3.2.1 Характеристика материала пациентов группы .№1. Сопоставление степени дифференцировки колоректальной аденокарциномы с результатами иммуногистохимического и электрохимического исследований

3.2.2 Характеристика материала пациентов группы №2

3.2.3 Характеристика материала пациентов группы №3

3.3 Сопоставление результатов электрохимического и биохимического исследований биоптатов опухолей и слизистой оболочки толстой кишки вне опухоли

3.4 Сопоставление результатов электрохимического и морфологического исследований биоптатов привитой опухоли и неизмененной стенки кишечника лабораторных животных

3.5 Оценка влияния перемешивания на ход электрохимического исследования

3.6 Оценка влияния детергента Тритона Х100 на ход электрохимического исследования

3.7 Оценка влияния забуференного формалина на активность щелочной

фосфатазы

ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы исследования

Колоректальный рак - одно из самых распространенных онкологических заболеваний. Своевременность постановки правильного диагноза колоректального рака, занимающего третье место в структуре онкологической патологии в мире, значительно увеличивает продолжительность жизни пациентов [12]. Выявление заболевания на поздних стадиях обусловливает поиск новых методов ранней диагностики [11].

Современная диагностика колоректального рака включает наряду с клиническим обследованием, использование различных инвазивных и не инвазивных методов [15]. Колоноскопия с биопсией опухоли является «золотым стандартом» диагностики колоректального рака. Срок гистологического исследования биопсий с момента приема материала в патологоанатомическое отделение не должен превышать 4 рабочих дней, а иммуногистохимического исследования - от 7 до 15 рабочих дней [13]. Это обусловливает поиск дополнительных новых методов диагностики для рациональной тактики маршрутизации пациентов, первоочередного исследования биопсий со злокачественными опухолями.

Актуальным направлением ранней диагностики колоректального рака является выявление обнаружение специфичных для этого заболевания маркеров в биологических жидкостях и тканях с помощью электрохимических биосенсоров, характеризующихся высокой чувствительностью и избирательностью по отношению к исследуемому веществу, миниатюризацией и невысокой стоимостью [60].

Щелочная фосфатаза является одним из маркеров функционального атипизма колоректальной аденокарциномы. Это выражается в снижении активности этого фермента в опухолевых клетках в сравнении с неизмененным эпителием. Продукты химической реакции между щелочной фосфатазой и специфическим субстратом 1-нафтил фосфатом обладают электрохимической

активностью, т. е. при постоянном напряжении генерируют электрический ток [122]. Таким образом, по величине силы тока можно судить о количестве выделяемых продуктов химической реакции, и, следовательно, об активности щелочной фосфатазы в исследуемом материале [140]. Приведенные данные делают перспективным исследование активности щелочной фосфатазы в ткани колоректальных карцином с помощью электрохимического метода с применением биосенсоров.

Степень разработанности темы исследования

Электрохимические биосенсоры в последние годы находят применение в клинической практике наряду с традиционными методами для неинвазивной диагностики различных заболеваний [97].

Определение активности щелочной фосфатазы как маркера дифференцировки кишечного эпителия используется при работе с колоректальными клеточными линиями - такими, как Сасо2 и НТ-29 [42]. Максимальная активность фермента регистрируется в дифференцированных эпителиальных клетках и составляет 0,7 ед./мг белка. В клетках низкодифференцированных клеточных линий колоректальной карциномы уровень экспрессии щелочной фосфатазы составляет <0,0001 ед./мг белка [28].

Морфологические исследования с использованием гистохимических методов выявили резкое снижение экспрессии щелочной фосфатазы в опухолевой ткани [75]. Представляет интерес оценка экспрессии фермента в опухолевых клетках аденокарциномы различной степени злокачественности по сравнению со слизистой оболочкой толстой кишки вне опухоли с помощью иммуногистохимического метода. Это также делает перспективным изучение электрохимического метода с применением биосенсоров для быстрой оценки активности щелочной фосфатазы в биоптатах колоректальной карциномы, что позволит оптимизировать маршрутизацию пациентов с эндоскопическими признаками злокачественной опухоли толстой кишки.

Цель исследования

Оценить диагностическую значимость электрохимического метода с использованием нанотехнологических биосенсоров для диагностики колоректальной аденокарциномы различной степени злокачественности путем сопоставления с результатами морфологического и биохимического исследования.

Задачи исследования

1. Провести электрохимическое исследование фрагментов опухолевой ткани и слизистой оболочки толстой кишки вне опухоли и сопоставить результаты с данными морфологического исследования.

2. Сопоставить степень злокачественности колоректальной аденокарциномы по данным гистологического заключения с результатами иммуногистохимического исследования с антителами к щелочной фосфатазе и электрохимического исследования биоптатов.

3. Провести сравнительную оценку электрохимического метода с применением нанотехнологических биосенсоров с биохимическим исследованием активности щелочной фосфатазы.

4. Оценить влияние фиксации биопсийного материала в формалине, постоянного перемешивания и добавления детергента Тритона-Х100 на результаты электрохимического исследования активности щелочной фосфатазы с использованием нанотехнологических биосенсоров.

5. Охарактеризовать операционные характеристики электрохимического метода (диагностическая чувствительность, диагностическая специфичность, прогностическая ценность положительного и отрицательного результатов) путем сравнения с результатами морфологического и биохимического исследования опухоли и слизистой оболочки толстой кишки вне опухоли.

Научная новизна исследования

Разработана новая методика исследования биоптатов толстого кишечника для диагностики колоректального рака с применением биосенсоров. Установлены количественные различия силы тока в биоптатах аденокарциномы и слизистой оболочки толстой кишки вне опухоли, которые позволяют использовать электрохимический метод при скрининге колоректальной аденокарциномы.

Установлены различия в экспрессии щелочной фосфатазы в опухолевых клетках колоректальной аденокарциномы различной степени злокачественности с помощью иммуногистохимического метода. Определены количественные различия в силе тока, полученные при электрохимическом исследовании аденокарцином различной степени дифференцировки.

Впервые произведено сопоставление результатов электрохимического, биохимического и морфологического методов для оценки активности щелочной фосфатазы в биоптатах аденокарциномы и слизистой оболочке толстой кишки вне опухоли; установлена диагностическая значимость электрохимического метода исследования биоптатов с применением нанотехнологических биосенсоров при колоректальном раке.

Определена диагностическая специфичность и диагностическая чувствительность использования биосенсоров при колоректальном раке. Доказано влияние особенностей преаналитического и аналитического этапов на результаты электрохимического исследования.

Теоретическая и практическая значимость исследования

Выявлена тесная корреляция результатов биохимического и электрохимического методов исследования биоптатов с результатами иммуногистохимической оценки экспрессии щелочной фосфатазы в биоптатах колоректальной аденокарциномы различной степени дифференцировки и слизистой оболочки толстой кишки. Установлено, что сила тока при исследовании

биоптатов колоректального рака статистически значимо ниже в сравнении с силой тока, полученной при исследовании слизистой оболочкой толстой кишки. Электрохимический метод с применением нанотехнологических биосенсоров как быстрый, недорогой, высокочувствительный метод может быть использован для клинических исследований в практической онкологии. Полученные данные открывают перспективу для поиска новых онкомаркеров как в опухолевой ткани, так и в биологических жидкостях организма, обладающих электрохимической активностью как самостоятельно, так и в результате их взаимодействия со специфическим субстратом. Экспериментальная оценка влияния формалина на активность щелочной фосфатазы, исследование влияния постоянного перемешивания и добавления детергента Тритона-Х100 в рабочий буфер с образцами тканей позволили улучшить технологию электрохимического исследования в виде совершенствования протокола и внесения изменений в конструкцию программно-аппаратного комплекса и биосенсоров.

Методология и методы исследования

Диссертационная работа имеет характер экспериментального аналитического выборочного научного одномоментного клинико-морфологического исследования. В рамках настоящего исследования использовался комплексный подход, включающий электрохимическое (хроноамперометрическое), биохимическое, гистологические исследования, иммуногистохимическое исследование с антителами к щелочной фосфатазе, а также статистические методы обработки полученных данных. Статистическую обработку полученных данных проводили на ПК с использованием встроенного пакета анализа табличного процессора Excel® 2016 MSO (© Microsoft, 2016), авторского (© В.С. Шелудько, 2001-2024) пакета прикладных электронных таблиц (ППЭТ) "Stat2015". В зависимости от нормальности распределения, оцененной с помощью критерия Колмогорова-Смирнова, использовались параметрические (критерий Стьюдента) и непараметрические методы (U Манна-Уитни, W

Вилкоксона). Статистическую значимость различий качественных переменных оценивалась с помощью критерия %2 (кси-квадрат). Различия считались статистически значимыми при уровне значимости р < 0,05.

Положения, выносимые на защиту

1. Электрохимический метод с применением нанотехнологических биосенсоров может быть использован для исследования биоптатов с целью экспресс-диагностики колоректального рака и рациональной маршрутизации пациентов. Морфологическое и биохимическое исследования позволяют уточнить характер изменений в биоптатах, подвергнутых электрохимическому исследованию.

2. Нарушение дифференцировки опухолевых клеток в низкодифференцированной колоректальной аденокарциноме выражается в более значительном снижении активности щелочной фосфатазы по сравнению с высоко-, умеренно дифференцированной аденокарциномой по результатам иммуногистохимического исследования.

3. При использовании электрохимического метода для диагностики колоректального рака следует учитывать особенности преаналитического и аналитического этапов исследования.

4. Электрохимический метод исследования характеризуется высокими диагностическими операционными критериями: диагностической специфичностью, диагностической чувствительностью и диагностической эффективностью для выявления колоректального рака.

Степень достоверности результатов исследования

Обоснованность и достоверность полученных результатов обеспечивается репрезентативностью выборки включенных в исследование пациентов, применением современных методов статистической обработки данных и выбором адекватных критериев для анализа. Достоверность полученных результатов также

подтверждается публикациями в рецензируемых научных изданиях. Надежность результатов электрохимического, биохимического и гистологического методов исследования подтверждена применением иммуногистохимического исследования с антителами к щелочной фосфатазе.

Научные положения и практические рекомендации, сформулированные в диссертации, основаны на анализе достаточного объема материала с применением комплексных современных методов исследования.

Использованные автором методы статистической обработки материалов исследования являются современными и воспроизводимыми. Для анализа первичных данных использованы методы описательной и аналитической статистики. Статистическую обработку полученных данных проводили на персональном компьютере с использованием встроенного пакета анализа табличного процессора Excel® 2016 MSO (© Microsoft, 2016), авторского (© В.С. Шелудько, 2001-2024) пакета прикладных электронных таблиц "Stat2015".

Достоверность результатов исследования подтверждена комиссией Государственного бюджетного учреждения здравоохранения «Пермский краевой онкологический диспансер» (акт проверки первичной документации от 12.05.2025г.).

Внедрение результатов исследования в практику

Результаты исследования внедрены в практическую деятельность медицинской лаборатории «Медлаб Экспресс», г. Пермь (акт внедрения от 15.05.2025 г.).

Результаты диссертационного исследования используются в учебном процессе при реализации программ ординатуры на кафедре онкологии, кафедре внутренних болезней, общей врачебной практики и медицины труда ФГБОУ ВО ПГМУ им. академика Е.А. Вагнера Минздрава России (акты внедрения в учебный процесс от 12.05.2025 и от 15.12.2025 г.).

Личный вклад автора

Автором самостоятельно выполнены все этапы диссертационного исследования. Планирование научной работы, формулировка гипотезы, определение методологии, концепции и дизайна диссертационного исследования, а также формулировка цели и задач работы проводились совместно с научными руководителями д.м.н., доцентом Д.Ю. Сосниным и д.м.н., профессором Г.Г. Фрейнд. Автор непосредственно осуществлял сбор первичного материала, анализировал отечественную и зарубежную литературу по теме исследования. Глубина поиска публикаций составила более 5 лет. Автором выполнены электрохимические, биохимические и морфологические исследования, а также статистическая обработка полученных данных. В процессе работы опытным путем усовершенствована технология электрохимического исследования с учетом влияния различных факторов на ход эксперимента. Автор подготовил публикации, текст диссертации, лично докладывал результаты исследования на научно-практических конференциях российского и международного уровней.

Связь работы с научными программами

Диссертационное исследование выполнено в соответствии с планом научно-исследовательской работы ФГБОУ ВО ПГМУ им. академика Е.А. Вагнера» Минздрава России (№ государственной регистрации темы 115030310053).

Публикации результатов исследования

По теме диссертационного исследования опубликовано 6 печатных работ, из них 3 статьи в научных рецензируемых изданиях, рекомендованных ВАК при Министерстве науки и высшего образования Российской Федерации для публикации основных результатов диссертаций на соискание ученой степени кандидата наук.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Значение электрохимического метода в диагностике колоректальной карциномы»

Апробация работы

Диссертационное исследование «Значение электрохимического метода в диагностике колоректальной карциномы» прошло экспертизу и одобрено локальным этическим комитетом Федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего образования «Пермский государственный медицинский университет им. академика Е.А. Вагнера» Министерства здравоохранения Российской Федерации: протокол №79 от 25 декабря 2013 года, в окончательной редакции после корректировки - протокол №2 от 26 марта 2025 года.

Тема диссертации была утверждена на заседании Совета лечебного факультета Федерального государственного бюджетного образовательного учреждения высшего образования «Пермский государственный медицинский университет им. академика Е.А. Вагнера» Министерства здравоохранения Российской Федерации: протокол №4 от 27 декабря 2013 г., в окончательной редакции после корректировки - протокол №3 от 16 апреля 2025 г.

Апробация работы состоялась на совместном расширенном заседании научной проблемной комиссии дисциплин морфологического профиля и научной проблемной комиссии по молекулярной биологии, фармакологии, нормальной физиологии и патофизиологии ФГБОУ ВО ПГМУ им. академика Е.А. Вагнера Минздрава России (протокол №13 от 21 мая 2025 г.).

Основные результаты диссертации обсуждены на следующих научно-практических конференциях: международная конференция «Актуальные вопросы патологоанатомической практики» (г. Челябинск, 2015 г.), III Всероссийская научно-практическая конференция с международным участием «Современные подходы к морфологической диагностике новообразований человека» (г. Челябинск, 2018 г.); XI Российский конгресс лабораторной медицины (г. Москва, 2025 г.).

Соответствие диссертации пас порту научной специальности

Диссертационное исследование «Значение электрохимического метода в диагностике колоректальной карциномы» соответствует формулам научных специальностей: 3.3.8. Клиническая лабораторная диагностика (Медицинские науки): п.2. Оптимизация и разработка новых методов исследования химического и клеточного состава биоматериалов, определение требований и показаний к условиям их применения; установление референтных величин, предела колебаний каждого параметра биологических жидкостей и нормальных колебаний для отдельных контингентов (по возрасту, полу, роду занятий, среде обитания); определение диагностической информативности лабораторных тестов и их колебаний; п.3. Клинико-лабораторные методы исследования для определения тяжести, периода и срока болезни, прогноза, контроля за лечением и его результатами; п.12. Основы организационного обеспечения клинической лабораторной диагностики. Основы лабораторной информатики. Факторы, влияющие на результаты лабораторных исследований. Логические и вероятностные алгоритмы лабораторной диагностики межлабораторных ошибок, выявление внутри- и межлабораторных ошибок и 3.3.2. Патологическая анатомия (Медицинские науки): п.2. Научный анализ патологических процессов, лежащих в основе заболевания, прижизненная диагностика и прогнозная оценка болезней на основе исследований биопсийных материалов; п.6. Разработка и совершенствование теоретических, методических и организационных принципов прижизненного и посмертного патологоанатомических исследований с позиций запросов общественного здравоохранения и медицинской практики.

Объем и структура диссертации

Диссертация изложена на 142 страницах машинописного текста, состоит из введения, глав «Обзор литературы», «Материалы и методы», «Результаты исследования», обсуждения результатов, заключения, а также выводов и

практических рекомендаций. Работа иллюстрирована 12 таблицами, 50 рисунками. Список литературы включает 192 источника, из них 19 отечественных и 173 зарубежных.

ГЛАВА 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1 Эпидемиология колоректального рака

Одной из ведущих проблем современной медицины является рост онкологической заболеваемости, которая занимает второе место в структуре летальности. Колоректальный рак (КРР) - одно из самых распространенных онкологических заболеваний в мире. По данным Американского онкологического общества (2024), он занимает третье место в структуре онкологической патологии в мире, уступая раку легких, раку простаты у мужчин и раку молочной железы у женщин. В 2024 году в США впервые выявлено 152810 новых случаев КРР, что составляет 8% от всех злокачественных новообразований [37].

В зарубежных странах имеется тенденция к снижению заболеваемости и смертности от КРР благодаря скринингу лиц, входящих в группу риска: в среднем заболеваемость снижается на 1% в год, смертность на 1,8% в год [37]. Однако в России наблюдается неуклонный рост заболеваемости, что обусловлено поздней диагностикой, когда опухоль обнаруживается на Ш-[У стадиях заболевания [11]. Этому способствует с одной стороны отсутствие специфической клинической картины заболевания и поздней обращаемостью за медицинской помощью, и, с другой стороны, низкая онкологическая настороженность в отношении КРР у врачей первого контакта [18]. В России у мужчин КРР занимает IV место в структуре онкологической патологии, имеется тенденция преобладания впервые выявленных случаев в возрасте 60-70 лет, с умеренным снижением показателей заболеваемости после 70 лет у обоих полов [5,11]. Среди злокачественных опухолей, выявляемых у пациентов 30-59 лет, КРР занимает VII место. В 2023 году в России выявлено 80712 новых случаев КРР; заболеваемость и среднегодовой прирост составили соответственно 32,56 человек на 100 тыс. населения и 2,14% для КРР с поражением ободочной кишки и 22,61 человек на 100 тыс. населения и 1,47% для КРР с поражением прямой кишки, ректосигмоидного соединения и ануса. [5]. Своевременность постановки правильного диагноза значительно увеличивает

продолжительность жизни пациентов с КРР. Средняя пятилетняя выживаемость у пациентов КРР в среднем составляет 65%, при этом стадия заболевания является наиболее важным предиктивным фактором: показатель пятилетней выживаемости колеблется от 91% у пациентов с локализованными формами заболевания до 14% у пациентов, имеющих отдаленные метастазы на момент постановки диагноза [160]. Б.И. Гатауллиным с соавторами была показана важность оценки пола, возраста пациента, локализации и морфологического типа опухоли для опредения прогноза и пятилетней выживаемости [3].

1.2 Клиническая диагностика колоректального рака - от факторов риска к высокоточной инструментальной и лабораторной диагностике

Современные подходы к диагностике КРР позволяют оценить злокачественный потенциал опухоли, назначить адекватное лечение, и определить прогноз для пациента. Последовательная диагностика должна включать в себя ряд этапов:

- оценка факторов риска заболевания КРР у здоровых лиц; составление профилактических рекомендаций для лиц в группе риска.

- физикальное, лабораторное и инструментальное обследование пациентов с КРР на дооперационном этапе.

- тщательное морфологическое исследование биопсийного и хирургического материала резецированной опухоли согласно современным стандартам.

- физикальное, лабораторное и инструментальное обследование пациентов с КРР на послеоперационном этапе для выявления возможных рецидивов заболевания, регионарных и отдаленных метастазов.

Американским онкологическим обществом (2024) и Всемирной Организацией Здравоохранения (2023) был выявлен ряд достоверных факторов риска развития КРР, которые подтверждаются крупными исследованиями и систематическими обзорами: ожирение [68, 102], низкая физическая активность

[183], умеренное и обильное употреблени е алкоголя [82], длительное курение [91, 152], частое употребление красного мяса [55, 79], сниженный уровень потребления кальция, фолиевой кислоты, продуктов, содержащих пищевые волокна [173], отягощенная наследственность в отношении КРР, неспецифических воспалительных заболеваний кишечника (ВЗК), синдрома Линча, семейного полипоза толстой кишки, сахарного диабета II типа (СД) [154, 50, 187], а также возраст старше 50 лет [148].

Вышеописанные факторы риска легли в основу создания клинических рекомендаций под редакцией Американского онкологического общества с целью профилактики КРР у пациентов старше 45 лет [37], включающих выбор и проведение по крайней мере одной из диагностических процедур в определенные промежутки времени:

- исследование кала на скрытую кровь / иммунохимическое или ДНК-исследование кала - 1 раз в 3 года.

- ректороманоскопия (сигмоскопия) - 1 раз в 5 лет.

- рентгеноконтрастное исследование кишечника - 1 раз в 5 лет.

- колоноскопия - 1 раз в 10 лет.

- компьютерная колонография - 1 раз в 5 лет.

Наиболее важные признаки, выявляемые при физикальном обследовании пациентов, включают пальпируемую опухоль, признаки кишечного кровотечения, гепатомегалию и желтушность кожи зачастую при наличии метастазов в печени, а также признаки осложнений в виде обструкции или перфорации стенки кишечника. Пальцевое ректальное исследование играет ключевую роль в скрининге рака прямой кишки [49].

Общеклиническое исследование пациента, включающее в себя анализ крови, мочи и кала, играет важное значение в постановке диагноза.

При анализе крови у пациентов с КРР часто выявляется железодефицитная анемия, нарушения содержания электролитов, ускорение СОЭ, увеличение С-реактивного протеина, а также признаки печеночного цитолиза и холестаза [178]. В исследовании Moghadamyeghaneh 7. было показано, что асимптоматический

лейкоцитоз, встречаемый у 5-6% пациентов с КРР, и ассоциированный с водно-электролитными нарушениями, существенно повышает риск смертности в послеопрерационном периоде [129], а высокое соотношение между нейтрофилами и лимфоцитами крови ассоциировано с более агрессивным поведением опухоли [184]. По данным Cui G. рефрактерный к терапии высокий уровень глюкозы у пациентов с КРР и СД ассоциирован с более агрессивным местным поведением опухоли [46]. Наряду с классическими показателями, в настоящее время широко исследуются более специфичные маркеры КРР, выявляемые в крови. В ряде исследований было показано, что онкомаркеры: карцин-эмбриональный антиген (CEA) [107] и метилированный септин-9 [112], антитела к белку р53 [132], адипонектин [115] не только выявляются в плазме крови у больных КРР в значительном количестве, но и могут служить фактором для оценки прогноза заболевания. На основе анализа выявления онкомаркеров при КРР в крови была предложена прогностическая шкала ("CAL"), позволяющая оценить вероятность выявления метастазов КРР в печени после оперативного лечения, и включающая оценку количества лимфоцитов, щелочной фосфатазы и CEA в плазме крови [131]. В другом исследовании был проведен анализ панели из 92 белков - маркеров раннего КРР и аденом толстой кишки, выявляемых в крови. Было показано, что пять протеинов прогностически наиболее ценны для ранней диагностики КРР: фактор роста и дифференцировки 15 (РДФ-15), амфирегулин, лиганд Fas-антигена, лиганд Fms-связанной тирозин-киназы 3 и аутоантитела к белку ТР53 [39].

Современные исследования посвящены выявлению в крови циркулирующих опухолевых клеток (ЦОК), микро-РНК и ДНК. Выявляемые в плазме крови ДНК опухолевых клеток позволяют описать опухолевый генотип, выявить клинически значимые мутации, что необходимо для назначения таргетной терапии [117]. Все большее внимание уделяется выявлению ЦОК как одному из прогностических маркеров КРР. Выявленные ЦОК могут быть использованы для иммуноцитохимического анализа, анализа мутаций и экспрессии конкретных генов с помощью методов гибридизации in situ, а также для культивирования и изучения свойств [149]. Роль эпителиально-мезенхимального взаимоотношения ЦОК и

других тканей в формировании отдаленных метастазов КРР до сих пор остается не до конца изученной.

Микро-РНК играют важную роль в клеточной пролиферации, дифференцировке и апоптозе [35]. Многие из них локализуются на областях хромосом, которые могут подвергаться делециям, амплификациям и транслокациям, что приводит к нарушению экспрессии микро-РНК. В этом случае, в т. ч. при КРР, они могут выступать как онкогены, так и опухолевые супрессоры [189]. В настоящее время изучено более 750 различных микро-РНК в плазме крови у пациентов с КРР, описана роль более 20 видов микро-РНК в развитии и прогрессировании КРР [186]. В работах Но1^ М. и Basati G. было показано, что концентрация сывороточных микро-РНК 194, 29Ь и других отчетливо коррелирует со стадией заболевания [29, 73].

При исследовании мочи на примере нескольких оригинальных исследований было показано, что выявление ряда метаболитов методом жидкостной хромато-масс-спектрометрии: пировиноградной и уксусной кислот, креатинина, карнитина, гиппуровой кислоты и других может служить дополнительным методом в диагностике и оценке прогноза КРР [33].

Исследование кала занимает одну из центральных позиций в скрининге КРР. Гваяковое исследование кала на скрытую кровь с дополнительными модификациями (проба Вебера - ван Деена) показало высокую специфичность для неинвазивного выявления аденом толстой кишки [123] и КРР [127]. Метод основан на реакции окисления гваяковой кислоты перекисью водорода при наличии в кале гема. В метаанализе 2021 года было продемонстрировано, что скрининг с помощью данного исследования снижает смертность от КРР, при этом не снижает риск заболеваемости [106]. Ввиду ряда недостатков, таких как забор большого количества образцов, необходимость исключения красного мяса в рационе питания и препаратов железа, возможные ложноположительные результаты при наличии желудочно-кишечного кровотечения любой локализации, практическая значимость метода в последние годы снижается [69]. Все большее значение приобретают методы выявления микро-РНК, ДНК опухолевых клеток и

онкопротеинов в кале [134]. Один из таких методов - иммуноцитохимический анализ, основанный на мультитаргетном выявлении ДНК, либо интактной части глобина в очищенных каловых массах, показал высокую чувствительность (98%) и специфичность (90%) при диагностике КРР и аденом с тяжелой дисплазией эпителия [104]. В целом, показатели чувствительности и специфичности иммуноцитохимического метода исследования кала при выявлении КРР выше в сравнении с тестом Вебера - ван Деена [124]. Метод не дает ложноположительных результатов при употреблении железосодержащих лекарств и красного мяса, при кровотечениях в верхних отделах желудочно-кишечного тракта, однако стоимость данного исследования выше [180]. Исследование, проведенное в Италии, оценило двухлетнюю программу скрининга с помощью иммуноцитохимического исследования кала, и выявило стабильное снижение ежегодной заболеваемости КРР на 28% через 8 лет [34].

Среди неинвазивных инструментальных методов диагностики КРР, демонстрирующих большую доступность и определенные преимущества, наибольшее значение играют рентгенологическое исследование, компьютерная (КТ) и магниторезонансная томография (МРТ) [52].

Рентгенологическое исследование толстой кишки с применением бария в последние годы играет все меньшее значение ввиду низкой чувствительности при диагностике небольших новообразований [64]. Проведение КТ требует дополнительной подготовки толстой кишки, но седация не требуется. По данным ряда авторов было показано, что КТ может служить альтернативным методом диагностики аденом толстой кишки размером более 1 см и КРР с чувствительностью до 87,9 % и специфичностью до 97,6 %, и, таким образом, не уступает, а приближается по эффективности к колоноскопии [49, 138]. Кроме того, КТ играет важную роль при определении тактики хирургического лечения опухолей толстой кишки на стадиях Т3 и Т4 для оценки поражения окружающих тканей и органов [59], а также на дооперационном выявлении регионарных лимфатических узлов с метастатическим КРР [30]. Среди ограничений данного метода следует отметить невозможность выявления опухолей толстой кишки менее

1 см и "зубчатых" опухолей, зачастую имеющих уплощенную форму [98]. Одной из модификаций метода КТ является КТ-колоноскопия, при которой происходит реконструкция изображений QD-рендеринг) для визуализации внутренней стенки толстой кишки без применения эндоскопического зонда [137]. Чувствительность метода для новообразований более 10 мм составляет 89%, специфичность - 94%. Из преимуществ метода следует отметить его меньшую инвазивность, отсутствие необходимости седации и низкий риск осложнений.

Метод МРТ в комбинации с позитронной эмисионной томографией также играет важную роль в предоперационной диагностике КРР для определения стадии заболевания, рестадирования КРР, а также для выявления метастатического поражения печени и других органов [111].

Решающее значение в инвазивной диагностике КРР играет эндоскопическое исследование. Сигмоскопия позволяет визуализировать прямую кишку, сигмовидную кишку и нисходящую ободочную кишку до селезеночного изгиба; методика не требует седации пациента и мониторинга гемодинамики [49]. В исследовании Holme O. et al. показано снижение заболеваемости и смертности от КРР на 20-30% при регулярной скрининговой сигмоскопии [74]. Оптическая колононоскопия является наиболее эффективным методом скрининга КРР, особенно в проксимальных отделах толстой кишки; включает в себя прямую визуализацию стенки кишки, а также возможность биопсии и удаления полипов. В настоящее время колоноскопия считается одним из самых чувствительных методов диагностики КРР. Ее осложнения, представленные перфорацией стенки кишки, кровотечением, легочно-сердечными осложнениями, достаточно редки, составляют менее 1 % случаев [49,172]. Чувствительность колоноскопии для диагностики аденом толстой кишки размером более 10 мм составляет 89-95%, специфичность 89% [106]; чувствительность для диагностики КРР составляет 18100% [86].

Вопросы совершенствования методик эндоскопической диагностики КРР остаются в центре внимания онкологов и эндоскопистов. В настоящее время наиболее изученными способами модернизации колоноскопия являются:

- хромоколоноскопия - окрашивание слизистой оболочки толстой кишки во время эндоскопии с помощью специальных красителей (индиго карминовый и др.). Сочетания окрашивания с применением узкополосного света позволяет получить детальное изображение сосудистого рисунка слизистой оболочки и его изменений, характерных для аденом, раннего и инвазивного КРР [78].

- высокоразрешающая микроэндоскопия и «оптическая биопсия» опухолей толстой кишки по данным ряда авторов обладают высокой чувствительностью и специфичностью в дифференциальной диагностике полипов толстой кишки и КРР, и зачастую, их результаты могут послужить основанием для проведения лечения до получения результатов гистологического исследования [113].

- капсульная видеоколоноскопия - неинвазивная методика, которая заключается в получении изображения на всем протяжении толстой кишки одноразовой эндоскопической видеокапсулой, принимаемой пациентом перорально, с последующей интерпретацией результатов [172]. Второе поколение аппаратов характеризуется более высокой точностью обнаружения полипов толстой кишки размером более 6 мм с чувствительностью 79-96% и специфичностью 66-97%. Частота выявления КРР составляет 93% [176].

1.3 Морфологическая диагностика колоректального рака

Морфологическая диагностика КРР является «золотым стандартом» среди прочих методик, включает макроскопическую, гистологическую, гистохимическую, иммуногистохимическую и молекулярно-генетическую диагностику биоптата и/или удаленной опухоли.

Макроскопически КРР обычно представлен одиночным полиповидным и/или ульцерированным узлом со смешанным (экзо- и эндофитным) ростом. Было показано, что правосторонний КРР чаще имеет экзофитное строение, в то время как левосторонние формы чаще имеют циркулярный рост [67]. Согласно протоколу Американского колледжа патологов (ЦЗСАР), современная макроскопическая диагностика КРР должна учитывать важные признаки опухоли, играющие роль в

определении стадии заболевания и прог ноза для пациента: размер опухолевого узла, наличие перфорации, вовлечение брыжейки кишки в патологический процесс, наличие опухолевого роста в краях резекции, состояние регионарных лимфатических узлов. Также важными для макроскопической характеристики операционного материала толстой кишки с КРР также являются оценка объема хирургического вмешательства, степень выраженности стеноза просвета кишки, расстояние от опухоли до зубчатой линии и ближайшего края резекции, вторичные изменения опухоли [84]. При макроскопической оценке неблагоприятными прогностическими факторами принято считать уплощенную форму опухоли с участками изъязвления, наличие дочерних узлов опухоли помимо основного узла, перфорацию опухоли [67].

Гистологически выделяют опухоли толстой кишки эпителиального, мезенхимального происхождения (лейомиомы, липомы и др.), а также лимфомы и вторичные (метастатические) опухоли. К эпителиальным опухолям относят различные виды аденом (тубулярные, тубуло-ворсинчатые, ворсинчатые, с дисплазией низкой или высокой степени), доброкачественные «зубчатые» образования, гамартомы, нейроэндокринные опухоли и карциномы [12, 45].

Гистологическая диагностика КРР основана на оценке 2 основных критериев: гистологического типа опухоли и степени дифференцировки (grade). В настоящее время принято выделять несколько видов карцином толстой кишки [45]:

- аденокарцинома (подтипы: «зубчатая», аденомо-подобная, медуллярная,

микропапиллярная, муцинозная, перстневидно-клеточная и др.) - наиболее

частая форма КРР, составляет 98% всех злокачественных опухолей толстой

кишки [65].

- аденосквамозная карцинома.

- нейроэндокринная карцинома: крупно-, мелкоклеточный подтипы.

- смешанная нейроэндокринная-не нейроэндокринная карцинома.

- плоскоклеточная карцинома.

- недифференцированная карцинома.

По степени дифференцировки аденокарциному толстой кишки в зависимости от способности опухолевых клеток формировать железоподобные структуры (ЖПС), выделяют [45] аденокарциному низкой степени злокачественности (low grade), соответствующую опухоли высокой и умеренной дифференцировки и аденокарциному высокой степени злокачественности (high grade), соответствующую опухоли низкой дифференцировки.

Оценка степени дифференцировки основана на оценке наименее дифференцированного компонента. Область инвазивного фронта, в которой нередко обнаруживаются опухолевые «почки» и кластеры низкодифференцированных опухолевых клеток, не учитываются при оценке степени дифференцировки.

При микроскопической оценке к плохим прогностическим факторам КРР относится: инвазия во все слои стенки кишки, низкая дифференцировка и отсутствие дифференцировки опухолевых клеток, наличие лимфоваскулярной и периневральной инвазии, выявление имплантационного опухолевого роста на серозном слое стенке кишки, выявление метастазов в регионарные лимфатические узлы [45, 67, 88]. В последнее время значительное число исследований посвящено изучению перитуморозной зоны опухоли, в частности реакции клеток иммунной системы, инфильтрирующих опухолевую ткань, а также изменениям со стороны стромальных элементов (фибробластов, эндотелиоцитов, адипоцитов и других клеток). Международная рабочая группа по изучению опухоль-инфильтрирующих лимфоцитов выявила, что предложенная ими система оценки, апробированная на материале 1034 пациентов, является надежным предиктором общей выживаемости пациентов при КРР. Так, при выраженной инфильтрации опухоли лимфоцитами выживаемость пациентов составляла 75 месяцев, при слабо выраженной инфильтрации 53 месяца [61]. По данным Sullivan L., опухолевое микроокружение и особенности его взаимодействия с опухолевыми клетками играет важную роль в оценке возможности прогрессии заболевания, чувствительности к терапии, а также прогноза для пациента [166].

Макро- и микроскопическая характеристика легла в основу стадирования КРР. Согласно патологоанатомической классификации, принято выделять 5 стадий карцином толстой и прямой кишки [2]:

- стадия 0 - соответствует карциноме in situ: опухоль инвазирует в собственную пластинку слизистой оболочки, без инвазии мышечной пластинки и подслизистой основы.

- стадия I - опухоль инвазирует подслизистый и мышечный слои стенки кишки, без достоверных регионарных и отдаленных метастазов.

- стадия II включает 3 подстадии:

- IIA - опухоль инвазирует субсерозный слой и околокишечную клетчатку,

- IIB - опухоль прорастает висцеральную брюшину,

- IIC - опухоль врастает в окружающие органы и ткани.

На стадии II регионарные и отдаленные метастазы опухоли не выявляются.

- стадия III включает 3 подстадии:

- IIIA - опухоль инвазирует подслизистый и мышечный слои стенки кишки, выявляются регионарные метастазы не более чем в 6 региональных лимфатических узлах.

- IIIB - опухоль прорастает висцеральную брюшину, выявляются регионарные метастазы более чем в 7 региональных лимфатических узлах.

- IIIC - опухоль врастает в окружающие органы и ткани, выявляются регионарные метастазы более чем в 7 региональных лимфатических узлах.

- стадия IV - признаки T (первичный опухолевый узел) и N (метастазы в региональные лимфатические узлы) не имеют значения; на стадии IVA выявляются отдаленные метастазы опухоли в 1 органе, IVB - в двух и более органах, либо опухоль врастает в париетальную брюшину, IVC - метастазы в брюшине с вовлечением / без вовлечения внутренних органов.

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Белкин Антон Николаевич, 2026 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Астафьев Е.А. Что такое потенциостат и как им правильно пользоваться / Е.А. Астафьев. - Черноголовка: ООО «Элинс», 2013. - 50 с.

2. Брайерли Д.Д. TNM классификация злокачественных опухолей / Д.Д. Брайерли, М.К. Господарович, К. Виттекинд; пер. с англ. и научн. ред. Е.А. Дубовой, К.А. Павлова. 2-е изд. на русском языке. - М.: Логосфера, 2018. - 344 с.

3. Гатауллин Б.И. Оценка влияния гендерных и возрастных различий на общую выживаемость больных колоректальным раком / Б.И. Гатауллин, И.Г. Гатауллин, Р.Г. Биктемирова [и др.] // Хирургия и онкология. - 2024. - том 14, №2. - С. 11-16.

4. Гайер Г. Электронная гистохимия / Г. Гайер; пер. с нем. И.Б. Бухвалов. - М.: Мир, 1974. - 458 с.

5. Каприн А.Д. Злокачественные новообразования в России в 2023 году (заболеваемость и смертность) / А.Д. Каприн, В.В. Старинский, А.О. Шахзадова. - М.: МНИОИ им. П.А. Герцена, 2024. - 276 с.

6. Ляпина С.А. Реактивные изменения нейтрофилов при бронхолегочных заболеваниях / С.А. Ляпина, Г.Г. Федотова // Современные проблемы науки и образования. - 2018. - № 6; URL: https://science-education.ru/ru/article/view?id=28285 (дата обращения: 21.12.2024).

7. Максимова П.Е. Колоректальный рак: эпидемиология, канцерогенез, молекулярно-генетические особенности и клеточные механизмы резистентности к терапии (аналитический обзор) / П.Е. Максимова, Е.П. Голубинская, Б.Д. Сеферов [и др.] // Колопроктология. - 2023. - том 22, №2. -С. 160-171.

8. Мырова Л.О. Обеспечение стойкости аппаратуры связи к ионизирующим и электромагнитным излучениям / Л.О. Мырова, А.З. Чепиженко. - 2-е изд., перераб. и доп. - М.: Радио и связь, 1988. - 296 с.

9. Малинина Е.И. Щелочная фосфатаза в практике врача-невролога / Е.И. Малинина, М.В. Мазалова // Медицинский альманах. - 2020. - том 4. - №65. - С. 21-28.

10. Малютина Н.Н. Патофизиологические и клинические аспекты воздействия метанола и формальдегида на организм человека / Н.Н. Малютина, Л.А. Тараненко // Современные проблемы науки и образования. - 2014.-№2; URL:https://scienceeducation.ru/ru/article/view?id=12826 (дата обращения: 21.12.2024).

11. Моисеенко А.Б. Стратегия и тактика комплексного лечения больных метастатическим колоректальным раком / А.Б. Моисеенко, А.В. Гуляев, А.М. Карачун [и др.] // Злокачественные опухоли. - 2015. - № 2. - С. 78-84.

12. Олейникова Н. А. Новое в классификации доброкачественных эпителиальных опухолей толстой кишки (ВОЗ, 2019, 5-е издание) / Н. А. Олейникова, П. Г. Мальков, Н. В. Данилова // Архив патологии. - 2020. - Т. 82, № 2. - С. 35-42.

13. Приказ №07н Министерства здравоохранения Российской Федерации от 14 апреля 2025 года «Об утверждении правил проведения патолого-анатомических исследований и унифицированных форм медицинской документации, используемых при проведения патолого-анатомических исследований»; URL:https://

https://normativ.kontur.ru/document?moduleId=1&documentId=500375 (дата обращения: 12.01.2025).

14. Разумов А.В. Экспериментальная методика оценивания стойкости радиоэлектронной аппаратуры автономных технических систем к воздействию мощного электромагнитного излучения / А.В. Разумов, А.Б. Махонин, А.С. Гоголевский // Известия Тульского государственного университета. Технические науки. - 2022. - № 10. - С. 133-137.

15. Салянова Е.П. Маркер воспаления в клинико-лабораторных исследованиях у больных колоректальным раком / Е.П. Салянова, Н.Н. Зыбина, Н.Е. Кушлинский [и др.] // Сборник Наукоемкие лабораторные технологии для клинической

медицины. Материалы XXVIII Всероссийской научно-практической конференции с международным участием. М.: Блок-принт, 2023. - С. 167-169.

16. Сефедов Б.Д. Молекулярно-генетическая характеристика колоректального рака / Б.Д. Сефедов, О.Ю. Грицкевич, А.Э. Лазарев [и др.] // Злокачественные опухоли. - 2023. - том 13. - №4. - C. 78-83.

17. Цыганкова М.В. Метастатический колоректальный рак / М.В. Цыганкова, Е.В. Ткаченко // Экспериментальная и клиническая гастроэнтерология. - 2023. - том 211, №3. - C. 22-27.

18. Шаназаров Н.А. Роль скрининговой колоноскопии и сигмоскопии в ранней диагностике колоректального рака / Н.А. Шаназаров, В.Ю. Дудник, Ж.К. Сагандыков // Университетская медицина Урала. - 2015. - № 1. - С. 48-53.

19. Шелудько В.С. Теоретические основы медицинской статистики (статистические методы обработки и анализа материалов научно-исследовательских работ): Метод. рекомендации / В.С. Шелудько, Г.И. Девяткова. - 3-е изд., исправл. и доп. - Пермь: ФГБОУ ВО «ПГМУ им. академика Е.А. Вагнера» Минздрава России, 2016. - 80 с.

20. Abdolahad M. Silicon nanograss based impedance biosensor for label free detection of rare metastatic cellsamong primary cancerous colon cells, suitable for more accurate cancer staging / M. Abdolahad, H. Shashaani, M. Janmaleki [et al.] // Biosensors & bioelectronics. - 2014. - № 59. - Р. 151-159.

21. Aguiar Vallim T.Q. MInd the gAP: intestinal alkaline phosphatase puts the breaks on atherosclerosis / T.Q. Aguiar Vallim, E.J. Tarling // Circulation research. - 2021. -Vol.128, №11. - P. 1660-1662.

22. Aizawa M. Enzyme immunosensor. III. Amperometric determination of human chorionic gonadotropin by membrane-bound antibody / M. Aizawa, A. Moriaka, S. Suzuki, Y. Nagamura // Analytical biochemistry. - 1979. - №94. - Р. 22-28.

23. Anbuselvam B. Wearable biosensors in cardiovascular disease / B. Anbuselvam, B.M. Gunasekaran, S. Srinivasan [et al.] // Clinica chimica acta; international journal of clinical chemistry. - 2024. - №561. - P. 119766.

24. Aydin M. Advances in immunosensor technology / M. Aydin, E.B. Aydin, M.K. Sezginturk // Advances in clinical chemistry. - 2021. - №102. - P. 1-62.

25. Baek D.H. Clinical potential of circulating tumor cells in colorectal cancer: a prospective study / D.H. Baek, G.H. Kim, G.A. Song [et al.] // Clinical and translational gastroenterology. - 2019. - Vol.10, №7. - e.00055.

26. Bahnassy A.A. Prognostic significance of circulating tumor cells (CTCs) in Egyptian non-metastatic colorectal cancer patients: a comparative study for four different techniques of detection (flowcytometry, cell search, quantitative real-time PCR and cytomorphology) / A.A. Bahnassy, S.E. Salem, M. Mohanad [et al.] // Experimental molecular pathology. - 2019. - Vol.106. - P. 90-101.

27. Bandodkar A.J. Non-invasive wearable electrochemical sensors: a review / A.J. Bandodkar, J. Wang // Trends in biotechnology. - 2014. - Vol.32, №7. - P. 363-371.

28. Barnard J.A. Butyrate rapidly induces growth inhibition and differentiation in HT-29 cells / J.A. Barnard, G. Warwick // Cell growth and differentiation. - 1993. - №4. - P. 495-501.

29. Basati G. Circulating levels of the miRNAs, miR-194, and miR-29b, as clinically useful biomarkers for colorectal cancer / G. Basati, A.E. Rasavi, I. Pakzad, F.A. Malayeri // Tumour biology. - 2016. - Vol.37, №2. - P. 1781-1788.

30. Bedrikovetski S. Artificial intelligence for pre-operative lymph node staging in colorectal cancer: a systematic review and meta-analysis / S. Bedrikovetski, N.N. Dudi-Venkata, H.M. Kroon // BMS Cancer. - 2021. - Vol.21, №1. - P. 1058.

31. Biosensors market size - by type, by technology, by application, by end use, & Global forecast, 2024-2032 [Электронный ресурс] - URL: https://www.https://www.gminsights.com/industry-analysis/biosensors-market (дата обращения: 29.10.2024 г.).

32. Bresalier R.S. Mucin production by human colonic-carcinoma cells correlates with their metastatic potential in animal-models of colon cancer metastasis / R.S. Bresalier, Y. Niv, J.C. Byrd [et al.] // Journal of clinical investigation. - 1991. - Vol.87, №3. -P. 1037-1045.

33. Brezmes J. Urine NMR metabolomics for precision oncology in colorectal cancer / J. Brezmes, M. Llambrich, R. Cumeras, J. Guma // International journal of molecular sciences. - 2022. - Vol.23, №19. - P. 11171.

34. Bucchi L. How a faecal immunochemical test screening programme changes annual colorectal cancer incidence rates: an Italian intention-to-screen study / L. Bucchi, S. Mancini, F. Baldacchini // British journal of cancer. - 2022. - Vol.127, №3. - P. 541548.

35. Budakoti M. Micro-RNA: the Darkhorse of cancer / M. Budakoti, A.S. Panwar, D. Molpa [et al.] // Cell signaling. - 2021. - №83. - P. 109995.

36. Cai G. A multilocus blood-based assay targeting circulating tumor DNA methylation enables early detection and early relapse prediction of colorectal cancer / G. Cai, M. Cai, Z. Feng [et al.] // Gastroenterology. - 2021. - №161. - P. 2053-2056.

37. Cancer facts and figures 2024 / American Cancer Society. - 2024. - 88 p.

38. Chang D. Functional nucleic acids for pathogenic bacteria detection / D. Chang, S. Zakaria, S.E. Samari [et al.] // Accounts of chemical research. - 2021. - Vol.54, №18. - P. 3540-3549.

39. Chen H. Development and validation of a panel of five proteins as blood biomarkers for early detection of colorectal cancer / H. Chen, J. Qian, S. Werner, [et al.] // Clinical epidemiology. - 2017. - №9. - P. 517-526.

40. Chen Z.E. Application of immunohistochemistry in gastrointestinal and liver neoplasms: new markers and evolving practice / Z.E. Chen, F. Lin // Archive of pathology & laboratory medicine. - 2015. - Vol.139, №1. - P. 14-23.

41. Cheng X. Prognostic impact of mitofusin 2 expression in colon cancer / X. Cheng, Y. Li, F. Liu // Translational cancer research. - 2022. - Vol.11, №10 - P.3610-3619.

42. Cizkova K. When activator and inhibitor of PPARa do the same: consequence for differentiation of human intestinal cells / K. Cizkova, T. Foltynkova, J. Hanyk [et al.] // Biomedicines. - 2021. - Vol.9, № 9. - P. 1255.

43. Coleman D. miRNA as a biomarker for the early detection of colorectal cancer / D. Coleman, S. Kuwada // Genes. - 2024. - Vol.15, №3. - P.338.

44. Costa P.H.P. The use of serum alkaline phosphatase as a choledocholithiasis marker to mitigate the cost of magnetic resonance cholangiography / P.H.P. Costa, J.H.B. de Sousa, I.T. de Lima [et al.] // Einstein (San Paolo, Brasil). - 2023. - №21. - eAO0204.

45. Cree I.A. WHO classification of tumors of the digestive system 5th edition / I.A. Cree, N.V. Adsay, A. Agaimy [et al.] // World Health Organization. - 2019. - 537 p.

46. Cui G. High blood glucose levels correlate with tumor malignancy in colorectal cancer patients / G. Cui, T. Zhang, F. Ren [et al.] // Medical science monitor. - 2015. - №21. - P. 3825-3833.

47. Dabbs D.J. Diagnostic immunohistochemistry: Theranostic and genomic applications 5th edition / D. J. Dabbs // 2018. - Elsevier. - 944 p.

48. Delgado-Urena M. Circulating tumor cells criteria (CyCAR) versus standard RECIST criteria for treatment response assessment in metastatic colorectal cancer patients / M. Delgado-Urena, F.G. Ortega, D. de Miguel-Perez [et al.] // Journal of translational medicine. - 2018. - Vol.16, №1 - P. 251.

49. De Vita V. Cancer. Principles & practice of oncology 12th edition / V. De Vita, T.S. Lawrence, S.A. Rosenberg // Wolters Kluwer Health - 2023. - 1968 p.

50. Dohmen J. Gender-specific differences in the development of colorectal cancer in Lynch syndrome patients - A systematic review / J. Dohmen, N. Sommer, K. van Beekum, [et al.] // Chirurgie (Heidelberg, Germany). - 2024. - Vol.95, №9 - P. 696708.

51. Dos Santos M.B. Fundamentals of biosensors and detection methods / M.B. Dos Santos, L. Rodriguez-Lorenzo, R. Queiros [et al.] // Advances in experimental medicine and biology. - 2022. - №1379 - P. 3-29.

52. Duarte R.B. Computed tomography colonography versus colonoscopy for the diagnosis of colorectal cancer: a systematic review and meta-analysis / R.B. Duarte, W.M. Bernardo, C.M. Sakai [et al.] // Therapeutics and clinical risk management. -2018. - №14 - P. 349-360.

53. Ely S.F. Principles of forensic pathology: from investigation to certification / S.F. Ely, J.G. Gill, 1st edition; Academic Press. - 2022. - 614 p.

54. Estaki M. Interplay between intestinal alkaline phosphatase, diet, gut microbes and immunity / M. Estaki, D. DeCoffe, D.L. Gibson // World journal of gastroenterology. - 2014. - Vol.20, № 42. - P. 15650-15656.

55. Farvid M.S. Consumption of red meat and processed meat and cancer incidence: a systematic review and meta-analysis of prospective studies / M.S. Farvid, E. Sidahmed, N.D. Spence [et al.] // European journal of epidemiology. - 2021. - Vol.36, №9 - P. 937-951.

56. Fernández-Gordón Sánchez F. Persistently elevated alkaline phosphatase without hepatopathy? / F. Fernández-Gordón Sánchez, C. Gómez Labrador, D. Riado Mínguez [et al.] // The Spanish journal of gastroenterology. - 2024. - Vol.116, №8 - P. 447448.

57. Fitzgerald R.C. The future of early cancer detection / R.C. Fitzgerald, A.C. Antoniou, L. Fruk [et al.] // Nature Medicine. - 2022. - Vol.28, №4 - P. 666-677.

58. Flecchia C. MSI colorectal cancer, all you need to know / C. Flecchia, A. Zaanan, W. Lahlou [et al.] // Clinics and research in hepatology and gastroenterology. - 2022. -Vol.46, №9 - P. 101983.

59. Flor N. Contrast-enhanced computed tomography colonography in preoperative distinction between T1-T2 and T3-T4 staging of colon cancer / N. Flor, M. Mezzanzanica, P. Rigamonti [et al.] // Academic radiology. - 2013. - №20. - P. 590595.

60. Fu J. Application of intelligent medical sensing technology / J. Fu, Q. Gao, S. Li // Biosensors (Basel). - 2023. - Vol.13, №8 - P. 812.

61. Fuchs T.L. Assessment of tumor-infiltrating lymphocytes using international tils working group (itwg) system is a strong predictor of overall survival in colorectal carcinoma: a study of 1034 patients / T.L. Fuchs, L. Sioson, A. Sheen [et al.] // American journal of surgical pathology. - 2020. - Vol.44, №4 - P. 536-544.

62. Gaiardo A. Nanostructured SmFeO3 gas sensors: investigation of the gas sensing performance reproducibility for colorectal cancer screening / A. Gaiardo, G. Zonta, S. Gherardi [et al.] // Sensors (Basel). - 2020. - Vol.20, №20 - P. 5910.

63. Gao C. Protective Properties of intestinal alkaline phosphatase supplementation on the intestinal barrier: interactions and effects / C. Gao, M.Y. Koko, W. Hong [et al.] // Journal of agriculture and food chemistry. - 2024. - Vol.72, №1 - P. 27-45.

64. Garborg K. Colorectal cancer screening / K. Garborg // Surgical clinics of North America. - 2015. - №95. - P. 979-989.

65. Geka G. SERS Immunosensors for cancer markers detection / G. Geka, A. Kanioura, V. Likodimos [et al.] // Materials (Basel). - 2023. - Vol.16, №10 - P. 3733.

66. Gomaa W. Villin [Электронный ресурс] - URL: https://www.pathologyoutlines.com/topic/stainsvillin.html (дата обращения: 26.10.2024 г.).

67. Gonzales R.S. Adenocarcinoma of colon [Электронный ресурс]. - URL: http://pathologyoutlines.com/topic/colontumoradenocarcinoma.html (дата обращения 22.10.2024 г).

68. Gonzalez-Gutierrez L. Obesity-associated colorectal cancer / L. Gonzalez-Gutierrez, O. Motino, D. Barriuso [et al.] // International journal of molecular sciences. - 2024. - Vol.25, №16 - P. 8836.

69. Gupta S. Screening for colorectal cancer / S. Gupta // Hematology/oncology clinics of North America. - 2022. - Vol.36, №3 - P. 393-414.

70. Hajebi Khaniki S. Analyzing aberrant DNA methylation in colorectal cancer uncovered intangible heterogeneity of gene effects in the survival time of patients / S. Hajebi Khaniki, F. Shokoohi, H. Esmaily [et al.] // Nature scientific reports. - 2023. -№13. - P. 22104.

71. He N. The Pathological features of colorectal cancer determine the detection performance on blood ctDNA / N. He, L. Song, Q. Kang [et al.] // Technology in cancer research and treatment. - 2018. - №17. - P. 1533033818791794.

72. Herman S.M. The hidden allergen: Triton X-100, a derivative of polyethylene glycol / S.M. Herman, E. Lui, H. Kim // The Journal of allergy and clinical immunology. In practice. - 2021. - Vol.9, №7. - P. 2941.

73. Hollis M. MicroRNAs potential utility in colon cancer: Early detection, prognosis, and chemosensitivity / M. Hollis, K. Nair, A. Vyas [et al.] // World journal of gastroenterology. - 2015. - Vol.21, №27. - P. 8284-8292.

74. Holme O. Effect of flexible sigmoidoscopy screening on colorectal cancer incidence and mortality: a randomized clinical trial / O. Holme, M. Loberg, M. Kalager [et al.] // JAMA. - 2014. - Vol.312, № 6. - P. 606-615.

75. Hoopwood D. Some aspects of fixation with glutaraldehyde. A biochemical and histochemical comparison of the effects of formaldehyde and glutaraldehyde fixation on various enzymes and glycogen, with a note on penetration of glutaraldehyde into liver / D. Hoopwood // Journal of anatomy. - 1967. - №101. - P. 83-92.

76. Hu M. Circulating tumor cells in colorectal cancer in the era of precision medicine / M. Hu, Z. Wang, Z. Wu [et al.] // Journal of molecular medicine (Berlin, Germany). -2022. - Vol.100, № 2. - P. 197-213.

77. Hua Y. DNA-based biosensors for the biochemical analysis: a review / Y. Hua, J. Ma, D. Li [et al.] // Biosensors (Basel). - 2022. - Vol.12, № 3. - P. 183.

78. Huang Y. Diagnostic accuracy of magnifying chromoendoscopy in the assessment of tumor invasion depth in early colorectal cancer: a systematic review and meta-analysis / Y. Huang, Z. Yang, Y.Yao [et al.] // Techniques in colonoproctology. - 2023. -Vol.27, № 12. - P. 1155-1167.

79. Huang Y. Red and processed meat consumption and cancer outcomes: Umbrella review / Y. Huang, D. Cao, Z. Chen [et al.] // Food chemistry. - 2021. - №356 - P. 129697.

80. Ilieva N. Immunohistochemical expression of CK20, CK7, and CDX2 in colorectal carcinoma in correlation with pathomorphological characteristics / N. Ilieva, D. Tashkova, D. Staykov [et al.] // Folia Medica. - 2022. - Vol.64, №2 - P. 214-220.

81. Iluz-Freundlich D. Low serum alkaline phosphatase levels in patients with chronic liver diseases: possible contributions to disease pathogenesis / D. Iluz-Freundlich, M.G. Van Iderstine, J. Uhanova [et al.] // Clinics and research in hepatology and gastroenterology. - 2021. - Vol.45, №4 - P.101692.

82. Ionescu V.A. Colorectal cancer: from risk factors to oncogenesis / V.A. Ionescu, G. Gheorghe, N. Bacalbasa [et al.] // Medicina (Kaunas, Lithuania). - 2023. - Vol.59, №9

- P. 1646.

83. Jabbal I.S. Medullary carcinoma of the colon: a comprehensive analysis of the National Cancer Database / I.S. Jabbal, A. Nagarajan, C. Rivera [et al.] // Surgical oncology. - 2022. - №45. - P. 101856.

84. Jain D. Protocol for the examination of specimens from patients with primary carcinoma of the colon and rectum [Электронный ресурс] -URL:https://documents.cap.org/protocols/ColoRectal_4.3.1.0.REL.CAPCP.pdf?_gl= 1*1xvz8tw*_ga*MTk4MTg4MDc0MC4xNzI5NTk1MjI2*_ga_97ZFJSQQ0X*MTc yOTU5NTIyNS4xLjEuMTcyOTU5NTM4OC4wLjAuMA (дата обращения: 22.10.2024 г.).

85. Jain S. Chromosomal instability & MUTYH pathways [Электронный ресурс] -URL:

https://www.pathologyoutlines.com/topic/colontumormolecularpathwayschromosom e.html (дата обращения: 26.10.2024 г.).

86. Jain S. Optimal strategies for colorectal cancer screening / S. Jain, J. Maque, A. Galoosian [et al.] // Current treatment options in oncology. - 2022. - №23. - P. 474493.

87. Jeong C. Efficient, electrochemical degradation of organic pollutants via nanofibrous Pt/Ir-RuO2 electrode with enhanced stability / C. Jeong, T.H. Kim, K.W. Lee [et al.] // Chemosphere. - 2024. - №369. - P. 143826.

88. Johncilla M. Histology of colorectal carcinoma: proven and purported prognostic factors / M. Johncilla, R.K. Yantiss // Surgical pathology clinics. - 2020. - Vol.13, №3

- P. 503-520.

89. Kabbat E. A. A histochemical study of distribution of alkaline phosphatase in various normal and neoplastic tissues / E. A. Kabbat, J. Furth // American journal of pathology.

- 1940. - №27. - P. 40-61.

90. Karimi F. Revolutionizing cancer monitoring with carbon-based electrochemical biosensors / F. Karimi, H. Karimi-Maleh, J. Rouhi [et al.] // Enviromental research. -2023. - Vol.239, №2 - P.117368.

91. Keivanlou M.H. Association between smoking and colorectal cancer in Eastern Mediterranean Regional Office (EMRO): a systematic review and meta-analysis / M.H. Keivanlou, E. Amini-Salehi, S. Hassanipour [et al.] // Saudi journal of gastroenterology. - 2023. - Vol.29, №4 - P. 204-211.

92. Kelly M.L. Medullary carcinoma of the colon / M.L. Kelly // ANZ Journal of surgery. - 2023. - Vol.93, №3 - P. 710-711.

93. Khokhar M. Non-invasive detection of renal disease biomarkers through breath analysis / M. Khokhar // Journal of breath research. - 2024. - Vol. 18, №2 - P. 024001.

94. Kiernan J.A. Histological and histochemical methods - theory and practice. 5th edition / J.A. Kierman // Scion publishing ltd. - 2015. - 571 p.

95. Klepinina L. Colon cancer cell differentiation by sodium butyrate modulates metabolic plasticity of Caco-2 cells via alteration of phosphotransfer network / L. Klepinina, A. Klepinin, L. Truu [et al.] // PLos One. - 2021. - Vol.16, №1. - e. 0245348.

96. Koley D. Triton X-100 concentration effects on membrane permeability of a single HeLa cell by scanning electrochemical microscopy (SECM) / D. Koley, A.J. Bard // Proceedings of the international academy of sciences of the USA. - 2010. - Vol.107, №39. - P. 16783-16387.

97. Kulkarni M.B. Biosensors and microfluidic biosensors: from fabrication to application / M.B. Kulkarni, N.H. Ayachit, T.M. Aminabhavi // Biosensors. - 2022. -Vol.12, №7 - P. 543.

98. Kumar M. Screening and surveillance of colorectal cancer using CT colonography / M. Kumar, B. D. Cash // Current treatment options in gastroenterology. - 2017. -Vol.15, №1. - P. 168-183.

99. Kumar V. Robbins & Kumar basic pathology / V. Kumar, A. Abbas, J. Aster [et al.]; 11th edition. - Elsevier, 2023. - 840 p.

100. Labry C. Formaldehyde preservation for deferred measurements of alkaline phosphatase activities in marine samples / C. Labry, M. Urvoy // Heliyon. - 2020. -Vol.6, №11. - e. 05333.

101. Lai Z. Associations between atherosclerosis and elevated serum alkaline phosphatase in patients with coronary artery disease in an inflammatory state / Z. Lai, Y. Liu, M. Huang [et al.] // Heart, lung and circulation. - 2023. - Vol.32, №9 - P. 1096-1106.

102. Lee J. Obesity and colorectal cancer / J. Lee, S.Y. Kim // Korean journal of gastroenterology. - 2023. - Vol.82, №2 - P. 63-72.

103. Lengiel C.G. Microsatellite instability as a predictor of outcomes in colorectal cancer in the era of immune-checkpoint inhibitors / C.G. Lengiel // Current drug targets. - 2021. - Vol.22, №9 - P. 968-976.

104. Lidgard G.P. Clinical performance of an automated stool DNA assay for detection of colorectal neoplasia / G.P. Lidgard, M.J. Domanico, J.J. Briumsma [et al.] // Clinical gastroenterology and hepatology. - 2013. - №11. - P.1313-1318.

105. Liebl C.M. The role of p53 signaling in colorectal cancer / C.M. Liebl, T.G. Hofmann // Cancers (Basel). - 2021. - Vol.13, №9. - P. 2125.

106. Lin J.S. Screening for colorectal cancer: updated evidence report and systematic review for the US preventive services task force / J.S. Lin, L.A. Perdue, N.B. Henrikson [et al.] // JAMA. - 2021. - Vol.325, №19 - P. 1978-1998.

107. Liu F. Prognostic value of the postoperative carcinoembryonic antigen level in colorectal cancer: A meta-analysis / F. Liu, S. Jiang, J. Cui [et al.] // World journal of surgery. - 2024. - Vol.48, №10 - P. 2359-2375.

108. Liu K. Elevated levels of serum alkaline phosphatase are associated with increased risk of cardiovascular disease: a prospective cohort study / K. Liu, Y. Yu, Y. Yuan [et al.] // Journal of atherosclerosis and thrombosis. - 2022. - Vol.30, №7 - P. 795-819.

109. Liu Q. Association between Ki67 expression and therapeutic outcome in colon cancer / Q. Liu, D. Ran, L. Wang [et al.] // Oncology letters. - 2023. - Vol.25, №6. -P. 272.

110. Liu Y. Gut microbiome in colorectal cancer: clinical diagnosis and treatment / Y. Liu, H.C.H. Lau, W.Y. Cheng [et al.] // Genomics, proteomics and bioinformatics. -2023. - Vol.21, №1. - P.84-96.

111. Lo H.Z. FDG-PET/MRI in colorectal cancer care: an updated systematic review / H.Z. Lo, K.T. Choy, J.C.H. Kong // Abdominal radiology (New York). - 2024.

112. Long J. Increased Kremen2 predicts worse prognosis in colon cancer / J. Long, F. Cong, Y. Wei [et al.] // Pathology oncology research. - 2023. - №29. - P.1611082.

113. Louie J.S. High-resolution microendoscopy in differentiating neoplastic from nonneoplastic colorectal polyps / J.S. Louie, R. Shukla, R. Richards-Kortum, S. Anandasabapathy // Best practical resolutions in clinical gastroenterology. - 2015. -Vol.29, №4. - P. 663-673.

114. Lu P. Methylated Septin 9 as a promising biomarker in the diagnosis and recurrence monitoring of colorectal cancer / P. Lu, X. Zhu, Y. Song [et al.] // Disease markers. -2022. - №2022 - P. 7087885.

115. Macleod A. Systemic adiponectin levels in colorectal cancer and adenoma: a systematic review and meta-analysis / A. Macleod, K.M. Scheurlen, J.F. Burton [et al.] // International journal of obesity. - 2023. - Vol.47, №10 - P. 911-921.

116. Makris K. Alkaline phosphatases: biochemistry, functions, and measurement / K. Makris, C. Mousa, E. Cavalier // Calcified tissue international. - 2023. - Vol.112, №2

- P. 233-242.

117. Malla M. Using circulating tumor DNA in colorectal cancer: current and evolving practices / M. Malla, J.M. Loree, P.M. Kasi, A.R. Parikh / Journal of clinical oncology.

- 2022. - Vol.40, №24. - P. 2846-2857.

118. Malla S.B. Pathway level subtyping identifies a slow-cycling biological phenotype associated with poor clinical outcomes in colorectal cancer / S.B. Malla, R.M. Byrne, M.W. Lafarge [et al.] // Nature Genetics. - 2024. - №56. - P. 458-472.

119. Malo J. Intestinal alkaline phosphatase deficiency increases the risk of diabetes / J. Malo, M.J. Alam, S. Islam [et al.] // BMJ open diabetes research and care. - 2022. -Vol.10, №1- e. 002643.

120. Manjunatha J.G. Electrocatalytic response of dopamine at mannitol and Triton X-100 modified carbon paste electrode: a cyclic voltammetric study / J.G. Manjunatha, B.E. Kumara Swamy, G.P. Mamatha [et al.] // International journal of electrochemical science. - 2009. - №4. - P. 1706-1718.

121. Martins R.D.S. The role of intestinal alkaline phosphatase in the development of necrotizing enterocolitis / R.D.S. Martins, E. M.W. Kooi, K. Poelstra [et al.] / Early human development. - 2023. - №183. - P. 105797.

122. Masson M. 4-Hydroxynaphthyl-1-phosphate as a substrate for alkaline phosphatase and its use in sandwich immunoassay / M. Masson, T. Haruyama, E. Kobatake [et al.] // Analytica Chimica Acta. - 1999. - Vol.402, №1-2. - P. 29-35.

123. Meklin J. The Automatically Analyzed (AA) ColonView (CV) quick test for fecal occult blood shows higher diagnostic accuracy in detection of colorectal adenoma than visually analyzed tests / J. Meklin, M. Eskelinen, D.P. Guimaraes [et al.] // Anticancer research. - 2021. - Vol.41, №11. - P. 5517-5525.

124. Meklin J. Colorectal cancer screening with traditional and new-generation fecal immunochemical tests: a critical review of fecal occult blood tests / J. Meklin, K. Syrjânen, M. Eskelinen // Anticancer research. - 2020. - Vol. 40, №2. - P.575-581.

125. Mello G.P.S. Glucose sensing by fluorescent nanomaterials / G.P.S. Mello, E.F.C. Simoes, D.M.A. Crista [et al.] // Critical reviews in analytical chemistry. - 2019. -Vol.49, №6. - P. 542-552.

126. Memon A.F. An improved electrochemical sensor based on triton X-100 functionalized SnO2 nanoparticles for ultrasensitive determination of cadmium / A.F. Memon, S. Ameen, N. Quambrani [et al.] // Chemosphere. - 2022. - №300. - P. 134634.

127. Mendis S. Biology and clinical implications of fecal occult blood test screen-detected colorectal cancer / S. Mendis, W. Hong, S. Ananda [et al.] // JNCI Cancer spectrum. - 2022. - Vol.6, №1. - pkab100.

128. Mo S. Early detection of molecular residual disease and risk stratification for stage I to III colorectal cancer via circulating tumor DNA methylation / S. Mo, L. Ye, D. Wang [et al.] // JAMA Oncology. - 2023. - Vol.9, №6. - P. 770-778.

129. Moghadamyeghaneh Z. Preoperative l eukocytosis in colorectal cancer patients / Z. Moghadamyeghaneh, M.H. Hanna, J.C. Carmichael [et al.] // Journal of American college of surgeons. - 2015. - Vol.221, №1. - P. 207-214.

130. Nemati S.S. Photoelectrochemical biosensors: prospects of graphite carbon nitride-based sensors in prostate-specific antigen diagnosis / S.S. Nemati, G. Dehghan // Analytical biochemistry. - 2025. - №696. - P. 115686.

131. Neofytou K. CALy Prognostic Score (CEA, ALP, Lymphocyte count) as a predictor of survival after hepatectomy for liver-only colorectal metastases / K. Neofytou, A. Giakoustidis, S. Mudan // The official journal of Balkan union of oncology. - 2015. - Vol.20, №3. - P. 746-755.

132. Niloofa R. Autoantibodies in the diagnosis, prognosis, and prediction of colorectal cancer / R. Niloofa, M.I. De Zoysa, L.S. Seneviratne // Journal of cancer research and therapeutics. - 2021. - Vol.17, №4. - P. 819-833.

133. Onyebuchi E.P. Alkaline phosphatase profile of patients with fibro-osseous lesions / E.P. Onyebuchi, S.O. Ajike, R. Yusuf [et al.] // Iranian journal of otorhinolaryngology. - 2022. - Vol.34, №125. - P. 311-318.

134. Pardini B. A Fecal MicroRNA signature by small RNA sequencing accurately distinguishes colorectal cancers: results from a multicenter study / B, Pardini, G. Ferrero, S. Tarallo [et al.] // Gastroenterology. - 2023. - Vol. 165, №3. - P. 582-599.

135. Peluso G. Current tissue molecular markers in colorectal cancer: a literature review / G. Peluso, P. Incollingo, A. Calogero [et al.] // Biochemistry research international.

- 2017. - №2017. - P. 2605628.

136. Pernick N. Cytokeratin 20 (CK20, K20) [Электронный ресурс] - URL: https://www.pathologyoutlines.com/topic/stainsck20.html (дата обращения: 22.10.2024 г.).

137. Philip A.K. Computed tomographic colonography / A.K. Philip, M.G. Lubner, B. Harms // The surgical clinics of New America. - 2011. - Vol.91, №1. - P. 127-139.

138. Pickhardt P.J. Colorectal cancer: CT colonography and colonoscopy for detection

- systematic review and meta-analysis / P.J. Pickhardt, C. Hassan, S. Halligan, R. Marmo // Radiology. - 2011. - №259. - Р. 393-405.

139. Pierantoni C. Molecular pathways of colorectal cancer development: mechanisms of action and evolution of main systemic therapy compounds / C. Pierantoni, L. Cosentino, L. Riccardiello // Digestive Diseases. - 2024. - Vol.42, №4. - P. 319-324.

140. Porat-Ophir C. Chip level agitation effects on the electrochemical sensing of alkaline-phosphatase expressed from integrated liver tissue / C. Porat-Ophir, V. Dergachev, A. Belkin [et al.] // Sensors and actuators B: chemical. - 2015. - Vol.213.

- P. 465-473.

141. Pourali G. Circulating tumor cells and cell-free nucleic acids as biomarkers in colorectal cancer / G. Pourali, G. Khalili-Tanha, E. Nazari [et al.] // Current Pharmaceutical Design. - 2023. - Vol.29, №10. - P. 748-765.

142. Puchtler H. On the chemistry of formaldehyde fixation and its effects on immunohistochemical reactions / H. Puchtler, S.N. Meloan // Histochemistry. - 1985.

- Vol.82, № 3. - P. 201-204.

143. Rantanen P. The prognostic significance of microsatellite instability in colorectal cancer: a Swedish multi-center study / P. Rantanen, A. Kerânen, S. Barot [et al.] // International journal of colorectal diseases. - 2023. - Vol. 38, №1 - P. 197.

144. Razavi P. High-intensity sequencing reveals the sources of plasma circulating cellfree DNA variants / P. Razavi, B.T. Li, D.N. Brown [et al.] / Nature Medicine. - 2019.

- Vol.25, №12 - P. 1928-1937.

145. Regen S. Membrane-disrupting molecules as therapeutic agents: a cautionary note / S. Regen // JACS Au. - 2020. - Vol.1, №1 - P. 3-7.

146. Ren M. Simultaneous visualization of miRNA-221 and Caspase-3 in cancer cells for investigating the feasibility of miRNA -targeted therapy with a dual-color fluorescent nanosensor / M. Ren, Z. Chen, C. Ge [et al.] // Biosensors (Basel). - 2022.

- Vol.12, №7 - P. 444.

147. Riancho J.A. Diagnostic approach to patients with low serum alkaline phosphatase / J.A. Riancho // Calcified tissue international. - 2023. - Vol.112, №3 - P. 289-296.

148. Roshandel G. Colorectal cancer: epidemiology, risk factors and prevention / G. Roshandel, F. Ghasemi-Kebria, R. Malekzadeh // Cancers. - 2024. - Vol.16, №8 - P. 1530.

149. Saadi S. Circulating tumor cells in colorectal cancer - a review of detection methods and clinical relevance / S. Saadi, M. Aarab, I. Tabyaoui, N.T. Jouti // Contemporary oncology. - 2023. - Vol.27, №3 - P. 123-131.

150. Saha T. Wearable Electrochemical glucose sensors in diabetes management: a comprehensive review / T. Saha, R.D. Cano, K. Mahato [et al.] // Chemical reviews. -2023. - Vol.38, №3 - P. 217-222.

151. Santos G.M. Intestinal alkaline phosphatase: a review of this enzyme role in the intestinal barrier function / G.M. Santos, S. Ismael, J. Morais [et al.] // Microorganisms. - 2022. - Vol.10, №4 - P. 746.

152. Scherubl H. Tobacco smoking and gastrointestinal cancer risk / H. Scherubl // Visceral medicine. - 2022. - Vol.38, №3 - P. 217-222.

153. Sciurti E. Label-free electrochemical biosensor for direct detection of Oncostatin M (OSM) inflammatory bowel diseases (IBD) biomarker in human serum / E. Sciurti, M.A. Signore, L. Velardi [et al.] // Talanta. - 2024. - №271 - P. 125726.

154. Shah S.C. Colorectal cancer in inflammatory bowel disease: mechanisms and management / S.C. Shah, S.H. Itzkowitz // Gastroenterology. - 2022. - Vol. 162, №3

- P. 715-730.

155. Shan Z. Proteomic profiling reveals a signature for optimizing prognostic prediction in colon cancer / Z. Shan, D. Luo, Q. Liu [et al.] // Journal of cancer. - 2021.

- Vol.12, №8 - P. 2199-2205.

156. Sharhaki S. Decellularization with triton X-100 provides a suitable model for human kidney bioengineering using human mesenchymal stem cells / S. Sharhaki, A.E. Bideskan, M. Aslzare [et al.] / Life sciences. - 2022. - Vol.295. - P. 120167.

157. Sharma A. Wearable biosensors: an alternative and practical approach in healthcare and disease monitoring / A. Sharma, M. Badea, S. Tiwary [et al.] // Molecules. - 2021.

- Vol.26, №3 - P. 748.

158. Sharma U. Alkaline phosphatase: an overview / U. Sharma, D. Pal, L. Prasad // Indian journal of clinical biochemistry. - 2014. - Vol.29, №3 - P. 269-278.

159. Selma-Royo M. Maternal diet during pregnancy and intestinal markers are associated with early gut microbiota / M. Selma-Royo, I. Garcia-Mantrana, M. Calatayud [et al.] // European journal of nutrition. - 2021. - Vol. 60. - P. 1429-1442.

160. Siegel R.L. Colorectal cancer statistics, 2023 / R.L. Siegel, N.S. Wagle, A. Cercek [et al.] // CA: A Cancer journal for clinicians. - 2023. - Vol.73, №3 - P. 233-254.

161. Singh S.B. Role of Intestinal alkaline phosphatase in innate immunity / S.B. Singh, H.C. Lin // Biomolecules. - 2021. - Vol.11, №12 - P. 1784.

162. Smit M.A. Deep learning-based tumor-stroma ratio scoring in colon cancer correlates with microscopic assessment / M.A. Smit, F. Siompy, J.M. Borkhost [et al.] // Journal of pathology informatics. - 2023. - Vol.14. - P. 100191.

163. Soler M. Label-free nanoplasmonic sensing of tumor-associate autoantibodies for early diagnosis of colorectal cancer / M. Soler, M.C. Estevez, R. Villar-Vazquez [et al] // Analytica chimica acta. - 2016. - №930. - P. 31-38.

164. Song Z.M. Characterization of alkaline phosphatase-reactive neurons in the guinea-pig small intestine / Z.M. Song, S.J. Brookes, M. Costa // Neuroscience. -1994. - Vol.63, №4. - P. 1153-1167.

165. Stukovnik Z. Recent developments in electrochemical-impedimetric biosensors for virus detection / Z. Stukovnik, U. Bren // International journal of molecular sciences. - 2022. - Vol.23, №24 - P. 15922.

166. Sullivan L. Tumor stroma ratio and its significance in locally advanced colorectal cancer / L. Sullivan, R.R. Pacheco, M. Kmeid [et al.] // Current oncology. - 2022. -Vol.29, №5 - P. 3232-3241.

167. Sun J. Identification of novel protein biomarkers and drug targets for colorectal cancer by integrating human plasma proteome with genome / J. Sun, J. Zhao, F. Jiang [et al.] // Genome medicine. - 2023. - Vol.15, №1 - P. 75.

168. Suzuki Y. Active-phase plasma alkaline phosphatase isozyme activity is a sensitive biomarker for excessive fructose intake / Y. Suzuki, D. Yokoyama, C. Matsuura [et al.] // In Vivo. - 2023. - Vol.37, №5 - P. 1967-1974.

169. Symonds E.L. Assessment of tumor burden and response to therapy in patients with colorectal cancer using a quantitative ctDNA test for methylated BCAT1/IKZF1 / E.L.

Symonds, S.K. Pedersen, B. Yeo [et al.] // Molecular oncology. - 2022. - Vol.16, №210 - P. 2031-2041.

170. Teing F.Y.F. Liquid biopsy-based colorectal cancer screening via surface markers of circulating tumor cells / F.Y.F. Teing, N. Abu, S.N. Nasir [et al.] // Diagnostics (Basel). - 2021. - Vol.11, №11 - P. 2136.

171. Than M. Diagnostic miss rate for colorectal cancer: an audit / M. Than, J. Witherspoon, J. Shami [et al.] // Annals of gastroenterology. - 2015. - №28. - P. 9498.

172. Tonini V. Why is early detection of colon cancer still not possible in 2023? / V. Tonini, M. Zanni // World journal of gastroenterology. - 2024. - Vol.30, .№3 - P. 211224.

173. Veettil S.K. Role of diet in colorectal cancer incidence: umbrella review of metaanalyses of prospective observational studies / S.K. Veettil, T.Y. Wong, Y.S. Loo [et al.] // JAMA Network open. - 2021. - Vol.4, №2 - e. 2037341.

174. Velsen E. Serum alkaline phosphatase can be elevated in patients with hypophosphatasia due to liver disease / E. Velsen, Z. Zervou, M.C. Zillikens // European journal of medical genetics. - 2023. - Vol. 66, №11 - P. 104866.

175. Verhaert P. Alkaline phosphatase activity in the brain of the American cockroach Periplaneta Americana L. / P. Verhaert, H. Walgraeve, R. Downer // The Histochemical Journal. - 1990. - Vol. 22, №11. - P. 628-635.

176. Vuik F.E.R. Colon capsule endoscopy in colorectal cancer screening: a systematic review / F.E.R. Vuik, S.A.V. Nieuwenburg, S. Moen [et al.] // Endoscopy. - 2021. -Vol.53, №8 - P. 815-824.

177. Walach N. Leukocyte alkaline phosphatase and carcinoembryonic antigen in colorectal cancer patients (usefulness in the assessment of the stage) / N. Walach, A. Guterman, J.L. Zaidman [et al.] // Oncology. - 1991. - Vol.48, №2. - P. 128-130.

178. Wautier J.W. Old and new blood markers in human colorectal cancer / J.L. Wautier, M.P. Wautier // International journal of molecular sciences. - 2022. - Vol.23, №21 - P. 12968.

179. Westenbrink E. Development and application of a new electronic nose instrument for the detection of colorectal cancer / E. Westenbrink, N. O'Connell, C. Bailey [et al.] // Biosensors and Bioelectronics. - 2015. - №67. - P. 733-738.

180. Wolf A.M.D. Colorectal cancer screening for average-risk adults: 2018 guideline update from the American Cancer Society / A.M.D. Wolf, E.T.H. Fontham, T.R. Church [et al.] // CA: a cancer journal for clinicians. - 2018. - Vol. 68, №4 - P. 250281.

181. Wu X. A HER2-targeting antibody-MMAE conjugate RC48 sensitizes immunotherapy in HER2-positive colon cancer by triggering the cGAS-STING pathway / X. Wu, L. Xu, X. Li [et al.] // Cell death & disease. - 2023. - Vol.14, №8 -P. 550.

182. Wu X. The expression and clinical significance of GPR39 in colon cancer / X. Wu, Y. Dou, H. Xu [et al.] // Irish journal of medical science. - 2022. - Vol.191, №4 - P. 1577-1585.

183. Xie F. Association between physical activity and digestive-system cancer: An updated systematic review and meta-analysis / F. Xie, Y. You, J. Huang [et al.] // Journal of sport and heath science. - 2021. - Vol.10, №1 - P. 4-13.

184. Yamamoto T. Inflammation-related biomarkers for the prediction of prognosis in colorectal cancer patients / T. Yamamoto, K. Kawada, K. Obama // International journal of molecular sciences. - 2021. - Vol.22, №15 - P. 8002.

185. Yang M. Advances in non-electrochemical sensing of human sweat biomarkers: from sweat sampling to signal reading / M. Yang, N. Sun, X. Lai [et al.] // Biosensors.

- 2023. - Vol.14, №1 - P. 17.

186. Yin T.F. Identification of the circRNA-miRNA-mRNA regulatory network and its prognostic effect in colorectal cancer / T.F. Yin, D.Y. Zhao, Y.C. Zhou [et al.] // World Journal of clinical cases. - 2021. - Vol.9, №18 - P. 4520-4541.

187. Yu G.H. Diabetes and colorectal cancer risk: clinical and therapeutic implications / G.H. Yu, S.F. Li, R. Wei, Z. Jiang // Journal of diabetes research. - 2022. - №2022

- P. 1747326.

188. Zhang W. Electrochemical sensors for measurement of colorectal cancer biomarkers / W. Zhang, G. Xiao, J. Chen [et al.] // Analytical and bioanalytical chemistry. - 2021. - Vol.413. - P. 2407-2428.

189. Zhang Y. CircRNAs in colorectal cancer: potential biomarkers and therapeutic targets / Y. Zhang, J. Luo, W. Yang, W.C. Ye // Cell death and disease. - 2023. -Vol.14, №6 - P. 353.

190. Zhang Y. Pan-cancer circulating tumor DNA detection in over 10,000 Chinese patients / Y. Zhang, Y. Yao, Y. Xu [et al.] // Nature Communities. - 2021. - Vol.12, №1 - P. 11.

191. Zhang Z. Expression of SAMHD1 and its mutation on prognosis of colon cancer / Z. Zhang, P. Li, P. Sun // Oncology letters. - 2022. - Vol.24, №3 - P. 303.

192. Zhong X.Y. Increased concentrations of antibody-bound circulatory cell-free DNA in rheumatoid arthritis / X. Y. Zhong, I. von Muhlenen, Y. Li [et al.] // Clinical chemistry. - 2007. - Vol.53, №9. - P. 1609-1614.