Морфофункциональные характеристики митохондрий лимфоцитов у детей при различных формах недостаточности клеточного энергообмена тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.25, кандидат медицинских наук Шабельникова, Екатерина Игоревна

• Шабельникова, Екатерина Игоревна
• кандидат медицинских наук
• 0

Оглавление диссертации кандидат медицинских наук Шабельникова, Екатерина Игоревна

ВВЕДЕНИЕ

ОГЛАВЛЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Энергетический метаболизм в митохондриях.

1.2. Краткие сведения о морфологии митохондрий в норме и при патологии.

1.2.1. Виды повреждений митохондрий.

1.3. Общие вопросы патологии митохондрий и митохондриального генома.

1.4. Методы диагностики митохондриальной патологии у детей.

ГЛАВА 2. ХАРАКТЕРИСТИКА ОБСЛЕДОВАННЫХ ДЕТЕЙ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ.

2.1. Группы обследованных детей.

2.2. Методы исследования.

2.2.1. Морфологические методы исследования.

2.2.2. Биохимические методы исследования.

2.2.3. Иммунологические методы исследования.

ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ.

3.1. Морфологические исследования.

3.1.1. Основные цитохимические характеристики обследованных детей.

3.1.2. Основные данные электронно-микроскопических методов исследования.

3.1.3. Данные исследования биоптатов мышечной ткани.

3.2. Основные биохимические характеристики обследованных детей.

3.2.1. Характеристика содержания молочной и пировиноградной кислот в крови.

3.2.2. Характеристика содержания продуктов перекисного окисления липидов (гидроперекисей, малонового диальдегида) и общей антиокислительной активности плазмы у обследованных детей.

3.3. Основные данные иммунологического исследования.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Морфофункциональные характеристики митохондрий лимфоцитов у детей при различных формах недостаточности клеточного энергообмена»

Актуальность проблемы. Исследования адаптационных реакций клеточной системы, их причин, проявлений, молекулярных механизмов относятся к фундаментальным проблемам цитологии. Адаптационный синдром является необходимым звеном любого патологического процесса, поэтому для постановки правильного диагноза, для контроля за эффективностью лечения и для профилактики болезней необходимо проведение исследований клеточных и молекулярных характеристик этого синдрома.

В последнее десятилетие в медицине активно развивается так называемое «метаболическое направление», формирующее представление о роли нарушений клеточного энергообмена в развитии и течении самых разнообразных патологических процессов (энцефалопатий, миопатий, кардиопатий и др.) (Вельтищев Ю.Е. 1992; 1998, Вельтищев Ю.Е. и соавт. 1999; Luft R. 1994; Scheffler I.E.,2001).

Одной из причин нарушения клеточного энергообмена является митохондриальная дисфункция. Основные биохимические процессы, происходящие в митохондриях это - окисление жирных кислот, цикл трикарбоновых кислот, окислительное фосфорилирование, регуляция внутриклеточного распределения кальция, образование стероидов, регуляция апоптоза. В митохондриях интегрированы пути метаболизма белков, жиров и углеводов, осуществляются основные энергетические процессы. В связи с этим изменения митохондрий способны вызвать сложную цепь патологических процессов на уровне клетки и всего организма в целом.

Известно, что количество и биохимические характеристики митохондрий в клетках различных тканей неодинаковы и зависят от функции клеток. Например, митохондрии печени не могут образовывать ацетоацетил-КоА, в отличие от митохондрий сердца. Кроме того, митохондрии обладают выраженным полиморфизмом. Значительно варьируют их размер, форма, организация крист, состояние матрикса.

Полноценная функциональная активность митохондрий зависит от многих условий. Для её обеспечения в первую очередь необходимо наличие неповрежденных внутримитохондриальных мембран. Нарушение сопряжения дыхания с фосфорилированием характерно для адаптационных реакций.

Заболевания, связанные с нарушением митохондриальных функций чрезвычайно разнообразны. Различают наследственные заболевания, обусловленные мутациями митохондриальных или ядерных генов, кодирующих синтез митохондриальных белков - это первичная митохондриальная недостаточность, которая приводит к развитию известных тяжелых синдромов, таких как синдром Кернса - Сейра, Пирсона, MELAS, MERRF и многие другие, а также широкий круг болезней, одним из звеньев патогенеза которых является нарушение клеточной энергетики: синдром хронической усталости (Behan W.M.H. 1994; Plioplys-AV et al.1995; McArdle-A et al. 1996), мигрень (Hipolite I. 1994), кардиомиопатии, болезни соединительной ткани, сахарный диабет, тубулопатии, панцитопения, гипопаратиреоз и др. Выявлено влияние митохондриальной недостаточности на характер течения послеожогового рубцевания у детей, хронического тонзиллита, урологических заболеваний (Сухоруков, 2004).

Морфологический анализ наряду с биохимическим и молекулярно-генетическим методами традиционно занимает ведущее место в диагностике митохондриальной недостаточности. Наиболее информативным при этом считается анализ митохондрий в биоптатах скелетной мышцы. Однако, учитывая полисистемность поражения, митохондриальные изменения можно выявлять и в других тканях.

В последнее время для диагностики нарушений клеточного энергообмена используется цитохимический метод определения активности митохондриальных ферментов в лимфоцитах периферической крови (метод Р.П. Нарциссова). Достоинствами метода являются его малотравматичность, относительная простота, возможность неоднократного применения для изучения динамики изменений и низкая стоимость.

Расширяющиеся методические возможности, в частности, компьютерная фотометрия позволяют получить значительно больший объем информации. При этом остаются неясными многие вопросы. В частности, не проводится четкого разделения между изменениями, связанными с полисистемными нарушениями клеточного энергообмена (первичными и вторичными) и возможными изменениями при воспалительных процессах.

Кроме того, не существует четких алгоритмов выбора конкретных диагностических маркеров среди большого количества потенциально выявляемых морфо-функциональных характеристик митохондрий лимфоцитов, поэтому актуальной является проблема сравнительного анализа диагностической значимости этих показателей.

Исходя из вышеизложенного, была обоснована цель исследования;

Выявить морфо-функциональные характеристики адаптационных и патологических реакций митохондрий в лимфоцитах при различных формах полисистемного нарушения клеточного энергообмена у детей и определить возможность использования изученных параметров для диагностики митохондриальных болезней.

Для достижения поставленной цели в работе решались следующие задачи:

1. Определить цитохимические и ультраструктурные характеристики митохондрий лимфоцитов периферической крови у детей с митохондриальными энцефаломиопатиями.

2. Определить изменения цитоферментативной активности и особенности ультраструктуры митохондрий лимфоцитов периферической крови у детей с митохондриальной недостаточностью, сопутствующей наследственным заболеваниям, первично не связанным с нарушениями клеточного энергообмена.

3. Выявить морфо-функциональные особенности митохондрий лимфоцитов у детей с хроническими воспалительными заболеваниями (на примере болезней верхних дыхательных путей) и сопоставить эти параметры с соответствующими показателями при митохондриальных болезнях.

4. Определить биохимические и иммунологические показатели, сопутствующие полисистемной митохондриальной недостаточности, а также морфологические показатели дизэнергетических состояний, полученные при биопсии мышечной ткани у обследуемых детей.

5. Выявить среди изученных лабораторных показателей значимые для диагностики митохондриальных болезней у детей.

Научная новизна работы.

Впервые на основании комплексного морфо-функционального исследования митохондрий лимфоцитов периферической крови как на световом, так и на электронно-микроскопическом уровнях, выявлены их структурно-функциональные отличия при первичных и вторичных формах дизэнергетических состояний. Впервые проведена комплексная морфологическая оценка митохондрий лимфоцитов при хроническом воспалительном процессе. При сопоставлении полученных данных определены варианты адаптационных и патологических изменений митохондрий лимфоцитов.

Практическая значимость.

В комплексе изучаемых морфо-функциональных параметров митохондрий лимфоцитов периферической крови определены диагностически наиболее значимые показатели полисистемных митохондриальных нарушений. Выявлены маркеры адаптационных и патологических изменений митохондрий лимфоцитов, что необходимо для повышения эффективности дифференциальной лабораторной диагностики заболеваний, связанных с нарушениями клеточного энергообмена.

Решение поставленных задач осуществлялось в Научно-исследовательской лаборатории общей патологии (руководитель - профессор, доктор медицинских наук В.С.Сухоруков) Федерального государственного учреждения Московского НИИ педиатрии и детской хирургии (директор — профессор, доктор медицинских наук А.Д.Царегородцев) Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию.

Внедрение в практику. Разработанный способ дифференциальной диагностики полисистемной митохондриальной недостаточности у детей апробирован и внедрен в практическую работу Научно-исследовательской лаборатории общей патологии ФГУ Московского НИИ педиатрии и детской хирургии Министерства здравоохранения и социального развития РФ.

Апробация работы. Материалы работы доложены и обсуждены на совместном методическом совещании Научно-исследовательской лаборатории общей патологии и отдела наследственных и врожденных заболеваний МНИИ педиатрии и детской хирургии Росздрава, а также кафедры гистологии, цитологии и эмбриологии лечебного факультета РГМУ. Основные положения диссертации доложены на I, II и III Всероссийском конгрессе " Современные технологии в педиатрии и детской хирургии" 2002, 2003 и 2004 года, на Международной научной конференции, посвященной проблемам туберозного склероза 16-18 сентября 2004 года, Кембридж, Англия.

По теме диссертации опубликовано 26 печатных работ, из них 8 - в зарубежной печати.

Заключение диссертации по теме «Гистология, цитология, клеточная биология», Шабельникова, Екатерина Игоревна

выводы

1. Цитохимические методы исследования митохондрий лимфоцитов периферической крови достоверно отражают полисистемные нарушения клеточного энергообмена, что подтверждается корреляцией цитохимических параметров с показателями ультраструктурного исследования митохондрий, с данными гистологического исследования биоптатов скелетной мышечной ткани, а также с биохимическими параметрами полисистемной митохондриальной недостаточности.

2. При первичных нарушениях клеточного энергообмена (митохондриальные энцефаломиопатии, синдром Кернса-Сейра, синдром MELAS) митохондрии лимфоцитов периферической крови характеризуются: снижением количества органелл, их набуханием, значительной вытянутостью формы, образованием своеобразных комплексов и кластеризацией органелл, наличием тотальных или очаговых признаков разрушения ультраструктуры, нарушением показателей оптической плотности при цитохимической оценке, ферментативной активности.

3. При полисистемных митохондриальных нарушениях, не носящих первичного этиопатогенетического характера (синдром Элерса-Данло, синдром Марфана, туберозный склероз), морфо-функциональные изменения митохондрий лимфоцитов отличаются очаговостью и умеренностью ультраструктурных изменений, а также специфичными цитохимическими нарушениями.

4. При хроническом воспалительном процессе дифференциально-диагностические лабораторные показатели адаптивных изменений клеточного энергообмена отличаются признаками активизации, гипертрофии и пролиферации митохондрий, а также увеличением размеров гранул формазана при цитохимическом выявлении активности лактатдегидрогеназы.

Практические рекомендации:

1. При диагностике полисистемных нарушений клеточного энергообмена (митохондриальные энцефаломиопатии, синдром Кернса-Сейра и др.) следует использовать полученные в работе клинико-лабораторные цитохимические критерии, позволяющие значительно уменьшить число проводимых с этой целью биопсий мышечной ткани.

2. В целях дифференциальной лабораторной диагностики «первичных» и «вторичных» полисистемных митохондриальных нарушений может быть применен предложенный в работе способ морфометрического анализа.

3. Полученные данные могут быть использованы для дифференциальной диагностики патологических и адаптивных (при функциональном напряжении иммунокомпетентных клеток) изменений митохондрий лимфоцитов периферической крови.

4. Материалы исследования могут быть включены в лекционные курсы для студентов на кафедрах: гистологии, цитологии и эмбриологии и клинической лабораторной диагностики высших медицинских учебных заведений.

Список литературы диссертационного исследования кандидат медицинских наук Шабельникова, Екатерина Игоревна, 0 год

1. Артюхина Н.И., Саркисова К.Ю. —Индивидуальные различия в реакциях на острый стресс, связанные с типом поведения. Структурные изменения в мозге./ Бюл. эксперим. биол.мед., 1993, т.116, №8, с.210-214

2. Вельтищев Ю.Е., Бочков Н.П. Наследственная патология человека. М. 1992;

3. Вельтищев Ю.Е., Темин П. А. Митохондриальные болезни. // Наследственные болезни нервной системы: Руководство для врачей. — М: Медицина. 1998. -с. 496

4. Вельтищев Ю.Е., Казанцева JI.3., Юрьева Э.А. и соавт. Диагностический алгоритм выявления митохондриальных заболеваний среди детей с недифференцированными нарушениями нервно-психического и физического развития. Пособие для врачей. Москва 1999

5. Виноградов В.В. Гормоны, адаптация и системные реакции организма./ Минск, Наука и техника, 1989, 223с.

6. Дадали J1. Митохондриальные болезни. Российский медицинский журнал, 1996г., N5, с.19-21.

7. Казанцева JI. 3. , Юрьева Э.А., Клембовский А. И. и соавт. Критерии дифференциальной диагностики наследственных нарушений нервно-психического развития, обусловленных патологией митохондрий. Пособие для врачей. М 1999:16

8. Клембовский А. И., Сухоруков В. С. Митохондриальная недостаточность у детей. Арх патол 1997;59:5:3-7.

9. Клембовский А.И., Сухоруков В. С., Казанцева JI.3. Определение группы риска развития митохондриальной недостаточности среди детей с врожденными и наследственными метаболическими болезнями. Пособие для врачей. М. 1999. с. 15;

10. Кнорре Д.Г., Мызина С.Д. Биологическая химия. Москва "Высшая школа" 1992г.

11. А. Ленинджер. Митохондрия. Москва, 1966.

12. Ленинджер А. Основы биохимии. Под редакц. В.А. Энгельгардта Москва "Мир" 1985г.

13. Лойда 3., Госсрау Р., Шиблер Т. Гистохимия ферментов, лабораторные методы.

14. Нарциссов Р. П. Анализ изображения клетки следующий этап развития клинической цитохимии в педиатрии. Педиатрия, N4, 1998г., с. 101-105

15. Панин Л.Е. Энергетические аспекты адаптации./ Л., 1978;

16. Э.де Робертис, В. Новинский, Ф. Саэс Биология клетки, издательство «Мир», Москва, 1973;

17. Северин Е.С., Алейникова Т.Л., Осипов Е.В. Биохимия. М: Медицина 2000; с. 164.

18. Сироткин В. В. А. с. 1488720 СССР., 1984;

19. Сироткин В. В., Щукин С. И. Бюллетень экспериментальной биологии. 1990.-N3.

20. Сироткин В. В., Володин Н. Д. Усовершенствование способа морфометрии и использование его в электронно-микроскопических исследованиях. Бюллетень экспериментальной биологии и медицины, 1990г., N7, с. 100-103

21. Сухоруков В. С. Гетерогенность и клинико-морфологическая неоднородность митохондриальной патологии у детей. Автореф. дисс. д.м.н. М. 1998;

22. Сухоруков В. С., Нарциссов Р. П., Клембовский А. И. и соавт. Сравнительная диагностическая ценность анализа скелетной мышцы и лимфоцитов при митохондриальных болезнях. Арх патол 2000;2:62:19-22.

23. Сухоруков B.C. — Раннее выявление митохондриальной недостаточности у детей с недифференцированными формами задержки нервно-психического и физического развития- Сборник материалов «Нарушение клеточного энергообмена у детей»; с.43-58;

24. Тозлиян Е.В. Клиническое значение митохондриальных нарушений у детей с недифференцированными формами задержки нервно-психического развития. Автореф. дисс.к.м.н. Москва-2003

25. Шапошникова В. И., Нарциссов Р. П. Индивидуальный год — собственный календарь морфогенеза, заболеваний и устойчивости эффективной деятельности. Физкультура и спорт. М., 1984г

26. Шищенко В. М., Петричук С. В. и соавт. Новые возможности цитохимического анализа в оценке состояния здоровья ребенка и прогнозе его развития. Педиатрия, N4, 1998г., с. 96-101

27. Adisa А. О., Odutuga A.A. Changes in the activities of three diagnostic enzymes in the heart of rats following the consumption of diets deficient in zinc and essential fatty acids. Biochem-Mol-Biol-Int. 1998 Oct; 46(3): 571-6;

28. Anderssen-Cedergren Ebba Ultrastructure of motor endplate and sarcoplasmic components of mouse skeletal muscle fiber. J. Ultrastruct. Res. 2, 288, 1959

29. Anderson S., Bankier A.T., Barrell B.G. et al. Sequence and organization of the human mitochondrial genome // Nature. 1981. V. 290. P. 457-465

30. Beal M.F. Mitochondria in neurogen eration. In: Desmille C., Di Mauro S., eds. Mitochondrial disoders: from pathophysiology to acquired defects. New York: Springer, 2002:17-35.

31. Brealey D., Brand M., Hargreaves I, Heales S.L., Smolenski R., Davies N.A., Cooper C.E., Singer M., 2003, Association between mitochondrial dysfunction and severity and outcome of septic shock, Lancet 360, 219-223

32. Bonilla E., Sciacco M., Sparaco M. et al. New morphological approaches to the study of mitochondrial encephalomyopathies. // Brain. Pathol. 1992. — vol. 2.-p. 113-119

33. Baysal BE, Ferrell RE, Willett-Brozick JE, Lawrence EC, Myssiorek D, Bosch A, van der Mey A, Taschner PE. Mutations in SDHD, a mitochondrial complex II gene, in hereditary paraganglioma. Science 2000 Feb 4; 287(5454):848-51;

34. Brown D.T., Samuels D.C., Michael E.M. et al. Random genetic drift determines the level of mutant mtDNA in human primary oocytes // Am. J. Hum. Genet. 2001. V. 68. P. 533-536;

35. Behan W.M.H., Gow J.W., Simpson K., More I.A.R., Downie I., Holt I., Behan P.O. Mitochondrial findings in the chronic fatigue syndrome. / J.Pathol., 1994, v.173, Suppl., p.153;

36. Carelli V. Lebers hereditary optic neuropathy. In: Schapira AHV, Di Mauro S., eds. Mitochondrial disoders in neurology. 2nd ed. Boston: Butterworth-Heinemann, 2002

37. Cell and tissue biology: a text book of histology (ed.L.Weiss) Urban and Schwartzenberg, Baltimore 1988

38. Chen Q. Mitochondrial encephalomyopathy. Report of a case. // Chung-Hua-Shen-Ching-Shen-Ko-Tsa-Chin; 1990 Feb; 23(1); p. 38-40, 63.

39. Chinnery P. F., Johnson M. A., Taylor R. W. et al. A novel mitochondrial tRNA isoleucine gene mutation causing chronic progressive external ophthalmoplegia. // J. Neurology. 1997. - vol. 49. - p. 1166-1168

40. Christodoulou J., Petrova-Benedict R. et all. An unusual patient with neonatal Marfan phenotype and mitochondrial complex I deficiensy. // Eur. J. Pediatr. -1993.-Vol. 152.-p. 428-432.

41. Chinnery P.F., Howell N., Lightowlers R.N., Turnbull D.M. MELAS and MERRF: the relationship between maternal mutation load and the frequency of clinically affected offspring//Brain. 1998. V. 121. P. 1889-1894;

42. Chinnery P.F., Johnson M.A., Wardell T.M. et al. The epidemiology of pathogenic mitochondrial DNA mutations// Ann. Neurol. 2000. V. 48. P. 188193.

43. Chinnery P.F., Turnbull D.M.- Epidemiology and treatment og mitochondrial disoders.Am J Med Genet 2001;106:94-101

44. Das A. M., Jolly R. D. et al. Anomalies of mitochondrial ATP synthase regulation in four different types of neuronal ceroid lipofuscinosis. // Mol-Genet-Metab. 1999 Apr; 66(4): 349-55

45. Duncan C.J. Mitochondrial division in animal cells./ In: S.A. Boffey and D.Lloid (Eds.), Division and segregation of organelles, Cambridge Univ.Press, 1988, p.95-113

46. DiMauro S., Moraes C. Mitochondrial encephalomyopathies. // Arch. Neurol. 1993.-vol. 50.-p. 1197-1208

47. Elleder M., Sokolova J. et al. Follow-up study of subunit с of mitochondrial ATP synthase (SCMAS) in Batten disease and in unrelated lysosomal disorders. //Acta-Neuropathol-Berl. 1997 Apr; 93(4): 379-90

48. Estivill X., Govea N., Barcelo A. et al. Familial progressive sensoneural deafness is mainly due to the mtDNAA1555G mutation and is enhanced by treatment with aminoglycosides // Am. J. Hum. Genet. 1998. V. 62. P. 27-35

49. Ernster L., Schatz G. Mitochondria: a historical review. / J.Cell.Biol., 1981, v.91, N3, pt 2, p.227-255

50. Fawcett D.W. (1986) A textbook of histology. W/В/ Saunders, Philadelphia;

51. Fentoni V., Testa D. Cockayne syndrome or mitochondrial encephalomyophathy ? A case report. // Riv. Neurobiol. 1995. - vol. 41. - p. 667-670;

52. Fischel-Chodsian N. Mitochondrial mutations and hearing loss: paradigm for mitochondrial genetics // Am. J. Hum. Genet. 1998. V. 62. P. 15-19;

53. Flatmark Т., Kryvi H., Tangeras A. Induction of megamitochondria by cuprizone biscyclo hexanone oxaldihydrazone. Evidence for an inhibition of the mitochondrial process./Eur. J.Cell Biol., 1980, v.23, p.141-148.

54. Goncalves A., Oliveira C., Ferro M.A., Dinis M., Cunha L. Glutamate dehydrogenase deficiency in Machado-Joseph disease. Can J Neurol Sci 1993 May; 20(2): 147-50;

55. Ghadially, F.N. (1988) Ultrastructural pathology of the cell and matrix. Butterworths, London

56. Green D.R., Reed J.C. Mitochondria and apoptosis // Science. 1998. V. 281. P. 1309-1316

57. Goto Y., Koga Y. Horai S., Nonaka I. Chronic progressive external ophthalmoplegia: a correlative study of mitochondrial DNA deletions and their phenotypic expression in muscle biopsies // J. Neurol. Sci. 1990. V. 100. P. 63-69;

58. Gerbitz K.D., van den Ouweland J.M., Maassen J.A., Jaksch M. Mitochondrial diabetes mellitus: a review // Biochem. Biophys. Acta. 1995. V. 1271. P. 253-260.

59. HartL.M.,JansenJJ.,LemkesH.H. etal. Heteroplasmy level of a mitochondrial gene mutation associated with diabetes mellitus decrease in leukocyte DNA upon aging // Hum. Mut. 1996. V. 7. P. 193-197;

60. Hanna M.G., Nelson I.P. Genetics and molecular patho-genesis of mitochondrial respiratory chain diseases // Cell. Mol. Life Sci. 1999. V. 55. P. 691-706

61. Howell N., Bogolin C., Jamieson R. et al. mtDNA mutations that cause optic neuropathy: how do we know? // Am. J. Hum. Genet. 1998. V. 62. P. 196-201

62. HowellN., Kubacka I., Halv or son S.,Mackey D. Leber's hereditary optic neuropathy: the etiological role of a mutation in the mitochondrial cytochrome b gene//Genetics. 1993. V. 133. P. 133-136;

63. Howell N., Xu M., Halvorson S. et al. A heteroplasmic LHON family: tissue distribution and transmission of the 11778 mutation // Am. J. Hum. Genet. 1994. V. 55. P. 203-206;

64. Howell N., Kubacka I., Mackey D.A. How rapidly does the human mitochondrial genome evolve? // Am. J. Hum. Genet. 1996. V. 59. P. 501509.

65. Hipolite I. Migraine: la piste des mitochondries. / J.Int.Med., 1994, v.321, p.17

66. Hatefi Y. The mitochondrial electron transport and oxidative phosphorylation system. // Annual Review of Biochemistry. 1988. - vol. 54. - p. 1015-1069;

67. Jenuth J.P., Peterson A.C., Fu K., Shoubridge E.A. Random genetic drift in the female germline explains the rapid segregation of mammalian mitochondrial DNA // Nat. Genet. 1996. V. 14. P. 146-151

68. Korf B.R. Mitochondrial inheritance // Human genetics. A problem-based approach / Ed. Korf B.R. Boston: Blackwell Scientific Inc., 1996. P. 238-259;

69. Kogelnik A.M., Lott M.T., Brown M.D. et. Al. MITO-MAP: a human mitochondrial genome database 1998 update // Nucl. Acids Res. 1998. V. 26. P. 112-115;

70. KeiT D.S.: Protean manifestations of mitochondrial diseases: A minireview. J Pediatr Hematol Oncol 19:279-286, 1997

71. Kumode M., Yamano Т., Shimada M. Histochemical study of mitochondrial enzymes in cerebellar cortex of macular mutant mouse, a model of Menkes kinky hair disease.//Acta-Neuropathol-Berl. 1994; 87 (3): 313-6

72. Kubota N., Hay ashy J., Iwamura Y. Induction of a particular deletion in mitochondrial DNA by X-rays depends on the inherent radiosensitivity of the cells // Radiat. Res. 1997. V. 148. P. 395-398.

73. Lindal S., Lund I., Aasly J. et al. Mitochondrial diseases and myopathies: a series of muscle biopsy specimens with ultrastructural changes in the mitochondria. // Ultrastruct-Pathol; 1992 May-Jun; 16(3); p. 263-75

74. Larsson N. G., Eikem H. G. et al. Lack of transmission of deleted mtDNA from a woman with Kearns-Sayre syndrome to her child. // Am. J. Hum. Genet. 1992. - vol. 50. - p. 360-363;

75. Larsson N.G., Clayton D.F. Molecular genetic aspects of human mitochondrial disorders // Annu. Rev. Genet. 1995. V. 29. P. 151-178;

76. Lightowlers R.N., Chinnery P.F., Turnbull D.M., Howell N. Mammalian mitochondrial genetics: heredity, heteroplasmy and disease // Trends. Genet. 1997. V. 13. P. 450-455

77. Lui V.W., Zhang C., Nagley P. Mutations in mitochondrial DNA accumulate differentially in three tissues during aging // Nucl. Acids. Res. 1998. V. 26. P. 1268-1275;

78. Lestienne P., Ponsot G. Kearns-Sayre syndrome with muscle mitochondrial DNA deletion // Lancet. 1988. V. l.P. 885

79. Low F.N. Mitochondrial structure. J. Biophysic. And Biochem. Cytol., 1956, 2 N 4 suppl. 337

80. Luft R.// Proceed.Natl.Sci.USA.-1994.-v.91, № 19.-p.8731-8738;

81. Mackey D.A., Oostra R.J., Rosenberg T. et al. Primary pathogenic mtDNA mutations in multigeneration pedigrees with Leber hereditary optic neuropathy//Am. J. Hum. Genet. 1996. V. 59. P. 481-485;

82. Mariotti С., Uziel G., Carrara F., DiDonato V. et al. Early-onset encephalomyopathy associated with tissue-specific mitochondrial DNA depletion: a morphological, biochemical and molecular-genetic study. // J. Neurol. 1995. - vol. 242. - p. 547-556;

83. Maaswinkel-Mooi P. D., Scholte H. R. et al. Depletion of mitochondrial DNA in the liver of a patient with lactic acedemia and hypoketonic hypoglycemia. // J. Pediatr. 1996. - vol. 128. - p. 679-683;

84. Majander A., Pihko H., Santavuori P. Palmitate oxidation in muscle mitochondria of patients with the juvenile form of neuronal ceroid-lipofuscinosis. //Am. J. Med. Genet. 1995 Jun 5; 57(2): 298-300;

85. Mashima Y., Hiida Y., Oguchi Y. et al. High frequency of mutations at position 11778 in mitochondrial ND4 gene in Japanise families with Leber's hereditary optic neuropathy//Hum. Genet. 1993. V. 92. P. 101-102

86. McArdle-A; McArdle-F; Jackson-MJ; Page-SF; Fahal-I; Edwards-RH -Investigation by polymerase chain reaction of enteroviral infection in patients with chronic fatigue syndrome./ Clin-Sci-Colch. 1996 Apr; 90 (4): 295-300.

87. Melov S., Shoffner J.M., Kaufman A., Wallace D.C. Marked increase in The number and variety of mitochondrial DNA rearrangement in aging human skeletal muscle //Nucl. Acids Res. 1995. V. 23. P. 4122-4126;

88. Moraes С. Т., DiMauro S., Bonilla E., Zeviani M. et al. Mitochondrial DNA deletions in progressive external ophthalmoplegia and the Kearns-Sayre syndrome. //NewEngl. J. Med. 1989. - vol. 320. - p. 1293-1299

89. Morgan-Hughes J. A., Michael G. Hanna. Mitochondrial encephalomyopathies: the enigma of genotype versus phenotype. Biochimica et Biophysica Acta 1410 (1999), p. 125-145

90. MoilanenJ.S.,Majamaa K. Relative fitness of carriers of the mitochondrial DNA mutation 3243A > G // Eur. J. Hum. Genet. 2001. V. 9. P. 59-62

91. Olsson С., Zethelius В., Lagerstrom-Fermer M. et al. Level of heteroplasmy for the mitochondrial mutation A3243G correlates with age at onset of diabetes and deafness // Hum. Mut. 1998. V. 12. P. 52-58.

92. Palade G.E. Elektron Mikroscopy of mitochondria and Other Cytoplasmic Structures. In: Enzymes: Units of Biological Structure and Function. New York, Academic Press, Inc. 1956,

93. Palade G. An electron microscope study of the mitochondrial structure. / J. Histochem. Cytochem., 1953, 1, p. 188;

94. Plioplys-AV; Plioplys-S Electron-microscopic investigation of muscle mitochondria in chronic fatigue syndrome. / Neuropsychobiology. 1995; 32 (4): 175-81.

95. Popanda 0., Fox G., at all. Modulation of DNA polimerases alpha, delta and epsilon by lactate dehydrogenase and 3-phosphoglycerate kinase. Biochim.-Biophys.-Acta. 1998 Apr 1; 1397(1): 102-17

96. Poulton J., Brown G.K. Investigation of mitochondrial disease //Arch. Dis. Child. 1993. V. 73. P. 94-97

97. Poulton J., O'Rahilly S., Morten K.J., Clark A. Mitochondrial DNA, diabetes and pancreatic pathology in Kearns-Sayre syndrome // Diabetologia. 1995. V. 38. P. 868-871.

98. Rhodin J. "Correlation of Ultrastructural Organization and Function in Normal and Experimentally Changea Proximal Convoluted Tubule. Cells of the Mouse kidney". Dissertation, Karolinska Institute, Stockholm, 1954

99. Riordan-Eva P., Sanders M.D., Govan G.G. et al. The clinical features of Leber's hereditary optic neuropathy defined by the presence of a pathogenic mitochondrial DNA mutation // Brain. 1995. V. 118. P. 319-337;

100. Robinson В. H. Lacticacidemia: biochemical, clinical and genetic considerations. // In Advances in Human Genetics , Plenum Press, New York. -1989.-pp. 151-179

101. Robinson В. H., Glerum D. M., Chow W. et al The use of skin fibroblast cultures in the detection of respiratory chain defects in patients with lacticacidemia. // Pediatric Research. 1990. — vol. 28. - p. 549-555.

102. Ross O.A., Hyland P., Curran M.D., et al., 2002. Mitochondrial DNA damage in lymphocytes: a role in immunosenescence? Exp. Gerontol.37 (2-3), 329340

103. Saraste M. Oxidative phosphorilation at the desiecle // Science. 1999. V. 283. P. 1488-1493

104. Salviati L, Sacconi S, Mancuso M, et al. Mitochondrial DNA depletion and dGK gene mutations. Ann Neurol. 2002; 52: 311-7

105. Schuchmann S., Muller W., Heinemann U. Altered Ca2+ signaling and mitochondrial deficiencies in hippocampal neurons of trisomy 16 mice: a model of Down's syndrome. J-Neurosci. 1998 Sep. 15 ; 18(18): 7216-31;

106. Schon T.A., Bonilla Т., DiMauro S. Mitochondrial DNA mutations and pathogenesis // J. Bioenerg. Biomembr. 1997. V. 29. P. 131-149;

107. Schon E.A., Manfredi G. Neuronal degeneration and mitochondrial dysfunction. J. Clin Invest 2003; 111: 303-12

108. Shashidharan P., Michaelidis T.M., Robakis N.K. et al. Novel human glutamate dehydrogenase expressed in neural and testicular tissues and encoded by an X-linked intronless gene. J Biol Chem 1994 Jun 17;269(24): 16971-6;

109. Shoffner J.M.: Oxidanve Phosphorylation Diseases, ed 8, (The Metabolic Basis of inherited Disease, vol 2.) New York, McGraw-Hill, 2001, pp. 23672423)

110. Shoffner J.M., Wallace D.C. Oxidative phosphorylation diseases and mitochondrial DNA mutations: diagnosis and treatment // Annu. Rev. Nutr. 1994. V. 14. P. 535-568;

111. Shoffner J. M., Wallace D. C. Mitochondrial genetics: principles and practice. Am J Hum Genet 1992; 51:6:1179-1186

112. Sjiistrand F.S. Electron microscopy of mitochondria and cytoplasmic double membranes. Ultrastructure of rod-shaped mitochondria. / Nature, 1953, v. 171, p. 30

113. Servidei S. Mitochondrial encephalomyopathies: gene mutation. Neuromuscul Disord 2002; 12:101-10

114. Smeitink J., Ruitenbeek W., Sengers R. et al. // J. Inherit. Metab. Dis. 1994. -Vol. 17, N 1. -p. 67-73

115. Suchorukov V. S., Nartsissov R. P., Petrichuk S. V., Vasilev S. et al. Peripheral lymphocytes as a mitochondrial insufficiency test. Eur J Med Res 2000; 5:1:31: 48-49

116. Syed S.E., Engel P.C. Inhibition of glutamate dehydrogenase by covalent coenzyme-substrate adducts: a re-examination. Biochem Mol Biol Int 1993 Jun; 30(2):283-91;

117. Thieme H., WissingerB., Jandeck C. et al. A pedigree of Leber's hereditary optic neuropathy with visual loss in childhood, primarily in girls // Graefes Arch. Clin. Exp. Ophthalmol. 1999. V. 237. P. 714-719

118. Tandler В., Hoppel C.L. Division of giant mitochondria during recovery from cuprizone intoxication./ J. Cell Biol., 1973, v.56, p.266-272

119. Tanji H., Takeda A., Tateyama M et al. Progressive cerebellar ataxia and distal amyotrophy of Charcot-Marie-Tooth type with hyperglutamataemia: two sibling cases. Rinsho Shinlceigaku 1995 Jul; 35(7):793-7.

120. Walker-UA; Byrne-E — The therapy of respiratory chain encephalomyopathy: a critical review of the past and current perspective./ Acta-Neurol-Scand. 1995 Oct; 92(4); 273-80

121. Wallace D.C.: Mitochondrial genetics: A paradigm for aging and degenerative diseases? Science 256:628-632,1992

122. Wallace D.C., Singh G., lott M.T. et. al. Mitochondrial DNA mutation associated with Leber's hereditary optic neuropathy // Science. 1988. V. 242. P.1427-1430;

123. Wallace D.C., Zheng X.X., lott M.T. et. al. Familial mitochondrial encephalomyopathy (MERRF): genetic, pathophysiological, and biochemical characterization of a mitochondrial DNA disease // Cell. 1988. V. 55. P. 601610

124. Wallace D.C. Mitochondrial diseases in man and mouse//Science. 1999. V. 283. P. 1482-1488;

125. Wallace D.C., Lott M.T., Brown M.D., Kerstann K. Mitochondria and neuroophthalmologic diseases // The matabolic and molecular basis of inherited disease / EdsScriver C.R., Beavdet A.L., Valle D. N.Y.: McGraw-Hill, 2001. V. 2. P. 2425-2512

126. Wallace D.C., Brown M.D., Lott MJI. Mitochondrial DNA variation in human evolution and disease // Gene. 1999. V. 238. P. 211-230;

127. Wallace D.C., Singh G., Lott M.T. et al. Mitochondrial DNA mutation associated with Leber's hereditary optic neuropathy // Science. 1988. V. 242. P. 1427-1430

128. Wallace D.C., Zheng X.X., Lott M.T. et al. Familial mitochondrial encephalomyopathy (MERRF): genetic, pathophysiological, and biochemical characterization of a mitochondrial DNA disease // Cell. 1988. V. 55. P. 601610;

129. Wallace D.C., Singh G., Lott M.T. et al. Mitochondrial DNA mutation associated with Leber's hereditary optic neuropathy // Science. 1988. V. 242. P. 1427-1430.

130. Weber K., Wilson J.N., Taylor L., et al. A new mtDNA mutation showing accumulation with time and restric tion to skeletal muscle // Am. J. Hum. Genet. 1997. V. 60. P. 373-380.

131. Wisniewski К. E., Golabek A. A., Kida E. Increased urine concentration of subunit с of mitochondrial ATP synthase in neuronal ceroid-lipofuscinoses patients. // J. Inherit. Metab. Dis. 1994; 17(2): 205-210.

132. Williams A. J., Coakley J. at all. Automated analysis of mitochondrial enzymes in cultured skin fibroblasts. Anal.- Biochem. 1998 Jun 1; 259(2): 176-80.

133. Zeviani M., Moraes C.T., DiMauro S. et al. Deletions of mitochondrial DNA in Kearns-Sayre syndrome // Neurology. 1988. V. 38. P. 1339-1346

134. Zichler H., Geisert O., von Haeseler A., Paabo S. A nuclear "fossil" of the mitochondrial D-loop and the origir of modern humans // Nature. 1995. V. 378. P. 489-492

135. Zullo S., Sieu L.C., Slightom J.L. et al. Mitochondrial D-loop sequences are integrated in the rat nuclear genome // J. Mol. Biol. 1991. V. 221. P. 12231235.