Состояние свободнорадикальных процессов и содержание веществ низкой и средней молекулярной массы у крупного рогатого скота в постнатальном онтогенезе тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 03.00.13, кандидат биологических наук Конева, Ирина Владимировна

• Конева, Ирина Владимировна
• кандидат биологических наук
• 2005

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Конева, Ирина Владимировна

03.00.13 - физиология 03.00.04 - биохимия

Диссертация на соискание ученой степени кандидата биологических наук

Научные руководители: заслуженный деятель науки РФ, доктор биол. наук, профессор Анатолий Яковлевич Рябиков; кандидат биол. наук, доцент Ирина Петровна Степанова

Омск

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

АОС - антиоксидантная система

АФК - активные формы кислорода

ВНСММ - вещества низкой и средней молекулярной

ДК - диеновые конъюгаты

ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота

КРС - крупный рогатый скот

МДА - малоновый диальдегид

ПОЛ - пероксидное окисление липидов

СОД - супероксиддисмутаза

CP - свободный радикал

СРО - свободнорадикальное окисление

ТХУ - трихлоруксусная кислота

XJI - хемилюминесценция

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ.

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Современные представления о роли свободнорадикальных процессов.

1.2. Характеристика и механизм действия антиоксидантной системы.

1.3. Окислительный стресс в норме и при патологиях.

1. 4. Возможности совместного использования показателей состояния ПОЛ, АОС с интегральным показателем уровня веществ низкои и средней молекулярной массы для диагностики нарушений обмена веществ.

ГЛАВА 2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Материал и методы исследования.

2.2. Состояние процессов пероксидного окисления липидов у крупного рогатого скота в постнатальном онтогенезе и при разных физиологических состояниях.

2. 3. Состояние антиоксидантной системы у крупного рогатого скота в постнатальном онтогенезе и при разных физиологических состояниях.

2. 4. Корреляция процессов пероксидного окисления липидов с состоянием антиоксидантной системы у крупного рогатого скота.

2.5. Корреляция процессов пероксидного окисления липидов, состояния антиоксидантной систем с содержанием с веществ низкой и средней молекулярной массы у крупного рогатого скота и в эксперименте.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Состояние свободнорадикальных процессов и содержание веществ низкой и средней молекулярной массы у крупного рогатого скота в постнатальном онтогенезе»

Актуальность исследования

Высокоинформативная характеристика метаболического статуса сельскохозяйственных животных и раннее выявление развивающихся нарушений обмена веществ с помощью современных биохимических и физиологических методов исследования способствует своевременному принятию профилактических мер. В последние годы большое внимание уделяется изучению свободнорадикального метаболизма, главным образом, пероксидного окисления липидов (ПОЛ) и состояния антиоксидантной системы (АОС), так как разобщение этих процессов существенно снижает резистентность организма к воздействию неблагоприятных факторов и является причиной многих патологических состояний [Halliwell,1992; Fridovich, 1994; Ito et al., 1994; Libby,1995; H. Morihiko, 1995; Ю.В. Абакумова и совт. 1996; B.T. Величковский, 2000; В.В. Абрамченко, 2001; Н.К. Зенков и соавт., 2001; Р.Х. Кармалиев, 2002]. Для коррекции патологических состояний широко применяются антиоксиданты, в то же время их применение может быть оправдано, если имеются достоверные сведения о состоянии системы ПОЛ/АОС в организме. В медицине все шире используются методы интегральной оценки интенсивности ПОЛ и состояния АОС основанные на регистрации спонтанной, либо активированной хемилюминесценции тест-объекта. [Ю. А Владимиров и соавт., 1990, P.P. Фархутдинов и соавт., 2000; Т. Д. Журавлева и соавт., 2003]. Однако в ветеринарии использование этого метода ограничено, практически не имеется данных о состоянии ПОЛ и АОС в организме сельскохозяйственных животных, в частности крупного рогатого скота (КРС). Также отсутствуют сведения о сопряжении свободнорадикальных процессов с содержанием веществ низкой и средней молекулярной массы (ВНСММ) крови, уровень которых рекомендуется использовать в качестве «критерия здоровья» [М.Я. Малахова, 1993]. Представляет практический интерес и является актуальным выявление взаимосвязи между показателями ПОЛ, АОС и ВНСММ у КРС для разработки патогенетически обоснованных методов коррекции нарушений метаболизма. Учитывая, что одной из возможных причин сдвигов в обмене веществ является потребление кормов и биодобавок, р содержащих ацетальдегид [L. Feiman, С, Lieber, 1999], интересно было проследить взаимосвязь между процессами ПОЛ, АОС и содержанием ВНСММ в эксперименте на лабораторных животных при развитии интоксикации уксусным альдегидом.

Цель исследования. Выявление особенностей протекания свободнорадикальных процессов пероксидации липидов, состояния антиоксидантной системы и взаимосвязи их с уровнем ВНСММ у крупного рогатого скота в постнатальном онтогенезе и при разных физиологических состояниях для совершенствования оценки их метаболического статуса, ц Задачи исследования:

1. Изучить интенсивность процессов пероксидного окисления липидов и состояние антиоксидантной системы в организме крупного рогатого скота клинически здорового и с признаками нарушенного обмена веществ.

2. Определить степень сбалансированности процессов пероксидного окисления липидов с состоянием антиоксидантной системы и уровнем веществ низкой и средней молекулярной массы у крупного рогатого скота в норме и с клиническими признаками метаболических нарушений.

3. Выявить взаимосвязь между показателями пероксидного окисления липидов, антиоксидантной системы и веществ низкой и средней молекулярной массы крови при острой химической интоксикации в эксперименте.

Научная новизна работы. Установлены возрастные особенности деятельности прооксидантной и антиоксидантной систем у крупного рогатого скота в физиологических условиях. Показано, что с 2-х месячного возраста интенсивность процессов пероксидации липидов у клинически здорового крупного рогатого скота находится на постоянном уровне,аполноценная функциональная антиоксидантная система окончательно формируется к 6-ти месячному возрасту. Выявлены ф особенности свободнорадикальных процессов и состояния АОС у коров в ходе репродуктивного цикла. Интенсивность свободнорадикального окисления липидов поддерживается у здоровых коров на постоянном уровне независимо от физиологического состояния. При метаболических нарушениях неспецифического характера отмечается активизация пероксидного окисления липидов и истощение системы антиоксидантной защиты. Впервые рассчитан коэффициент сбалансированности, представляющий собой отношение показателей состояния АОС и интенсивности ПОЛ. Установлена корреляция показателей интенсивности ПОЛ и состояния АОС с уровнем ВНСММ в крови коров и телок в норме и при метаболических нарушениях. Усиление свободнорадикального окисления способствует накоплению ВНСММ в крови животных. Получены новые сведения об интенсивности процессов ПОЛ, состояния АОС и сопряжения этих процессов с накоплением ВНСММ в плазме крови и эритроцитах в норме и при интоксикации уксусным альдегидом Показано, что усиление интенсивности пероксидных процессов приводит к повышению содержания ВНСММ в плазме крови и эритроцитах.

Практическая значимость работы. Результаты исследований позволяют рекомендовать определение интенсивности ПОЛ, АОС и концентрации ВНСММ для контроля над над состоянием здоровья животного и для своевременного выявления отклонений в обмене веществ. Рассчитанный коэффициент сбалансированности, представляющий собой отношение показателей состояния АОС и интенсивности ПОЛ является критерием оценки уровня свободнорадикального метаболизма и может быть использован для раннего выявления метаболических сдвигов. Полученные сведения о состоянии свободнорадикальных процессов необходимо использовать при составлении рационов кормления крупного рогатого скота. КРС. Результаты исследований отражены в учебном пособии «Биохимия печени и почек», рекомендованном Учебно-методическим объединением вузов РФ по образованию в области зоотехнии и ветеринарии для студентов вузов по специальности «Ветеринария».

Апробация работы. Материалы диссертации доложены на: IV Съезде физиологов Сибири (Новосибирск, 2001); научно-практической конференции, посвященной 40-летию Алтайского государственного аграрного университета (Барнаул, 2002); научных конференциях профессорско-преподавательского состава и аспирантов Омского государственного аграрного университета (2001, 2002, 2003, 2004).

Публикации. По материалам диссертации опубликовано 11 научных работ.

Объём и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 144 страницах печатного текста и состоит из введения, обзора литературы, собственных исследований, заключения, выводов, иллюстрирована 14 таблицами, 33 рисунками. Библиографический список включает 217 источников, в том числе 87 - зарубежных авторов.

Заключение диссертации по теме «Физиология», Конева, Ирина Владимировна

Выводы.

1. Интенсивность процессов пероксидного окисления липидов у клинически здорового крупного рогатого скота стабилизируется к 2 месячному возрасту; антиоксидантная система окончательно формируется к 6 месячному возрасту.

2. У клинически здоровых коров в ходе репродуктивного цикла процессы пероксидного окисления липидов протекают на постоянном уровне, а антиоксидантная система достоверно усиливает свое действие у коров при наиболее напряженных для них физиологических состояниях.

3. У клинически здорового крупного рогатого скота независимо от возраста и физиологического состояния существует сопряжение свободнорадикальных реакций пероксидации липидов с состоянием антиоксидантной системы. У животных с клиническими признаками нарушения обмена веществ наблюдается усиление пероксидного окисления липидов (в среднем на 60%) и снижение емкости антиоксидантной системы ( в среднем на 15%).

4. Коэффициент сбалансированности, который представляет собой отношение показателя состояния антиоксидантной системы к показателю пероксидного окисления липидов, позволяет выявить нарушения метаболизма на ранних стадиях. Значения коэффициента сбалансированности клинически здоровых животных достоверно не различается между собой, что указывает на сбалансированность действия прооксидантной и антиоксидантной систем. У крупного рогатого скота с клиническими признаками нарушения обмена веществ числовые значения коэффициента сбалансированности достоверно отличаются в среднем на 50%, от аналогичного показателя здоровых животных, что указывает на состояние окислительного стресса.

5. Уровень содержания ВНСММ в крови крупного рогатого скота стабилизируется к 6 месячному возрасту. При наиболее напряженных физиологических состояниях концентрация ВНСММ достоверно снижается. У коров и телок с явно выраженными клиническими признаками нарушений в обмене веществ имеется корреляция между активацией процессов пероксидного окисления липидов, образованием ВНСММ в плазме и сорбцией этих веществ эритроцитами крови.

6. Интоксикация уксусным альдегидом в дозе Уг LD50 способствует усилению процессов пероксидного окисления липидов, активации антиоксидантной системы и повышению уровня ВНСММ в плазме и сорбции этих веществ эритроцитами крови лабораторных крыс.

3. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

Успешное развитие животноводства невозможно без изучения особенностей метаболизма сельскохозяйственных животных с помощью современных методов исследований. Выявление отклонений в метаболизме позволит своевременно принимать меры, направленные на ускорение развития адаптационных механизмов, что в конечном счете ведет к увеличению продуктивности животных. По данным многочисленных исследований последних десятилетий в основе многих патологий на субклеточном уровне лежат однотипные механизмы, особую роль среди которых играют процессы пероксидного окисления липидов клеточных мембран [Bablock et al., 1992; Ерохин А.С. и соавт., 1995; Абакумова Ю.В., 1996; Исмагилова Э.Р., 1999; Silert et al., 1999; Цехмистренко С.И., Кононский А.И., 2000; Мурзагулов К.К. и соавт., 2002; Кармолиев Р.Х., 2002 и др.]. Усиленная активация свободнорадикального окисления жирных кислот липидов приводит к изменению состава и структуры клеточных мембран. Нарушается их проницаемость и свойства, вплоть до необратимых повреждений. В литературе имеются данные о целесообразности терапии антиоксидантами, воздействующими на самые ранние стадии нарушения метаболизма, одной из которых является стадия образования свободных радикалов [Мкртумян A.M., 1993; Дунин И.М., Лебенгарц Я.З., 1997; Подколзин А.А. и соавт, 2003; Попова Е., Сокирко Т., 1997; Радионова Т.Н., Панфилова М.Н., 2003]. В связи с этим проблема раннего обнаружения повышенного уровня ПОЛ остается актуальной, так как, отслеживая уровень пероксидации липидов и его корреляцию с состоянием АОС можно корректировать нарушения СРО еще на начальном этапе. Также имеются данные о том, что нарушение обмена веществ характеризуется увеличением содержания в крови ВНСММ. На ранних стадиях нарушений повышение уровня ВНСММ является компенсаторной реакцией организма, при более глубоких нарушениях образуются токсические вещества, в особенности олигопептиды. В то же время, сведения об исследованиях свободнорадикального метаболизма сельскохозяйственных животных малочисленны, отсутствуют данные о состоянии процессов ПОЛ и АОС у КРС в возрастном аспекте и при разных физиологических состояниях, не имеется сведений о сопряжении свободнорадикальных процессов с уровнем ВНСММ в крови. Недостаточная изученность свободнорадикальных процессов и вместе с тем важная их роль в жизнедеятельности организма, определили цель нашей научной работы: выявить особенности процессов ПОЛ и состояния АОС у КРС в постнатальном онтогенезе и при разных физиологических состояниях и их корреляцию с содержанием ВНСММ для совершенствования оценки метаболического статуса животных.

Метод биохемилюминесценции применяется в клинической биохимии для выявления нарушений липидного обмена, воспалительных, инфекционных и онкологических заболевании, также для выявления начальных стадий различных патологий при скрининговых профилактических обследованиях. Этот метод, являясь неспецифическим, не учитывает этиологические и нозологические особенности болезни. Повышение показателя ХЛ сыворотки крови относительно среднестатистического уровня ХЛ здорового организма с учетом возраста на 30-40% свидетельствует о повышении перекисного окисления липидов (ПОЛ), которое может быть связано как с нарушением липидного обмена в организме, так и с воспалительным процессом.

В то же время имеются немногочисленные данные о применении этого метода в ветеринарной медицине.

На первом этапе нашей работы методом биохемилюминесценции был определен интегральный показатель ПОЛ клинически здоровых телок разного возраста и 12-ти месячных телок с признаками нарушенного обмена веществ, а также клинически здоровых коров при разных физиологических состояниях и коров в период раздоя со слабо и явно выраженными признаками нарушенного обмена веществ.

В первые дни жизни животных происходит адаптация организма к кардинальному изменению кислородного режима, что оказывает влияние на уровень свободнорадикальных процессов. При анализе данных показателя ПОЛ в постнатальном онтогенезе установлено, что у клинически здоровых телок от 2-15 суточного до одномесячного возраста интенсивность процессов пероксидации липидов достоверно ниже, чем у животных старших возрастных групп. У 2-х месячных телок отмечено достоверное увеличение показателя интенсивности ПОЛ относительно показателя животных контрольной группы. У телок в возрасте 6-24-х месяцев значения показателя ПОЛ достоверно выше показателя одномесячных телок и между собой достоверно не отличаются. По данным М.И. Рецкого и соавт. (2001) в этот период в крови нарастает уровень свободных жирных кислот, как субстратов энергетического обмена, следовательно, усиливаются и процессы пероксидации. Начиная с 2-х месяцев, как видно из данных значений интегрального показателя ПОЛ свободнорадикальные процессы пероксидации липидов у клинически здорового КРС протекают практически на постоянном уровне. Данные об аналогичных исследованиях в доступной нам литературе отсутствуют, поэтому полученные значения интегрального показателя ПОЛ у телок 624-х месяцев (14,46 16,02 ед/30 с) приняты за норму. Более высокие значения интегрального показателя ПОЛ сыворотки крови телок 2-х месячного возраста и старше по сравнению со значением этого показателя у одномесячных телок по всей вероятности свидетельствует о высокой готовности клеток организма к генерации свободных радикалов. Эти активные формы кислорода выполняют при физиологических концентрациях важные для организма функции (стабилизация липидного состава и структуры мембран клеток, синтез биологически активных веществ, бактерицидные функции клеток). Установленные нами относительно невысокие показатели интенсивности процессов ПОЛ у клинически здоровых телок находится в соответствии с общепринятым суждением о том, что ПОЛ - естественный метаболический процесс, поэтому интенсивность свободнорадикального окисления липидов в норме низкая. При физиологическом уровне пероксидации жирных кислот липидов клеточных мембран активизируются механизмы адаптации к условиям окружающей среды, инициируются биоэнергетические процессы, активируется ряд ферментов [Бурлакова Е.Б. 1980; Sies, 1986 McCord, 1993; Величковский Б. Т., 2001; Абрамченко В.В., 2002].

Интегральный показатель интенсивности ПОЛ в группе клинически здоровых коров в период производства молока колеблется в пределах 15,82+17,48 ед./ЗО с. Достоверного отличия в средних значениях показателя интенсивности пероксидации липидов между коровами контрольной группы и группами начального и заключительного этапов сухостойности и новотельности не выявлено. Полученные результаты свидетельствуют о том, что свободнорадикальные реакции окисления липидов в организме клинически здоровых коров при разных физиологических состояниях протекают практически на постоянном уровне, являются защитным механизмом от воздействия свободных радикалов, а также выполняют функцию регуляторов физико-химических свойств клеточных мембран, неспецифических регуляторов фагоцитоза. [Ignarro, 1972; Н.П. Лысенко, Н.А. Фомичева, 1999; В.Т. Величковский (2001), В.П. Скулачев, 1998 и др.]. Отмеченная нами тенденция к снижению интенсивности процессов ПОЛ у коров при состояниях сухостойности и новотельности, очевидно, может быть объяснена деятельностью адаптационно-компенсаторных механизмов, направленных на подавление процессов пероксидации при этих наиболее напряженных для организма состояниях.

Значения показателя ПОЛ у 12-ти месячных телок с клиническими признаками нарушенного обмена веществ достоверно превышают таковые у клинически здоровых животных аналогичного возраста на 60%. Также значительно увеличивается по сравнению с контролем интегральный показатель интенсивности ПОЛ у коров с нарушенным обменом веществ по сравнению с клинически здоровыми, у коров со слабовыраженными признаками и с явно выраженными признаками нарушенного обмена веществ на 60% и 70% соответственно.

Эти результаты соответствуют данным литературы (Новиков Ю.Х., 1999) о том, что чрезмерная активация процессов ПОЛ является патогенетическим фактором при ряде заболеваний, причем интенсивность свободнорадикальных процессов прямо пропорциональна выраженности патологического процесса. Избыточная продукция свободных радикалов, как показано многочисленными исследованиями отечественных и зарубежных ученых, является общим патогенетическим звеном в механизме воздействия на организм факторов среды и условий жизнедеятельности (ксенобиотики, инфекции, ионизирующее излучение, ультрафиолетовая радиация, гипоксия, физиологическое перенапряжение, стресс, информационная перегрузка и др.). Полученные нами методом биохемилюминесценции данные увеличения интегрального показателя интенсивности ПОЛ у КРС при нарушениях обмена веществ, совпадают с результатами исследования И.З. Севрюк и соавт. (1998), которые установили усиление пероксидации липидов по увеличению содержания МДА у коров с начальной стадией остеомаляции.

Из данных литературы известно, что показатели ПОЛ не всегда объективно отражают свободнорадикальный статус организма [Janero, 1990; Т.Ю. Реброва, 2001; Ю.А. Владимиров 1998; P.P. Фархутдинов, 2000; Е.Е. Дубинина, 2001]. Токсическое действие АФК и их избыточная генерация, приводящая к деструкции липидов мембран, предупреждается за счет функционирования антирадикальных и антипероксидных механизмов, объединенных в универсальную биологическую систему -АОС. Эта система представлена ферментативным и неферментативным звеньями, совместным действием которых поддерживается физиологический уровень свободнорадикальных процессов, обеспечивающих неспецифическую резистентность организма. АОС обеспечивает устойчивость организма ко многим факторам, провоцирующим избыточное образование АФК. [Goto et al., 1992; Harris, 1992; Л.А.Тиунов, 1995; T.A. Лисицина и соавт., 1996 Б.Т. Величковский, 2001].

Поскольку избыточная пероксидация липидов мембран предотвращается действием соединений, образующих систему антирадикальной защиты, вторым этапом нашей работы было определение интегрального показателя состояния АОС у КРС в постнатальном онтогенезе и при разных физиологических состояниях. Согласно полученным данным пределы колебаний значения показателя АОС в контрольной группе телок составили 0,155 + 0,199 отн. ед. Значения показателя АОС у телок разного возраста свидетельствует о том, что новорожденные телята имеют самый низкий уровень антиоксидантной защиты. У телят этой возрастной группы показатель АОС колеблется в пределах 0,14К 0,159 отн. ед., что достоверно ниже, чем у одномесячных животных. Полученные данные согласуются с суждением о том, что у новорожденных животных функционирует только ферментативное звено АОС, так как в организме существует дефицит токоферола, ретинола, каротинов и аскорбиновой кислоты. У телят в 2 и 3-х месячном возрасте показатель состояния АОС остается практически на одном уровне и принимает значения 0,21+ 0,22 отн. ед. С 6-и месячного возраста значения показателя АОС достоверно увеличиваются по сравнению с контролем, а между собой достоверно не различаются. Таким образом, система антирадикальной защиты у КРС, как и другие показатели гомеостаза окончательно формируется только к 6-и месяцам, по мере адаптации животного к новым условиям существования.

Интегральный показатель состояния АОС в группе коров в период производства молока колеблется в диапазоне 0,19 + 0,23 отн. ед. В отличие от процессов ПОЛ наблюдается достоверное усиление антиоксидантной защиты у коров при наиболее напряженных для организма состояниях (заключительного этапа сухостойности и новотельности) по сравнению с контрольной группой животных.

В группе 12-ти месячных телок с клиническими признаками нарушенного обмена веществ значение показателя состояния АОС достоверно ниже, чем у клинически здоровых животных аналогичного возраста, в то же время в этой группе животных усиливаются процессы пероксидации липидов. Полученные данные согласуются с гипотезой Е.Н. Кухтина и Н.Н. Глущенко (1996) о регуляции процессов свободнорадикального окисления антиоксидантной системой, согласно которой интенсивность пероксидации липидов контролируется по принципу замкнутого контура с отрицательной обратной связью, что способствует поддержанию ПОЛ на физиологическом уровне.

У коров периода раздоя со слабо выраженными признаками нарушенного обмена веществ показатель состояния АОС проявляет тенденцию к снижению, а у коров с явно выраженными признаками достоверно снижается по сравнению с контролем.

Таким образом, у КРС с признаками нарушенного обмена веществ происходит изменение состояния системы антиоксидантной защиты по сравнению с клинически здоровыми животными. Одновременно, как было указано выше, у животных этих групп показатель пероксидации жирных кислот достоверно увеличивается по сравнению с контролем.

Полученные результаты свидетельствуют о том, что у животных с нарушенным обменом веществ существует дефицит компонентов системы антирадикальной защиты. Степень выраженности клинических проявлений метаболических нарушений пропорциональна уровню истощения компонентов АОС, роль которых сводится к защите биосубстратов от воздействия активных форм кислорода, и в первую очередь жирных кислот липидов клеточных мембран, от свободнорадикальной деструкции. По мнению многих исследователей, понижение буферной емкости АОС определяет уменьшение адаптивной возможности организма при воздействии токсических и микробных агентов [Е.Б. Бурлакова 1980; В.В., Абрамченко, 2002 и другие]. Данные литературы указывают, что в отличие от других физиологических систем (например, свертывания крови или гормональной) даже непродолжительный сбой в деятельности антиоксидантной системы не происходит безразлично для организма. Истощение системы антирадикальной защиты у животных приводит к более высокой чувствительности организма к окислительному стрессу, по сравнению с клинически здоровыми животными. Возможно, компенсаторно-повышенная активность системы АОС в начальной стадии нарушения обмена веществ в последующем угнетается.

Многочисленными исследованиями доказан неоднозначный характер свободнорадикального окисления в организме [Д.И. Кузьменко, Б.И. Лаптев, 1999; Е.Е. Дубинина, 2001 и другие]. Как показали исследования свободнорадикального метаболизма для разграничения физиологического и патологического СРО могут быть использованы разнообразные показатели уровня активности прооксидантной и антиоксидантной систем. Умеренная интенсивность ПОЛ является условием активации АОС, тем самым уменьшается вероятность развития функциональных расстройств или патологических изменений, тогда как дальнейшая интенсификация ПОЛ приводит к значительному снижению буферной емкости АОС. Дальнейшее нарушение состава и структуры биополимеров приводит к повреждению мембран, изменению состава цитоплазмы и ее структурной организации. В физиологических условиях в организме поддерживается баланс между интенсивностью свободнорадикальных реакций пероксидации биосубстратов и деятельностью антиооксидантной системы, тем самым предотвращается чрезмерная активация ПОЛ и накопление его продуктов - свободных радикалов, пероксидов жирных кислот, липопероксидов, альдегидов, кетонов, оксикислот.

При анализе полученных данных установлено, что у клинически здоровых животных протекание процессов ПОЛ и состояние АОС имеют общие закономерности, поэтому следующим этапом наших исследований стало выявление степени взаимосвязи интенсивности процессов ПОЛ и состояния АОС в организме КРС в постнатальном онтогенезе и при разных физиологических состояниях с помощью статистической обработки результатов. Установлено, что у клинически здоровых телок в возрасте от 2-15 суток до 6 месяцев, а также в 18 месяцев существует достоверная сильная линейная взаимосвязь между интенсивностью процессов ПОЛ и состоянием АОС. В группах животных в возрасте 9, 12, 24 месяцев наблюдается условно-вероятная положительная линейная корреляция между процессами ПОЛ и состоянием АОС, что указывает на высокую сбалансированность процессов пероксидации липидов и антирадикальной защиты у клинически здоровых животных в постнатальном онтогенезе. В то же время у 12-и месячных телок с признаками нарушенного обмена веществ значения показателей ПОЛ и АОС достоверно превышают аналогичные значения клинически здоровых животных того же возраста, коэффициент линейной корреляции Пирсона равен -0,203 (р=0,74). Что свидетельствует о дисбалансе между интенсивностью процессов ПОЛ и состоянием системы антирадикальной защиты.

Следовательно, биохемилюминесцентные интегральные показатели ПОЛ и АОС, отражающие интенсивность свободнорадикальных реакций окисления липидов и состояние антирадикальной защиты, доказывают существование прямой связи между усилением пероксидации липидов и снижением антирадикальной защиты и позволяют своевременно выявлять изменения в соотношении прооксидантной и антиоксидантной систем у животных в любой возрастной группе.

При анализе коэффициента корреляции показателей ПОЛ и АОС клинически здоровых коров установлено, что в группе коров в период раздоя имеется достоверная положительная линейная корреляция между интенсивностью ПОЛ и состоянием системы антирадикальной защиты. У коров при состоянии начального, заключительного этапов сухостойности и новотельности выявлена условно-вероятная положительная взаимосвязь между показателями ПОЛ и АОС. Следовательно, наблюдается высокая степень сбалансированности процессов пероксидации липидов и антирадикальной защиты у клинически здоровых животных независимо от физиологического состояния.

Линейная взаимосвязь между значениями показателей ПОЛ и АОС у коров со слабовыраженными и явно выраженными признаками нарушения обмена веществ практически отсутствует. Эти данные указывают на резкое усиление свободнорадикальных процессов на фоне снижения буферной емкости антиоксидантной системы, а также на разобщение процессов ПОЛ и деятельности АОС. Эти данные могут служить подтверждением состояния оксидативного стресса, при котором происходят нарушения в метаболизме белков, жиров, нуклеиновых кислот, углеводов и в водно-электролитном обмене. Несостоятельность компонентов системы АОС на фоне усиления свободнорадикального окисления липидов является, по мнению акад. Ю.А. Владимирова одной из возможных причин усиления клинических признаков нарушенного обмена веществ. При патологических состояниях образуется так называемый порочный круг: интенсификация процессов ПОЛ на фоне снижения активности антирадикальной защиты приводит к усиленной генерации активных форм кислорода. Следствием этого является нарушение обменных процессов и изменение важнейших физиологических функций организма.

Таким образом, установлена достоверная сильная линейная взаимосвязь между интенсивностью ПОЛ и состоянием АОС у здоровых телок в возрасте от 2-15 суток до 6 месяцев и коров периода раздоя, а также условно-вероятная положительная линейная корреляция этих процессов у телок в возрасте 9, 12, 24 месяцев и коров начального и заключительного этапов сухостойности и новотельности.

Так как нами была обнаружена высокая степень взаимосвязи между показателями пероксидации липидов и состоянием системы антиоксидантной защиты у клинически здоровых телок и коров, было целесообразно рассчитать коэффициент сбалансированности процессов АОС и ПОЛ, который представляет собой отношение интегрального показателя АОС к показателю ПОЛ. Данные исследования показывают, что самые низкие по сравнению с другими возрастными группами, значения КБ у новорожденных телок. У клинически здоровых телок в возрастных группах от 1-го до 3-х месяцев численные значения коэффициента сбалансированности между собой достоверно не различаются. Начиная с 6-ти месяцев, численные значения КБ увеличены по сравнению с контролем. Таким образом, коэффициент сбалансированности АОС/ПОЛ показывает, что по мере адаптации животного к условиям существования дисбаланс между действием факторов, усиливающих свободнорадикальное окисление биосубстратов и деятельностью системы антирадикальной защиты сглаживается. К 6-ти месяцам организм КРС характеризуется достаточно высокой стабильностью исследуемых показателей свободнорадикального метаболизма, вероятно, за счет включения дополнительных адаптационных механизмов, в частности вступает в действие наряду с ферментативным и неферментативное звено АОС, что позволяет поддерживать интенсивность процессов ПОЛ на физиологическом уровне. До 6-месячного возраста коррекцию интенсивности свободнорадикального окисления можно проводить при помощи введения в кормовой рацион веществ, обладающих свойставми антиоксидантов, таких как токоферолы, аскорбиновая кислота, полифенолы растительного происхождения.

У клинически здоровых коров при состояниях раздоя и новотельности значения КБ находятся в диапазоне 1,21 + 1,54 усл. ед. и достоверно не различаются между собой. При состоянии начального и заключительного этапов сухостойности значения КБ достоверно отличаются от КБ коров контрольной группы, что, возможно, связано с тенденцией к снижению интенсивности процессов пероксидации и усилению деятельности АОС при рассматриваемых состояниях. Однако, численные значения КБ у коров при разных физиологических состояниях находится в диапазоне 1,21+ 1,83 усл.ед., что свидетельствует о высокой степени сбалансированности пероксидных процессов и деятельности всех звеньев системы антирадикальной защиты, у клинически здоровых коров независимо от физиологического состояния.

В то же время у КРС с клиническими признаками нарушенного обмена веществ значения КБ достоверно отличается от аналогичного показателя здоровых животных. Так, у 12-ти месячных телок с клиническими признаками нарушенного метаболизма значение КБ составляет 55% от КБ клинически здоровых животных и колеблется в диапазоне 0,66, + 0,78усл. ед.

У коров со слабовыраженными и явно выраженными признаками нарушения обмена веществ КБ принимает значения достоверно ниже, чем КБ клинически здоровых коров на 39,7% и 48,4% соответственно (рис. 34).

Уменьшение величины КБ по сравнению с нормой свидетельствует о дисбалансе между процессами ПОЛ и антирадикальной защитой, то есть о возникновении состояния окислительного стресса у животных. Степень дисбаланса в системе ПОЛ-АОС выражена гораздо сильнее у животных с явно выраженными признаками нарушенного обмена. В условиях нарушенного обмена веществ значение КБ тем ниже, чем в большей степени активируются процессы пероксидации липидов и снижается активность компонентов антиоксидантной системы.

120 100 80 60 40 20 0 * т

ПН 1 1

Рис. 33. Коэффициент сбалансированности ПОЛ и АОС коров:

1 - клинически здоровые, 2- со слабо выраженными признаками, 3- с явно выраженными признаками нарушенного обмена веществ.Примечание:*- достоверность различий по сравнению с контролем (р<0,05)

Таким образом, интегральные показатели XJI, характеризующие интенсивность ПОЛ и состояние АОС и их корреляции с одной стороны позволяет прогнозировать возможную патологию, а, с другой - проводить своевременную профилактику антиоксид антами. Величина КБ дает достоверные представления о состоянии системы равновесия ПОЛ/АОС, позволяет выявить выраженность смещения баланса между действием прооксидантных и антиоксидантных факторов и может служить способом лабораторной диагностики отклонений в метаболизме у КРС.

В последние годы в клинической биохимии для оценки тяжести интоксикации предложен ряд методов, основанных на определении содержания в биологических средах ВНСММ. В то же время ряд исследователей полагают, что чрезмерная пероксидация ненасыщенных жирных кислот липидов мембран клеток при низкой активности системы антиоксидантной защиты способствует увеличению уровня ВНСММ в крови. [З.А. Туликова, 1983; В.И. Гудим, Н.К. Габриэлян, 1985]. Для установления возможной взаимосвязи между интенсивностью ПОЛ, активностью АОС и содержанием ВНСММ в крови нами был изучен ряд корреляционных взаимоотношений между показателями состояния ПОЛ, АОС и ВНСММ в сыворотке и плазме крови КРС.

Нами установлено, что уровень ВНСММ в плазме крови телок в возрасте 2-15 суток достоверно отличается от контроля. Начиная с 2-х месяцев, уровень ВНСММ в плазме не различается по сравнению с контролем.

Уровень этих соединений в эритроцитах достоверно выше у новорожденных телок по сравнению с контролем. У телок в возрасте от 1-го до 3-х месяцев содержание ВНСММ в эритроцитах практически не изменяется. Начиная с 6-ти месячного возраста, содержание ВНСММ достоверно повышается по отношению к контролю и находится на стационарном, характерном для взрослых животных уровне у телок 9-ти, 12-ти и 24-хмесяцев. В целом, при анализе данных о содержании ВНСММ в плазме и эритроцитах крови телок в разные возрастные периоды выявлено, что концентрация этих соединений и в плазме и в эритроцитах крови стабилизируется к 6-ти месячному возрасту.

В то же время у 12-и месячных телок с клиническими признаками нарушенного обмена веществ содержание ВНСММ и в плазме крови и в эритроцитах достоверно повышается по сравнению с уровнем ВНСММ клинически здоровых животных аналогичного возраста. Выявлена взаимосвязь между интенсивностью процессов ПОЛ, состоянием АОС и содержанием ВНСММ в плазме и эритроцитах крови телок с клиническими признаками нарушенного обмена веществ. Установлено, что существует вероятная положительная линейная корреляция между показателем содержания ВНСММ плазмы и показателем процессов ПОЛ, а также между показателем содержания ВНСММ плазмы и показателем состояния АОС, в то же время между показателем ВНСММ эритроцитов и ПОЛ и показателем ВНСММ эритроцитов и АОС обнаруживается условно-вероятная положительная линейная корреляция. Эти данные позволили предположить, что с помощью интегрального метода определения уровня ВНСММ и интенсивности процессов ПОЛ и АОС, можно своевременно выявлять состояние интоксикации и оксидативного стресса с целью их коррекции.

Содержание ВНСММ в плазме крови клинически здоровых коров л периода раздоя колеблется в диапазоне 4,9 + 5,3 усл.ед. . У животных начального этапа сухостойности уровень ВНСММ практически не изменяется, а у коров заключительного этапа сухостойности достоверно снижается. При состоянии новотельности происходит увеличение содержания ВНСММ, но не достигает величин у животных периода раздоя. Содержание ВНСММ в эритроцитах крови коров периода раздоя находится в диапазоне 14,9 ^ 15,3 усл.ед.2. Так же как и в плазме при состоянии начального этапа сухостойности уровень ВНСММ практически не изменяется по сравнению с контролем. На заключительном этапе сухостойности содержание ВНСММ в эритроцитах достоверно снижается. Для периода новотельности характерна тенденция к увеличению содержания ВНСММ, у коров этой группы содержание ВНСММ достоверно отличается от контроля.

В группе коров со слабо выраженными признаками нарушенного обмена веществ содержание ВНСММ в плазме достоверно снижается, а в эритроцитах повышается по сравнению с контролем. В группе коров с ярко выраженными отклонениями в обмене веществ уровень ВНСММ достоверно повышается и в плазме, и в эритроцитах крови по отношению к контролю. Следовательно, уровень ВНСММ, и в плазме и эритроцитах крови в периоды раздоя и начального этапа сухостойности практически не изменяется, в то же время достоверно снижается в периоды заключительного этапа сухостойности и новотельности. Полученные данные согласуются с ранее установленными результатами [И.П. Степанова и соавт., 2001, 2003]. Возможно, уменьшение содержания

ВНСММ вызвано повышенной потребностью организма в изучаемые периоды в таких важнейших соединениях как окисленные и восстановленные пиридиновые коферменты дегидрогеназ (НАД\ НАДФ-Н), нуклеозид-5-фосфаты, глутатион, необходимых для анаболических процессов и процессов детоксикации. По данным М.Я. Малаховой (1995) вышеуказанные вещества поглощают ультрафиолетовые лучи в исследуемом диапазоне длин волн.

У коров с клиническими признаками нарушенного обмена веществ установлена взаимосвязь между интенсификацией свободнорадикальных реакций и содержанием ВНСММ в крови. У коров со слабовыраженными признаками нарушенного обмена веществ установлена условно-вероятная положительная корреляция уровня ВНСММ в эритроцитах и активации процессов пероксидации липидов. У коров с явно выраженными признаками существует вероятная положительная корреляция уровня ВНСММ с активацией свободнорадикальных процессов, как в плазме, так и в эритроцитах крови. В то же время у коров этих групп отсутствует линейная взаимосвязь между содержанием ВНСММ в крови и показателем состояния АОС. Полученные данные указывают на то, что в организме коров с клиническими признаками нарушений в обмене веществ существует взаимосвязь между усиленным синтезом ВНСММ в плазме и активацией процессов ПОЛ, но одновременно наблюдается дисбаланс в деятельности прооксидантной и антиоксидантной систем. Это согласуется с данными литературы, о том, что увеличение содержания ВНСММ сопровождается изменением проницаемости клеточных мембран, нарушением тканевого дыхания. Чрезмерная пероксидация липидов и истощение АОС предшествует нарушению катаболизма пуриновых, пиримидиновых оснований и белков. Выявленный дисбаланс в состоянии ПОЛ/АОС у КРС с признаками нарушенного метаболизма и корреляция усиления процессов пероксидации липидов с содержанием ВНСММ в крови обуславливает необходимость применения данных показателей в качестве возможного критерия оценки степени выраженности нарушений.

Таким образом, при современном уровне технологии ведения животноводства, для повышения резистентности необходимо изыскание биологических резервов организма. Этому может способствовать оптимизация процесса обследования животных с помощью хемилюминесцентного метода определения интенсивности ПОЛ и состояния АОС и интегрального метода определения содержания ВНСММ. Выявленные закономерности рекомендуется использовать на практике. Так, при обнаруженных метаболических нарушениях у коров при помощи интегрального метода, основанного на определении содержания ВНСММ, необходимо дополнительно оценить интенсивность процессов ПОЛ и состояние антирадикальной защиты для выбора патогенетически обоснованных методов коррекции сдвигов в обмене веществ животных.

В литературе имеются данные о том, что одной из возможных причин нарушения баланса между интенсивностью ПОЛ и состоянием АОС является избыточная концентрация ацетальдегида (Corrazzi et al., 1980; Mantle et al. 1999; Feihman et al., 1999), который является естественным метаболитом. До настоящего времени роль эндогенного ацетальдегида в метаболизме окончательно не установлена. Существует гипотеза, что свободные радикалы могут образовываться при метаболизме ацетальдегида, а это приводит к накоплению в организме продуктов ПОЛ и развитию эндогенной интоксикации [Takahashi et al., 1994]. L. Feihman et al. (1999) считают, что ацетальдегид нарушает механизмы антиоксидантной защиты. В связи с вышеизложенным, представлялось интересным изучить влияние экзогенного ацетальдегида на показатели интенсивности ПОЛ и АОС, а также на систему детоксикации, состояние которой определяется содержанием ВНСММ в крови.

В эксперименте на белых крысах показано, что уже через полчаса после введения ацетальдегида наблюдается достоверное повышение содержания ВНСММ в эритроцитах крови, которое сохраняется в течение 4-х часов после введения токсического агента. Через 6 часов после интоксикации ацетальдегидом содержание ВНСММ в эритроцитах крови белых крыс возвращается к норме.

Статистическая обработка результатов выявила наличие положительной линейной корреляции в динамике между содержанием ВНСММ в плазме и эритроцитах. В первые 6 часов после интрагастрального введения ацетальдегида у крыс активируются процессы накопления ВНСММ в плазме и сорбции этих соединений эритроцитами крови. К 12 часам после токсического воздействия ацетальдегида метаболические процессы в крови животных нормализуются. Поскольку повышение содержания ВНСММ в крови белых крыс после введения ацетальдегида является кратковременным, этот процесс, следует рассматривать как проявление общего адаптационного синдрома.

Изучение состояния процессов ПОЛ при ацетальдегидной интоксикации выявило, что у интактной группы крыс показатель ПОЛ в сыворотке крови колеблется в диапазоне 10,35 + 11,53 ед./ 30 сек. После ингастрального введения крысам ацетальдегида в дозе lA LD50 наблюдается активизация свободнорадикальных процессов пероксидации липидов в первые шесть часов, причем достоверное изменение показателя ПОЛ наблюдается уже через 0,5 часа. Через 12 часов после воздействия токсического агента интенсивность пероксидации липидов начинает снижаться, но остается достоверно высокой по сравнению с контролем. Через 24 часа после ацетальдегидной интоксикации практически происходит нормализация процессов ПОЛ.

У контрольной группы белых крыс среднее значение показателя состояния АОС колеблется в диапазоне 0,12 + 0,16 отн. ед. Мобилизация компонентов антирадикальной защиты обнаруживается только через 1 час после того, как крысам ввели ацетальдегид. Через 4 часа отмечается достоверное усиление антирадикальной защиты, которое сохраняется еще 2 часа. К 12 часам после воздействия токсическим агентом наблюдается нормализация антиоксидантной активности сыворотки крови белых крыс, которая сохраняется до конца эксперимента.

В целом результаты эксперимента показывают, что в первые 6 часов после интоксикации ацетальдегидом усиливаются процессы свободно-радикальной пероксидации ненасыщенных жирных кислот и активируется антиоксидантная система, причем максимальные изменения приходятся на 4 и 6 часов, а в последующем свободнорадикальные процессы нормализуются и их интенсивность не изменяется до конца эксперимента.

Изучение линейных взаимосвязей между процессами ПОЛ и состоянием АОС крыс после интоксикации уксусным альдегидом выявило, что характер изменений является аналогичным. Также обнаружена линейная взаимосвязь между показателем, характеризующим ПОЛ, и содержанием ВНСММ плазмы и эритроцитов. Обнаружена линейная корреляция между показателем антиоксидантной активности сыворотки крови и содержанием соединений низкой и средней молекулярной массы плазмы и эритроцитов крови. Обнаруженный дисбаланс в действии про- и антиоксидантных факторов и их взаимосвязь с усиленной наработкой ВНСММ в первые часы после воздействия на организм крыс ацетальдегида свидетельствует о раннем вовлечении свободнорадикальных процессов в патогенетические механизмы интоксикации. Результаты проведенного эксперимента согласуются с данными литературы о том, что при воздействии эндогенных факторов организм мобилизует «программы адаптивного поведения», конечная цель которых - повысить резистентность организма к раздражителям. Такое приспособление связано с развитием комплекса защитных биохимических реакций, с участием многих ферментов, в том числе протеаз и ферментов системы антиоксидантной защиты [Кузьмина Л.П., Тарасова Л.А., 2000].

Полученные результаты указывают на то, что с помощью метода биохемилюминесценции возможно оценить интенсивность ПОЛ и состояние АОС и своевременно выявить дисбаланс между активацией процессов свободнорадикального окисления и мобилизацией антиоксидантной защиты в организме животных. В результате эксперимента на белых крысах выявлено, что при ацетальдегидной интоксикации в организме этих животных имеется взаимосвязь между активацией процессов ПОЛ, состоянием АОС, усиленным образованием ВНСММ в плазме и сорбцией этих веществ эритроцитами крови. Эти данные могут иметь значение для дальнейшей расшифровки механизмов развития эндогенной интоксикации.

Подводя итог вышесказанному следует отметить, что контроль над состоянием здоровья и продуктивностью животных необходимо осуществлять путем диспансеризации с обязательным проведением лабораторной диагностики наиболее распространенных болезней животных, связанных с нарушением обмена веществ. Наиболее обоснованными на наш взгляд при биохимическом мониторинге являются показатели состяния ПОЛ, АОС и уровень ВНСММ.

Изначально этиологический фактор независимо от своей природы и происхождения вызывает в организме повышенное образование активных форм кислорода, что приводит к интенсификации процессов ПОЛ. В результате длительной пероксидации липидов возникают структурно-функциональные изменения в клетках, в первую очередь, интенсивно функционирующих и повреждаемых этиологическим фактором тканей, органов, физиологических систем. Возможные нарушения предотвращаются за счет функционирования АОС, которая рассматривается как универсальная биологическая система естественной детоксикации. Разобщение в организме процессов пероксидации липидов и антирадикальной защиты приводит к состоянию оксидативного стресса.

Повышение значений показателей ПОЛ и АОС от 30+40 до 200+300% относительно референтных величин (с учетом возраста и физиологического состояния) свидетельствует об активации свободнорадикальных реакций липидов, которая может быть связана как с нарушением липидного обмена (гипо-, гипер-, дислипопротеинемия) в организме, так и с воспалительным процессом или инфекционным заболеванием. Поэтому при выявленном дисбалансе интенсивности свободнорадикальных реакций липидов и состояния АОС необходимо определить содержание общих липидов сыворотки крови для исключения липидных нарушений. При нормолипопротеинемии рекомендуется провести общий анализ крови для подтверждения наличия воспалительного процесса. С целью выявления конкретного воспалительного процесса следует провести, например, ряд определений ферментов, активность которых меняется более дифференцированно. Так, активность щелочной фосфатазы изменяется при заболеваниях печени и костной патологии, а-амилазы или липазы - при панкреатите и т.д.

Понижение значений показателей ПОЛ и АОС более чем в 2 раза относительно референтных величин (с учетом возраста и физиологического состояния) свидетельствует либо об анемии, либо о наличии злокачественного образования.

Эффективность хемилюминесцентных показателей ПОЛ и АОС определяется высокой чувствительностью на наличие предпатологического состояния. Если значения показателя находятся в диапазоне значений нормы, можно однозначно говорить об отсутствии в организме патологии и/или предпатологического состояния, что невозможно на одном анализе ни при каких других формах обследования

Уровень соединений низкой и средней молекулярной массы в крови в норме невелик и строго контролируется организмом. Интенсификация процессов ПОЛ приводит к повышению содержания ВНСММ, являющихся продуктами протеолиза.

Понижение показателя ВНСММ свидетельствует об использовании организмом не только питательных компонентов корма, но и запасов собственных тканей, в частности, таких важнейших соединений низкой и средней молекулярной массы как пиридиновые коферменты, пентозо-5-фосфаты, глутатион и ряд других пептидов, необходимых для процессов синтеза и детоксикации.

Эффективность показателей уровня ВНСММ, состояния ПОЛ и АОС определяется тем, что он позволяет объективно в целом оценить метаболический статус КРС, главным образом белковый и свободнорадикальный, без привлечения общепринятых показателей белкового и липидного обмена.

Одним из звеньев профилактики болезней является введение в соответствующие технологии животноводства, в качестве обязательного, наиболее полного обеспечения потребности животных в антиоксидантах, биологически активных веществ, обладающих антиоксидантными свойствами (витамины Е, С, А, -каротин, медь, цинк, селен и другие микроэлементы, серосодержащие аминокислоты, обеспечивающих наиболее оптимальные условия для синтеза глутатиона). Дозы антиоксидантов должны быть более высокими в рационах молодняка до 6 месяцев, поскольку, согласно нашим исследованиям, антирадикальная защита окончательно формируется у КРС только к этому возрасту. Коровы при наиболее напряженных физиологических состояниях (сухостойности и новотельности) также нуждаются в повышенных концентрациях антиоксидантов, так как в этот период мобилизуется система АОС.

При выявленном дисбалансе в функционировании про- и антиоксидантной систем в организме КРС независимо от этиологических и нозологических особенностей болезни следует использовать фармакологические антиоксиданты.

Активация свободнорадикального окисления вызывает перестройку нейроэндокринного звена. Формируется стресс-реакция со своими негативными последствиями, поэтому желательным представляется использование фармакологических адаптогенов - стресс-корректоров.

Одним из отрицательных последствий оксидативного стресса и стрессовой нейрогормональной перестройки является накопление в организме токсических продуктов пероксидации липидов, токсических олигопептидов, аутоантигенов, мобилизация и повышенный расход факторов неспецифической резистентности клеточного и гуморального звеньев. В результате еще до возникновения нозологически дифференцируемой патологии возникает иммунодефицитное состояние. Поэтому одним из звеньев профилактики болезней животных в условиях повышенной стрессовой нагрузки является введение в технологии применение фармакологических иммуномодуляторов. Звеном профилактики болезней является введение в рацион коров в периоды сухостойности и новотельности биологически активных веществ низкой и средней молекулярной массы, таких как рибозо-5-фосфат, синтетические олигопептиды, так как у животных при этих состояниях выявлено пониженное содержание ВНСММ.

Активация пероксидации липидов приводит к повышенному содержанию соединений низкой и средней молекулярной массы, в том числе токсичных олигопептидов. В связи с отсутствием их иммуногенности, механизм детоксикации гидрофобных олигопептидов представляет собой сорбцию токсинов альбуминами и липопротеинами низкой плотности. Поэтому при повышенном содержании ВНСММ и снижении связывающей способности альбуминов одним из звеньев профилактики является использование энтеросорбентов.

Таким образом, интегральные показатели ПОЛ и АОС целесообразно использовать для своевременного выявления пред- и патологического состояния у КРС, связанного с нарушением свободнорадикального метаболизма, и для решения вопроса о включении в комплексную терапию фармакологических антиоксидантов, стресс-корректоров и иммуномодуляторов. Затем с помощью интегрального показателя ВНСММ следует выявить наличие в организме токсичных веществ, в том числе, олигопептидов. При наличии патологии интегральные показатели должны использоваться с показателями, дифференцированно отражающие определенную патологию.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Конева, Ирина Владимировна, 2005 год

1. Абакумова, Ю. В. Физиологическое и патологическое свободнорадикальное окисление: сущность, методика распознавания, теоретическое и практическое значение / Абакумова Ю. В. // Врачевание и его методология. Саратов, 1996. - С. 33.

2. Абрамченко, В. В. Антиоксиданты и антигипоксанты в акушерстве / В. В. Абрамченко // СПб.: ДЕАН, 2001. 400 с.

3. Барабой, В. А. Перекисное окисление и стресс / В. А. Барабой, И.И. Брехман, В.Г. Галонин. Л.: Наука, 1991. - С. 17- 19.

4. Барабой, В. А. Спонтанная хемилюминесценция сыворотки крови в норме и при воздействии ионизирующей радиации / Барабой В. А., Орел В. Э. // В кн.: Биохемилюминесценция. М.: Наука.-1983.- С. 222-240.

5. Биолюминесцентное определение жизнеспособных клеток в лиофилизированных вакцинах / Балинер Л. М., Богаутдинов 3. Ф., Опарин Ю. Г., Угарова Н. Н., Фрунджан В. Г. // Ветеринария. 2002. - № 9. - С. 22- 27.

6. Биохемилюминесцентные методы анализа в микробиологии / Н. Н.Угарова, Ю. Л.Бровко, И. Ю.Традатян, Е. И.Райнина // Прикладн. биохим. имикробиол.- 1987.-23. №1.-С. 14-24.

7. Биохимические основы патологических процессов: учебное пособие / под ред. Е. С. Северина.- М.: Медицина, 2000.- 304 с.

8. Биохимия человека: пер. с англ. В 2 кн. / Р. Марри, Т. Грейннер, П. Мейет, В. Родуэл. - М.: Мир, 1993. С. 414 с.

9. Бойко, И. А. Резистентность телят-молочников при скармливании аскорбината натрия и аскорбиновой кислоты / И. А.Бойко,

10. И. А. Молчанов, Э. К Нжока // Актуал. пробл. науки в с.-х. пр-ве. -Н.Новгород, 1997. С. 98- 99.

11. Бурлакова, Е. Б. Молекулярные механизмы действия антиоксидантов при лечении сердечно-сосудистых заболеваний / Е. Б. Бурлакова // Кардиология. 1980. - №8. - С. 48.

12. Безрукова, Г. А. Влияние молекулярного кислорода и ионов кальция на мембранную проницаемость эритроцито / Г. А. Безрукова, О. М. Анисимова, В.И. Рубин //Лаб. дело. 1991.- № 9.- С. 38-41.

13. Величковский, Б.Т. Молекулярные и клеточные основы экологической пульмонологии / Б. Т. Величковский // Пульмонология. -2000.-№3.- С. 36-42.

14. Величковский, Б. Т. Патогенетическая терапия и профилактика хронического пылевого бронхита с обструктивным синдромом / Б. Т. Величковский // Пульмонология 1995.-№ 3.- С. 6-19.

15. Величковский, Б. Т Свободнорадикальное окисление как звено срочной и долговременной адаптации организма к окружающим факторам / Б. Т. Величковский // Вестн. РАМН. 2001. - №6. - С. 45- 52.

16. Виноградов, А. Ю. Свободнорадикальные процессы и продукты азотистого катаболизма в крови при гипоксии и гипероксии: Автореф. дис. к. биол. наук: 03.00.04 .- Ростов на Дону, 1995. 16 с.

17. Виноградов, В. А. Кормовые дрожжи белотин в рационе коров / В. А. Виноградов, М. Н. Кириллов // Молочное и мясное скотоводство. - 2003. - №1. - С. 19- 22.

18. Владимиров, Ю. А. Свободные радикалы и антиоксиданты / Ю. А. Владимиров // Вестн. РАМН. 1998. - №7. - С. 43- 51.

19. Владимиров, Ю.А. Перекисное окисление липидов в биологических мембранах. / Ю. А. Владимиров, Ф. И. Арчаков. М.: Наука, 1972.-252 с.

20. Владыка, А. С. «Средние молекулы» и проблема эндогенной интоксикации при критических состояниях различной этиологии / А. С.

21. Владыка, Э. Р. Левицкий // Анест. и реаним. 1987. - № 2. - С. 37- 42.

22. Влияние мексидола и его структурных компонентов на содержание углеводородов и перекисное окисление липидов при остром стрессе / Т. А. Девяткина, Р. В. Луценко, Е. М. Важничая, Л. Д. Смирнов // Вопросы мед. химии. 1999. - №3. - С. 63- 67.

23. Возрастные особенности свободнорадикального окисления липидов и антиоксидантной защиты в эритроцитах здоровых людей / Т. Д. Журавлева, С. Н. Суплотова, Н. С. Киянюк, О. Ю. Аубакирова // Клин, и лаб. диагн. 2003.-№8. - С. 17- 18.

24. Волчегорский, И. А. «Средние молекулы» как эндогенные модуляторы стресса / И. А. Волчегорский, Ю. К. Костин // Пат. физиол. -1994. -№ 4. -С. 23-26.

25. Воспаление: Руководство для врачей / под ред. В. В. Серова и В. С. Паукова. М.: Медицина, 1995. - 640 с.

26. Габриэлян, Н. И. Гипотеза средних молекул в практике клинической нефрологии / Н. И. Габриэлян, Э. Р. Левицкий // Терапевт, арх. 1983. - № 6. - С. 76- 78.

27. Габриэлян, Р. Э. Особенности обмена веществ у коров в зависимости от физиологического состояния / Р. Э. Габриэлян // Зоотехния. 2001. - №7.- С. 21-23.

28. Голиков, С. Н. Общие механизмы токсического действия / С. Н. Голиков, А. А. Тиунов- Л.: Медицина, 1986. 280 с.

29. Гудим, В. И. Средние молекулы как уремические токсины (состояние вопроса) / В. И. Гудим, Н. И. Габриэлян // Лаб. дело. 1985. -№ 3. - С. 145-151.

30. Гудим, В.И. Клиническое значение средних молекул в патогенезе нефрогенной анемии / В. И. Гудим, П. С. Сигалла // Терапевт, арх. 1983. - № 6. - С. 78- 82.

31. Гурвич, А. А. Энергетические основы митогенетического излучения и его регистрация на фотоэлектронных умножителях / А. А. Гурвич. М.: Медицина, 1974. - 96 с.

32. Давиденкова, Е. Ф. Атеросклероз и процесс перекисного окисления липидов / Е. Ф. Давиденкова, М. Г. Шафран // Вестн. РАМН.1998.- №3. С. 10.

33. Дадали, В. А. Биохимические механизмы детоксирующего и онкопротекторного действия микронутриентов, растительных индолов и изотиоцианатов / В. А Дадали, Т. Т. Березов // Вопросы биол. медицины и фармак. химии. 1998. - № 4. - С. 44-52.

34. Данченко, О. О. Особливосп антиокисдантного захисту оргашзму гусенят / О. О. Данченко, В. В. Калитка // BicH. Полтав. держав, сшьскогосподар. ин-ту. Полтава, 2000. -№3.-С.31-32.

35. Действие некоторых стресс-факторов на организм телят / В. Д. Баранников, Г. К. Волков, А. А. Шуканов, Н. С. Маковлева, Н. К. Кириллов, И. А. Федянина // Ветеринария. 1997. -№11. - С. 48- 50.

36. Дороговиз, С. М. Изучение влияния экзогенной супероксиддисмутазы на течение модельной патологии печени / С. М. Дороговиз, Л. В. Деримедведь // Вестн. науч. исслед. Украинской фармацевтической академии. Киев, 1995. - С. 28- 34.

37. Дубинина, Е. Е. Роль активных форм кислорода в качестве сигнальных молекул в метаболизме тканей при состояниях окислительного стресса / Е. Е. Дубинина // Вопросы мед. химии. 2001. №6. - С. 561- 581.

38. Дунин, И.М. Использование селена в молочном скотоводстве /

39. И. М. Дунин, Я. 3. Лебенгарц // Аграрн. наука. 1997. - №6. - С. 20-21.

40. Егоршина, Е. В. Перекисное окисление липидов и развитие эндотоксикоза у больных острой пневмонией / Е. В. Егоршина, Е. А. Бородин // Докл. 6 Национальн. конгресса по болезням органов дыхания.-Новосибирск. 1996. - С. 167.

41. Ерохин, А. С. Активность супероксиддисмутазы в сперме барана и быка при криоконсервации / А. С.Ерохин, И. Г.Коган, В. А. Барсель // С.-х. биология. 1995. - №4. - С. 50- 55.

42. Жаркой, Б. А. Антиоксидант динофен / Б. А.Жаркой, М. И. Рецкий // Птицеводство. 2000. - №1. - С. 26.

43. Журавлев, А. И. Биохемилюминесценция. М.: Наука. 1983. -252 с.

44. Журавлев, А.И. Сверхслабое свечение сыворотки и его значение в комплексной диагностике / А.И.Журавлев, А.И. Журавлева. -М.: Медицина.-1975. 120 с.

45. Зарубина, И. А. Связь перекисного окисления липидов с агрегационной активностью тромбоцитов.: автореф. дис. . к. биол. наук: 03.00.04 / Башкирская гос. мед. акад. -Уфа, 1998. 23 с.

46. Зенков, Н. К. Внутриклеточный окислительный стресс и апоптоз / Н. К. Зенков, Е. Б.Меныцикова, Н. Н Вольский // Усп. совр. биол. 1999-№5-С. 440.

47. Изучение особенностей липидного обмена у телят при анемии / К. К. Мурзагулов, М. Г. Зухабов, А. Б.Бикбулатова, Т. С. Сейтембаев // Вет. врач. 2002. - №2. - С. 54-56.

48. Казаков, И. В. Уремические токсины средней молекулярной массы и выведение их при гемофильтрации / И. В.Казаков, В. С. Тимохов // Урол. и нефр. 1991. -№ 1. - С. 67-69.

49. Камышников, В. С. Клинико-биохимическая лабораторная диагностика / В. С. Камышников. В 2т. Т.2.- Мн.: Беларусь, 2003. - 463 с.

50. Кармолиев, P. X. Состояние антиоксидантной системы защиты организма цыплят при токсической дистрофии / Р. Х.Кармолиев, А. В. Васильев // Ветеринария. -2002. № 11. - С. 42-45.

51. Кармалиев, P. X. Биохимические процессы при свободнорадикальном окислении и антиоксидантной защите. Профилактика окислительного стресса у животных / P. X. Кармолиев // С.-х. биология. 2002. - №2. - С. 19-28.

52. Кишкун, А. А. Значение средних молекул в оценке уровня эндогенной интоксикации / А. А.Кишкун, А. С. Кудинова // Воен.-мед. журнал. 1990. - № 2.- С. 41-44.

53. Клименко, М. О. Загальна патолопя запалення: напрямки розвитку та актуальш методолопчш питания / М. О. Клименко // Ф1зюл. журнал. 1998. - Т. 44, №4. - С. 82-87.

54. Коваленко, В.Ф. Особливост1 прооксидантно-антиокислантной системи в тканинах матки свиней / В. Ф.Коваленко, Р. В. Ашскша-Левчук, А. М. Шостя // BicH. аграр. науки. Киев. - 2002. - №2. - С. 38-41.

55. Кожевникова, Л. К. Биохимический мониторинг норок в период лактации / Л. К. Кожевникова, В. А. Илюха, Л. Б. Узенбаева // Ветеринария. 1997. - №3. - С. 48-51.

56. Комаров, А. А. К методике определения активности каталазы крови и печени цыплят / А. А. Комаров, Ю. И. Микулец // Ветеринария. -1998.-№3.-С. 46-48.

57. Копылова, Т. Н. Процессы перекисного окисления липидов и антиокислительная система печени крыс при остром и хроническом отравлении / Т. Н. Копылова // С.-х. биология. Сер. Биология животных.-2000. №4. - С. 74-77.

58. Корнякова, В. В. Перспективы использования антиокисдантов в клинике / В. В. Корнякова // Вестн. ОмГАУ. Омск, 1999. - № 1. - С. 2628.

59. Крапивина, Е.В. Влияние селена на защитные системы организма свиней / Е. В.Крапивина, В. П. Иванов // Ветеринария. 1999. -№ 5. - С. 44-46.

60. Кузьмина, Л. П. Биохимический профиль организма: теоретические и практические аспекты изучения и оценки в медицине труда / Л.П. Кузьмина, Л.А. Тарасова // Медицина труда и промышленная экология. 2000. - №7. - С. 1-6.

61. Кузьменко, Д. И. Оценка резерва липидов сыворотки крови для перекисного окисления в динамике окислительного стресса у крыс / Д. И. Кузьменко, Б. И. Лаптев // Вопр.мед. химии. 1999. - №1. - С. 32-34.

62. Кухтина, Е. Н. Влияние железа, цинка и меди на процессы перекисного окисления липидов печени in vivo / Е. Н. Кухтина, Н. Н.

63. Глущенко // Биохимия. 1996. - Т.61, вып. 6. - С. 993-999.

64. Лебенгарц, Я. 3. Возрастные особенности иммунологической реактивности и обмена веществ крупного рогатого скота / Я. 3. Лебенгарц // С.-х. биология. Сер. биология животных. 1994. - №6. - С. 66-77.

65. Леонтьев, Л. Б. Методический подход к профилактике окислительного стресса / Л. Б. Леонтьев // Актуальные проблемы молодняка в современных условиях: материалы междунар. практ. конф. (23-25 сент.2002). Воронеж. - 2002. - С. 377-378.

66. Лисицина, Т.А. Активные формы кислорода и патогенез ревматоидного артрита и системной красной волчанки / Т. А. Лисицина, М. М. Иванова, А. Д. Дурнев // Вестник РАМН, 1996. № 12. - С. 15-19.

67. Ляпин, О. А. Ионол как регулятор стрессов у откормочного молодняка / О. А. Ляпин // Зоотехния. 1998. - №1. - С. 25-28.

68. Малахова, М. Я. Метод регистрации эндогенной интоксикации. / Малахова М. Я. СПб.: МАЛО, 1995. - 35 с.

69. Матюшин, Б. Н. Активные формы кислорода: токсическое действие и методические подходы к лабораторному контролю при поражении печени / Б. Н. Матюшин, А. С. Логинов // Клин, лаборат. диагностика. 1996 №4 - С. 51.

70. Меерсон, Ф. 3. Адаптация организма к стрессовым ситуациям и предупреждение стрессорных повреждений / Ф. З.Меерсон, Г. С. Сухих, Л. С. Каткова // Вестник АМН СССР. 1984. - № 4. - С. 45-51.

71. Меныцикова, Е. Б. Окислительный стресс при воспалении / Е. Б. Меныцикова, Н. К. Зенков // Усп. совр. биол.-1997. Вып. 2. - С. 155171.

72. Николайчик, В. В. «Средние молекулы»- образование и способы определения / В. В. Николайчик, Кирковский // Лаб. дело.- 1989. -№ 8.- С.31-33. В.В.

73. Новиков, Ю. X. Свободнорадикальное воспаление и антиоксидантная защита у больных бронхиальной астмой / Ю. X. Новиков // Вопросы мед. химии.- 1999.- №3. С. 56-62.

74. Оболенский, С. В. Лабораторная диагностика интоксикаций в практике интенсивной терапии / С. В. Оболенский, М. Я. Малахова. СПб., 1991.- 16 с.

75. Основы биохимии: пер. с англ. В 3 т. / А. Уайт, Ф. Тейндлер и др. - М.: Мир. - 1981.- Том. 3. - С. 1307-1318.

76. Первушин, Ю. В. Лабораторная диагностика синдрома эндогенной интоксикации / Ю. В.Первушин. Ставрополь. - 1993. - 25 с.

77. Пескин, А. В. Роль кислородных радикалов, образующихся прифункционировании мембранных редокс-цепей в повреждении ДНК / А. В. Пескин // Биохимия.-1996. Т. 61, вып. 1. - С. 65-72.

78. Петрович, Ю. А. Свободнорадикальное окисление и его роль в патогенезе воспаления, ишемии и стресса / Ю. А.Петрович, Д. В. Гуткин // Патол. физиол. и эксперим. терапия. 1986. - №5. - С. 85-91.

79. Петрович, Ю. А. Селеноэнзимы и другие селенопротеины, их биологическое значение / Ю. А.Петрович, Р.П. Подорожная // Успехи соврем, биол. 1981 №1.- С. 127-128.

80. Петрович, Ю. А. Влияние селенита натрия на активность глютатионпероксидазы и супероксиддисмутазы в тканях глаза при герпетическом кератите / Ю. А. Петрович, Н. А. Терехина, К. В. Шмагель // Бюл. эксперим. биол. и медицины. 1987 - №4 - С. 405.

81. Погодаев, С. Ф. Живая масса коров определяет потенциал удоев / С. Ф.Погодаев, А. М. Гаджиев // Зоотехния.- 2001. № 1.- С. 23-32.

82. Попова, Е. Вшьнорадикальш процеси: бюлогична та патогенетичная роль / Е. Попова, Т. Сокирко // Вет. медицина Украши.-1997.-№2. С. 16-18.

83. Правила проведения работы с использованием экспериментальных животных // Химия и жизнь. 1979. - №10. - С. 5-8.

84. Природные антиоксиданты как гепатопротекторы / Н. Д. Бунятян, О. А. Герасимова, Т. С. Сахарова, JI. В. Яковлева // Эксперим. и клин, фармакология. - 1999. - №2. - С. 64- 67.

85. Реброва, Т. Ю. Вклад системы антиокислительных ферментов в реализацию кардиопротекторного эффекта опиоидов при окислительном стрессе / Т. Ю. Реброва, Jl. Н. Маслова, С. В. Там // Вопр. мед. химии.-2001.- №3.- С. 47-51.

86. Рецкий, М. И. Изменения антиоксидантной системы у животных после рождения / М. И. Рецкий // Докл. XVIII Съезда Физиологического Общества им. И.П. Павлова. Казань. - 2001. - С. 209.

87. Родионова, Т. Н. Обмен веществ и мясная продуктивностьмолодняка крупного рогатого скота под влиянием селена / Т. Н. Родионова, М. Н. Панфилова // С.-х. биология. Сер. биология животных-2003. С. 108-109.

88. Роль процессов свободнорадикального окисления в патогенезе инфекционных болезней / А. П. Шепелев,. И. В. Корниенко, А. В. Шестопалов, А. Ю. Антипов // Вопр. мед. химии.- 2000. Т.46. вып. 2. - С. 110-116.

89. Салахов, И. И. Современные аспекты патогенеза эндотокси-нового шока / И.И Салахов, А.И. Ипатов // Успехи совр. биол. 1998.-Т.118.- Вып. 1.- С. 33-47.

90. Свободные радикалы в биологии пер. с англ. в 2 кн. / У. Прайер и др.. - М.: Мир.- Т. 1. - 318 с.

91. Свободные радикалы в живых системах / Ю. А. Владимиров, О. А. Азизова, А. И. Деев, А. В. Козлов, А. Н. Осипов, Д. И. Рощупкин // Итоги науки и техники. Биофизика: бюл. ВИНИТИ. 1991. - №29. - С. 252.

92. Севрюк, И. 3. Диагностические тесты для выявления метаболических нарушений у глубокостельных коров / И. З.Севрюк, Г. Ф. Макаревич, Н. Ю. Германович // Учен. зап. Витеб. гос. акад. вет. медицины. 1998. - Т.38. - С. 73-76.

93. Сидоров, И. В. Активные формы кислорода в окислительных процессах у животных и защитная регуляторная роль биоантиоксидантов / И. В.Сидоров, Н. А. Костромитинов // С.-х. биология'. Сер. биология животных. 2003. - №6.- С. 3-14.

94. Скаржинская, Г. М. Уровень селена в крови коров / Г. М. Скаржинская, Е. А. Кузьменкова, В. И. Иванов // Ветеринария. 1997.- №1. - С. 38-40.

95. Скулачев, В.П. Генетика, стратегии эволюции и кислород / В. П. Скулачев // Природа. 1998. - №12. - С. 8-10.

96. Скулачев, В. П. Возможная роль активных форм кислорода в защите от вирусных инфекций / В. П. Скулачев // Биохимия,- 1998. Т.63,вып. 12.-С. 1691-1694.

97. Соловьев, А. I. Ф1зюлопя та патоф1зюлопчш мехашзми д1\' оксиду азоту та пероксинприту / А. I. Соловьев // Ф1зюл. журнал. 1998. -Т. 44, N3.-С. 111-118.

98. Состояние системы антиоксидантной защиты в печени потомства крыс при антенатальном воздействии свинца / М. Г.Узбеков, К. И. Корпачевская, Н. И.Бубнова, Г. В. Куликова // Патол. физиол. и эксперим. терапия. 2003. - №1. - С. 23-24.

99. Стальная, И. Д. Метод определения малонового диальдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты / И. Д. Стальная, Т. Д. Гариашвили // В кн.: Современные методы в биохимии. М.: Медицина, 1977. - С. 44-46.

100. Степанова, И. П. Диагностическая ценность определения ВНСММ в плазме крови и эритроцитах коров / И. П.Степанова, JL М. Дмитриева, В. И. Зайнчковский // Зоотехния.- 2001. № 12. - С. 14-15.

101. Степанова, И. П. Интегральный метод диагностики метаболических нарушений у коров / И. П.Степанова, JI. М.Дмитриева, И. В. Власова // С.-х. биология.- 2003. № 4. - С. 9-13.

102. Справочник по биохимии. Киев: Наукова думка, 1971.- С. 101375.

103. Сулейманов, М. Структурно-функциональные механизмы возникновения и развития патологии у молочных сельскохозяйственных животных / М. Сулейманов, В. С. Слободяник // Докл. РАСХН. 2001.- № 2. С. 39-42.

104. Тарасенко, JI. Санитарно-гшешчш заходи спрямоваш на выведения сполук ртуп з оргашзму телят / JI. Тарасенко // Тваринницво Украши. 1998. - №3. - С. 20-21.

105. Тиунов, JI. А. Биохимические механизмы адаптации и компенсации нарушенных функций при действии на организм химических веществ / JI. А. Тиунов // В кн.: Структурные основы адаптации и компенсации нарушенных функций М.: Медицина, 1998.-С. 366-381.

106. Тиунов, JI. А. Механизмы естественной детоксикации и антиоксидантной защиты / Л. А. Тиунов // Вестник РАМН.- 1995.- № 3.- С. 9-12.

107. Ткачева, Л. В. Влияние селенопирана и витаминов на сперматогенез быков / Л. В.Ткачева, Е. П. Ващекин // Ветеринария. 2003. -№7. - С. 34-36.

108. Туликова, 3. А. Среднемолекулярные уремические токсины (обзор литературы) / 3. А. Туликова // Вопр. мед. химии.- 1983.- № 1.-С. 210.

109. Туликова, 3. А. Влияние средних молекул, выделенных из сыворотки крови обожженных пациентов, на состояние процессов перекисного окисления липидов в тканях животных / 3. А. Туликова, В. К. Осипович // Вопр. мед. химии.- 1990.- № 3.- С. 24-26.

110. Тутельян, В. А. Селен как эссенциальный и дефицитный фактор в питании населения России / В. А.Тутельян, С. А. Хотимченко // Вестник РАМН.- 2001.- №6.- С. 31-32.

111. Тышко, Н. В. Система антиоксидантной защиты как информативный тест .при гигиенической оценке генетически модифицированных источников пищевого белка / Н. В. Тышко // Вопр. питания.- 1999.- № 4.- С. 24-26.

112. Фармакологическая активность лазина / В.И. Левицкий, Н. Т. Климонтова, П. А.Золотов, Г. А. Вилков, Б. В. Стародомский, С. И. Бахтаров//Ветеринария.-1998.-№ 10. С. 41-43.

113. Фомина, В. Д. Механизм адаптации коров в условиях повышенных физиологических нагрузок / В.Д. Фомина, Л.Н. Адамушкина // Вопросы физики, химии и биологии в ветеринарии.- Московская гос. акад. вет. медицины и биотехнологии.- М., 1999.- С. 71-72.

114. Фотохемилюминесценция как метод изучения антиокислительной активности в биосистемах. Математической моделирование / Д. В.Магин, Д. Ю.Измайлов, И. Н.Попов, Г. Левин, Ю. А.

115. Владимиров И Вопр. мед. химии.- 2000.- № 4. С. 30-38.

116. Хемилюминесцентный метод анализа в ветеринарной медицине / Р. Р.Фархутдинов, М. В.Степаненко, В. А. Лиховских, Н. В. Голованов // Современные вопросы ветеринарной медицины и биологии: сб. науч. тр. БашГАУ.-Уфа, 2000.-С. 305-310.

117. Хуцишвили, М. Б. Свободнорадикальные процессы и их роль в патогенезе некоторых заболеваний органов пищеварения / М. Б. Хуцишвили, С. И. Рапопорт// Клинич. медицина.- 2002. № 10.- С. 10-16.

118. Черемисина, Т.Б. Хемилюминесцентное определение активности супероксиддисмутазы / Т. Б.Черемисина, Т. Б.Суслова, Л. Г. Коркина // Клин. лаб. диагн.- 1994.- № 1.- С. 22-23.

119. Шакиров, Д. Ф. Состояние системы пероксидного окисления липидов в организме экспериментальных животных после воздействия циклических углеводородов / Д.Ф. Шакиров, Д.А. Еникеев // Пат. физиол. и эксперим. медицина. 2003. - №1.-С. 26-28.

120. Шанин, В. Ю. Клиническая патофизиология: учебник для медицинских вузов /В. Ю. Шанин. СПб.: Специальная литература, 1998.569 с.

121. Эколого-адаптационная стратегия защиты здоровья и продуктивности животных в современных условиях / под ред. А. Г. Шахова.- Воронеж, 2001.-207 с.

122. Элиот, В. Биохимия и молекулярная биология / В. Эллиот, Д. Эллиот.- Пер. с англ. М.: Изд-во НИИ биомедицинской химии РАМН, 2000.- 372 с.

123. Юдин, М. Ф. Физиологическое состояние организма коров в разные сезоны года / М. Ф. Юдин //Ветеринария.- 2001.- №2. С. 38-41.

124. Alexander, S. Stress in the Racing Horse: Coping as Not Coping / S. Alexander, C. Irvine // J.Equine Sci.-1998. Vol. 9. - №3.-P. 77-81.

125. Allan, R.M. Proteolysis of isolated mitochondria by myocardial lyzosomal enzymes / R.M. Allan, E. Welman // Biochem. J. 1980. - Vol. 90.-№1. - P. 139-144.

126. Baars, A. The glutathione S transferaze. Their role in detoxication and toxification of xenobiotics / A.Baars, D.Breimer // Ann. Biol. Clin. - 1980. -Vol. 38, №1. -p. 49-56.

127. Babcock, G. Oxigen activation and the conservation of energy in cell respiration / G. Babcock, M. Wilstrom // Nature. -1992. -Vol. 356.-P. 301309.

128. Babior, В. M. The respiratory burst oxidase / В. M. Babior // Trends Biochem. Sci.-1987.-Vol. 12.-P. 241-243.

129. Badr, K.F. Novel mediators of sepsis-associated renal failure / K.F. Badr // Semin nephrol. 1994. -Vol. 14. - P. 3-7.

130. Barbour, A. G. Chemiluminescence by polymorphonuclear leukocytes from patients with active bacterial infection / A.G.Barbour, C.D. Allred, C.O. Solbery, A. R. Hill // J. Infect Dis.- 1980. Vol. 141. -P. 14-26.

131. Bentler, E. Erythrocyte glutathione synthetase deficiency leads not only to glutathione, but also to glutathione-s-transferase deficiency / E. Bentler, T. Gelbart, C. Pegelow//J. Clin. Invest. 1986. -Vol.77. -P. 38-41.

132. Bisby, R.H. Interactions of vitamin E with free radicals and membranes / R. H. Bisby // Free Radic. Res. Commun. -1990. №8. - P. 299306.

133. Bootman, M.D. The elemental principles of calcium signaling / M.D. Bootman // Cell. 1995. - Vol.83. - P. 675-678.

134. Cattell, V. Inducible nitric oxide synthase in inflammation / V.Cattell, A. Jansen // Histochem. J. 1995. - V. 27, № 10. - P. 777-784.

135. Chassenad, L. F. The role of glutathione and glutathione s-transferases in the metabolism of chemical carcinogens and other electrophilic agents / L. F. Chassenad // Adv. canser res.-1979. Vol.29. - P. 175-274.

136. Chronological Changes in the Superoxide-Scavenging Ability of the Plasma of Mares and Foals at Delivery / N. Ishida, F. Sato, Y. Asai, T. Masumizu, N. Mukoyama // J.Equine Sci.- 1995, Vol. 8. № 4. -P. 109-111.

137. Colvin, P. Metabolism of high-density lipoprotein SNB fraction / P. Colvin, J. Parks // Curr. Opion. Lipodol. -1999. -Vol. 10. -P. 309-314.

138. Corazzi, L. The effect of acute ethanol administration on the activity of membrane-bound enxymes of rat liver / L. Corazzi, G. Arienti, G. Porcellati //Pharmakol. res. commun.-1980.-T.12. № 8. - P. 739-749.

139. Eckstein, F. Guanosine 5'-(2-Thiodiphosphate as inhibitor of adenylate cyclase stimulation by quanine nucleotides and fluoride ions / F. Eckstein, D. Cassels, H. Levkovitz // Nutr. Repts. Int. 1979. - Vol.19. - №19. -P. 9829-9834.

140. Estabrook, R. W. The remarkable P-450s: a historical review of these versatile hemoprotein catalysts / R. W. Estabrook // FASEB J. 1996. -Vol.10.-P. 202-204.

141. Erythrocyte glutathione S-transferase deficiency and hemolytic anemia / E. Bentler, D. Dunning, I.B. Dabe, L. Forman // Blood. 1988. - Vol. -P. 73-77.

142. Feihman, L. Ethanol and lipid metabolism / L. Feihman, C. Lieber // American J. Clin. Nutr. 1999. - Vol. - 70. - P. 791-792.

143. Francis, G. High density lipoproteinoxidation: in vitro susceptibility and potential in vivo consequences / G. Francis // Biochim. Biophys. Acta. -2000.-Vol. 1483.-P. 217-235.

144. Fridman, F. Hummoral immune response impairment followingexcess vitamin E nutrition in the chick and turkey / F. Fridman, J. Bartov, 1. Sklan // Poultry Sc. 1998. Vol.77. - №7.-P. 956-962.

145. Fridovich, L. Superoxide radical and superoxide dismutase / L. Fridovich // Ann. Rev. Biochem. 1994. - Vol. 64. - P. 97-112.

146. Scand. 1966-V. 17-P. 1635.

147. Goto, I. The Relationship between reduced glutathion level and glutathion S-transferase activity in sheep erythrocytes / I. Goto, Y.Maede, N. Agar // J. Vet. Res.-1992. Vol.40. - Number 2,3.-P. 99-104.

148. Grover, P. Glutathione S-transferases in detoxification / P.Grover // Biochem. Soc. Transact. 1982. - Vol. 10, №2. - P. 80-82.

149. Hajger, D. Lipoprotein trafficking in vascular cells. Molecular Trojan horses and cellular saboteurs / D. Hajgar, M. Haberland // J. Biol. Chem.1997. Vol. 272.-P. 22975-22978.

150. Haynes W.G., Webb D.J. The endothelin family of peptides: local hormones with diverse roles in health and disease// Clin. Chem.- 1991.- Vol. 84.- P. 485-500.

151. Halliwell B. Free Radical in the Brain, aging, Neurological and Mental Disorders, Springer-Verlag / B. Halliwell. Berlin., N.Y., London, 1992.- P. 21-40.

152. Harris, E. Regulation of antioxidant enzymes / E. Harris // FASEB J. 1992. - Vol. 6. - P. 2675-2683.Ф

153. Hayasaki, Y. Generation of oxygen radicals in long-evans cinnamon rats with hereditary hepatitis and hepatocelluar carcinomas / Y. Hayasaki // Jpn. J.Vet. Res. 1996. - Vol. 44(1). - P. 62.

154. Hornstein, О. Selenintoxikation bei abstzferkeln / O. Hornstein, J. Czondor, H. Rang // Tierarztl. Umsch. 1998. - Jg.53, №9. - S. 547-554.

155. Ignarro, L.J. Lysosom membrane stabilization in vivo: effects of steroidal and nonsteroidal anti-inflammatory drags on the integrity of liver lysosomes / L.J. Ignarro // J. Pharmakol .Exp. Ther. 1972. - Vol.182. - P. 178188

156. Inikai, N. Differences in the lipid peroxides and the substances with superoxide-scavenging activities in sera between hot-bred (thoroughbred) and cold-bred (cross-bred) horses / N. Inikai // J. Vet. Res. 1995. - Vol. 43(1). - P. 64.

157. Ishida, N. Changes in Serum Concentration of Uric Acid and Allantoin due to Exhaustive Treadmill Exercise / N. Ishida, F. Sato, M. Kurosawa, // J. Equine Sci.- 1996. Vol. 10. - № 2. - P. 45-48.

158. Jacobs, K.H. Characteristics and mechanisms of adenylate cyclase inhibition by hormones / K.H. Jacobs // Biochem.Sos.Trans. 1981. - Vol.9. - № 2. - P. 56.

159. Janero, D.R. Malondialdehyde and thiobarbituric acid-reactivity as diagnostic indices of lipid peroxidation and peroxidative tissue injury / D. R. Janero // Free Rad.Biol.Med. 1990. №9. - P. 515-540.

160. Jard, S. Angiotensin 2 and L-adrenergic adenylate cyclase / S.Jard, B.Cantau, K. Jacobs // J. Biol. Chem.-1981. Vol.256. - №6.- P. 2603-2606.

161. Jaroby, W.B. The glutathione s-transferases. A group of mult, functional detoxification proteins / W.B. Jaroby // Adv. Enzymol. Relate a reas. Mol. Biol. 1978. - Vol.46. - P. 383-414.

162. Jessup, W. Oxidized lipoprotein and nitric oxide / W.Jessup // Curr. Opin. Lipidol. 1996. - Vol. 7. - P. 274-280.

163. Jialal, L. Devaraj lowdensity lipoprotein oxidation, antioxidants and atherosclerosis a clinical biochemical perspective / L. Jialal // Clin. Chem.-1996. Vol. 42. - P. 498-506.

164. Jokebainen, F. Acetaldehyde and liver disease / F. Jokebainen, A.

165. Kalle // Alcohole in Haelth and Disease. New York, Basel, 2001. P. 387-406.174.

166. Kasai, E. Mechanism of oxidative damage and species difference in erythrocytes oxidized by sodium n-propylthiosulfate, causative agent of onion induced hemolytic anemia / E. Kasai // J. Vet. Res. 1996. - Vol. 44(1). - P. 37.

167. Kimura, K. Modulation of platelet activating factor-induced glycogenolysis in the perfused rat liver after administration of endotoxin endotoxin vivo / K. Kimura, M.Moriyama, M. Nishisako //J. Biochem. 1998. -Vol. 123.-P. 142-149.

168. Kitagawa, S.A comparison of superoxide releasing reasoned in human polymorphonuclear leukocytes and monocytes / S. Kitagawa, F. Takakii, S.Sakamoto // Immunol. -1980; 125(1). P. 359-364.

169. Kiso, T. Characterization of vasoactive intestinal peptide receptors in canine liver membranes / T. Kiso // Biochem. Pharmacol. 1994. - Vol.47. -P. 241-245.

170. Knopp, R. Drug therapy: drug treatment of lipid disorders / R.Knopp // N. Engl. J. Med.-1999. Vol.341. - P. 498-511.

171. Lawrence, R. A. Glutathion peroxidase activity in selenium -deficient rat liver / R. A. Lawrence, R.F. Burk II Biochem. Biophys. Res. Commun. 1976. - Vol. 71.-P. 952-958.

172. Li, С. T. Spectrophotometric determination of lam tissue peroxide value / С. T. Li, M. Wick, D. B.Min // Spec. Circ. Ohio State Univ. Ohio Agr. Res. and Dev.Cent. 2002. - №180. - P. 55-56.

173. Libby, P. Molecular bases of the acute coronary suborns / P. Libby // Circulation. 1995. - Vol. 91.-P. 2844-2850.

174. Lipid peroxidation and antioxidant of sera in new born calves nanami / O. Inanami, N. Okada, N. Sato, A. S higa, M. Kuwabara // Mag. Res. Med. 1995. - Vol. 6.-P. 249-251.

175. Mantle, D. Free radicals as mediators of alcohol toxicity / D. Mantle, V. R. Preedy // Advers. Drug Peact. And toxicol. Rev. 1999. - 18, №4.- P. 235-252.

176. Maede, Y. Hereditary high concentration of glutathione in canine erythrocytes associated with high accumulation of glutamate, glutamine and aspartate / Y. Maede, N. Kasai, N. Taniguchi // Blood. 1982. - Vol. 59.-P. 883889.

177. Maede, Y. (Na.K)-ATP-ase and ouabain binding in reticulocytes from dogs with high K+ and low K+ erythrocytes and their changes during maturation / Y. Maede, M. Inaba // J. Biol. Chem. 1985. - Vol.260. - P. 33373343.

178. Maede, Y. Hereditary high concentration of glutathione in canine erythrocytes associated with high accumulation of glutamate, glutamine and aspartate / Y. Maede, N. Kasai, N. Taniguchi // Blood. 1982. - Vol. 59.-P. 883889.

179. Marcus, С J. Glutathione transferase from human erythrocytes / C.J. Marcus, W.H. Habig, W.B. Jaroby //Arch. Biochem. Biophys. -1978. Vol.88. -P. 287-293.

180. Piaz, M. Mechanisms of disease: Antioxidants and atherosclerotic heart disease / M. Piaz, B. Frei, J. Vitra, J. Keaney // N. Engl. J. Med. 1995. -Vol. 37 .- P. 408-416.

181. Morihiko, H. Oxidative effects of sodium n-propylthiosulfate, the causative agent of onion induced hemolytic anemia in dogs / H. Morihiko // J. Vet. Res. - 1995. - Vol.43. - №. 1. - P. 29-30.

182. Okabe, J. Some biochemical and biophysical characteristics of canine and bovine erythrocytes / J. Okabe // J. Vet. Res. 1995. - Vol.43. -№. 1. -P. 31-32.

183. Onkawa, H. Assay for lipid peroxides in animal tissue bythiobarbituric acid reaction / H. Onkawa, N. Oncki, K. Jadi I I Anal. Biochem. -1979. V.95, № 2. - P. 351-358.

184. Ostra enzootyczna dystrofia miesni u zrebiecia I profilaktyezne zastosowanie selenu z witamina E / R. Gorecka, J. Sikora, E. Sitarska, B. Osinska, P. Dziekan//Med. Weter. 1999. - R.55, №8. -S. 535-538.

185. Pasquali-Ronchetti, I. Ultrastructural and biochemical changes induced by progressive lipid peroxidation on isolated microsomes and rat liver endoplasmic reticulum / I. Pasquali-Ronchetti, A. Bini // Lab.Invest. 1980. -Vol.42, №4.-P. 457-468.

186. Pataoxonas inhibits high-density lipoprotein oxidation and preserver its function. A possible peroxidative role for peroxinase / M.Aviram, M. Rjsenblat, C. Bisgaier, R. Newton, S. Primo-Paemo, B. Ladu // J.Clin. Invest. 1998. - Vol.100. -P. 1581-1590.

187. Plasma copper and antioxidant status in Wilson's disease/ Ogihara H., Ogihara, Т., Miki, M., Yasuda, H„ Mino M. //Pediatr. Res.- 1995. Vol. 37. -P. 216.

188. Prohasra, J.R. Glutathion peroxidase activity of glutathion S-transferase purified from rat liver / J.R. Prohasra, H.E.Ganther // Biochem. Biophys. Res. Commun. 1977. - Vol.76. - P. 437-445.

189. Purification and characterization of form of cytochrom P-450 from bear liver microsomes // Y.Ymamoto, M. Masuda, A.Kazusada // Biochem. Pharmacol. 1995. - Vol. 49. - P. 965-970.

190. Rose, R. C. Biology of free radical scavengers: an evaluation of ascorbate / R. C. Rose, A. M. Bode // FASEB J. 1993. - Vol. 7. - P. 1135-1142.

191. Rusting, R. L. Why do we age? / R. L. Rusting // Sci. Amer.-l 992. -Vol. 267(6).-P. 130-141.

192. Saito, T. Isolation and biological activities of toxic substances in rhizomes of bracken fern, pteridium aquilinum / T.Saito // J. Vet. Res. 1987. -Vol.49.-P. 181-183.

193. Scavenging activity of superoxide anion in cultured rat hepatocytes

194. К. Ito, М. Kuwabara, Y. Nakajima, J. Kimura, J. Uchino // Transplant. Pros. -1994. Vol. 26. - P. 10599-10606.

195. Shimamoto, Y. Alteration of liver metabolism by interacebroventricular administration of lipopolysacaharide / Y. Shimamoto //J. Vet. Res. 1995. - Vol. 43(1). - P.67.

196. Silert, S. De novo lipogenesis, lipid kinetics and whole-body lipid balance in humans after acute alcohol consumption / S. Silert, Neese R., M. Hellerstein // American J. Clin. Nutr.- 1999. Vol 70. - P. 928-936.

197. Sjodin, B. Biochemical mechanisms for oxygen free radical formation during exercise / B. Sjodin, Y.H. Westing, F.S. Apple // Sports Med.-1990.-Vol. 10.-P. 236-254.

198. Smith, K. Dietary vitamin E and selenium affect mastitis and milk duality / K. Smith, J. Hogan, W. Beiss // J. anim. Sc.-1997. Vol.75, №6. - P. 1659-1665.

199. Snyder, S. H. Biological roles and mechanism of action of nitric oxide / S. H. Snyder, D. S. Brendt // Sci. Amer.-1992. Vol.266, №5. - P. 28-35.

200. Snyder, S. H. Nitric oxide: a physiologic messenger molecule / S. H. Snyder, D. S. Brendt // Ann. Rev. Biochem. 1994. - Vol.63. - P. 175-195.

201. Suzuki, T. Glutathione peroxidase, superoxide disumutase and catalpas in the red blood cell of GSH-normal and GSH-deficient sheep / T. Suzuki, N. S. Agar // Experientia. 1983. - Vol. 39. - P. 103-104.

202. Takahachi, A. Acrylamide induced neurotoxicity in the central nervous system of Sapanes quails / M. Takiguchi, M. Mizutani, C. Itakura // J. Neuropathol. Exp. Neurol. - 1994. - Vol. 53.- P. 276-283

203. Takiguchi, M. Mechanism of free radical-induced oxidative injury and activation of signal transduction in rat liver membrane with acute hepatitis-spectroscopic observation / M. Takiguchi // J. Vet. Res. 2000. - Vol.48, № 1,-P. 50-51.

204. The effect of radiation on bioluminescent bacteria: possible use luminescent bacteria as a biological dosimeter / J. Mantle, M. Fridin, A. A.

205. Bulich, H. Perry // Phys. In Med. And Biol. 1983. 28. - №5. - P. 599-602.

206. Uddin, S. Dietary antioxidants protection against oxidative stress / S. Uddin, S. Ahmad // Biochem. Education. 1995. - Vol.23. - P. 222-231.

207. Wu, G. Phagocyte-induced lipid peroxidation of intravenous fat emulsions and counteractive effect of vitamin E / G. Wu, CJarstrand, J. Nordenstrom // Nutrition. 1999. - Vol. 15. - P. 359-364.

208. Yamato O. Novel Heinz body hemolysis factors in onion (Allium сера) / О. Yamato, Т. Yoshihara, A. Ichihara, Y. // Biosci. Biotech. Biochem. -1994.-Vol. 58.-P. 221-222.

209. Young, E. G. On the estimation of allantoin by the Rimini-Schryver reaction / E. G. Young, C. F. Conway // J. Bio. Chem. 1992. - Vol. 142. - P. 839-853.