Активаторы плазминогена урокиназного (uPA) и тканевого (tPA) типов и их ингибитор (PAl-1) в опухолях и при гиперпластических процессах щитовидной железы тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.00.14, кандидат биологических наук Харитиди, Татьяна Юрьевна

• Харитиди, Татьяна Юрьевна
• кандидат биологических наук
• 2001

Оглавление диссертации кандидат биологических наук Харитиди, Татьяна Юрьевна

Список сокращений.

Введение.

Глава I. Обзор литературы.

1.1 Рак щитовидной железы.

1.1.2. Этиология и патогенез рака щитовидной железы.

1.1.3 Гиперплазия и рак щитовидной железы.

1.2. Активаторы и ингибиторы активаторов плазминогена.

1.2.1 Сериновые протеазы. Плазмин.

1.2.2. Система активации плазминогена.

1.2.3. Активатор плазминогена урокиназного типа (иРА).

1.2.4. Активатор плазминогена тканевого типа 0:РА).

1.2.5. Ингибиторы активаторов плазминогена (РА1).

1.3. Прогностическое значение активаторов и ингибиторов активаторов плазминогена.

1.3.1. Прогностическое значение активаторов и ингибиторов активаторов плазминогена в опухолях щитовидной железы.

Глава II. Материалы и методы исследования.

2.1,Общая клиническая характеристика обследованных больных.

2.2.Методы исследования.

2.3.Статистический анализ данных.

Глава III. Результаты исследования и их обсуждение. 3.1.Сравнение концентраций uPA, tPA и PAI-1 с учетом клинико-морфологических характеристик узлового коллоидного зоба щитовидной железы.

3.1.¡.Сравнение концентраций uPA, tPA и PAI-1 в зависимости от клинико-морфологических особенностей узлового коллоидного зоба щитовидной железы с признаками аденоматоза.

3.1.2.Сравнение концентраций uPA, tPA и PAI-1 в зависимости от клинико-морфологических характеристик узлового зоба щитовидной железы без признаков аденоматоза.

3.2.Сравнение концентраций uPA, tPA и PAI-1 в зависимости от клинико-морфологических особенностей диффузного токсического зоба щитовидной железы.

3.2.1.Сравнение концентраций uPA, tPA и PAI-1 в зависимости от клинико-морфологических особенностей диффузного токсического зоба щитовидной железы с признаками аденоматоза.

3.2.2.Сравнение концентраций иРА, 1РА и РА1-1 в зависимости от клинико-морфологических особенностей диффузного токсического зоба щитовидной железы без признаков аденоматоза.

3.3.Сравнение концентраций иРА, 1РА и РА1-1 в зависимости от клинико-морфологических особенностей аденомы щитовидной железы.

3.4.Сравнение концентраций иРА, 1РА и РА1-1 с учетом клинико-морфологических особенностей рака щитовидной железы.

3.5.Сравнение концентраций иРА, 1РА н РА1-1 при различных заболеваниях щитовидной железы.

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Активаторы плазминогена урокиназного (uPA) и тканевого (tPA) типов и их ингибитор (PAl-1) в опухолях и при гиперпластических процессах щитовидной железы»

Актуальность темы исследования. В последнее десятилетие повсеместно отмечается увеличение частоты заболеваемости (в 5-6 раз) раком щитовидной железы (РЩЖ) (С.Б.Пинский и соавт., 1999). Причиной высокой заболеваемости считают ухудшение экологической обстановки, радиоактивное загрязнение. Согласно современным данным литературы частота случайного выявления онкологических заболеваний щитовидной железы при лечении эутиреоидного узлового зоба составляет 0,4-27%, а частота опухолей при диффузном токсическом зобе - 0,5-21,5% (А.Л.Акинечев и соавт., 1998). Диагностика гиперпластических и опухолевых процессов в щитовидной железе затруднена. Примерно в 50% случаев у больных раком щитовидной железы устанавливается ошибочный диагноз. При этом почти у 60% больных выявляется РЩЖ в III или IV стадиях заболевания, хотя они относятся к визуальным формам новообразований (И.С.Агеев, 1992). В начальных стадиях болезни ошибки диагностики составляют 50-100%. При поступлении больных в клинику ошибки диагностики имеют место в 33,2-85,0% случаев (Л.Н.Камардин и соавт., 1984; Г.А.Гинзбург, 1991). В связи с этим большое внимание уделяется разработке новых методов обследования для своевременной диагностики РЩЖ, применению новых тест-систем для дальнейшей оценки биологического поведения узловых новообразований, а следовательно, риска малигнизации, активности процессов инвазии и метастазирования.

Особое внимание в последнее время многие исследователи уделяют проблеме инвазии и метастазирования опухолей щитовидной железы. Это связано с тем, что, основными проявлениями прогрессии опухолевого процесса считается способность раковых клеток проникать в прилежащие ткани, повреждая их, а также перемещаться с током крови или лимфы в отдаленные органы и ткани, давать начало новым очагам опухолевого роста (Murray P. et al., 1988).

Центральное место в этой проблеме занимает система активации плазминогена - многокомпонентный каскад протеолитических реакций, участвующий в разрушении базальной мембраны и внеклеточного матрикса, окружающих опухоль, что способствует выходу опухолевых клеток и образованию метастазов (Ellis V. et al., 1991; Graeff H. et al., 1992). Центральную роль в этих процессах играют сериновые протеазы активаторы плазминогена урокиназного (иРА) и тканевого (tPA) типов (Andreasen Р.А. et al., 1990). Стало известно, что иРА участвует в процессах деградации межклеточного вещества соединительной ткани, a tPA участвует в тромбофибринолизе (Mignatti P. et al., 1993; Pollanen J. et al., 1987).

Активность uPA может подавляться двумя специфическими ингибиторами PAI-1 и PAI-2 (Andreasen Р.А. et al., 1990; Ginsburg D. et al., 1986; Kruithof E.K.O. et al., 1986). По некоторым данным литературы роль ингибиторов, в частности, PAI-1 (Eaton D.L. et al., 1984), может сводиться не только к подавлению метастазирования и инвазии (через торможение активации плазминогена и всего следующего протеолитического каскада), но и к распространению опухолевого процесса (защита опухолевых клеток от протеолиза) (Reilly D. et al., 1992; Е.С.Герштейн и соавт., 1999). Поэтому высокий уровень ингибитора PAI-1 является неблагоприятным прогностическим фактором. Высокие концентрации иРА в тканях считают неблагоприятным признаком общей и безрецидивной выживаемости. Высокие значения tPA наоборот коррелировали с лучшей общей и безрецидивной выживаемостью, о чем свидетельствуют ряд работ, доказывающих прогностическое значение активаторов и ингибиторов активаторов плазминогена в опухолях различных локализаций (Foekens et al., 1992, 1996; Kim et al., 1998). Так, в ткани злокачественных опухолей яичников содержание иРА и PAI-1 значительно выше, a tPA -значительно ниже у женщин в более поздних стадиях заболевания. Исследования, проведенные при раке молочных желез, доказали что, чем агрессивнее болезнь, тем ниже содержание в опухоли tPA.

В опухолях мозга высокий уровень иРА и отсутствие tPA коррелируют с гистологически более агрессивными злокачественными новообразованиями, характеризующимися более быстрым характером течения и короткими сроками выживаемости. Высокий уровень ингибитора PAI-1 может расцениваться как неблагоприятный прогностический фактор (Но С.Н. et al., 1999; Ruppert С. et al., 1997; Bindal A.K. et al., 1994).

Несмотря на то, что активаторы и ингибиторы активаторов плазминогена являются объектом многих исследований, в литературе представлено немного данных относительно их роли в процессах инвазии рака щитовидной железы, а также возможности их использования в дифференциальной диагностике гиперпластических и опухолевых процессов этого органа.

Цель исследования - сравнительная оценка показателей активности активаторов плазминогена урокиназного (иРА) и тканевого 0:РА) типов и их ингибитора (РА1-1) при раке, аденоме и гиперпластических процессах щитовидной железы с учетом основных морфологических и клинических характеристик заболевания.

Для достижения указанной цели необходимо было решить следующие задачи.

Задачи исследования

1. Провести сравнительное изучение содержания активаторов плазминогена урокиназного (иРА) и тканевого 0:РА) типов, а также ингибитора активаторов плазминогена 1 типа (РА1-1) в цитозолях злокачественных опухолей, доброкачественных новообразований и при гиперплазиях щитовидной железы.

2. Сопоставить уровни 1РА, иРА и РА1-1 в злокачественных опухолях, доброкачественных новообразованиях и гиперпластических процессах щитовидной железы с учетом основных морфологических и клинических особенностей заболевания.

3. Оценить взаимосвязь показателей 1РА, иРА и РА1-1 в опухоли у больных различными морфологическими вариантами рака щитовидной железы.

Научная новизна

Впервые в отечественной литературе проведено сравнительное определение содержания активаторов плазминогена урокиназного и тканевого (иРА и 1РА) типов и их ингибитора типа 1 (РА1-1) в цитозольной фракции злокачественных опухолей, доброкачественных новообразований и гиперпластических заболеваний щитовидной железы.

На основании лабораторных и клинических исследований выявлена взаимосвязь между экспрессией активаторов плазминогена урокиназного и тканевого (иРА и 1РА) типов и их ингибитора 1 типа (РА1-1) в цитозольной фракции злокачественных опухолей щитовидной железы.

Показано, что в аденомах и при гиперпластических заболеваниях щитовидной железы экспрессируется меньше иРА и РА1-1 и больше 1РА, по сравнению со злокачественными опухолями.

Выявлено повышение уровня РА1-1 при медуллярном раке щитовидной железы в отличие от других гистологических вариантов рака.

Установлена взаимосвязь содержания иРА в злокачественных опухолях щитовидной железы со стадией заболевания и вовлеченностью регионарных лимфатических узлов.

Практическая значимость исследования Работа представляет не только теоретический интерес для анализа роли активаторов плазминогена урокиназного и тканевого типов (иРА и 1РА) и их ингибитора типа 1 (РА1-1) в процессах инвазии и метастазирования злокачественных опухолей щитовидной железы, но имеет значение для оценки степени риска малигнизации узловых образований и гиперпластических процессов в этом органе.

Кроме того, представленные данные исследования открывают перспективу создания новых лекарственных средств, влияющих на экспрессию иРА, 1РА и РА1-1 в опухолях, с целью ингибирования процессов инвазии и метастазирования при раке щитовидной железы.

Апробация работы Основные результаты диссертации изложены на 3-й Всероссийской научно-практической конференции «Актуальные вопросы эндокринологии» (16-18 мая 2000г., Пермь), IV Ежегодной Российской онкологической конференции (21-23 ноября 2000г., Москва), научно-практической конференции «Современные подходы к диагностике и лечению злокачественных новообразований» (7 декабря 2000г., Москва), первой Московской городской научно-практической молодежной конференции

Медицина на пороге XXI века. Актуальные проблемы и вопросы» (22 февраля 2001г., Москва), VIII Российском национальном конгрессе «Человек и лекарство» (2-6 апреля 2001г., Москва), второй Российской конференции молодых ученых «Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины» (24-28 апреля 2001г., Москва).

Материалы диссертации доложены на совместной научной конференции лаборатории клиническои биохимии, хирургических отделении опухолей головы и шеи и верхних дыхательно-пищеварительных путей НИИ клинической онкологии РОНЦ им. Н.Н.Блохина РАМН, хирургического отделения диагностики, отделения изучения новых противоопухолевых лекарств, лаборатория патологической анатомии опухолей с прозектурой.

20 декабря 2001г.

Публикации результатов исследования

По теме диссертации опубликованы 6 научных работ.

Структура и объем работы

Заключение диссертации по теме «Онкология», Харитиди, Татьяна Юрьевна

ВЫВОДЫ

1. Иммуноферментным методом в цитозолях 44 опухолей первичных больных раком щитовидной железы активатор плазминогена (иРА) обнаружен в 98% случаев, в количестве от 0,003 до 4,30 нг/мг белка (в среднем 0,78±0,15, медиана - 0,34 нг/мг белка); активатор плазминогена тканевого типа ОРА) в 100%) случаев, в количестве от 0,06 до 5,98 нг/мг белка (в среднем 1,52±0,23, медиана - 1,52 нг/мг белка), а их ингибитор РА1-1 в количестве от 0,05 до 7,61 нг/мг белка (в среднем 1,15±0,21, медиана - 0,74 нг/мг белка) у 100% больных. При этом средние уровни экспрессии иРА и РА1-1 были наибольшими в злокачественных опухолях, а уровень РА1-1 наименьшим по сравнению с другими обследованными группами пациентов.

2. Концентрация иРА прогрессивно возрастает с увеличением стадии заболевания, размера опухоли и наличия регионарных метастазов в лимфатических узлах. Не обнаружено четкой взаимосвязи в злокачественных новообразованиях щитовидной железы между содержанием иРА, 1РА, РА1-1 и типом роста, степени дифференцировки опухоли.

3. У больных медуллярным раком щитовидной железы концентрация РА1-1 в опухоли была самой высокой (р<0,005), а содержание 1РА наиболее низким по сравнению с другими группами обследованных больных с новообразованиями щитовидной железы. Содержание иРА практически не зависело от гистологического варианта медуллярного рака.

4. Прямую, высоко достоверную корреляционную зависимость наблюдали между уровнями иРА и 1РА в группах больных раком щитовидной железы и диффузным токсическим зобом без аденоматоза, а также между уровнями иРА и РА1-1 в группах больных узловым коллоидным зобом без и с аденоматозом и диффузным токсическим зобом с аденоматозом.

5. Не обнаружено зависимости уровней иРА, 1РА и РА1-1 от возраста и длительности заболевания. Уровень экспрессии РА1-1 зависит от сохранения репродуктивной функции женщин в группах больных, аденомой и узловым коллоидным зобом без аденоматоза, а уровень экспрессии tPA был более высоким в группе больных раком щитовидной железы в менопаузе.

6. У больных узловым коллоидным зобом без и с аденоматозом показатели экспрессии активаторов и ингибитора активаторов плазминогена приближались к значениям этих показателей у больных раком щитовидной железы. Значения иРА, 1РА и РА1-1 практически не отличались между больными узловым коллоидным зобом без и с аденоматозом.

ЗАКЛЮЧЕНИЕ

В последние время многие исследования сконцентрированы в области изучения механизмов инвазии и метастазирования опухолей. Центральное место в этой проблеме занимает система активации плазминогена -многокомпонентный каскад протеолитических реакций, участвующий в разрушении базальной мембраны и внеклеточного матрикса окружающих опухоль тканей, что способствует выходу опухолевых клеток и образованию метастазов (Ellis V. et al., 1991; Graeff Н. et al., 1992).

Ключевую роль в процессах активации плазминогена играют сериновые протеазы, активаторы плазминогена урокиназного (иРА) и тканевого (tPA) типов, а также их специфические ингибиторы, относящиеся к семейству серпинов - PAI-1 и PAI-2. Известно, что иРА участвует в процессах деградации межклеточного вещества соединительной ткани, как в норме, так и при патологии, a tPA - в тромбофибринолизе (Mignatti P. et al., 1993; Pollanen J. et al., 1987). Роль PAI-1 связана преимущественно с защитой опухолевых клеток от разрушающего действия иРА.

Многие авторы подтверждают важность и перспективность исследования ферментов системы активации плазминогена в различных типах опухолей для дальнейшего использования результатов в клинической практике. При этом наиболее перспективными показателями с точки зрения уточнения прогноза заболевания и оценки злокачественного потенциала опухоли, являются иРА и РА1-1. Роль активатора плазминогена тканевого типа пока недостаточно изучена.

Наименее исследована роль иРА, 1РА и РА1-1 при заболеваниях щитовидной железы. В литературе встречаются отдельные работы, посвященные данной теме, однако большинство этих исследований проведено в эксперименте либо на животных, либо в культуре клеток. Основу настоящего клинического материала составили 146 больных с различными заболеваниями щитовидной железы.

Согласно представленным нами данным, заболеваниями щитовидной железы в основном страдают женщины, что подтверждают и результаты других исследователей (С.Б.Пинский и соавт., 1999). Так, из 146 обследованных нами больных было 129 женщин и 17 мужчин, что составило 88,4 и 11,6%, соответственно. В связи с этим сравнение значений исследуемых показателей между мужчинами и женщинами не проводили.

Проведенное нами иммуноферментное определение концентрации некоторых наиболее важных компонентов системы активации плазминогена в цитозолях злокачественных опухолях, доброкачественных новообразований и при гиперпластических процессах щитовидной железы позволило выявить ряд закономерностей. В первую очередь, было убедительно продемонстрировано многократное увеличение концентрации активатора плазминогена урокиназного типа - иРА в злокачественных опухолях по сравнению с другими заболеваниями щитовидной железы табл.22, рис.16). Это наблюдение согласуется с предполагаемой универсальной ролью иРА в механизмах злокачественной трансформации клеток. Как известно, иРА считается ключевым звеном в запуске каскадного механизма превращения плазминогена в плазмин, который, в свою очередь, участвует в разрушении межклеточных компонентов матрикса и проникновении опухолевых клеток в окружающие ткани. Уровень ингибитора активаторов плазминогена также был увеличен, однако данные сравнения между группами (кроме группы больных аденомой щитовидной железы) РА1-1 были не достоверны. При сопоставлении средних значений активатора плазминогена тканевого типа его концентрация в опухолевой ткани оказалась достоверно ниже (в группе больных аденомой щитовидной железы не достоверно). При сопоставлении медиан и средних значений иРА и 1РА в различных группах наблюдается обратная зависимость: минимальному количеству иРА в группе гиперплазий щитовидной железы соответствует максимальное значение гРА. И наоборот, максимальные количества иРА, в злокачественных опухолях щитовидной железы соответствовали минимальные значение 1РА.

В этой связи представлялось интересным выявить зависимость содержания активаторов и ингибитора активаторов плазминогена в зависимости от клинико-морфологических показателей в исследуемых группах больных. Статистический анализ показал, что концентрации иРА, 1РА и РА1-1 во всех группах сравнения не коррелировали с возрастом, и длительностью заболевания. Концентрация РА1-1 зависела от сохранения репродуктивной способности женщин (в группах больных аденомой и узловым коллоидным зобом щитовидной железы), а уровень экспрессии 1РА был достоверно выше в группе больных раком щитовидной железы. Нами не обнаружено четкой взаимосвязи содержания иРА, 1РА и РА1-1 в опухолях щитовидной железы со степенью дифференцировки и характером опухолевого поражения. Концентрация иРА прогрессивно возрастала с увеличением стадии заболевания, размера опухоли и наличия регионарных метастазов. Изменения концентрации 1РА были не столь однозначны, наблюдалось возрастание уровня 1РА от I ко II стадии РЩЖ, незначительное понижение его отмечено в III стадии и максимальное значение - в IV стадии болезни. Содержание РА1-1 было практически одинаковым при I и II стадиях РЩЖ, достигало максимума в III стадии и понижалось в IV стадии болезни. Изменение концентраций исследуемых показателей в зависимости от индекса N выявило повышение иРА, РА1-1 и незначительное снижение концентрации 1РА.

При гистологическом исследовании большинство опухолей было отнесено к папиллярному РЩЖ, вторую по величине группу составил фолликулярный рак, в единичных наблюдениях обнаружен медуллярный рак щитовидной железы. Содержание РА1-1 в фолликулярном и папиллярном РЩЖ практически не отличалось друг от друга, а различие между значениями иРА и 1РА было недостоверным. Медуллярный РЩЖ отличался от других гистологических вариантов рака низким содержанием 1РА (недостоверно) и высоким содержанием РА1-1, что в сравнении с папиллярной и фолликулярной карциномой является неблагоприятным фактором и подтверждается тяжелым клиническим течением, большей агрессивностью, склонностью к рецидивированию после лечения по сравнению с папиллярным и фолликулярным вариантами РЩЖ (Г.С.Зефирова, 1999).

Во всех группах сравнения, кроме группы больных аденомой щитовидной железы, наблюдалась достоверная корреляционная зависимость. В группах больных узловым коллоидным зобом щитовидной железы с аденоматозом и диффузным токсическим зобом с аденоматозом, корреляционная зависимость определялась между уровнями иРА и РА1-1, тогда как в группах больных злокачественными опухолями и диффузным токсическим зобом щитовидной железы - между уровнями иРА и 1РА.

Значения иРА, 1РА и РА1-1 практически не отличались в группах больных узловым коллоидным зобом щитовидной железы с признаками аденоматоза и без таковых.

Наиболее близкой к группе больных РЩЖ, по уровню экспрессии активаторов и ингибитора активаторов плазминогена, оказались группы пациентов с узловым коллоидным зобом щитовидной железы с аденоматозом.

В группе больных УКЗ щитовидной железы с аденоматозом, отмечено, достоверное снижение уровня РА1-1 с увеличением размеров гиперплазированных узлов, что по утверждению ряда авторов является хорошим прогностическим признаком. В группе больных УКЗ щитовидной железы без аденоматоза с увеличением размера узлов, отмечено, достоверное увеличение уровня 1РА, что также характерно для благоприятного прогноза заболевания и, возможно, снижает риск малигнизации.

В заключении следует отметить, что результаты изучения системы регуляции плазминогена при разных заболеваниях щитовидной железы подтверждают связь экспрессии активаторов плазминогена иРА, 1РА и их ингибитора РА1-1 в биологии опухоль-трансформированных тканей, а также со степенью распространенности опухолевого процесса. Дальнейшие исследования должны быть направлены на разработку новых методов лечения опухолей и гиперпластических заболеваний щитовидной железы, которые способствуют нормализации процессов регуляции активности плазминогена и на изучение их роли в прогнозе заболевания.

Список литературы диссертационного исследования кандидат биологических наук Харитиди, Татьяна Юрьевна, 2001 год

1. Агеев И.С., Минкин Л.У., Копылов В.И. // Онкоэндокринологический подход к раннему раку щитовидной железы в условиях зобной эндемии. -Актуальные вопросы диагностики и лечения злокачественных опухолей головы и шеи. Москва. - 1991.-С.125-127.

2. Акинечев A.JL, Романчишен А.Ф., Борисов С.Б. // Степень онкологической опасности рецидивного зоба. Современные аспекты хирургической эндокринологии. - Липецк. - 1998. - С.5-8.

3. Балаболкин М.И. // Эндокринология. М: Универсум паблишинг. - 1998.582 С.

4. Бомаш Н.Ю. // Морфологическая диагностика заболеваний щитовидной железы. М.- Медицина,- 1981.- 186 С.

5. Брейдо И.С. // Хирургическое лечение заболеваний щитовидной железы.-С-П. "Гиппократ". -1998.- 331 С.

6. Валдина Е.А. // Заболевания щитовидной железы. М., -1993.- 223 С.

7. Валдина Е.А. // Сочетание рака щитовидной железы с другими злокачественными опухолями. Вопр. онкол.-1986.-№ 12.- С.49-53.

8. Гайдар Ю.А., Коцарев О.С., Политаева В.И., Брежнев М.В. // Рак и аутоиммунные процессы щитовидной железы. Тезисы II съезда онкологов стран СНГ. - 2000.- №57.

9. Герштейн Е.С., Кушлинский Н.Е. // Система активации плазминогена в оценке прогноза и гормоно-чувствительности рака молочной железы.-Вестник ОНЦ.- 1999.- №2.- С.52-59.

10. Гинзбург Г.А. // Комбинированный доступ при медиастинальных метастазах рака щитовидной железы. Сб. научных трудов "актуальные вопросы диагностики и лечения злокачественных опухолей головы и шеи. -М.- 1991.-С.127-129.

11. Гнатышак А.И. // Рак щитовидной железы. Киев. - 1962.

12. Демидчик Е.П., Циб А.Ф., Душников Е.Ф. //Рак щитовидной железы у детей. М.- Медицина. - 1996.- 206 С.

13. Заридзе Д.Г., Райхлин Н.Т. // Арх. Пат. 1971. - №3. - С. 16-22.

14. Зефирова Г.С. // Заболевания щитовидной железы.- М.-Арт-Бизнес-Центр.-1999.-С.138-146.

15. Казанцева H.A., Федосенко А.К., Гуревич JI.E. // Иммуногистохимические исследования в дифференциальной диагностике доброкачественных и злокачественных поражений щитовидной железы. Арх. Пат. - 2001. - №4 - С.18-21.

16. Камардин JI.H., Романчишен А.Ф. // Хирургическая тактика и результаты повторных вмешательств при раке щитовидной железы. Вопр. онкол. -1984. -№11.-С.25-30.

17. Краевский H.A., Смольникова A.B., Саркисова Д.С. // Патологоанатомическая диагностика опухолей человека. Руководство для врачей. - М. Медицина. -1993. -т.2 -С.349

18. Кушлинский Н.Е. // Возможности, неудачи и перспективы исследования опухолевых маркеров в современной онкологической клинике. Часть 2 (лекция) Заочная академия последипломного образования.-1999. - С.25-32.

19. Мамедов А.З., Калинин А.П. // Эпидемиология рака щитовидной железы: Обзорная информация Медицина и здравоохранение: Серия онкология.-М.-1984. - Вып.З. - С.57-75.

20. Напалков Н.П. // Современные проблемы онкологии. Под ред. С.А.Холдина. Л. - 1965. - С.34-43

21. Павловский М.П., Рудницкая А.Ю., Макар Р.Д., Вовк И.В. // Озлокачествление зоба. Хирургия.- 1989.-№5.-С.22-25.

22. Пачес А.И., Пропп P.M. // Рак щитовидной железы. Центр внедрения достижений науки и техники "Москва" - 1995.- 370 С.

23. Пинский С. Б., Дворниченко В.В., Белобородов В.А. // Опухоли щитовидной железы. Иркутск. - 1999.- 170 С.

24. Ременник JI.В., Старинский В.В., Чиссов В.И. // Злокачественные новообразования щитовидной железы на территориях Российской Федерации, пострадавших вследствие аварии на Чернобыльской АЭС. -Вопр. Онкологии.-1995.-№2.- С. 29-34.

25. Ровенский Ю.А. // Молекулярные механизмы онкогенеза, инвазии и метастазирования (цикл лекций). М.-1999.

26. Романчишен А.Ф. // Неотложные и срочные операции при осложненных заболеваниях щитовидной железы. Вопросы клинической хирургии органов эндокринной системы. - J1. -1987.- С. 67-75.

27. Хем А., Кормак Д. // Гистология. М.- Мир. - 1983. - С. 77-91.

28. Чиссов В.И., Дарьялова C.JI. //Избранные лекции по клинической онкологии. Москва. - 2000.-С.51-296.

29. Alnemri E.S., Livingston D.J., Nicolson D.W. // Human ICE/CED-3 protease nomenclature. Cell. -1996.-Vol.87.-P.171.

30. Andreasen P.A., Georg В., Lund L.R., Ricco A., Stacey S.N. // Plasminogen activator inhibitors: hormonally regulated serpins. Mol. Cell Endocrinol.-1990.- Vol. 68.-P.1-19.

31. Banner D.W., Dx Arcy A., Janes W. // Crystal structure of the soluble human 55 kd TNF receptor-human TNF(3 complex: implication for TNF receptor activation.- Cell.-1993.-Vol.73.-P.431 -445.

32. Bindal A.K., Hammoud M., Shi W.M., Wu S.Z., Sawaya R., Rao J.S. // Prognostic significance of proteolytic enzymes in human brain tumors.- J. Neurooncol.- 1994,- Vol.22,№2,- P. 101-110.

33. Cassano S., Ragno P., Blasi F., Rossi G. // Production of urokinase-type plasminogen activator by normal and transformed rat thyroid cells in culture.-Exp. Cell. Res.- 1989.- Vol. 182,№1.-P. 197-205

34. Cohen R., Modigliani E. // Medullary thyroid carcinoma: 25 years on. Cancer Journal. - 1993. - Vol.6,№2.-P.

35. Cubellis M.V., Nolli M.L., Cassani G., Blasi F. // Binding of sigle-chain pro-urokinase to the urokinase receptor of human U937 cells. J. Biol. Chem.-1986.-Vol.261.-P.15819-15822.

36. Cubellis M.V., Wun T.C., Blasi F. // Receptor-mediated internalization and degradation of urokinase is caused by its specific inhibitor PAI-1.- EMBO J.-1990.-Vol.9-P. 1079-1085.

37. Dan0 K., Andreasen P.A., Grondahl-Hansen J., Kristeans P.I., Nilsen L.S., Skriver L. // Plasminogen activators, tissue degradation, and cancer. Adv. Cancer Res.-1985.-Vol.44.-P.139-266.

38. De Witte J.H., Sweep C.G., Klijn J.G., Grebenschikov N., Peters H.A. // Prognostic value of urokinase-type plasminogen activator in 671 primary breast cancer patients. Br. J. Cancer.- 1999.-Vol.80,№l-2.-P.286-294.

39. Duffy M.J., (TGrady P, Devaney D., CTSiorain L., Fennelly J.J., Lijnen H.J. // Urokinase plasminogen activator, a marker for aggressive breast carcinomas: preliminary report. Cancer. -1988.-Vol.62.-P.531-533.

40. Duffy M.J., Reilly D., O'Sullivan C., O'Higgins N., Fennelly J.J., Andreasen P. // Urokinase-plasminogen activator, a new and independent prognostic marker in breast cancer. Cancer Res.-1990.-Vol.50.-P.6827-6829.

41. Duggan C., Kennedy S., Kramer D.M., Barnes C., Elvin P., McDermott E., O'Higgins N., Duffy M.J. // Plasminogen activator inhibitor type 2 in breast cancer. Br. J. Cancer -1997.-Vol.76.-P.622-627.

42. Eaton D.L., Scott R.W., Baker J.B. // Purification of human fibroblast urokinase proenzyme and analysis of its regulation by proteases and proase nexin. J. Biol. Chem.-1984.-Vol.259.-P.6241-6247.

43. Ellis V., Behrendt N., Dam0 K. // Plasminogen activation by receptor-bound urokinase. J. Biol. Chem.-1991.- Vol.266.- P. 12752-12758.

44. Ellis V., Pyke C., Eriksen J., Solberg H., Dam0 K. // The urokinase receptor: involvement in cell surface proteolysis and cancer invasion.-Ann. N.Y.Acad.Sci.-1992.-Vol.667.-P. 13-31.

45. Ellis V., Wun T.C., Behrendt N., Ronne E., Dam0 K. // Inhibition of receptor-bound uroknase by plasminogen activator inhibitors. J. Biol. Chem.-1990.-Vol.265.- P.9904-9908.

46. Fardoni J.R., Leight G.S., Dilley W.G. // Br. J. Surg. 1986. - Vol.73 -P.2278-281.

47. Farid N.R., Shi Y., Zou M. // Molecular basis of thyroid cancer. Endocr. Rev. - 1994.-Vol.15-P.202-232.

48. Foekens J.A., Berns E.M.J.J., Look M.P., Klijn J.G.M. // Molecular and Clinical Endocrinology (Vol.1). /Ed. J. R. Pasqualini. Hormone Dependent Cancer/ Eds J.R. Pasqualini, B. S. Katzenellebogen.-New York, 1996.-P.217-253.

49. Foekens J.A., Schmitt M., van Putten W.L.J., Peters H.A., Portengen H., Kramer M.D., Jänicke F., Klijn J.G.M. // Plasminogen activator inhibitor-1 and prognosis in primory breast cancer. J. Clin. Oncol.-1994.-N.12.-P.1648-1658.

50. Foekens J.A., Schmitt M., van Putten W.L.J., Peters H.A., Bontenbal M., Jänicke F., Klijn J.G.M. // Prognostic value of urokinase-type plasminogen activator in 671 primary breast cancer patients. Cancer Res.-1992.-Vol.52.-P.6107-6105.

51. Ginsburg D., Zeheb R., Yang A.Y. // cDNA cloning of human plasminogen activator-ingibitor from endothelial cells. J. Clin. Invest. - 1986 - Vol.78 -P.1673-1680.

52. Graeff H., Harbeck N., Pache L., Wilhelm O., Jänicke F, Schmitt M. // Prognostic impact and clinical relevance of tumor-associated proteases in breast cancer. Fibrinolysis.-1992.-N.6, Suppl.4.-P.45-53.

53. Hall S.W., Humphries J.E., Gonias S.L. // Ingibition of cell surface receptor-bound plasmin by alpha 2-antiplasmin and alpha 2-macroglobulin. J. Biol. Chem.-1991.-Vol.266.-P. 12329-12336.

54. Hembrough T.A., Kralovich K.R., Li L., Gonias S.L. // Citokeratin 8 released by breast carcinoma cells in vitro binds plasminogen and tissue-type plasminogen activator and promotes plasminogen activator.- Biochem. J.-1996a.-Vol.317.-P.763-769.

55. Herszenyi L., Plebani M., Carraro P., De Paoli M., Roveroni G., Cardin R., Tulassay Z., Naccarato R., Farinati F. // The role of cysteine and serine proteases in colorectal carcinoma.- Cancer.- 1999.-Vol.86.- P. 1135-1142.

56. Ho C.H., Yuan C.C., Liu S.M. // Diagnostic and prognostic values of plasma levels of fibrinolytic markers in ovarian cancer.-Gynecol.Oncol.-1999.-Vol.75,-P.397-400.

57. Holmberg L., Kristoffersson A.C., Lecander I., Wallen P., Astedt B. // Immunoradiometric quantification of tissue plasminogen activator secreted by fetal organs. Comparison with urokinase. Scand. J. Clin. Lab. Invest. - 1982. -Vol.42,№4. - P.347-54.

58. Ito Y., Takeda T., Kobayashi T., Wakasugi E., Tamaki Y., Umeshita K., Monden T., Shimano T., Monden M. // Plasminogen activation system in active even in thyroid tumors; an immunohistochemical study.-Surgery.-1995.-Vol. 118,№6.-P. 1011-1016.

59. Jänicke F., Graeff H., Schmitt M. // Clinical relevance of the urokinase-type and tissue-type plasminogen activators and of their type 1 inhibitor in breast cancer. Semin. Thromb. Hemost.-1991.-Vol.17.-P.303-312.

60. Jänicke F., Schmitt M., Pache L., Ulm K., Harbeck N., Graeff H. // Urokinase (uPA) and its inhibitor PAI-1 are strong and independent prognostic factors in node-negative breast cancer. Breast Cancer Res. Treat.-1993.-Vol.24.-P. 195208.

61. Kinder D.H., Berger M.S., Muller B.A., Silber J.R. // Urokinase plasminogen activator is elevated in human astrocytic gliomas relative to normal adjacent brain.-J. Oncol. Res.- 1993.-Vol.5.-P.409-414.

62. Kralovich K.R., Li L., Hembrough T.A., Webb D.J., Karns L.R., Gonias S.L. // Caracterization of the binding sites for plasminogen by tissue-type plasminogen activator in citokeratin 8 and citokeratin 18. J. Protein Chem.-1998.- Vol.17.-P.845-854.

63. Kruithof E.K.O., Vassalli J.-D., Schleuning W.-D. // Purification and characterization of a plasminogen activator ingibitor from the histiocytic lymphoma cell line U-937. J. Biol. Chem. - 1986. - Vol.261. - P.11207-11213.

64. Kusunoki T., Nishida S., Kimoto-Kinoshita S., Murata K., Satou T., Tomura T. // Type IV collagenase and immunostaining of type IV collagen in human thyroid tumors. Auris Nasus Larynx. - 2000. - Vol.27,№2. - P. 161-165.

65. Lacueva Gomez F.J. // The role of plasminogen activators and their specific inhibitor in lung cancer biology (squamous and adenocarcinoma). Diss. Abstr. Int.- 1993.- Vol.54,№3.-P.802.

66. Lemoine N.R., Mayall E.S., Wallie F.S. // High frequency of ras oncogene activation is all stages of human thyroid tumorigenesis. Oncogene. - 1989. -Vol.4.-P.119-164.

67. Liotta L.A., Tryggvason K., Garbisa S., Hart I., Foltz C.M., Shafie S. // Metastatic protential correlates with enzymatic degradation of basement membrane collagen. Nature. - 1980. - Vol.284. - P.67-68.

68. Mignatti P., Rifkin D.B. // Biology and biochemistry of proteinases in tumor invasion. Physiol. Rev.-1993.-Vol.73.-P.161-195.

69. MOller L.B. // Structure and function of the urokinase receptor. Blood Coagul. Fibrinolysis. - 1993. - Vol.4. - P.293-303.

70. Murray P., Granner D., Mayes P. // Harper's Biochemistry. 1988. - San Mateo - Vol.2 - P.352.

71. Packman K.S., Demeure M.J., Doffek K.M. // Increased plasminogen activator and type IV collagenase activity in invasive follicular thyroid carcinoma cells. -Department of Surgery, Medical College of Wisconsin, Milwaukee 53226, USA.

72. Padro T., van den Hoogen C.M., Emeis J.J. // Experimental hypothyroidism increases plasminogen activator inhibitor activity in rat plasma.-1998.-Gaubius Laboratory IVVO-TNO, Leiden, The Netherlands.

73. Piotrowski Z., Soszka T. // Tissue plasminogen activator (PA) and urokinase inhibitor in the tissue of neutral and hyperthyroid goitre.-Exp. Cell Res. -1989.-Vol. 182,№1.-P. 197-205.

74. Pollanen J., Sakseba O., Salonen E.M. // Distinct localisation of urokinase-type plasminogen activator and its type 1 inhibitor under cultured human fibroblasts and sarcoma cells. J. Cell. Biol. - 1987. -Vol. 104.-P. 1085-1097.

75. Pyke C., Kristensen P., Ralfkiaer E., Erikse J., Dan0 K. // The plasminogen activation system in human colon cancer: messenger RNA for the inhibitor PAI-1 is located in endothelial cells in the tumor stroma. Cancer Res. - 1991. -Vol.51. -P.4067-4071.

76. Ragno P., Montuori N., Covelli B., Hoyer-Hansen G., Rossi G. // Differential expression of a truncated form of the urokinase-type plasminogen-activator receptor in normal and tumor thyroid cells.-Thyroid.-1998,-Vol.8,№l.-P.23-28.

77. Reilly D., Christensen L., Duch M., Nolan N., Duffy M.J., Andreasen P.A. // Type-1 plasminogen activatorinhibitor in human breast carcinomas. Int. J. Cancer. - 1992. - Vol.50. - P.208-214.

78. Rothe M., Wong S.C., Henzel W.J., Goeddel D.V. // A novel family of putative signal transducers associated with the cytoplasmic domain of the 75 kDa tumor necrosis factor receptor. Cell. - 1994. -Vol.78. - P.681-692.

79. Ruppert C., Ehrenforth S., Scharrar I., Halberstandt E. // Protease levels in breast, ovary, and other gynecological tumor tussues: prognostic importance in breast cancer.-Cancer Detect Prev.-1997.-Vol.21 .-P.452-459.

80. Schimke R.N. //Genetic aspects of multiple endocrine neoplasia.- Ann. Rev. Med.- 1984.-Vol.35.- P.25-31.

81. Scott R.W., Bergman B.L., Bajpai A., Harsh R.T., Rodriquez H., Jones B.N., Barreda C., Watts S., Baker J.V. // Protease nexin. Properties and a modified purification procedure. J. Biol. Chem. -1985.-Vol.260.-P.7029-7034.

82. Sherman C. // Thyroid Cancer. Manual of Clinical Oncology. Fifth Edition UICC.- 1990.-P.204-210.

83. Shi Y.E., Zou M.J., Shmidt H. // Hight rates of ras codon 61 mutation in thyroid tumors in an iodide-deficient area. Cancer Res. - 1991. - Vol.51. -P.2690-2693.

84. Spiegel S., Foster D., Kolesnick R. // Signal transduction through lipid second messenger.- Curr.Opin.Cell Biol.-1996.-Vol.8.-P. 159-167.

85. Sundstrum B.E., Stigbrand T.I. // Cytokeratins and tissue polypeptide antigen.- Int. J. Biol. Markers.-1994.-Vol.9.-P.102-108.

86. Umeda T., Eguchi Y., Okino K., Komada M., Hattori T. // Cellular localization of urokinase-type plasminogen activator, its inhibitors, and their mRNAs in brest cancer tissues.-Pathol.-1997.-Vol.l83.-P.338-397.

87. Van Roozendaal C.E.P., Klijn J.G.M., Sieuwerts A.M., Henzen-Longmans S.C., Foekens J.A. // Role urokinase plasminogen activator in human breast cancer: Active invovment of stromal fibroblasts. Fibrinolysis.-1996.-Vol.2.-P.79-83.

88. Zou M.J., Shi Y.E., Farid N.R. // P53 mutationes in all stages of thyroid carcinomas.-J. Clin. Endocr.-1993.-Vol.77.-P. 1054-1058.1. РОССИЙСКАЯгосул/v;--- .ПАЯ'oBg^T- оь