Антипролиферативный аптамер и комбинация нейроиндукторов как основа для управления каскадами нейрогенеза при дифференцировочной терапии глиом тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 00.00.00, кандидат наук Колесникова Варвара Анатольевна

• Колесникова Варвара Анатольевна
• кандидат наук
• 2025

Оглавление диссертации кандидат наук Колесникова Варвара Анатольевна

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность проблемы

Цель работы и основные задачи исследования

Научная новизна

Теоретическая ценность и практическая значимость

Положения, выносимые на защиту:

Апробация работы

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

1. ХАРАКТЕРИСТИКА ГЛИОБЛАСТОМЫ

1.1. Глиомы, их классификация, степени злокачественности, понятие -глиобластома

1.2. Гетерогенность глиобластом

1.3. Маркеры, характерные для глиом

1.4. Теории происхождения глиом

1.5. Перспективные методы терапии глиобластомы

1.6. Причины устойчивости глиобластомы к терапии и ее рецидивирования

2. ХАРАКТЕРИСТИКА НЕЙРАЛЬНЫХ СТВОЛОВЫХ И ОПУХОЛЕВЫХ ГЛИОМНЫХ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК

2.1. Нейральные стволовые клетки

2.2. Опухолевые стволовые клетки глиомы

2.3. СЭ133 как маркер опухолевых стволовых клеток глиомы

2.4. Сигнальные пути в ОСКГ, поддерживающие состояние стволовости

2.4.1. Сигнальный путь Notch в стволовых клетках

2.4.2. Сигнальный путь Sonic Hedgehog в стволовых клетках

2.4.3. Сигнальный путь Wnt/ ß-катенин в стволовых клетках

2.4.4. Сигнальный путь PI3K/Akt/mTOR в стволовых клетках

2.4.5. Участие CD133 в сигнальных путях опухолевых клеток

3. АПТАМЕРЫ

3.1. Описание и преимущества аптамеров

3.2. Методы получения и модификации аптамеров

3.3. Применение аптамеров

3.3.1. Диагностика с применением аптамеров

3.3.2. Терапия с применением аптамеров

4. ПЕРЕПРОГРАММИРОВАНИЕ КЛЕТОК

4.1. Подходы к перепрограммированию клеток

4.2. Дифференцировочная терапия

4.3. Использование малых молекул как индукторов дифференцировки ИПСК

4.3.1. Факторы, действующие на ранних этапах нейрональной дифференцировки: LDN-193189, SB431542

4.3.2. Факторы, стимулирующие нейрональную дифференцировку на стадии прогениторных клеток: Purmorphamine

4.3.3. Нейротрофический фактор BDNF

5. МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

5.1. Клеточные культуры и нейросферы

5.2. Иммуномагнитная сепарация

5.3. Культивирование клеток с аптамерами и нейроиндукторными молекулами

5.4. MTS-тест

5.5. Оценка жизнеспособности в реальном времени

5.6. Иммуногистохимия и иммуноцитохимия

5.7. ПЦР в реальном времени

5.8. Создание генетической конструкции CD133fr/eEGFP-c1

5.8.1. Получение фрагмента области интереса (CD133fr). Полимеразная цепная реакция с последующим электрофорезом

5.8.2. Выделение образцов из геля

5.8.3. Секвенирование по Сенгеру

5.8.4. Лигирование вставки и вектора

5.8.5. Получение компетентных клеток

5.8.6. Трансформация компетентных клеток

5.8.7. Скрининг колоний

5.8.8. Наращивание и выделение плазмидной ДНК

5.8.9. Рестрикция векторов и вставки

5.8.10. Трансфекция

5.8.11. Визуализация трансфецированных клеток

5.9. Дот-блотинг и вестерн-блотинг

5.10. Анализ на апоптоз

5.11. Транскриптомный анализ

5.12. Оценка противоопухолевого действия аптамера bi-(AID-l-T) в комбинации с факторами в отношении глиобластомы 101/8

5.12.1. Ревитализация опухоли

5.12.2. Имплантация тканевого штамма глиобластомы 101/8 в мозг крысы с последующим тестированием коктейля GQIcombi

5.13. Оценка накопления аптамера bi-(AID-l-T) в опухоли 101/8 на 14 день роста опухоли

5.14. Статистическая обработка

6. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

6.1. CD 133 как маркер ОСКГ

6.1.1. Высокая экспрессия CD 133 в культуре клеток глиобластомы человека G01 из образца глиобластомы пациента

6.1.2. Распределение CD133fr в мембранах клеток глиобластомы человека G01, трансфицированных рекомбинантной ДНК GD133fr/pEGFP-c1

6.1.3. Характеристика клеточных культур глиобластомы человека G01 CD133 - и G01 CD133+

6.2. Исследование влияния аптамеров и их комбинаций с малыми молекулами на культуры клеток глиобластомы человека (grade 4)

6.2.1. Воздействие на клетки глиобластомы человека G01 CD133- и CD133+ комбинацией двух эффекторов: антипролиферативным аптамером bi-HD1 или bi-(AID-1-T) и одним нейроиндуктором

6.2.2. Воздействие на клетки глиобластомы человека G01 CD133- и G01 CD 133+ сложной комбинацией GQIcombi: антипролиферативным bi-(AID-1-T) в сочетании с каскадом нейроиндукторов для ИПСК (SB431542+LDN-193189+PRM+BDNF)

6.2.3. Воздействие GQIcombi на несколько перевиваемых клеточных культур глиобластомы от пациентов

6.2.4. Влияние аптамеров специфичных к CD133 на пролиферацию клеток глиобластомы человека G01

6.3. Исследование влияния коктейля GQIcombi (аптамера bi-(AID-1-T) с комбинацией малых молекул) на культуры клеток глиом человека разной степени злокачественности (grades 2-4)

6.3.1. Тестирование коктейля GQIcombi (аптамер bi-(AID-1-T) с комбинацией SB431542+LDN-193189+PRM+BDNF) на культурах клеток глиом grades 2, 3,

6.3.2. Рост апоптоза в клетках глиобластомы G01 после воздействия комбинации GQIcombi

6.3.3. Транскриптомный анализ культуры клеток глиобластомы человека G01 после воздействия комбинации GQIcombi (аптамер bi-(AID-1-T) и SB431542+LDN-193189+PRM+BDNF)

6.3.4. Исследование различных режимов добавления GQIcombi (аптамер bi-(AID-1-T) и SB431542+LDN-193189+PRM+BDNF) при культивировании клеточной культуры глиобластомы человека

6.3.5. Устойчивость клеток культуры глиобластомы человека G01 к действию GQIcombi в зависимости от представленности маркеров CD133, CD44 и L1CAM

6.4. Исследование влияния дифференцировочной терапии с использованием GQIcombi на рост тканевой модели глиобластомы 101/8 у крыс

7. ОБСУЖДЕНИЕ

8. ЗАКЛЮЧЕНИЕ

ВЫВОДЫ

БЛАГОДАРНОСТИ

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

ВВЕДЕНИЕ

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Антипролиферативный аптамер и комбинация нейроиндукторов как основа для управления каскадами нейрогенеза при дифференцировочной терапии глиом»

Актуальность проблемы

Глиомы представляют собой первичные опухоли головного мозга, развивающиеся, как предполагают по одной из гипотез, из нейральных стволовых или прогениторных клеток, содержащих инициирующие опухоль генетические изменения (Weller et al., 2024).

Глиобластома - одна из самых распространенных злокачественных первичных опухолей головного мозга человека во взрослом возрасте. Это самая агрессивная и злокачественная опухоль из глиом (grade 4), которая является неизлечимой на данный момент времени, поэтому разработка подходов к ее диагностике и лечению представляет собой перспективное направление для исследований. Согласно Всемирной Организации Здравоохранения глиобластома относится к диффузным астроцитарным глиомам взрослого типа 4-ой степени злокачественности (grade) c изоцитратдегидрогеназой (IDH) дикого типа (Louis et al., 2021).

Современные стандарты терапии глиобластомы включают хирургическую резекцию опухоли, химио- и радиотерапию. Тем не менее, 2-летняя выживаемость пациентов с диагнозом глиобластома составляет 26-33%, а 5-летняя выживаемость составляет всего 5% (Delgado-Lopez et al., 2016; Batash et al., 2017). В последнее время предлагается множество различных подходов к лечению данной опухоли, включая модификации уже существующих и разработку новых методов, таких как клеточная, генная и иммунотерапия (Alifieris et al., 2015; Jain, 2018).

Рецидивы глиобластомы объясняются некоторыми авторами существованием опухолевых стволовых клеток (ОСК), устойчивых к терапии (Singh et al., 2004). Одним из предполагаемых маркеров ОСК глиомы (ОСКГ) считают поверхностный маркер CD133, предположительно отвечающий за пролиферацию и поддержание жизнеспособности стволовых клеток (Brescia et al., 2013; Brown et al., 2017). Он считается маркером как опухолевых, так и нейральных

стволовых клеток (Uchida et al., 2000). Экспрессия CD133 обнаруживается на гемопоэтических стволовых клетках, эндотелиальных прогениторных клетках, нейральных стволовых клетках, а также на тканеспецифичных стволовых клетках, таких как стволовые клетки почек, простаты и роговицы. Он также был найден на мембранной поверхности опухолевых стволовых клеток глиобластомы, рака легкого, простаты, яичников, поджелудочной железы, почек (Gehling et al., 2000; Bussolati et al., 2005; Mizrak et al., 2008; Glumac et al., 2018). Таким образом, при сложности выделения из опухолевых клеток глиобластомы собственно стволовых на основе внутриклеточных маркеров, можно использовать данный поверхностный маркер, что одновременно позволит оценить и устойчивость CD133-позитивных клеток к исследуемым воздействиям (De et al., 2017).

В последнее время развивается направление в молекулярной биологии, которое занимается дифференцировкой различных клеток. Данное направление в основном используют для предварительного структурирования вектора дифференцировки у незрелой клетки при клеточной терапии. Известно, что прогениторные клетки чувствительны к воздействию индукторов, что позволяет легко использовать подобную технологию. Однако, возможно, подобный подход можно применить и к опухолевым клеткам. В качестве индукторов дифференцировки пытаются использовать класс веществ, получивших название малые молекулы, для которых разрабатываются протоколы последовательного добавления к клеточным культурам на разных этапах дифференцировки (De et al., 2017). Также ведутся исследования по подбору комбинаций препаратов для терапии глиобластомы (Gao et al., 2019; Senhaji et al., 2022). Однако, на данный момент все попытки использовать дифференцировочную терапию для солидных опухолей были неудачными. Очевидно, что неудача основана на малой чувствительности опухолевых клеток к индукторам. Известно, что активно делящиеся опухолевые клетки имеют нарушенную программу деления. Появилось предположение о необходимости использовать антипролиферативные цитостатические молекулы для улучшения чувствительности опухолевых клеток к индукторному воздействию.

Таким антипролиферативным агентом может быть аптамер, который цитостатически временно останавливает деление опухолевых клеток, а в качестве молекул запускающих нейрональную дифференцировку клеток глиобластомы можно использовать нейроиндукторные малые молекулы, которые используются для нейрональной дифференцировки индуцированных плюрипотентных столовых клеток (ИПСК) (Shutova et al., 2011). Подобный подход может создать новое направление терапии опухолей головного мозга, а в случае успеха, данная методика может быть применима и при лечении других солидных опухолей.

Цель работы и основные задачи исследования

Целью данной работы было изучение возможности управления пролиферативным и дифференцировочным потенциалом клеток глиом человека. Были поставлены следующие задачи:

1. Выбрать и охарактеризовать культуру клеток глиомы человека (grade 4), полученную из опухолевой ткани пациента, оценить в ней уровень экспрессии CD133 как маркера опухолевых стволовых клеток.

2. Из клеточной культуры глиомы человека (grade 4) получить и охарактеризовать, обогащенную CD133+ и обедненную CD133- клеточные культуры.

3. Подобрать аптамер, дозозависимо ингибирующий пролиферацию клеток глиомы человека (grade 4).

4. Провести поиск оптимальной комбинации антипролиферативного аптамера и нейроиндукторных молекул, способных эффективно снижать пролиферацию клеток в обогащенной CD133+ и обедненной CD133- клеточных культурах глиомы человека (grade 4) in vitro.

5. Исследовать универсальность подобранной комбинации аптамера и нейроиндукторных малых молекул на клеточных культурах глиом разной степени злокачественности (grade 2-4).

6. Исследовать чувствительность клеточных культур глиом человека к воздействию подобранной комбинации аптамера и нейроиндукторных малых

молекул в зависимости от представленности молекулярных маркеров опухолевых стволовых клеток глиомы (ОСКГ) CD133, CD44, L1CAM.

7. Исследовать влияние подобранной комбинации аптамера и нейроиндукторных малых молекул на рост имплантированной опухоли глиобластомы 101/8 на модели крысы in vivo.

Научная новизна

В настоящей работе впервые был применен принцип совместного воздействия антипролиферативного аптамера и нейроиндукторных малых молекул на клетки глиомы человека с целью снижения пролиферации этих опухолевых клеток.

Впервые получен эффективный способ дифференцировочной терапии для глиомы человека.

Введено понятие GQIcombi, которым обозначен коктейль, состоящий из антипролиферативного аптамера bi-(AID-1-T) и нейроиндукторных малых молекул - LDN-193189, SB431542, purmorphamine, BDNF. Новизна подтверждена патентом №2820200 «Способ терапии глиомы человека за счет снижения пролиферации и индукции дифференцировки опухолевых клеток глиомы человека».

Впервые исследовано воздействие комбинации GQIcombi на культуры клеток глиом разной степени злокачественности (grade 2-4), полученных из опухолевых тканей пациентов после резекции опухоли, и показана универсальность эффективного снижения пролиферации клеток всех исследованных культур.

Впервые был продемонстрирован антипролиферативный эффект GQIcombi в отношении тканевой глиобластомы 101/8, имплантированной в мозг крысы.

Теоретическая ценность и практическая значимость

С теоретической точки зрения данная работа вносит вклад в понимание правильной стратегии воздействия на опухолевую клетку с целью остановки ее пролиферации. Как известно, процессы клеточного деления и дифференцировки

являются взаимоисключающими, в особенности в зонах нейрогенеза в мозге (Liu et al., 2019a). Мы показали, что если первоначально остановить клеточное деление опухолевой клетки глиомы человека, то далее можно управлять ее дифференцировкой. В работе показано, что подобный подход может захватывать своим воздействием и опухолевые стволовые клетки глиомы, что делает использование GQIcombi перспективным и инновационным по сравнению со всеми другими вариантами терапии этого заболевания. В конечном результате получается, что опухолевые стволовые клетки глиомы, а также прогениторные клетки дифференцируются под влиянием действующих на разных этапах дифференцировки малых молекул. При этом обнаружено, что часть клеток опухоли погибнет путем естественного апоптотического процесса, поскольку для них эти сигналы будут «нерелевантны».

С практической точки зрения, полученные в работе данные позволяют сказать, что существует вариант изменения жизненной программы опухолевой клетки глиомы, благодаря которому можно перепрограммировать опухолевый процесс на безопасный для организма непролиферативный. Полученные in vitro и in vivo результаты создают основу для дальнейших исследований на животных с целью подбора оптимальных режимов и концентраций для полной остановки деления опухолевых клеток, что в перспективе может привести к созданию противоопухолевого препарата для использования в терапии глиобластомы. Кроме того, в случае успеха можно использовать подход дифференцировочной терапии и при других видах опухолей, подбирая коктейли для управления дифференцировкой других типов клеток.

Положения, выносимые на защиту:

1. Дифференцировочная терапия, включающая поэтапное воздействие коктейлем GQIcombi (состоящим из аптамера bi-(AID-l-T) и молекул-индукторов LDN-193189, SB431542 + purmorphamine + BDNF), перепрограммирует клетки глиомы человека из агрессивного пролиферативного в дифференцированное нейрональное состояние in vitro.

2. Использование in vitro коктейля GQIcombi, состоящего из блокатора пролиферации аптамера bi-(AID-1-T) c кратковременным цитостатическим эффектом и молекул-нейроиндукторов LDN-193189, SB431542 + purmorphamine + BDNF, стимулирует апоптоз в большинстве клеток глиомы человека, не подвергающихся дифференцировке.

3. Антипролиферативный аптамер bi-(AID-1-T) при его внутривенном введении in vivo таргетно доставляется в клетки тканевого штамма глиобластомы 101/8. Последовательное введение GQIcombi значительно снижает средний объем имплантированной глиобластомы 101/8 в мозге крысы.

Апробация работы

Основные результаты работы были доложены на IV Национальном конгрессе по регенеративной медицине (Москва, 2019), Международной научной конференции студентов, аспирантов и молодых ученых «Ломоносов» (2019, 2020, 2021, 2023), 16-й Конгрессе Европейской ассоциации нейроонкологов (EANO) (Австрия, 2021), V Национальном конгрессе по регенеративной медицине (Москва, 2022), XXV Научной школе-конференции молодых ученых по физиологии высшей нервной деятельности и нейрофизиологии (Москва, 2022), XXVII Научной школе-конференции молодых ученых по физиологии высшей нервной деятельности и нейрофизиологии (Москва, 2023), XXIV Съезде физиологического общества им. И. П. Павлова (Санкт-Петербург, 2023), 76-й Международной школе-конференции молодых ученых Биосистемы: организация, поведение, управление (Нижний Новгород, 2023 г.), VI Национальном конгрессе по регенеративной медицине (Санкт-Петербург, 2024), Всероссийском форуме молодых исследователей ХимБиоSeasons 2025 (Калининград, 2025).

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ГЭБ - гематоэнцефалический барьер

ИПСК - индуцированные плюрипотентные столовые клетки

ИЦ - интрацеллюлярный домен

кДНК - комплементарная ДНК

НСК - нейральные стволовые клетки

ОСКГ - опухолевые стволовые клетки глиомы

ОЕ - Оптические Единицы

ОСК - опухолевые стволовые клетки

ПААГ - полиакриламидный гель

ПЦР-РВ - ПЦР в реальном времени

РК - ретиноевая кислота

ТМ - трансмембранный домен

ЦНС - центральная нервная система

ЭДТА - этилендиаминтетрауксусная кислота

ЭЦ - экстрацеллюлярный домен

ACVR1 - рецептор активина A типа I

ADAMT2 - дезинтегрин и металлопротеиназа с мотивами тромбоспондина

AO клетки - клетки, обладающие адипогенным, остеогенным и хондрогенным потенциалом дифференцировки

APC - аллофикоцианин

ATRA - полностью транс-ретиноевая кислота

ATRX - альфа-талассемия/умственная отсталость, Х-сцепленная

AX клетки - клетки, которые обладают остеогенным и хондрогенным потенциалом дифференцировки

AXL - рецептор тирозин-протеинкиназы UFO

BDNF - нейротрофический фактор головного мозга

BET - семейство белков бромодомена и экстратерминального домена

BMP - костный морфогенетический белок

SMAD - белок, родственный Sma и Mad

BRAF-V600E - мутация V600E гена серин/треониновой протеинкиназы

B-raf MET - фактор мезенхимально-эпителиального перехода

BSA - бычий сывороточный альбумин

CAR - химерный рецептор антигена

CDK4 - циклинзависимая киназа 4

CDKN2A/B - ингибитор циклинзависимой киназы 2A/B

c-Myc - клеточный гомолог онкогена вируса птичьего миелоцитоматоза

CTLA4 - гликопротеин цитотоксических T-лимфоцитов 4

CXCR4 - рецептор хемокинов C-X-C типа 4

DABCO - 1,4-диазабицикло[2.2.2]октан

DAXX - белок 6, связанный со смертью

DHO - дигидрооротат

DHODH - дигидрооротатдегидрогеназы

DMEM7F12 - модифицированная среда Игла Дульбекко/питательная смесь F-12 DMSO - диметилсульфоксид

DNMTs - ДНК-метилтрансферазы

EGFR - рецептор эпидермального фактора роста

EGFRvIII - вариант III рецептора эпидермального фактора роста

EpCAM - молекула адгезии эпителиальных клеток

EphA2, EphB3/2 - тирозинкиназы рецептора эфрина

ERK - фермент семейства MAPK из группы киназ, регулируемых внеклеточными сигналами

EZH2 - энхансер гомолога 2 zeste FBS - эмбриональная телячья сыворотка

FDA - управление по санитарному надзору за качеством пищевых продуктов и медикаментов

FGFR - рецептор фактора роста фибробластов Foxgl - белок forkhead box Gl G - область гликозилирования

G34R/V - точечная мутация, замена глицина в позиции 34 на аргинин или валин

GFAP - глиальный фибриллярный кислый белок

GL - гранулярный слой

Gli - связанный с глиомой онкоген

GQ - G-квадруплекс

H3F3A - гистон H3, семейство 3A

H3K27 - гистон 3 лизин 27

H3K27me3 - гистон 3 лизин 27 3 триметил

HDAC - деацетилазы гистонов

Hes5 - фактор транскрипции Hairy and Enhancer of Split 5

HGFR - рецептор фактора роста гепатоцитов

HIF-1 - фактор, индуцируемый гипоксией 1

HIF-2 - фактор, индуцируемый гипоксией 2

HIST1H3B - гистоновый кластер 1, H3b

IAP - ингибиторы белков апоптоза

Icombi - комбинация нейроиндукторных малых молекул LDN-193189, SB431542, purmorphamine, BDNF

IDH - изоцитратдегидрогеназа

IgG - иммуноглобулин G

IgY - иммуноглобулин Y

JMJD3 - белок, содержащий домен Джумонджи 3

K27M - точечная мутация, замена лизина в позиции 34 на метионин

Klf4 - круппелеподобный фактор 4

L1CAM - белок молекулы клеточной адгезии L1

LB - лизогенный бульон

MAPK - митоген-активируемая протеинкиназа MCL-1 - миелоидно-клеточный лейкоз-1 MDM2 - убиквитин-еЗ лигаза, подобный P53 MDM4 - регулятор P53

MEK - митоген-активируемая протеинкиназа/киназа ERK MGMT - O6-метилгуанин-ДНК-метилтрансфераза MHC - главный комплекс гистосовместимости

miPHK - микроРНК ML - молекулярный слой

MMLV - обратная транскриптаза вируса лейкемии мышей MMP2 - матриксные металлопротеиназы 2 MMP9 - матриксные металлопротеиназы 9 mTOR - мишень рапамицина млекопитающих

MTS - 3-(4,5-диметилтиазол-2-ил)-5-(3-карбоксиметоксифенил)-2-(4-

сульфофенил)-2Н-тетразолий

NCBI - Национальный центр биотехнологической информации

NEB Tm Calculator - калькулятор температуры плавления New England Biolabs

NeuroD - фактор нейрогенной дифференцировка 1

NF1 - ядерный фактор 1

NF-kB - ядерный фактор, усилитель каппа-легкой цепи активированных В-клеток NG2 - нейрон-глиальный антиген 2

NMD - нонсенс-опосредованный распад информационной РНК (мРНК) Notchl - гомолог Notch 1

Oct2 - октамер-связывающий фактор транскрипции 2 Oct4 - октамер-связывающий фактор транскрипции 4 PARP - поли-(аденозиндифосфатрибоза) полимераза PBS - фосфатно-солевой буфер

PCNA - пролиферирующий клеточный ядерный антиген PD-1 - рецептор программируемой клеточной гибели 1 PDGFR - рецептор тромбоцитарного фактора роста

PDGFRA - рецептор тромбоцитарного фактора роста А

PDGFRB - рецептор тромбоцитарного фактора роста B

PDL-1 - лиганд рецептора программируемой клеточной гибели 1

PI3K/Akt - фосфоинозитид-3-киназа/протеинкиназа B альфа

PKC - фосфолипаза C (PLQ-y/протеинкиназа C

PlGF - плацентарный фактора роста

PPM1D - протеинфосфатаза 1D магнийзависимая дельта

PROM1 - проминин-1

PSA-NCAM - полисиалированная молекула адгезии нейрональных клеток

PTEN - фосфатаза с двойной субстратной специфичностью

R132H - точечная мутация, замена аргинина в позиции 132 на гистидин

RAR - рецептор ретиноевой кислоты

RARE - элементы ответа на ретиноевую кислоту

RB1 - белок ретинобластомы 1

RBP-Jk - белок Jk, связывающий сигнал рекомбинации

RMS - ростральный миграционный поток

ROCK - ингибиторы Rho-киназы

RTCA - анализатор клеток в реальном времени

RTK - рецепторы тирозинкиназы

RXR - рецептор ретиноида X

SELEX - систематическая эволюция лигандов путем экспоненциального обогащения (Systematic Evolution of Ligands by EXponential Enrichment)

SGZ - субгранулярная зона

Shh - сигнальный путь Sonic Hedgehog siPHK - малые интерферирующие РНК

SMARCAL1 - SWI/SNF-связанный матричный актин-зависимый регулятор хроматинового подсемейства A-подобный белок 1

Smoothened - рецептор, связанный с белком G класса Frizzled

Sox2 - область определения пола Y-блок 2

SSEA1 - стадийно-специфичный эмбриональный антиген-1

STAT3 - преобразователь сигнала и активатор транскрипции 3

sVEGFR1 - растворимый рецептор фактора роста эндотелия сосудов 1

sVEGFR2 - растворимый рецептор фактора роста эндотелия сосудов 2

SVZ - субвентрикулярная зона

TAE - трисацетат-ЭДТА

TAR - транс-активируемый ответный элемент, участок РНК, расположенный на 5'-конце мРНК вируса иммунодефицита человека

TBS-T - трис-буферный физиологический раствор с Твином 20

TERT - обратная транскриптаза теломеразы

TfR - трансферриновый рецептор

TGF-ß - трансформирующий фактор роста бета

TP53 - транскрипционный фактор, регулирующий клеточный цикл

TTFields - поля для лечения опухоли

VEGF - фактор роста эндотелия сосудов

VEGFR - рецептор фактора роста эндотелия сосудов

Wnt - семейство секретируемых сигнальных белков, регулирующих эмбриогенез и гомеостаз тканей

w/v - грамм в мл раствора

1. ХАРАКТЕРИСТИКА ГЛИОБЛАСТОМЫ

1.1. Глиомы, их классификация, степени злокачественности, понятие -глиобластома

В 2021 году Всемирная организация здравоохранения обновила классификацию опухолей головного мозга, сделав акцент на молекулярных характеристиках опухолей. Weller M. и соавторы (Weller et al., 2021) предложили диагностический алгоритм, позволяющий идентифицировать различные виды глиом у взрослых (Рисунок 1).

Рисунок 1. Диагностический алгоритм для комплексной классификации диффузных глиом у взрослых. Адаптирован (Weller et al., 2021).

Образцы тканей, полученные путем биопсии у пациентов с диффузными глиомами, оцениваются с помощью иммуногистохимии на наличие мутации R132H (замена аргинина в позиции 132 на гистидин) в белке IDH 1 и на потерю экспрессии ядерного белка ATRX (альфа-талассемия/умственная отсталость, Х-сцепленная). Для постановки диагноза «глиобластома» IDH-дикого типа необходимо сочетание нескольких условий: пациент в возрасте старшее 55 лет, гистология подтверждает типичную глиобластому без ранее существовавшей глиомы более низкой степени злокачественности, опухоль локализуется не по средней линии, сохраняется экспрессия ATRX, отсутствие мутации R132H в IDH1 при иммуногистохимическом исследовании. Во всех других случаях диффузных глиом для более точного диагноза отсутствие обнаружения мутации R132H в IDH1 при иммуногистохимическом окрашивании должно сопровождаться секвенированием ДНК IDH1 и IDH2 для обнаружения или исключения наличия неканонических мутаций.

Диффузные астроцитарные глиомы IDH-дикого типа без признаков микрососудистой пролиферации или некроза тестируют на амплификацию EGFR (гена рецептора эпидермального фактора роста), мутацию в промоторной области TERT (обратная транскриптаза теломеразы) и цитогенетический профиль с различными вариантами приобретения 7й и утраты 10й хромосом (Cheng et al., 2024) как молекулярных характеристик глиобластом IDH-дикого типа 2.

Кроме того, наличие мутаций в гистоне H3.3 G34R/V (замена глицина в позиции 34 на аргинин или валин) оценивают с помощью иммуногистохимии или секвенирования ДНК для выявления диффузных полушарных глиом с мутацией H3.3 G34, в частности, у молодых пациентов с глиомами IDH-дикого типа (например, у пациентов в возрасте младше 50 лет с потерей экспрессии ATRX в опухолевых клетках).

Для выявления диффузных глиом средней линии с мутацией H3 K27M (замена лизина в позиции 34 на метионин) диффузные глиомы таламуса, ствола мозга или спинного мозга оценивают на предмет мутаций в гистоне H3 K27M и по

утрате H3K27me3 (ядерного К27-триметилированного гистона H3) (Weller et al., 2021).

Глиобластома является одной из самых распространенных злокачественных опухолей головного мозга. Ежегодно выявляется 3-5 случаев заболевания на 100 000 человек, при этом выживаемость в 42,4% случаев составляет 6 месяцев, 1 год в 17,7% случаев, 5-летняя выживаемость ограничивается всего 5% (Omuro et al., 2013; Delgado-Lopez et al., 2016; Dewdney et al., 2023).

1.2. Гетерогенность глиобластом

Глиобластома характеризуется гетерогенностью опухолевых клеток, входящих в ее состав (Aum et al., 2014; Patel et al., 2014). Благодаря секвенированию РНК единичных клеток (scRNA-seq) глиобластомы удалось выделить несколько подтипов глиобластомы: классический, пронейральный и мезенхимальный (Neftel et al., 2019). Классический тип характеризуется увеличенной экспрессией EGFR, для мезенхимального выявлены делеции в гене NF1 (ядерный фактор 1), особенностями пронейрального типа являются изменения в гене PDGFRA (рецептор тромбоцитарного фактора роста А) и точечные мутации в гене IDH1 (Verhaak et al., 2010). Согласно исследованиям, выживаемость пациентов зависит от подтипа глиобластомы, так пациенты с мезенхимальным подтипом глиобластомы имеют наихудший прогноз (Jeanmougin et al., 2020). Если рассматривать сигнальные пути, для мезенхимального подтипа сигнальный каскад PI3K/Akt (фосфоинозитид-3-киназа/протеинкиназа B альфа) играет роль в развитии более агрессивного поведения опухоли в связи с повышенной пролиферацией, выживаемостью и ангиогенезом. В то время для пронейрального подтипа опухоли характерна активация пути Notch1 (гомолог Notch 1) и эта активация может быть связана с более продолжительным периодом выживания пациентов (Phillips et al., 2006). Гетерогенность глиобластом определяется не только генетической программой опухолевого развития собственно клеток опухоли, но и модулируется ее микроокружением, под влиянием которого могут происходить существенные

изменения, включающие изменение в экспрессии поверхностных маркеров (Dirkse et al., 2019).

1.3. Маркеры, характерные для глиом

Прогностическое значение и одну из ключевых ролей в классификации глиом 2021 года играет наличие мутаций в гене IDH. Пациенты с мутантным геном IDH имеют более высокую вероятность выживания, чем пациенты с глиомой IDH дикого типа (Chen et al., 2016; Reifenberger et al., 2017). В обновленной классификации опухолей центральной нервной системы (ЦНС) понятие «глиобластома» теперь используется исключительно для обозначения опухолей 4-ой степени злокачественности (grade 4) с диким типом IDH у взрослых и больше не включает опухоли с мутацией IDH или опухоли, возникающие в детском возрасте (Louis et al., 2021).

Другим генетическим маркером, попавшим в международную классификацию ВОЗ 2021 года, стал ген MGMT (O6-метилгуанин-ДНК-метилтрансферазы). MGMT кодирует белок репарации ДНК, который удаляет алкильные группы в положении 06-гуанина, возникающие в результате воздействия алкилирующими агентами. Эпигенетическое подавление MGMT путем метилирования промотора часто встречается при глиобластоме (40-50%). То есть, если экспрессия MGMT не подавляется, его белковый продукт нейтрализует цитотоксическое действие терапевтического препарата Темозоломида, снижая его терапевтический эффект (Richard et al., 2020).

Следует обратить внимание на тот факт, что классификации глиом стали ориентироваться на молекулярные маркеры и на поиск подобных маркеров направлены усилия многих научных коллективов. Например, показано, что мутации в гене EGFR, чей продукт вовлечен в различные сигнальные пути, в том числе в PI3K/AKT/mTOR (мишень рапамицина млекопитающих), способствуют пролиферации, клеточной выживаемости за счет ингибирования апоптоза, а вовлечение в Ras/Raf/MAPK (митоген-активируемая протеинкиназа), управляет

дифференцировкой, пролиферацией и миграцией клеток. И подобные мутации встречаются примерно в 57% случаях глиобластом (Furnari et al., 2015).

Также нарушения в ряде важных для правильного функционирования клеток процессах (нарушение в репарации ошибочно спаренных нуклеотидов, гипоксия и др.), а также гиперэкспрессия генов VEGF (фактор роста эндотелия сосудов), ki67, PD-1 (рецептор программируемой клеточной гибели 1) , PDL-1 (лиганд рецептора программируемой клеточной гибели 1), BRAF-V600E (мутация V600E гена серин/треониновой протеинкиназы B-raf), MET (фактор мезенхимально-эпителиального перехода) также могут быть биомаркерами глиобластомы (Senhaji et al., 2022).

Потенциальными биомаркерами могут служить биомаркеры sVEGFR1 (растворимый рецептор фактора роста эндотелия сосудов 1), sVEGFR2 (растворимый рецептор фактора роста эндотелия сосудов 2), а также циркулирующие PlGF (плацентарный фактора роста) и VEGF (Sareen et al., 2022).

На данный момент сформулированы характеристики молекулярных дефектов, которые необходимы для образования и развития глиобластомы, которые происходят в следующих процессах: инициация опухолевого роста, предотвращение ее старения и активация бесконечного деления (Wen et al., 2020). Мутации в гистонах H3F3A (гистон H3, семейство 3A) или HIST1H3B (гистоновый кластер 1, H3b), гиперэкспрессия EGFR, гомозиготная делеция CDKN2A/B (ингибитор циклинзависимой киназы 2А/В), утрата гена NF1, изменения в сигнальном пути PI3R/mTOR связаны с инициацией опухолевого роста. Нарушения в клеточном цикле - амплификация CDK4 (циклинзависимая киназа 4) и CDKN2A/B, гене ACVR1 (рецептор активина A типа I) сигнального пути BMP-SMAD (сигнальный путь, в котором белки BMP (костные морфогенетические белки) активируют внутриклеточные белки SMAD (белки, родственные Sma и Mad), регулирующие экспрессию генов), механизмах апоптоза (гены TP53 (транскрипционный фактор, регулирующий клеточный цикл), MDM2 (убиквитин-е3 лигаза), MDM4 (Регулятор P53), RB1 (белок ретинобластомы 1), PPM1D (протеинфосфатаза 1 D магнийзависимая дельта) способствуют избеганию

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Колесникова Варвара Анатольевна, 2025 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1. Aartsma-Rus A., Corey D.R. The 10th Oligonucleotide Therapy Approved: Golodirsen for Duchenne Muscular Dystrophy // Nucleic Acid Ther. 2020. V. 30. № 2. P. 67-70.

2. Absorbance Measurements | BMG LABTECH. [Электронный ресурс]. URL: https://www.bmglabtech.com/en/absorbance/ (дата обращения 14.06.2025).

3. Ahmed S.I., Javed G., Laghari A.A., Bareeqa S.B., Farrukh S., Zahid S., Samar S.S., Aziz K. CD133 Expression in Glioblastoma Multiforme: A Literature Review // Cureus. 2018. V. 10. № 10. P. e3439.

4. Alifieris C., Dimitrios T.T. Glioblastoma multiforme- Pathogenesis and treatment // Pharmacology and Therapeutics journal. 2015. V. 152. P. 63-82.

5. Alshaer W., Hillaireau H., Vergnaud J., Mura S., Delomenie C., Sauvage F., Ismail S., Fattal E. Aptamer-guided siRNA-loaded nanomedicines for systemic gene silencing in CD-44 expressing murine triple-negative breast cancer model // Journal of Controlled Release. 2018. V. 271. P. 98-106.

6. Amero P., Khatua S., Rodriguez-Aguayo C., Lopez-Berestein G. Aptamers: Novel therapeutics and potential role in neuro-oncology // Cancers (Basel). 2020. V. 12. № 10. P. 1-29.

7. An N., Xu H., Gao W.Q., Yang H. Direct conversion of somatic cells into induced neurons // Mol Neurobiol. 2018. V. 55. № 1. P. 642-651.

8. Arima Y., Nobusue H., Saya H. Targeting of cancer stem cells by differentiation therapy // Cancer Sci. 2020. V. 111. № 8. P. 2689-2695.

9. Aum D.J., Kim D.H., Beaumont T.L., Leuthardt E.C., Dunn G.P., Kim A.H. Molecular and cellular heterogeneity: The hallmark of glioblastoma // Neurosurg Focus. 2014. V. 37. № 6. P. e11.

10. Azzi S., Bruno S., Giron-Michel J., Clay D., Devocelle A., Croce M., Ferrini S., Chouaib S., Vazquez A., Charpentier B., Camussi G., Azzarone B., Eid P. Differentiation therapy: Targeting human renal cancer stem cells with interleukin 15 // J Natl Cancer Inst. 2010. V. 103. № 24. P. 1884-1898.

11. Thibault B., Genre L., Naour A. Le, Brocal C., Mery E., Vuagniaux G., Delord J. P., Wiedemann N., Couderc B. DEBIO 1143, an IAP inhibitor, reverses carboplatin resistance in ovarian cancer cells and triggers apoptotic or necroptotic cell death // Sci Rep. 2018. V. 8. № 1. P. 17862.

12. Batash R., Asna N., Schaffer P., Francis N., Schaffer M. Glioblastoma Multiforme, Diagnosis and Treatment; Recent Literature Review // Curr Med Chem. 2017. V. 24. № 27. P. 3002-3009.

13. Becher O.J., Hambardzumyan D., Fomchenko E.I., Momota H., Mainwaring L., Bleau A.M., Katz A.M., Edgar M., Kenney A.M., Cordon-Cardo C., Blasberg R.G., Holland E.C. Gli activity correlates with tumor grade in platelet-derived growth factor-induced gliomas // Cancer Res. 2008. V. 68. № 7. P. 2241-2249.

14. Bidlingmaier S., Zhu X., Liu B. The utility and limitations of glycosylated human CD133 epitopes in defining cancer stem cells // Bone. 2005. V. 23. № 1. P. 1-7.

15. Bigas A., Porcheri C. Notch and stem cells // Advances in Experimental Medicine and Biology.: Springer New York LLC, 2018. P. 235-263.

16. Bond A.M., Ming G., Song H. Ontogeny of adult neural stem cells in the mammalian brain. 2021. P. 67-98.

17. Bouchard P.R., Hutabarat R.M., Thompson K.M. Discovery and Development of Therapeutic Aptamers // Annu Rev Pharmacol Toxicol. 2010. V. 50. P. 237-257.

18. Bradshaw A., Wickremsekera A., Tan S.T., Peng L., Davis P.F., Itinteang T. Cancer Stem Cell Hierarchy in Glioblastoma Multiforme // Front Surg. 2016. V. 3. P. 115.

19. Brescia P., Ortensi B., Fornasari L., Levi D., Broggi G., Pelicci G. CD133 is essential for glioblastoma stem cell maintenance // Stem Cells. 2013. V. 31. № 5. P. 857869.

20. Brown D. V., Filiz G., Daniel P.M., Hollande F., Dworkin S., Amiridis S., Kountouri N., Ng W., Morokoff A.P., Mantamadiotis T. Expression of CD133 and CD44 in glioblastoma stem cells correlates with cell proliferation, phenotype stability and intratumor heterogeneity // PLoS One. 2017. V. 12. № 2. P. 1-17.

21. Buglione M., Pedretti S., Poliani P.L., Liserre R., Gipponi S., Spena G., Borghetti P., Pegurri L., Saiani F., Spiazzi L., Tesini G., Uccelli C., Triggiani L., Magrini S.M. Pattern of relapse of glioblastoma multiforme treated with radical radio-chemotherapy: Could a margin reduction be proposed? // J Neurooncol. 2016. V. 128. № 2. P. 303-312.

22. Bukari B., Samarasinghe R.M., Noibanchong J., Shigdar S.L. Non-invasive delivery of therapeutics into the brain: The potential of aptamers for targeted delivery // Biomedicines. 2020. V. 8. № 5. P. 120.

23. Burri S.H., Gondi V., Brown P.D., Mehta M.P. The Evolving Role of Tumor Treating Fields in Managing Glioblastoma: Guide for Oncologists // American Journal of Clinical Oncology: Cancer Clinical Trials. 2018. V. 41. № 2. P. 191-196.

24. Bussolati B., Bruno S., Grange C., Buttiglieri S., Deregibus M.C., Cantino D., Camussi G. Isolation of renal progenitor cells from adult human kidney // American Journal of Pathology. 2005. V. 166. № 2. P. 545-555.

25. Campos B., Wan F., Farhadi M., Ernst A., Zeppernick F., Tagscherer K.E., Ahmadi R., Lohr J., Dictus C., Gdynia G., Combs S.E., Goidts V., Helmke B.M., Eckstein V., Roth W., Beckhove P., Lichter P., Unterberg A., Radlwimmer B., et al. Differentiation therapy exerts antitumor effects on stem-like glioma cells // Clinical Cancer Research. 2010. V. 16. № 10. P. 2715-2728.

26. Castaigne S., Chomienne C., Daniel M.T., et al. All-trans retinoic acid as a differentiation therapy for acute promyelocytic leukemia. I. Clinical results // Blood. 1990. V. 76. P. 1704-1709.

27. Chen J.R., Yao Y., Xu H.Z., Qin Z.Y. Isocitrate dehydrogenase (IDH)1/2 mutations as prognostic markers in patients with glioblastomas // Medicine (United States). 2016. V. 95. № 9. P. e2583.

28. Chen S.Q., Huang M., Liu C.L., Shen Y.Y., Cai Q., Wang P.J. Differentiation of induced pluripotent stem cells into neural stem cells induced by brain-derived neurotrophic factor via Wnt/p-catenin and extracellular signal-regulated kinase/mitogen-activated protein kinases signal pathway // Zhonghua Yi Xue Za Zhi. 2017. V. 97. № 41. P. 3263-3268.

29. Cheng Y.-W., Wang Z., Mularo F., Wang X. P648: A validation study using droplet digital PCR to identify copy number changes at complement factor H related gene regions // Genetics in Medicine Open. 2024. V. 2. P. 101553.

30. Chiao M.T., Cheng W.Y., Yang Y.C., Shen C.C., Ko J.L. Suberoylanilide hydroxamic acid (SAHA) causes tumor growth slowdown and triggers autophagy in glioblastoma stem cells // Autophagy. 2013. V. 9. № 10. P. 1509-1526.

31. Chiquet-Ehrismann R. Tenascins // International Journal of Biochemistry and Cell Biology. 2004. V. 36. № 6. P. 986-990.

32. Choy W., Nagasawa D.T., Trang A., Thill K., Spasic M., Yang I. CD133 as a marker for regulation and potential for targeted therapies in glioblastoma Multiforme // Neurosurg Clin N Am. 2012. V. 23. № 3. P. 391-405.

33. Ciancio D.R., Vargas M.R., Thiel W.H., Bruno M.A., Giangrande P.H., Mestre M.B. Aptamers as diagnostic tools in cancer // Pharmaceuticals. 2018. V. 11. № 3. P. 123.

34. Corbeil D., Karbanová J., Fargeas C.A., Jászai J. Prominin-1 (CD133): Molecular and cellular features across species // Adv Exp Med Biol. 2013. V. 777. P. 3 -24.

35. Cortés-Medina L. V., Pasantes-Morales H., Aguilera-Castrejon A., Picones A., Lara-Figueroa C.O., Luis E., Montesinos J.J., Cortés-Morales V.A., la Rosa Ruiz M.P. De, Hernández-Estévez E., Bonifaz L.C., Alvarez-Perez M.A., Ramos-Mandujano G. Neuronal transdifferentiation potential of human mesenchymal stem cells from neonatal and adult sources by a small molecule cocktail // Stem Cells Int. 2019. V. 2019. P. 1-13.

36. Courtois S., Durán R. V., Giraud J., Sifré E., Izotte J., Mégraud F., Lehours P., Varon C., Bessede E. Metformin targets gastric cancer stem cells // Eur J Cancer. 2017. V. 84. P. 193-201.

37. Bonnet D., Dick J. E. Human acute myeloid leukemia is organized as a hierarchy that originates from a primitive hematopoietic cell // Nat Med. 1997. V. 3. № 7. P. 730-7.

38. Dalhoff K., Dancey J., Astrup L., Skovsgaard T., Hamberg K.J., Lofts F.J., Rosmorduc O., Erlinger S., Bach Hansen J., Steward W.P., Skov T., Burcharth F., Evans T.R.J. A phase II study of the vitamin D analogue Seocalcitol in patients with inoperable hepatocellular carcinoma // Br J Cancer. 2003. V. 89. № 2. P. 252-257.

39. Dawson L.E., D'Agostino L., Hakim A.A., Lackman R.D., Brown S.A., Sensenig R.B., Antonello Z.A., Kuzin I.I. Induction of Myogenic Differentiation Improves Chemosensitivity of Chemoresistant Cells in Soft-Tissue Sarcoma Cell Lines // Sarcoma. 2020. V. 2020. P. 1-9.

40. Day C., Hinchcliffe E., Robinson J. H3K27me3 in Diffuse Midline Glioma and Epithelial Ovarian Cancer: Opposing Epigenetic Changes Leading to the Same Poor Outcomes // Cells. 2022. V. 11. № 21. P. 3376.

41. De D., Halder D., Shin I., Kim K.K. Small molecule-induced cellular conversion // Chem Soc Rev. 2017. V. 46. № 20. P. 6241-6254.

42. Delgado-López P.D., Corrales-García E.M. Survival in glioblastoma: a review on the impact of treatment modalities // Clinical and Translational Oncology. 2016. V. 18. № 11. P. 1062-1071.

43. Dewdney B., Jenkins M.R., Best S.A., Freytag S., Prasad K., Holst J., Endersby R., Johns T.G. From signalling pathways to targeted therapies: unravelling glioblastoma's secrets and harnessing two decades of progress // Signal Transduct Target Ther. 2023. V. 8. № 1. P. 400.

44. Dirkse A., Golebiewska A., Buder T., Nazarov P. V., Muller A., Poovathingal S., Brons N.H.C., Leite S., Sauvageot N., Sarkisjan D., Seyfrid M., Fritah S., Stieber D., Michelucci A., Hertel F., Herold-Mende C., Azuaje F., Skupin A., Bjerkvig R., et al. Stem cell-associated heterogeneity in Glioblastoma results from intrinsic tumor plasticity shaped by the microenvironment // Nat Commun. 2019. V. 10. № 1. P. 1-16.

45. Ehrlich M., Mozafari S., Glatza M., Starost L., Velychko S., Hallmann A.L., Cui Q.L., Schambach A., Kim K.P., Bachelin C., Marteyn A., Hargus G., Johnson R.M., Antel J., Sterneckert J., Zaehres H., Schöler H.R., Baron-Van Evercooren A., Kuhlmann T. Rapid and efficient generation of oligodendrocytes from human induced pluripotent stem cells using transcription factors // Proc Natl Acad Sci U S A. 2017. V. 114. № 11. P. E2243-E2252.

46. El-Akabawy G., Medina L.M., Jeffries A., Price J., Modo M. Purmorphamine Increases DARPP-32 Differentiation in Human Striatal Neural Stem Cells Through the Hedgehog Pathway // Stem Cells Dev. 2011. V. 20. № 11. P. 1873-1887.

47. Ermoian R.P., Kaprealian T., Lamborn K.R., Yang X., Jelluma N., Arvold N.D., Zeidman R., Berger M.S., Stokoe D., Haas-Kogan D.A. Signal transduction molecules in gliomas of all grades Ralph // Journal of Neurooncololgy. 2010. V. 91. № 1. P. 19-26.

48. Furnari F.B., Cloughesy T.F., Cavenee W.K., Mischel P.S. Heterogeneity of epidermal growth factor receptor signalling networks in glioblastoma // Nat Rev Cancer. 2015. V. 15. № 5. P. 302-310.

49. Galsky M., Kelly W.K. The Development of Differentiation Agents for the Treatment of Prostate Cancer // Semin Oncol . 2003. V. 30. P. 689-97.

50. Gao L., Huang S., Zhang H., Hua W., Xin S., Cheng L., Guan W., Yu Y., Mao Y., Pei G. Suppression of glioblastoma by a drug cocktail reprogramming tumor cells int

o neuronal like cells // Sci Rep. 2019. V. 9. № 1. P. 1-14.

51. Gehling U.M., Ergün S., Schumacher U., Wagener C., Pantel K., Otte M., Schuch G., Schafhausen P., Mende T., Kilic N., Kluge K., Schäfer B., Hossfeld D.K., Fiedler W. In vitro differentiation of endothelial cells from AC133-positive progenitor cells // Blood. 2000. V. 95. № 10. P. 3106-3112.

52. Germain P., Iyer J., Zechel C., Gronemeyer H. Co-regulator recruitment and the mechanism of retinoic acid receptor synergy // Nature. 2002. V. 415. №2 6868. P. 187192.

53. Glumac P.M., LeBeau A.M. The role of CD133 in cancer: a concise review // Clin Transl Med. 2018. V. 7. № 1. P. 1-14.

54. Gong L., Yan Q., Zhang Y., Fang X., Liu B., Guan X. Cancer cell reprogramming: A promising therapy converting malignancy to benignity // Cancer Commun. 2019. V. 39. № 1.

55. Gunhanlar N., Shpak G., Kroeg M. van der, Gouty-Colomer L.A., Munshi S.T., Lendemeijer B., Ghazvini M., Dupont C., Hoogendijk W.J.G., Gribnau J., Vrij F.M.S. de, Kushner S.A. A simplified protocol for differentiation of electrophysiologically mature neuronal networks from human induced pluripotent stem cells // Mol Psychiatry. 2017. V. 23. № 5. P. 1336-1344.

56. Gupta S.K., Smith E.J., Mladek A.C., Tian S., Decker P.A., Kizilbash S.H., Kitange G.J., Sarkaria J.N. PARP inhibitors for sensitization of alkylation chemotherapy in glioblastoma: Impact of blood-brain barrier and molecular heterogeneity // Front Oncol. 2019. V. 8. P. 670.

57. Halder D., Kim G.H., Shin I. Synthetic small molecules that induce neuronal differentiation in neuroblastoma and fibroblast cells // Mol Biosyst. 2015. V. 11. № 10. P. 2727-2737.

58. Han H., Shin D.Y., Kim D., Kim H., Lee C., Koh Y., Hong J., Yoon S.S. Induction of leukemic stem cell differentiation by aryl hydrocarbon receptor agonist and synergy with gilteritinib in FLT3-ITD + acute myeloid leukemia // Leuk Lymphoma. 2020a. V. 61. № 8. P. 1932-1942.

59. Han J., Gao L., Wang J., Wang J. Application and development of aptamer in cancer: From clinical diagnosis to cancer therapy // J Cancer. 2020b. V. 11. № 23. P. 6902-6915.

60. Hays E.M., Duan W., Shigdar S. Aptamers and glioblastoma: Their potential use for imaging and therapeutic applications // Int J Mol Sci. 2017. V. 18. № 12. P. 2576.

61. Heddleston J.M., Li Z., McLendon R.E., Hjelmeland A.B., Rich J.N. The hypoxic microenvironment maintains glioblastoma stem cells and promotes reprogramming towards a cancer stem cell phenotype // Cell Cycle. 2009. V. 8. № 20. P. 3274-3284.

62. Hempstead B.L. Brain-Derived Neurotrophic Factor: Three Ligands, Many Actions // Trans Am Clin Climatol Assoc. 2015. V. 126. P. 9-19.

63. Hjelmeland M.D., Hjelmeland A.B., Sathornsumetee S., Reese E.D., Herbstreith M.H., Laping N.J., Friedman H.S., Bigner D.D., Wang X.F., Rich J.N. SB-431542, a small molecule transforming growth factor-ß-receptor antagonist, inhibits human glioma cell line proliferation and motility // Mol Cancer Ther. 2004. V. 3. № 6. P. 737-745.

64. Hogan B.L.M. Bone morphogenetic proteins: Multifunctional regulators of vertebrate development // Genes Dev. 1996. V. 10. № 13. P. 1580-1594.

65. Huang X., Wan J., Leng D., Zhang Y., Yang S. Dual-targeting nanomicelles with CD133 and CD44 aptamers for enhanced delivery of gefitinib to two populations of lung cancer-initiating cells // Exp Ther Med. 2019. V. 19. № 1. P. 192-204.

66. Hurley L.H. DNA and its associated processes as targets for cancer therapy // Nat Rev Cancer. 2002. V. 2. № 3. P. 188-200.

67. Ichikawa Y. Differentiation of a Cell Line of Myeloid Leukemia // J. Cell. Physiol. 1969. V. 74. P. 223-234.

68. Inman G.J., Nicolás F.J., Callahan J.F., Harling J.D., Gaster L.M., Reith A.D., Laping N.J., Hill C.S. SB-431542 is a potent and specific inhibitor of transforming growth factor-ß superfamily type I activin receptor-like kinase (ALK) receptors ALK4, ALK5, and ALK7 // Mol Pharmacol. 2002. V. 62. № 1. P. 65-74.

69. Iwadate Y. Plasticity in glioma stem cell phenotype and its therapeutic implication // Neurol Med Chir (Tokyo). 2018. V. 58. № 2. P. 61-70.

70. Izgi K., Canatan H., Iskender B. Current status in cancer cell reprogramming and its clinical implications // J Cancer Res Clin Oncol. 2017. V. 143. № 3. P. 371-383.

71. Izumoto S., Ohnishi T., Arita N., Hiraga S., Taki T., Hayakawa T. Gene Expression of Neural Cell Adhesion Molecule L1 in Malignant Gliomas and Biological Significance of L1 in Glioma Invasion // Cancer Res. 1996. V. 56. № 6. P. 1440-1444.

72. Jain K.K. A critical overview of targeted therapies for glioblastoma // Front Oncol. 2018. V. 8. №8. P. 419.

73. Jeanmougin M., Hávik A.B., Cekaite L., Brandal P., Sveen A., Meling T.R., Ágesen T.H., Scheie D., Heim S., Lothe R.A., Lind G.E. Improved prognostication of glioblastoma beyond molecular subtyping by transcriptional profiling of the tumor microenvironment // Mol Oncol. 2020. V. 14. № 5. P. 1016-1027.

74. Jeught M. Van Der, Heindryckx B., O'Leary T., Duggal G., Ghimire S., Lierman S., Roy N. Van, Chuva De Sousa Lopes S.M., Deroo T., Deforce D., Sutter P. De. Treatment of human embryos with the TGFß inhibitor SB431542 increases epiblast

proliferation and permits successful human embryonic stem cell derivation // Human Reproduction. 2014. V. 29. № 1. P. 41-48.

75. Jin X., Jin X., Kim H. Cancer stem cells and differentiation therapy // Tumor Biology. 2017. V. 39. № 10. P. 1-11.

76. Kamath A.A., Friedman D.D., Hacker C.D., Smyth M.D., Limbrick D.D., Kim A.H., Hawasli A.H., Leuthardt E.C. MRI-Guided Interstitial Laser Ablation for Intracranial Lesions: A Large Single-Institution Experience of 133 Cases // Stereotact Funct Neurosurg. 2018. V. 95. № 6. P. 417-428.

77. Katagiri T., Watabe T. Bone morphogenetic proteins // Cold Spring Harb Perspect Biol. 2016. V. 8. № 6. P. a021899.

78. Kauffman S., Monod J.&, Heidelberger P.&. Differentiation of Malignant to Benign Cells // J Theor Biol. 1971. V. 31. № 3. P. 429-451.

79. Kawamura Y., Takouda J., Yoshimoto K., Nakashima K. New aspects of glioblastoma multiforme revealed by similarities between neural and glioblastoma stem cells // Cell Biol Toxicol. 2018. V. 34. № 6. P. 425-440.

80. Kemper K., Sprick M.R., Bree M. De, Scopelliti A., Vermeulen L., Hoek M., Zeilstra J., Pals S.T., Mehmet H., Stassi G., Medema J.P. The AC133 epitope, but not the CD133 protein, is lost upon cancer stem cell differentiation // Cancer Res. 2010. V. 70. № 2. P. 719-729.

81. Konishi H., Asano N., Imatani A., Kimura O., Kondo Y., Jin X., Kanno T., Hatta W., Ara N., Asanuma K., Koike T., Shimosegawa T. Notch1 directly induced CD133 expression in human diffuse type gastric cancers // Oncotarget. 2016. V. 7. № 35. P. 56598-56607.

82. Krishnamurthy N., Kurzrock R. Targeting the Wnt/beta-catenin Pathway in Cancer: Update on Effectors and Inhibitors // Cancer Treat Rev. 2018. V. 62. P. 50-60.

83. Kulabhusan P.K., Hussain B., Yuce M. Current perspectives on aptamers as diagnostic tools and therapeutic agents // Pharmaceutics. 2020. V. 12. № 7. P. 1-23.

84. Lacouture M., Sibaud V. Toxic Side Effects of Targeted Therapies and Immunotherapies Affecting the Skin, Oral Mucosa, Hair, and Nails // Am J Clin Dermatol. 2018. V. 19. P. 31-39.

85. Lara-Velazquez M., Al-Kharboosh R., Jeanneret S., Vazquez-Ramos C., Mahato D., Tavanaiepour D., Rahmathulla G., Quinone-Hinojosa A. Advances in brain tumor surgery for glioblastoma in adults // Brain Sci. 2017. V. 7. № 12.

86. Legatova V., Samoylenkova N., Arutyunyan A., Tashlitsky V., Zavyalova E., Usachev D., Pavlova G., Kopylov A. Covalent bi-modular parallel and antiparallel G-Quadruplex DNA nanocostructs reduce viability of patient glioma primary cell cultures // Int J Mol Sci. 2021. V. 7. № 12. P. 166.

87. Liou G.Y. CD133 as a regulator of cancer metastasis through the cancer stem cells // International Journal of Biochemistry and Cell Biology. 2019. V. 106. P. 1-7.

88. Liu L., Michowski W., Kolodziejczyk A., Sicinski P. The cell cycle in stem cell proliferation, pluripotency and differentiation // Nat Cell Biol. 2019a. V. 21. № 9. P. 1060-1067.

89. Liu M.Y., Xie F., Zhang Y., Wang T.T., Ma S.N., Zhao P.X., Zhang X., Lebaron T.W., Yan X.L., Ma X.M. Molecular hydrogen suppresses glioblastoma growth via inducing the glioma stem-like cell differentiation // Stem Cell Res Ther. 2019b. V. 10. № 1. P. 1-10.

90. Liu Y., Peterson D. Mechanism of cellular 3-(4, 5-dimethylthiazol-2-yl)-2, 5-diphenyltetrazolium bromide (MTT) reduction // J Neurochem. 1997. V. 69. № 2. P. 58193.

91. Louis D.N., Perry A., Wesseling P., Brat D.J., Cree I.A., Figarella-Branger D., Hawkins C., Ng H.K., Pfister S.M., Reifenberger G., Soffietti R., Deimling A. Von, Ellison D.W. The 2021 WHO classification of tumors of the central nervous system: A summary // Neuro Oncol. 2021. V. 23. № 8. P. 1231-1251.

92. Macdonald J., Henri J., Goodman L., Xiang D., Duan W., Shigdar S. Development of a Bifunctional Aptamer Targeting the Transferrin Receptor and Epithelial Cell Adhesion Molecule (EpCAM) for the Treatment of Brain Cancer Metastases // ACS Chem Neurosci. 2017. V. 8. № 4. P. 777-784.

93. Mahmood A., Harkness L., Schroder H.D., Abdallah B.M., Kassem M. Enhanced differentiation of human embryonic stem cells to mesenchymal progenitors by inhibition of TGF-p/activin/nodal signaling using SB-431542 // Journal of Bone and Mineral Research. 2010. V. 25. № 6. P. 1216-1233.

94. Mak A.B., Pehar M., Nixon A.M.L., Williams R.A., Uetrecht A.C., Puglielli L., Moffat J. Post-translational regulation of CD133 by ATase1/ATase2 mediated lysine acetylation // J Mol Biol. 2005. V. 23. № 1. P. 1-7.

95. Manoranjan B., Chokshi C., Venugopal C., Subapanditha M., Savage N., Tatari N., Provias J.P., Murty N.K., Moffat J., Doble B.W., Singh S.K. A CD 133-AKT-Wnt signaling axis drives glioblastoma brain tumor-initiating cells // Oncogene. 2020. V. 39. № 7. P. 1590-1599.

96. McComish S.F., Caldwell M.A. Generation of defined neural populations from pluripotent stem cells // Philosophical Transactions of the Royal Society B: Biological Sciences. 2018. V. 373. № 1750. P. 20170214.

97. Mehta M., Deeksha, Tewari D., Gupta G., Awasthi R., Singh H., Pandey P., Chellappan D.K., Wadhwa R., Collet T., Hansbro P.M., Kumar S.R., Thangavelu L., Negi P., Dua K., Satija S. Oligonucleotide therapy: An emerging focus area for drug delivery in chronic inflammatory respiratory diseases // Chem Biol Interact. 2019. V. 308. P. 206215.

98. Ming G., Song H. ADULT NEUROGENESIS IN THE MAMMALIAN CENTRAL NERVOUS SYSTEM // Annu Rev Neurosci. 2005. V. 28. № 1. P. 223-250.

99. Mizrak D., Alison M., Brittan MR. CD133: molecule of the moment // J Pathol. 2008. V. 214. № 1. P. 3-9.

100. Molenaar R.J., Wilmink J.W. IDH1/2 Mutations in Cancer Stem Cells and Their Implications for Differentiation Therapy // Journal of Histochemistry and Cytochemistry. 2022. V. 70. № 1. P. 83-97.

101. Müller P., Gaebel R., Lemcke H., Steinhoff G., David R. Data on the fate of MACS® MicroBeads intramyocardially co-injected with stem cell products // Data Brief. 2017. V. 13. P. 569-574.

102. Murnyak B., Kouhsari M.C., Hershkovitch R., Kalman B., Marko-Varga G., Klekner A., Hortobagyi T. PARP1 expression and its correlation with survival is tumour molecular subtype dependent in glioblastoma // Oncotarget. 2017. V. 8. № 28. P. 4634846362.

103. Namchaiw P., Wen H., Mayrhofer F., Chechneva O., Biswas S., Deng W. Temporal and partial inhibition of GLI1 in neural stem cells (NSCs) results in the early maturation of NSC derived oligodendrocytes in vitro // Stem Cell Res Ther. 2019. V. 10. № 1. P. 1-15.

104. Nanta R., Shrivastava A., Sharma J., Shankar S., Srivastava R.K. Inhibition of sonic hedgehog and PI3K/Akt/mTOR pathways cooperate in suppressing survival, self-renewal and tumorigenic potential of glioblastoma-initiating cells // Mol Cell Biochem. 2019. V. 454. № 1-2. P. 11-23.

105. Neftel C., Laffy J., Filbin M.G., Hara T., Shore M.E., Rahme G.J., Richman A.R., Silverbush D., Shaw M.L., Hebert C.M., Dewitt J., Gritsch S., Perez E.M., Gonzalez Castro L.N., Lan X., Druck N., Rodman C., Dionne D., Kaplan A., et al. An Integrative Model of Cellular States, Plasticity, and Genetics for Glioblastoma // Cell. 2019. V. 178. № 4. P. 835- 849.e21.

106. Nimjee S.M., White R.R., Becker R.C., Sullenger B.A. Aptamers as Therapeutics // Annu Rev Pharmacol Toxicol. 2017. V. 57. № 1. P. 61-79.

107. Nowell P.C. The Clonal Evolution of Tumor Cell Populations // Science (1979). 1976. V. 194. № 4260. P. 23-28.

108. Odeh F., Nsairat H., Alshaer W., Ismail M.A., Esawi E., Qaqish B., Bawab A. Al, Ismail S.I. Aptamers chemistry: Chemical modifications and conjugation strategies // Molecules. 2020. V. 25. № 1. P. 3.

109. Oh J., Kim Y., Che L., Kim J.B., Chang G.E., Cheong E., Kang S.G., Ha Y. Regulation of cAMP and GSK3 signaling pathways contributes to the neuronal conversion of glioma // PLoS One. 2017. V. 12. № 11. P. 1-15.

111. Oh J., Kim Y., Baek D., Ha Y. Malignant gliomas can be converted to non-proliferating glial cells by treatment with a combination of small molecules // Oncol Rep. 2019. V. 41. № 1. P. 361-368.

111. Omuro A., DeAngelis L.M. Glioblastoma and other malignant gliomas: A clinical review // J Am Med Assoc. 2013. V. 310. № 17. P. 1842-1850.

112. Oshimori N., Fuchs E. The harmonies played by TGF-ß in stem cell biology // Cell Stem Cell. 2012. V. 11. № 6. P. 751-764.

113. Parsons D.W., Jones S., Zhang X., Lin J.C.-H., Leary R.J., Angenendt P., Mankoo P., Carter H., Siu I.-M., Gallia G.L., Olivi A., McLendon R., Rasheed B.A., Keir S., Nikolskaya T., Nikolsky Y., Busam D.A., Tekleab H., Diaz L.A., et al. An Integrated Genomic Analysis of Human Glioblastoma Multiforme // Science (1979). 2008. V. 321. № 5897. P. 1807-1812.

114. Pastor F. Aptamers: A new technological platform in cancer immunotherapy // Pharmaceuticals. 2016. V. 9. № 4. P. 64.

115. Patel A.P., Tirosh I., Trombetta J.J., Shalek A.K., Gillespie S.M., Wakimoto H., Cahill D.P., Nahed B. V., Curry W.T., Martuza R.L., Louis D.N., Rozenblatt-Rosen O., Suva M.L., Regev A., Bernstein B.E. Single-cell RNA-seq highlights intratumoral heterogeneity in primary glioblastoma // Science. 2014. V. 344. № 6190. P. 1396-1401.

116. Paul S., Sinha S., Kundu C.N. Targeting cancer stem cells in the tumor microenvironment: An emerging role of PARP inhibitors // Pharmacol Res. 2022. V. 184. P. 106425.

117. Peacock C.D., Wang Q., Gesell G.S., Corcoran-Schwartz I.M., Jones E., Kim J., Devereux W.L., Rhodes J.T., Huff C.A., Beachy P.A., Watkins D.N., Matsui W. Hedgehog signaling maintains a tumor stem cell compartment in multiple myeloma // Proc Natl Acad Sci U S A. 2007. V. 104. № 10. P. 4048-4053.

118. Peng W., Wang K., Zheng R., Derwahl M. 1,25 dihydroxyvitamin D3 inhibits the proliferation of thyroid cancer stem-like cells via cell cycle arrest // Endocr Res. 2016. V. 41. № 2. P. 71-80.

119. Pescador R., Capuzzi L., Mantovani M., Fulgenzi A., Ferrero M.E. Defibrotide: Properties and clinical use of an old/new drug // Vascul Pharmacol. 2013. V. 59. № 1-2. P. 1-10.

120. Phillips H.S., Kharbanda S., Chen R., Forrest W.F., Soriano R.H., Wu T.D., Misra A., Nigro J.M., Colman H., Soroceanu L., Williams P.M., Modrusan Z., Feuerstein B.G., Aldape K. Molecular subclasses of high-grade glioma predict prognosis, delineate a pattern of disease progression, and resemble stages in neurogenesis // Cancer Cell. 2006. V. 9. № 3. P. 157-173.

121. Pierce G.B., Speers W.C. Tumors as caricatures of the process of tissue renewal: prospects for therapy by directing differentiation // Cancer Res. 1988. V. 48. № 8. P. 1996-2004.

122. Pietrobono S., Gagliardi S., Stecca B. Non-canonical hedgehog signaling pathway in cancer: Activation of GLI transcription factors beyond smoothened // Front Genet. 2019. V. 10. P. 1-20.

123. Prager B.C., Bhargava S., Mahadev V., Hubert C.G., Rich J.N. Glioblastoma Stem Cells: Driving Resilience through Chaos // Trends Cancer. 2020. V. 6. № 3. P. 223235.

124. Reifenberger G., Wirsching H.G., Knobbe-Thomsen C.B., Weller M. Advances in the molecular genetics of gliomas-implications for classification and therapy // Nat Rev Clin Oncol. 2017. V. 14. № 7. P. 434-452.

125. Reynolds C.P., Matthay K.K., Villablanca J.G., Maurer B.J. Retinoid therapy of high-risk neuroblastoma // Cancer Letters.: Elsevier Ireland Ltd, 2003. P. 185-192.

126. Richard S., Tachon G., Milin S., Wager M., Karayan-Tapon L. Dual MGMT inactivation by promoter hypermethylation and loss of the long arm of chromosome 10 in glioblastoma // Cancer Med. 2020. V. 9. № 17. P. 6344-6353.

127. Robey R.W., Pluchino K.M., Hall M.D., Fojo A.T., Bates S.E., Gottesman M.M. Revisiting the role of ABC transporters in multidrug-resistant cancer // Nat Rev Cancer. 2018. V. 18. № 7. P. 452-464.

128. Rossi M., Magnoni L., Miracco C., Mori E., Tosi P., Pirtoli L., Tini P., Oliveri G., Cosci E., Bakker A. ß-catenin and Gli1 are prognostic markers in glioblastoma // Cancer Biol Ther. 2011. V. 11. № 8. P. 753-761.

129. Saito S., Lin Y.C., Nakamura Y., Eckner R., Wuputra K., Kuo K.K., Lin C.S., Yokoyama K.K. Potential application of cell reprogramming techniques for cancer research // Cellular and Molecular Life Sciences. 2019. V. 76. № 1. P. 45-65.

130. Sareen H., Ma Y., Becker T.M., Roberts T.L., Souza P. de, Powter B. Molecular Biomarkers in Glioblastoma: A Systematic Review and Meta-Analysis // Int J Mol Sci. 2022. V. 23. № 16. P. 8835.

131. Seebacher N.A., Stacy A.E., Porter G.M., Merlot A.M. Clinical development of targeted and immune based anti-cancer therapies // Journal of Experimental and Clinical Cancer Research. 2019. V. 38. № 1. P.156.

132. Senhaji N., Houssaini A.S., Lamrabet S., Louati S., Bennis S. Molecular and Circulating Biomarkers in Patients with Glioblastoma // Int J Mol Sci. 2022. V. 23. №2 13. P. 7474.

133. Sharma T.K., Bruno J.G., Dhiman A. ABCs of DNA aptamer and related assay development // Biotechnol Adv. 2017. V. 35. № 2. P. 275-301.

134. Singh S. K., Clarke I. D, Terasaki M., Bonn V. E, Hawkins C., Squire J., Dirks P.B. Identification of a cancer stem cell in human brain tumors // Cancer Res. 2003. V. 63. № 18. P. 5821-8.

135. Sheng L., Rigo F., Frank Bennett C., Krainer A.R., Hua Y. Comparison of the efficacy of MOE and PMO modifications of systemic antisense oligonucleotides in a severe SMA mouse model // Nucleic Acids Res. 2020. V. 48. № 6. P. 2853-2865.

136. Niu C. S., Li M.W., Ni Y. F., Chen J.M., Mei J.M., Li J., Fu M. Effect of alltrans retinoic acid on the proliferation and differentiation of brain tumor stem cells // J Exp Clin Cancer Res. 2010. V. 29. № 1. P. 113.

137. Shigdar S., Qiao L., Zhou S.F., Xiang D., Wang T., Li Y., Lim L.Y., Kong L., Li L., Duan W. RNA aptamers targeting cancer stem cell marker CD133 // Cancer Lett. 2013. V. 330. № 1. P. 84-95.

138. Shigdar S., Schrand B., Giangrande P.H., Franciscis V. de. Aptamers: Cutting edge of cancer therapies // Molecular Therapy. 2021. V. 29. № 8. P. 2396-2411.

139. Shutova M.V., Chestkov I.V., Bogomazova A.N., Lagarkova M.A., Kiselev S.L. Generation of iPS Cells from Human Umbilical Vein Endothelial Cells by Lentiviral Transduction and Their Differentiation to Neuronal Lineage // Human Embryonic and Induced Pluripotent Stem Cells. Springer Protocols Handbooks. / под ред. Ye K., Jin S. : Humana Press, 2011. P. 133-149.

140. Singh S.K., Hawkins C., Clarke I.D., Squire J.A., Bayani J., Hide T., Henkelman R.M., Cusimano M.D., Dirks P.B. Identification of human brain tumour initiating cells // Nature. 2004. V. 432. № 7015. P. 396-401.

141. Skoda A.M., Simovic D., Karin V., Kardum V., Vranic S., Serman L. The role of the hedgehog signaling pathway in cancer: A comprehensive review // Bosn J Basic Med Sci. 2018. V. 18. № 1. P. 8-20.

142. Smith J.R., Vallier L., Lupo G., Alexander M., Harris W.A., Pedersen R.A. Inhibition of Activin/Nodal signaling promotes specification of human embryonic stem cells into neuroectoderm // Dev Biol. 2008. V. 313. № 1. P. 107-117.

143. Song Y., Zhu Z., An Y., Zhang W., Zhang H., Liu D., Yu C., Duan W., Yang C.J. Selection of DNA aptamers against epithelial cell adhesion molecule for cancer cell imaging and circulating tumor cell capture // Anal Chem. 2013. V. 85. № 8. P. 41414149.

144. Song Y., Lee S., Jho E. hoon. Enhancement of neuronal differentiation by using small molecules modulating Nodal/Smad, Wnt/ß-catenin, and FGF signaling // Biochem Biophys Res Commun. 2018. V. 503. № 1. P. 352-358.

145. Spira A.I., Carducci M.A. Differentiation therapy // Curr Opin Pharmacol. 2003. V. 3. № 4. P. 338-343.

146. Strickland S., Mahdavi V. The Induction of Differentiation in Teratocarcinoma Stem Cells by Retinoic Acid // Cell. 1978. V. 15. № 2. P. 393-403.

147. Sullenger B.A., Gallardo H.F., Ungers G.E., Gilboa E. Over-expression of TAR Sequences Renders Cells Resistant to Human lmmunodeficiency Virus Replication // Cell. 1990. V. 63. № 3. P. 601-608.

148. Sun Z., Wang L., Zhou Y., Dong L., Ma W., Lv L., Zhang J., Wang X. Glioblastoma Stem Cell-Derived Exosomes Enhance Stemness and Tumorigenicity of Glioma Cells by Transferring Notch1 Protein // Cell Mol Neurobiol. 2019. P. 1-18.

149. Sykes D.B., Kfoury Y.S., Mercier F.E., Wawer M.J., Law J.M., Haynes M.K., Lewis T.A., Schajnovitz A., Jain E., Lee D., Meyer H., Pierce K.A., Tolliday N.J., Waller A., Ferrara S.J., Eheim A.L., Stoeckigt D., Maxcy K.L., Cobert J.M., et al. Inhibition of Dihydroorotate Dehydrogenase Overcomes Differentiation Blockade in Acute Myeloid Leukemia // Cell. 2016. V. 167. № 1. P. 171- 186.e15.

150. Takahashi K., Yamanaka S. Induction of Pluripotent Stem Cells from Mouse Embryonic and Adult Fibroblast Cultures by Defined Factors // Cell. 2006. V. 126. № 4. P. 663-776.

151. Tchoghandjian A., Jennewein C., Eckhardt I., Momma S., Figarella-Branger D., Fulda S. Smac mimetic promotes glioblastoma cancer stem-like cell differentiation by activating NF-kB // Cell Death Differ. 2014. V. 21. № 5. P. 735-747.

152. Thé H. De. Differentiation therapy revisited // Nat Rev Cancer. 2018. V. 18. № 2. P. 117-127.

153. Tilak M., Holborn J., New L.A., Lalonde J., Jones N. Receptor Tyrosine Kinase Signaling and Targeting in Glioblastoma Multiforme // Int J Mol Sci. 2021. V. 22. № 4. P. 1831.

154. Trump D.L. Retinoids in bladder, testes and prostate cancer: epidemiologic, preclinical and clinical observations // Leukemia. 1994. V. 8. № (Suppl 3). P. S50-4.

155. Tuerk C., Gold L. Systematic Evolution of Ligands by Exponential Enrichment: RNA Ligands to Bacteriophage T4 DNA Polymerase // Science. 1990. V. 249. № 4968. P. 505-510.

156. Uchida N., Buck D.W., He D., Reitsma M.J., Masek M., Phan T. V., Tsukamoto A.S., Gage F.H., Weissman I.L. Direct isolation of human central nervous system stem cells // Proc Natl Acad Sci U S A. 2000. V. 97. № 26. P. 14720-14725.

157. Verhaak R.G.W., Hoadley K.A., Purdom E., Wang V., Qi Y., Wilkerson M.D., Miller C.R., Ding L., Golub T., Mesirov J.P., Alexe G., Lawrence M., O'Kelly M., Tamayo P., Weir B.A., Gabriel S., Winckler W., Gupta S., Jakkula L., et al. Integrated Genomic Analysis Identifies Clinically Relevant Subtypes of Glioblastoma Characterized by Abnormalities in PDGFRA, IDH1, EGFR, and NF1 // Cancer Cell. 2010. V. 17. № 1. P. 98-110.

158. Virchow R. Archiv fuer pathologische Anatomie und Physiologie und fuer klinische Medizin // Springer. 1855. V. 8. № 23.

159. Wakefield L.M., Hill C.S. Beyond TGFß: Roles of other TGFß superfamily members in cancer // Nat Rev Cancer. 2013. V. 13. № 5. P. 328-341.

160. Wallenborn M., Xu L.X., Kirsten H., Rohani L., Rudolf D., Ahnert P., Schmidt C., Schulz R.M., Richter M., Krupp W., Mueller W., Johnson A.A., Meixensberger J., Holland H. Molecular analyses of glioblastoma stem-like cells and glioblastoma tissue // PLoS One. 2020. V. 15. № 7. P. 1-16.

161. Wang T., Chen C., Larcher L.M., Barrero R.A., Veedu R.N. Three decades of nucleic acid aptamer technologies: Lessons learned, progress and opportunities on aptamer development // Biotechnol Adv. 2019. V. 37. № 1. P. 28-50.

162. Wankowicz P., Roginska D., MacHalinski B., Nowacki P. Expression of markers of neural stem and progenitor cells in glioblastoma multiforme in relation to tumor recurrence and overall survival // Archives of Medical Science. 2020. V. 16. № 2. P. 481-483.

163. Hong W.K., Lippman S.M., Itri L.M., Karp D.D., Lee J.S., Byers R.M., Schantz S.P., Kramer A.M., Lotan R., Peters L.J., et al. Prevention of second primary tumors with isotretinoin in squamous-cell carcinoma of the head and neck // N Engl J Med. 1990. V. 323. P. 795-801.

164. Waxman S. Differentiation therapy in acute myelogenous leukemia (non-APL) // Leukemia. 2000. V. 14. № 3. P. 491-496.

165. Weller M., Bent M. van den, Preusser M., Rhun E. Le, Tonn J.C., Minniti G., Bendszus M., Balana C., Chinot O., Dirven L., French P., Hegi M.E., Jakola A.S., Platten M., Roth P., Ruda R., Short S., Smits M., Taphoorn M.J.B., et al. EANO guidelines on the diagnosis and treatment of diffuse gliomas of adulthood // Nat Rev Clin Oncol. 2021. V. 18. № 3. P. 170-186.

166. Weller M., Wen P.Y., Chang S.M., Dirven L., Lim M., Monje M., Reifenberger G. Glioma // Nat Rev Dis Primers. 2024. V. 10. № 1. P. 33.

167. Wen P.Y., Weller M., Lee E.Q., Alexander B.M., Barnholtz-Sloan J.S., Barthel F.P., Batchelor T.T., Bindra R.S., Chang S.M., Antonio Chiocca E., Cloughesy T.F., DeGroot J.F., Galanis E., Gilbert M.R., Hegi M.E., Horbinski C., Huang R.Y., Lassman A.B., Rhun E. Le, et al. Glioblastoma in adults: A Society for Neuro-Oncology (SNO) and European Society of Neuro-Oncology (EANO) consensus review on current management and future directions // Neuro Oncol. 2020. V. 22. № 8. P. 1073-1113.

168. Wichterle H., Lieberam I., Porter J.A., Jessell T.M. Directed differentiation of embryonic stem cells into motor neurons // Cell. 2002. V. 110. № 3. P. 385-97.

169. Wiese S., Karus M., Faissner A. Astrocytes as a source for extracellular matrix molecules and cytokines // Front Pharmacol. 2012. V. 3. P. 120.

170. Wu W., Klockow J.L., Zhang M., Lafortune F., Chang E., Jin L., Wu Y., Daldrup-Link H.E. Glioblastoma multiforme (GBM): An overview of current therapies and mechanisms of resistance // Pharmacol Res. 2021. V. 171. P. 105780.

171. xCELLigence instrument portfolio brochure. [Электронный ресурс]. URL: https://www.agilent.com/cs/library/brochures/5994-1596EN_General%20xC%20 Brochure.pdf (дата обращения 14.06.2025).

172. Xiang D., Shigdar S., Bean A.G., Bruce M., Yang W., Mathesh M., Wang T., Yin W., Tran P.H.L., Shamaileh H. Al, Barrero R.A., Zhang P.Z., Li Y., Kong L., Liu K., Zhou S.F., Hou Y., He A., Duan W. Transforming doxorubicin into a cancer stem cell killer via EpCAM aptamer-mediated delivery // Theranostics. 2017. V. 7. №2 17. P. 40714086.

173. Xie Q., Wen T., Yang A., Zhang X., Chen B., Meng J., Liu J., Gu N., Xu H. A contrast examination of proinflammatory effects on kidney function for y-fe2o3 np and gadolinium dimeglumine // Int J Nanomedicine. 2021. V. 16. P. 2271-2282.

174. Xie Y.H., Chen Y.X., Fang J.Y. Comprehensive review of targeted therapy for colorectal cancer // Signal Transduct Target Ther. 2020. V. 5. № 1. P. 22.

175. Xu J., Du Y., Deng H. Direct lineage reprogramming: Strategies, mechanisms, and applications // Cell Stem Cell. 2015. V. 16. № 2. P. 119-134.

176. Yalcin F., Dzaye O., Xia S. Tenascin-C Function in Glioma: Immunomodulation and Beyond // Adv Exp Med Biol. 2020. V. 1272. P. 149-172.

177. Yan H., Williams D., Jin G., Mclendon R., Rasheed B.A., Yuan W., Kos I., Batinic-Haberle I., Jones S., Riggins G.J., Friedman H., Friedman A., Reardon D., Herndon J., Kinzler K.W., Velculescu V.E., Vogelstein B., Bigner D.D. IDH1 and IDH2 Mutations in Gliomas // New England Journal of Medicine. 2009. V. 36. № 8. P. 76573.

178. Yan Y., Li Z., Xu X., Chen C., Wei W., Fan M., Chen X., Li J.J., Wang Y., Huang J. All-trans retinoic acids induce differentiation and sensitize a radioresistant breast cancer cells to chemotherapy // BMC Complement Altern Med. 2016. V. 16. P 113.

179. Yoon S., Rossi J.J. Targeted molecular imaging using aptamers in cancer // Pharmaceuticals. 2018. V. 11. № 3. P. 1-16.

180. Yu P.B., Deng D.Y., Lai C.S., Hong C.C., Cuny G.D., Bouxsein M.L., Hong D.W., McManus P.M., Katagiri T., Sachidanandan C., Kamiya N., Fukuda T., Mishina Y., Peterson R.T., Bloch K.D. BMP type I receptor inhibition reduces heterotopic ossification // Nat Med. 2008. V. 14. № 12. P. 1363-1369.

181. Zhang F., Liu C.L., Tong M.M., Zhao Z., Chen S.Q. Both Wnt/ß-catenin and ERK5 signaling pathways are involved in BDNF-induced differentiation of pluripotent stem cells into neural stem cells // Neurosci Lett. 2019. V. 708. № 16. P. 134345.

182. Zhang J., Jiao J. Molecular Biomarkers for Embryonic and Adult Neural Stem Cell and Neurogenesis // Biomed Res Int. 2015. V. 2015. P. 1-14.

183. Zhang L., Yin J., Yeh H., Ma N., Lee G., Chen X.A., Wang Y., Lin L., Chen L., Jin P., Wu G., Chen G. Small molecules efficiently reprogram human astroglial cells into functional neurons // Cell Stem Cell. 2016. V. 17. № 6. P. 735-747.

184. Zhao C., Deng W., Gage F.H. Mechanisms and Functional Implications of Adult Neurogenesis // Cell. 2008. V. 132. № 4. P. 645-660.

185. Zhao G.Q. Consequences of knocking out BMP signaling in the mouse // Genesis (United States). 2003. V. 35. № 1. P. 43-56.

186. Zheng J., Zhao S., Yu X., Huang S., Liu H.Y. Simultaneous targeting of CD44 and EpCAM with a bispecific aptamer effectively inhibits intraperitoneal ovarian cancer growth // Theranostics. 2017. V. 7. № 5. P. 1373-1388.

187. Zhou G., Won Bae S. Da, Nguyen R., Huo X., Han S., Zhang Z., Hebbard L., Duan W., Eslam M., Liddle C., Yuen L., Lam V., Qiao L., George J. An aptamer-based drug delivery agent (CD133-apt-Dox) selectively and effectively kills liver cancer stemlike cells // Cancer Lett. 2021. V. 501. P. 124-132.

188. Zhou Y., Liu Y., Zhang J., Yu D., Li A., Song H., Zhang W., Davis D., Gilbert M.R., Liu F., Yang C. Autocrine BMP4 Signaling Enhances Tumor Aggressiveness via Promoting Wnt/p-Catenin Signaling in IDH1-mutant Gliomas // Transl Oncol. 2020. V. 13. № 2. P. 125-134.

189. Zhuang W., Long L., Zheng B., Ji W., Yang N., Zhang Q., Liang Z. Curcumin promotes differentiation of glioma-initiating cells by inducing autophagy // Cancer Sci. 2012. V. 103. № 4. P. 684-690.

190. Zong H., Parada L.F., Baker S.J. Cell of origin for malignant gliomas and its implication in therapeutic development // Cold Spring Harb Perspect Biol. 2015. V. 7. № 5. P. 1-13.