Экспериментальное исследование ранозаживляющих свойств дигидрокверцетина при термической травме кожи. тема диссертации и автореферата по ВАК РФ 14.03.06, кандидат наук Щукина, Ольга Геннадьевна

• Щукина, Ольга Геннадьевна
• кандидат наук
• 2014

Оглавление диссертации кандидат наук Щукина, Ольга Геннадьевна

ОГЛАВЛЕНИЕ

Введение

Глава 1. Обзор литературы

1.1 Структура и свойства биофлавоноидов, определяющие их биологическую активность

1.2 Основные фармакологические свойства биофлавоноидов кверцетина и дигидрокверцетина

1.3 Роль свободнорадикального и перекисного окисления при ожогах

1.4 Использование растительных препаратов в лечении термических ожогов

Глава 2. Материалы и методы исследования

2.1 Характеристика экспериментальных животных

2.2 Характеристика препаратов, используемых в работе

2.3 Экспериментальная модель исследования дигидрокверцетина

в составе мази при лечении термического ожога

2.4 Экпериментальная модель окислительного стресса

с использованием дициклопентадиена

2.5 Методы исследования безопасности дигидрокверцетина

2.5.1 Методы исследования острой токсичности

2.5.2 Методы исследования кумуляции и хронической токсичности

2.5.3 Методы оценки местно-раздражающего действия

2.6 Методы статистической обработки 58 Глава 3. Результаты собственных исследований

3.1 Исследование ранозаживляющего действия дигидрокверцетина

при экспериментальном термическом ожоге кожи

3.2 Экспериментальное исследование антиоксидантных

свойств дигидрокверцетина

3.3 Экспериментальное исследование токсичности

дигидрокверцетина и безопасности его применения

3.3.1 Исследование острой токсичности и кумуляции

3.3.2 Исследование местно-раздражающего действия

3.3.3 Исследование хронической токсичности 89 Глава 4. Обсуждение результатов исследований 101 Заключение 116 Выводы 118 Практические рекомендации 120 Список сокращений и условных обозначений 121 Список литературы 122 Список иллюстрированного материала

Рисунки

Таблицы 145 Приложение 1 Патент № 2405536 РФ на изобретение «Мазь для лечения

термических ожогов и способ лечения с её использованием»

Введение диссертации (часть автореферата) на тему «Экспериментальное исследование ранозаживляющих свойств дигидрокверцетина при термической травме кожи.»

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность темы исследования. В настоящее время во всех странах высокие показатели ожогового травматизма являются одной из актуальных проблем медицины1 и общества в целом (Гусейнов Т.С., Мейланова Р.Д., Гусейнова С.Т., 2013; Зиновьев Е.В., Нестеров Ю.В., Лагвилава Т.О., 2013). Почти два миллиона человек в мире получают ожоги ежегодно, из них около ста тысяч нуждаются в госпитализации, а тысячи ожогов приводят к летальным исходам (Герасимова Л.И., Назаренко Г.И., 2005; Миронов С.П. и соавт., 2007; Гребенюк А.Н., Баринов В.А., Башарин В.А., 2008; Вазина И.Р., Бугров С.Н., 2009;). Чаще всего ожоговые травмы происходят на производствах в индустриально-развитых регионах, хотя две трети случаев ожогового травматизма имеют бытовой характер (Нестерова Ю.В., Поветьева Т.Н., Нагорняк Ю.Г., 2009; Миронов С.П., Какорина Е.П., Андреева Т.М., 2007).

Лечение ожоговых ран ложится тяжелым бременем на здравоохранение и государство в целом. При этом зачастую, несмотря на лечение, заживление ран происходит с образованием рубцов (Абаев Ю.К., 2003). Общая стоимость лечения пациентов с ожоговыми ранами и снижение качества жизни людей с Рубцовыми изменениями кожи после ожогов трудно измеримы, что и определяет необходимость разработки новых методов лечения ожогов и создания новых эффективных лекарственных средств, улучшающих течение пролиферативно-репаративных процессов в ожоговой ране.

В настоящее время интенсивно изучаются вопросы патогенеза раневого процесса при термической травме кожи, влияния различных фармакологических средств на течение и исходы длительно незаживающих ран (Абаев Ю.К., 2003). В фармакологии активно развивается направление создания лекарственных средств на основе растительного сырья (Сафонов В.В., Сафонова М.Ю., Лесиовская Е.Е., 1999).

1 ВОЗ. Доклад «Мировая статистика здравоохранения, 2009 год» :

URL: http://www.who.int/ru/URL: http://www.who.int/ru/

Это обусловлено высокой биологической активностью веществ растительного происхождения, благодаря сочетанию в них целого комплекса соединений, способных действовать на организм как самостоятельно, так и проявляя синергизм друг к другу (Лесиовская Е.Е., Саватеева-Любимова Т.Н., 2011). В отличие от синтетических лекарственных средств, многие вещества, синтезируемые растениями, являются физиологичными по отношению к человеку (Барабой В.А., 1984). Использование в практической медицине научных данных, полученных в этой области, позволяет надеяться на улучшение результатов лечения пациентов с длительно незаживающими ранами2.

В последние годы для лечения ожогов и профилактики послеожоговых осложнений все большее внимание привлекают биологически активные вещества растительного происхождения, связывающие и нейтрализующие свободные радикалы, а также другие токсические соединения на поверхности ран (Никулин A.A. и соавт., 1992; Кулатаева А.К., 2006; Нестерова Ю.В. и соавт., 2009; Наумов A.A. и соавт., 2010). Применение антиоксидантов определяется важной ролью процессов свободнорадикального и перекисного окисления в заболеваниях и травмах, сопровождающихся повреждением и воспалением тканей, включая ожоги (Оковитый C.B., 2003). Показано, что многие биологически активные вещества растительного происхождения, входящие в состав лекарственных средств и содержащие в своём составе антиоксиданты, способны оказывать антимикробное и противовоспалительное действие (Саватеева-Любимова Т.Н, Лесиовская Е.Е, Сивак К.В., 2011).

Одним из таких веществ является дигидрокверцетин (ДКВ), который был впервые выделен из древесины лиственницы сибирской в лаборатории природных соединений Иркутского института органической химии Сибирского отделения АН СССР академиком М.Г. Воронковым и его учениками - H.A. Тюкавкиной и В.А. Бабкиным (Бабкин В.А., Остроухова Л.А., Дьячкова С.Г., 1997; Бабкин В.А.,

2 Лечение ран и их заживление - справочник хирурга.

URL: http://lizzy.clan.su/news/lechenie_ran_i_ikh_zazWvlenie_spravochnik_khirurga/2012-ll-23-68

Остроухова JI.А., Иванова С.З., 2004).

Степень разработанности темы. Дигидрокверцетин выделяют из комля и щепы лиственницы сибирской (Larix sibirica Ledeb.), даурской (Larix dahurica Turcz.) и лиственницы Гмелина (Larix Gmelinii), произрастающих на территориях северо-восточной и восточной части России, а также в Северной Америке. Лиственное сырьё ценно тем, что 80 % дигидрокверцетина находится в комле, который, как правило, не используется лесозаготовителями, и остается на лесосеках.

Разнообразие биологических эффектов ДКВ, многие из которых были обнаружены В.К. Колхир, H.A. Тюкавкиной, В.А. Быковым (1995), в значительной степени связано с его антиоксидантными свойствами. ДКВ существует в виде четырех энантиомеров, что отражается на его физико-химических свойствах. Рядом авторов проведена оценка антиоксидантной активности производных этого вещества и взаимосвязь полученных эффектов с их химическим строением (Роговский B.C., Матюшин А.И., Шимановский Н.Л., 2010).

Дигидрокверцетин широко используют в пищевой промышленности, в косметологии и фармакологии. К настоящему времени известны такие фармакологические эффекты дигидрокверцетина, как антиоксид антный, капилляропротекторный, противоспалительный, гастропротекторный,

гепатопротекторный, радиопротекторный, гиполипидемический, диуретический, которые по ряду показателей в 3 - 5 раз превосходят соответствующие эффекты кверцетина и рутина (Плотников М.Б., Тюкавкина H.A., Плотникова Т.М., 2005).

Однако действие дигидрокверцетина на раневую поверхность и на заживление ожоговых поражений кожи практически не исследовано. Не изучено токсическое влияние на организм ДКВ, выделенного из лиственницы сибирской по новой технологии с применением мембранных фильтров и не дана оценка безопасности данного вещества, что является необходимым условием при создании новых лекарственных форм (Лесиовская Е.Е., Саватеева-Любимова Т.Н., 2011).

Таким образом, исследование влияния местного применения ДКВ на

течение и исход термического ожога кожи, с оценкой безопасности этого вещества, является актуальной научной задачей, что и обусловило выбор цели настоящей работы.

Цель работы: экспериментально оценить ранозаживляющую эффективность дигидрокверцетина при термической травме кожи и обосновать возможность его использования в составе лекарственных форм для наружного применения.

Для достижения поставленной цели решались следующие задачи:

1. В экспериментальных исследованиях на кроликах оценить эффективность дигидрокверцетина при его применении в составе мазевой лекарственной формы для лечения термических ожогов кожи ША степени.

2. Установить основные механизмы противоожоговых эффектов дигидрокверцетина.

3. В острых и хронических экспериментальных исследованиях на двух видах лабораторных животных оценить безопасность применения дигидрокверцетина.

4. Установить основные поражаемые органы и характер токсического действия дигидрокверцетина на организм экспериментальных животных.

Научная новизна. В результате проведенных исследований впервые:

- показана возможность использования дигидрокверцетина при его наружном применении для лечения термических ожогов кожи;

- установлено, что ДКВ при местном применении облегчает течение ожоговой болезни, способствует благоприятному протеканию процесса заживления раны и полностью предотвращает образование грубого рубца при термических ожогах кожи П1А степени;

- выявлено, что ключевые звенья механизма действия ДКВ в эффективных (терапевтических) дозах связаны с его антирадикальной активностью, способностью стимулировать антиоксидантную защитную систему организма, оказывать местное противовоспалительное, мембраностабилизирующее и

детоксицирующее действие, улучшать состояние микроциркуляции;

- показано, что ДКВ является малотоксичным веществом, не обладает местно-раздражающим действием, хорошо переносится и безопасен при длительном применении;

- установлены основные поражаемые органы при поступлении в организм ДКВ в высоких дозах (печень, сердце) и определено, что его токсичность связана с прооксидантной активностью.

Теоретическая и практическая значимость работы. Теоретическая значимость исследования состоит в раскрытии основных механизмов противоожоговой эффективности ДКВ при его наружном применении в составе мазевой лекарственной формы для лечения термических ожогов IIIA степени. Установлены закономерности реакции организма на длительное введение ДКВ в разных дозах и определены уровни доз, в которых дигидрокверцетин проявляет антиоксидантные и прооксидантные свойства.

Практическая значимость исследования заключается в доказательстве благоприятного влияния местного применения ДКВ на протекание процесса заживления ожоговой раны, наиболее важным результатом которого является предотвращение образования грубого рубца при термических ожогах кожи IIIA степени. Экспериментально обоснована схема местного применения ДКВ при ожогах и представлены рекомендации по разработке гидро- и липофильных форм для наружного применения на его основе.

Материалы исследования используются в НЦ реконструктивной и восстановительной хирургии СО РАМН в научно-исследовательской работе по созданию модели раневой болезни и её лечения на лабораторных животных в условиях эксперимента (акт внедрения от 25.02.2010), в учебном процессе кафедры «Экология и безопасность деятельности человека» ФГБОУ ВПО «Ангарская государственная техническая академия» (ATTA) при изучении курса «Основы токсикологии» (акт внедрения от 15.02.2010), в работе отдела токсикологии НИИ биофизики ФГБОУ ВПО ATTA (акт внедрения от 4.02.2010), в

системе Регионального управления Госсанэпиднадзора для оценки производств сопутствующих химических соединений на предприятиях, контролируемых территориальным органом Госсанэпиднадзора ФМБА России (акт внедрения от 19.02.2010).

Методология и методы исследования. Диссертационное исследование выполнялось в несколько этапов. На первом этапе изучалась отечественная и зарубежная литература по проблеме исследования. На втором этапе отрабатывалась экспериментальная модель термической травмы кожи, а также адекватные методы оценки противоожоговой эффективности и безопасности ДКВ. На третьем этапе проводились экспериментальные исследования ранозаживляющих свойств ДКВ при термическом ожоге кожи у кроликов. На четвертом - экспериментальные исследования по оценке безопасности ДКВ в острых и хронических опытах. На пятом - анализировались результаты собственных исследований, формулировались и обосновывались научные положения и выводы, вытекающие из результатов работы.

Для решения поставленных задач и достижения поставленной цели проведены экспериментальные исследования на трех видах животных (кролики, крысы, мыши). Использованы современные токсикологические, физиологические, биохимические, гематологические, патоморфологические и физико-химические методы с последующей статистической обработкой полученных данных.

Положения, выносимые на защиту:

1. Дигидрокверцетин в составе мазевой лекарственной формы эффективен при лечении термических ожогов кожи П1А степени, обеспечивая процесс заживления ран без повреждения свежеобразованной кожи и без образования грубого рубца.

2. В основе ранозаживляющего действия дигидрокверцетина при термических ожогах кожи лежат его свойства стимулировать антиоксидантные механизмы зашиты клеток от окислительного стресса, улучшать микроциркуляцию, уменьшать воспалительные процессы в ране, оказывать местное детоксицирующее действие.

3. В дозах, рекомендуемых для лечения ожоговой болезни, дигидрокверцетин не оказывает неблагоприятного побочного действия на организм, безопасен при длительном применении. Основными органами, поражаемыми при введении в организм дигидрокверцетина в высоких дозах, являются сердце и печень.

Степень достоверности и апробация результатов. Степень достоверности определяется репрезентативным объемом выборки экспериментальных животных, применением комплекса современных методов экспериментальных исследований (токсикологических, физиологических, морфологических, гистохимических, биохимических, гематологических) и адекватных приемов математической статистики.

Материалы диссертации доложены и обсуждены: на XI международной научной школе-конференции студентов и молодых ученых «Экология Южной Сибири и сопредельных территорий» (Абакан, 2007г); на международной научно-практической конференции «Дальневосточная весна-2008» (Комсомольск-на-Амуре, 2008); на III съезде токсикологов России (Москва, 2008); на научно-практической конференции «Лабораторные животные как основа экспериментальной медицины» (Томск, 2009); на международной научно-практической конференции «Актуальные вопросы электрофизиологии и незаразной патологии животных» (Улан-Удэ, 2009); на XXIII международной научно-практической конференции «Современная медицина: актуальные вопросы» (Новосибирск, 2013); на VI Международной научной конференции «Европейские прикладные науки: современные подходы в научных исследованиях» (Штутгарт, Германия, 2013).

Исследование выполнялось в соответствии с плановой тематикой научно-исследовательских работ отдела токсикологии НИИ биофизики ФГБОУ ВПО ATTA и ФГБУН «Институт токсикологии Федерального медико-биологического агентства» в 2007 - 2013 гг. по теме НИР: «Исследование влияния дигидрокверцетина, полученного по новой технологии с применением мембранных фильтров, на термический ожог кожи».

Личное участие автора. Тема и план диссертации, ее основные идеи и содержание разработаны совместно с научными руководителями на основе многолетних целенаправленных исследований. Автор самостоятельно обосновала актуальность темы диссертации, ее цель, задачи и этапы научного исследования. Лично проведен анализ литературы, отработана экспериментальная модель оценки фармакологической активности ДКВ, освоены и самостоятельно выполнены токсикологические, физиологические, биохимические методики, приемы забора биологического материала для патоморфологических исследований, способы окраски и приготовления гистологических препаратов. Лично выполнены экспериментальные исследования по изучению ранозаживляющих свойств дигидрокверцетина при термической травме кожи и проведена оценка безопасности ДКВ на лабораторных животных, с их последующей статистической обработкой и анализом полученных данных. Личный вклад автора составляет 90-95%.

Публикации. Основное содержание диссертации опубликовано в 23 научных работах, из них 8 - в рецензируемых журналах, рекомендованных ВАК РФ. Получен патент № 2405536 РФ на изобретение (приложение 1).

Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 146 страницах машинописного текста: состоит из введения, обзора научной литературы, главы с изложением результатов экспериментального исследования, главы с обсуждением результатов, заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы (152 отечественных и 46 зарубежных источников). Содержит 7 таблиц, 78 рисунков и 1 приложение.

Методы статистической обработки цифрового материала. Полученные цифровые данные обрабатывали с помощью пакетов прикладных программ "Microsoft Excel" (Авива Петри, 2009) и "Biostat". Для оценки достоверности различий использовали t-критерий Стьюдента. Статистически значимыми считали различия при р<0,05. Для оценки значимости различий результатов, представленных в альтернативной форме, использовали точный метод Фишера для четырехпольной таблицы.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Структура и свойства биофлавоноидов, определяющие их биологическую

активность

Флавоноиды - природные полифенольные соединения, структурными элементами которых служат два ароматических кольца, соединенных трёхуглеродным мостиком, образующим у-пироновое кольцо в виде фенилбензопирона (рисунок 1.1).

о

у-пирон

2-фенилбензопирон

2

г СНН:

5/

сн

с

Фланон

Флавонол

Халконовое ядро

Рисунок 1.1 - Основные формы флавоноидов (Меныцикова Е.Б., Ланкин В.З.,

Зенков Н.К., 2006)

В 1814 году М.Э. Шевроле выделил из растений флавоноид, названный кверцетином (рисунок 1.2).

он

он о

Рисунок 1.2 - Структурная формула кверцетина

В 1936 году венгерский биохимик А. Сент-Дьердьи из кожуры лимона экстрагировал витамин Р (рисунок 1.3), который повышал прочность капилляров

и снижал кровоточивость у морских свинок и крыс на моделях скорбута (Роговский B.C., Шимановский H.JL, Матюшин А.И., 2012).

он

«Э(С12н21о9)

он о

Рисунок 1.3 - Структурная формула витамина Р

Впервые термин «биофлавоноид», т.е. флавоноид, обладающий биологической активностью, стали применять в 1949 году (Комов В.П., Шведова В.Н., 2004; Тюкавкина H.A., Руленко H.A., Колесник Ю.А., 1997). Все флавоноидные соединения делятся на агликоновые формы и гликозиды. Первые не содержат в своей структуре сахарных остатков, а во второй форме содержится остаток сахара (Андреева В.Ю., Плотников М.Б., Калинкина Г.И., 2001; Меныцикова Е.Б., Ланкин В.З., Зенков Н.К., 2006; Селиванова H.A., Тюкавкина H.A., Колесник Ю.А., 1998; Пашчна Е.П., Морозова Р.П, Доченко Г.В., 2007; Mayer В., Schumacher М., Brandstater Н., 2001).

Названия флавоноидов преимущественно связанны с источником их выделения из растений. Так, например, источником выделения кверцетина послужила кора дуба Quercus velutina Lam, таксифолина (дигидрокверцетина) -древесина псевдотсуги тиссолистной Pseudotsuga taxifolia. В зависимости от природы ароматического фрагмента различают собственно фенолы (а-токоферол, гидрохинон и др.), оксипроизводные конденсированных аренов (нафтолы и т.п.), а также гетероароматические соединения (эмоксипин).

По числу присоединенных к ароматическому ядру ОН-групп различают моно- и полифенолы, существенно различающиеся по антиокислительной активности, зависящей от взаимного расположения ОН-групп. Так, по своей способности ингибировать окисление различных липидных субстратов незамещенные фенолы располагаются в следующем порядке: пирокатехин (1,2-

дигидроксибензол) > а-нафтол > (3-нафтол > гидрохинон (1,4-дигидроксибензол) > резорцин (1,3-дигидроксибензол) > фенол. Высокая антиокислительная активность пирокатехина обусловлена образованием внутримолекулярной водородной связи между двумя гидроксильными группами, расположенными у соседних атомов углерода (рисунок 1.4). Вследствие этого не участвующий в образовании водородной связи атом Н становится более подвижным и более реакционноспособным по отношению к радикалам (Меныцикова Е.Б., Панкин В.З., Зенков Н.К., 2006).

Рисунок 1.4 - Образование водородной связи у пирокатехина

Одним из основных источников образования радикалов при окислении липидов в биологических системах являются гидроперекиси, разлагающиеся в присутствии ионов металлов переменной валентности (Бубенчиков P.A., Воротынцева Н.И., Дроздова И.Л., 2001; Кулинский В.И., Колесниченко Л.С., 2009; Курлянский Б.А., Филов В.А., 2002; Хавинсон В.Х. и соавт., 2003). Поэтому вещества, реагирующие с гидроперекисями с образованием стабильных молекулярных продуктов или связывающие каталитически активные ионы металлов, также проявляют антиокислительную активность (Ланкин В.З., Бондарь Т.Н., Тихазе А.К., 1997; Ланкин В.З., Тихазе А.К., Беленков Ю.Н., 2000; Селиванова И.А., Тюкавкина H.A., Колесник Ю.А., 1998; Пас1чна Е. П., Морозова Р. П., Донченко Г. В., 2007). Способностью связывать ионы металлов переменной валентности и за счёт этого ингибировать ПОЛ в биологических системах обладают многие природные флавоноиды, поэтому их рассматривают как антиоксиданты комбинированного действия (Attaguile G., Russo A., Campisi А., 2000; Del Bello В., Maellaro Е., Sugherini L., 1994).

Самый многочисленный класс природных фенольных соединений -

флавоноиды (Барабой В.А., 1984). Флавоноиды входят в состав овощей, фруктов, цветов, семян, стеблей и корней растений. Количественное содержание их находится в широком диапазоне. Так, содержание кверцетина (мг/кг веса) меняется от 0-2 в моркови и картофеле до 708 в томатах. В растениях флавоноиды синтезируются в результате сложного каскада реакций, так называемых шикиматного и ацетато-малонатного (поликетидного) путей (рисунок 1.5). Из продуктов шикиматного пути (активированная молекула оксикоричной кислоты: яоря-кумарил-КоА) образуется кольцо В, а из трёх молекул малонил-КоА - кольцо А (Роговский B.C., Шимановский H.JL, Матюшин А.И., 2012). В настоящее время из растений выделено и охарактеризовано более 500 соединений класса флавоноидов.

Флавоноиды представляют собой полифенолы, структурной основой которых служит флавоновое ядро, содержащее два ароматических кольца А и В, соединенных СЗ-мостиком (рисунок 1.6). Разнообразие флавоноидов достигается за счёт наличия асимметричных атомов углерода в гетероцикле, а также различных заместителей в ароматических ядрах А и В. Флавоноиды способны проявлять как прооксидантные, так и антиоксидантные свойства, которые зависят от их растворимости, соотношения окислителей и восстановителей в среде, наличия металлов переменной валентности, pH среды, наличия ОН-заместителей и двойной связи С2-СЗ между кольцами А и В и количеством фенольных ОН-групп в их молекулах (Меныцикова Е.Б., Ланкин В.З., Зенков Н.К., 2006; Роговский B.C., Шимановский Н.Л., Матюшин А.И., 2012).

Наиболее важными для антирадикальной активности структурными элементами молекул флавоноидов являются (Ernster L., 1998):

1) две ОН-группы в положениях СЗ' и С4';

2) двойная связь между 2 и 3 атомами углерода, желательно совместно с карбонильной группой в положении С4;

3) ОН-группы в положениях СЗ и С5 совместно с карбонильной группой.

011 ЭрИ!рО*>"4 фосфш

НО^Л)

ШикнмлгиыН

И VI к

Малонил КоА

п КумарилКоА

Фепичыанин

Халкоисингалз

Сшльбсмсиигаэа

Ф(Кф0С 1(011 ПИруМ!

Лургуыдимсинтаы

Хялкои

Т Сшльбен

■¿У (р«»ер41ро*|

X ал кои фла кино ни юм ераш

Флавонол с ни газа

Ф.ИМИСМНПМ I

Флавонол

ОН О Дмгадрофлавоиол

Флавоионл-З'-гидроксилам

ДигиЛрофнтнтчрсЛухгтпа

Рсдукта ш

ОМ ОН ЛсВкоанпшиаиилин

Л 1 о 14М ■ мили кем Н1 л >а

Ко.шмсри шин»

ОН

Антониани.чмн

Гамнмн

Рисунок 1.5 - Схема биосинтеза основных классов флавоноидов в растениях (Меньшикова Е.Б., Ланкин В.З., Зенков Н.К., 2006)

О

Флаваноны (дигидрофлавоны) Рисунок 1.6 - Базовые структуры на основе флавонового ядра

В молекулах флавоноидов ОН-группа в положении С4' - наиболее предпочтительная мишень для радикальной атаки, при этом наличие ОН-групп у соседнего атома СЗ' (катехоловая структура) или СЗ' и С5' (галловая структура) облегчает отрыв атома водорода (рисунок 1.7). Между соседними гидроксилами кольца В образуются водородные связи, и соединения, с подобными структурами, характеризуются низким окислительным потенциалом и относительно легко образуют радикалы.

W?

о о—-н V

Рисунок 1.7 - Структурные элементы флавоноидов, наиболее важные для антирадикальной активности (Ernster L., 1998)

Присутствие орто-дигидроксильной структуры приводит к большей делокализации неспаренного электрона и повышению стабильности феноксильного радикала. Катехоловые структуры также эффективно связывают ионы металлов переменной валентности, препятствуя тем самым их вовлечению в реакции разложения гидроперекисей. Это прежде всего касается катехоловых структур В-кольца (рисунок 1.7), однако при Ре2+- и Ре3+-индуцированном окислении, так же, как в отношении ОН-радикалов в реакции Фентона и

пероксинитрита, выраженный ингибирующнй эффект дают соединения, содержащие ОН-группы в положениях С7 и С8 или С5 и С6 (Плотников М.Б., Тюкавкина Н.А., Плотникова Т.М., 2005).

Важное значение двойной связи для антиоксидантного действия флавоноидов, по мнению вышеназванных авторов, определяется образованием диеновой структуры между атомом кислорода в положении С4 и электронной структурой В-кольца, что приводит к делокализации электронной плотности по всей молекуле при образовании радикала. Исследования показали несколько большее смещение в область С-кольца спиновой плотности неспаренного электрона в радикале кверцетина, имеющем ненасыщенную связь С2-СЗ, по сравнению с аналогичным по структуре радикалом дигидрокверцетина (таксифолина), у которого эта связь одинарна (рисунок 1.8).

0,67 0,70

Кверцетин Дигидрокверцетин

Рисунок 1.8 - Распределение спиновой плотности неспаренного электрона по структурам радикалов (Меныцикова Е.Б., Панкин В.З., Зенков Н.К., 2006)

Дигидрокверецетин был получен впервые в Японии в 1951 году из древесины сибирской лиственницы. Он обладал Р-витаминной активностью, а также целым рядом других свойств, отсутствующих у большинства биофлавоноидов3.

Длительное время считалось, что дигидрокверцетин содержится только в цитрусовых, косточках винограда, софоре японской, лепестках розы, стеблях гингко билоба, эвкалипта. В Советском Союзе дигидрокверцетин производили в

3 URL: http://www.vitaspb.com/glavnaya/istoriya-otkrytya-digidrokvertsetina

Батуми из виноградных косточек и в Ташкенте - из сухих цветков сакуры, доставляемых из Японии. Дигидрокверцетин в качестве пищевой добавки использовали для молодняка с целью предупреждения развития у животных ряда болезней, в том числе и бешенства. Производство целебной субстанции в нашей стране и за рубежом и выпуск на ее основе фармацевтических препаратов, вследствие дороговизны активно не развивалось.

Структурная формула дигидрокверцетина представлена на рисунке 1.9.

он

он о

Рисунок 1.9 - Структура дигидрокверцетина

Разработка технологии получения этого ценного сырья из лиственницы в СССР началась в 70-е годы. Работы эти выполняли сотрудники лаборатории природных соединений Иркутского института органической химии Сибирского Отделения Академии Наук H.A. Тюкавкина, К.И. Лаптева, Л.А. Остроухова совместно с научными сотрудниками Ленинградской Лесотехнической академии С.Д. Антоновской и Красноярского института леса и древесины Г.Д. Антоновой (Плотников М.Б., Тюкавкина H.A., Плотникова Т.М, 2005).

Список литературы диссертационного исследования кандидат наук Щукина, Ольга Геннадьевна, 2014 год

СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1) Абаев, Ю. К. Биология заживления острой и хронической раны. / Ю. К. Абаев // Медицинские новости. - 2003. - № 6. - С. 3-10

2) Адамская, Н. А. Компьютерное 3D моделирование поверхности тела для точного планирования реконструктивных операций / Н. А. Адамская, И. А. Косова, Г. Г. Кармазановский // Материалы 7 Всероссийского научного форума "Радиология 2005". 31 мая-3 июня, Москва. - 2005. - С. 4-5.

3) Алексеев, А. А. Ожоговая септикотоксемия: этиология, патогенез, клиника, лечение / А. А. Алексеев, В. А. Лавров // Росс. мед. журнал. - 1998. - № 1. - С. 41-44.

4) Алексеев, А. А. Местное лечение ожоговых ран / А. А. Алексеев, М. Г. Крутиков // Росс. мед. журнал. - 2000. - № 5. - С. 51-53.

5) Алиев, А. А., Кролик / А. А. Алиев, Н. В.Зеленевский, К. А. Лайшев и др. -СПб: Агропромиздаг. 2002, - 448 с.

6) Альберт, А. Избирательная токсичность. Физико-химические основы терапии: В 2 Т. / Альберт А. ; Пер. с анг. М. А. Думпис, М. Б. Ганиной, под ред. проф. В.

A. Филова. - М.: Медицина, 1989. - Т. 2. - 432 с.

7) Андреева, В. Ю. Исследование флавоноидного состава экстрата манжетки обыкновенной и его влияния на структурно-метаболический статус эритроцитов на модели инфаркта миокарда / В. Ю. Андреева, М. Б. Плотников, Г. И. Калинкина // Бюл. СО РАМН. - 2001. - № 3. - С. 32-36.

8) Аникин, И. Л. Использование лекарственных растений для лечения ран в российской медицине XVI - XVIIbb. / И. Л. Аникин // Вестник хирургии. -1991.-№ 5.-С. 138-140.

9) Артёмкина, Н. А. Экстрактивные вещества хвои и побегов Picea abies (L.) Karst. / H. А. Артёмкина, В. И. Рощин // Раст. ресурсы. - 2004. - № 3. - С. 7786.

10) Артёмкина, Н. А. Экстрактивные вещества хвои и побегов Picea abies (Pinaceae). 3. Динамика содержания фенольных соединений / Н. А. Артёмкина,

B. И. Рощин // Раст. ресурсы. - 2006. - № 3. - С. 66-74.

11) Афанасьева, Ю. Г. Изменение структуры фосфолипидов клеточных мембран под действием флавоноидов / Ю. Г. Афанасьева, Р. С. Насибуллин // Вопр. биол., мед. и фарм. химии. - 2010. - № 5. - С. 41-45.

12) Аюшиева, С. Р. Влияние фитопленки "Хастаплен" на показатели перекисного окисления липидов при экспериментальном язвенно-некротическом гингивите / С. Р. Аюшиева, Я. Г. Разуваева, Д. Н. Олейников // Экология в современном мире: взгляд научной молодежи: Материалы Всероссийской конференции молодых ученых, 24-27 апр., Улан-Удэ. - 2007. -С. 345-346.

13) Бабенкова, И. В. Антиоксидантная активность гистохрома и некоторых лекарственных препаратов, применяемых в офтальмологии / И. В. Бабенкова, Ю. О. Теселкин, Н. В. Макашова // Вестник офтальмологии. - 1999. - № 4. - С. 22-24.

14) Бабкин, В. А. Безотходная комплексная переработка биомассы лиственницы сибирской и даурской / В. А. Бабкин, JI. А. Остроухова, С. Г. Дьячкова // Химия в интересах устойчивого развития. - 1997. - № 5. - С. 105-115.

15) Бабкин, В. А. Промышленный способ производства дигидрокверцетина из древесины лиственницы / В. А. Бабкин, Д. В. Бабкин, Ю. А. Малков // URL: http ://www. ehem. asu. ru/confer/conf-2005/cprm-2005-576.pdf (дата обращения: 21.11.2012).

16) Бабкин, В. А. Продукты глубокой химической переработки биомассы лиственницы. Технология получения и перспективы использования / В. А. Бабкин, JI. А. Остроухова, С. 3. Иванова // Росс. хим. журнал. - 2004. - Т. 78. -№ 3. - С. 62-69.

17) Бадюгин, И. С. Экстремальная токсикология: руководство для врачей / И. С. Бадюгин, Ш. С. Каратай, Т. К. Константинова; под ред. Е.А. Лужникова. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2006. - 416 с.

18) Барабой, В.А. Растительные фенолы и здоровье человека.- М.: Наука, 1984,- 160 с.

19) Белоусова, Н. И. Химический состав эфирного масла багульников / Н. И. Белоусова, В. А. Хан, А. В. Ткачев // Химия растительного сырья. - 1999. - № З.-С. 5-38.

20) Белоусов, А. Е. Рубцы и их коррекция / А. Е. Белоусов. - СПб.: КОМАНДОР-SPB, 2005. - Т. 4. - 128 с.

21) Белянина, И. Б. Изменение состояния перекисного окисления липидов в ожоговой ране под влиянием препаратов для местного лечения ожогов / И. Б.

Белянина, Н. В. Островский, В. Б. Бородулин // Скорая мед. помощь. - 2006. -№ 3. - С. 108-109.

22) Бергхоф, П. К. Мелкие домашние животные. Болезни и лечение / П. К. Бергхоф - пер. с нем. - 2-е изд., испр. и доп. - М.: Аквариум, 2004. - 224 с.

23) Биохимические исследования в токсикологическом эксперименте / Под ред. М.Ф. Савченкова и В.М. Прусакова. - Иркутск.: Изд-во Иркут. ун-та., 1990. -216 с.

24) Бодоев, А. В. Ранозаживляющее действие экстракта черных листьев бадана толстолистного / А. В. Бодоев, И. О. Убашев, JI. Н. Шантанова // Вестн. Бурят, ун-та. - 2001. - Сер. 11,- № 1. - С. 77-80.

25) Богданов, А.Н. Клиническая гематология. Руководство для врачей. / А.Н. Богданов. -М.: Фолиант, 2008.-488 с.

26) Бубенчиков, Р. А. Фитохимическое изучение фиалки душистой / Р. А. Бубенчиков // Человек и его здоровье: Сб. науч. работ. Вып. 3. - Курск. - 2000. -С. 335-336.

27) Бубенчиков, Р. А. Фенолкарбоновые кислоты представителей родов мальва, земляника, фиалка II РА. Бубенчиков, Н. И. Воротынцева, И. JI. Дроздова / Актуальные проблемы медицины и фармации: Материалы 66-й конф. студентов и молодых ученых. Курск. - 2001. - С. 305-306.

28) Буреш, Я. Электрофизиологические методы исследования / Я. Буреш, М. Петрань, И. Захар. - М.: Изд-во иностранной литературы, 1962. - 456 с.

29) Бурлакова, Е. Б. Роль токоферолов в пероксидации липидов биомембран / Е. Б. Бурлакова, С. А. Крашаков, Н. Г. Храпова // Биол. мембраны. - 1998. - Т. 15, №2-С. 335-336.

30) Вазина, И. Р. Летальность и причины смерти обожженных / И. Р. Вазина, С. Н. Бугров // Росс. мед. журнал. - 2009. - № 3. - С. 14-17.

31) ВОЗ. Доклад «Мировая статистика здравоохранения, 2009 год» : [сайт]. [2009]. URL: http://www.who.int/ru/ (дата обращения: 21.11.2012).

32) Владимиров, Ю. А. Дигидрокверцетин (таксифолин) и другие флавоноиды как ингибиторы образования свободных радикалов на ключевых стадиях апоптоза / Ю. А. Владимиров, Е. В. Проскупнина, Е. М. Демин // Биохимия. -2009. - Т. 74, № 3. - С. 372-379.

33) Выдрина, С. Н. Astragalus L. - Астрагал / С. Н. Выдрина // Флора Сибири. Новосибирск. - 1994. - Т. 9. - С. 30-32.

34) Гахрамов, Ф. С. Показатели антиокислительного потенциала слезы, плазмы крови у кроликов с химическим ожогом III степени на разных стадиях ожоговой болезни / Ф. С. Гахрамов, К. Т. Керимов, А. И. Джафаров // Бюлл. экспер. биол. и мед. - 2006. - Т. 142, № 9. - С. 260-263.

35) Гахрамов, Ф. С. Коррекция изменений общих и локальных показателей ПОЛ и системы антиоксидантной защиты с помощью природных антиоксидантов при экспериментальной ожоговой болезни глаз / Ф. С. Гахрамов, К. Т. Керимов, А. И. Джафаров // Бюлл. экспер. биол. и мед. - 2006. - Т. 142, № 12. - С. 652655.

36) Герасимова, Л. И. Термические и радиационные ожоги. / Л. И. Герасимова, Г. И. Назаренко; 2-е изд., перераб. и доп. - М.: Медицина, 2005. - 384 с.

37) Гланц, С. Медико-биологическая статистика / С. Гланц; пер. с анг. Ю. А. Данилова; под ред H. Е. Бузикашвили, Д. В. Самойлова. - М: Практика, 1999. -459 с.

38) ГОСТ 6709-72. Вода дистиллированная. Технические условия. - М.: Стандартинформ, 2007. - 11 с.

39) Гребенюк, А. Н. Оказание неотложной медицинской помощи пострадавшим при пожарах / А. Н. Гребенюк, В. А. Баринов, В. А. Башарин, Н. Ф. Маркизова // Медицина катастроф. - 2008. - Т.62, №2. - С. 14-17.

40) Гусейнов, Т. С. Морфология микроциркулярного русла при ожоговом шоке и коррекции инфузией перфторана / Т. С. Гусейнов, Р. Д. Мейланова, С. Т. Гусейнова // Бюлл. экспер. биол. и мед. - 2013. - Т. 155, № 1. - С. 125- 128.

41) Дерябина, Г. И. Органическая химия / Г.И. Дерябина, Г.В. Кантария // Самара: СГУ, 2003. URL: http://vmw.chemistiy.ssu.samara.ru/chem2/index2.htm (дата обращения: 5.11.2013).

42) Дихтяренко, В. В. Влияние сухих экстрактов из слоевищ Cetraria islandica (L.) Ach. и из однолетних побегов Caragana spinosa (L.) Vahl ex Hörnern на развитие экспериментальной язвы желудка у крыс / В. В. Дихтяренко, М. Ю. Сафонова, В. В. Сафонов // Раст. ресурсы. - 2001. - Т. 37, № 2. - С. 51-56.

43) Доркина, Е. Г. Влияние патулетина из цветков бархатцев распростертых на состояние эндогенной антиоксидантной системы / Е. Г. Доркина, А. Ю. Терехов, Е. О. Сергеева // Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции. Пятигорск. - 2007. - Вып. 62. - С. 464-467.

44) Дроздова, И. JI. Антиоксидантная активность полифенольных комплексов Viola odorata L. и Fragaria vesca L. / И. JI. Дроздова, Р. А. Бубенчиков // Раст. ресурсы. - 2004. - № 2. - С. 92-96.

45) Друзь, Е. А. Гепатозащитная активность наноформы кверцетина / Е. А. Друзь, Т. В. Кашникова, Н. Б. Фельдман // Вопр. биол., мед. и фарм. химии. -2010.-№ 4.-С. 47-51.

46) Друзь, Е. А. Разработка систем трансдермальной доставки биофлавоноидов рутина и силимарина / Е. А. Друзь, Т. В. Александрова, Н. Д. Лужнов // Вопр. биол., мед. и фарм. химии. - 2010. - № 5. - С. 46-51.

47) Ефремов, А. П. Интерьерные различия крольчат разного возраста / А. П. Ефремов, П.Н. Мартынов // Фундаментальные исследования. - 2012. - № 5. -С. 138-142.

48) Жанатаев, А. В. Изучение генотоксичности дигидрокверцетина in vivo / А. В. Жанатаев, А. В. Кулакова, В. В. Насонова // Бюлл. экспер. биол. и мед. -2008.-Т. 145, №3,-С. 309-312.

49) Желтова, Н. А. Патологическая физиология / Н. А. Желтова. - М.: Изд-во «Владос», 2005. - 215 с.

50) Западнюк, И. П. Лабораторные животные. Разведение, содержание, использование в эксперименте. / И. П. Западнюк, В. И. Западнюк, Е. А. Захария - 2-е изд., перераб. и доп. - Киев: Вища школа, 1974. - 300 с.

51) Заяц, Т. Л. Изменение некоторых свойств эритроцитной мембраны и структуры эритроцитов при тяжелых ожогах в эксперименте / Т. Л. Заяц, В. А. Лавров, А. И. Марчук // Бюлл. экспер. биол. и мед. - 1990. - № 1. - С. 27-30.

52) Зенкевич, И. Г. Особенности стереоизомерного состава и некоторые физико-химические свойства природного дигидрокверцетина / И. Г. Зенкевич, В. Г. Макаров, А. Ю. Ещенко // Раст. ресурсы. - 2006. - Т. 42, № 3. - С. 81-92.

53) Зиновьев, Е. В. Экспериментальная оценка влияния реамберина и цитофлавина на течение и исходы острого периода ожоговой болезни / Е. В. Зиновьев, Ю. В. Нестеров, Т. О. Лагвилава // Экспер. и клин. фарм. - 2013. - Т. 76,-№4.-С. 39-44.

54) Иванова, Н. В. Комплекс мономерных фенольных соединений коры лиственницы / Н. В. Иванова, Л. А. Остроухова, В. А. Бабкин // Химия раст. сырья. - 1999. - № 4. - С. 5-7.

55) Иванов, И.С. Влияние дигидрокверцетина на тонус изолированных вен крыс / И. С. Иванов, А. В. Сидехменова, А. В. Носарев // Бюлл. экспер. биол. и мед. -2013.-Т. 155,№1.-С. 71-71.

56) Иванкова, Ю. С. Морфологическая оценка эффективности мазей, содержащих фермент коллагеназу, на термический ожог в эксперименте / Ю. С. Иванкова, И. Л. Абисалова, А. В. Локарев // Фундаментальные исследования. -2012,-№8.-С. 466-469.

57) Иренчий, А. М. Суммарное содержание биологически активных веществ различных групп в побегах Caragana spinosa (L.) Vahl ex Hörnern / А. M. Иренчий, С. А. Минина // Раст. ресурсы. - 2004. - № 3. - С. 96-100.

58) История открытия дигидрокверцетина: [сайт]. URL: http://wvvw.vitaspb.com/glavnaya/istoriya-otiaytya-digidrokvertsetina (дата обращения: 10.11.2013).

59) Киселева, Т. Л. Изучение анатомо-диагностических признаков сбора №1 для профилактики и лечения отморожений / Т. Л. Киселева, Л. Н. Фролова, А. А. Мельникова // Традиц. мед. - 2009. - № 2. - С. 60-64.

60) Клигуненко, Е. Н. Ожоговая травма. / Е. Н. Клигуненко, Д. П. Лещев, В. В. Сличенков и др. - Днепропетровск: «Пороги», 2004. - 196 с.

61) Коваленко, А. Л. Ремаксол - препарат для восстановления системы антиоксидантной защиты при поражении печени циклофосфаном в эксперименте / А. Л. Коваленко, А. Ю. Петров, Д. С. Суханов, Т. Н. Саватеева, М. Г. Романцов // Экспер. и клин. фарм. - 2011. - Т. 74, № 1. - С. 32-35.

62) Коломиец, Н. Э. Оценка перспективности некоторых видов лекарственного растительного сырья с точки зрения их экологической чистоты / Н. Э. Коломиец, И. А. Туева, О. А. Мальцева // Химия раст. сырья. - 2004. - №4. - С. 25-28.

63) Колхир, В. К. Диквертин - новое антиоксидантное и капилляропротекторное средство / В. К. Колхир, Н. А. Тюкавкина, В. А. Быков // Хим.-фарм. ж. - 1995. - № 9. - С. 61-64.

64) Комов, В. П. Биохимия. / В. П. Комов, В. Н. Шведова. - М.: Дрофа, 2004. -638 с.

65) Кравченко, Л. В. Оценка антиоксидантной и антитоксической эффективности природного флавоноида дигидрокверцетина / Л. В. Кравченко,

С. В. Морозов, JI. И. Авреньева // Токсикологический вестник. - 2005. - № 1. -С. 14-20.

66) Крепкова, JI. В. Некоторые особенности токсикологического изучения лекарственных препаратов из растений / JI. В. Крепкова, В. В. Бортникова, Е. В. Арзамасцев // Вопр. биол., мед. и фармац. химии. - 2009. - № 5. - С. 51-54.

67) Кузин, М. И. Ожоговая болезнь / М. И. Кузин, В. К. Сологуб, В. В. Юденич -М. : Медицина, 1982. - 160 с.

68) Кулатаева, А. К. Антимикробные и ранозаживляющие свойства комбинации этанольных экстрактов и эфирных масел лекарственных растений / А. К. Кулатаева, Р. Н. Пак, Б. А. Ермекбаева // Раст. ресурсы. - 2006. - № 2. - С. 102108.

69) Кулинский, В. И. Система глутатиона. I. Синтез, транспорт глутатионтрансферазы, глутатионпероксидазы / В. И. Кулинский, JI. С. Колесниченко // Биомедицинская химия. - 2009. - Т. 55, № 3. - С. 255-277.

70) Курлянский, Б. А. Общая токсикология / Б. А. Курлянский, В. А. Филов - М. : Медицина, 2002. - 607 с.

71) Панкин, В. 3. Влияние свободных жирных кислот на липопероксидазную активность антиоксидантных ферментов - Se-содержащей глутатионпероксидазы и неселеновой глутатион-Б-трансферазы / В. 3. Панкин, Т. Н. Бондарь, А. К. Тихазе // Докл АН СССР. - 1997. - Т. 353, № 5. - С. 69-73.

72) Ланкин, В. 3. Свободнорадикальные процессы при заболеваниях сердечнососудистой системы / В. 3. Ланкин, А. К. Тихазе, Ю. Н. Беленков // Кардиология. - 2000. - № 7. - С. 48-61.

73) Ланкин, В. 3. Антиоксиданты в комплексной терапии атеросклероза: pro et contra / В. 3. Ланкин, А. К. Тихазе, Ю. Н. Беленков // Кардиология. - 2004. - № 2.-С. 72-81.

74) Лечение ожогов. URL: http://www.congelation.ru/pervaya-pomoshh-pri-ozhogax/ (дата обращения : 21.11.2012)

75) Лечение ран и их заживление - справочник хирурга. URL: http ://lizzy. clan. su/news/lechenie_ran_i_ikh_zazhivlenie_spravochnik_khirurga/201 2-11-23-68 (дата обращения: 23.09.2013)

76) Логинов, Л. П. Современные принципы местного лечения термических ожогов / Л. П. Логинов // Рус. мед. жур. - 2001. - Т. 9, № 3-4. - С. 123-125.

77) Лойт, А. О. Профилактическая токсикология: руководство для токсикологов-экспериментаторов / А. О. Лойт, М. Ф. Савченков. - Иркутск: Изд-во Иркут. ун-та, 1996. - 288 с.

78) Лоскутников, А. Ф. Ожоговая болезнь / А. Ф. Лоскутников // Актуальные вопросы интенсивной терапии. - 1998. - № 3. - С. 49-54.

79) Лысенков, С. П. Патологическая физиология / С. П. Лысенков, Л. 3. Телль, С. А. Шастун. - М.: Изд-во «МИА», 2007. - 672 с.

80) Мартин, М. Руководство по электрокардиографии мелких домашних животных / М. Мартин; пер. с англ. А. И. Зорина, ред. - М.: Аквариум, 2005. -144 с.

81) Маслов, В. И. Лекция по общей хирургии для студентов лечебного, педиатрического и стоматологического факультетов. Термические поражения. / В. И. Маслов. - Саратов: СГМУ, 1999.

82) Машковский М. Д. Лекарственные средства / М. Д. Машковский. - 16-е изд. -М.: Новая волна, 2006. - 1206 с.

83) Межидов, С. X. Метаболизм железа при травиатической болезни / С. X. Межидов, А. И. Тома // Вестник травматологии и ортопедии им. H.H. Приорова. - 2007. - № 2. - С. 88-91.

84) Меньшикова, Е. Б. Окислительный стресс. Прооксиданты и антиоксиданты / Е. Б. Меныцикова, В. 3. Ланкин, Н. К. Зенков. - М.: Фирма «Слово», 2006. -553 с.

85) Меркулов, Г. А. Курс патогистологической техники / Г. А. Меркулов. - Л.: Медицина, 1969. -424 с.

86) Микроскопическая техника в биологии. URL: http://labx.narod.ru/index.html (14 января 2013 г.)

87) Милонов, П. А. Влияние кверцетина на течение лучевой болезни / П. А. Милонов // Вопр. эксперим. и клинич. радиологии: кн. Киев, 1966. - вып.2. - С. 92.

88) Милонов, П. А. Влияние кверцетина на характер морфологических изменений при лучевой болезни / П. А. Милонов, Н. П. Милонова // Вопр. теор. и клин, медицины: кн. Киев, 1968. - С. 139.

89) Миронов, С. П. Состояние травматолого-ортопедической помощи населению РФ / С. П. Миронов, Е. П. Какорина, Т. М. Андреева / Вестник травматологии и ортопедии им. Приорова. - 2007. - № 3. - С. 3-10.

90) Миронова, Г. Д. Влияние некоторых флавоноидсодержащих препаратов растительного происхождения на активность митохондриального АТФ-зависимого калиевого канала / Г. Д. Миронова, М. И. Шигаева, Н. В. Белослудцева // Бюлл. экспер. биол. и токсикол. - 2008. - № 8. - С. 195-199.

91) Михальчик, Е. В. Показатели окислительного стресса при ожоговой травме / Е. В. Михальчик. - М.: Рос. ун-т дружбы народов, 2006. - 39 с.

92) Михальчик, Е. В. Активность антиоксидантных ферментов в ране при глубоких ожогах / Е. В. Михальчик, Ю. А. Питерская, В. А. Липатова // Бюлл. экспер. биол. и мед. - 2009. - Т. 147, № 6. - С. 696-699.

93) Михальчик, Е. В. Ранозаживляющее действие препарата на основе папайи в экспериментальной модели термической травмы / Е. В. Михальчик, А. В. Иванова, М. В. Ануров // Бюлл. экспер. биол. и мед. - 2004. - Т. 137, № 6. - С. 638-640.

94) Михальчик, Е. В. Профилактическое и лечебное действие комплексного антиоксидантного препарата при ожоговой травме у крыс / Е. В. Михальчик, А.

B. Иванова, М. В. Ануров // Бюлл. экспер. биол. и мед. - 2004. - Т. 138, № 9. -

C. 299-301.

95) Михальчик, Е. В. Антиоксидантные ферменты кожи при экспериментальных ожогах / Е. В. Михальчик, С. М. Титкова, М. В. Ануров // Биомедицинская химия. - 2006. - Т. 52, № 6. - С. 576-585.

96) Михальчик, Е. В. Защитное действие комплексного антиоксидантного препарата на основе витаминов и аминокислот при ожоговой травме у крыс, осложненной эндотоксемией / Е. В. Михальчик, С. М. Титкова, М. В. Ануров // Бюлл. экспер. биол. и мед. - 2006. - Т. 141, № 6. - С. 636-638.

97) Ммаев, H.H. Руководство для врачей / H. Н. Ммаев, С.И. Рябов. - СПб.: Спецлит, 2008. - 543 с.

98) Моделирование заболеваний / Под ред. проф. C.B. Андреева. - М.: Медицина, 1973. - 336 с.

99) Мчедлидзе, Т. Ш. Мазь для лечения гнойновоспалительных заболеваний, ожогов, воспалительных заболеваний суставов, трофических язв и длительно незаживающих ран, способ ее приготовления и способ лечения / Т.Ш. Мчедлидзе // Патент № 2165754 РФ; г. Санкт-Петербург. - № 97109330/14; Заявл. 02.09.97; Опубл. 27.04.01.

100) Наумов, А. А. Воздействие нанокомплекса, содержащего антиоксидант, липид и аминокислоту, на раневую поверхность, вызванную термическим ожогом / А. А. Наумов, Ю. В. Шаталин, М. М. Поцелуева // Бюлл. экспер. биол. и мед. - 2009. - Т. 149, № 1. - С. 69-73.

101) Нестерова, Ю. В. Механизмы влияния комплексных и выделенных веществ из живокости высокой на репаративную активность тканей в эксперименте / Ю. В. Нестерова, Т. Н. Поветьева, Ю. Г. Нашрняк // Экспер. и клин, фармакол. -2009. - Т. 72, № 3. - С. 40-43.

102) Николаев, В. О. Иммуносупрессорные свойства сухого экстракта из побегов Caragana spinosa (L.) Vahl ex Hörnern. / В. О. Николаев, Е. Е. Лесиовская // Раст. ресурсы. - 2001. - Т. 37, № 2. - С. 56-61.

103) Общая токсикология / Под ред. А.О. Лойта. - СПб.: ЭЛБИ-СПб., 2006. - 224 с.

104) Оковитый, С. В. Клиническая фармакология антиоксидантов / С. В. Оковитый // ФАРМиндекс-Практик. - 2003. - вып. 5. - С. 85-111.

105) О чем говорят анализы: справочник / Под ред. Е. Н. Панкова. 8-е изд. -Ростов н/Д.: Феникс, 2007. - 252 с.

106) Пеньков, Л. Ю. Окислительный стресс и антиоксидантная терапия у детей с термической травмой / Л. Ю. Пеньков, Л. Г. Коркина, Е. В. Михальчик // Скорая мед. помощь. - 2006. -№ 3. - С. 204-205.

107) Петри А. Наглядная медицинская статистика / А. Петри, К. Сэбин; пер. с англ., под ред. В. П. Леонова; 2-е изд., перераб. и доп. - М.: ГЭОТАР-Медиа, 2009. -168 с.

108) Пирс, Э. Гистохимия / Э. Пирс; под ред. проф. В. В. Португалова. - М.: Изд-во иностранной лит., 1962. - 962 с.

109) Плотников, М. Б. Лекарственные препараты на основе диквертина / М. Б. Плотников, Н. А. Тюкавкина, Т. М. Плотникова. - Томск: Изд-во Том. ун-та, 2005. - 228 с.

110) Потапович, А. И. Сравнительное исследование антиоксидантных свойств и цитопротекторной активности флавоноидов / А. И. Потапович, В. А. Костю к // Биохимия. - 2003. - Т. 68, № 5. - С. 632-638.

111) Правила лабораторной практики в Российской Федерации Министерства здравоохранения РФ Приказ от 19 июня 2003 года № 267. URL: http://www.kodeks.ru (дата обращения: 21.11.2012г).

112) Раны и раневая инфекция: руководство для врачей / Под ред. проф. М. И. Кузина и проф. Б. М. Костюченок. 2-е изд., перераб. и доп. - М.: Медицина, 1990.-592 с.

113) Ревина, А. А. Полифункциональная радиопротекторная активность природных пигментов - флавоноидов / А. А. Ревина // Нетрадиционные природные ресурсы, инновационные технологии и продукты. - М., 2003. - С. 197-208.

114) Роговский, B.C. Антипролиферативная и антиоксидантная активность новых производных дигидрокверцетина / В. С. Роговский, H. JI. Шимановский, А. И. Матюшин // Экспериментальная и клиническая фармакология. - 2010. - Т. 73, №9.-С. 39-42.

115) Роговский, В. С. Антигипертензивная и нейропротекторная активность кверцетина и его производных / В. С. Роговский, H. JL Шимановский, А. И. Матюшин // Экспер. и клин, фармакол. - 2012. - Т. 75, № 9. - С. 37-41.

116) Роговский, В. С. Оценка способности дигидрокверцетина ингибировать окисление фибриногена озоном / В. С. Роговский, М.А. Розенфельд, С. Д. Разумовский // Экспер. и клин. фарм. - 2013. - Т. 76, № 3. - С. 23-26.

117) Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. / под ред. А.Н. Миронова. Часть первая. - М.: «Гриф и К», 2012. - 944 с.

118) Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ / Под ред. член.-корр. РАМН, проф. Р. У. Хабриева. 2-е изд., перераб. и доп. - М.: ОАО „Изд-во «Медицина»", 2005. - 832 с.

119) Руководство по лабораторным животным и альтернативным моделям в биомедицинских технологиях / под ред. H.H. Каркшценко, C.B. Грачева. PDF. M.: Профиль, 2010. - 344с. URL: www.scbmt.ru/mag /rukovodstvo.pdf (дата обращения: 12.02.2013 г.)

120) Рябинин, В. Е. Состояние и возможные механизмы нарушений кислородзависимых процессов при ожоговой болезни (обзор) / В. Е. Рябинин, Р. И. Лифшиц // Вопр. медиц. химии. - 1990. - № 1. - С. 7-13.

121) Саватеева-Любимова, Т. Н. Экспериментальное изучение синергизма в действии цитофлавина и лимонника в условиях гипоксии различного генеза / Т. Н. Саватеева-Любимова, Е. Е. Лесиовская, К. В. Сивак, К. И.Стосман, Т. А.

Рассоха, А. В. Савагеев // Вестник Российской военно-медицинской академии. - 2008. - № 3(23). Приложение 1. - С. 203-204.

122) Саватеева-Любимова, Т. Н. Противомикробные, антиэкссудативные и иммунотропные свойства комбинации хлоргексидина биглюконата с цинка оксидом, янтарной и аскорбиновой кислотами / Т. Н. Саватеева-Любимова, Е. Е. Лесиовская, К. В. Сивак // Экспер. и клин. фарм. - 2011. - Т. 74, № 2. - С. 4446.

123) Сафонов, В. В. Цетрария ирландская и карагана колючая как перспективные источники лекарственных средств / В. В. Сафонов, М. Ю. Сафонова, Е. Е. Лесиовская // Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения. - СПб, 1999. - С. 76-78.

124) Сафонов, В. В. Спектрофотометрический метод определения содержания суммы флавоноидов в лекарственном сырье Caragana spinosa (L.) Vahl ex Hörnern / В. В. Сафонов, E. И. Саканян, E. E. Лесиовская // Раст. ресурсы. -2000.-Т. 36, №2.-С. 129-132.

125) Сафонов, В. В. Противовоспалительные свойства сухого экстракта из побегов Caragana spinosa (L.) Vahl ex Hörnern / В. В. Сафонов, E. E. Лесиовская, E. И. Саканян // Раст. ресурсы. - 2000. - Т. 36, № 3. - С. 83-90.

126) Сафонов, В. В. Разработка состава, технологии и методов анализа дерматологической мази с экстрактом караганы колючей Caragana spinosa (L.) Vahl ex Hörnern / В. В. Сафонов, К. Э. Кабышев, Е. И. Саканян // Фармация на современном этапе проблемы и достижения: Сб. науч. тр. ВНИИФ. - СПб, 2000. - Т. 39, Ч. 1. - С. 285-288.

127) Селезнёва, А. И. Действие флавоноидов в реакциях перекисного окисления липидов / А. И. Селезнёва, М. Н. Макарова // 9 Международный съезд "Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения" (ФИТОФАРМ 2005) и Конференция молодых ученых Европейского Фотохимического Общества "Растения и Здоровье", Санкт-Петербург, 22-25 июня, 2005. - СПб, 2005. - С. 808

128) Селиванова, И. А. Изучение всасывания диквертина в условиях моделирования желудочно-кишечного тракта / И. А. Селиванова, Н. А. Тюкавкина, Ю. А. Колесник // Фармация. - 1998. - № 2. - С. 27-38.

129) Сергеева, Е. О. Влияние флавоноидов на механизмы развития окислительного стресса при токсических поражениях печени / Е. О. Сергеева -Пятигорск: Пятигор. гос. фармац. акад., 2007. - 24 с.

130) Сиднева, О. В. Сезонная динамика содержания флавоноидов в наземной части Astragalus membranaceus (Fabaceae) в восточном Забайкалье / О. В. Сиднева // Раст. ресурсы. - 2005. - № 4. - С. 81-84.

131) Слесаренко, С. В. Ожоговая травма. / С. В. Слесаренко, Г. П. Козинец, Е. Н. Клигуненко. - Днепропетровск: ДнепроТяжМаш, 2002. - 60 с.

132) Спиричев, В. Б. Современное обоснование витаминотерапии / В. Б. Спиричев // Росс. мед. журнал. - 2009. - № 6. - С. 37-43.

133) Степанюк, С. Н. Изучение специфической фармакологической активности мази, содержащей витамины А, Е и маслянный экстракт плодов рябины обыкновенной / С. Н. Степанюк, Н. В. Никитина, С. А. Кулешова // 9 Международный съезд "Актуальные проблемы создания новых лекарственных препаратов природного происхождения" (ФИТОФАРМ 2005) и Конференция молодых ученых Европейского Фотохимического Общества "Растения и Здоровье", Санкт-Петербург, 22-25 июня, 2005. - СПб, 2005. - С. 633-635.

134) Суханов, Д. С. Антиоксидантная активность ремаксола на модели лекарственного поражения печени / Д. С. Суханов, Т. Н. Саватеева, A. JI. Коваленко, А. Ю. Петров, М. Г. Романцов // Проф. и клин, медицина. - 2008. -№4.-С. 127-131.

135) Суханов, Д. С. Цитопротекторная активность сукцинатсодержащих препаратов на функциональную активность печени в эксперименте / Д. С. Суханов, A. JI. Коваленко, М. Г. Романцов, А. Ю. Петров, Т. Н. Саватеева // Экспер. и клин. фарм. - 2010. - Т. 73, № 8. - С. 35-38.

136) Терентьев, П. В. Кролик / П. В. Терентьев, В. Б.Дубинин, Г. А.Новиков. - М: «Советская наука», 1952. - 364 с.

137) Токсикологическая химия. Метаболизм и анализ токсикантов / Под ред. проф. Н. И. Калетиной. -М.: ГЭОТАР-Медиа, 2008. - 1016 с.

138) Тюкавкина, Н. А. Средство для комплексной терапиии заболеваний "Диквертин": получение, стандартизация, фармакологические свойства и клинические исследования / Н. А. Тюкавкина, И. А. Руленко, Ю. А. Колесник // Материалы I Междунар. съезда "Актуальные проблемы создания новых

лекарственных препаратов природного происхождения". - Выборг, 1997. - С. 67-71.

139) Тюкавкина, Н. А. Дигидрокверцетин - новая антиоксидантная и биологически активная пищевая добавка / Н. А. Тюкавкина, И. А. Руленко, Ю. А. Колесник // Вопросы питания. - 1997. - № 6. - С. 12-15.

140) Убашеев, И. О. Раны и их лечение в тибетской медицине / И. О. Убашеев, В. Э. Назаров-Рыгтылон, С. М. Батарова. - Новосибирск: Наука, 1990. - 192 с.

141) Ушакова, Т. А. Глюкокортикостироиды при термической травме / Т. А. Ушакова, М. Г. Крутиков, И. Ю. Ларионов // Росс. мед. журнал. - 2009. - № 2. -С. 17-19.

142) ФС 42-2620-97 Вода для инъекций URL: http://www.medfílter.ru/uvoi_standarts.html (дата обращения: 21.11.2012 г).

143) Фурсова, А. Ж. Экстракт черники в профилактике макулярной дегенерации и катаракты у преждевременно стареющих крыс OXYS / А. Ж. Фурсова, О. Г. Гусаревич, А. М. Гончар // Успехи геронтол. - 2005. - № 16. - С. 76-79.

144) Хавинсон, В.Х. Свободнорадикальное окисление и старение / В. X. Хавинсон, В. А. Баринов, А. В. Арутюнян, В. В. Малинин. - СПб.: Наука, 2003.

- 327 с.

145) Хаджай, Я. И. К фармакологии кверцетина / Я. И. Хаджай, В. Ф. Королёв // Фармакология и токсикология. - 1962. - Т.25, № 1. - С. 71-77.

146) Шаварда, А.Л. Особенности состава летучих терпеноидов побегов Ledum palustre L. (Ленинградская область) / А. Л. Шаварда, В. А. Ханин, Н. А. Медведева // Раст. ресурсы. - 2004. - № 3. - С. 87-95.

147) Шантанова, Л. Н. Ранозаживляющая активность сухого экстракта и линимента зубчатки поздней / Л. Н. Шантанова, П. В. Алексеев, И. К. Иванова // Вестн. Бурят, ун-та. - Сер. 11. - 2003. - № 3. - С. 167-173.

148) Шимановский, Н. Л. Направленный транспорт лекарственных веществ с помощью наночастиц оксида железа / Н. Л. Шимановский // Росс. хим. журнал.

- 2012. - Т. 56. - № 3-4. - С. 126-145.

149) Шкаренков, А. А. Доклиническое токсикологическое изучение диквертина / А. А. Шкаренков, А. А. Белошапко, Ю. Б. Кузнецов // Вопр. биол., мед. и фарм. химии. - 1998. - № 3. - С. 36-39.

150) Шпекина, Г. А. Флавоноиды Caragana spinosa / Г. А. Шпекина // Химия природ, соединений. - 1990. -№ 1. - С. 117-118.

151) Энциклопедический словарь лекарственных растений и продуктов животного происхождения / Под ред. Г. П. Яковлева, К. Ф. Блиновой. - 2-е изд., испр. и доп. - СПб.: СпецЛит; СПХФА, 2002. - 1000 с.

152) Эскина, К. А. Антиоксидантное действие силимарина при экспериментальном сахарном диабете / К. А. Эскина // Новые достижения в создании лекарственных средств растительного происхождения. Томск, 2006. -С. 374-378.

153) Кобець, Ю. М. Вивчення репаративжн активноCTi комбшоваши маз1 антисептичшн дп для л1кування ранового процесу [Изучение репаративной активности комбинированной мази антисептического действия для лечения раневого процесса] / Ю. М. Кобець, В. I. Чуешов, JI. М. Малопгган // BicH. Фармацп. - 2008. - № 2. - Р. 67-69.

154) Набока, I. М. Лшувально-профшактичш властивост! маз1 на основ! природних антисептишв в умовах експериментальшн гшйно-запально1 патологи [Лечебно-профилактические свойства мази на основе природных антисептиков в условиях экспериментальной гнойно-воспалительной патологии] /1. М. Набока, В. Г. Дем'яненко, Н. I. Фшмонова // BicH. Фармацп. -2008,- № 3. - Р. 80-82.

155) Паачна, Е. П. Пероксидащя лшщв та актившсть фермента антиоксидантного захисту за умов розсшного склерозу / Е. П. ПаЫчна, Р. П. Морозова, Г. В. Донченко // Укр. 6ioxiM. ж. - 2007. -V. 79, № 5. - Р. 165-174.

156) Пахомова, А. О. Змша повед1нкових реакцш та лшопероксидних процес!в в тканиш печ1нки гостро алкогол!зованих щур1в при введенш кверцетину протягом 14 д1б / А. О. Пахомова, О. А. Коваленко, Т. М. Говоруха // Phys. Alive.-2008.-V. 16, №1,-P. 105-110.

157) Яковлева, Л. В. Морфолопчне дослцщення впливу маз{ "Л1пов1т" на загоення отково1 рани nncipn у njypie [Морфологическое исследование влияния мази "Липовит" на заживление ожоговой раны кожи у крыс] / Л. В. Яковлева, Ю. Б. Ларьяновська, О. В. Ткачова // Клш. Фармащя. - 2003. - Vol. 7, №1,-Р. 50-52, 74.

158) Attaguile, G. Antioxidant activity and protective effect on DNA cleavage of extracts from Cistus incanus L. and Cistus monspeliensis L. / G. Attaguile, A. Russo, A. Campisi // Cell Biol, and Toxicol. - 2000. - V. 16, № 2. - P. 83-90.

159) Awasthi, Y. C. Physiological role of glutathione-S-transferases in protection mechanisms against lipid peroxidation: a commentary / Y. C. Awasthi, P. Zimniak, S. S. Singhal // Biochem Arch. - 1995. - V. 11. - P. 47-54.

160) Beyer, U. V. Fungistatische Wirksamkeit phenolischer Inchaltstoffen der Fichte, Picea abies (L.) Karst, und Einfluß von S02 / U. V. Beyer, M. Tesche, W. Heller // Forstw. Cbl. - 1993. -№ 112. -S. 251-256.

161) Blat, D. A novel iron-chelating derivative of the neuroprotective peptide NAPVSIPQ / D. Blat, L. Weiner, B. H. Youdim Moussa // J. Med. Chem. - 2008. -V. 51, № l.-P. 126-134.

162) Cambers, S. J. Purification of a citosolle enzyme from human liver with phospholipid hydroperoxide glutathione peroxidase activity / S. J.Cambers, N. Lambert, G. Williamson // Int J Biochem. - 1994. - V. 26. - P. 1279-1286.

163) Chu, F.-F. Expression, characterization, and tissue distribution of a new cellular selenium-dependent glutathione peroxidase, GSHPx-Gl / F.-F. Chu, J. H. Doroshow, R. S. Esworthy // J. Biol. Chem. 1993. V. 268. P. 2571-2576.

164) Coimbra S. The effect of green tea in oxidative stress / S. Coimbra, E. Castro, P. Rocha-Pereira // Clin. Nutr. - 2006. - V. 25, № 5. - P. 790-796.

165) QIFTQi, ilhan. Epidemiologic evaluation of patients with major burns and recommendations for burn prevention/ ilhan ^IFTQi, Kemal ARSLAN, Zeynep ALTUNBA§, Fatih KARA, Huseyin YILMAZ // Turkish Journal of Trauma & Emergency Surgery. - 2012. - V. 18. - № 2. - P. 105-110.

166) Del Bello B. Purification of NADPH-dependent dehydroascorbate reductase from rat liver and its identification with 3a-hydroxysteroid dehydrogenase / B. Del Bello, E. Maellaro, L. Sugherini //J. Biochem. - 1994. -№ 304. - P. 385-390.

167) Ernster, L. DT-diaphorase: its structure, function, regulation, and role in antioxidant defence and cancer chemotherapy / L. Ernster // In: Pathophysiology of Lipid Peroxides and Related Free Radicals. Ed. K. Yagi. Japan Sei. Soc. Press, Tokyo/S. Karger. Basel - 1998. - P. 149-168.

168) Esterbauer, H. Chemistry and biochemistry of 4-hydroxynonenal, malonaldehyde and related aldehydes / H. Esterbauer, R. J. Schaur, H. Zollner // Free Radic Biol Med.-1991,-V. 11.-P. 81-128.

169) Flohe, L. Glutatione peroxidase brought into focus / L. Flohe // Free Radicals in Biol. - 1982. -V. 5. - P. 223-254.

170) Glisham, M. В. Modulation of leukocyte-endothelial interaction by reactive metabolites of oxygen and nitrogen: relevance to ischemic heart disease / M. B. Glisham, D. N. Granger, D. J. Lefer // Free Radic Biol Med. - 1998. - № 25. - P. 404-433.

171) He Shui-Xiang. Effects of extract from Ginkgo biloba on carbon tetrachloride-induced liver injury in rats / He Shui-Xiang, Luo Jin-Yan, Wang Yue-Peng // World J. Gastroenterol. - 2006. - Vol. 12, № 24. - P. 3924-3928.

172) Heo, M. Y. Anticlastogenic effect of flavonoids against mutagen-induced micronuclei in mice / M. Y. Heo, К. H. Yu, H. P. Kim // Mutat. Res. - 1992. - № 284.-P. 243-249.

173) Ingold, K. U. Autoxidation of lipids and antioxidation by a-tocopherol and ubiquinol in nomogeneous solution and in aqueous dispersions of lipids -unrecognized consequences of lipid particle size as exemplified by oxidation of human low density lipoprotein / K. U. Ingold, V. W. Bowry, R. Stocker // Proc. Natl Acad. Sci USA. - 1993. - № 90. - P. 45-49.

174) Jensen, B. P. Investigation of the metabolic fate of 2-, 3- and 4-bromobenzoic acids in bile-duct-cannulated rats by inductively coupled plasma mass spectrometry and high-performance liquid chromatography/inductively coupled plasma mass spectrometry/electrospray mass spectrometry / B. P. Jensen, S C. J. Mith, C. J. Bailey //Rapid Commun. Mass Spectrom. -2005. -V. 19, № 4. - P. 519-524.

175) Jiang Hui-Di. [Взаимосвязь между структурой и активностью флавоноидов на перекисное окисление липидов в микросомах печени крысы] / Jiang Hui-Di., Fang Wei-Jie., Fu Xu-Chun. // Gaodeng xuexiao huaxun xuebaoChem. J. Chin. Univ. = Chem. J. Chin. Univ. - 2003. - V. 24, № 12. - P. 2221-2223.

176) Kalyanarainan, B. Synergistic interaction between the probucol phenoxyl radical and ascorbic acid in inhibiting the oxidation of low density lipoprotein / B. Kalyanarainan, V. M. Darley-Usman, J. Wood // J Biol Chem. - 1992. - V. 276. - P. 6789-6795.

177) Kulanthaive, I. P. Naturally occurring protein kinase С inhibitors 11. Isolation of oligomeric stilbenes from Caragana spinosa /1. P. Kulanthaive, W. P. Janzen, L. M. Ballas //Plantamedica. - 1995. -V. 1, № 1. -P. 41-44.

178) Kuhn, H. Structure elucidation of oxygenated lipids in human atherosclerotic lesions / H. Kuhn, J. Belkner, R. Wiesner // Eicosanoids. - 1992. - V. 5. - P. 17-22.

179) Magdalan, J. Quercetin-5'-sulfonic acid sodium salt and morin-5'-sulfonic acid sodium salt as antidotes in the subacute cadmium intoxication in mice / J. Magdalan, A. Szelag, E. Chledba // Pharmacol. Repts. - 2007. - V. 59, № 1. - P. 210-216.

180) Mayer, B. High-throughput fluorescence screening of antioxidative capacity in huma serum /B. Mayer, M. Schumacher, H. Brandstater //Anal. Biochem. - 2001. -V. 297, №2.-P. 144-153.

181) Mojzisova, G. Dietary flavonoids and risk of coronary heart disease / G. Mojzisova, M. Kuchta // Physiol. Res. - 2001. - V. 50, № 6. - P. 529-535.

182) Moncada, S. Nitric oxide: physiology, pathophysiology, and pharmacology / S. Moncada, R. M. J. Palmer, E. A. Higgs // Pharmacol Rev. - 1991. - V. 43 - P. 109142.

183) Orhan, H. Use of {19}F-nuclear magnetic resonance and gas chromatography-electron capture detection in the quantitative analysis of fluorine-containing metabolites in urine of sevoflurane-anaesthetized patients / H. Orhan, J. N. M. Commandeur, G. Sahin // Xenobiotica. - 2004. - V. 34. - № 3. - P. 301-316.

184) Paulke, A. St. John's wort flavonoids and their metabolites show antidepressant activity and accumulate in brain after multiple oral doses / A. Paulke, M. Noldner, M. Schubert-Zsilavecz // Pharmazie. - 2008. - V. 63. - № 4. - P. 296-302.

185) Schinella, G. R. Antioxidant effects of an aqueous extract of ilex paraguariensis / G. R. Schinella, G. Troiani, V. Davila // Biochem. and Biophys. Res. Commun. -2000. -V. 269. -№ 2. - P. 357-360.

186) Sies, H. Glutathione peroxidase protects against peroxynitrite-mediated oxidations / H. Sies, V. S. Sharov, L.-O. Klotz // J. Biol. Chem. - 1997. - V. 272. - P. 27812-27817.

187) Skrzypinska-Gawrysiak, M. Effect of circadian rhythm on 1,1,2,2-tetrabromoethane hepatotoxicity in mice / M. Skrzypinska-Gawrysiak, A. Sapota // Toxicol. Lett. - 2002. -V. 135. - P. 131.

188) Song, Ch. Antimicrobial isoflavans from Astragalus membranaceus (Fisch) Bunge / Ch. Song, Zh. Zheng, D. Liu // Chem. Abstrs. - 1998. -V. 128. - № 99816.

189) Song, Ch. Ptepocarpans and isoflavans from Astragalus membranaceus (Fisch) Bunge / Ch. Song, Zh. Zheng, D. Liu // Chem. Abstrs. - 1999. - V. 130. - № 78683.

190) Stocker, R. Ubiquinol-10 protect human low density lipoprotein more efficiently against lipid peroxidation than does a-tocopherol / R. Stocker, V. W. Bowry, B. Frei // Proc. Natl. Acad. Sci USA. - 1991. -V. 88. - P. 1646-1650.

191) Shimoi, К. Radioprotective effect of flavonoids in gamma-ray irradiated mice / K. Shimoi, S. Masuda, M. Furugori // Carcinogenesis. - 1994. - № 15(11). - R 2669-2672.

192) Theobald Denis, D. Studies on the metabolism and toxicological detection of the designer drug 2,5-dimethoxy-4-methyl-'6eTa'-phenethylamine (2C-D) in rat urine using gas chromatographic/mass spectrometry techniques / D. Theobald Denis, H. Maurer Hans // J. Mass Spectrom. - 2006. - V. 41. - № 11. - P. 1509-1519.

193) Toda Shizuo. Inhibitory effect of prenylated flavonoid in Euchresta japonica and Artocarpus heterophyllus on lipid peroxidation by interaction of hemoglobin and hydrogen peroxide / Toda Shizuo, Shirataki Yoshiaki // Pharm. Biol. - 2006. - V. 44. -№4.-P. 271-273.

194) Tomas, J. P. Protective action of phospholipids hydroperoxide glutathione peroxidase against membrane-damaging lipid peroxidation / J. P. Tomas, M. Maiorino, F. Ursini//J. Biol. Chem. - 1990. -V. 265. -P. 454-461.

195) van Acker Frederique, A.A. Flavonoids can replace 'альфа'-tocopherol as an antioxidant / A.A. van Acker Frederique, O. Schouten, R. M. M. Haenen Guido // FEBS Lett. - 2000. - V. 473, № 2. - P. 145-148.

196) Yamamoto, Y. Plasma glutathione peroxidase reduced phosphatidylcholine hydroperoxide / Y. Yamamoto, Y. Nagata, E. Niki // Biochem Biophys Res Communs. - 1993. - V. 193.-P. 133-138.

197) Yoshikawa, M. Bioactive constituents from Chinese natural medicines. XXIV. Hypoglycemic effects of Sinocrassula indica in sugar-loaded rats and genetically diabetic KK-Ay mice and structures of new acylated flavonol glucosides, sinocrassosides Ab A2, Bi and B2 / M. Yoshikawa, T. Wand, T. Morikawa // Chem. and Pharm. -2007. -V. 55, № 9. -P. 1308-1315.

198) Zhao Lina. [Количественное определение восстановленного глутатиона посредством анализа реакции с участием глутатион-8-трансферазы при ингибирующем действии продукта реакции] / Zhao Lina, Jia Tao, Yunsheng Zhao, Fei Liao // Xi'an jiaotong daxue xuebao. YixuebanJ. Xi'an Jiaotong Univ. Med. Sci. = J. Xi'an Jiaotong Univ. Med. Sci. - 2006. - V. 27, № 3. - P. 300-303.

Список иллюстрированного материала

(рисунки)

номер Наименование иллюстрации страница

1.1. Основные формы флавоноидов (Меньшикова Е.Б., Панкин В.З., Зенков Н.К., 2006) 12

1.2. Структурная формула кверцетина 12

1.3. Структурная формула витамина Р 13

1.4. Образование водородной связи у пирокатехина 14

1.5. Схема биосинтеза основных классов флавоноидов в растениях (Меньшикова Е.Б., Ланкин В.З., Зенков Н.К., 2006) 16

1.6. Базовые структуры на основе флавонового ядра 17

1.7. Структурные элементы флавоноидов, наиболее важные для антирадикальной активности (Ernster L., 1998) 17

1.8. Распределение спиновой плотности неспаренного электрона по структурам радикалов (Меньшикова Е.Б., Ланкин В.З., Зенков Н.К., 2006) 18

1.9. Структурная формула дигидрокверцетина 19

1.10. Энантиомеры дигидрокверцетина 20

1.11. Основные пути образования и утилизации свободных радикалов в организме 29

2.1. Структурная формула дициклопентадиена 46

2.2. Схема экспериментального исследования ранозаживления термического ожога кожи у кроликов 49

2.3. Схема исследования антиоксидантной активности ДКВ 53

2.4. Схема экспериментальной оценки острой токсичности ДКВ 54

2.5. Схема экспериментального исследования острого введения ДКВ на белых нелинейных крысах 55

2.6. Схема экспериментального исследования при повторном введении дигидрокверцетина 56

2.7. Схема экспериментального исследования при многократном введении дигидрокверцетина 57

3.1. Образование струпа у кролика к исходу первых суток после нанесения ожога IIIA степени 59

3.2. Динамика температуры тела у кроликов после нанесения ожога 60

3.3. Динамика температуры раны у кроликов после нанесения ожога 61

3.4. Динамика толщины складки кожи у кроликов после нанесения ожога 64

3.5. Стадия отторжения струпа в контрольной группе на 14 сутки 65

3.6. Стадия отторжения струпа на 21 сутки (лечение облепиховым маслом) 65

3.7. Стадия отторжения струпа на 21 сутки (мазь с ДКВ) 66

3.8. Динамика количества лейкоцитов 68

3.9. Динамика содержания эритроцитов 68

3.10. Динамика СОЭ 69

3.11. Динамика содержания гемоглобина 70

3.12. Динамика количества ретикулоцитов 71

3.13. Динамика количества лимфоцитов 72

3.14. Динамика общего белка в сыворотке крови 73

3.15. Динамика содержания альбумина в сыворотке крови 74

3.16. Участок кожи на 3 сутки после ожога контрольной группы. Выраженный струп (1), некротические массы (2), выраженный отек дермы (3). Окраска: гематоксилин-эозин. Ув. об. 12,5 75

3.17. Участок кожи на 3 сутки после ожога при применении ДКВ. Отечность эпидермиса (1) и дермы (2), образование грануляционной ткани (3). Окраска: гематоксилин-эозин. Ув. об. 12,5 75

3.18. Препарат кожи кролика. Термический ожог, контроль (без применения исследуемых веществ), 7 сутки (окраска по ван-Гизону, ув.х120) 75

3.19. Участок кожи на 7 сутки после ожога и аппликации мази с ДКВ. Активная пролиферация эпидермиса (1) под струпом (2). Окраска: гематоксилин-эозин. Ув. об. 12,5 76

3.20. Участок кожи на 7 сутки после ожога и аппликации облепихового масла. Активная пролиферация эпидермиса (1) под струпом (2). Окраска: гематоксилин-эозин.Ув. об. 12,5 76

3.21. Препарат кожи кролика. Термический ожог, контроль на 14 сутки. Сосочковая зона дермы: пучки коллагеновых волокон расположены беспорядочно, рыхло. Окраска: гематоксилин-эозин. 77

3.22. Препарат кожи кролика. Термический ожог, аппликации с ДКВ на 14 сутки. Сосочковая зона дермы: пролиферация кровеносных капилляров. Окраска: гематоксилин-эозин. 77

3.23. Препарат кожи кролика. Термический ожог, 77

контроль на 14 сутки. Сосочковая зона дермы: коллагеновые волокна расположены компактно и рыхло. Окраска: гематоксилин-эозин.

3.24. Препарат кожи кролика. Термический ожог, контроль на 21 сутки. Выраженные волосяные фолликулы (1) и сальные железы (2), дерма отечная (3). Окраска: гематоксилин-эозин. 78

3.25. Препарат кожи кролика. Термический ожог, аппликации с ДКВ на 21 сутки. Образование волосяных луковиц (1) и сальных желез (2), дерма с явлениями отечности (3). Окраска: гематоксилин-эозин. 78

3.26. Препарат кожи кролика. Термический ожог, аппликации с облепиховым маслом на 21 сутки. Образование волосяных луковиц (1) и сальных желез (2), дерма с явлениями отечности (3). Окраска: гематоксилин-эозин. 78

3.27. Препарат кожи кролика. Термический ожог, контроль на 30 сутки. Окраска по ван-Гизону, ув. х 250. 79

3.28. Препарат кожи кролика. Термический ожог, аппликации с ДКВ на 30 сутки. Окраска: гематоксилин-эозин. 79

3.29. Участок кожи на 40 сутки после ожога и аппликации мази с ДКВ. Полная эпителизация раневой поверхности (1), разрастание коллагеновых волокон в дерме (2), формирование волосяных фолликул и сальных желез (3). Окраска по ван Гизону. Ув. об. 12,5 80

3.30. Участок кожи на 40 сутки после ожога в контрольной группе. 80

3.31 Участок кожи на 40 сутки после ожога и аппликации облепиховым маслом 80

3.32. Участок кожи на 40 сутки после ожога и аппликации мази с ДКВ. 81

3.33. Изменения уровня малонового диальдегида 82

3.34. Изменения уровня гидроперекиси липидов 82

3.35. Динамика аланинаминотрансферазы 83

3.36. Динамика восстановленного глутатиона 83

3.37. Доза-эффект дигидрокверцетина 84

3.38. Сердечная мышца крысы на 3 сутки после однократного перорального воздействия ДКВ в дозе 85

5 ООО мг/кг. Расширение капилляров, просветление цитоплазмы миофибрилл. Окраска: гематоксилин-эозин.

3.39. Препарат печени крысы после однократного воздействия ДКВ в дозе 5 ООО мг/кг: А - контроль, Б - опыт.Окраска по Шабадашу. 86

3.40. Препарат печени крысы после однократного воздействия ДКВ в дозе 5 ООО мг/кг: А - контроль, Б - опыт. Окраска по Пирсу. 86

3.41. Препарат печени крысы после однократного воздействия ДКВ в дозе 5 ООО мг/кг: А - контроль, Б - опыт. Увеличение ЩФ.Окраска азосочетанием. 86

3.42. Макроскопическое исследование органов на 14 сутки: опыт (1-3), контроль (4) 87

3.43. Макроскопическое исследование почек на 14 сутки: опыт (1-3), контроль (4) 87

3.44. Микроскопическое исследование печени на 14 сутки контрольной группы. Активность ЛДГ. Окраска по Пирсу. 87

3.45. Микроскопическое исследование печени опытной группы на 14 сутки после однократного воздействия ДКВ в дозе 5 ООО мг/кг. Активность ЛДГ. Окраска по Пирсу. 87

3.46. Микроскопическое исследование печени на 14 сутки контрольной группы. Активность СДГ. Окраска по Пирсу. 88

3.47. Микроскопическое исследование печени на 14 сутки после однократного воздействия ДКВ в дозе 5 ООО мг/кг (опыт). Снижение активности СДГ. Окраска по Пирсу. 88

3.48. Динамика двигательной активности 89

3.49. Динамика норкового рефлекса 90

3.50. Динамика статического мышечного напряжения 90

3.51. Динамика свертываемости крови при многократном введении ДКВ 92

3.52. Изменения содержания меркаптуровых кислот в моче крыс в процессе многократного введения ДКВ в различных дозах 92

3.53. Изменение содержания глюкуроновой кислоты в моче крыс в процессе многократного введения ДКВ в различных дозах 93

3.54. Изменение содержания сульфатов в моче крыс в процессе многократного введения ДКВ в различных 94

дозах

3.55. Изменение содержания глюкуроновой кислоты в печени крыс в процессе многократного введения ДКВ в различных дозах 94

3.56. Печень крысы в контрольной группе на 3 месяц. Окраска по шабодашу. 97

3.57. Печень крысы в опытной группе после воздействия ДКВ в дозе 3 ООО мг/кг на 3 месяц. Содержание гликогена не отличается от контроля. Окраска по Шабодашу. 97

3.58. Печень крысы в контрольной группе на третьем месяце.Окраска по Нахласу. 97

3.59. Печень крысы в опытной группе после воздействия ДКВ в дозе 3 ООО мг/кг на третьем месяце. Незначительное снижение активности СДГ (на 1 балл). Окраска по Нахласу. 97

4.1. Образование хелатного комплекса 112

(таблицы)

номер Наименование таблицы страница

1.1. Лекарственные растения, применявшиеся для лечения ран 38

3.1. Размеры ожоговой поверхности у кроликов 60

3.2. Изменение модуля комплексного сопротивления кожи у кроликов 62

3.3. Динамика массы тела кроликов после нанесения ожога 63

3.4. Характеристика электрокардиограммы у крыс 85

3.5. Динамика гематологических показателей (М ± т) 91

3.6. Биохимические показатели в крови у крыс после введения ДКВ (М±т) 98